专利名称：在质谱分析中的功能检查和偏差补偿的制作方法
技术领域：
本发明涉及根据独立权利要求1的前序部分所述的一种用于质谱仪的功能的检查方法，涉及根据权利要求2的前序部分所述的用于在质谱法中补偿偏差的方法，以及涉及根据权利要求12的前序部分所述的用于执行这功能检查和用于质谱仪的补偿方法的装置。它涉及在定量化学分析领域中的发明。提供了来自生物医学分析领域的实施方案。
背景技术：
色谱分析，特别是色谱-质谱联用分析方法，在生命科学领域中是非常重要的，特别是用于医学实验室诊断、食物和环境分析。在这种情况下，首先准备诸如血浆、血清、血液或尿液等生物样品(例如去蛋白)，然后通过色谱法(例如GC =气相色谱法；LC =液相色谱法，HPLC=高压或高效液相色谱法)进行分离。然后将色谱馏分的样品连续地供应到质谱检测器。在用常压电离(例如电喷射(ESI)MS/MS)进行质谱测量的情况下，使目标分析物电离以进行检测。然而，这种电离不仅是检测相应的目标分析物，也检测非常大量的来自样品基质的其他物质。因此，每个常压电离均会出现高度综合的物理化学，其中需要假定多个分子的相互作用。除此之外，将此表达为“离子抑制”和“离子增强”的现象。样品基质的成分在大多数情况下不能很详细地确定，用相应的目标分析物将所述成分暂时地洗脱到离子源中，既可以导致目标分析物的离子产额增加又可以导致目标分析物的离子产额减小。同样地，在离子源和离子光学(“充电”)的部件上沉积也将导致系统的电离效率经常会出现这样的情况在一连串的分析中，检测器信号随着时间过去会出现偏移甚或偏差(所谓的波动)。通常是在一系列样品中分析校准样品(已知分析物浓度)，该校准样品后面是待量化和检查的“未知样品”或“未知物”。如果在这样的系列内，关于在一连串测量内的目标分析物出现电离率偏差，或如果电离特性与校准样品和未知物的不同，将会导致未知物的
测量结果错误。为了补偿相应的离子产额的调制效应(modulation effects)，使用了被称为内标物的物质。所涉及的这些物质的分子结构需要尽可能与目标分析物的类似。理想地，目标分析物的稳定同位素标记分子(例如，皮质醇分子中的四个氢原子用氘交换)适合作为用液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MQ测量皮质醇的内标物。在校准或控制样品和未知物的一连串的分析中，在样品处理开始时便立即将数量正好相同的各自的内标物添加到所有样品(校准，控制和未知物)。结果会产生每个样品的目标分析物与内标物之浓度比，该比率在样品处理期间不再发生变化。在质谱检测样品的运行中，以交替的方式记录目标分析物 (例如在MS/MS技术中碰撞诱导的离子跃迁)和内标物的信号，或同时地作为质谱图。因此，在同一样品运行中记录两个独立的质谱图。在不具体的检测方法诸如紫外线检测的情况下，必须以这样的一种方式选择内标物，以致于它在与目标分析物不同的时间点进行洗脱。在此情况下，在质谱图(分析物和内标物)中确定了两个峰面积。为了进行定量评估， 对内标物和目标分析物的峰面积进行确定(于限定的保留时间)。目标分析物的峰面积与内标物的峰面积之比被称为个别分析的响应。以这种响应(即峰面积比)为基础来进行校准和定量。由于这种内标准化的原则，至少部分消除了从样品到样品的离子产额的偏差。然而这种情况的先决条件是，目标分析物和内标物的电离行为通过调制效应(“充电”、基质成分等等)以非常类似的方式被影响。一方面，使用校准样品来进行定量导致要投入额外的时间来进行准备和分析。另一方面，这样的校准样品不会对用未知浓度的分析物(未知物)进行样品分析的质量提供任何直接陈述。