Daphmalenine A的O-(二乙胺基)乙基衍生物在制备抗肝纤维化药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及Daphmalenine A衍生物、制备方 法及其用途。
【背景技术】
[0002] 肝纤维化是慢性肝损伤向肝硬化发展的动态过程，表现为细胞外基质（ECM)大量 合成、分泌，而降解绝对或相对不足，使ECM在肝脏内弥漫沉积。其起始于肝细胞（HC)坏死， 随之是炎症反应、纤维生成介质释放，肝星状细胞（FSC)激活，最终以肝脏结缔组织成分的 合成与降解明显失去平衡。肝纤维化是多种慢性肝病共同的病理过程，是影响预后的重要 因素。
[0003] 过去的20年间，肝纤维化的研宄取得了长足进展，证实肝纤维化与一定程度的肝 硬化都是可逆的。近年来陆续出现了一些抗肝纤维化治疗方法，包括化学药、生物制剂、中 药与基因疗法等，但是理想的临床治疗手段仍然缺乏（刘平.加强抗肝纤维化作用机制的 研宄.中华肝病杂志，2005, 8(13) :561)。目前防治肝纤维的关键是针对与肝星状细胞激活 相关的环节，主要是：减轻肝损伤；抑制星状细胞激活，减少细胞外基质产生；调节细胞因 子紊乱，促进活化肝星状细胞凋亡；抑制肝脏成纤维细胞的增殖以及星状细胞激活大量分 泌诱导肝脏成纤维细胞的增殖。
[0004] 从天然产物中寻找化合物或先导化合物并进行结构修饰获得其衍生物，从而得到 高效低毒的潜在药物最有重要价值。
[0005] 本发明涉及的化合物Daphmalenine A是一个2011年发表（Yu Zhang et al.,2011.Daphmalenines A and B:Two New Alkaloids with Unusual Skeletons from Daphniphyllum himalense. Eur. J. Org. Chem. 2011, 4103 - 4107)的化合物，我们对化合物 Daphmalenine A进行了结构修饰，获得了一个新的Daphmalenine A衍生物，并对其抗肝纤 维化活性进行了评价，其具有抗肝纤维化活性。
[0006] 由于肝脏星状细胞的激活，从而引起了多种生长因子的大量分泌，这些生长因子 会诱导肝脏成纤维细胞的快速增殖，从而加速纤维化，其中最重要的生长因子之一就是 TGF。因此，筛选抗肝纤维化药物的一个重要思路就是筛选能够抑制肝脏成纤维细胞增殖的 药物或者筛选能够抑制TGF等生长因子诱导的成纤维细胞的增殖，筛选常常在成纤维细胞 上进行，NIH/3T3细胞是最常用的细胞株。
【发明内容】
[0007] 本发明公开了一个Daphmalenine A衍生物，其结构为：
[0008]
[0009] 本发明Daphmalenine A衍生物（III)可通过下面方法制备：
[0010] (I)Daphmalenine A(I)与 1，2-二溴乙烧反应得到 Daphmalenine A 的 O-溴乙基 衍生物（II);
[0011] (2)Daphmalenine A的0-溴乙基衍生物（II)与二乙胺发生取代反应制得 Daphmalenine A的〇-(二乙胺基）乙基衍生物（III)。
[0012]
[0013] 进一步的Daphmalenine A的0-(二乙胺基）乙基衍生物（III)的制备方法为：（I) 将419mg化合物Daphmalenine A⑴溶于IOmL苯，向溶液中加入0· 08g的四丁基溴化按， 7.52(^的1，2-二溴乙烷和611^的50%氢氧化钠溶液；混合物在35摄氏度搅拌1211;1211之 后将反应液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取两次，合并有机相溶液；然后对有机相溶液依 次用水和饱和食盐水洗涤4次，再用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩去除溶剂得到产物粗 品；产物粗品用硅胶柱层析纯化，流动相为：石油醚/丙酮=100:1. 5，v/v，收集黄色集中洗 脱带即得到Daphmalenine A的0-溴乙基衍生物（II)的黄色固体。
