PA(购自Sigma公司），继续孵育5分钟，即刻测 定在475nm处的吸光值(Abs) 〇
[0127] 计算对酪氨酸酶活性的抑制率：
[0128] 抑制率（％ ) = [ 1-(T-T0)/(C_C0) ] X 100%。
[0129] 式中：T-样品管Abs; TO-样品对照管Abs; C-阴性对照管Abs; CO-空白对照Abs。
[0130] 3、实验结果，如表5所示。
[0131]表5美洲大蠊活性成分提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用
[0133] 4 结论：
[0134] 美洲大蠊活性成分提取物具有抑制酪氨酸酶活性的作用，且这种抑制作用与浓度 呈依赖关系；在3.36mg/ml的浓度下对酪氨酸酶的抑制率高达97.38%，证实本发明美洲大 蠊活性成分提取物具有显著美白功效。
[0135] 应用例1:美洲大蠊活性成分提取物有效部位化妆品制备实例
[0136] (1)面霜的制备：
[0137] A、配方如表6所示：
[0138] 表6
[0141] B、制备步骤如下：取鲸蜡硬脂基葡糖苷、十六-十八醇、辛酸/癸酸三甘油酯、霍霍 巴油、棕榈酸异丙酯和甘油混合加热至80°C，作为A相，保温备用；取美洲大蠊活性成分提取 物，加入汉生胶、卡波940、透明质酸钠和去离子水，混合加热至80°C，分散均匀，作为B相，保 温备用；将A相在均质下慢慢加入到预先分散均匀并加热至80°C的B相中，加入环二甲基硅 油345均质3分钟，加入氢氧化钠调节pH = 6-7,搅拌冷却到50°C，加入香精，搅拌、冷却到35 °C即得。外观为白色，未嗅到美洲大蠊提取物的气味。
[0142] (2)乳液的制备：
[0143] A、配方如表7所示：
[0144] 表7
[0146] B、制备步骤如下：取纯环戊甲基硅氧烷KF995、凡士林、吐温-80、维生素 E醋酸酯和 甘油混合加热至80°C，作为A相，保温备用；取美洲大蠊活性成分提取物，加入汉生胶、 CarbopoIUltrez 10、1,3-丁二醇和去离子水混合加热至80°C，分散均勾，作为B相，保温备 用；将A相在均质下慢慢加入到预先分散均匀并加热至80°C的B相中，均质3分钟，加入三乙 醇胺调节pH=6-7，搅拌冷却到50°C，加入香精，搅拌、冷却到35°C即得。
[0147] (3)眼霜的制备：
[0148] A、配方如表8所示：
[0149] 表8
[0151 ] B、制备步骤如下:取美洲大蠊活性成分提取物的有效部位，加热至50°C，加入1，3-丁二醇、绿茶提取物、乙二胺四乙酸二钠和去离子水，分散均匀，搅拌直至清澈;在搅拌下缓 慢加入有机娃弹性体，作为A相，备用；取DC245、霍霍巴油、维生素 E醋酸酯、维生素 A棕榈酸 酯混合加热至80°C，作为B相，保温备用;将A相在均质下慢慢加入到预先分散均匀并加热至 80°C的B相中，均质3分钟，冷却到35°C即得。
[0152] (4)眼霜的制备：
[0153] A、配方如表9所示：
[0154] 表9
[0156] B、制备步骤如下:取美洲大蠊活性成分提取物，加热至80°C，加入聚丙烯酸、甘油、 1，3_ 丁二醇、岩藻聚糖硫酸酯、透明质酸钠，搅拌分散均匀，作为A相，备用;取去离子水加入 A相、分散均匀，加入三乙醇胺调节pH = 6-7,搅拌，冷却到50°C加入香精、甲基异噻唑琳酮， 搅拌、冷却到35°C即得。
[0157] 上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的 限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化， 均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种美洲大蠊活性成分提取物的制备方法，其特征在于包括如下步骤： (1) 提取浓缩液的制备:将干燥后的美洲大蠊粉碎，然后在美洲大蠊粉末中加入乙醇溶 液或水提取，将得到的提取溶液浓缩，得到提取浓缩液； (2) 有效部位粗提液的分离:在步骤（1)得到的提取浓缩液中加入水，冷却后于冷藏静 置至分层，油水分离，取水层，得到美洲大蠊的有效部位粗提液； (3) 有效部位的精制:在美洲大蠊的有效部位粗提液中加入有机溶剂进行萃取脱脂，取 水层;去除水层残留的有机溶剂后加入活性炭，加热至微沸，然后降到55~65°C，保温，冷却 后抽滤，取滤液，得到美洲大蠊活性成分提取物。2. 根据权利要求1所述的美洲大蠊活性成分提取物的制备方法，其特征在于： 步骤(1)中所述的乙醇溶液的浓度为体积百分比〇~80%，不含端点值0; 步骤(1)中所述的提取的方式为回流提取或是超声提取； 步骤(2)中所述的冷却为自然冷却至室温； 步骤(2)中所述的冷藏静置的温度为5~15°C; 步骤(3)中所述的有机溶剂为乙酸乙酯和石油醚中的一种或两种。