作为备选方案，如上述般对样品本身增加限定数量的内标物(在质谱分析中， 无论是在同一记录中或在同步地记录的独立记录中都会产生两个质谱峰)，最近已经描述了一种方法，其中将参考溶液连续地混合到色谱装置的洗脱液中，从而能够补偿离子产额的起伏(Stahnke H, Reemtsma T, Alder L 的"Compensation of matrix effects by post-column infusion of a monitor substance in multiresidue analyses with LC-MS/MS”，分析化学2009年，81期第2185-92页)。周期性地记录参照物的信号水平(以交替的方式对目标分析物的传质轨道(mass transfer track)进行记录)。通过综合数据处理过程的帮助下，该参考信号用于对可以影响信号产生的因素进行测量值补偿。 Stahnke等人的方法使用与目标分析物不一样的监控物。由于目标分析物和参照物在它们的电离行为方面可以彼此不同，这种方法主要是在分析上易受干扰(principally analytically interference-prone)。搜索适当的参照物是具有挑战性的，因为需要被发现的物质在任何情况下都会遭受到类似于目标分析物的信号产率(signal yield)的调制。 对于许多目标分析物来说，需要假定的是没有适合于作此用途的物质会被发现。此外，需要对周期性地记录的参考信号和目标分析物的峰面积进行综合评估，即直接从最初记录的质谱图进行评估和量化是不可能的或至少是易受干扰的。
发明内容
本发明的目的是提供允许检查质谱仪的功能或质谱分析的质量和补偿离子产额的起伏的装置和方法。根据第一方面，此目的是以这样的一种方式来达到，即建立一种用于检查质谱仪的功能的测试方法。根据本发明的测试方法的特征在于，所述测试方法包括以下工作步骤(a)将色谱分离系统的洗脱液与具有已知浓度的目标分析物溶液混合；(b)将在步骤(a)中所产生的混合物注入质谱仪中，所述质谱仪具有至少一个提供信号的检测器；
(c)基于检测器信号来捕捉质谱图，其中所述质谱图包括目标分析物的集成线和质谱峰；(d)通过捕捉在目标分析物的集成线上面的集成质谱峰面积A和在目标分析物的集成峰面积A下面由来自所述峰集成线的垂直下降线得到得到的面积B来评估所述质谱图；(e)从已确定的质谱面积A和B形成数学关系；(f)确定用于所述数学关系的阈值，指定质量合格的质谱分析的上或下阈值；以及(g)基于数学关系与至少一个已确定的阈值的比较，接受或拒绝质谱分析。根据第二方面，所述目的是以这样的一种方式来达到，即建议一种用于补偿质谱分析中离子产额的偏差的方法。根据本发明的补偿方法的特征在于，所述补偿方法包括以下工作步骤(a)将色谱分离系统的洗脱液与具有已知浓度的目标分析物溶液混合；(b)将在步骤(a)中所产生的混合物注入质谱仪，所述质谱仪具有至少一个提供信号的检测器；(c)基于所述检测器信号捕捉质谱图，其中所述质谱图包括目标分析物的集成线和质谱峰；(d)通过捕捉在目标分析物的集成线上面的集成质谱峰值面积A和由来自峰集成线的垂直下降线在目标分析物的集成峰面积A下面得到的面积B来评估所述质谱图；(e)从已确定的质谱面积A和B形成数学关系；以及(f)评估用于补偿所述检测器中离子产额的偏差的所述质谱图。根据另一个方面，所述目的是以这样的一种方式来达到，即建议一种用于执行所述测试方法和所述补偿方法的装置。根据本发明的装置的特征在于，所述装置包括(a)泵，所述泵具有用于输送已知浓度的目标分析物溶液的泵控制件，以及(b)被设置在质谱仪上游的T型件，所述T型件包括用于将所述T型件与质谱仪连接的第一连接件，用于将所述T型件与所述泵连接的第二连接件，以及用于引进来自色谱分离系统的洗脱液的第三连接件，以及选择性地包括(c)流量检测器。