板蓝根提取物中核苷类成分的纯化工艺的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及板蓝根中核苷类成分的纯化领域，具体为一种板蓝根提取物中核苷类成分的纯化工艺。
【背景技术】
[0002]板蓝根为我国使用历史悠久的传统中药，又名靛青根、蓝靛根、靛根，为清热解毒之常用中药，始载于《神农本草经》，味苦，性寒，有清热解毒，凉血利咽功能。用于温毒发斑、舌绛紫暗、痄腮、烂喉丹痧、大头瘟疫、丹毒、痈肿等症。目前所用的板蓝根分为2种:一种为十字花科植物蒋蓝Isatis indigoticaFort.的根，全国多数地区，特别北方地区广泛使用，习称“北板蓝”。另一种为爵床科植物马蓝Strobilanthes cusia (Nees) 0.Ktze.的根，华南地区及西南大部分地区习惯应用，习称“南板蓝”。两者在中医临床上均有应用，中国药典2005版一部规定十字花植物蒋蓝Isatis indigoticaFort.的干燥根是板蓝根的主要来源。
[0003]板蓝根制剂在临床上常用于病毒性疾病及细菌感染疾病的防治，尤其在抗病毒方面疗效确切。众多文献报道板蓝根对于病毒引起的流感、乙型肝炎、单纯疱疹、病毒性心肌炎、肾病综合征、出血热、腮腺炎等多种疾病均有较好的治疗或预防作用，是公认的有较好抗病毒效果的少数中药之一。板蓝根中主要含有吲哚类、有机酸类、氨基酸类、核苷类等成分，核苷类成分为板蓝根抗病毒作用的有效部位之一。有关核苷类成分的提取纯化报道较少，本实验以核苷为对照品测定总核苷的含量，通过研究考察多种类型的大孔吸附树脂对板蓝根总核苷的吸附性能、洗脱参数等因素，对采用HPD450型大孔树脂纯化板蓝根总核苷类成分的工艺进行了研究。
【发明内容】
[0004]本发明针对以上不足之处，提供了一种板蓝根提取物中核苷类成分的纯化工艺，
工艺简单，产率高，易实行。
[0005]本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:一种板蓝根提取物中核苷类成分的纯化工艺，(I)板蓝根提取液的制备称取板蓝根药材500 g,加水煎煮2次，第I次加10倍量的水(m/v)，加热至沸腾后，保持沸腾2 h，滤过；第2次加8倍量的水，加热至沸腾后，保持沸腾I h,滤过，合并2次煎煮液，滤过，滤液浓缩至约750 mL,冷却，加乙醇使含醇量达到70%,搅匀，冷藏24 h,滤过，回收乙醇至500 mL,滤过，冷藏，得到含Ig.mL-Ι原药材的板蓝根水提醇沉溶液。
[0006](2)板蓝根液核苷类成分的纯化采用大孔树脂纯化法，将上一步得到的板蓝根提取液通过与生药材等量的732阳离子树脂柱的滤出液以及去离子水洗脱溶液合并，得到HPD450大孔树脂的上样溶液，洗脱溶剂选用50%乙醇，洗脱溶剂的体积为柱体积的5倍，上样溶液的PH为2，树脂柱的径高比为1: 7，上样流速选择1.5 BV.h-1。
[0007]本发明的有益效果是:采用大孔树脂分离纯化工艺中，除树脂种类外，洗脱溶剂、样品溶液的PH值、柱径高比、上样速度等均对纯化效果产生影响，本发明对上述因素均进行了实验考察，并根据考察结果确定了采用HPD450型大孔树脂纯化板蓝根溶液中核苷类成分的工艺，经对纯化工艺进行验证和精制度测定，表明采用确定的纯化工艺可获得纯度大于50%的纯化产物，并具有良好的精制度，达到了实验预期的目的。
【具体实施方式】
[0008]实施例1 一种板蓝根提取物中核苷类成分的纯化工艺，包含有如下步骤:
(I)板蓝根提取液的制备称取板蓝根药材500 g,加水煎煮2次，第I次加10倍量的水(m/v)，加热至沸腾后，保持沸腾2 h，滤过；第2次加8倍量的水，加热至沸腾后，保持沸腾I h,滤过，合并2次煎煮液，滤过，滤液浓缩至约750 mL,冷却，加乙醇使含醇量达到70%,搅勻，冷藏24 h,滤过，回收乙醇至500 mL,滤过，冷藏，得到含I g.ιΛ_1原药材的板蓝根水提醇沉溶液。
[0009](2)板蓝根液核苷类成分的纯化采用大孔树脂纯化法，将上一步得到的板蓝根提取液通过与生药材等量的732阳离子树脂柱的滤出液以及去离子水洗脱溶液合并，得到HPD450大孔树脂的上样溶液，洗脱溶剂选用50%乙醇，洗脱溶剂的体积为柱体积的5倍，上样溶液的PH为2，树脂柱的径高比为1: 7，上样流速选择1.5 BV.h-1。
【主权项】
1.一种板蓝根提取物中核苷类成分的纯化工艺，其特征在于:包含有如下步骤: A、板蓝根提取液的制备称取板蓝根药材500 g,加水煎煮2次，第I次加10倍量的水(m/v)，加热至沸腾后，保持沸腾2 h，滤过；第2次加8倍量的水，加热至沸腾后，保持沸腾I h,滤过，合并2次煎煮液，滤过，滤液浓缩至约750 mL,冷却，加乙醇使含醇量达到70%,搅勻，冷藏24 h,滤过，回收乙醇至500 mL,滤过，冷藏，得到含I g *mL-l原药材的板蓝根水提醇沉溶液。2.B、板蓝根液核苷类成分的纯化采用大孔树脂纯化法，将上一步得到的板蓝根提取液通过与生药材等量的732阳离子树脂柱的滤出液以及去离子水洗脱溶液合并，得到HPD450大孔树脂的上样溶液，洗脱溶剂选用50%乙醇，洗脱溶剂的体积为柱体积的5倍，上样溶液的PH为2，树脂柱的径高比为1: 7，上样流速选择1.5 BV.h-1。
【专利摘要】本发明公开了一种板蓝根提取物中核苷类成分的纯化工艺，包含有如下步骤：A、板蓝根提取液的制备称取板蓝根药材500g,加水煎煮2次,第1次加10倍量的水(m/v),加热至沸腾后,保持沸腾2h,滤过;第2次加8倍量的水,加热至沸腾后,保持沸腾1h,滤过,合并2次煎煮液,滤过,滤液浓缩至约750mL,冷却,加乙醇使含醇量达到70%,搅匀,冷藏24h,滤过,回收乙醇至500mL,滤过,冷藏,得到含1g·mL-1原药材的板蓝根水提醇沉溶液。B、板蓝根液核苷类成分的纯化采用大孔树脂纯化法，将上一步得到的板蓝根提取液通过与生药材等量的732阳离子树脂柱的滤出液以及去离子水洗脱溶液合并,得到HPD450大孔树脂的上样溶液，洗脱溶剂选用50%乙醇,洗脱溶剂的体积为柱体积的5倍，上样溶液的pH为2，树脂柱的径高比为1∶7,上样流速选择1.5BV·h-1。本发明工艺简单，产率高，易实行。
【IPC分类】A61K36/195, A61K125/00, A61K36/315
【公开号】CN105616464
【申请号】CN201410673779
【发明人】雷印平
【申请人】雷印平
【公开日】2016年6月1日
【申请日】2014年11月24日