3. 根据权利要求2所述的美洲大蠊活性成分提取物的制备方法，其特征在于： 所述的乙醇溶液的浓度为体积百分比50~70 % ; 所述的回流提取的温度为70~100°C; 所述的超声提取的条件如下:超声功率为100~500W，时间60分钟~120分钟。4. 根据权利要求3所述的美洲大蠊活性成分提取物的制备方法，其特征在于： 所述的乙醇溶液的浓度为体积百分比55~65 % ; 所述的回流提取的步骤如下：回流提取3次:第一次为在美洲大蠊粉末加入乙醇溶液， 乙醇溶液的加入量按lg美洲大蠊粉末配比12mL乙醇溶液计算，浸泡1小时后加热至沸腾，保 持微沸2小时，固液分离;第二次为分离得到的固体中加入乙醇溶液，乙醇溶液的加入量按 lg美洲大蠊粉末配比10mL乙醇溶液计算，加热至沸腾，保持微沸1.5小时，固液分离;第三次 为分离得到的固体中加入乙醇溶液，乙醇溶液的加入量按lg美洲大蠊粉末配比10mL乙醇溶 液计算，加热至沸腾，保持微沸1.5小时，固液分离;将三次回流提取后得到的液体合并，得 到提取溶液； 所述的超声提取的步骤如下：回流提取3次:第一次为在美洲大蠊粉末加入乙醇溶液， 乙醇溶液的加入量按lg美洲大蠊粉末配比12mL乙醇溶液计算，浸泡1小时后超声提取2小 时，固液分离;第二次为分离得到的固体中加入乙醇溶液，乙醇溶液的加入量按lg美洲大蠊 粉末配比10mL乙醇溶液计算，超声提取1.5小时，固液分离;第三次为分离得到的固体中加 入乙醇溶液，乙醇溶液的加入量按lg美洲大蠊粉末配比10mL乙醇溶液计算，超声提取1.5小 时，固液分离;将三次回流提取后得到的液体合并，得到提取溶液。5. 根据权利要求1所述的美洲大蠊活性成分提取物的制备方法，其特征在于： 步骤(1)中所述的浓缩的方式为减压浓缩； 步骤(2)中所述的水包括纯化水、蒸馏水和去离子水； 步骤(2)中所述的冷藏静置的时间为12小时以上； 步骤（3)中所述的有机溶剂的一次体积用量为相当于所述的有效部位粗提液体积的 0.2~1倍； 步骤(3)中所述的萃取脱脂的次数为1~2次； 步骤(3)中所述的萃取脱脂的操作步骤为:在美洲大蠊的有效部位粗提液中加入有机 溶剂，振摇1~5分钟，静置分层，分取水层； 步骤(3)中所述的去除水层残留的有机溶剂的步骤为：将水层加热至60~65°C保温30 ~60min; 步骤(3)中所述的活性炭的用量为按活性炭:有效部位粗提液=lg:42~58ml计算； 步骤(3)中所述的保温的时间为10~15分钟； 步骤(3)中所述的抽滤液的浓度为调整至0.5~1.5g生药/ml。6. -种美洲大蠊活性成分提取物，通过权利要求1~5任一项所述的制备方法得到。7. 权利要求6所述的美洲大蠊活性成分提取物在制备化妆品中的应用。8. 根据权利要求7所述的美洲大蠊活性成分提取物在制备化妆品中的应用，其特征在 于:所述的化妆品的形式包括水剂、水凝胶、泡沫凝胶、巴布剂、膜剂、外用搽剂、软膏剂、乳 化体系和表面活性剂体系。9.一种具有美容抗炎作用的化妆品，其特征在于:含有权利要求6所述的美洲大蠊活性 成分提取物和允许的药物赋形剂或载体。10. 根据权利要求9所述的具有美容抗炎作用的化妆品，其特征在于:所述允许的药物 赋形剂或载体选自：溶剂、增溶剂、防腐剂、抗氧剂、pH调节剂、促渗剂、脂质体、保湿剂、增稠 剂、螯合剂、肤感调节剂、表面活性剂、乳化剂、推进/抛射剂、香精、色素，以及其他功效添加 剂。
【专利摘要】本发明公开了一种美洲大蠊活性成分提取物在制备化妆品中的应用。该美洲大蠊活性成分提取物通过如下步骤制备得到：对美州大蠊进行净选、干燥、粉碎等预处理，然后经过提取、减压浓缩、水层分离、醋酸乙酯脱脂与不良气味、活性碳吸附脱致敏物及热原等步骤，获得主含多肽、氨基酸等活性成分的每ml含0.5～1.5g生药的有效部位滤液。该美州大蠊活性成分提取物有效部位具有抗炎、消肿、促进皮肤愈合、改善微循环、美白等天然保健功能，可以制备成水剂、水凝胶、乳化体系和表面活性剂体系，作为消疤、美白、抗皱、淡斑、保湿等功效的美容护肤用品。
【IPC分类】A61K8/98, A61P17/00, A61Q19/00, A61P17/10, A61P17/02, A61Q19/02, A61Q19/08, A61P31/04, A61P31/10
【公开号】CN105434310
【申请号】CN201510991867
【发明人】蔡丙国, 傅国华, 李吉来, 刘少勇
【申请人】广州市娇兰化妆品有限公司
【公开日】2016年3月30日
【申请日】2015年12月22日