根据又一个方面，所述目的是以这样的一种方式来达到，即建议一种用于执行所述测试方法和所述补偿方法的设备。根据本发明的设备的特征在于，所述设备包括(a)泵，所述泵具有用于输送已知浓度的目标分析物溶液的泵控制件，以及(b)被设置在质谱仪上游的供料装置，所述供料装置包括用于将所述供料装置与设置在所述质谱仪上游的真空室连接的第一连接件，具有用于引进来自色谱分离系统的洗脱液的第二连接件的第一注射导管，以及用于将所述供料装置与所述泵连接的第三连接件，以及选择性地包括(c)流量检测器。根据再一个方面，所述目的是以这样的一种方式来达到，即建议一种用于执行所述测试方法和所述补偿方法的设备。根据本发明的设备的特征在于，所述设备包括(a)泵，所述泵具有用于输送已知浓度的目标分析物溶液的泵控制件，以及
(b)被设置在质谱仪上游的混合装置，所述混合装置包括用于将所述混合装置与质谱仪连接的第一连接件，具有用于引进来自色谱分离系统的洗脱液的第二连接件的第一注射导管，以及用于将所述混合装置与所述泵连接的第三连接件，以及选择性地包括(c)流量检测器。从属权利要求提供了另外的优选的或有创造性的特征。形成的商A/B、B/A、A_B/A 或A2/B2，或Iog(A)-Iog(B)的差或各自的相反值优选作为在步骤(e)中的数学关系。特别优选形成的商A/B作为在步骤(e)中的数学关系。
将参照附图和测量结果更详细地解释本发明，应当理解的是，图示的数个实施方案仅仅作为例子，而不是对本发明的范围作限制。其中-图1示出了用于将目标分析物混合到色谱分离系统的洗脱液的(PCI)系统(PCI =永久柱后灌注)系统的第一配置；-图2示出了用于将目标分析物混合到色谱分离系统的洗脱液的(PCI)系统的第
二配置；-图3示出了用于将目标分析物混合到色谱分离系统的洗脱液的(PCI)系统的第三配置，图中包括位于质谱仪上游的减压室；-图4示出了于将目标分析物混合到色谱分离系统的洗脱液的(PCI)系统的第四
配置；-图5示出了根据所述发明的用于评估的质谱图，根据所述质谱图，通过连续地将目标分析物添加到色谱分离系统的洗脱液，将会形成一基线标高；-图6示出了以图1所示的技术配置以及所述质谱评估方法为基础测量他克莫司的校准函数。
具体实施例方式发现了一种系统配置和质谱评估方法的结合，其允许只使用目标分析物溶液执行质谱测量方法的内部标准化。如图1至图4所示，该系统配置可以用于以恒速将目标分析物混合到色谱分离系统的洗脱液以作为参考溶液。或者，目标分析物(在色谱方法中等度洗脱)可以以溶解的方式在色谱系统的流动相中存在。通过所述配置来确保以连续的速度将目标分析物供应到检测器，从而在质谱仪中产生连续的“背景”信号。在这个过程中使基线上升，因此具有置于实际的质谱分析下面所谓的“基线偏移”。根据本发明的测试方法可以用来检查质谱仪的功能或性能(=性能或响应)。本发明的测试方法是基于质谱图中的基线标高，其也可用于补偿涉及相应的目标分析物的各自的检测器的信号产生中的偏差。较佳地，质谱仪的功能或性能的检查发生在以目标分析物溶液为基础进行实际样品分析之前或之后。特别优选的是，对带已知的分析物和/或未知的分析物的样品与已知的目标分析物的混合物进行同时或并行分析，使得在每次分析时都可获得当前的质量陈述。这是通过将分开的目标分析物溶液连续地混合到色谱分离系统的洗脱液来达到，使得只有这种混合物将到达质谱仪5的检测器5’。以下将解释这种混合的不同可能性这种将目标分析物混合到来自色谱分离系统1，2的洗脱液可以通过泵4经由T型件3发生(见图1)。