硫代酰胺类化合物或其盐、以及包含它们的细胞因子产生抑制剂的制作方法

专利名称：硫代酰胺类化合物或其盐、以及包含它们的细胞因子产生抑制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及作为伴随免疫机能的异常亢进的疾病的治疗药物或预防药物有用的硫代酰胺类化合物或其盐。
背景技术：
在生物体的免疫反应中，由各种免疫细胞所产生的细胞因子控制免疫应答的方向性。在该免疫应答控制中，担当中心作用的是辅助T细胞，根据所产生的细胞因子的种类的不同，可以分为Th1和Th2的子集。已知Th1型细胞主要产生白介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)等，并参与对病毒、细菌等的感染预防等细胞性免疫。已知Th2型细胞主要产生白介素4(IL-4)、白介素5(IL-5)、白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)、白介素13(IL-13)等，并参与对寄生虫的感染预防以及源于B细胞的抗体产生等的体液免疫。但是，已知在由于某种原因导致这些生物体预防机构的控制丧失、或降低的情形中，会引起免疫机能的异常亢进或者平衡异常，并诱发或恶化各种疾病。
Th2型的免疫应答，起因于其异常亢进，与IgE抗体或肥大细胞主要参与的速发型变态反应、嗜酸细胞主要参与的迟发型变态反应等过敏性炎症反应的诱发、活化，以及荨麻疹、食物过敏、过敏性休克、嗜酸细胞增加综合征、哮喘、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、异位性皮炎等各种过敏性疾病的诱发、恶化密切相关。另外，全身性红斑狼疮等的抗体产生或者体液免疫异常亢进的疾病中发生的全身性自身免疫疾病也同样与Th2型免疫应答的异常亢进密切相关。为了治疗、预防这些过敏性疾病，认为对Th2型的免疫应答进行控制是重要的。另一方面，Th1型的免疫应答，起因于其异常亢进，诱发、活化细胞性免疫反应，并与慢性风湿性关节炎、I型糖尿病、桥本甲状腺炎、重症肌无力症、多发性硬化症等脏器特异性自身免疫疾病的诱发、恶化密切相关。另外，伴随着脏器移植的排异反应也与Th1型的细胞性免疫反应密切相关。为了治疗或预防这些自身免疫疾病或移植后的排异反应，认为对Th1型的免疫应答进行控制是重要的。
在专利文献1中，记载了作为细胞因子产生抑制剂有效的酰胺类化合物，但是，并不包含硫代酰胺类化合物。
专利文献1国际公开公报WO02/51397A发明内容迄今为止，对Th1或者Th2型的免疫应答进行特异性的控制，以治疗重症化的免疫·过敏性疾病是困难的，现状是，除了甾体类药物之外，环孢菌素和FK506等同时对Th1和Th2型的细胞因子产生进行强力抑制的免疫抑制剂构成了这些疾病的治疗体系的主体。但是，用甾体类药物，会产生肾上腺皮质功能不全、糖尿病、消化性溃疡、青光眼等各种副作用，而使用环孢菌素或FK506，会产生肾损伤、中枢神经损伤等严重的副作用，因此，希望开发与这些不同的新型细胞因子产生抑制剂。
本发明者为了找出更优异的细胞因子产生抑制剂进行了各种研究，结果发现，特定的硫代酰胺类化合物具有细胞因子产生抑制作用，从而完成了本发明。
即，本发明涉及式(I)所表示的硫代酰胺类化合物或其盐、以及包含它们作为有效成分的细胞因子产生抑制剂化1
[式中、A为氮原子、N-氧化物、C-NO2或C-CN；Hal为卤素原子；M1为可以被取代的烷基、可以被取代的链烯基、可以被取代的炔基、可以被取代的环烷基、可以被取代的环烯基、可以被取代的芳基、可以被取代的杂环基、可以被取代的氨基、氧原子、硫原子、SO或SO2；M2为可以被取代的氨基、氧原子、硫原子或单键；R1为卤素原子、氰基、硝基、可以被取代的烷基、可以被取代的烷氧基、可以被取代的烷基硫基、可以被取代的氨基或者可以被取代的杂环基；R2、R3、R4和R5各自独立地为氢原子、可以被取代的烷基、氰基或者烷基氧基羰基；R6为卤素原子、氰基、硝基、可以被取代的烷基、可以被取代的链烯基、可以被取代的炔基、可以被取代的环烷基、可以被取代的环烯基、可以被取代的芳基、可以被取代的杂环基、可以被取代的氨基或B-Q基(B为羰基、羰基氧基、氧基羰基、氧原子、硫原子、SO或SO2；Q为氢原子、可以被取代的烷基、可以被取代的链烯基、可以被取代的炔基、可以被取代的环烷基、可以被取代的环烯基、可以被取代的芳基、可以被取代的杂环基或者可以被取代的氨基)；Cy为环烷基、环烯基、芳基或杂环基；k、p和q各自独立地为0～3的整数；r为0～5的整数]。
