对于生产和用于注射装置中是最佳的含有丙二醇的肽制剂的制作方法
【专利说明】
[0001] 本申请是申请日为2004年11月18日、发明名称为"对于生产和用于注射装置中 是最佳的含有丙二醇的肽制剂"的中国发明专利申请No. 200480034152. 8的分案申请。
技术领域
[0002] 本发明涉及包括肽和丙二醇的药物制剂，涉及制备该制剂的方法，以及涉及该制 剂在治疗疾病和病症中的用途，为此该制剂中所含肽的用途得到表明。本发明进一步涉及 减少肽制剂对注射装置的阻塞的方法和减少生产肽制剂过程中生产设备上沉积物的方法。
【背景技术】
[0003] 含有肽的药物制剂中包含等渗剂是公知的，这样制剂中所用的较常见等渗剂之一 是甘露醇。然而，本发明者观察到甘露醇在生产肽制剂过程中引起了问题，因为其结晶导致 生产设备和成品中的沉积物。这样的沉积物增加了生产制剂过程中清洗装填设备的需要， 且这导致了降低的生产能力。此外，这样的沉积物还导致了降低的成品产量，因为含有肽制 剂的小瓶/药筒如果存在颗粒就需要废弃。最后，本发明者观察到在通过注射给药的肽制 剂中，甘露醇的存在导致注射装置的阻塞。
[0004] 因此，需要鉴定甘露醇的替代等渗剂，用于包含于含有肽的制剂中，尤其是用于包 含于通过注射给药的肽制剂中。
【发明内容】
[0005] 本发明者发现含有一定浓度丙二醇的肽制剂呈现出生产设备和成品中减少的沉 积物，还呈现出注射装置减少的阻塞。本发明的组合物可以与任何肽配制，并且还是物理和 化学稳定的，因此使得它们耐存储并适于入侵方式的给药（例如，注射，皮下注射，肌内，静 脉内或灌输）以及非入侵方式的给药。
[0006] 因此本发明涉及包含肽和丙二醇的药物制剂，其中丙二醇的存在浓度为I-IOOmg/ ml，制剂的pH为7-10。在优选实施方案中，本发明的药物制剂进一步含有缓冲剂和防腐剂。
[0007] 本发明还涉及制备本发明药物制剂的方法。
[0008] 在一个实施方案中，制备肽制剂的方法包括：
[0009] a)将防腐剂、丙二醇和缓冲剂溶解于水中制得第一种溶液；
[0010] b)将肽溶解于水中制得第二种溶液；
[0011] c)将第一种和第二种溶液混合；和
[0012] d)将c)中混合物的pH调节至所需的pH。
[0013] 在另一个实施方案中，制备肽制剂的方法包括：
[0014] a)将防腐剂和缓冲剂溶解于水中制得第一种溶液；
[0015] b)将丙二醇加入第一种溶液中；
[0016] c)将第一种溶液与含有溶解于水中的肽的第二种溶液混合；和
[0017] d)将c)中混合物的pH调节至所需的pH。
[0018] 在再一个实施方案中，制备肽制剂的方法包括：
[0019] a)将防腐剂、缓冲剂和丙二醇溶解于水中制得溶液；
[0020] b)将肽加入步骤a)的溶液中；和
[0021] C)将步骤b)溶液的pH调节至所需的pH。
[0022] 本发明进一步涉及使用本发明药物制剂的治疗方法，其中给予有效量的组合物来 抗击疾病、病症或障碍，为此制剂中所含肽的给药得到表明。
[0023] 此外，本发明还涉及减少生产肽制剂过程中生产设备上沉积物的方法，其中该方 法包括用浓度为1-lOOmg/ml的丙二醇替代所述制剂中之前所用的等渗剂。
[0024] 在一个实施方案中，通过模拟装填实验来测量含有丙二醇的制剂在生产过程中生 产设备上的沉积物相对于含有之前所用等渗剂的制剂所观察到的沉积物的减少。
[0025] 本发明还涉及减少生产肽制剂过程中成品中沉积物的方法，其中该方法包括用浓 度为Ι-lOOmg/ml的丙二醇替代所述制剂中之前所用的等渗剂。
[0026] 在一个实施方案中，通过含有丙二醇制剂的小瓶和/或药筒由于沉积物必须废弃 的数目相对于含有之前所用等渗剂制剂的小瓶和/或药筒由于沉积物必须废弃的数目的 减少来测量成品中沉积物的减少。
