专利名称：合成肽组合物及其生产方法
技术领域：
本发明涉及其适用于人和动物的含有合成肽组合物的制剂，以及涉及它们的生产方法。
背景技术：
从科学和医学研究中发现，低分子的蛋白能够以调节的方式干预生物的合成过程。这可能增进组织的功能或内分泌系统的功能。这些低分子蛋白也被称为信号肽，同样在神经水平上起神经递质的作用，或在免疫水平上起分化因子的作用。它们存在于所有的组织中。因此，例如，多肽作为白细胞间素和粒细胞巨噬细胞集落稳定因子以同样的方式调节早期T细胞在胸腺上皮的分化。这种多肽和其他多肽的合成复制以及它们在制剂中的用途使得它们有可能对获得性免疫缺陷综合症、感染、过敏、自主免疫性疾病、神经内分泌疾病(如丝状长骨体生长部类癌)有应答，同时也有可能对在化疗或放射治疗后免疫恢复效果有应答。
例如，WO98/53845揭示了一种统计上的合成胸腺肽组合物及其用作一种活性免疫和/或内分泌制剂，其中，合成胸腺肽对应于牛胸腺，而其胸腺肽组合物供活性免疫和/或内分泌制剂中应用。合成胸腺肽组合物在制剂中的应用使得人淋巴细胞增殖随剂量而增加。结果，这种制剂可作为治疗免疫衰弱，免疫缺陷性疾病以及激素紊乱性疾病的药物。而且，这种制剂还可作为构建皮肤，毛发，指甲的一种物质，并用作化妆品和食物补充品。在这种情况下，合成胸腺肽来源于肽的新合成。
众所周知，已知的合成胸腺肽及其组合物有如下不足它们对应于牛胸腺的肽以及肽组合物，另外，只有胸腺这种器官可作为肽及其组合物的制备模板。因此，合成胸腺肽及其组合物在制剂中的用途仅限于所述的激素作用和产物的协同内分泌作用。在这点上，用这种制剂治疗人的器官中或人体内个别组织中的各基因、细胞或组织缺陷是不可能的。因此，不可能用对胸腺组织有效的信号肽来治疗心、肝、肺或其他器官因基因、细胞或组织缺陷而造成的功能紊乱。同样，次级淋巴组织如淋巴结、派尔班、肠联合淋巴组织、和脾脏的功能性紊乱也完全不能治疗。而在对人体的有效治疗上还有一个问题，即从牛胸腺分离出的肽与人胸腺肽不同，因此在某些情况下病人会对动物蛋白产生耐受不良反应。
发明内容
本发明的一个目的在于提高和进一步研制前述类型制剂，其含有合成肽组合物，除了治疗激素和内分泌紊乱之外，也可以用于其他医学领域的治疗，如治疗基因、细胞和组织缺陷。本发明的另一目的在于，基于这种肽的组合物研制一些对人类有改进的特异性效力的产品。同样，本发明的再一目的在于，提供一种具有相应性能的相应制剂的制备方法。
具体实施例方式
根据权利要求1所述的物质，含有本发明的合成肽组合物制剂可以实现上述的目的。因此，一种含有合成肽组合物的制剂的特征在于所述的肽组合物来源于人体组织的部份水解，而部份水解产物可以通过特殊的酶组合物得到。
根据本发明，业已发现，可以借助于在一定的试验条件下可催化水解特殊的酶组合物通过人体组织的部份水解所得到的合成肽组合物。这些合成肽组合物可以用作激素和内分泌紊乱以及组织功能不良的治疗药物。另外，还发现，用人体组织的合成肽则可以提高制剂的效力，能有效地避免对动物蛋白质的耐受不良反应和排斥反应。
具体地说，本发明提供的合成肽组合物可以通过特殊的酶组合物得到。特殊的酶组合物这样选择以至于组织中特殊的、短链蛋白质可部份水解。这样，这种部份水解应使得有可能分离信号肽以及其他有效蛋白质，然后用于制剂中。一定的试验条件，如一定的PH值，温度，盐含量，或者加有特殊酶的组合物的水解持续时间，都可以有目的的控制部份水解。
在有目的的部份水解的情况下，如果可以得到质量从150到3000道尔顿的肽，则是有利的。这将使得制剂可以通过各种途径给药。
根据权利要求4的特征，含有本发明的合成肽组合物的制剂也可实现上述目的。因此，含有合成肽组合物制剂的特征在于肽组合物可由新合成的肽组成。新合成的肽在结构和成分上符合人体组织的肽和肽组合物。
关于这点，本发明也已发现，相当于人体组织肽的肽的新合成使得有可能认识到肽组合物可用作激素和内分泌紊乱以及组织功能不良的治疗药物。进一步发现，从头合成有可能得以以一种重复的方式来生产肽和肽组合物。其结果是可以达到不使用人体组织而进行移植。
为了生产这些合成肽组合物，则会出现，以适当地通过化学方法而衍生出的各个氨基酸逐段排列形成短链肽，然后从它们的氨基末端和其侧向功能团上的衍生形态释放出这些合成肽。用这个方法，在制药上是有可能以可重复，消毒的方式来生产肽和肽组合物。
这样生产的肽组合物的优点在于和自然制剂不一样，它们能够消除疾病风险，例如朊病毒风险，特别是牛绵状脑病风险，或者病毒病原体。
这些肽的平均质量最好为150到3000道尔顿。这使得有可能这些短链肽的简易从头合成在药物治疗的耐受范围内。这种制剂也可以应用于各种形式的用药。