式(I)化合物通过抑制Th2型的细胞因子的产生，作为对荨麻疹、食物过敏、过敏性休克、嗜酸细胞增加综合征、哮喘、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、异位性皮炎等各种过敏性疾病；全身性红斑狼疮等抗体产生或者体液免疫异常亢进的全身性自身免疫疾病进行治疗或预防的药物是有用的。另外，通过抑制Th1型的细胞因子的产生，作为对慢性风湿性关节炎、I型糖尿病、桥本甲状腺炎、重症肌无力症、多发性硬化症等脏器特异性自身免疫疾病；伴随脏器移植的排异反应的治疗或预防药物是有用的。
上述式(I)化合物的盐只要是药学上允许的盐即可。可以列举出例如，盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐等无机酸盐；对甲苯磺酸盐、丙磺酸盐、甲磺酸盐等有机酸盐；钾盐、钠盐等碱金属盐；钙盐等碱土金属盐；三乙醇胺盐、三(羟甲基)氨基甲烷盐等有机胺盐。
在式(I)化合物或其盐中可以具有结晶水。并且，在式(I)化合物或其盐中，可以具有多种晶型。
作为式(I)中含有的卤素原子，可以列举出氟原子、氯原子、溴原子、碘原子等。
作为式(I)中的各取代基所包含的烷基部分、以及后述二次取代基和三次取代基中的烷基部分，通常为碳原子数为1～20的烷基，可以列举出例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、癸基、十九烷基等。这些基团包括直链的或者支链的脂肪链构造异构体。
作为式(I)中的各取代基中包含的链烯基部分、以及后述二次取代基和三次取代基中的链烯基部分，通常为碳原子数为2～20的链烯基，可以列举出例如，乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基、癸烯基、十九碳烯基等。另外，这些基团包括直链的或者支链的脂肪链构造异构体。
作为式(I)中的各取代基中包含的炔基部分、以及后述二次取代基和三次取代基中的炔基部分，通常为碳原子数为2～20的炔基，可以列举出例如，乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基、癸炔基、十九碳炔基等。另外，这些基团包括直链的或者支链的脂肪链构造异构体。
作为式(I)中的各取代基中包含的环烷基部分、以及后述二次取代基和三次取代基中的环烷基部分，通常为碳原子数为3～10的环烷基，可以列举出例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环辛基等单环基团；另外，还可以列举出稠合型多环基团；金刚烷基、降金刚烷基、降冰片烷基、降冰片酮基等桥型多环基团。
作为式(I)中的各取代基中包含的环烯基部分、以及后述二次取代基和三次取代基中的环烯基部分，通常为碳原子数3～10的环烯基，可以列举出例如，环戊烯基、环己烯基、环辛烯基等单环基、以及稠合型多环基、桥型多环基等。
作为式(I)中的各取代基中包含的芳基部分、以及后述二次取代基和三次取代基中的芳基部分，除了苯基之外，还可以列举出萘基等稠合型多环基团。
作为式(I)中的各取代基中包含的杂环部分、以及后述二次取代基和三次取代基中的杂环部分，可以列举出吡咯基、吡咯啉基、吡咯烷基、呋喃基、二氢呋喃基、四氢呋喃基、噻吩基、二氢二噻吩基、四氢噻吩基、吡唑基、吡唑啉基、吡唑烷基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、唑基、唑啉基、唑烷基、异唑基、异唑啉基、异唑烷基、噻唑基、噻唑啉基、噻唑烷基、异噻唑基、异噻唑啉基、异噻唑烷基、二唑基、二唑啉基、二唑烷基、噻二唑基、噻二唑啉基、噻二唑烷基、三唑基、三唑啉基、三唑烷基、四唑基、四唑啉基、四唑烷基、间二氧杂环戊烯基、二氧戊环基、二硫杂环戊二烯基、二硫戊环基等5员单杂环基；吡啶基、二氢吡啶基、四氢吡啶基、哌啶基、嘧啶基、二氢嘧啶基、四氢嘧啶基、六氢嘧啶基、哒嗪基、二氢哒嗪基、四氢哒嗪基、六氢哒嗪基、吡嗪基、二氢吡嗪基、四氢吡嗪基、哌嗪基、三嗪基、二氢三嗪基、四氢三嗪基、六氢三嗪基、吡喃基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