[0027] 本发明进一步涉及减少肽制剂对注射装置的阻塞的方法，其中该方法包括用浓度 为Ι-lOOmg/ml的丙二醇替代所述制剂中之前所用的等渗剂。
[0028] 在一个实施方案中，在模拟使用研宄中测量含有丙二醇制剂对注射装置的阻塞相 对于含有之前所用等渗剂制剂观察到的阻塞的减少。
【附图说明】
[0029] 图1显示了显微镜载玻片上干燥液滴的照片，从左至右为不含有等渗剂的安慰 剂（无肽）制剂（即，只有水，防腐剂和缓冲剂），作为等渗剂的甘露醇，山梨糖醇，木塘 醇，蔗糖或甘油，最右边的载玻片含有甘露醇和肽Arg 34, Lys26(Νε-(γ-Glu(Ntl-十六烷 酰）））-GLP-l(7-37)。
[0030] 图2显示了光学显微镜的照片，从左至右为含有甘露醇、精氨酸、肌醇或甘油作为 等渗剂的安慰剂制剂的一些干燥的液滴。
[0031] 图3显示了给药含有肌醇、麦芽糖或甘油作为等渗剂的安慰剂制剂阻塞的针的光 学显微镜照片。
[0032] 图4显示了用含有甘氨酸、乳糖或甘露醇作为等渗剂的安慰剂制剂给药的针上沉 积物的光学显微镜照片。
[0033] 图5显示了模拟装填含有肌醇的Arg34，LyS 26(NE-(Y-Glu(Na-十六烷 酰）））-GLP-I (7-37)介质24小时后的装填设备。
[0034] 图6显示了模拟装填含有甘露醇的安慰剂制剂24小时后装填设备上的沉积物。
[0035] 图7显示了用含有甘露醇（上图）和丙二醇（下图）的 Arg34, Lys26 (Νε - ( γ -Glu (Nci -十六烷酰）））-GLP-I (7-37)制剂给药的针上的沉积物。
[0036] 发明详述
[0037] 本发明涉及含有肽或肽混合物和丙二醇的药物制剂，其中制剂中丙二醇的终浓度 为 l-100mg/ml，制剂的 pH 为 7-10。
[0038] 发现本发明的药物制剂对于生产是最佳的，因为它们相对于含有其他等渗剂的制 剂呈现出生产设备中减少的沉积物，如通过实施例中所述的模拟装填研宄所测量的。此外， 发现本发明的药物制剂对于用于注射装置中是最佳的，因为它们相对于含有其他等渗剂的 制剂呈现出注射装置减少的阻塞，如通过实施例中所述的模拟使用研宄所测量的。
[0039] 本发明的制剂可以与任何肽一起配制，其中这样肽的实例包括但不限于，胰高血 糖素、人生长激素（hGH)、胰岛素、抑肽酶、因子VII、组织血纤维蛋白酶原激活蛋白（TPA)、 因子VIIa、FFR-因子Vila、肝素酶、ACTH、肝素结合蛋白、促肾上腺皮质激素释放因子、血管 紧张素、降钙素、胰高血糖素样肽-1、胰高血糖素样肽-2、胰岛素样生长因子-1、胰岛素样 生长因子-2、成纤维细胞生长因子、胃抑制肽、生长激素释放因子、垂体腺苷酸环化酶激活 肽、分泌素、肠胃泌素（enterogastrin)、生长激素释放抑制因子、甲状旁腺激素、血栓形成 素、促红细胞生成素、下丘脑释放因子、促乳素、甲状腺刺激激素、内啡肽、脑啡肽、加压素、 催产素、阿片样物质、DPP IV、白细胞介素、免疫球蛋白、补体抑制剂、丝氨酸蛋白酶抑制剂、 细胞因子、细胞因子受体、FOGF、肿瘤坏死因子、肿瘤坏死因子受体、生长因子及其类似物和 衍生物，这些肽中的每一种构成本发明的替代实施方案。
[0040] 在本申请中，名称"类似物"用于表示这样的肽，其中母体肽的一个或多个氨基酸 残基已经被其他氨基酸残基取代和/或其中母体肽的一个或多个氨基酸残基已经缺失和 /或其中已经将一个或多个氨基酸残基添加至母体肽。这样的添加可以发生在母体肽的 N-末端或C-末端或两端。通常"类似物"是这样的肽，其中母体肽的6个或更少的氨基酸 已经被取代和/或添加和/或缺失，更优选是这样的肽，其中母体肽的3个或更少的氨基酸 已经被取代和/或添加和/或缺失，最优选是这样的肽，其中母体肽的一个氨基酸已经被取 代和/或添加和/或缺失。
