专利名称：一种利用微生物法降低药渣中残留的泰乐菌素的方法
技术领域：
本发明涉及一种降低药渣中残留的泰乐菌素的方法，尤其是涉及一种 利用微生物法降低药渣中残留的泰乐菌素的方法。
背景技术：
国内外抗生素药渣加工利用始于50年代后期。1957年，我国上海第 三制药厂将四环素药渣晒干后用作词料添加剂，在上海郊区养猪、鸡业中 推广应用。直至80年代末期，凡有抗生素生产的地方，均将药渣简单晒 晾后，用作蛋白饲料或添加剂。但由于受气候、场地等限制，晾晒法预处 理药渣受到一定的限制。因为工厂不可能有那么多空闲地来晾晒。晾晒期 间，药渣散发出一种特殊异味，而且，药渣有机物含量高，易引起二次发 酵，颜色变黑，产生恶臭味，引来大量苍蝇，环境十分恶劣。随着人们环 保意识的提高和国家环保整治力度的加大，近十年来，人们将抗生素药渣 的处理工艺主要集中在干燥技术的攻关上。1991年，山东鲁抗医药集团公 司抗生素药渣干燥工艺获得成功。1996年，山东鲁抗饲料厂又研究出离心 机结合流化床干燥青霉素湿渣，使干燥成本降低30%。
随着各种药渣干燥设备的研制成功，国内有数家单位开展了抗生素药 渣用作高蛋白饲料原料及药物性添加剂的研究。1998年 1999年，李月海 等利用鲁抗泰乐菌丝蛋白和头孢菌丝蛋白分别以1.5%、 3%的添加量代替 等量的豆粕用于产蛋鸡饲养，获得较好的饲喂效果；用泰乐菌素蛋白词料 饲养肉仔鸡，肉鸡成活率、增重速度、料肉比均显著高于未添加组。
然而，上述药渣的开发使用，均没有消除药渣中残留的抗生素。因为 动物长期食入高残留抗生素的药渣后，会产生耐药菌、畜产品药物残留等 种种不良后果。这就意味着药渣作为再生伺料资源，用前必须降低其内所 残留的抗生素。
近年来，国内外有关药渣中残留抗生素降解技术的研究报道甚少，但 在城市生活废水和工业废水中残留抗生素的治理方面研究报道较多。汤少 红等将药渣直接以肥料的形式用于花丼施用，也取得了较满意的施肥效
果，但药渣中残有抗生素，长期使用可能会对土壤微生态平衡产生负面影
响。Kummerer等、Ingerslev等、Drillia等采用生物法，对生活废水中残 留环丙沙星、氧氟沙星、甲硝哒唑、复方新诺明和兽用土霉素等的降解技 术进行了研究，但所得到的结果是不一致的。主要原因是①不同抗生素， 其分子结构和稳定性是不一样的；②降解用菌株还有待进一步筛选与优 化；③污水中无机、有机质对不同菌株降解不同抗生素的影响可能有别； 温度、pH值、溶解氧等对不同降解过程的影响。Lange等、Andreozzi 等用臭氧对污水中残留的大环内酯类抗生素诸如红霉素、克拉霉素、罗红 霉素、林可霉素进行无害化处理，取得了较为满意的治理效果，但这种方
法是否适合药渣治理，尚需研究。也有人采用电化氧化法处理废水中抗生 素残留，发现用此方法能有效降低废水中氧氟沙星含量，但对残留林可霉 素无显著降解作用，但这种方法不适合于工厂规模化处理，因能耗太大。 Otker等、Polubesova等用蒙脱石、沸石等多孔型硅酸盐矿物质吸附污水 中残留四环素、恩诺沙星等药物，进而使污水得以净化，但这种方法没有 从根本上消除残留抗生素，只是抗生素的存在位点发生了改变，不适合于 药渣中残留抗生素的治理。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种简单、独特、易于推 广使用的利用微生物法降低药渣中残留的泰乐菌素的方法。
本发明通过如下方式实现