如果所述泵4具有足够的存储量(例如，在具有大汽缸容积的活塞泵的情况下)，将不需要用于目标分析物溶液的额外存贮器4b。然而，如果使用螺形压缩泵将目标分析物溶液输送到T型件3 (其不包含任何存储量)，那么连接这样的存贮器4b是不可避免的。如果使用高精度注射泵4来输送所述目标分析物溶液，那么最好将三通阀4c设置在三个连接件与T型件3、存贮器4b和注射泵4之间(见图幻。适合用于功能检查或偏差补偿的泵较佳地选自包括压电泵，注射泵，活塞泵(例如已知的LC泵)和螺形压缩泵的组。 这些泵是本领域的技术人员众所周知的(例如可从文献EP 0 956 449 Bl得知压电泵的情况)。根据本发明的另一个实施方案，通过双喷嘴(从美国专利US 6，465，776 Bl得知) 或供料装置10同时注入色谱分离系统的洗脱液和目标分析物溶液(参见图幻。所述供料装置10包括两条彼此完全分开的注射导管8，9，其中一条注射导管注入色谱分离系统1，2 的洗脱液，而另一条注射导管注入泵4的目标分析物溶液。这种方法需要在质谱仪的上游提供减压室12，而所述减压室设置在供料装置10与质谱仪5之间。目标分析物与色谱分离系统1，2(由双箭头表示)的洗脱液的混合只会在所述上游的真空室12中发生。也在这种情况下，只有所述混合物到达质谱仪5的检测器5'。较佳地，将这里没有示出但从美国专利US 6，465，776 Bl得知的四极离子导管设置在真空室12与质谱仪5之间，使用四极离子导管可以在个别流体样品到达质谱仪之前把它们带到平行的轨道上。根据本发明的又一个实施方案，通过混合喷嘴同时注入色谱分离系统1，2的洗脱液和目标分析物溶液(参见图4)。与图3形成对比，所述混合装置11包括两条只是部分彼此分开的注射导管8，9，其中一条注射导管注入色谱分离系统1，2的洗脱液，而另一条注射导管注入来自泵4的目标分析物溶液。两条注射导管在混合装置11内彼此连接，使得可以省略设置在质谱仪上游的减压室。也在这种情况下，只有所述混合物到达质谱仪5的检测
5 ο以下内容一般适用于通过T型件3或供料装置10或混合装置11和分开的泵4， 将目标分析物与来自色谱分离系统1，2的洗脱液进行混合的步骤可以在梯度法或等度法 (isocratic methods)中使用。按照本发明的备选实施方案，目标分析物可以在色谱分析系统1，2的流动相中溶解，而不需要额外的泵4。这在等度色谱分析的情况下是有可能的。还可以假设只用分析物溶液(没有未知物)来执行所述功能测试。此外，可以将带有相关的控制系统的流量检测器13设置在分离柱2与T型件3之间(参见图1和图幻或者设置在分离柱2与供料装置10或混合装置11之间(参见图3 和图4)。在这个流量检测器13的帮助下，连续地对经过的样品或色谱分离系统1，2的洗脱液进行分析。一旦确定所关注的样品已到达流量检测器13中，就可以着手将目标分析物注入T型件3或供料装置10或混合装置11。当确定所关注的样品已完结，则可以停止注入目标分析物。在质谱图的运行时间内限定一时窗14，它是从开始注入目标分析物至结束的这段时间(参见图5)。较佳地，该时窗要够大，以致于它能够明确地包含质谱仪运行时间的关注部分，在其中捕捉对应于预期的分析物的检测器信号。作为以检测器控制供应的目标分析物的结果，可以大大减少执行本发明的测试或补偿方法时所需的目标分析物的数量，所述目标分析物往往是非常昂贵的。这就是为什么用于执行所述测试方法或所述补偿方法的装置最好包括带有各自的控制件的流量检测器 13，所述流量检测器13设置在色谱分离系统1，2与T型件3之间或者在色谱分离系统1，2 与供料装置10或混合装置11之间，用于对来自色谱分离系统1，2的洗脱液进行光学分析。 