[0041] 在本申请中，"衍生物"用于表示肽或其类似物，其是通过在肽或其类似物的一个 或多个氨基酸残基上引入有机取代基例如酯、烷基或亲脂性官能度来化学修饰的。
[0042] 在一个实施方案中，本发明制剂中包括的肽是GLP-I促效药，其中应理解"GLP-1 促效药"指的是完全或部分激活人GLP-I受体的任何肽。在优选实施方案中，"GLP-1促效 药"是结合于GLP-I受体的任何肽，优选具有亲和常数（K d)或效价（EC5tl)低于1 μ M，例如 低于ΙΟΟηΜ，如通过本领域已知的方法测量的（参见，例如WO 98/08871)并呈现促胰岛素活 性，其中可以用本领域技术人员已知的体内或体外测定法测量促胰岛素活性。例如，可以将 GLP-I促效药给药于动物并随时间测量胰岛素浓度。
[0043] 鉴定GLP-I促效药的方法描述于WO 93/19175中（Novo Nordisk A/S)并且根据本 发明可以使用的合适的GLP-I类似物和衍生物的实例包括WO 99/43705 (Novo Nordisk A/ S)，WO 99/43706(Novo Nordisk A/S)，WO 99/43707(Novo Nordisk A/S)，TO 98/08871(具 有亲脂性取代基的类似物）和WO 02/46227(与血清白蛋白或与Ig的Fc部分融合的类似 物）（Novo Nordisk A/S)，WO 99/43708(Novo Nordisk A/S)，WO 99/43341(Novo Nordisk A/S), WO 87/06941(The General Hospital Corporation), WO 90/11296(The General Hospital Corporation)，WO 91/11457(Buckley 等），WO 98/43658(EliLilly&Co·)， EP 0708179-A2 (Eli Lilly&Co·)，EP 0699686-A2(Eli Lilly&Co·)，TO 01/98331(Eli Lilly&Co.)中所提及的那些。
[0044] 在一个实施方案中，GLP-I促效药选自GLP-I (7-36)-酰胺，GLP-I (7-37)， GLP-I (7-36)-酰胺类似物，GLP-I (7-37)类似物，或这些中任一种的衍生物。
[0045] 在一个实施方案中，GLP-I促效药是GLP-I (7-36)-酰胺、GLP-I (7-37)、 GLP-I (7-36)-酰胺类似物或GLP-I (7-37)类似物的衍生物，其包含亲脂性取代基。
[0046] 在本发明的这个实施方案中，GLP-I衍生物优选具有三个连接于母体肽（即， GLP-I (7-36)-酰胺，GLP-I (7-37)，GLP-I (7-36)-酰胺类似物或 GLP-I (7-37)类似物）的亲 脂性取代基，更优选两个亲脂性取代基，且最优选一个亲脂性取代基，其中每个亲脂性取代 基优选具有4-40个碳原子，更优选8-30个碳原子，更优选8-25个碳原子，更优选12-25个 碳原子，最优选14-18个碳原子。
[0047] 在一个实施方案中，亲脂性取代基包含部分或全部氢化的环戊菲骨架。
[0048] 在另一个实施方案中，亲脂性取代基是直链或支链烷基。
[0049] 在再一个实施方案中，亲脂性取代基是直链或支链脂肪酸的酰基。优选，亲脂 性取代基是具有通式CH 3(CH2)nCO-的酰基，其中η是4至38的整数，优选12至38的整 数，最优选是 CH3(CH2)12CO-, CH3(CH2)14CO-, CH3(CH2)16CO-, C