31.85(s),127.58(s),85.77(s),82.24(s),66.79(s),66.55(s),65.94(s),56.97 (s),54.25(s),52.72(s),52.54(s),51.71(s),45.61(s),40.48(s),38.38(s),38.16(s), 34.85(s),33.36(s),29.67(s),28.80(s),26.53(s),25.32(s),23.87(s),22.13(s),20.88 (s),20.38(s),19.82(s),18.51(s),17.93(s),14.89(s).
[0045] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for C4抽69化08:729.5054;found:729.5051。
[0047] 实施例4 Schiglautone A的0-(二径乙胺基）乙基衍生物的合成 [004引将化合物II(358mg，0.5mmol)溶于15mL乙腊，加入无水碳酸钟(0.345g，2.5mmol)， 舰化钟(0. 084g，0.5mmo 1)和二乙醇胺（1.0514g，1 Ommo 1)，混合物加热回流化。反应结束后 将反应液倒入冷水中，用二氯甲烧萃取=次，合并有机相，依次用水和饱和食盐水洗涂，无 水硫酸钢干燥，减压浓缩去除溶剂。产物用硅胶柱层析纯化(石油酸/丙酬100:1，v/v)，得到 Schiglautone A的0-(二径乙胺基）乙基衍生物的淡黄色固体(0.199g,52% )。
[0049] Ih 醒R(500MHz，DMS0-d6)Sl7.77(s，lH)，6.00(s，lH)，5.40(s，lH)，5.20(s，lH), 3.37(d，J=17.8Hz，4H)，3.28(s，W)，2.87(s，lH)，2.51(d，J = 6.5Hz，4H)，2.43(s，8H)， 2.24(s，2H)，2.06(d，J=12.7Hz，2H)，1.76-1.68(m，5H)，1.57(s，lH)，1.53-1.39(m，細）， 1.36(s，lH)，1.24(s，lH)，1.20-1.14(m，3H)，l.ll(s，lH)，0.94-0.82(m，10H)，0.80(s，3H)， 0.76(s，3H)，0.72(d J = 20.0Hz，3H).
[0050] "C NMR(125MHz，DMS0-d6)S211.39(s),208.98(s),169.80(s),160.73(s),143.02 (s),131.42(s),127.05(s),85.91(s),82.25(s),66.70(s),65.63(s),58.62(s),56.55 (s),56.61(s),53.30(s),52.45(s),51.52(s),45.29(s),40.06(s),38.52(s),38.17(s), 34.73(s),33.17(s),29.35(s),28.38(s),26.34(s),25.00(s),23.45(s),22.05(s),20.67 (s)，20.07(s)，19.31(s)，18.41(s)，17.73(s)，14.59(s).
[0051] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for C42出3N2〇io:765.5265;found:765.5261。
S油igla山one A的0-(二超乙胺基)己基巧生物 [0化3] 实施例5 Schiglautone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物（IV)的合成 [0054] 将实施例4所获得的Schiglautone A的0-(二径乙胺基）乙基衍生物（382mg， 0.5mmol)溶于8mL氯仿，逐滴加入氯化亚讽(0.238g，2mmol)，反应物加热回流化。将反应物 冷却至室溫，滴加甲醇分解过量的氯化亚讽，减压浓缩除去溶剂。产物经硅胶柱层析纯化 (石油酸/丙酬l〇〇:l，v/v)，得到化合物IV的淡黄色胶状固体(0.297g，71%)。
[0055] Ih 醒R(500MHz，DMS0-d6)Sl3.87(s，lH)，6.01(s，lH)，5.50(d，J = 8.4Hz，2H)， 3.61(s，4H)，3.55(s，4H)，3.45(s，2H)，3.40(s，2H)，2.98(s，lH)，2.73(d J=17.4Hz，4H), 2.67-2.57(m,6H),2.54(s,2H),2.40(s,lH),2.10(s,lH),1.99(s,2H),1.78(s,lH),1.73 (d，J=16.9Hz，4H)，1.58(d，J = 3.0Hz，2H)，1.46(d，J = 3.0Hz，2H)，1.43(s，lH)，1.37(s， lH)，1.22(s，lH)，1.17(dd，J=18.9，ll.lHz，4H)，0.95-0.83(m，10H)，0.80(d J = 20.0Hz, 3H)，0.78(d J = 20.0Hz，3H)，0.73(d J = 20.0Hz，3H).
[0056] "C NMR(125MHz，DMS0-d6)S211.19(s),208.87(s),169.79(s),160.85(s),143.24 (s)，131.74(s)，127.50(s)，85.69(s)，82.13(s)，66.71(s)，65.84(s)，56.87(s)，55.80 (s),53.19(s),52.44(s),51.64(s),45.51(s),40.38(s),39.22(s),38.30(s),38.05(s), 34.77(s),33.28(s),29.56(s),28.72(s),26.45(s),25.21(s),23.79(s),22.05(s),20.77 (s)，20.30(s)，19.76(s)，18.41(s)，17.85(s)，14.81(s).