特别优选的流量检测器13是扫描检测器(例如紫外线、可见光和近红外检测器)、折光检测器或荧光检测器。在较质谱图的运行时间短的时窗14期间以恒定流速连续供应目标分析物，这可以在图1至图4所示的根据本发明的用于执行所述测试方法或补偿方法的装置的所有实施方案中发生。作为选择或与上述的检测器控制供应目标分析物相结合，此目标分析物的供应还可以时间控制的方式发生。如果在质谱仪中待分析的样品含有许多类似的物质，这是特别有利的并且可以以特别简单的方式执行。较佳地，在目标分析物供应期间，来自色谱分离系统1，2的关注事件到达混合位置之前不久，所述目标分析物与来自色谱分离系统1，2的洗脱液也到达此混合位置。取决于所选择的执行所述测试方法或补偿方法的装置的实施方案，该混合位置可设置在T型件 3的内部(参见图1和图幻、在供料装置10之后(见图3的真空室1 、或者在混合装置 11的内部(参见图4)。为了确保在这些先决条件下有足够的时间供应目标分析物，较佳的是延长来自色谱分离系统1，2的洗脱液从流量检测器13到达所选择的混合位置所需的时间。在系统是定量流动的情况下，此操作规程(instruction)的简单解决方案是延伸流量检测器13与位于T型件3的内部中、在供料装置10之后、或在混合装置11的内部中的混合位置之间的路径。例如使用毛细管(类似于高效液相色谱(HPLC)毛细管)来达到这样的路径延伸15，例如将所述毛细管放置在流量检测器13与T型件3之间。如果需要较大的路径延伸15，可以采用卷绕的毛细管(参见图1)。或者和/或另外，可以使T型件3的各个入口分支延伸或者包含延长路径的曲径(图中未显示)。当流量检测器13检测到关注事件时，用于供应目标分析物的泵4可以及时在这样的装置中开始运转。有利地，所述路径延伸15还可以用于时间控制的目标分析物供应中。所得到的质谱图的评估将在下文进行详细说明在评估这些质谱图时，通过制定的基点识别和面积测量方法来捕捉目标分析物的峰面积A(其由实际的质谱法产生)。另外，在相应的峰下面的“底基”(即四边形的面积B) 都将被捕捉(参见图幻。较佳地，以峰面积A除以峰7下面的四边形峰面积B得到的商来计算个别分析的“响应”。这个面积B是由峰7的集成线6、质谱图的基线以及从峰集成线 6的末端下降到所述基线的下降线形成的(参见图5 ；面积A和B)。如果涉及目标分析物的电离效率在分析物峰7的洗脱期间减小或增加，获得记录的峰面积A也减小或增加。同样地，还会获得在所述峰下面的底基的面积B减小或增加。结果，这两个面积的商A/B将变成独立于瞬时离子产额。因此该方法适合于抵偿离子产额的偏差，还适用于在所述分析之前加入到样品中的独特内标物。如果在样品中和在洗脱溶液中的分析物的浓度是已知的，则所述两个面积的商A/B或任何其它数学关系式诸如这些面积的平方的商A2/B2或任何其它前述的面积A和B的数学关系式的值允许对所述分析的质量进行陈述。所述的方法进一步提供了超越现有技术的相关和令人惊讶的优势，因为在不需要用于此目的的内部标准化的分开物的情况下，提供了发展色谱特别是质谱的分析方法的可能性监控物(不是添加到所述流动相便是将柱后加到所述流中)与所述方法中相应的目标分析物是完全相同的。与常规的在样品制备的范围内增加内标物的内部标准化方法相比，达到了在样品制备期间减少工作量。在使用质谱方法的情况下(也特别与^ahnke等人的方法进行了比较)，进一步优势在于只需要对每个分析物记录一个单一质量轨道(mass track)，以便于量化。如果使用将目标分析物溶解于流动相中的系统配置(如在本文所述)，将会有超越 Stahnke等人的方法的相关优势，而且不需要额外的设备项目。