一种利用微生物法降低药渣中残留的泰乐菌素含量的方法，其特征在 于该方法包括如下步骤
a. 药渣培养基配制将下述重量的原料混合而成即可得药渣培养基 药渣600g 800g,麸皮400g 200g， MgS04.7H20 0.1g 0.2g， K2HP04 0.1g 0.2g， FeSO4.7H2O0.1g~0.3g，水800mL 1000mL;
b. 细菌悬液制备取热带假丝酵母和Em原露菌株，分别接种于YPD 液体培养基中，30。C摇床中培养20 30h， 4000r/min离心15min后，悬浮 于新的YPD液体培养基中，30°C摇床中继续培养8~10h后即可得到热带 假丝酵母和Em原露悬液；
c. 取步骤a制备的药渣培养基，加入步骤b制备的热带假丝酵母和Em原露悬液，每200g的药渣培养基中加入的热带假丝酵母和Em原露悬 液各4 10mL，搅拌均匀，25 30。C下，孵育24~36h,然后在60~100°C 下烘干，粉碎后即可；'
所述YPD液体培养基是由5g的酵母浸出粉、10g的蛋白胨、20g的 葡萄糖和lOOOmL的水混合而成。
本发明有如下效果
1) 大幅度降低了药渣中残留的泰乐菌素的含量本发明采用微生物
法对泰乐菌素药渣进行处理，使药渣中残留泰乐菌素含量由原来的
40mg/kg 60mg/kg降低至4.5mg/kg以下。
2) 本发明使泰乐菌素药渣再利用成为可能由于药渣中泰乐菌素的 残留量较高，使泰乐菌素药渣直接作为动物饲料或肥料使用，己受到人们 的广泛置疑。美国食品和药物管理局(FDA)规定，泰乐菌素在可食组织和 蛋中的残留允许浓度为0.2mg/kg。若用上述处理后的药渣为原料，生产单 细胞蛋白饲料或饲料酶制剂，单细胞蛋白按1%的比例，词料酶制剂按0.3% 的比例添加到猪、鸡全价配合词料中。以肉鸡为例，饲养2kg的肉鸡，大 约需要4kg左右的全价配合饲料，则消耗药渣0.052kg，肉鸡则食入不高 于0.234mg的泰乐菌素。假如动物食入的药渣中的泰乐菌素全部蓄积在动 物机体中，则肉鸡机体中泰乐菌素含量为0.117mg/kg，低于FDA规定的 0.2mg/kg限量。实际上，动物食入含有泰乐菌素的药渣， 一则药渣中的泰 乐菌素不可能全部被动物肠道吸收；二则经肠道吸收的泰乐菌素，大部分 要经过组织分解代谢而排除体外，只有少量蓄积在动物组织中。
3) 本发明通过热带假丝酵母和Em原露复合菌株处理药渣，提高了 药渣中残留泰乐菌素的降解效果。因为，单独热带假丝酵母或Em原露对 药渣中残留泰乐菌素的降解效果要极显著低于二者复合降解的效果。
具体实施例方式
实施例l:
1) 药渣培养基配制
药渣600g，麸皮400g， MgS04'7H20 O.lg， K2HP04 O.lg， FeS04.7H20 O.lg，水1000mL。
2) 细菌悬液制备取热带假丝酵母和Em原露菌株，分别接种于YPD液体培养基中，30°C摇床中培养20h， 4000r/min离心15min后，悬浮于 新的YPD液体培养基中，30。C摇床中继续培养8h。
3)取步骤2)制备的热带假丝酵母和Em原露悬液各4mL,接种于 200g药渣培养基中，搅拌均匀。25。C下，孵育36h。然后在60。C下烘干 后粉碎。
经测定，处理后药渣中泰乐菌素含量为3.2mg/kg。 :药渣培养基配制
药渣700瑪，麸皮300g，MgS04.7H20， 0.2g，K2HP04， 0.15g， FeS04.7H20 0.2g，水900mL。
