香菇中多糖类物质的提取纯化方法
【技术领域】
[0001]本发明属于食品加工技术领域，具体涉及一种香菇中多糖类物质的提取纯化方法。
【背景技术】
[0002]香菇已经公认为是一种珍贵的食药两用的资源。香菇多糖具有较强的药用价值，能调节并恢复人体的免疫功能，具有一定的抗癌作用。香菇多糖以β_1，3葡聚糖为主，含有少量的木糖和甘露糖，具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能。香菇多糖的副作用轻微，对正常细胞无杀伤作用，这是它优于细胞毒抗癌药的特点之一。而且香菇多糖能有效拮抗化疗药物的毒副反应。
[0003]以香菇为原料可开发各种保健食品、饮品、调味品和药品，关于香菇多糖提取工艺的研究有很多传统工艺，如热水浸提法、稀酸浸提法、稀碱浸提法等，还有新兴工艺超声辅助法、微波辅助法、酶法、超滤法等，但均存在多糖提取率较低的缺陷。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种香菇中多糖类物质的提取纯化方法，有效提高香菇中多糖类物质的提取率。
[0005]本发明所采用的技术方案是:
香菇中多糖类物质的提取纯化方法，其特征在于:
由以下步骤实现:
干燥粉碎一高温浸提一超声波提取一离心浓缩一反复冻融离心过滤一醇沉一离心干燥。
[0006]所述干燥粉碎的步骤为:
新鲜香菇清洗除杂后，将菇盖与菇柄分开并进行剪切，之后置于80°C恒温干燥箱中烘干8 h，取出放入粉碎机中粉碎得到香菇粉。
[0007]所述高温浸提的步骤为:
取香菇粉按料液比(m/v)1: (20-40)的比例加入纯净水，搅拌均匀后置于容器中，密封放入高压灭菌锅中在115-125°C下保温，0.5-2h后取出。
[0008]所述超声波提取的步骤为:
高温浸提结束后，在超声功率550W、温度75-100°C条件下超声处理0.5_2h进行提取。
[0009]所述离心浓缩的步骤为:
超声波提取结束后，在3500r/min转速下离心15min，去除沉淀，收集上清液；将收集的上清液在温度100°C条件下加热浓缩至原料液体积的五分之一，得到香菇多糖水溶液。
[0010]所述反复冻融离心过滤的步骤为:
将香菇多糖水溶液在-80°C冰箱中冷冻40min，拿出后在40°C水浴加热溶解，在3500r/min转速下离心30min后过滤，反复四次冻融离心过滤除去蛋白。
[0011]所述醇沉的步骤为:
在除去蛋白的香菇多糖水溶液中加入四倍体积乙醇溶液，质量分数为95%，冰箱冷藏室中2-6 °C下静置过夜。
[0012]所述离心干燥的步骤为:
将醇沉后的香菇多糖水溶液在3500r/min转速下离心20min除去上清液收集沉淀，对沉淀进行干燥制得香菇多糖。
[0013]本发明具有以下优点:
本发明采用超高温结合超声的工艺流程对香菇多糖进行提取。①通过超声的空化作用和振荡作用，使粒子的运动速度增大，香菇多糖的溶出率增加，比一般传统的热水浸提法提取率大，超声时间的延长会使香菇细胞破碎充分，多糖溶出彻底，从而提高了香菇子实体多糖得率。②超高温高压使细胞膜受损，细胞的通透性增强，分子的扩散速度增大，同时，高温环境会使部分蛋白质变质，使香菇多糖溶液中的蛋白质含量减少。将高温与超声结合提取香菇多糖，高温使细胞膜受损，细胞通透性增强，分子扩散速度增大，再经过超声的空化作用和振荡使细胞中粒子的运动速度更加快速，通过物理作用，使细胞中的多糖分子更易穿过细胞膜，使香菇多糖的溶出率大大增加。
[0014]采用本发明技术方案中“超高温”的提取过程，香菇多糖提取量已经可以达到常规超声提取方法(如100°C条件结合超声波提取香菇多糖的方法)的1.9倍，而采用本发明技术方案的完整技术方案一一 “超高温结合超声”的提取过程，能将香菇多糖提取量提高到常规超声提取方法(如100°C条件结合超声波提取香菇多糖的方法)的2.21倍，且提取时间大大缩短。
[0015]另外，本发明在醇沉之前通过反复冻融法除蛋白，将多糖溶液放置在冷冻箱中快速冷冻，然后迅速融化，如此反复冻融多次，破坏香菇中蛋白质的稳定，使其沉淀出来。常规方法往往是采用先浓缩、后醇沉提取多糖的方法，得到醇沉多糖以后还要对该多糖进行复溶解，然后再进行除蛋白操作，操作更麻烦。本发明在步骤设置上较该常规方法大大简化，也比传统的用化学试剂的方法更简单、安全、经济和环保，而且选择是在醇沉之前进行反复冻融，更利于后续香菇多糖，而且提取率纯度更高。
【具体实施方式】
[0016]下面结合【具体实施方式】对本发明进行详细的说明。
[0017]本发明涉及的香菇中多糖类物质的提取纯化方法，其具体工艺流程为干燥粉碎一高温浸提一超声波提取一离心浓缩一反复冻融离心过滤一醇沉一离心干燥。
[0018]具体为:
(I)干燥粉碎:
新鲜香菇清洗除杂后，将菇盖与菇柄分开并进行剪切，之后置于80°c恒温干燥箱中烘干8 h，取出放入粉碎机中粉碎得到香菇粉。
[0019](2)尚温浸提:
取香菇粉按料液比(m/v)1: (20-40)的比例加入纯净水，即将Ig香菇粉加入到20_40mL水中，搅拌均匀后置于容器中，密封放入高压灭菌锅中在115-125Γ下保温，0.5-2h后取出。
[0020](3)超声波提取:
高温浸提结束后，在超声功率550W、温度75-100°C条件下超声处理0.5_2h进行提取。
[0021](4)离心浓缩:
超声波提取结束后，在3500r/min转速下离心15min，去除沉淀，收集上清液；将收集的上清液在温度100°C条件下加热浓缩至原料液体积的五分之一，得到香菇多糖水溶液。
[0022](5)反复冻融离心过滤:
将香菇多糖水溶液在-80°C冰箱中冷冻40min，拿出后在40°C水浴加热溶解，在3500r/min转速下离心30min后过滤，反复四次冻融离心过滤除去蛋白。
[0023](6)醇沉:
在除去蛋白的香菇多糖水溶液中加入四倍体积乙醇溶液，质量分数为95%，冰箱冷藏室中2-6 °C下静置过夜。
[0024](7)离心干燥:
将醇沉后的香菇多糖水溶液在3500r/min转速下离心20min除去上清液收集沉淀，对沉淀进行干燥制得香菇多糖。
[0025]实施例1:
(I)干燥粉碎:
新鲜香菇清洗除杂后，将菇盖与菇柄分开并进行剪切，之后置于80°C恒温干燥箱中烘干8 h，取出放入粉碎机中粉碎得到香菇粉。
[0026](2)尚温浸提:
取香菇粉按料液比(m/v) 1:20的比例加入纯净水，搅拌均匀后置于容器中，密封放入高压灭菌锅中在125°C下保温，0.5h后取出。
[0027](3)超声波提取:
高温浸提结束后，在超声功率550W、温度100°C条件下超声处理0