制备方法，所述方法包括以下步骤:
[0020](1)将外层生物层平铺在基板上，在外层生物层上放置内层支撑层，而后在内层支撑层上放置另一外层生物层，将平铺好的三层结构的两端与基板固定；
[0021](2)将步骤(1)得到的固定于基板上的三层结构在浸渍液中浸泡，而后洗净浸渍液，在最后放置的外层生物层上加另一基板覆盖，热压状态下干燥，从基板上取下即得所述复合疝补片。
[0022]在本发明中，在制备复合疝补片之前，还包括将外层生物层和内层支撑层分别进行预处理的步骤。
[0023]优选地，所述外层生物层的预处理为将外层生物层在pH = 8-10 (例如pH 8.2、8.4、8.6、9、9.3、9.5 或 9.8)的碳酸氢钠溶液中浸泡 6_12h，例如 6.2h、6.5h、6.8h、7h、7.4h、7.8h、8h、8.4h、8.7h、9h、9.5h、9.8h、10h、10.3h、10.8h、llh、ll.3h、ll.5h 或 11.8h。
[0024]优选地，所述内层支撑层的预处理为将内层支撑层在pH = 3-5(例如pH 3.1,3.2,3.5、3.8、4、4.2、4.4、4.6 或 4.8)的盐酸缓冲液中浸泡 10_30min，例如 lOmin、12min、15min、18min、20min、23min、25min、28min 或 30mino
[0025]在本发明中，所述外层生物层可以为已上市的脱细胞支架或用常规化学方法或酶催化方法处理牛膀胱、猪小肠或猪膀胱得到相对应的脱细胞支架，所述化学方法是指用过氧乙酸(质量体积浓度为0.1-0.15% )对牛膀胱、猪小肠或猪膀胱进行浸泡搅拌洗涤，之后反复纯水清洗后干燥得到相对应的脱细胞支架。所述酶催化方法是指利用胰蛋白酶(0.05%胰蛋白酶/0.05% EDTA)水溶液对牛膀胱、猪小肠或猪膀胱进行浸泡搅拌洗涤，之后反复纯水清洗后干燥得到相对应的脱细胞支架。
[0026]在本发明中，所述内层支撑层可以为已上市的聚内酯网片产品或者利用直径为0.3-0.6mm的聚内酯单丝根据本领域人员熟知的编织技术编织成网片。
[0027]优选地，在本发明中，步骤(1)和步骤(2)所述基板为玻璃板、不锈钢板或理化板中的任意一种。在本发明中对于所述基板并无特殊限制，除上述列出的几种基板外，还可以使用其他水平度较好的平板。
[0028]优选地，步骤(1)和步骤(2)所述基板的重量为500g-2kg，例如510g、550g、600g、700g、800g、1kg、1.2kg、1.4kg、1.6kg、1.8kg 或 1.9kg。
[0029]在本发明所述制备方法中，步骤(2)所述在浸渍液中浸泡为在浓度梯度为50%、60%、75%、90%和 95% 的浸渍液中分别浸泡 10_40min，例如 lOmin、15min、20min、25min、30min、35min 或 40mino
[0030]优选地，步骤(2)所述浸渍液为乙醇和甘油的混合水溶液，其中乙醇与甘油体积比为 1:1_5:1，例如1.2:1、1.5:1、1.8:1、2:1、2.3:1、2.5:1、2.8:1、3:1、3.5:1、3.8:1、4:1、4.3:1、4.5:1、4.8:1 或 4.9:1，优选 4:1。
[0031 ] 在本发明中，浸渍液选用乙醇和甘油的混合水溶液时，所使用的浸渍液的梯度浓度(50%、60%、75%、90%和95% )指的是乙醇和甘油的混合水溶液中乙醇和甘油总体积浓度。
[0032]优选地，步骤⑵所述热压的温度为40-60°C，例如42°C、44°C、46°C、48°C、50°C、53°C、55°C、57°C或 59。。。
[0033]优选地，步骤(2)所述干燥在真空干燥箱中进行。
[0034]优选地，步骤⑵所述干燥的温度为40-60°C，例如42°C、44°C、46°C、48°C、50°C、53°C、55°C、57°C或 59。。。
[0035]在本发明中，所述在热压状态下干燥是指将放置在两层基板之间的三层结构(每个基板重量为500g-2kg)在真空干燥箱中于温度40-60°C下进行处理，在基板压着三层结构的材料的情况下，抽真空，材料上含有的一些溶剂挥发，此时，三层结构会有部分融合，增强其结合力，增强得到的复合疝补片的力学强度，在这个过程中，如果没有基板压着三层结构的材料，则材料已发生收缩，难以得到平整的材料，也难以保证三层结构之间的结合力，从而无法保证其力学强度。在本发明中热压与干燥是同时进行的，因此热压的温度与干燥的温度是相同的，均是通过控制真空干燥箱的温度而实现的。