[0057] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for C4抽69Ci4N2〇6:839.3880;found:839.3881。
[0059] 实施例6组合物抗红细胞低下性贫血实验
[0060] 实验1组合物对失血小鼠的治疗作用
[0061 ] ICR小鼠30只，罕方各半，均分成5组(n = 10)。除生理盐水组外，其它组每只小鼠从 眼眶静脉放血0.5ml，2地后再取血测全部各组指标，然后连续灌胃给药1周且给药之后每天 放血0.5ml，末次给药化后，从眼眶静脉丛取血用F-800全血小板分析仪进行红细胞计数 (10口/1)。
[0062] 组合物的制备:将研磨之后过200目网的5mg化合物III的粉末和研磨之后过200目 网的95mg化合物IV的粉末装入带盖的小管中并用满轮揽拌仪混合即得到IOOmg组合物，使 用时用水溶解运1 OOmg的组合物即得到组合物的溶液。
[0063] 表1组合物对因失血所致红细胞减少的治疗作用
[00化]与模型组比较:卸<0.05
[0066] 结果表明，放血小鼠经服用组合物治疗7天后，与模型组比较，其红细胞显著高于 模型组，接近生理盐水组。而化合物HI和化合物IV无此作用。
[0067] 二、组合物对环憐酷胺致红细胞减少的治疗作用
[006引对小鼠骨髓造血功能损伤的防治作用ICR小鼠50只，罕(:^用，均分成5组(n=10)， 即生理盐水组、造模组、组合物1.2mg/kg组、化合物III 1.2mg/kg组和化合物IV 1.2mg/kg 组，口服给药，每天1次。第0、5、10日除生理盐水组外，其它各组小鼠分别腹腔注射环憐酸胺 80mg/kg，然后继续给药3天。于末次给药后化，从眼眶静脉丛取血，测红细胞数(l0i^L)。 [0069]表2组合物对环憐酷胺所致红细胞的影响
[0070]
[0071] 与模型组比较:**p<0.01
[0072] 结果表明，与生理盐水组比较，环憐酸胺能使小鼠骨髓损伤，造成外周血细胞下 降，组合物组与模型组比较，可明显对抗环憐酸胺所致小鼠红细胞下降。而化合物III和化 合物IV无此作用。
[0073] =、组合物对苯所致红细胞减少的治疗作用
[0074] 对再生障碍性贫血小鼠的影响：昆明种小鼠50只，罕嫌用，均分成5组(n = 10)，除 生理盐水组外，其它组小鼠皮下注射苯〇.5ml/kg，连续12天，造模的当日，同时口服给药，每 天1次，共18天，末次给药后化，眼眶静脉丛取血，测红细胞。
[0075] 表3组合物对苯所致红细胞减少的治疗作用
[0077] 与模型组比较:**p<0.01
[0078] 结果表明，组合物组与模型组比较，可明显对抗苯所致再生障碍性贫血小鼠红细 胞的下降。而化合物HI和化合物IV无此作用。
[0079] 结论:组合物能够显著升高红细胞，可W用来制备治疗贫血的药物。而化合物III 和化合物IV不能够显著升高红细胞，不能用来制备治疗贫血的药物。
[0080] 实施例7本发明所设及组合物片剂的制备
[0081] 取2克组合物，加入制备片剂的常规辅料18克，混匀，常规压片机制成100片。
[0082] 实施例8本发明所设及组合物胶囊的制备
[0083] 取2克组合物，加入制备胶囊剂的常规辅料如淀粉18克，混匀，装胶囊制成100粒。
【主权项】
1. 一种组合物，其特征为该组合物由化合物HI和化合物IV组成，该组合物中化合物 III和化合物IV的质量百分数分别为5%和95%，2. 如权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征为:将化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照质量百分数分别为5%和95%充分混合。3. -种如权利要求1所述的组合物在治疗红细胞低下性贫血药物中的应用。4. 如权利要求3所述的组合物在治疗红细胞低下性贫血药物中的应用，其特征为:所述 红细胞低下性贫血是由失血所引起的。5. 如权利要求3所述的组合物在治疗红细胞低下性贫血药物中的应用，其特征为:所述 红细胞低下性贫血是由化学物质所引起的红细胞低下。6. 如权利要求5所述的组合物在治疗红细胞低下性贫血药物中的应用，其特征为:所述 化学物质为苯，所述红细胞低下性贫血是由苯所致的再生障碍性贫血。7.如权利要求5所述的组合物在治疗红细胞低下性贫血药物中的应用，其特征为:所述 化学物质为环憐酸胺，所述红细胞低下性贫血是由环憐酸胺所致红细胞下降。
【专利摘要】本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及组合物、制备方法及其在制备抗红细胞低下性贫血药物上的用途。本发明公开了一种组合物及其制备方法。药理学实验表明，本发明的组合物具有抗红细胞低下性贫血的作用，具有开发抗红细胞低下性贫血药物的价值。
【IPC分类】A61K31/201, A61P7/06, A61K31/5377
【公开号】CN105497038
【申请号】CN201511010016
【发明人】吴俊华, 周未末
【申请人】南京大学
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2015年12月29日