预防或治疗巴斯综合征的方法和组合物的制作方法
【专利说明】
[0001] 相关专利申请的交叉引用
[0002] 本申请要求2013年3月1日提交的美国临时专利申请61/771，534、2013年3月 1日提交的美国临时专利申请61/771,642和2013年6月26日提交的美国临时专利申请 61/839, 753的优先权，其全部通过引用整体结合到本文中来。
技术领域
[0003] 本发明技术通常涉及预防或治疗巴斯综合征（BarthSyndrome)、降低与巴斯综合 征相关的危险因子和/或降低巴斯综合征的严重性的组合物和方法。具体地讲，本发明技 术涉及施用有效量的芳族阳离子肽到有此需要的受试者以使TAZ1的表达水平正规化。
【背景技术】
[0004] 提供以下描述以帮助读者的理解。但并不承认所提供的信息或引用的参考文献为 现有技术。
[0005] 巴斯综合征为以扩张型心肌病（DCM)、骨骼肌病、中性粒细胞减少、生长延迟和有 机酸尿为特征的磷脂新陈代谢的可遗传病症。巴斯综合征的发病率估计为1/454, 000个 活产婴儿，其中根据地理位置，估计的发病率范围为1/400, 000-1/140, 000。巴斯综合征为 X-连接的病症，且因此不成比例地影响着男性患者。
[0006] 巴斯综合征由在TAZ基因中的突变引起（tafazzin;Xq28)，TAZ基因编码TAZ1， TAZ1为在局部化到内部线粒体膜的磷脂-心磷脂的新陈代谢中包括的酰基转移酶。缺损的TAZ1功能引起心磷脂的异常再成型且连累到线粒体结构和呼吸链功能。
【发明内容】
[0007] -方面，本发明技术涉及一种治疗在有此需要的受试者中的巴斯综合征的方法， 所述方法包括：向所述受试者施用治疗有效量的肽D-Arg-2' 6'-Dmt-LyS-Phe-NH2S其药学 上可接受的盐。
[0008] 在一些实施方案中，与正常对照受试者相比较，所述受试者表现出降低的TAZ1表 达水平。在一些实施方案中，每天施用所述肽，持续6周或更久。在一些实施方案中，每天 施用所述肽，持续12周或更久。
[0009] 在一些实施方案中，所述受试者已经被诊断为具有巴斯综合征。在一些实施方案 中，所述巴斯综合征包括心肌病、骨骼肌异常、中性粒细胞减少、发育迟缓、弱肌张力、在尿 和血液中有机酸的水平增加和频繁细菌传染中的一种或多种。
[0010] 在一些实施方案中，所述受试者为人类。在一些实施方案中，所述肽经口服、局部、 全身、静脉内、皮下、腹膜内或肌肉内施用。
[0011] 在一些实施方案中，所述方法还包括向所述受试者单独、依次或同时地施用心血 管剂。在一些实施方案中，所述心血管剂选自由抗心律不整剂、血管扩张剂、抗心绞痛剂、皮 质类固醇、强心苷、利尿剂、镇静剂、血管紧张素转化酶（ACE)抑制剂、血管紧张素II拮抗 剂、溶栓剂、钙通道阻断剂、血栓烷受体拮抗剂、自由基清除剂、抗血小板药物、β-肾上腺素 受体阻断药物、α-受体阻断药物、交感神经抑制剂、洋地黄制剂、强心药（inotrope)和抗 高血脂药物构成的组。
[0012] 在一些实施方案中，所述药学上可接受的盐包括乙酸盐或三氟乙酸盐。
[0013] -方面，本公开内容提供一种增加在有此需要的哺乳动物受试者中TAZ1的表达 的方法，所述方法包括：向所述受试者施用治疗有效量的肽D-Arg-2' 6' -Dmt-Lys-Phe-NH2 或其药学上可接受的盐。
[0014] 在一些实施方案中，在所述受试者中TAZ1的表达是在正常对照受试者中TAZ1的 表达水平的约二分之一至五分之一。在一些实施方案中，每天施用所述肽，持续6周或更 久。在一些实施方案中，每天施用所述肽，持续12周或更久。
[0015] 在一些实施方案中，所述受试者已经被诊断为具有巴斯综合征或疑似具有巴斯综 合征或处于具有巴斯综合征的危险之中。在一些实施方案中，所述巴斯综合征包括心肌病、 骨骼肌异常、中性粒细胞减少、发育迟缓、弱肌张力、在尿和血液中有机酸的水平增加和频 繁细菌感染中的一种或多种。
[0016] 在一些实施方案中，所述受试者为人类。在一些实施方案中，所述肽经口服、局部、 全身、静脉内、皮下、腹膜内或肌肉内施用。