、二氧杂环己二烯基、二烯基、二烷基、二噻烷基、吗啉基等6员单杂环基；噻吩并噻吩基、二氢环戊二烯并噻吩基、吲哚基、四氢吲哚基、异吲哚基、四氢异吲哚基、苯并噻吩基、四氢苯并噻吩基、苯并呋喃基、四氢苯并呋喃基、苯并唑基、四氢苯并唑基、苯并异唑基、四氢苯并异唑基、苯并噻唑基、四氢苯并噻唑基、苯并异噻唑基、四氢苯并异噻唑基、苯并咪唑基、四氢苯并咪唑基、苯并间二氧杂环戊烯基、苯并二硫杂环戊二烯基、苯并二烷基、苯并二噻烷基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、2，3-二氮杂萘基、1，5-二氮杂萘基、嘌呤基等稠合型多环杂环基；奎宁环基等桥型多环杂环基。
作为上述可以被取代的烷基、可以被取代的链烯基以及可以被取代的炔基的二次取代基，可以列举出卤素、羟基、巯基、烷氧基、烷基硫基、链烯基氧基、链烯基硫基、炔基氧基、炔基硫基、环烷基、环烯基、环烷氧基、环烷基硫基、环烯基氧基、环烯基硫基、烷氧基羰基、烷基羰基、烷基羰基氧基、链烯基氧基羰基、链烯基羰基、链烯基羰基氧基、炔基氧基羰基、炔基羰基、炔基羰基氧基、环烷氧基羰基、环烷基羰基、环烷基羰基氧基、环烯基氧基羰基、环烯基羰基、环烯基羰基氧基、芳基、芳基氧基、芳基硫基、芳基氧基羰基、芳基羰基、芳基羰基氧基、杂环基、杂环氧基、杂环硫基、杂环氧基羰基、杂环羰基、杂环羰基氧基、氨基、氰基、硝基、羧基、氨基羰基、烷基磺酰基、链烯基磺酰基、炔基磺酰基、环烷基磺酰基、环烯基磺酰基、芳基磺酰基、杂环磺酰基、氨基磺酰基等。这些二次取代基的个数可以是1个也可以为2个以上，这些二次取代基可以是相同的或者不同的。
作为上述可以被取代的环烷基、可以被取代的环烯基、可以被取代的芳基以及可以被取代的杂环基的二次取代基，可以列举出卤素、羟基、巯基、烷基、链烯基、炔基、烷氧基、烷基硫基、链烯基氧基、链烯基硫基、炔基氧基、炔基硫基、环烷基、环烯基、环烷氧基、环烷基硫基、环烯基氧基、环烯基硫基、烷氧基羰基、烷基羰基、烷基羰基氧基、链烯基氧基羰基、链烯基羰基、链烯基羰基氧基、炔基氧基羰基、炔基羰基、炔基羰基氧基、环烷氧基羰基、环烷基羰基、环烷基羰基氧基、环烯基氧基羰基、环烯基羰基、环烯基羰基氧基、芳基、芳基氧基、芳基硫基、芳基氧基羰基、芳基羰基、芳基羰基氧基、杂环基、杂环氧基、杂环硫基、杂环氧基羰基、杂环羰基、杂环羰基氧基、氨基、氰基、硝基、羧基、氨基羰基、烷基磺酰基、链烯基磺酰基、炔基磺酰基、环烷基磺酰基、环烯基磺酰基、芳基磺酰基、杂环磺酰基、氨基磺酰基等。这些二次取代基的个数可以是1个也可以为2个以上，这些二次取代基可以是相同的或者不同的。
作为式(I)中的各取代基中包含的可以被取代的氨基的二次取代基，可以列举出羟基、烷基、链烯基、炔基、烷氧基、链烯基氧基、炔基氧基、环烷基、环烯基、环烷氧基、环烯基氧基、烷氧基羰基、烷基羰基、链烯基氧基羰基、链烯基羰基、炔基氧基羰基、炔基羰基、环烷氧基羰基、环烷基羰基、环烯基氧基羰基、环烯基羰基、芳基、芳基氧基、芳基氧基羰基、芳基羰基、杂环基、杂环氧基、杂环氧基羰基、杂环羰基、氨基羰基、烷基磺酰基、链烯基磺酰基、炔基磺酰基、环烷基磺酰基、环烯基磺酰基、芳基磺酰基、杂环磺酰基、氨基磺酰基等。这些二次取代基的个数可以是1个也可以为2个以上，这些二次取代基可以是相同的或者不同的。另外，2个该二次取代基可以一起形成含有或不含杂原子的环。
在上述二次取代基中，除了卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、羧基之外的各取代基可以进一步被卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、羧基、氨基、烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂环基、烷氧基、链烯基氧基、炔基氧基、环烷基氧基、环烯基氧基、芳基氧基、杂环氧基、烷基硫基、链烯基硫基、炔基硫基、环烷基硫基、环烯基硫基、芳基硫基、杂环硫基、烷基磺酰基、链烯基磺酰基、炔基磺酰基、环烷基磺酰基、环烯基磺酰基、芳基磺酰基、杂环磺酰基、烷基羰基、链烯基羰基、炔基羰基、环烷基羰基、环烯基羰基、芳基羰基、杂环羰基、烷基氧基羰基、链烯基氧基羰基、炔基氧基羰基、环烷基氧基羰基、环烯基氧基羰基、芳基氧基羰基、杂环氧基