[0014] (2)将化合物II(263mg，0. 5mmol)溶于20mL乙腈当中，向其中加入无水碳酸钾 (345mg，2. 5mmol)，碘化钾（84mg，0. 5mmol)和二乙胺（1460mg，20mmol)，混合物加热回流 l〇h。反应结束后将反应液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取四次，合并有机相。依次用水 和饱和食盐水洗涤合并之后的有机相，再用无水硫酸钠干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物 粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油醚/丙酮=100:1，v/v)，收集黄色集 中洗脱带即得到Daphmalenine A的0-(二乙胺基）乙基衍生物（III)的黄色胶状固体 (196. 8mg, 76% ) 〇
[0015] 本发明公开的化合物可以制成药学上可接受的盐或药学上可接受的载体。
[0016] 药效学实验表明，本发明的Daphmalenine A衍生物（III)具有较好的抗肝纤维化 作用。本发明的药学上可接受的盐与其化合物具有同样的药效。
[0017] 进一步的，化合物III的体外实验表明，化学物III具有很强的抗成纤维细胞增殖 的活性，因此本发明的化学物III有望被用于制备新型抗肝纤维化药物。
[0018] 进一步的，化合物III的体外实验表明，化合物III具有很强的抗生长因子诱导的 成纤维细胞增殖的活性，化合物III是一个极具开发潜力的化合物，它可直接用于相应疾 病的治疗以及相关药物的制备。
[0019] 以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加以限定。
【具体实施方式】
[0020] 实施例1化合物Daphmalenine A的制备
[0021] 化合物Daphmalenine A(I)的制备方法参照Yu Zhang等人发表的文献（Yu Zhang et al. , 2011. Daphmalenines A and B:Two New Alkaloids with Unusual Skeletons from Daphniphyllum himalense. Eur. J. Org. Chem. 2011, 4103 - 4107)的方法。
[0022]
[0023] 实施例2 Daphmalenine A的O-溴乙基衍生物（II)的合成
[0024] 将化合物I (419mg，1.0 Ommol)溶于IOmL苯，向溶液中加入四丁基溴化铵（TBAB) (0. 08g)，1，2-二溴乙烷（7. 520g，40.0 Ommol)和6mL的50 %氢氧化钠溶液。混合物在35 摄氏度搅拌12h。12h之后将反应液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取两次，合并有机相溶 液。然后对有机相溶液依次用水和饱和食盐水洗涤4次，再用无水硫酸钠干燥，最后减压 浓缩去除溶剂得到产物粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油醚/丙酮= 100:1.5, v/v)，收集黄色集中洗脱带即得到化合物II的黄色固体（320mg，61% )。
[0025] IH NMR (500MHz, DMS〇-d6) δ 3. 84 (d, J = I. 6Hz, 2H), 3. 76 - 3. 50 (m, 5H), 3. 42 (s, 2 Η), 3. 09 (s, 1Η), 2. 99 (s, 1Η), 2. 88 (s, 1Η), 2. 70 (s, 1Η), 2. 64 (d, J = 19. 1Hz, 3Η), 2. 45 (d, J =5. 6Hz, 3Η) , 2. 33 (s, 1Η) , 2. 19 - 2. 12 (m, 5Η) , 2. 07 (s, 1Η) , 1. 97 (d, J = 9· 2Ηζ, 3Η), L 84 - L 76 (m, 3Η), L 69 (s, 1Η), L 15 (s, 1Η), L 04 (s, 3Η)。
[0026] 13C NMR (125MHz, DMS0-d6) δ 219. 71 (s) ,21L 07 (s), 176. 65 (s) ,66. 24 (s) ,65. 38 (s)，63. 59 (s)，59. 42 (s)，54. 79 (s)，52. 18 (s)，46. 22 (s)，46. 01 (s)，45. 50 (s)，45. 27 (s)，4 0· 33 (s)，37. 86 (s)，37. 61 (s)，36. 27 (s)，34. 26 (s)，30. 89 (s)，28. 52 (s)，26. 04 (s)，25. 24 ( s), 8. 50 (s) 〇
[0027] HRMS(