到目前为止，在各方法的发展方面对参照物(其在信号特性方面与目标分析物非常类似)的搜索遇到的相关的挑战如果找不到适合的参照物，那么特定的质谱方法的发展往往会完全失败。因此，本发明相应地改进了在化学分析中定量色谱/质谱分析方法的适用性。将以测量来自人类全血样品的免抑制疫力的他克莫司(immunosuppressive tracrolimus)的实施方案为基础说明所述方法的功能特性。为此目的，在蛋白质沉淀后于治疗浓度范围内使用四个校准样品。通过液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MQ分析这些沉淀物(所述方法描述在Vogeser，Michael 等人的‘Instrument-specific matrix effects of calibration materials in the LC-MS/MS analysis of tacrolimus，，，2008 ￥，I^Ji^U 学第M期第1406-8页)。把他克莫司溶液(100微克/升于甲醇/水中，1/1)以5微升 /分钟的速度通过T型件注入分析柱和质谱系统之间的液流中。图5示出了在整个质谱图运行期间记录的质谱图。从而检测具体为他克莫司的质量转移(母离子821.5m/q;产品离子768.5m/q)。面积A是峰面积。面积B是在所述峰下面的底基面积，所述面积B通过连续注入他克莫司而产生。可以从模拟以及数字信号或质谱仪检测器的数据计算出面积A和B。图6示出了以此质谱评估为基础而准备的校准函数。在X轴输入校准样品的已知的分析物浓度。Y轴示出了表面A/表面B的峰面积比的相应的响应。得到所述峰面积响应与校准浓度之间的线性关系。在此系列中以所述原则为基础进行分析的质量控制样品被发现在由制造商指定的浓度在5. 2微克/升之内的目标范围内用于补偿质谱测量中离子产额的偏差的特别优选的实施方案包括以下特征用于补偿在量化色谱分析中信号产生装置的偏差的區別色谱分析方法的特征在于，在一连串的分析期间以恒定速度将测量的目标分析物纯溶液连续供应给信号产生装置 (检测器)。此外，这种色谱分析方法的特征较佳地在于，以此方式在色谱图中产生背景信号 (=基线标高、偏移)。另外，这种色谱分析方法的特征较佳地在于，以这样一种方式实现目标分析物的连续供应将目标分析物溶解在色谱系统的流动相中(用等度洗脱的方法)，或者通过T型件和第二泵装置以恒定速度将作为参照物的目标分析物溶液连续地混合到分析分离柱的远程流中。此外，这种色谱分析方法的特征较佳地在于，实现了利用色谱图中的基线标高来补偿涉及相应目标分析物的各自的检测器的信号产生的偏差。此外，这种色谱分析方法的特征较佳地在于，对位于目标分析物的峰的集成线下面的四边形进行评估。最后特别的是，这种色谱分析方法的特征在于，为了量化所述目标分析物，由目标分析物的集成色谱峰下面、来自峰集成线的垂直下降线得到的面积，在与集成峰面积有关的评估方法中被安置在目标分析物的集成线上面。图示及所描述的数个实施方案的有用组合均属于本发明的范围。附图标记列表
1高效液相色谱(HPLC)泵η
2分离柱}色谱分离系统3T 型件4泵4b存贮器4c三通阀5质谱仪5 ‘质谱仪5的信号产生检测器6质谱峰7的集成线7质谱峰8第一分开的注射导管9第二分开的注射导管10供料装置11混合装置12真空室13流量检测器14时窗15路径延伸A目标分析物的峰面积(在集成线6上面)B在质谱峰7的集成线下面由垂直下降线得到的面积(作为基线标高)
权利要求
