雷公连提取物在制备抗心肌缺血缺氧产品中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及雷公连提取物在制备抗心肌缺血缺氧产品中的应用，属于药材活性成 分应用技术领域。
【背景技术】
[0002] 心肌缺血性疾病是心血管疾病中的一个焦点，心肌缺血缺氧也是心肌梗死和缺血 性心脏病等共同的病理基础。心肌供血供氧不足导致心肌代谢紊乱，能量供应不足，心肌收 缩功能下降，血液输出量降低，进而影响整个机体的功能，乃至引起心肌细胞死亡。因此，对 于心血管疾病特别是心肌缺血缺氧的临床研宄和实验研宄普遍得到重视。
[0003] 心肌缺血缺氧属于中医"胸痹"、"卒心痛"等范畴，其主要临床表现类似于急性冠 状动脉综合征（ACS)。ACS是由急性心肌梗死所产生的一组危重的临床综合征。传统中医 认为"人年四十，阴气自半"，心肌缺血缺氧是由脏腑虚弱，冷热风邪侵袭手少阴经所致。临 床上近年来多见于中老年人，病在心，与脾和肝肾三脏有关。肾气已虚，鼓动血脉运行之力 不足，机体内已有血行迟缓，聚湿生痰，瘀而不通之势，这是本病发生的前提和基础，治疗多 以活血化瘀，行气止痛为主要治则进行辨证，并取得了良好的临床疗效。
[0004] 雷公连为天南星科雷公连属下的一个种，是中国的特有植物。附生藤本。茎较细 弱，粗3~5_，借气生根紧贴于树干上，节间长3~5cm。莖叶可入药，治风湿、跌打、心绞 痛。目前尚未有将雷公连用于抗心肌缺血缺氧产品中的相关研宄报道。
【发明内容】
[0005] 为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供雷公连提取物在制备抗心肌缺血 缺氧产品中的应用，可将雷公连提取物制成抗心肌缺血缺氧的药物或保健品。
[0006] 为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：
[0007] 雷公连提取物在制备抗心肌缺血缺氧产品中的应用。
[0008] 前述应用中，所述雷公连提取物为从雷公连药材中提取得到，其中有机酸含量为 1%~30%，生物碱含量为40%~70%。
[0009] 前述应用中，所述雷公连提取物是这样制备的：将雷公连药材分别用95%、75%、 50%的乙醇各浸泡3~5次，每次6~24h，至颜色变浅后，合并浸泡液，回收乙醇，得到乙 醇提取物；将乙醇提取物置于70°C水浴中挥发至无醇味，依次用0. 5~2倍体积的石油醚、 0. 5~2倍体积的乙酸乙醋分别萃取3~5次，再用0. 5~3倍体积的正丁醇萃取3~6 次，取正丁醇萃取液进行减压回收至无醇味，得正丁醇萃取物，用水溶解后，上大孔树脂柱， 先用蒸馏水洗，至洗出液无色后，再用8~15倍柱体积的50%乙醇以2~3倍柱体积/h的 速度洗脱，收集乙醇洗脱液，将洗脱液减压浓缩，置于60°C水浴中挥发至干膏状，再于60°C 减压干燥，即得。
[0010] 前述雷公连提取物的应用中，所述产品是以雷公连提取物为活性成分，加入药用 载体或赋形剂制成的药物或保健品制剂。
[0011] 具体的应用方法如：取雷公连提取物，加入胶囊剂常用辅料，混匀，烘干，灭菌，装 入胶囊，包装，制成胶囊剂。
[0012] 或者取雷公连提取物，加适量的增溶剂，研磨，加入少量水稀释，混匀，加入矫味剂 和防腐剂，混匀，加水至规定量，过滤，混匀，分装，灭菌，制成口服液。
[0013]或者取雷公连提取物，加入片剂常用辅料，混匀，制粒，干燥，压片，制成片剂。
[0014]或者取雷公连提取物，加入颗粒剂常用辅料，制粒，干燥，整粒，制成颗粒剂。
[0015]或者取雷公连提取物，加入滴丸基质，混匀，滴制成丸，即得滴丸剂。
[0016]前述雷公连提取物的应用中，所述产品是将雷公连提取物与其它药用活性成分组 合，加入药用载体或赋形剂制成的药物组合物或保健品制剂。
[0017]为了验证雷公连提取物抗心肌缺血缺氧作用效果，申请人进行了一系列试验研 宄，具体如下：
[0018] 一、试剂准备及实验分组
[0019]雷公连提取物的制备：将雷公连药材分别用95%、75%、50%的乙醇各浸泡3~5 次，每次6~24h，至颜色变浅后，合并浸泡液，回收乙醇，得到乙醇提取物；将乙醇提取物置 于70°C水浴中挥发至无醇味，依次用0. 5~2倍体积的石油醚、0. 5~2倍体积的乙酸乙酯 分别萃取3~5次，再用0. 5~3倍体积的正丁醇萃取3~6次，取正丁醇萃取液进行减压 回收至无醇味，得正丁醇萃取物，用水溶解后，上大孔树脂柱，先用蒸馏水洗，至洗出液无色 后，再用8~15倍柱体积的50%乙醇以2~3倍柱体积/h的速度洗脱，收集乙醇洗脱液， 将洗脱液减压浓缩，置于60°C水浴中挥发至干膏状，再于60°C减压干燥，即得雷公连提取 物。