2) 细菌悬液制备取热带假丝酵母和Em原露菌株，分别接种于YPD 液体培养基中，30°C摇床中培养25h， 4000r/min离心15min后，悬浮于 新的YPD液体培养基中，30。C摇床中继续培养9h。
3) 取步骤2)制备的热带假丝酵母和Em原露悬液各7mL，接种于 200g药渣培养基中，搅拌均匀。28。C下，孵育30h。然后在80。C下烘干 后粉碎。
经测定，处理后药渣中泰乐菌素含量为4.0mg/kg。
实施例3:
1) 药渣培养基配制
药渣800g，麸皮200g，MgS04'7H20 0.15g, K2HPO40.2g， FeS04.7H20 0.3g，水800mL。
2) 细菌悬液制备取热带假丝酵母和Em原露菌株，分别接种于YPD 液体培养基中，30。C摇床中培养30h， 4000r/min离心15min后，悬浮于 新的YPD液体培养基中，30°C摇床中继续培养10h。
3) 取步骤2)制备的热带假丝酵母和Em原露悬液各10mL，接种于 200g药渣培养基中，搅拌均匀。30。C下，孵育24h。然后在100。C下烘 干后粉碎。
经测定，处理后药渣中泰乐菌素含量为4.5mg/kg。 上述YPD是酵母浸出粉胨葡萄糖液体简称，其是由5g的酵母浸出粉、 10g的蛋白胨和20g的葡萄糖和1000mL的水混合而成。
权利要求
1.一种利用微生物法降低药渣中残留的泰乐菌素含量的方法，其特征在于该方法包括如下步骤a.药渣培养基配制将下述重量的原料混合而成即可得药渣培养基药渣600g～800g，麸皮400g～200g，MgSO4·7H2O 0.1g～0.2g，K2HPO40.1g～0.2g，FeSO4·7H2O 0.1g～0.3g，水800mL～1000mL；b.细菌悬液制备取热带假丝酵母和Em原露菌株，分别接种于YPD液体培养基中，30℃摇床中培养20～30h，4000r/min离心15min后，悬浮于新的YPD液体培养基中，30℃摇床中继续培养8～10h后即可得到热带假丝酵母和Em原露悬液；c.取步骤a制备的药渣培养基，加入步骤b制备的热带假丝酵母和Em原露悬液，每200g的药渣培养基中加入的热带假丝酵母和Em原露悬液各4～10mL，搅拌均匀，25～30℃下，孵育24～36h，然后在60～100℃下烘干，粉碎后即可。
2. 如权利要求1所述的一种利用微生物法降低药渣中残留的泰乐菌 素含量的方法，其特征在于所述YPD液体培养基是由5g的酵母浸出粉、 10g的蛋白胨、20g的葡萄糖和lOOOmL的水混合而成。
全文摘要
本发明涉及一种降低药渣中残留的泰乐菌素的方法，尤其是涉及一种利用微生物法降低药渣中残留的泰乐菌素的方法，其特征在于该方法包括如下步骤a.药渣培养基配制、b.细菌悬液制备、c.取步骤a制备的药渣培养基，加入步骤b制备的热带假丝酵母和Em原露悬液，每200g的药渣培养基中加入的热带假丝酵母和Em原露悬液各4～10mL，搅拌均匀，25～30℃下，孵育24～36h，然后在60～100℃下烘干，粉碎后即可；采用本发明提供的方法处理后药渣中泰乐菌素含量由原来的40mg/kg～60mg/kg降低至4.5mg/kg以下，使药渣资源化利用成为可能。
文档编号A62D3/02GK101204613SQ20071019719
公开日2008年6月25日 申请日期2007年12月6日 优先权日2007年12月6日
发明者李卫芬, 邱智杰, 马玉龙 申请人:宁夏大学