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、链烯基氨基羰基、炔基氨基羰基、环烷基氨基羰基、环烯基氨基羰基、芳基氨基羰基、杂环氨基羰基、氨基磺酰基、烷基氨基磺酰基、二烷基氨基磺酰基、链烯基氨基磺酰基、炔基氨基磺酰基、环烷基氨基磺酰基、环烯基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、杂环氨基磺酰基、烷基氨基、二烷基氨基、链烯基氨基、炔基氨基、环烷基氨基、环烯基氨基、芳基氨基、杂环氨基、烷基羰基氨基、链烯基羰基氨基、炔基羰基氨基、环烷基羰基氨基、环烯基羰基氨基、芳基羰基氨基、杂环羰基氨基、烷基磺酰基氨基、链烯基磺酰基氨基、炔基磺酰基氨基、环烷基磺酰基氨基、环烯基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、杂环磺酰基氨基等三次取代基所取代。这些三次取代基的个数可以是1个也可以为2个以上，当为2个以上时，这些取代基可以是相同的或者不同的。进而，当二次取代基为被2个三次取代基所取代的氨基时，该三次取代基可以一起形成含有或不含杂原子的环。
式(I)化合物或其盐有时存在几何异构体或光学异构体等立体异构体，本发明也包含各种异构体及它们的混合物。
上述式(I)化合物或其盐可以通过如下方法制造[制法1]使式(II) (式中、A、Hal、R1及k如上所述，L为离去基)所表示的化合物与式
(III)(式III) (式中、M1、M2、R2、R3、R4、R5、R6、Cy、p、q及r如上所述)所表示的化合物发生反应的方法。另外，作为上述L所表示的离去基，可以列举出卤素原子、烷氧基等。
制法1的反应可以在适当的溶剂的存在下进行。作为具体使用的溶剂，可以列举出苯、甲苯、二甲苯等芳烃类；戊烷，己烷，庚烷，石油醚(petroleumether)，轻石油，石油醚(petroleum benzine)等脂肪族烃类；二乙基醚、二丙基醚、二丁基醚、四氢呋喃、二氧六环等醚类；乙腈、丙腈等腈类；二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺等酸酰胺类；二甲亚砜等亚砜类；环丁砜等砜类；六甲基磷酰胺等磷酸酰胺类；氯仿、二氯甲烷、四氯化碳、1，2-二氯乙烷等卤化烃类、或者它们的混合溶剂。
在制法1的反应中，有时希望在碱的存在下进行反应。作为具体使用的碱，可以列举出三乙胺、吡啶、N-甲基吗啉、1，8-二氮杂双环[5.4.0〕-7-十一烯、N，N-二甲基苯胺等有机碱；锂、钠、钾等碱金属；碳酸锂、碳酸钠、碳酸钾等碱金属的碳酸盐；碳酸氢锂、碳酸氢钠、碳酸氢钾等碱金属的碳酸氢盐；氢化锂、氢化钠、氢化钾等碱金属的氢化物；正丁基锂、二异丙基酰胺锂、酰胺钠等。
制法1的反应通常在-70～150℃的反应温度下进行的，优选在-10～100℃的反应温度下进行。反应时间通常为0.1～48小时。
在制法1中，式(III)的化合物，相对于1mol式(II)的化合物可以0.8～2当量、优选1～1.5当量的比例使用。
制法1的反应中的各种反应条件可以各自相互适当组合。另外，在这些各种反应条件中，虽然包括通常范围的反应条件和优选范围的反应条件，但是也可以将它们适当地相互选择、组合。
使式(IV) (式中、A、Hal、M1、M2、R1、R2、R3、R4、R5、R6、Cy、k、p、q及r如上所述)所表示的化合物与硫羰基化试剂进行反应的方法。
作为在制法2的反应中使用的硫羰基化试剂，可以列举出口一ソン试剂(Lawson试剂)、五硫化二磷等。
制法2的反应可以在适当的溶剂的存在的条件下进行。作为具体使用的溶剂，可以列举出苯、甲苯、二甲苯等芳烃类；戊烷，己烷，庚烷，石油醚(petroleum ether)，轻质石油，石油醚(petroleum benzine)等脂肪族烃类；二乙基醚、二丙基醚、二丁基醚、四氢呋喃、二氧六环等醚类；二硫化碳、或者它们的混合溶剂。
制法2的反应通常在-20～150℃的反应温度下进行，优选在0～110℃的反应温度下进行。反应时间通常为0.1～48小时。
在制法2中，硫羰基化试剂相对于1mol的上述式(IV)的化合物可以0.4～2当量的比例使用。
制法2的反应中的各种反应条件可以各自相互适当组合。另外，在这些各种反应条件中，虽然包括通常范围的反应条件和优选范围的反应条件，但是也可以将它们适当地相互选择、组合。
