糅漆树果丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物及其组合物的医药用途和制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属医药技术领域，具体涉及一种糅漆树果丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物及 其组合物的医药用途和制备方法以及它在治疗阿尔茨海默病（AD)等方面的医药用途。
【背景技术】
[0002] 在高通量筛选的过程中，本发明意外地发现糅漆树果具有很好的抑制丁酰胆碱酯 酶的活性，该活性提取物及其组合物有望应用于治疗阿尔茨海默病（AD)等方面的医药用 途。
【发明内容】
[0003] 本发明所解决的技术问题是提供一种糅漆树果提取物。
[0004] 本发明还提供了以糅漆树果提取物为主要活性成分的组合物。
[0005] 本发明同时提供了糅漆树果提取物及其组合物的制备和应用。
[0006] 本发明是通过如下技术方案实现的： 维吾尔药糅漆树果经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶（SiO2)柱分离，上样后的硅 胶柱，用石油醚-丙酮混合溶剂梯度洗脱(石油醚-丙酮，比例见表1 )，各石油醚-丙酮比例 混合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外筛选体系测试其丁酰胆碱酯酶抑制活性，意外地 发现先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:5,体积比)洗脱，继用石油醚-丙酮混 合溶剂(石油醚-丙酮，100:12,体积比)洗脱得到的石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮， 100:12,体积比)洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物。而其他 比例的洗脱部位，没有丁酰胆碱酯酶抑制活性的作用。最优为先用石油醚-丙酮混合溶剂 (石油醚-丙酮，100:5,体积比)洗脱25倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙 酮，100:12,体积比）洗脱20倍柱体积，洗脱液干燥后所得提取物即为本发明丁酰胆碱酯酶 抑制活性的提取物。丁酰胆碱酯酶抑制活性的提取物可以通过以上方法得到富集，从而与 其他杂质类成分分离开。该糅漆树果丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物从未见文献报道，其薄 层色谱（TLC)分析结果见图1，TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯： 丙酮（3:1:1)显色方法：香草醛-硫酸显色。
[0007] 维吾尔药糅漆树果经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶 柱，用石油醚-丙酮混合溶剂梯度洗脱(石油醚-丙酮，比例见表1)，各石油醚-丙酮比例 混合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外筛选体系测试其丁酰胆碱酯酶抑制活性，意外地 发现先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:30,体积比）洗脱，继用石油醚-丙酮 混合溶剂(石油醚-丙酮，100:50,体积比）洗脱得到的石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙 酮，100:50,体积比）洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物。而 其他比例的洗脱部位，没有丁酰胆碱酯酶抑制活性的作用。特别地，优选为先用石油醚-丙 酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:30,体积比)洗脱15倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂 (石油醚-丙酮，100:50,体积比)洗脱25倍柱体积，洗脱液干燥后即为本发明丁酰胆碱酯酶 抑制活性的提取物。丁酰胆碱酯酶抑制活性的提取物可以通过以上方法得到富集，从而与 其他杂质类成分分离开。该糅漆树果丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物从未见文献报道，其薄 层色谱（TLC)分析结果见图2, TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯： 丙酮（3:1:1)显色方法：香草醛-硫酸显色。
[0008] 具体，发现过程如下： 1、糅漆树果经甲醇超声提取物的制备 取维吾尔药糅漆树果20 g，经100 mL甲醇超声提取15 min，提取液浓缩后，得提取物 SN0053A，样品上柱：2. 7275 g，拌样硅胶3 g，空白硅胶15g，石油醚-丙酮系统。
[0009] 2、石油醚-丙酮混合溶剂梯度洗脱方法和结果 取维吾尔药糅漆树果20 g，经100 mL甲醇超声提取15 min，提取液浓缩后，得提取物 SN0053A，2. 7275上柱，甲醇溶解，共用甲醇15 mL。上硅胶柱色谱，拌样硅胶3 g，空白硅胶 15 g，玻璃柱内径2. 5cm，石油醚-丙酮系统梯度洗脱(条件见表1)，柱体积45 mL，每个梯 度洗脱300mL，得到，各个浓度提取洗脱液的洗脱物，回收溶剂，即得，石油醚：丙酮梯度洗 脱提取物，TLC分析结果见图3, TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯： 丙酮（3:1:1)显色方法：香草醛-硫酸显色。
[0010] 表 1
【主权项】
1. 一种糅漆树果提取物，其特征为糅漆树果经溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱 分离，上样后的硅胶柱，先用体积比为100:5的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱，继用体积比为 100:12的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱，用100:12石油醚-丙酮混合溶剂洗脱的洗脱液经 回收有机溶剂，干燥，即为该提取物；或一种糅漆树果提取物，其特征为糅漆树果经溶剂超 声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油 醚-丙酮，100:30,体积比）洗脱，继用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:50,体积 比）洗脱，用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:50,体积比）洗脱的洗脱液经回收 有机溶剂，干燥，即为该提取物。