根据权利要求8的特征，在另一个变换的范围内，含有本发明的合成肽组合物的制剂也可实现上述目的。因此，含有合成肽组合物制剂的特征在于可以自基因修饰微生物得到肽组合物。在这种情况下，所生产的肽的基因原材料对应于人体组织的肽的核苷酸序列。
在本变换措施的范围内，本发明已经发现，微生物用对应于人体组织的肽的核苷酸序列的基因原材料的克隆，使得有可能生产可用作激素和内分泌功能紊乱的治疗药物，以及所有组织的功能不良的治疗药物的合成肽。本发明也发现，采用微生物使制药上大规模再现性成为可能。在这种情况下，在工业范围内，发酵槽中的液体培养物可以进行大量生产，因此，对于这种制剂将有很大的需求量。另外，和从动物有机体合成的肽相比，人体将对通过以上方法生产的肽有更好的耐受性。
合成肽的一种特别简单的生产是用质粒来克隆微生物的cDNA。在这个过程中，cDNA可以通过反转录肽的mRNA得到。采用带可能的选择性标记的质粒中或者在有选择性的培养基中的cDNA，可以保证只有这些含有所需肽的cDNA的微生物被选择，除了选择性的标记外，质粒中也可以加入启动子，其有提高克隆的cDNA的表达的作用。
微生物可以以一种特别有利的方式释放肽到培养基中，从中可以收集到相同的肽。这可以通过渗透性休克或电休克方法来实现。因此，合成肽可以通过简单的方法加以之后的离心步骤和层析法得到。
本发明中的肽的平均质量较好为150到3000道尔顿。由于核苷酸序列的大小受到限制，所以它可以实现简单而稳定的微生物克隆。另外，通过以上方法所生产的肽组合物可以通过所有途径给药。
此制剂含有合成肽组合物，故而其可以更有效的方式作为器官的功能不良的治疗药物之用。在这一点上，有可能通过合成肽组合物的作用使有缺陷的或被破坏的组织再生或者重建。
还有可能提供含有合成肽组合物作为免疫和/或内分泌活性制剂。在这一点上，有利的是，由人体器官复制的合成肽组合物完全排除牛绵状脑病的风险或其它可以从动物传播到人体的疾病的风险。
也有可能用含有合成肽组合物的制剂作为化妆品或食物补充剂。这样可以确保那些不必以药物治疗的人也可以接受含有合成肽组合物。
至于生产方法，权利要求20的步骤可达到上述的目的。因此，一种制剂的生产方法的特征在于其组织借助于酶进行部分水解，而此组织来源于人体，且部分水解的产物可以借助于特殊的酶组合物得到。本发明的方法最好用于生产权利要求1-3和权利要求13-19中所述的制剂，这可参阅说明书的前述部分，以避免重复。
至于生产方法，权利要求21的步骤可同样达到上述的目的。因此，一种制剂的生产方法的特征在于由适当地通过化学方法而衍生的各个氨基酸排列成肽，而新合成的肽在其结构和成分上对应于人体组织的肽和肽组合物。在这一点上，可以根据Merrifield固体相方法来安排生产方法。本发明的方法最好用于生产一种权利要求4-7和13-19中任何一项所述的制剂，这也可参阅说明书的前述部分，以避免重复。
在另一个变换的范围内，同样有可能以权利要求22的步骤定义一种本发明的方法。因此，一种制剂的生产方法的特征在于肽和肽组合物可以通过对微生物的基因修饰得到。在这种情况下，肽的基因原材料对应于人体组织的肽的核苷酸序列。本发明的方法最好用于生产一种根据权利要求8-19中任何一项所述的制剂，同样在这种情况下，可参阅说明书的前述部分，以避免重复。
一种制剂的生产方法最好可以发展到这样一种程度，以至于从部分水解组织得到的肽组合物或从肽的新合成所得到的肽组合物或由基因修饰微生物而得到的肽和肽组合物形成了一定比率和型式的有人体组织特性的氨基酸。这样，就有可能确保从这些方法生产出和天然产品相同的产品。
最后，应该注意到，以有利的方式进一步提高和发展本发明的教导有无数的可能性。然而，上述的实施例仅为解释要求保护的指导，而不限于这些实施例。
权利要求
1.一种应用于人类和动物且含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，肽组合物从组织的部分水解得到，而组织来源于人体，其部分水解的产物通过特殊的酶组合物得到。
2.根据权利要求1所述的含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，可以这样选择酶组合物以便进行有目的的部分水解。
3.根据权利要求1或2所述的含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，有目的的部分水解所得到的肽的质量是150到3000道尔顿。
4.一种应用于人类和动物且含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，肽组合物可以由新合成的肽组成，而新合成的肽在结构和成分上对应于人体组织的肽和肽组合物。
5.根据权利要求4所述的含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，合成肽可以通过组合单个的氨基酸得到。
