5H), 2. 79(s, 1H), 2. 71 (d,J= 10. 0Hz, 2H), 2. 63 (d,J= 1. 4Hz, 4H), 2. 43 (t,J= 16. 7Hz, 3H), 2. 36 (d,J= 5. 9Hz, 1H), 2. 19 - 2. 12 (m, 5H), 2. 09 - 2. 00 (m, 4H),I. 90 (dd,J= 10. 7, 8. 0Hz, 1H),L85 (d,J= 23. 9Hz, 1H),I. 72 (s, 1H),I. 65 (s, 1H),I. 13 (d,J= 7. 0Hz, 7H),I. 06 (s, 3H).
[0033]13CNMR(125MHz, ,DMS0-d6)S219. 80 (s) ,211. 16 (s)，176. 74 (s) ,66. 30 (s) ,63. 64 (s)，61. 62 (s)，59. 51 (s)，54. 88 (s)，52. 27 (s)，51. 99 (s)，47. 76 (s)，46. 30 (s)，46. 06 (s)，4 5. 55 (s)，45. 26 (s)，40. 31 (s)，37. 86 (s)，37. 63 (s)，36. 28 (s)，30. 87 (s)，28. 53 (s)，26. 01 ( s)，25. 23 (s)，12. 37 (s)，8. 50 (s) ?
[0034]HRMS(ESI) :m/z[M+H].calcdforC29H47N2O6:519. 3434 ;found:519. 3429。
[0035]
[0036] 实施例4DaphmalenineA的0_(二乙胺基）乙基衍生物抗骨质疏松作用的检测
[0037] 1、材料与方法
[0038]将十周龄健康SD雌鼠（24只，江苏省动物中心）随机分成4组，每组6只：假手术 组（Sham)、卵巢切除模型组（0VX)、DaphmalenineA的0-(二乙胺基）乙基衍生物组（化合 物III组）、化合物IV组。饲养条件：温度为（23±2) °C，光照：黑暗为12 : 12。让各组大 鼠适应环境2周后开始骨质疏松造模手术：各组大鼠均经腹腔注射20%乌拉坦麻醉（6ml/ kg体重），Sham组开腹后关腹，其余两组行双侧卵巢切除术。术后第4周起，Sham组和OVX 组每天进食标准饲料和去离子水，化合物III组、化合物IV组每天进食标准饲料和去离子 水，同时分别灌胃给与化合物III、化合物IV10mg/kg，连续3个月，每周称一次体重。实验 结束后，用乌拉坦麻醉，摘取眼球采血，2000r/min离心，吸取上清（即血清）。摘除大鼠子 宫，迅速称重。取出大鼠双侧股骨和双侧胫骨，剔除软组织。两胫骨经800°C高温炉（由南 京大学化学化工学院提供）中灰化8h，冷却后称灰重。用研钵碾碎成灰状，取0.Ig骨灰溶 于lml, 6mol/l盐酸中，测骨妈和骨磷时取0. 2ml用超纯水稀释至lml，用全自动生化分析仪 检测骨钙和骨磷含量。左股骨用骨密度仪测量骨密度（BMD)。血清生化指标测定：取血清 0.5ml，用全自动生化分析仪检测血清碱性磷酸酶（ALP)、钙（Ca)和磷（P)。
[0039] 三乙胺（化合物IV)为市售分析纯。
[0040]
[0042] 2、结果
[0043] (I)DaphmalenineA的0_(二乙胺基）乙基衍生物对双侧卵巢切除大鼠血清ALP， 血清Ca和血清P的的影响
[0044] 表1可以看出去卵巢后，模型组大鼠血清碱性磷酸酶活性增加。去卵巢后，体 内雌激素缺乏，导致骨转化率增加，与绝经后妇女的高转化型骨质疏松症一致。给予 DaphmalenineA的0-(二乙胺基）乙基衍生物3个月后，碱性磷酸酶活性显著下降，可见 DaphmalenineA的0-(二乙胺基）乙基衍生物可以抑制去卵巢引起的骨转化率的增加，减 少骨质的破坏。表中还显示与假手术组相比，模型组大鼠血清钙明显下降，而Daphmalenine A的0-(二乙胺基）乙基衍生物可显著提升血清钙浓度。血清钙是骨形成的重要标记物，说 明DaphmalenineA的0-(二乙胺基）乙基衍生物可以有效逆转由于卵巢切除导致的血清 钙的降低，有利于骨的形成。而化合物IV没有化合物III的作用。
[0045] 表IDaphmalenineA的0_(二乙胺基）乙基衍生物对双侧卵巢切除大鼠血清ALP， 血清Ca和血清P的影响
[0046]
[0047] *P〈0.05vsOVX组
[0048] (2)DaphmalenineA的0_(二乙胺基）乙基衍生物对双侧卵巢切除大鼠左股骨BMD 的的影响
[0049] 表2可以看出去卵巢后模型组大鼠左股骨骨密度较假手术组显著下降，给予 DaphmalenineA的0-(二乙胺基）乙基衍生物3个月后，骨密度显著增加。而化合物IV没 有化合物III的作用。
