鬼针草总黄酮的制药应用
【专利摘要】本发明提供鬼针草总黄酮在制备治疗动脉粥样硬化药物中的应用。此外，本发明还提供了一种药物组合物，包含有效量的鬼针草总黄酮和一种或多种药学上可接受的辅料。经实验证实，鬼针草总黄酮能明显降低血脂、提高血清NO含量、降低ET?1含量，并抑制斑块进展，因此可以有效治疗动脉粥样硬化。
【专利说明】
鬼针草总黄酮的制药应用
技术领域
[0001] 本发明涉及心内科治疗领域，具体涉及鬼针草总黄酮在制备治疗动脉粥样硬化药 物中的应用。
【背景技术】
[0002] 鬼针草，又名鬼骨草、一包针、刺针草、婆婆草、盲肠草等，为菊科(Compos i tae)管 状花亚科鬼针草属(BidensL.)植物，一年生草本，其药材资源非常丰富，主要分布于我国东 北、河北、山东、山西、河南、江苏、云南、四川、两广等地，生于水边、河岸、湿地、荒地及山坡 等处，极易米集。
[0003] 鬼针草所含化学成分种类较多，文献报道曾从该植物中分离得到挥发油类、甾醇、 查耳酮、橙酮、聚乙炔类等，其活性成分以聚乙炔类和黄酮类成分为主。已分离出多种聚乙 炔类成分。乙醇提取物的正丁醇部分鉴定出4个黄酮成分，为金丝桃戒(hyperoside)、奥卡 宁(okanin)、异奥卡宁-7-0-葡萄糖戒和海生菊戒(maritimein)。鬼针草各部位中黄酮类成 分有较大差异，在花果期，叶和花序中总黄酮含量较高(分别为6.67 %和6.68 % )，茎枝中含 量较低(0.89%)。叶中分离鉴定了 21种挥发性成分，主要为脂肪烷和脂肪酸类，另外含少量 的醛、酮烯、腈、胺及呋喃类成分;其中脂肪类化合物占相当比例。分离出的4种酚酸类成分， 经理化测试及光谱分析，分别鉴定为水杨酸、原儿茶酸、没食子酸、脂肪酸类化合物。还有甾 体类化合物如菠留醇、胡萝卜苷，谷留醇、豆留醇-3-〇-i3_D-葡萄糖苷。鬼针草含有丰富的氨 基酸，如天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、酪氨酸、赖 氨酸等17种氨基酸，其中8种为人体必需氨基酸，总蛋白质157.89g/kg，总游离氨基酸含量 达139.89g/kg，必需氨基酸总量57.09g/kg。鬼针草所含氨基酸与传统名贵药材亚香棒虫 草、冬虫夏草相比，在种类上多了胱氨酸，在含量上脯氨酸、谷氨酸高于两者，其他氨基酸含 量相当。另外鬼针草中还含有11种人体必需微量元素，测定结果表明，Mg含量最高，P、Fe、Ca 含量较高，Cu、Zn次之，1111、(：〇、附、1〇、(>含量最低，鬼针草中含有丰富的？，是其调节神经、催 眠、镇静等作用的内在原因。维生素在鬼针草中也有分布，如维生素出、维生素 Β2、β-胡萝卜 素。
[0004] 鬼针草药用历史悠久，在民间验方中有小人参之称。其生物活性多样，且作用温和 持久，具有较高的药用价值，对消化系统、中枢神经系统及心血管系统显示较强的药理作 用。近年来对鬼针草药材进行了一些开发和利用，目前国内的鬼针草产品有悦年片、鬼针草 口服液、鬼针草保健冲剂等，但也仅限于防治高血压等疾病，还未见对鬼针草总黄酮在动脉 粥样硬化方面的报道。专利ZL200510097338.4中记载了鬼针草总黄酮的制备方法，在此将 其全文引入本发明中。
[0005] 冠状动脉硬化是极为常见的一种心脑血管疾病，动脉粥样硬化是动脉硬化的血管 病中常见的最重要的一种，其特点是受累动脉病变从内膜开始。一般先有脂质和复合糖类 积聚、出血及血栓形成，纤维组织增生及钙质沉着，并有动脉中层的逐渐蜕变和钙化，病变 常累及弹性及大中等肌性动脉，一旦发展到足以阻塞动脉腔，则该动脉所供应的组织或器 官将缺血或坏死。由于在动脉内膜积聚的脂质外观呈黄色粥样，因此称为动脉粥样硬化。
[0006] 动脉粥样硬化是动脉硬化的一种，大、中动脉内膜出现含胆固醇、类脂肪等的黄色 物质，多由脂肪代谢紊乱，神经血管功能失调引起。常导致血栓形成、供血障碍等。也叫粥样 硬化。
[0007] 动脉粥样硬化的症状主要决定于血管病变及受累器官的缺血程度，主动脉粥样硬 化常无症状，冠状动脉粥样硬化者，若管径狭窄达75%以上，则可发生心绞痛、心肌梗塞、心 律失常，甚至猝死。脑动脉硬化可引起脑缺血、脑萎缩，或造成脑血管破裂出血，肾动脉粥样 硬化常引起夜尿、顽固性高血压、严重者可有肾功能不全。肠系膜动脉粥样硬化可表现为饱 餐后腹痛便血等症状。下肢动脉粥样硬化引起血管腔严重狭窄者可出现间歇性跛行、足背 动脉搏动消失，严重者甚至可发生坏疽。