6.根据权利要求4或5所述的含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，合成肽的平均质量是150到3000道尔顿。
7.根据权利要求4-6中任何一项所述的含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，所得到的合成肽没有朊病毒风险，尤其是没有牛绵状脑病风险。
8.一种应用于人类和动物且含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，肽组合物可自基因修饰的微生物得到，所得的肽在其基因原材料上对应于人体组织的肽的核苷酸序列。
9.根据权利要求8所述的含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，微生物可以通过质粒中含的cDNA序列克隆而得到。
10.根据权利要求8或9所述的含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，微生物释放肽到培养物的培养基中。
11.根据权利要求8-10中任何一项所述的含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，肽可以在培养物的培养基中收集。
12.根据权利要求8-11中任何一项所述的含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，释放到培养物的培养基中的合成肽的平均质量是150到3000道尔顿。
13.根据权利要求1-12中任何一项所述的含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，所述的制剂用作治疗器官的功能不良的药物。
14.根据权利要求1-12中任何一项所述的含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，所述的制剂用作治疗免疫衰弱和免疫缺陷的药物。
15.根据权利要求1-12中任何一项所述的含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，所述的制剂用作治疗基因缺陷的药物。
16.根据权利要求1-12中任何一项所述的应用于人和动物且含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，所述的制剂用作治疗细胞或组织的缺陷的药物。
17.根据权利要求1-12中任何一项所述的含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，所述的制剂用作治疗激素功能紊乱的药物。
18.根据权利要求1-12中任何一项所述的含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，所述的制剂用作化妆品。
19.根据权利要求1-12中任何一项所述的含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，所述的制剂用作食物补充剂。
20.一种根据权利要求1所述的制剂的生产方法，其特征在于，组织是依靠酶来部分水解，而组织来源于人体，以及部分水解的产物可以通过特殊的酶组合物得到。
21.一种根据权利要求4所述的制剂的生产方法，其特征在于，以适当地通过化学方法而衍生的各个氨基酸排列而形成肽，而新合成的肽在结构和成分上对应于人体组织的肽和肽组合物。
22.一种根据权利要求8所述的制剂的生产方法，其特征在于，肽和肽组合物由微生物得到，而肽在基因原材料上对应于人体组织的肽的核苷酸序列。
23.一种根据权利要求20-22中任何一项所述的制剂的生产方法，其中，组织部分水解或者以适当地通过化学方法而衍生的各个氨基酸排列而形成肽，或者通过基因修饰微生物生成，其特征在于，所述的方法包括以下步骤形成一定比率以及型式上有人体组织特征的氨基酸。
全文摘要
一种适用于人和动物且含有合成肽组合物的制剂，其特征在于，肽组合物来源于人体组织的部分水解；肽组合物从新合成的肽得到，后者的结构和成分与人体组织对应；或者肽组合物是通过基因修饰微生物得到，所产生的肽在它们的基因原材料上对应于人体组织的肽的核苷酸序列。本发明也揭示了这种肽组合物的生产方法。
文档编号A61Q19/00GK1809373SQ200480017017
公开日2006年7月26日 申请日期2004年6月17日 优先权日2003年6月17日
发明者G·H·克雷特－劳可 申请人:罗乐·玛利亚·克雷特－劳可