生地黄中同时提取多糖和梓醇的方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及中药植物中有效物质的提取技术领域。
【背景技术】
[0002] 生地黄，别名地黄、生地、地髓等，为常用的补益中药之一，临床应用极为广泛，所 含有效成分主要为多糖和梓醇。多糖是由许多相同或不同的单糖以α -或β -糖苷键所 组成的化合物，普遍存在于自然界植物体中，包括淀粉、纤维素、多聚糖、果胶等。由于植物 多糖的来源广泛，不同种的植物多糖的分子构成及分子量各不相同。相关研宄指出，地黄多 糖具有提高免疫力、抑制肿瘤、抗衰老、促进造血机能、降血糖等活性。梓醇是一种环稀醚猫 葡萄糖苷类化合物，具有广泛的药理作用，其在抗癌、神经保护、抗炎、利尿、降血糖及抗肝 炎病毒等领域均有特定疗效。梓醇为不稳定化合物，生地黄中梓醇含量最高，加工炮制过程 中，所含梓醇大幅下降甚至消失。
[0003] 为了更加方便和有效的获得地黄的治疗作用，已经有很多方法用来分别提取地黄 中的多糖和梓醇，分别获得地黄多糖和梓醇提取物，再经纯化后，可以进行深加工，依需求 制成各种片剂、粉剂等，供人们选择使用。如CN 101041675 A提供了一种地黄提取地黄寡 糖、地黄多糖的方法；CN 102863489 A公开了一种从地黄茎中提取梓醇的方法，这些方法 均在于获得纯的、高含量的提取产物，提取物适于后期深加工，因而提取成本高、工艺繁琐、 时间长。
[0004] 考虑到地黄的主要有效成分为地黄多糖和梓醇，部分人群有同时服用地黄多糖和 梓醇的需要，而前述的方法制备出的多糖和梓醇均为分别提取，需要两次提取过程，对于消 费者来说，需要承担两次提取的成本，性价比低。
[0005] CN 101817855Α公开了一种从新鲜地黄中制备梓醇和地黄多糖的方法，其通过一 次提取过程，提取到多糖和梓醇的混合物再经分离纯化分别得到相应的纯品。其采用乙醇 和水作为提取液，分两次提取，由于多糖和梓醇的最佳提取条件并不相同，甚至相互影响， 其提取过程中并未考虑到优化多糖和梓醇影响各自得率的不同条件，得到混合物中多糖和 梓醇的得率较低，工艺繁琐，成本较高。
【发明内容】
[0006] 本发明要解决的技术问题是提供生地黄中同时提取多糖和梓醇的方法，能够解决 已有技术提取多糖和梓醇得率较低、工艺繁琐、成本较高的问题，制得多糖和梓醇混合物中 多糖和梓醇的得率高，具有工艺简单安全、提取效率高、成本低的优点，经济效率高，有利于 环保，适于工业化生产。
[0007] 为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：生地黄中同时提取多糖和梓 醇的方法，其特征在于：包括如下步骤， 步骤一、样品前处理，将生地黄干燥至恒重，粉碎，过筛，筛目大于等于20目； 步骤二、提取，将已处理的生地黄与蒸馏水混合均匀，固液比为1: (8~12) g/ml，加 热，温度为90°C~100°C，提取时间为1~2小时，提取2~3次，合并提取液； 步骤三、将提取液浓缩，干燥即得成品。
[0008] 优选地，所述步骤二中，固液比为1:8 g/ml，加热温度为90°C，提取时间为1. 5小 时，提取2次。
[0009] 进一步地，所述步骤三中，将提取液浓缩后，再置于喷雾干燥机中，添加麦芽糊精， 经喷雾干燥制得粉末状成品。
[0010] 优选地，所述步骤三中，提取液浓缩至比重为I. l〇g/ml，添加5% (质量比）的麦芽 糊精，喷雾干燥机进风温度150°C ±2°C，出风温度80°C ±2°C。 toon] 采用上述技术方案所产生的有益效果在于：本发明根据影响多糖和梓醇得率的因 素优化了提取方法，如温度、固液比、提取时间、提取次数等，使制得混合物中多糖和梓醇取 得最佳得率，提取效率高。本发明仅用水作为提取液，提取温度低于100度，提取方法简单， 实施成本低，适于工业化生产。本发明能够解决已有技术提取多糖和梓醇得率较低、工艺 繁琐、成本较高的问题，制得产物不需分离，有效保留了提取物，直接制成粉末状成品，无污 染，可直接食用或深加工，经济效益好。
【附图说明】
