合物五：大黄总蒽醌lmg，丹参总酸酸30mg，红花苷20mg ;
[0049] 组合物六：大黄总蒽醌40mg，丹参总酸酸20mg，红花苷Img ;
[0050] 组合物七：大黄总蒽醌80mg，丹参总酸酸lmg，红花苷30mg ;
[0051] 组合物八：大黄素 lmg，丹参总酸酸30mg，红花苷15mg ;
[0052] 组合物九：大黄素60mg，丹参总酸酸lmg，红花苷30mg ;
[0053] 组合物十：大黄酸lmg，丹参总酸酸30mg，红花苷15mg ;
[0054] 组合物^--:大黄酸80mg，丹参总酸酸15mg，红花苷Img ;
[0055] 组合物十二：大黄酸40mg，大黄素30mg，丹参总酸酸30mg，红花苷30mg ;
[0056] 组合物十三：大黄酸Img，大黄素60mg，丹参酸酸BI5mg，红花苷Img ;
[0057] 组合物十四：大黄酸80mg，大黄素 lmg，丹参素30mg，红花苷15mg ;
[0058] 组合物十五：大黄酸IOmg,丹参酸酸B15mg，丹参素 IOmg,红花苷IOmg ;
[0059] 组合物十六：大黄素60mg，丹参酚酸B30mg，丹参素15mg，羟基红花黄色素 Almg ;
[0060] 组合物十七：大黄总蒽醌lmg，丹参素30mg，红花苷30mg ;
[0061] 组合物十八：大黄总蒽醌80mg，丹参酸酸Blmg,红花苷30mg ;
[0062] 组合物十九：大黄总蒽醌40mg，丹参酸酸B15mg，丹参素 lmg，红花苷30mg ;
[0063] 组合物二十：大黄总蒽醌lmg，丹参素30mg，羟基红花黄色素 A30mg ;
[0064] 组合物二十一 ：大黄总蒽醌80mg，丹参酚酸B15mg，丹参素15mg，羟基红花黄色素 Almg ；
[0065] 组合物二十二：大黄总蒽醌40mg，丹参酚酸B15mg，丹参素15mg，羟基红花黄色素 A15mg，大黄酉分和大黄素甲醚25mg ;
[0066] 组合物二十三：大黄总蒽醌40mg，丹参酚酸B15mg，丹参素15mg，羟基红花黄色素 A15mg，大黄多糖15mg ;
[0067] 组合物二十四：大黄总蒽醌40mg，丹参酚酸B15mg，丹参素15mg，羟基红花黄色素 A15mg，丹参酸酸A2mg ;
[0068] 组合物二十五：大黄总蒽醌40mg，丹参酚酸B15mg，丹参素15mg，羟基红花黄色素 A15mg，大黄酸和大黄素甲醚25mg，大黄多糖15mg，丹参酸酸A2mg。
[0069] 实验一、本发明对慢性肾衰大鼠的治疗作用
[0070] 1.实验动物SD大鼠350只，雌雄各半，体重200g±20g，购自中国科学院上海实验 动物中心。
[0071] 2.实验药物本发明25组组合物，药物成分均有由大连美仑生物技术有限公司提 供，实验前均用〇. 5%羧甲基纤维钠配成3. 8mg/ml溶液（大黄酸、大黄素、丹参素、红花苷药 物浓度与组合物二十五相同）。
[0072] 3.实验方法取350只SD大鼠，随即取出10只作为空白对照组，其余大鼠适应性喂 养3天。除空白对照组外，其余大鼠用2. 5%腺嘌呤混悬液按250mg/kg/天灌胃，连续灌胃 给予3周，待出现血清尿素氮、肌酐升高等肾功能衰竭现象时，将符合要求的大鼠随即分为 模型组、组合物一至二十五组，大黄酸、大黄素、丹参素、红花苷组。组合物一至二十五组和 单一成分药物组分别灌胃给予相应药物l〇ml/kg，空白对照组和模型组灌胃给予等体积的 〇. 5%羧甲基纤维钠溶液，每日给药一次，连续给药4周。末次给药24h后，腹主动脉取血， 测定血清尿素氮、肌酐、血清白蛋白的含量和血液流变学各指标，解剖肾脏进行病理切片， 显微镜下观察病理变化。
[0073] 4.检测指标
[0074] (1)测定血清尿素氮、肌酐和血清白蛋白的含量
