专利名称：1→2连接的、具有1,2反式糖苷键的甘露糖和葡萄糖双糖的制备新方法
技术领域：
本发明属于有生物活性的寡糖的制备技术领域，特别是涉及能用于合成1→2连接的、具有1,2反式糖苷键的甘露糖和葡萄糖双糖的制备，以及含有这些双糖的寡糖的制备方法。
1→2连接的、具有1,2反式糖苷键的吡喃式寡糖存在于很多天然产物中，如酵母细胞壁多糖含有α1→2连接的甘露寡糖片段，很多寡糖抗原也都含有α1→2连接的甘露寡糖片段。β1→2连接的葡萄糖存在于很多有活性的寡糖中。在已报道的1→2连接的寡糖合成中，都是用保护-去保护的逐步合成策略。如双糖是由单糖供体和单糖受体偶联而得到的。本发明的目的在于由苯甲酰化单糖的原酸酯重排直接制备1→2连接的双糖，进而由这些双糖制备出寡糖。
T.K.Lindhorst曾经报道过全乙酰化的单糖原酸酯重排得到全乙酰化的双糖，但产率低(由500毫克原酸酯得到125毫克双糖)，且得到的双糖无法继续改性以合成寡糖[见J.Carbohydr.Chem.,16(1997)237-243]。而本发明能较高产率地由苯甲酰化的原酸酯制备双糖(由1克原酸酯可制备双糖450毫克)，且得到的双糖2位为乙酰基，与其它位的苯甲酰基有别，可被选择性脱除，然后与其它糖偶联制备寡糖。
本发明的目的是这样实现的以苯甲酰化的糖的烷基原酸酯为原料，在路易斯酸催化下进行重排，得到2位为乙酰基的苯甲酰化双糖，选择性脱除乙酰基，即得到双糖受体，而脱除1位烷基并进行活化，即得到双糖供体，由这些供体与受体可合成新的寡糖。
本发明的合成方法在于苯甲酰化的甘露糖及葡萄糖的烷基原酸酯，在路易斯酸的催化下重排，直接得到1→2连接的、具有1,2反式糖苷键的双糖。如 Bz=Ph(CO)- All=Allyl Ac=乙酰基将所得的双糖2在酸性条件下选择性脱除乙酰基，即得到双糖受体。如 Bz=Ph(CO)- All=Allyl将所得的双糖2的1位烯丙基脱除，再进行活化，即得到双糖供体。如 Bz=Ph(CO)- All=Allyl Ac=乙酰基将双糖受体3与双糖供体4偶连，即得到四糖。如 Bz=Ph(CO)- All=Allyl Ac=乙酰基双糖受体3可以与任何糖基供体如单糖供体、双糖供体、寡糖供体偶联，得到含双糖受体3的糖基的寡糖。如与1→6连接的双糖供体6偶联 Bz=Ph(CO)- All=Allyl Ac=乙酰基双糖供体4可以与任何糖基受体如单糖受体、双糖受体、寡糖受体偶连，得到含双糖供体4的糖基的寡糖。如与单糖受体8偶联 Bz=Ph(CO)- All=Allyl Ac=乙酰基按常规方法去除保护，即得到游离的寡糖。
所述的路易斯酸为重金属盐、三氟化硼、三甲基硅三氟甲磺酸盐等；所述的烷基原酸酯中的烷基为烯丙基、甲基、乙基、丁基、辛基及含芳烃的基等。
所述的活化的糖基供体为卤代物、酰基酯、三氯亚胺酯等。
所述的双糖、寡糖供体或由均一的单糖组成，或由不同的单糖按任意连接方式而成。
所述的双糖、寡糖受体或由均一的单糖组成，或由不同的单糖按任意连接方式而成。
下面结合实施例对本发明进行详细的说明。
(1)苯甲酰化的甘露糖的烯丙基原酸酯1的合成 将四乙酰基溴代甘露糖822毫克，2毫克分子溶于二氯甲烷中，加入2,4-二甲基吡啶0.23毫升，2毫克分子，搅拌下室温反应3小时，减压下蒸干溶剂，加入甲醇40毫升，再加入甲醇钠，至pH=8，搅拌2小时后蒸干。加入吡啶25毫升，苯甲酰氯2.6毫升，搅拌下室温反应3小时，按常规方法处理反应液，用硅胶柱层析法精致产品，得到苯甲酰化的烯丙基原酸酯920毫克，产率80％(2)双糖2的制备 将单糖原酸酯1 1150毫克，2毫克分子，溶于30毫升二氯甲烷中，加入TMSOTF(三甲基硅三氟甲磺酸盐)8微升，在室温、搅拌下进行反应，用TLC监测。反应完成后，用常规方法处理反应液，产物用硅胶柱层析法精制，得到2位为乙酰基的苯甲酰化双糖2518毫克，产率45％。