2. 如权利要求1所述糅漆树果提取物，其特征为，其中，提取溶剂可以为甲醇、石油醚、 水、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂或乙醇水混合溶剂，优条件为甲醇和95%乙醇； 提取物提取用有机溶剂用量为药材重量的2-50倍(重量/体积比)。
3. 如权利要求1所述糅漆树果提取物，其特征为糅漆树果经溶剂超声提取，提取液浓 缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:5， 体积比)洗脱，洗脱2-50倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:12,体积 比)洗脱，洗脱2-50倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:12,体积比)洗 脱的洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该提取物；或其特征为糅漆树果经溶剂超声提取， 提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙 酮，100:30,体积比）洗脱，洗脱2-50倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙 酮，100:50,体积比）洗脱，洗脱2-50倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮， 100:50,体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该提取物。
4. 如权利要求1-3任何一项所述的一种维吾尔药糅漆树果提取物，其特征为，用于洗 脱的石油醚-丙酮混合溶剂的洗脱体积为2-50倍柱体积。
5. 权利要求1所述提取物的制备方法，其特征为：糅漆树果经有机溶剂超声提取，提 取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮， 100:5,体积比）洗脱2-50倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:12， 体积比）洗脱2-50倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:12,体积比）洗 脱的洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该提取物；以上条件最优为先用石油醚-丙酮混合 溶剂(石油醚-丙酮，100:5,体积比）洗脱25倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂(石油 醚-丙酮，100:12,体积比)洗脱20倍柱体积；或糅漆树果经有机溶剂超声提取，提取液浓缩 后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:30,体 积比）洗脱2-50倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:50,体积比）洗 脱2-50倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮，100:50,体积比)洗脱的洗脱液 经回收有机溶剂，干燥，即为该提取物；以上条件最优为先用石油醚-丙酮混合溶剂(石油 醚-丙酮，100:30,体积比）洗脱15倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂(石油醚-丙酮， 100:50，体积比）洗脱25倍柱体积。
6. -种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1-5任何一项所述的维吾尔药糅漆树 果提取物和药学上可接受的载体。
7. -种药物制剂，其特征在于，包含权利要求1-5任何一项所述的糅漆树果提取物或 权利要求6所述的药物组合物。
8. 如权利要求7所述的药物制剂，其特征在于，所述的制剂为固体分散体、环糊精包合 物、分散片。
9. 权利要求1-5任何一项所述提取物或权利要求6所述的组合物或权利要求7所述的 药物制剂在制备丁酰胆碱酯酶抑制活性药物中的应用。
10. 如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的丁酰胆碱酯酶抑制活性，可用于治 疗阿尔茨海默病（AD)等方面的医药用途。
11. 如权利要求1-5任何一项所述的维吾尔药肉根黄芪胶提取物，其特征在于，用TLC 检测法；其色谱条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（3:1:1)显色方法： 香草醛-硫酸显色。
【专利摘要】本发明属医药技术领域，具体涉及一种糅漆树果丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物及其组合物的制备方法以及它在治疗阿尔茨海默病(AD)等方面的医药用途。所述的提取物通过如下方法获得：先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:5，体积比）洗脱，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:12，体积比）洗脱，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:12，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物，或先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:30，体积比）洗脱，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:50，体积比）洗脱，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:50，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物。
【IPC分类】G01N30-90, A61K36-22, A61P25-28
【公开号】CN104825508
【申请号】CN201510058780
【发明人】王金辉, 热娜·卡斯木, 黄健, 李国玉, 张瑾, 王小青, 马庆东, 张珂
【申请人】新疆医科大学
【公开日】2015年8月12日
【申请日】2015年2月4日