[0008]
【申请人】在医疗实践中，发现鬼针草总黄酮对于动脉粥样硬化具有显著的治疗效 果，从而完成了本发明。
【发明内容】
[0009] 在本发明的第一个方面，在于提供鬼针草总黄酮在制备治疗动脉粥样硬化药物中 的应用。
[0010] 本发明还提供了一种治疗动脉粥样硬化的药物组合物，包含有效量的鬼针草总黄 酮和一种或多种药学上可接受的辅料，所述药物组合物含有重量比为1~99%的鬼针草总 黄酮。
[0011] 所述药物组合物还可以包含其他治疗动脉粥样硬化的活性成分，包括中药和西药 组分。
[0012] 优选的，所述药物组合物含有重量比为10~60%的鬼针草总黄酮。
[0013] 本发明的鬼针草总黄酮的制备方法可以采用现有技术中的任意方法，例如专利 ZL200510097338.4中所述的方法。
[0014] 本发明的应用中，所述鬼针草总黄酮制剂剂型为胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂或口 服液制剂中的一种，为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料， 例如:填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂等，填充剂包括:淀 粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等，崩解剂包括:淀粉、预胶化淀 粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维 素钠等，润滑剂包括:硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等，助悬剂包括:聚乙烯 吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等，粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯 烷酮、轻丙基甲基纤维素等，甜味剂包括:糖精钠、阿斯帕坦、鹿糖、甜蜜素、甘草次酸等，矫 味剂包括:甜味剂及各种香精，防腐剂包括:尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、 苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等。所述鬼针草总黄酮也可以制备为胃肠外给药的剂型，包 括注射液、冻干粉针剂、输液剂等。本领域技术人员熟知这些制剂的制备方法。
[0015] 本发明所述药物的使用剂量和使用方法取决于诸多因素，包括患者的年龄、体重、 性别、自然健康状况、营养状况、化合物的活性强度、服用时间、代谢速率、病程严重程度以 及诊治医师的主观判断。本领域的技术人员根据上述因素可以容易地决定使用剂量和使用 方法。本发明的活性成分鬼针草总黄酮制成各种剂型的口服药物，成人口服，常用剂量一次 Ο·l_50mg/kg。
【具体实施方式】
[0016]下述实施例用于举例说明本发明鬼针草总黄酮的应用，但其不能对本发明的范围 构成任何限制。
[0017] 试验例 [0018] 1、材料
[0019]动物:健康新西兰兔，体重2.0-2.5kg，雌雄各半，5月龄，由山东医科大学实验动物 中心提供。
[0020] 药物与试剂:鬼针草总黄酮。辛伐他汀片，广州南新制药有限公司。甘油三酯(TG) 测定试剂盒、总胆固醇(TC)测定试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固 醇(LDL-C)测定试剂盒、N0测定试剂盒，南京建成生物工程研究所;ET-1测定试剂盒，北京东 亚免疫技术研究所。
[0021] 仪器：LX20自动生化分析仪；酶标仪，日本BI0-R0D550 ;石蜡切片机，德国莱卡 LD2150。
[0022] 2、方法
[0023] 家兔动脉粥样硬化模型的建立:取健康新西兰兔，雌雄各半，颗粒饲料平衡喂养1 周后，随机取10只作为正常对照组，用普通饲料喂养，其余为高脂造模组，给予高脂饲料喂 养(按1 %胆固醇、5 %猪油、10 %蛋黄粉、84 %普通饲料比例制作），各组每兔每天进食总量 相等，限制为150g，自由饮水。12周后高脂造模组取2只实验家兔处死，光镜下观察主动脉内 膜明显增厚，伴有大量泡沫细胞，内皮细胞排列紊乱、不连续，大量平滑肌细胞迀移内膜，视 为造模成功。