(3)双糖受体3的合成 将双糖21000毫克，1毫克分子，溶于25毫升甲醇中，加入乙酰氯(0.50毫升)，室温、搅拌下反应4小时，再补加乙酰氯(0.25毫升)。用TLC监测，反应完成后，按常规方法处理反应液，得到双糖3 910毫克。产率95％。
(4)双糖供体4的合成 将双糖21000毫克，1毫克分子，溶于含乙酸钠(292毫克)的乙酸(10毫升)，加入氯化钯293毫克，搅拌、室温下反应，用TLC监测，反应完成后，过滤，将滤液和洗涤液合并，减压下蒸干。将残余物溶于15毫升干燥二氯甲烷中，加入三氯乙睛0.2毫升，2毫克分子，DBU27微升，在室温、搅拌下进行反应，用TLC监测。反应完成后，用常规方法处理反应液，产物用硅胶柱层析法精制，得到双糖供体4994毫克，产率90％(5)四糖5的制备 按SHIMIDT发表的标准反应方法(Adv.Carbohydr.Chem.Biochem.50,1994,21-124)，使双糖供体4(1105毫克，1毫克分子)与双糖受体(958毫克，1毫克分子)反应，得到四糖51429毫克，产率88％其它寡糖的制备，亦按SHIMIDT发表的标准反应方法进行，产率75.90％。
权利要求
1．本发明是关于一种制备1→2连接的、具有1,2反式糖苷键的甘露糖和葡萄糖双糖的新方法，及由这些双糖继续制备寡糖的新方法，其特征在于(1)苯甲酰化的甘露糖及葡萄糖的烷基原酸酯，在路易斯酸的催化下重排，直接得到1→2连接的、具有1,2反式糖苷键的双糖。如 Bz=Ph(CO)- All=Allyl Ac=乙酰基(2)将所得的双糖2在酸性条件下选择性脱除乙酰基，即得到双糖受体。如 Bz=Ph(CO)- All=Allyl(3)将所得的双糖2的1位烯丙基脱除，再进行活化，即得到双糖供体。如 Bz=Ph(CO)- All=Allyl Ac=乙酰基(4)将双糖受体3与双糖供体4偶连，即得到四糖。如 Bz=Ph(CO)- All=Allyl Ac=乙酰基(5)双糖受体3可以与任何糖基供体如单糖供体、双糖供体、寡糖供体偶联，得到含双糖受体3的糖基的寡糖。如与1→6连接的双糖供体6偶联 Bz=Ph(CO)- All=Allyl Ac=乙酰基(6)双糖供体4可以与任何糖基受体如单糖受体、双糖受体、寡糖受体偶连，得到含双糖供体4的糖基的寡糖。如与单糖受体8偶联 Bz=Ph(CO)- All=Allyl Ac=乙酰基按常规方法去除保护，即得到游离的寡糖。
2．如权利1(1)所述的一种制备1→2连接的、具有1,2反式糖苷键的甘露糖和葡萄糖双糖的新方法，及由这些双糖继续制备寡糖的新方法，其特征在于所述的路易斯酸为重金属盐、三氟化硼、三甲基硅三氟甲磺酸盐等；所述的烷基原酸酯中的烷基为烯丙基、甲基、乙基、丁基、辛基及含芳烃的基等。
3．如权利1(3)所述的一种制备1→2连接的、具有1,2反式糖苷键的甘露糖和葡萄糖双糖的新方法，及由这些双糖继续制备寡糖的新方法，其特征在于所述的活化的糖基供体为卤代物、酰基酯、三氯亚胺酯等。
4．如权利1(5)所述的一种制备1→2连接的、具有1,2反式糖苷键的甘露糖和葡萄糖双糖的新方法，及由这些双糖继续制备寡糖的新方法，其特征在于所述的双糖、寡糖供体或由均一的单糖组成，或由不同的单糖按任意连接方式而成。
5．如权利1(6)所述的一种制备1→2连接的、具有1,2反式糖苷键的甘露糖和葡萄糖双糖的新方法，及由这些双糖继续制备寡糖的新方法，其特征在于所述的双糖、寡糖受体或由均一的单糖组成，或由不同的单糖按任意连接方式而成。
全文摘要
本发明涉及1→2连接的、具有1,2反式糖苷键的甘露糖及葡萄糖双糖的制备新方法,以及由这些双糖继续制备寡糖的新方法。用苯甲酰化的甘露糖及葡萄糖的烷基原酸酯为原料,在路易斯酸催化下重排,能直接得到2位乙酰化的、其它位为苯甲酰化的双糖,由这些双糖可制备新的寡糖。
文档编号C07H3/00GK1309130SQ0010084
公开日2001年8月22日 申请日期2000年2月17日 优先权日2000年2月17日
发明者孔繁祚, 朱玉亮 申请人:中国科学院生态环境研究中心