1.一种用于检查质谱仪(5)的功能的测试方法，其特征在于，所述方法包括以下工作步骤(a)将色谱分离系统(1，2)的洗脱液与具有已知浓度的目标分析物溶液混合；(b)将在步骤(a)中所产生的混合物注入质谱仪( 中，所述质谱仪具有至少一个提供信号的检测器(5，)；(c)根据所述检测器信号捕捉质谱图，其中所述质谱图包括所述目标分析物的集成线 (6)和质谱峰(7)；(d)通过捕捉在所述目标分析物的所述集成线(6)上面的集成质谱峰面积(A)和通过在所述目标分析物的所述集成峰面积(A)下面由来自所述峰集成线(6)的垂直下降线得到的面积(B)来评估所述质谱图；(e)从已确定的质谱面积A和B形成数学关系；(f)确定用于在步骤(e)中形成的所述数学关系的至少一个阈值，其中所述阈值指定质量合格的质谱分析的临界；以及(g)以所述数学关系与已确定的阈值的比较为基础，接受或拒绝样品的质谱分析。
2.一种用于补偿在质谱分析中离子产额的偏差的方法，其特征在于，所述方法包括以下工作步骤(a)将色谱分离系统(1，2)的洗脱液与具有已知浓度的目标分析物溶液混合；(b)将在步骤(a)中所产生的混合物注入质谱仪(5)，所述质谱仪具有至少一个提供信号的检测器(5，)；(c)根据所述检测器信号捕捉质谱图，其中所述质谱图包括所述目标分析物的集成线 (6)和质谱峰(7)；(d)通过捕捉在所述目标分析物的所述集成线(6)上面的集成质谱峰值面积(A)和通过来自所述峰集成线(6)的垂直下降线在所述目标分析物的所述集成峰面积(A)下面得到的面积(B)来评估所述质谱图；(e)从已确定的质谱面积A和B形成数学关系；以及(f)评估用于补偿在所述检测器(5')中离子产额的偏差的所述质谱图。
3. 根据权利要求1所述的测试方法或根据权利要求2所述的补偿方法，其特征在于，所述数学关系选自包括商(Α/Β)、(Β/Α)、(A-B/A)或(A2/B2)，[log㈧-log (B)]的差及其各自的相反值的组。
4.根据权利要求1所述的测试方法或根据权利要求2所述的补偿方法，其特征在于，所述数学关系由商(A/B)限定。
5.根据权利要求1所述的测试方法或根据权利要求2所述的补偿方法，其特征在于，在所述质谱分析期间以恒定速度将分开的目标分析物溶液与所述色谱分离系统(1，2)的洗脱液连续地混合。
6.根据权利要求5所述的测试方法或补偿方法，其特征在于，在时窗(14)期间以恒定速度连续供应所述目标分析物，所述时窗较所述质谱图的运行时间短。
7.根据权利要求5或6所述的测试方法或补偿方法，其特征在于，用泵(4)连续供应所述目标分析物，所述泵与设置在所述质谱仪( 上游的T型件C3)操作连接。
8.根据权利要求1所述的测试方法或根据权利要求2所述的补偿方法，其特征在于，目标分析物在所述色谱分离系统(1，2)的流动相中溶解。
9.根据权利要求1所述的测试方法或根据权利要求2所述的补偿方法，其特征在于，在所述质谱分析期间，通过分开的注射导管(8，9)以恒定速度将分开的目标分析物溶液和所述色谱分离系统(1，2)的洗脱液连续地供应到供料装置(10)、真空室(12)，然后供应给质谱分析。
10.根据权利要求1所述的测试方法或根据权利要求2所述的补偿方法，其特征在于， 在所述质谱分析期间，通过会聚的注射导管(8，9)以恒定速度将分开的目标分析物溶液和所述色谱分离系统(1，2)的洗脱液连续地供应到混合装置(11)，在所述混合装置中把它们彼此混合，然后把它们供应给质谱分析。
11.根据权利要求9或10所述的测试方法或补偿方法，其特征在于，在时窗(14)期间以恒定速度连续供应所述目标分析物，所述时窗较所述质谱图的运行时间短。