[0017] 在一些实施方案中，所述方法还包括向所述受试者单独、依次或同时地施用心血 管剂。在一些实施方案中，所述心血管剂选自由抗心律不整剂、血管扩张剂、抗心绞痛剂、皮 质类固醇、强心苷、利尿剂、镇静剂、血管紧张素转化酶（ACE)抑制剂、血管紧张素II拮抗 剂、溶栓剂、钙通道阻断剂、血栓烷受体拮抗剂、自由基清除剂、抗血小板药物、β-肾上腺素 受体阻断药物、α-受体阻断药物、交感神经抑制剂、洋地黄制剂、强心药（inotrope)和抗 高血脂药物构成的组。
[0018] 在一些实施方案中，所述药学上可接受的盐包括乙酸盐或三氟乙酸盐。
[0019] -方面，本公开内容提供一种降低在与正常对照受试者相比具有减少的TAZ1表 达的哺乳动物受试者中巴斯综合征的危险的方法，所述方法包括：向所述受试者施用治疗 有效量的肽D-Arg-2' 6' -Dmt-Lys-Phe-NH2或其药学上可接受的盐。
[0020] 一方面，本公开内容提供一种稳定在具有巴斯综合征或疑似具有巴斯综合征的哺 乳动物受试者中的心磷脂再成型的方法。在一些实施方案中，所述哺乳动物受试者具有与 正常对照受试者相比减少的TAZ1表达。在一些实施方案中，所述心磷脂为心磷脂的18:2 物质。
【附图说明】
[0021 ] 图1为示出在狗心脏衰竭模型中D-Arg-2' 6' -Dmt-Lys_Phe_NH2对心磷脂物质 18:2-18:2-18:2-18:2的水平的影响的图表；
[0022] 图2为示出在狗心脏衰竭模型中D-Arg-2' 6' -Dmt-Lys-Phe-NHJtTAZ1表达水平 的影响的图表；
[0023] 图3为在巴斯综合征患者中的线粒体的电子显微镜图像；
[0024] 图4A为在心脏病中的线粒体的超微结构的电子显微镜图像；
[0025] 图4B为在用D-Arg-2' 6' -Dmt-Lys-Phe-MUS疗的心脏病中线粒体的超微结构的 电子显微镜图像；
[0026] 图5A为在心脏病中的线粒体的组织的电子显微镜图像；
[0027] 图5B为在用D-Arg-2' 6' -Dmt-Lys-Phe-MUS疗的心脏病中线粒体的组织的电子 显微镜图像。
【具体实施方式】
[0028] 应当了解下文以各种详细程度描述本发明的某些方面、模式、实施方案、变体和特 征以提供对本发明的充分理解。下文提供如在本说明书中所用的某些术语的定义。除非另 外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语通常具有与本发明所属领域中的普通技术人 员通常理解的相同的含义。
[0029] 如在本说明书和所附权利要求书中所使用，除非上下文清楚地指明，否则单数形 式的"一个（a) "、"一种（an)"以及"所述（the)"包括复数个对象。例如，提及"一个细胞" 包括两个或更多个细胞的组合等。
[0030] 本文使用的向受试者"施用"试剂、药物或肽包括向受试者引入或递送化合物以 执行其预期功能的任何路径。施用可通过任何合适的路径进行，包括经口服、鼻内、肠胃外 (静脉内、肌肉内、腹膜内或皮下）或局部进行。施用包括自施用和通过另一者施用。
[0031] 本文使用的术语"氨基酸"包括天然存在的氨基酸和合成氨基酸，以及以类似于天 然存在的氨基酸的方式发挥作用的氨基酸类似物和氨基酸模拟物。天然存在的氨基酸为 由遗传密码编码的那些氨基酸，以及随后进行修饰的氨基酸，例如羟基脯氨酸、γ-羧基谷 氨酸和〇-磷酸丝氨酸。氨基酸类似物是指具有与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构 (即，与氢、羧基、氨基和R基团键结的α-碳）的化合物，例如，高丝氨酸、正亮氨酸、甲硫 氨酸亚砜、甲硫氨酸甲基锍。这些类似物具有修饰的R基团（例如，正亮氨酸）或修饰的 肽主链，但是保留与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构。氨基酸模拟物是指具有与氨 基酸的一般化学结构不同的结构，但是以类似于天然存在的氨基酸的方式发挥作用的化学 化合物。氨基酸可以通过其通常已知的三字母符号或通过IUPAC-IUB生物化学命名委员会 (IUPAC-IUBBiochemicalNomenclatureCommission)推荐的单字母符号在本文中提到。