[0075] (2)病理学检查
[0076] 5.实验结果
[0077] (1)本发明对慢性肾衰模型大鼠血清尿素氮、肌酐和血清白蛋白的影响。见表1。 [0078] 表1本发明对慢性肾衰大鼠血清尿素氮、肌酐和血清白蛋白的影响PU )
[0079]
[0082] 结果表明：空白对照组与模型组比较尿素氮和肌酐明显较低，血清白蛋白明显较 高，且有显著性差异，表明造模后，已对大鼠造成严重损伤，经过4周的治疗各给药组大鼠 尿素氮和肌酐显著降低，血清白蛋白明显升高，且有显著性差异（P〈〇. 05或p〈0. 01)。
[0083] (3) HE染色显微镜下观察结果
[0084] 空白对照组：肾小球和肾小管清晰，结构正常，未见病理改变；模型组：肾小球萎 缩，肾小管明显扩张，近曲小管和远曲小管上皮细胞均有明显浊肿和变性发生，肾间质纤维 组织增生，并有慢性炎细胞浸润；各给药组：肾小球轻微充血，结构未见异常，肾小管有轻 微扩张，无明显炎细胞浸润。
[0085] 6.结论结果证实，各给药组对慢性肾衰均有较好地治疗作用，具体表现在对血肌 酐、尿素氮、血清白蛋白和病理学特征的改善作用。
[0086] 实验二、本发明组合物对肾小球肾炎的治疗作用
[0087] 1.实验动物SD大鼠320只，雌雄各半，体重180_220g，购自中国科学院上海实验 动物中心。新西兰白兔8只，购自西安市迪乐普生物资源开发有限公司。
[0088] 2.实验药物本发明25组组合物，药物成分均有由大连美仑生物技术有限公司提 供，实验前均用〇. 5%羧甲基纤维钠配成3. 8mg/ml溶液（大黄酸、大黄素、丹参素、红花苷药 物浓度与组合物二十五相同）。
[0089] 3.实验方法
[0090] (1)制备兔抗大鼠胸腺细胞血清取无菌的SD大鼠12只，处死，小心摘取大鼠胸腺 和肝脏。将肝脏用PBS缓冲液冲洗干净后制成肝粉待用；另将胸腺置于PBS缓冲液中，冲洗 2-3次，小心分离、去除其表面的淋巴结和血管，置200目不锈钢网筛上，用解剖针轻轻划破 胸腺游离出胸腺细胞，用PBS缓冲液冲洗，收集胸腺细胞悬液，离心10min，用PBS缓冲液重 制2 X IOVml的胸腺细胞悬液，按体积比1 :2混合胸腺细胞悬液和弗氏完全佐剂，充分混 匀，以混合后的悬液作为大鼠胸腺细胞免疫抗原液。将大鼠胸腺细胞免疫抗原液多点注射 于8只新西兰白兔背部皮下，每只兔子注射3ml。常规饲养2周后，兔耳缘静脉注射2 X IO7/ ml的胸腺细胞悬液，每只注射I. 5ml。7d后心脏抽取兔子血液，收集兔血清。用免疫扩散法 测抗兔抗大鼠胸腺细胞血清效价为I :160-1 :320。兔抗大鼠胸腺细胞血清于56°C、30min 灭活后，分别用同个体大鼠肝粉吸附以去除非特异性抗体，室温离心30min，弃去肝粉，收集 兔抗大鼠胸腺细胞血清，-20°C保存备用。
[0091] ⑵慢性肾小球肾炎大鼠模型的制备取健康SD大鼠，适应性喂养3天后，收集尿 液，检测尿蛋白，结果均为阴性。随即分为正常对照组、模型组、组合物一至二十五组，每组 10只。除正常对照组大鼠尾静脉注射2ml生理盐水外，其余组大鼠一次性尾静脉注射兔抗 大鼠胸腺细胞血清2ml。
[0092] (3)给药方法及测定指标注射兔抗大鼠胸腺细胞血清6天后，组合物一至二十五 组分别灌胃给予相应药物l〇ml/kg，空白对照组和模型组灌胃给予等体积的0. 5%羧甲基 纤维钠溶液，每日给药一次，连续给药4周。末次给药24小时后，腹主动脉取血，分别测定 IL-6、IL-8和TNF- α水平，解剖肾脏，进行病理学考察。
[0093] 4.结果
[0094] (1)本发明对慢性肾小球肾炎大鼠血清IL-6、IL-8和TNF- α的影响
[0095] 表2本发明对慢性肾小球肾炎大鼠...