[0012] 图1是本发明【具体实施方式】中提取次数对得率的影响曲线图； 图2是本发明【具体实施方式】中提取时间对得率的影响曲线图； 图3是本发明【具体实施方式】中提取温度对得率的影响曲线图； 图4是本发明【具体实施方式】中提取固液比对得率的影响曲线图；。
【具体实施方式】
[0013] 下面对本发明作进一步详细的说明，其中所用材料与仪器为： Waters高效液相色谱仪（Waters 2998光电二极阵列检测器、Breeze色谱工作站)，紫 外分光光度计（岛津UV-1750)，旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)，HH-W420数显三用恒温 水浴箱(金坛市医疗仪器厂)，SP-1500实验型喷雾干燥机(上海顺仪科技公司），TS-NS系列 提取浓缩机组(上海顺仪科技公司），生地黄购于河北保定安国，梓醇标准品（中国食品药品 检定所)，葡萄糖标准品(北京索莱宝科技有限公司)，麦芽糊精（山东西王糖业有限公司)，乙 腈、甲醇为色谱纯，其他均为分析纯。
[0014] 一、生地黄中多糖和梓醇提取方法在优化前需要先确定多糖和梓醇的含量测定方 法，及优化结果的测试对比指标。
[0015] 1.地黄多糖的含量测定方法 (1)标准曲线的绘制 取葡萄糖标准品，105°c下干燥至恒重，精密称取IOmg于50ml容量瓶中，用蒸馏水定容 至刻度。精密吸取上述溶液0. l、〇. 2、0.4、0.6、0.8、1.0 ml置具塞试管中，分别加蒸馏水 至2. 0 ml，加入5%的苯酚试液Iml，摇匀，迅速滴加浓硫酸5ml，快速混匀，静置5min，沸水 浴中加热15min，冷却至室温。用蒸馏水做空白对照，在490nm处测得吸光度。以浓度为横 坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线，Y=〇. 〇〇65x+0. 1136 ( R2=O. 9948)。
[0016] ⑵供试品溶液的制备 精密称取样品约IOmg于50ml容量瓶中，蒸馏水定容至刻度，充分溶解后，取0.1 ml于 具塞试管中，加水至2ml，加入5%苯酷试液lml，摇勾，迅速滴加浓硫酸5ml，快速混勾，静置 5min，沸水浴中加热15min，冷却至室温，即得供试品，测定吸光度，计算多糖含量，记为α (%)〇
[0017] 2梓醇的含量测定方法 (1)色谱条件 色谱柱：XBridge?C18( 5 μL? 4. 6x250mm);柱温 30°C ;检测波长 210nm ;流动相：乙 腈-水（1 : 99);进样体积20 μ 1 ;流速lml/min。
[0018] (2)标准曲线的制备 称取梓醇对照品l〇mg，置于IOOmL容量瓶中，以流动相（1%乙腈）溶解稀释至刻度，摇 勾既得）。配成 10 U g/ml，20 μ g/ml，40 μ g/ml，60 μ g/ml，80 μ g/ml，100 μ g/ml，按 2. I. 1. 2 的色谱条件，分别进样，记录色谱图，对峰积分计算峰面积，以峰面积为Y，以进样浓度为X， 进行线性回归，绘制标准曲线，γ=4954. 1Χ+5995. 2 (R2 = 0. 9987 )。
[0019] ⑶供试品溶液的制备 取样品约l〇〇mg，置于圆底烧瓶中，加入50ml 60%的甲醇，称定质量，加热回流提取 I. 5h冷却后再次称定质量，用甲醇补足减失的质量，继续提取I. 5h。摇匀，过膜，量取滤液 35ml，减压浓缩至近干燥，残渣用流动相（1%乙腈）溶解，转移定容至IOml量瓶中，摇匀，既 得。在上述色谱条件下测定，计算梓醇含量，记为β (%)。
[0020] 3.地黄多糖、梓醇的提取 取生地黄干燥至恒重，粉碎，过20目筛，取质量20. 00g，记为Ml (g)，在不同的时间、 温度、固液比下提取，过滤，提取两次，合并滤液浓缩，减压干燥，既得地黄提取物产品，记为 M2 (g)〇
[0021] 4.提取考察指标 以地黄多糖和梓醇的得率为考察指标，两物质得率的计算方法如下，
二、单因素实验 在保持其他因素相同条件下，分别考察不同提取温度（°C )、固液比（g/ml)、提取时间 (h)、提取次数（η)等各因素对地黄多糖得率的影响。
[0022] L提取次数的选择 采用提取温度80°C，提取时间2h，提取倍数8倍水，