种接种在适宜的培养基中，活化后，再接种在肉汤培养基中， 置37°C溫箱培养6~化，取出用肉汤稀释备用。 阳0巧]最低抑菌浓度（MIC)测定：组合物1、组合物2、组合物3、组合物4和组合物5制成 含量为Ig/ml的溶液，离屯、，取上清液，IOmin高压蒸气灭菌，在无菌条件下，将上述各药液 分别用葡萄糖酪红肉汤作管外递减稀释，药物的稀释浓度分别为0 ;1:5,1:10,1:20,1:40， 1:80,1:160,1:320,1:640,1:1280及对照管，每管均为Iml。每管加一种菌液，每管菌量均 为0. 1ml，混合均匀，37 °C培养2地，取出观察细菌生长，对照管液体为红色，细菌生长管为 黄色，无细菌生长的最低药物浓度即为对该菌株的最低抑菌浓度（MIC)。
[0026] 7.结果
[0027] 表1组合物对小鼠止咳作用的影响（x±S，n= 10)
[0029] 注：与空白组比较，冲<0. 05,*冲<0. 01，**冲<0.0 Ol
[0030] 组合物1、组合物2、组合物4、组合物5给药组动物的咳嗽潜伏期明显延长 (P<0. 05)，组合物2、组合物52min咳嗽次数明显减少（P<0. 05)，提示组合物2、组合物5 口 服给药能明显延长咳嗽潜伏期和减少咳嗽次数，对小鼠具有明显的止咳作用。
[0031] 表2组合物对小鼠桂疲作用的影响（X+S，n= 10)
[0033] 注：与空白组比较，冲<0. 05,*冲<0. 01，**冲<0.0 Ol
[0034] 组合物1、组合物2、组合物3和组合物5给药组动物的气管酪红排泌量明显提高 (P<0. 05,P<0. 01)，排疲增加率达 127. 8%、136. 7、144. 7%和 125. 8%，组合物 1、组合物 2、 组合物3和组合物5有一定的桂疲作用。
[0035] 表3组合物对豚鼠平喘作用的影响（x±S，n= 9)
[0037] 注：与空白组比较，冲<0. 05,*冲<0. 01，**冲<0.0 Ol
[0038] 组合物1、组合物2、组合物3、组合物4和组合物5给药组动物引喘潜伏期显著延 长（P<0. 05，P<0. 01)，表明组合物1、组合物2、组合物3、组合物4和组合物5给药对豚鼠具 有明显的平喘作用。 W39] 表4组合物体外抗菌MIC结果（1 :n)
[0041] 结果显示组合物1、组合物2、组合物3、组合物4、组合物5对金黄色葡萄球菌有较 强的抑制作用。对其他链球菌、肺炎双球菌、甲型链球菌、绿脈杆菌和伤寒杆菌则均存在一 定的抑制作用。 具体实施例： 阳0创实施例1 :取枯梗200g、鱼腥草1000 g加水煎煮2次，第一次加水8倍，第二次加 水6倍，提取2次第一次化，第二次1.化。合并二次煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度 1.25(60°C)的清膏；将氨茶碱6.Og加入清膏中，混合均匀，即得。组合物其中，枯梗总皂巧 占总重量的1.48%，总黄酬占19. 18%，氨茶碱占2. 07%，该化合物组合物中枯梗总皂巧： 鱼腥草总黄酬：氨茶碱=1.0:21.0:1.4。 阳0创实施例2 :取枯梗lOOg、鱼腥草1500g加水煎煮2次，第一次加水8倍，第二次加 水6倍，提取2次第一次化，第二次1.化。合并二次煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度 1.25(6(TC)的清膏；将氨茶碱4.5g加入清膏中，混合均匀，即得。组合物其中，枯梗总皂巧 占总重量的0.53%，总黄酬占16. 83%，氨茶碱占1. 12%，该化合物组合物中枯梗总皂巧： 鱼腥草总黄酬：氨茶碱=1. 0:31. 7:2. 1。
[0044] 实施例3 :取枯梗50g、鱼腥草2000g加水煎煮2次，第一次加水8倍，第二次加 水6倍，提取2次第一次化，第二次1.化。合并二次煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度 1.25(60°C)的清膏；将氨茶碱3.Og加入清膏中，混合均匀，即得。组合物其中，枯梗总皂巧 占总重量的0. 25%，总黄酬占18. 77%，氨茶碱占0. 59%，该化合物组合物中枯梗总皂巧： 鱼腥草总黄酬：氨茶碱=1.0:75. 1:2. 36。
[0045] 实施例4 :取枯梗lOOg、鱼腥草1500g加水煎煮2次，每次加水6倍，每次提取比。 合并二次煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度1. 25 (60°C)的清膏；将氨茶碱4. 5g加入清 膏中，混合均匀，即得。组合物其中，枯梗总皂巧占总重量的0.63%，总黄酬占19. 83%，氨 茶碱占1. 44%，该化合物组合物中枯梗总皂巧：鱼腥草总黄酬：氨茶碱=1. 0:31. 5:2. 3。
[0046] 实施例5 :取枯梗lOOg、鱼腥草1500g加水煎煮3次，第一次加水8倍，第二立次 加水6倍，每次提取1.化。合并二次煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度1. 25 (60°C)的 清膏；将氨茶碱4. 5g加入清膏中，混合均匀，即得。组合物其中，枯梗总皂巧占总重量的 0. 47%，总黄酬占14. 65%，氨茶碱占0. 92%，该化合物组合物中枯梗总皂巧：鱼腥草总黄 酬：氨茶碱=1.0:31.2:1.9。
【主权项】
1. 一种组合物在制备治疗急慢性支气管炎药物中的应用，该组合物原料为桔梗0. 3~ 3重量份，鱼腥草8~40重量份，氨茶碱0. 02~0. 08重量份，系通过如下方法制得：取桔 梗、鱼腥草药材加水煎煮2~4次，水量分别为4~12倍，煎煮时间分别为0. 5~3小时，合 并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度1. 1~1. 4(60°C)的清膏；将氨茶碱加入清膏中， 混合均匀，即得。2. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于桔梗0. 5~2重量份，鱼腥草10~20重量 份，氛茶喊〇. 03~0. 06重量份。3. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于桔梗1重量份，鱼腥草15重量份，氨茶碱 〇. 045重量份。4. 如权利要求1所述的提取物，其特征在于，所述加热回流提取为2次，第一次加水8 倍，第二次6倍，煎煮时间第一次为2小时，第二次为1. 5小时。
【专利摘要】本发明属于中西药结合领域，涉及一种具有止咳平喘、消炎化痰作用的组合物、其制备方法及在制备急慢性支气管炎药物中的应用。该组合物由下述原料按质量份制备而成：桔梗0.3～3重量份，鱼腥草8～40重量份，氨茶碱0.02～0.08重量份，系通过如下方法制得：桔梗、鱼腥草药材加水煎煮2～4次，水量分别为4～12倍，煎煮时间分别为0.5～3小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度1.1～1.4(60℃)的清膏；将氨茶碱加入清膏中，混合均匀，即得。本发明所得的组合物具有显著化痰、平喘、镇咳作用。
【IPC分类】A61P11/06, A61P11/00, A61K36/78, A61K31/522, A61P11/10, A61P11/14
【公开号】CN105343275
【申请号】CN201510772849
【发明人】李松林, 孔铭, 朱贺
【申请人】江苏省中医药研究院
【公开日】2016年2月24日
【申请日】2015年11月12日