[0036]作为本发明的优选技术方案，本发明所述复合疝补片的制备方法具体包括以下步骤:
[0037](1)将外层生物层在pH = 8-10的碳酸氢钠溶液中浸泡6_12h进行预处理，将内层支撑层在pH = 3-5的盐酸缓冲液中浸泡10-30min进行预处理；
[0038](2)将预处理后的外层生物层平铺在基板上，在外层生物层上放置预处理后的内层支撑层，而后在内层支撑层上放置另一预处理后的外层生物层，将平铺好的三层结构的两端与基板固定；
[0039](3)将步骤⑴得到的固定于基板上的三层结构在体积浓度的梯度为50%、60%、75 %、90 %和95 %的浸渍液中分别浸泡10-40min，其中浸渍液为乙醇和甘油的混合水溶液，其中乙醇与甘油体积比为1:1-5:1，而后洗净浸渍液，在最后放置的外层生物层上加另一基板覆盖，在40-60°C的真空干燥箱中于热压状态下干燥，所述干燥的温度为40-60°C，而后从基板上取下即得所述复合疝补片。
[0040]利用本发明方法制备的复合疝补片，内外层结合力良好，支撑层位于内层，在将该复合疝补片植入过程中，支撑层不与组织接触，缝合强度适中，与组织接触的是可以诱导细胞增长的脱细胞支架，能够降低疝缺损部位的感染以及疤痕形成；支撑层的聚内酯仍能保持其力学强度，能够有效的解决当下疝修补的迟发疼痛、容易复发等问题。
[0041]另一方面，本发明提供了如第一方面所述的复合疝补片在制备用于治疗疝缺损部位的感染或降低疤痕形成的材料中的应用。本发明制备得到的复合疝补片经真空灭菌后方可用于疝气的治疗。
[0042]现对于现有技术，本发明具有以下有益效果:
[0043]本发明采用包含三层结构的复合疝补片，由于与组织接触的脱细胞支架位于外层，可以诱导细胞增长，从而能够降低疝缺损部位的感染以及疤痕形成，利用聚内酯网片层作为内层支撑层能够保持复合疝补片的力学强度，提高补片的稳定性，能够承受较高的腹张压，并且内外层结合力良好，能够有效地解决当前由于产品强度不稳定，难以承受较高的腹张压，待细胞长入后，支架逐渐降解而带来的疝修补的迟发性疼痛以及容易复发等问题，并且本发明的复合疝补片制备方法简单，可应用于工业生产。
【具体实施方式】
[0044]下面通过【具体实施方式】来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
[0045]实施例1
[0046]在本实施例中，通过以下方法制备复合疝补片，具体包括以下步骤:
[0047](1)将牛膀胱脱细胞支架层(库克生物技术公司)在pH = 8的碳酸氢钠溶液中浸泡12h进行预处理，将聚内酯网片层在pH = 5的盐酸缓冲液中浸泡20min进行预处理；
[0048](2)将预处理后的牛膀胱脱细胞支架层平铺在玻璃板上，在牛膀胱脱细胞支架层上放置预处理后的聚内酯网片层(强生)，而后在聚内酯网片层上放置另一预处理后的牛膀胱脱细胞支架层，将平铺好的三层结构的两端与玻璃板用皮筋固定；
[0049](3)将步骤(1)得到的固定于玻璃板上的三层结构在体积浓度的梯度为50%、60 %、75 %、90 %和95 %的浸渍液中分别浸泡30min，其中浸渍液为乙醇和甘油的混合水溶液，其中乙醇与甘油体积比为4:1，而后洗净浸渍液，取下皮筋，在最后放置的牛膀胱脱细胞支架层上加另一玻璃板覆盖，在50°C的真空干燥箱中于热压状态下干燥，而后从玻璃板上取下即得所述复合疝补片。
[0050]实施例2
[0051]在本实施例中，通过以下方法制备复合疝补片，具体包括以下步骤:
[0052](1)将猪小肠脱细胞支架层(库克生物技术公司)在pH = 10的碳酸氢钠溶液中浸泡6h进行预处理，将聚内酯网片层在pH = 4的盐酸缓冲液中浸泡lOmin进行预处理；
[0053](2)将预处理后的牛膀胱脱细胞支架层平铺在玻璃板上，在猪小肠脱细胞支架层上放置预处理后的聚内酯网片层，而后在聚内酯网片层上放置另一预处理后的猪小肠脱细胞支架层，将平铺好的三层结构的两端与玻璃板用皮筋固定；
[0054](3)将步骤(1)得到的固定于玻璃板上的三层结构在体积浓度的梯度为50%、60 %、75 %、90 %和95 %的浸渍液中分别浸泡lOmin，其中浸渍液为乙醇和甘油的混合水溶液，其中乙醇与甘油体积比为1: 1，而后洗净浸渍液，取下皮筋，在最后放置的猪小肠脱细胞支架层上加另一玻璃板覆盖，在40°C的真空干