[0032] 本文使用的术语"有效量"是指足以实现所要的治疗性和/或预防性作用的量，例 如引起在有此需要的受试者中的例如TAZ1的表达水平增加（例如，正规化）的量。在治疗 或预防应用的情况下，在一些实施方案中，向受试者施用的组合物的量将取决于疾病的类 型和严重性及个体的特征，例如一般健康状况、年龄、性别、体重和药物耐受性。在一些实施 方案中，其还将取决于疾病的程度、严重性和类型。技术人员将能够根据这些因素和其它因 素确定适当的剂量。组合物也可与一种或多种额外的治疗性化合物组合施用。在本文所述 的方法中，可将例如D-Arg-2' 6' -Dmt-Lys-Phe-NH2的芳族阳离子肽或例如乙酸盐或三氟乙 酸盐的其药学上可接受的盐施用到具有巴斯综合征的一种或多种体征、症状或危险因素的 受试者，所述症状例如为心肌病、骨骼肌异常、中性粒细胞减少、发育迟缓、弱肌张力、在尿 和血液中的有机酸水平增加和/或例如肺炎的频繁细菌感染。例如，"治疗有效量"的芳族 阳离子肽包括如下水平，在施用之后受试者的TAZ1表达水平增加和/或巴斯综合征的一种 或多种体征、症状或危险因子的存在、频率或严重性降低或消除。在一些实施方案中，治疗 有效量降低或缓解巴斯综合征的生理作用和/或巴斯综合征的危险因子和/或发展巴斯综 合征的可能性。
[0033] 本文使用的术语"巴斯综合征"是指由TAZ1酰基转移酶缺乏引起的磷脂新陈代谢 的可遗传病症。巴斯综合征的体征和症状包括心肌病、骨骼肌异常、中性粒细胞减少、发育 迟缓、弱肌张力、在尿和/或血液中有机酸的水平增加和/或例如肺炎的频繁细菌感染。
[0034] 本文使用的术语"TAZ1"或"tafazzin"是指由TAZ基因编码的人类X染色体酰 基转移酶。TAZ1同种型的说明性序列由例如GenBank登录号NM_000116. 3、NM_181311. 2、 ΝΜ_181312·2和ΝΜ_181313·2给出。.
[0035] 本文使用的"分离的"或"纯化的"多肽或肽是指基本上不含来自产生该试剂的细 胞或组织来源中的细胞物质或其它污染多肽，或当化学合成时基本上不含化学前体或其它 化学品的多肽或肽。例如，分离的芳族阳离子肽将不含会干扰试剂的诊断性或治疗性用途 的物质。这类干扰性物质可包括酶、激素和其它蛋白质溶质及非蛋白质溶质。
[0036] 本文使用的使受试者的TAZ1表达水平"正规化"是指朝"正常"或野生型表达水 平的方向改变受试者的TAZ1表达水平。例如，使在与正常受试者相比具有降低的TAZ1表 达的受试者中的TAZ1表达水平正规化是指增加TAZ1表达水平。在一些实施方案中，使在 受试者中的TAZ1表达正规化是指缩减或降低与例如未治疗的对照受试者相比TAZ1表达的 降低程度。
[0037] 本文使用的"增加"受试者的TAZ1表达水平意指增加在器官或组织中受试者的 TAZ1水平（例如，受试者的TAZ1表达水平，例如RNA和/或蛋白水平）。在一些实施方案 中，增加TAZ1表达水平为增加约1 %、约5%、约10%、约15%、约20%、约25%、约30%、 约 35%、约 40%、约 45%、约 50%、约 55%、约 60%、约 65%、约 70%、约 75%、约 80%、约 85 %、约90 %、约95 %或更大。供选或额外地，在一些实施方案中，增加TAZ1表达水平度量 为在受试者中在TAZ1表达减小的程度方面的缩减或降低。在一些实施方案中，TAZ1降低 减小约0. 25倍-约0. 5倍、约0. 5倍-约0. 75倍、约0. 75倍-约1. 0倍或约1. 0倍-约 1.5 倍。
[0038] 本文使用的术语"多肽"、"肽"和"蛋白质"在本文中可互换地用来意指包含通过 肽键或修饰的肽键彼此接合的两个或更多个氨基酸的聚合物，即肽等排体。"多肽"是指短 链（常称作肽、糖肽或低聚物）和较长的链（一般称作蛋白质）两者。多肽可含有不同于 基因编码的20种氨基酸的氨基酸。多肽包括通过天然过程如翻译后加工或通过本领域熟 知的化学修饰技术所修饰的氨基酸序列。
[0039] 本文使用的术语"同时"治疗性使用是指通过相同路径并在相同时间或在基本上 相同的时间施用至少两种活性成分。
[0040] 本文使用的术语"分别"治疗性使用是指在相同时间或在基本上相同的时间通过 不同路径施用至少两种活性成分。
[0041] 本文使用的术语"依次"治疗性使用是指在不同时间施用至少两种活性成分，施用 路径相同或不同。更特定地讲，依次使用是指在开始施用另一种或其它活性成分之前，完全 施用活性成分之一。因此可以在施用另一种或多种