照的相对基因表达。
[0056] 图18Α显示卡普兰-梅尔曲线图（Kaplan Meir plot)，该曲线图显示在慢性受损 肝脏中部分肝切除之后使用CSFl-Fc治疗的手术后地存活率（p = 0. 07)和增加体重的倾 向（实线=CSFl-Fc，点线=对照；η = 8个/组，在第4天和第7天）。图18B显示平均肝 脏重量与体重比率、肝细胞增殖（ki67免疫组织化学）以及经由天狼星红量化（Sirius red quantification)的纤维化量化。图18C显示血清参数。
[0057] 图19显示A)相对于对照组（MARCO :具有胶原结构的巨噬细胞受体；MSRl :巨噬细 胞清除剂受体1)平均值的基因表达（白色=对照；阴影=CSFl-Fc) ;B)显示在血管内注射 之后从1-15分钟时覆盖在选通的荧光珠粒上的流动曲线图的珠粒清除率分析（点线=对 照；实线=CSFl-Fc ;灰色线=未受损伤、未经处理的小鼠）；C)在血管内注射荧光珠粒之 后15分钟时的离体荧光器官。（η =每组6个）
[0058] 图20显示A)相对于对照组（MARCO :具有胶原结构的巨噬细胞受体；MSRl :巨噬细 胞清除剂受体1)平均值的基因表达[白色=对照；阴影=CSFl-Fc] ;B)珠粒清除率分析； C)在血管内注射荧光珠粒之后15分钟时的离体荧光器官。
[0059] 图21显示A)在手术前以及手术后第1天和手术后第3天取得的55名进行部分 肝切除的患者的血清CSFl水平。B)根据肝脏切除程度来分离的同期组群。具有事后分析 的双因素方差分析（two way AN0VA)显示，与具有小于3个切除区段的患者相比较，具有超 过5个切除区段的患者的CSFl水平明显增加。C)以点显示的出现手术后肝脏衰竭的患者 与同期组群中的其余患者（中值和范围）相比较。
【具体实施方式】
[0060] 术语"M-CSF"、"巨噬细胞集落刺激因子"、"CSF-1"、"CSF1"、"集落刺激因子1"以 及"集落刺激因子-1"在此可互换地使用。
[0061] 术语"补充（supplementation) "、"补充剂（supplement) " 或"补充 (supplementing) "是希望以超过个体已经具有的起作用的CSF-I水平的另外或额外量向 个体给予CSF-I。
[0062] 术语"治疗（treat) "、"治疗（treating) " 或"治疗（treatment of) " 是希望与将 在不存在治疗的情况下发生的情况相比，降低病症的严重性或减少病症的症状、或部分或 完全地消除病症。治疗不需要实现病症的完成治愈。
[0063] 术语"恢复（restore) "、"恢复（restoring) "或"恢复（restoration of) "是希望 与将在不存在治疗的情况下发生的情况相比，降低病症的严重性或减少病症的症状、或部 分或完全地消除病症。治疗不需要实现病症的完成治愈。
[0064] "治疗学上有效"或"有效"量希望指代如经由临床测试和评估、患者观察等等所提 到，使疾病或病症的症状缓解的剂量。"有效量"或"有效"可以进一步指代造成生物学或化 学活性的可检测变化的剂量。可检测变化可以由本领域的普通技术人员针对相关机制或过 程来检测和/或进一步量化。此外，"有效量"或"有效"可以指代保持所需生理学状态，即， 减少或预防明显衰退和/或促进所关注病状的改善的量。如在本领域中一般理解的，剂量 将取决于给药途径、患者的症状和体重、并且也取决于所给予的化合物而变化。
[0065] 可以在本发明中治疗的病状包括由于物理外伤、药物或毒性化学品不良作用、感 染、自身免疫性、局部缺血、酒精诱发的肝损害或任何其他肝损害原因所致的肝损害或肝 炎。肝损伤通常由物理外伤（如道路交通事故、跌倒、攻击等等）造成。扑热息痛（乙酰胺 苯酚）用药过量是药物诱发的肝损害的相对常见原因，但肝损害也可以由许多其他药剂造 成，例如甲胺喋呤、他汀类、烟酸、胺碘酮、化学治疗剂以及一些抗生素。酒精诱发的肝脏疾 病是分布极广泛的肝损害原因。造成肝损害的感染尤其包括A、B或C型肝炎病毒感染。虽 然CSFl治疗可能并非在所有肝损害情况下都将是适当的，但它在许多情况下可以具有有 益作用。