[0050] 表2DaphmalenineA的0-(二乙胺基）乙基衍生物对双侧卵巢切除大鼠左股骨 BMD的的影响
[0053] *P〈0. 05vsOVX组
[0054] (3)DaphmalenineA的0-(二乙胺基）乙基衍生物对双侧卵巢切除大鼠双侧胫骨 参数的影响
[0055] 表3可以看出与假手术组相比，模型组大鼠双胫骨灰重显著降低，而 DaphmalenineA的0_(二乙胺基）乙基衍生物组较模型组显著升高。DaphmalenineA的 〇-(二乙胺基）乙基衍生物也能显著升高骨钙和骨磷含量。而化合物IV没有化合物III的 作用。
[0056] 表3DaphmalenineA的0_(二乙胺基）乙基衍生物对双侧卵巢切除大鼠双侧胫 骨参数的影响
[0057]
[0058] *P〈0.05vsOVX组
[0059] 结论：DaphmalenineA的0_(二乙胺基）乙基衍生物能够抑制去卵巢引起的骨转 化率增强和骨质破坏，同时可以提高血钙浓度，有利于骨的沉积。对于由于雌激素缺乏导致 的骨质疏松具有防治作用，并且无雌激素样副作用。DaphmalenineA的0-(二乙胺基）乙 基衍生物可以用于骨质疏松的防治。化合物IV不能够抑制去卵巢引起的骨转化率增强和 骨质破坏，不可以提高血钙浓度，不利于骨的沉积，对于由于雌激素缺乏导致的骨质疏松不 具有防治作用，不可以用于骨质疏松的防治。
[0060] 实施例5本发明所涉及DaphmalenineA的0_(二乙胺基）乙基衍生物片剂的制 备
[0061] 取20克DaphmalenineA的0_(二乙胺基）乙基衍生物或者其药学上可接受的盐 当中的一种，加入制备片剂的常规辅料180克，混匀，常规压片机制成1000片。
[0062] 实施例6本发明所涉及DaphmalenineA的0-(二乙胺基）乙基衍生物胶囊的制 备
[0063] 取20克DaphmalenineA的0_(二乙胺基）乙基衍生物或者其药学上可接受的盐 当中的一种，加入制备胶囊剂的常规辅料如淀粉180克，混匀，装胶囊制成1000粒。
【主权项】
1. 一种具有式III所示结构的Daphmalenine A的0-(二乙胺基）乙基衍生物及其药 学上可接受的盐在抗骨质疏松药物中的应用，2. 如权利要求1所述的Daphmalenine A的0-(二乙胺基）乙基衍生物及其药学上可 接受的盐在抗骨质疏松药物中的应用，其特征为：所述骨质疏松为雌激素缺乏引起的骨质 疏松。3. 如权利要求2所述的Daphmalenine A的0-(二乙胺基）乙基衍生物及其药学上可 接受的盐在抗骨质疏松药物中的应用，其特征为：所述雌激素缺乏是由卵巢功能缺失引起 的。4. 如权利要求3所述的Daphmalenine A的0-(二乙胺基）乙基衍生物及其药学上可 接受的盐在抗骨质疏松药物中的应用，其特征为：所述Daphmalenine A的0-(二乙胺基） 乙基衍生物抑制雌激素缺乏引起的骨转化率增强和骨质破坏。5. 如权利要求3所述的Daphmalenine A的0-(二乙胺基）乙基衍生物及其药学上可 接受的盐在抗骨质疏松药物中的应用，其特征为：所述Daphmalenine A的0-(二乙胺基） 乙基衍生物提高血清ALP、血清Ca和血清P的浓度。6. 如权利要求3所述的Daphmalenine A的0-(二乙胺基）乙基衍生物及其药学上可 接受的盐在抗骨质疏松药物中的应用，其特征为：所述Daphmalenine A的0-(二乙胺基） 乙基衍生物提高股骨骨密度。7. 如权利要求3所述的Daphmalenine A的0-(二乙胺基）乙基衍生物及其药学上可 接受的盐在抗骨质疏松药物中的应用，其特征为：所述Daphmalenine A的0-(二乙胺基） 乙基衍生物提高双胫骨骨钙和双胫骨骨磷。
【专利摘要】本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及Daphmalenine A的O-(二乙胺基)乙基衍生物、制备方法及其在制备抗骨质疏松药物上的用途。本发明合成了一个新的Daphmalenine A的O-(二乙胺基)乙基衍生物，并公开了其制备方法。药理学实验表明，本发明的Daphmalenine A的O-(二乙胺基)乙基衍生物具有抗骨质疏松的作用，具有开发抗骨质疏松药物的价值。
【IPC分类】A61K31/439, A61P19/10, C07D491/107
【公开号】CN104887671
【申请号】CN201510278434
【发明人】吴俊华, 黄蓉, 吴俊艺
【申请人】南京大学
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年5月27日