上述式(IV)化合物或其盐可以通过在上述制法1使用使用式(V) (式中、A、Hal、R1、k及L如上所述)所表示的化合物代替式(II)化合物，与上述式(III)化合物进行反应来制造。
通过上述制法1及制法2以及它们所附带的方法得到的式(I)化合物可以通过已知的方法，例如，浓缩、减压浓缩、蒸馏、分馏、转溶、溶剂提取、结晶化、重结晶、色谱等进行分离、精制。另外，在以游离体形式得到式(I)化合物时，可以通过常规的方法形成盐。
上述式(I)化合物或其盐及其立体异构体分别单独地、或者以混合物显示细胞因子产生抑制作用。
本发明将提供用作治疗或预防伴随免疫机能的异常亢进的疾病的药物有用的细胞因子产生抑制剂。
具体实施例方式
下面记载了上述式(I)化合物或其盐的优选的实施方式。
(1)A为氮原子、C-NO2或C-CN；Hal为卤素原子；M1为可以被取代的烷基、可以被取代的链烯基、可以被取代的炔基、可以被取代的环烷基或者可以被取代的芳基；R1为卤素原子或硝基；R2、R3、R4及R5各自独立地为氢原子或者可以被取代的烷基；R6为卤素原子、可以被取代的烷基、可以被取代的杂环基、可以被取代的氨基或B-Q基(B为氧原子或硫原子；Q为氢原子、可以被取代的烷基或者可以被取代的环烷基)；Cy为环烷基、芳基或杂环基的上述式(I)化合物或其盐。
(2)p及q为0的上述式(I)化合物或其盐。
(3)A为C-NO2的上述式(I)化合物或其盐。
(4)上述的(1)化合物或其盐，A为C-NO2。
(5)上述(4)化合物或其盐，M1为可以被取代的烷基或者可以被取代的芳基。
(6)上述(4)的化合物或其盐，M2为可以被取代的氨基、氧原子又硫原子。
(7)上述(4)的化合物或其盐，Cy为杂环基。
另外，以下第1表中记载了优选的化合物的具体实例。

第1表 (第1表续) (第1表续) (第1表续) 另外，上述式(VI) -3-吡啶磺酰胺除外)的式(VI)化合物或其盐。
(6)X为CO，A为C-NO2，M1为可以被取代的烷基、可以被取代的链烯基、可以被取代的炔基或者可以被取代的环烷基，Cy为环烷基、芳基或杂环基，p及q为0的式(VI)化合物或其盐。
(7)上述(6)的化合物或其盐，Cy为苯基或6员单杂环基。
(8)X为CO，A为氮原子，p及q为0的式(VI)化合物或其盐。
(9)X为CO，A为氮原子，M1为可以被取代的烷基、可以被取代的芳基或者可以被取代的杂环基，M2为可以被取代的氨基、氧原子或单键，Cy为环烷基或杂环基，p及q为0的式(VI)化合物或其盐。
(10)上述(9)的化合物或其盐，Cy为金刚烷基或6员单杂环基。
(11)上述(9)的化合物或其盐，Cy为6员单杂环基。
上述式(I)及(VI)化合物或者它们的盐为显示出细胞因子产生抑制作用的化合物，并可以用作例如下述伴随免疫机能异常亢进的疾病的治疗药物或预防药物。
(1)选自荨麻疹、食物过敏、过敏性休克、嗜酸细胞增加综合征、哮喘、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎及异位性皮炎的至少一种过敏性疾病。
(2)抗体产生或者体液免疫异常亢进的全身性自身免疫疾病。
(3)选自慢性风湿性关节炎、I型糖尿病、桥本甲状腺炎、重症肌无力症及多发性硬化症的至少一种脏器特异性自身免疫疾病。
(4)伴随脏器移植的排异反应。
式(I)化合物通常以常见的医药制剂形态(例如，第12改正日本药局方所规定的方法)使用。该医药制剂是使用通常使用的填充剂、增量剂、结合剂、湿润剂、崩解剂、表面活性剂、润滑剂等稀释剂或者赋形剂制备的。作为医药制剂，可以根据治疗目的选择各种形态，其实例可以列举出片剂、丸剂、散剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、栓剂、液剂、悬浊剂、乳剂、注射剂(液剂、悬浊剂等)、喷雾剂、气溶胶、霜剂、软膏、洗剂、透皮试剂(贴剂、基质剂、胶带)等。
在制成片剂的形态时，作为载体，可以使用该领域广泛已知的载体。可以列举出例如，乳糖、白糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、淀粉、碳酸钙、高岭土、结晶纤维素、硅酸等赋形剂；水、乙醇、丙醇、单糖浆、葡萄糖液、淀粉液、明胶溶液、羧甲基纤维素、陶瓷、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等的结合剂；干燥淀粉、藻酸钠、琼脂粉末、海带多糖末、碳酸氢钠、碳酸钙、聚氧乙烯失水山梨糖醇脂肪酸酯类、十二烷基硫酸钠、硬脂酸单甘油酯、淀粉、乳糖等的崩解剂；白糖、三硬脂酸甘油酯、可可油脂、氢化油等的崩解抑制剂；季铵碱、十二烷基硫酸钠等吸收促进剂；明胶、淀粉等保湿剂；淀粉、乳糖、高岭土、膨润土、胶态硅酸等吸附剂；精製滑石、硬脂酸盐、硼酸粉末、聚乙二醇等润滑剂等。另外，片剂为根据需要施加了常规的剂皮的片剂，例如糖衣片、明胶包衣片、肠溶包衣片、薄膜涂布片或双层片、多层片。