[0066] 术语"Fc"是希望指抗体分子中与细胞（如巨噬细胞和肥大细胞）表面上的抗体 受体以及补体蛋白结合的区域。Fc (50, 000道尔顿）片段含有CH2和CH3区以及由一个或 多个二硫化物和非共价相互作用保持在一起的铰链区的一部分。Fc和Fc5 μ片段分别由 IgG和IgM的碎片化产生。术语Fe来源于这些抗体片段结晶的能力。Fe片段完全由免疫 球蛋白的重链恒定区生成。Fe片段无法结合抗原，但它是造成抗体的效应子功能（如补体 固定）的原因。
[0067] "多肽"是指经由肽键连接的氨基酸聚合物（二肽或更大）。因此，术语"多肽"包 括蛋白质、寡肽、蛋白质片段、蛋白质类似物等等。术语"多肽"涵盖如上文所定义的多肽， 这些多肽由核酸编码、重组地产生、从适当来源中分离或经合成。
[0068] 如在此所用，"功能性"多肽是保持至少一种通常与该多肽相关联的生物活性的多 肽。优选地，"功能性"多肽保持未经修饰的肽所具有的所有活性。"保持"生物活性意味着 多肽保持天然多肽生物活性的至少约50%、60%、75%、85%、90%、95%、97%、98%、99% 或更多（并且可能甚至具有比天然多肽高的活性水平）。"非功能性"多肽是基本上不展现 可检测的通常与该多肽相关联的生物活性的多肽（例如，至多仅不显著的量，例如小于约 10%或甚至5% )。
[0069] 如在此所用的"融合蛋白"是指在对两种（或更多种）不同多肽或其片段进行编码 的两个异源核苷酸序列或其片段以正确的翻译读取框融合在一起时产生的蛋白质。该两种 或更多种不同多肽或其片段包括在自然界中未被发现融合在一起的那些多肽或其片段和/ 或包括天然存在的突变体。
[0070] 如在此所用，"片段"是实质上保持至少一种通常与蛋白质或多肽相关联的生物 活性的片段。在具体实施例中，"片段"实质上保持未经修饰的蛋白质所具有的所有活性。 "实质上保持"生物活性意味着蛋白质保持天然蛋白质生物活性的至少约50%、60%、75%、 85%、90%、95%、97%、98%、99%或更多（并且可能甚至具有比天然蛋白质高的活性水 平）。
[0071] "重组多肽"是由重组核酸产生的多肽。
[0072] "经分离"多肽意味着与天然存在的生物体或病毒中的至少一些其他组分（例如通 常发现与该多肽缔合的细胞或病毒的结构性组分、或其他多肽或核酸）分离或实质上不含 这些组分的多肽。如在此所用，"经分离"多肽的纯度是至少约25%、50%、60%、70%、75%、 80%、85%、90%、95%、97%、98%、99%或更多^/界）。
[0073] 术语"衍生物"应理解为是指从CSF-I衍生（实质上衍生）或获得（实质上获得）、 但保持CSF-I生物学功能的相似性或实质性相似性的任何分子。在某些方面中，生物学功 能是促进肝脏器官发育的能力。衍生物可以例如通过CSF-I裂解产生生物活性片段、环化、 生物偶联和/或与一个或多个另外的部分偶合来提供，这些另外的部分改善例如溶解度、 稳定性或生物学半衰期或充当后续检测的标签等等。衍生物也可以由翻译后或合成后修饰 来产生，该修饰如碳水化合物部分的附接、或产生结构性修饰（多个）的化学反应（多个） (如氨基酸（多个）的烷基化或乙酰化）或涉及化学键形成的其他变化。在适合用于本 发明中的衍生物的尤其优选的实施例中，衍生物是CSF-I的成熟结构域。在适合用于在此 所披露的方法中的衍生物的另一个优选实施例中，该衍生物是CSF-I的生物活性C端片段 (例如包含具有536个氨基酸的蛋白质中的C端氨基酸1到150的CSF-I片段）。CSF-I衍 生物的其他实施例包括包含C端和/或N端（例如用乙酸酐对N端的酰化）化学修饰侧链 (例如赖氨酰基ε-氨基的聚乙二醇化）或连接到不同载体（例如人类血清白蛋白或组氨 酸（His6)标记）上的CSF-1。
[0074] 如一般在此所用，"同系物"视具体情况与另一个核酸或多肽共有可界定的核苷 酸或氨基酸序列关系。"蛋白质同系物"优选地与如在此所描述多肽的氨基酸序列共有至 少70 %或80 %序列一致性、更优选地至少85%、90 %并且甚至更优选地至少95%、96%、 97%、98%或99%序列一致性。CSF的同系物也可以根据本发明来加以使用。这类CSF同 系物的特征将优选地在于与具有较高或实质性生物活性的CSF蛋白质的生物活性大约相 同或更大的生物活性。