[0020] 其余试剂：复方丹参片（通化方大药业股份有限公司）；盐酸异丙肾上腺素注射液 (ISO,上海和丰制药有限公司，规格：2mL:Img每支）；钠石灰；乌拉坦（上海恒远科技有限 公司），临用前配成20%溶液；凡士林（购于贵州芝林大药房）。
[0021] 昆明种小鼠，6~8周龄，体重18~22g，雌雄各半，重庆腾鑫生物技术有限公司提 供，动物合格证号：（渝）2007-007,分笼饲养于贵阳中医学院药理实验室。BL-420S生物机 能实验系统（成都泰盟科技有限公司）。
[0022] 将健康昆明种小鼠48只，雌雄各半，体重18~22g，随机分为四组，每组12只。分 别编号为空白对照组、雷公连提取物高剂量组（给药剂量为0. 〇12g/kg)、雷公连提取物低 剂量组（给药剂量为〇. 〇〇6g/kg)和阳性药复方丹参片对照组（给药剂量为0. 483g/kg)。 灌胃量为〇.lmL/10g，空白对照组给予等量蒸馏水灌胃，每日两次，连续给药7d。
[0023] 二、雷公连提取物对ISO致小鼠心肌急性缺血心电图T波的影响
[0024] 于末次给药40min后，用20%乌拉坦0.2111171(^腹腔注射麻醉，待小鼠麻醉 后，仰卧固定于鼠台上，记录正常心电图（II导联），待心电图稳定后，小鼠腹腔注射 ISO(0. 04mL/10g)，记录注射后3min内T波平均高度，以PR段为基线测量，取平均值，并与 缺血前心电图比较，T波抬高程度作为心肌缺血程度指标。结果如表1所示。
[0025] 表1雷公连提取物对ISO致小鼠心肌急性缺血心电图T波的影响（I±s)
[0026]
[0027] 注：与空白组比较，*P< 0? 05,**P< 0? 01
[0028] 由表1可知，各组小鼠腹腔注射ISO后，小鼠ST-T段均出现改变，T波显著高耸， 雷公连提取物高剂量组和低剂量组均能显著抑制心肌ST-T的抬高（P< 0. 05)。
[0029] 三、雷公连提取物对小鼠常压耐缺氧能力的影响
[0030] 于末次给药40min后将小鼠放入底部铺有IOg钠石灰的250mL广口瓶中，在瓶口 涂抹凡士林以保证广口瓶密闭，盖上瓶盖后开始计时，观察小鼠表现，记录小鼠从盖上广口 瓶盖到停止呼吸所用时间。结果如表2所示。
[0031] 表2雷公连提取物对小鼠常压耐缺氧能力的影响（^ ±s)
[0032]
[0033] 注：与空白组比较，*P< 0? 05,**P< 0? 01
[0034] 由表2可知，与空白对照组比较，雷公连提取物高剂量组和低剂量组均能显著提 高正常小鼠常压耐缺氧能力，延长小鼠存活时间（P< 0. 01)。
[0035] 四、雷公连提取物对ISO致小鼠急性心肌缺血常压耐缺氧能力的影响
[0036] 于末次给药40min后，小鼠皮下注射IS0(0. 04mL/10g)，皮下注射ISO15min后将 小鼠放入底部铺有IOg钠石灰的250mL广口瓶中，在瓶口涂抹凡士林以保证广口瓶密闭，盖 上瓶盖后开始计时，观察小鼠表现，记录小鼠从盖上广口瓶盖到停止呼吸时间。结果如表3 所示。
[0037] 表3雷公连提取物对ISO致小鼠急性心肌缺血常压耐缺氧能力的影响（^ ±s)
[0038]
[0039]注：与空白组比较，*P< 0? 05,**P< 0? 01
[0040] 由表3可知，盐酸异丙肾上腺素能明显提高小鼠的耗氧量，导致小鼠耐缺氧能力 下降，存活时间缩短。与空白对照组比较，雷公连提取物高剂量组和低剂量组能明显提高小 鼠ISO致急性心肌缺血常压耐缺氧能力，延长小鼠存活时间（P< 0. 05)。
[0041] 五、雷公连提取物对小鼠断头缺血缺氧喘息时间的影响
[0042] 于末次给药40min后，用大剪刀在小鼠耳根部快速剪头，立即用秒表开始计时，记 录小鼠从断头后到张口喘息停止的喘息次数和时间。结果如表4所示。
[0043] 表4雷公连提取物对小鼠断头缺血缺氧喘息时间的影响（[土s)
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