一种利用微藻制备纳米银的方法
【技术领域】
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[0001]本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用微藻制备纳米银的方法。
【背景技术】
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[0002]早在远古时代，金属银就被人们认识到具有抗菌和杀菌作用，并具有广谱的抗菌活性。近年来，对金属纳米粒子的研宄新进展，推动了纳米银在抗菌领域的应用，研宄发现用多种方法制备的纳米银都具有高效的抗菌活性。纳米银被称为二i^一世纪新一代的抗菌剂，它具有广谱、高效的抗菌性能，纳米银作为抗菌材料业已得到了广泛的应用，如用在烧伤敷料、手术台、水净化装置和一些医疗设备等。基于纳米银优良的抗菌性能，其应用前景广阔，在生活用品领域、医疗卫生领域、建材领域、电子工业领域等都有广泛的市场需求。
[0003]纳米银粒子的制备方法很多，主要是液相化学还原法、电化学法、光化学还原法等化学方法，和还原球磨法、蒸发冷凝法、雾化法等物理方法，其中尤以化学还原法比较常见，但也需要严格控制反应条件，对制备技术的要求比较高。
【发明内容】
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[0004]本发明的目的是提供一种简便易行、可操作性强、成本低廉，且制备过程不会向环境排出有毒有害物质，比较环保的利用微藻制备纳米银的方法。
[0005]本发明利用微藻制备纳米银的方法，其特征在于，将小球藻、丝藻或四尾栅藻藻液离心，将藻细胞沉淀重悬于灭菌的水中，置于超声波下冰浴破碎，离心，去掉藻沉淀，向上清的藻液中加入硝酸银，银离子的终浓度为5-100 μ g/mL，再置于20-40°C水浴震荡反应l_5h，然后经超声处理、滤膜过滤，滤液即为纳米银溶液。
[0006]优选，所述置于超声波下冰浴破碎以及超声处理，其超声输出功率为150-200W，破碎 3-lOmin。
[0007]所述的过滤优选是用孔径0.1-0.22 μ m的滤膜过滤。
[0008]本发明利用微藻制备纳米银粒子，该制备方法简便易行，可操作性强，成本低廉，且制备过程不会向环境排出有毒有害物质，是一项既简单又环保的纳米银制备技术。
【附图说明】
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[0009]图1-图6分别是实施例1-6的纳米银溶液的透射电镜图。
【具体实施方式】
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[0010]以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
[0011]实施例1:
[0012]将培养好的小球藻藻液加到离心管中置于离心机上5000rpm离心5分钟，将湿重Ig微藻重悬于20mL去离子水中，并在冰浴条件下超声破碎藻细胞，超声输出功率为150瓦特，超声lmin，间歇lmin，重复5次。离心，去掉藻沉淀，向20ml上清液中加入硝酸银溶液，使银离子的终浓度为?ο μ g/mL，置于水浴摇床上30°C振荡反应5h，然后将反应液在冰浴条件下进行超声破碎，输出功率为150瓦特，超声lmin，间歇lmin，重复5次。将超声后的溶液用0.22 μm的滤膜过滤，得到澄清的纳米银溶液。该纳米银溶液的电镜图如图1所示，从图1可以看出，本实施例的纳米银溶液确实为纳米银溶液。
[0013]实施例2:
[0014]将培养好的小球藻藻液加到离心管中置于离心机上5000rpm离心5分钟，将湿重2g藻细胞沉淀重悬于20ml灭菌的去离子水中，并在冰浴条件下超声破碎藻细胞，输出功率为200瓦特，超声lmin，间歇lmin，重复10次。离心，去掉藻沉淀，向20ml上清液中加入硝酸银溶液，使银离子的终浓度为20 μ g/mL，置于水浴摇床上40°C振荡反应5h，然后将反应液在冰浴条件下进行超声破碎，输出功率为150瓦特，超声lmin，间歇lmin，重复3次。将超声后的溶液用0.22 μm的滤膜过滤，得到澄清的纳米银溶液。该纳米银溶液的电镜图如图2所示，从图2可以看出，本实施例的纳米银溶液确实为纳米银溶液。
[0015]实施例3:
[0016]将培养好的小球藻藻液加到离心管中置于离心机上5000rpm离心5分钟，将湿重5g藻细胞沉淀重悬于20mL灭菌的去离子水中，并在冰浴条件下超声破碎藻细胞，输出功率为200瓦特，超声Imin，间歇Imin，重复5次。离心，去掉藻沉淀，向20ml上清液中加入硝酸银溶液，使银离子的浓度为50 μ g/mL，置于水浴摇床上20°C振荡反应5h，然后将反应液在冰浴条件下进行超声破碎，输出功率为150瓦特，超声lmin，间歇lmin，重复10次。将超声后的溶液用0.22 μm的滤膜过滤，得到澄清的纳米银溶液。该纳米银溶液的电镜图如图3所示，从图3可以看出，本实施例的纳米银溶液确实为纳米银溶液。
[0017]实施例4:
[0018]将培养好的小球藻藻液加到离心管中置于离心机上5000rpm离心5分钟，将湿重5g藻细胞沉淀重悬于20mL灭菌的去离子水中，并在冰浴条件下超声破碎藻细胞，输出功率为200瓦特，超声Imin，间歇Imin，重复3次。离心，去掉藻沉淀，向20ml上清液中加入硝酸银溶液，使银离子的浓度为100 μ g/mL，置于水浴摇床上30°C振荡反应5h，然后将反应液在冰浴条件下进行超声破碎，输出功率为150瓦特，超声lmin，间歇lmin，重复5次。将超声后的溶液用0.22 μm的滤膜过滤，得到澄清的纳米银溶液。该纳米银溶液的电镜图如图4所示，从图4可以看出，本实施例的纳米银溶液确实为纳米银溶液。
[0019]实施例5:
[0020]将培养好的四尾栅藻藻液加到离心管中置于离心机上5000rpm离心5分钟，将湿重Ig藻细胞沉淀重悬于20mL灭菌的去离子水中，并在冰浴条件下超声破碎藻细胞，输出功率为150瓦特，超声lmin，间歇lmin，重复5次。离心，去掉藻沉淀，向20ml上清液中加入硝酸银溶液，使银离子的终浓度为10 μ g/mL，置于水浴摇床上20°C振荡反应5h，然后将反应液在冰浴条件下进行超声破碎，输出功率为150瓦特，超声lmin，间歇lmin，重复5次。将超声后的溶液用0.22 μm的滤膜过滤，得到澄清的纳米银溶液。该纳米银溶液的电镜图如图5所示，从图5可以看出，本实施例的纳米银溶液确实为纳米银溶液。
[0021]实施例6:
[0022]将培养好的丝藻藻液加到离心管中置于离心机上5000rpm离心5分钟，将湿重Ig藻细胞沉淀重悬于20mL灭菌的去离子水中，并在冰浴条件下超声破碎藻细胞，输出功率为200瓦特，超声lmin，间歇lmin，重复5次。离心，去掉藻沉淀，向20ml上清液中加入硝酸银溶液，使银离子的终浓度为5 μ g/mL，置于水浴摇床上20°C振荡反应lh，然后将反应液在冰浴条件下进行超声破碎，输出功率为200瓦特，超声lmin，间歇lmin，重复5次。将超声后的溶液用0.1 ym的滤膜过滤，得到澄清的纳米银溶液。该纳米银溶液的电镜图如图6所示，从图6可以看出，本实施例的纳米银溶液确实为纳米银溶液。
【主权项】
1.一种利用微藻制备纳米银的方法，其特征在于，将小球藻、丝藻或四尾栅藻藻液离心，将藻细胞沉淀重悬于灭菌的水中，置于超声波下冰浴破碎，离心，去掉藻沉淀，向上清的藻液中加入硝酸银，银离子的终浓度为5-100 μ g/mL，再置于20?40°C水浴震荡反应l_5h，然后经超声处理、滤膜过滤，滤液即为纳米银溶液。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述置于超声波下冰浴破碎以及超声处理，其超声输出功率为150-200W，破碎3-10min。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的过滤是用孔径0.1-0.22 μ m的滤膜过滤。
【专利摘要】本发明公开了一种利用微藻制备纳米银的简单方法。它是将小球藻或丝藻或四尾栅藻藻液分别离心，将藻细胞沉淀重悬于灭菌的去离子水中，置于超声波下冰浴破碎，输出功率为150-200W，破碎3-10min，离心，去掉藻沉淀，向藻液中加入硝酸银，银离子的浓度为5-100μg/mL，置于20-40℃水浴摇床震荡反应1-5h，再经超声处理、滤膜过滤得到纳米银溶液。本发明利用微藻制备纳米银粒子，该制备方法简便易行，可操作性强，成本低廉，且制备过程不会向环境排出有毒有害物质，是一项既简单又环保的纳米银制备技术。
【IPC分类】B22F9-24
【公开号】CN104525965
【申请号】CN201410830502
【发明人】李文茹, 梁青, 施庆珊, 冯静, 谢小保, 黄小茉
【申请人】广东省微生物研究所
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年12月25日