在制成丸剂的形态时，作为载体，可以使用广泛使用本领域已知的载体。可以列举出例如，葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、硬化植物油、高岭土、滑石等赋形剂；阿拉伯胶粉末、黄芪胶粉末、明胶、乙醇等结合剂；海带多糖琼脂等崩解剂等。
在制成栓剂形态时，作为载体，可以广泛使用已知的载体。可以列举出例如，聚乙二醇、可可脂、高级醇、高级醇的酯类、明胶、半合成甘油酯等。
在制备成注射剂时，优选液剂、乳剂及悬浊剂被灭菌、且与血液等渗。在制成这些液剂、乳剂及悬浊剂的形态时，作为稀释剂，可以使用该领域所通常使用的所有稀释剂。例如，可以列举出水、乳酸水溶液、乙醇、丙二醇、乙氧基化异硬脂醇、聚氧化异硬脂醇、聚氧乙烯失水山梨糖醇脂肪酸酯类等。另外，在该情况等为了制备等渗性的溶液，可以使医药制剂中包含充分的量的食盐、葡萄糖或者甘油。另外，也可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、无痛化剂等。并且可以根据需要使医药制剂中包含着色剂、防腐剂、香料、调味剂、甜味剂等或其他的医药品。
式(I)化合物的量没有特别的限制，可以在很宽的范围内选择，但通常，优选为总组合物的1～70重量％、优选5～50重量％。
式(I)化合物的给药方法没有特别的限制，可以根据各种制剂的形态、患者的年龄、性别等其他条件、疾病的程度等经口或非经口给药。例如在经口给药的情形中，优选的形态可列举片剂、丸剂、液剂、悬浊剂、乳剂、颗粒剂及胶囊剂等。在非经口给药形式中，可以局部给药剂、注射剂、透皮试剂、经鼻剂、经肺剂、栓剂等形式给药。在注射剂的情形中，可以单独给药，或者在与葡萄糖、氨基酸等常见的补液混合后静脉内给药，进而优选根据需要单独在肌肉内、皮内、皮下或者腹腔内给药。另外，在栓剂的情形中，优选的方式为直肠内给药。
式(I)化合物的给药量可以根据用法、患者的年龄、性别等其他条件、疾病的程度等适当选择，通常作为有效成分的上述式(I)化合物的量为每天每1kg体重约0.05～50mg、可以一次给药或者分多次给药。另外，优选在给药单位形态中优选包含1～1000mg的有效成分。
实施例下面，对本发明的实施例(合成例和试验例)进行描述，但是本发明并不限于这些实施例。
合成例1N-(4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)苯基)-2-氯-5-硝基硫基苯甲酰胺(化合物No.1)的合成在加热回流下将410mg的N-(4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)苯基)-2-氯-5-硝基苯甲酰胺及452mg的Lawson试剂的10m的甲苯溶液搅拌一整夜。反应结束后，冷却，在减压条件下蒸馏除去溶剂。在残渣中加入乙酸乙酯，过滤除去不溶物，然后减压浓缩滤液，通过柱色谱精制所得到的粗产物，得到312mg熔点为186-187℃的N-(4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)苯基)-2-氯-5-硝基硫基苯甲酰胺(化合物No.1)。
通过与合成例1相同的方法可合成如下化合物。
·化合物No.2N-(4-(6-氯-4-三氟甲基-2-吡啶基氧基)苯基)-2-氯-5-硝基硫基苯甲酰胺(熔点186-187℃)·化合物No.3N-(3-(6-哌啶子基-4-三氟甲基-2-吡啶基氧基)丙基)-2-氯-5-硝基硫基苯甲酰胺(油状物)·化合物No.4N-(3-(6-硫代吗啉代基-4-三氟甲基-2-吡啶基氧基)丙基)-2-氯-5-硝基硫基苯甲酰胺(熔点132-133℃)·化合物No.5N-(4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基硫基)苯基)-2-氯-5-硝基硫基苯甲酰胺(熔点72-73℃