12.一种用于执行根据权利要求1-7中任一项所述的测试方法或根据权利要求2-7中任一项所述的补偿方法的装置，其特征在于，所述装置包括(a)泵G)，所述泵具有用于输送已知浓度的目标分析物溶液的泵控制件，以及(b)被设置在所述质谱仪( 上游的T型件(3)，所述T型件包括用于将所述T型件(3) 与所述质谱仪( 连接的第一连接件，用于将所述T型件与所述泵(4)连接的第二连接件， 以及用于引进来自所述色谱分离系统(1，2)的洗脱液的第三连接件，以及选择性地包括(c)流量检测器(13)。
13.一种用于执行根据权利要求9所述的测试方法或补偿方法的装置，其特征在于，所述装置包括(a)泵G)，所述泵具有用于输送已知浓度的目标分析物溶液的泵控制件，以及(b)被设置在所述质谱仪( 上游的供料装置(10)，并且所述供料装置包括用于将所述供料装置(10)与设置在所述质谱仪( 上游的真空室(1 连接的第一连接件，具有用于引进来自所述色谱分离系统(1，2)的洗脱液的第二连接件的第一注射导管(8)，以及用于将所述供料装置(10)与所述泵(4)连接的第三连接件，以及选择性地包括(c)流量检测器(13)。
14.一种用于执行根据权利要求10所述的测试方法或补偿方法的装置，其特征在于， 所述装置包括(a)泵G)，所述泵具有用于输送已知浓度的目标分析物溶液的泵控制件，以及(b)被设置在所述质谱仪( 上游的混合装置(11)，并且所述混合装置包括用于将所述混合装置(11)与所述质谱仪( 连接的第一连接件，具有用于引进来自所述色谱分离系统(1, 的洗脱液的第二连接件的第一注射导管(8)，以及用于将所述混合装置(11)与所述泵(4)连接的第三连接件，以及选择性地包括(c)流量检测器(13)。
15.根据权利要求12-14中任一项所述的装置，其特征在于，所述装置进一步包括用于所述目标分析物溶液的存贮器Gb)。
16.根据权利要求15所述的装置，其特征在于，所述装置进一步包括三通阀( )，所述三通阀设置在所述泵(4)和所述存贮器Gb)以及所述T型件( 或所述供料装置(10)或所述混合装置(11)之间。
17.根据权利要求12-16中任一项所述的装置，其特征在于，所述泵选自包括压电泵， 注射泵，活塞泵和螺形压缩泵的组。
18.根据权利要求12-17中任一项所述的装置，其特征在于，所述装置包括具有相关控制件的流量检测器(13)，所述流量检测器被设置在所述色谱分离系统(1，幻与所述T型件 (3)之间，或者在所述色谱分离系统(1, 与所述供料装置(10)之间，或者在所述色谱分离系统(1，2)与所述混合装置(11)之间，并被设置成用于对来自所述色谱分离系统(1，2)的洗脱液进行光学分析。
全文摘要
本发明涉及一种用于检查质谱仪(5)的功能的测试方法以及用于补偿在质谱分析中离子产额的偏差的方法，其特征在于，所述方法包括将色谱分离系统(1，2)的洗脱液与具有已知浓度的目标分析物溶液混合，将所述混合物注入质谱仪(5)中，所述质谱仪具有提供信号的检测器，根据所述检测器信号捕捉质谱图，捕捉在集成线(6)上面的集成质谱峰面积(A)和在所述集成峰面积(A)下面的面积(B)，并形成面积(A)和(B)的数学关系。所述测试方法从而进一步包括设定用于所述数学关系的阈值，所述阈值指定质谱分析的可接受质量的界限，以所述数学关系与所述设定的阈值的比较为基础，接受或拒绝所述质谱分析。所述补偿方法从而进一步包括评估用于补偿在检测器(5′)中离子产额的偏差的所述质谱图。本发明进一步涉及用于执行所述测试方法或补偿方法的装置。
文档编号H01J49/00GK102484030SQ201080039354
公开日2012年5月30日 申请日期2010年6月18日 优先权日2009年6月25日
发明者M·沃格塞, R·盖尔, W·豪格 申请人:泰肯贸易股份公司