[0075] 如在此所用，"变体"蛋白质是其中一个或多个氨基酸已经由不同氨基酸替代的蛋 白质。保持天然或野生型CSF生物活性的CSF蛋白质变体可以根据本发明来加以使用。在 本领域中充分理解，一些氨基酸可以在不改变多肽活性的性质的情况下变成具有广泛类似 特性的其他氨基酸（保守取代）。一般来说，很可能在多肽的特性中产生最大变化的取代是 以下那些取代，其中（a)亲水性残基（例如，Ser或Thr)被取代成疏水性残基（（例如Leu、 lie、Phe或Val)或被该疏水性残基取代；(b)半胱氨酸或脯氨酸被取代成任何其他残基或 被该残基取代；（c)具有正电性侧链的残基（例如，Arg、His或Lys)被取代成负电性残基 (例如，Glu或Asp)或被该负电性残基取代或（d)具有巨大侧链（例如，Phe或Trp)的残 基被取代成具有较小侧链的残基（例如，Ala、Ser)或无侧链的残基（例如，Gly)或被该残 基取代。
[0076] 本发明的实施例进一步提供一种编码在此所描述的融合蛋白的经分离核酸（例 如，"经分离DNA"或"经分离载体基因体"）。核酸与天然存在的生物体或病毒中的至少一 些其他组分（如例如通常发现与该核酸缔合的细胞或病毒的结构性组分、或其他多肽或核 酸）分离或实质上不含这些组分。构成本发明活性剂的多肽的编码序列经转录，并且任选 地经翻译。根据本发明的实施例，编码序列的转录与翻译将导致产生所描述的融合蛋白。
[0077] 本领域的普通技术人员应了解，归因于遗传密码的简并，在编码本发明融合多肽 的核酸中可能存在变化性。核酸序列中的进一步变化可以用过存在（或不存在）非翻译序 列（如内含子序列以及5'和3'未翻译序列）来引入。此外，本发明的经分离核酸包涵编 码与在此具体披露的多肽序列、或对应于包括在本发明方面中的蛋白质（或其片段）的那 些已知序列具有至少约60%、70%、80%、90%、95%、97%、98%或更高氨基酸序列相似性 的融合蛋白的那些核酸、并且进一步编码如在此所定义的功能性融合蛋白。
[0078] 本发明的经分离核酸包括RNA、DNA (包括cDNA)以及其嵌合体。经分离核酸可以 进一步包括经修饰的核苷酸或核苷酸类似物。
[0079] 编码本发明多肽的经分离核酸可以与适当的表达控制序列（例如转录/翻译控制 信号和聚腺苷酸化信号）相关联。
[0080] 应了解，取决于所需水平和组织特异性表达，可以使用多种启动子/增强子要素。 取决于所需表达模式，启动子可以是构成性或可诱导的（例如，金属硫蛋白启动子或激素 可诱导的启动子）。启动子可以是天然（native)或外来的，并且可以是天然（natural)或 合成性序列。外来是希望转录起始区未见于该转录起始区引入到其中的野生型宿主中。选 择启动子以使得它将在所关注的靶细胞（多个）中起作用。
[0081] 本发明进一步提供制造在此所描述的融合蛋白的方法。制造融合蛋白的方法在本 领域中得到充分理解。这类方法包括使包含有包含编码融合蛋白的核酸的载体的宿主细胞 在适合于表达和后续分离该融合蛋白的条件下生长。因此，编码构成本发明融合蛋白的多 肽的经分离核酸可以例如出于克隆或其他实验室操作、重组蛋白产生或基因递送的目的而 结合到载体中。示例性载体包括细菌性人工染色体、粘粒、酵母人工染色体、噬菌体、质粒、 脂质载体以及病毒载体（下文更详细描述）。
[0082] 在具体实施例中，经分离核酸结合到表达载体中。在本发明的其他实施例中，包括 在此所描述的经分离核酸的载体包括于宿主细胞中。与不同宿主细胞相容的表达载体是本 领域中众所周知的并且含有适合于核酸转录与翻译的要素。典型地，表达载体含有"表达 盒"，该表达盒沿5'到3'方向包括启动子、以可操作方式与该启动子缔合的编码本发明多 肽或其活性片段的编码序列、以及任选地，包括用于RNA聚合酶的停止信号和用于聚腺苷 酸化酶的聚腺苷酸化信号的终止序列。
[0083] 除上文所论述的调控控制序列之外，重组表达载体还可以含有另外的核苷酸序 列。举例来说，重组表达载体可以编码可选标记基因以识别已