)·化合物No.6N-(4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氨基)苯基)-2-氯-5-硝基硫基苯甲酰胺(熔点199-200℃)·化合物No.7N-(4-(6-氯-4-三氟甲基-2-吡啶基硫基)苯基)-2-氯-5-硝基硫基苯甲酰胺(熔点183-186℃)·化合物No.8N-(3-(6-二甲基氨基-4-三氟甲基-2-吡啶基氧基)丙基)-2-氯-5-硝基硫基苯甲酰胺(熔点102-103℃)·化合物No.9N-(4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)苯基)-2-氟-5-硝基硫基苯甲酰胺(熔点167-168℃)·化合物No.10N-(3-(6-异丙氧基-4-三氟甲基-2-吡啶基氧基)丙基)-2-氯-5-硝基硫基苯甲酰胺(油状物)·化合物No.11N-(4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)-2-氟苯基)-2-氯-5-硝基硫基苯甲酰胺(熔点193℃)
·化合物No.12N-(4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)-2-氟苯基)-2-氟-5-硝基硫基苯甲酰胺(熔点146-147℃)·化合物No.13N-(4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)苯基)-4，6-二氯硫代烟酰胺(熔点175-176℃)·化合物No.14N-(4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧基苯基)-2，3，4-三氟-5-硝基硫基苯甲酰胺(熔点124-126℃)·化合物No.15N-(4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧基苯基)-2-氟-4，5-二硝基硫基苯甲酰胺(熔点167-169℃)·化合物No.16N-(3-(6-二甲基氨基-4-三氟甲基-2-吡啶基氧基)丙基)-2-氟-5-硝基硫基苯甲酰胺(熔点130-133℃)·化合物No.17N-(4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)-3-(1H-吡咯-1-基)苯基)-2-氯-5-氰基硫基苯甲酰胺(熔点229-230℃)·化合物No.18N-(3-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基氧基)丙基)-2-氯-5-硝基硫基苯甲酰胺(熔点119-120℃)·化合物No.19N-(4-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基氧基)苯基)-2-氯-5-硝基硫基苯甲酰胺(熔点220-222℃)参考合成例1N-(2-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)乙基)-2-氯-5-硝基苯甲酰胺的合成在约55～60℃将600mg N-2-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)乙基邻苯二甲酰亚胺与85mg肼一水合物的8mL甲醇溶液搅拌约6小时。冷却后，加入16mL的醚并搅拌，过滤除去不溶物，减压浓缩滤液。将浓缩物溶于6mL乙腈中，加入190mg三乙胺、接着加入350mg 2-氯-5-硝基苯甲酰氯并搅拌约1小时。反应结束后，加水，并通过乙酸乙酯提取，芒硝干燥，减压下浓缩得到粗产品。通过柱色谱对粗产品进行精制，得到350mg熔点为126～127℃的N-(2-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)乙基)-2-氯-5-硝基苯甲酰胺。
参考合成例2N-(4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)苯基)-4-氯烟酰胺的合成在150mg 4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)苯胺和116mg三乙胺的5mL四氢呋喃溶液中，加入100mg 4-氯烟酸氯盐酸盐，搅拌约50分钟后，加水，过滤所析出的结晶。使用醚洗涤所过滤的结晶，然后干燥，得到106mg熔点为178～180℃(分解)的N-(4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)苯基)-4-氯烟酰胺。