[0024] 动物分组及给药:将高脂造模组家兔随机分组，每组10只：模型组、鬼针草总黄酮 高剂量组、中剂量组、低剂量组、阳性对照组。除正常对照组仍然喂养普通饲料外，其余各组 喂养上述高脂饲料。鬼针草总黄酮组分别灌胃给予〇. 5，2，8g/Kg;辛伐他汀组灌胃给予给予 辛伐他汀2.5mg/Kg;其余组给予相应量生理盐水。所有动物自由饮水，每天给药1次给药共8 周。所有动物在给药8周后空腹抽取耳静脉血5mL，供检测各组家兔血清TC、TG、LDL、HDL、N0、 ET-1使用；抽血结束后以空气栓塞法处死所有实验动物，无菌取出主动脉根部至主动脉穿 膈肌处动脉段作为标本，清除外膜附着组织，沿动脉长轴剪开，取斑块最显著部位动脉段 1 c m，置于10 %福尔马林溶液中浸泡固定后修剪成约1 c m X 0.15 c m X 0.15 c m的组织块，用于 病理组织学观察。
[0025] 检测指标及测定方法:采用酶法测定血清TC、TG、LDL、HDL水平;N0测定采用硝酸还 原酶法;ET-1采用放射免疫分析法。测量斑块面积:病理组织块经切片机按4μπι的厚度切割， 采用HE染色制作病理切片，计算斑块面积占整条主动脉面积的百分比。
[0026] 按以下规定进行病变分级:①0级:无病变;②I级：病变占1-25%;③II级：病变占 26-50 %;④III级:病变占51-75 %;⑤IV级:病变占76-100 %。记分方法:①0级:计0分;②I 级:计1分;③Π 级:计2分;d)II I级:计3分;⑤IV级:计4分。
[0027] 3、数据处理计量资料以qx±s表示。试验数据进行组间t检验。
[0028] 4、结果
[0029] 4.1对动脉粥样硬化模型兔血脂的影响
[0030] 试验结果见表1，结果表明，与空白组相比，模型组的TC、TG、LDL明显升高（P< 0.01)、HDL明显降低(P <0.01)，表明造模成功。与模型组相比，阳性对照组、鬼针草总黄酮 各剂量组能显著降低动脉粥样硬化模型兔血中TC、TG、LDL水平(P<0.05、0.01);升高动脉 粥样硬化模型兔血中HDL水平(P<0.05、0.01)。
[0031] 表1鬼针草总黄酮对动脉粥样硬化模型兔血脂的影响（?κ土 S，-n = l〇)
[0032]
[0033] ~与模型组比较:，<0.05，呷<0.01(下表同)' ' '
[0034] 4.2对动脉粥样硬化模型兔MKET-1的影响
[0035] 试验结果见表2,结果表明，与模型组相比，阳性对照组、鬼针草总黄酮各剂量组能 显著降低动脉粥样硬化模型兔血中ET-1水平，提高N0水平，且均具有显著性意义(P<0.05、 0·01)〇
[0036] 表2鬼针草总黄酮对动脉粥样硬化模型兔NO、ET-1的影响（qx± S，η = 1 〇)
[0037]
[0038] 4.3对动脉粥样硬化模型兔动脉斑块的影响
[0039] 试验结果见表3,结果表明，与模型组相比，阳性对照组、鬼针草总黄酮各剂量组能 显著降低动脉粥样硬化模型兔斑块面积(P<0.05、0.01)。
[0040] 表3鬼针草总黄酮对动脉粥样硬化模型兔动脉斑块的影响(qx±S，n = l〇)
[0041]
[0042]综上所述，鬼针草总黄酮能明显降低血脂、提高血清NO含量、降低ET-1含量，并抑 制斑块进展，因此可以有效治疗动脉粥样硬化。
【主权项】
1. 鬼针草总黄酮在制备治疗动脉粥样硬化药物中的应用。2. -种治疗动脉粥样硬化的药物组合物，包含有效量的鬼针草总黄酮和一种或多种药 学上可接受的辅料。3. 权利要求2的药物组合物，其中所述药物组合物含有重量比为1~99%的鬼针草总黄 酮。4. 权利要求2-3的药物组合物，所述药物组合物含有重量比为10~60%的鬼针草总黄 酮。5. 权利要求2-4的药物组合物，所述药物组合物还可以包含其他治疗动脉粥样硬化的 活性成分，包括中药和西药组分。6. 权利要求1的应用或者权利要求2-5的药物组合物，其中鬼针草总黄酮可以为胶囊 剂、片剂、颗粒剂、散剂或口服液制剂中的一种。
【文档编号】A61K36/28GK105935371SQ201610397854
【公开日】2016年9月14日
【申请日】2016年6月8日
【发明人】常方圆
【申请人】常方圆