上述式(VI)化合物的具体实例如下第2表所示。这些化合物可以按照参考合成例1和2以及上述制法1进行制造。
第2表

(第2表续)
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试验例1(IL-5产生抑制作用的评价试验)通过抗小鼠CD3抗体及IL-2对小鼠脾脏细胞进行处理，诱发细胞因子的产生。在该细胞因子产生系统中添加受试化合物，评价其抑制作用。即，将使用硼酸缓冲生理食盐溶液(pH8.5)调制成10～20μg/ml的抗小鼠CD3抗体分别以50μl/孔注入到96孔细胞培养板中，在4℃下放置18小时。除去未反应液，使用Hanks缓冲液洗涤1次，然后以50μl/孔分别注入使用含10％胎牛血清(FCS)的RPMI液调制成10ng/ml的IL-2。在阴性对照组中，除去抗CD3抗体及IL-2，仅对溶液进行处理。接着，分别注入50μl/孔的受试化合物稀释液(浓度10ppm)，向其中分别注入100μl/孔的从Balb/c小鼠(雌、7～10周龄)的脾脏制备的1×107个/ml的细胞悬浊液。在孵育器内(37℃、5％二氧化碳)培养40～48小时，然后回收培养上清液，使用ELISA法测定细胞因子产生量。
针对作为细胞因子的白介素5(IL-5)通过如下所示的ELISA法进行。首先，作为1次抗体，使用碳酸缓冲液(pH9.5)将大鼠抗小鼠IL-5抗体(エンドジエン、Code No.MM-550C)稀释至1μg/ml，以50μl/孔洒在96孔板(IWAKI、Code No.3860-096)中，在4℃下包被一晚(16～24小时)。然后，使用含10％FCS的磷酸缓冲生理食盐水pH7.2(封闭缓冲液)在37℃下将板封闭2小时(250μl/孔)。使用包含0.05％Tween20(ナカライテスク、CodeNo.281-51)的PBS(洗涤用缓冲液)将板洗涤4次，加入50μl/孔的培养上清稀释液，在室温下孵育1小时。为了制作标准曲线，使用重组小鼠IL-5(R& D Systems、Code No.405-ML)。使用洗涤用缓冲液将板洗涤4次，加入(50μl/孔)使用含有0.05％Tween20的封闭缓冲液稀释成0.5μg/ml的作为二次抗体的生物素标记的大鼠抗小鼠IL-5抗体(フア一ミジエン、CodeNo.18062D)，在室温下孵育1小时。使用洗涤缓冲液将板洗涤4次，然后，加入(50μl/孔)使用含有0.05％Tween20的封闭缓冲液稀释800倍的抗生蛋白链菌素标记的过氧化物酶(プロザイム、Code No.CJ30H001)，在室温下反应15分钟。使用洗涤缓冲液将板洗涤4次，加入100μl/孔的TNB基质溶液(Sigma，Code No.T-8665)并发色10～20分钟。加入100μl/孔的1M硫酸溶液停止反应，然后使用微板读数器(スペクトラマツクス、和光纯药工业)(波长450nm)测定吸光度。实验进行2次，求出细胞因子产生量的平均值，通过下式求出抑制率(％)。
抑制率(％)＝{1-(T-N)/(P-N)}×100其中，T受试化合物処理组的平均值、N阴性对照组的平均值、P阳性对照组的平均值。
结果是，化合物No.1～19以及第2表中的化合物分别可以观察到50％以上的细胞因子产生抑制活性。
试验例2(IFN-γ产生抑制作用的评价试验)通过与试验例1相同的方法，使用大鼠抗小鼠IFN-γ抗体(フア一ミジエン、Code No.18181D)作为1次抗体、使用生物素标记的大鼠抗小鼠IFN-γ抗体(フア一ミジエン、Code No.18112D)作为二次抗体，进行小鼠脾脏细胞培养上清中的IFN-γ的定量。为了制作标准曲线，使用重组小鼠IFN-γ(ジエンザイム、Code No.3485)。结果是，如果看所得到的IFN-γ产生抑制率(％)，则可判明本发明化合物具有IFN-γ抑制作用。
试验例3(小鼠的抗原(OVA)诱发细胞因子产生的药效评价试验)在BALB/c小鼠(从日本エスエルシ一购入，雄性，5～8周龄)的腹腔内(或皮下)免疫2μg/匹的オブアルブミン(OVA)(SIGMA社制造的No.A-5503)，其是与アラムアジユバント(硫酸铝钾、ナカライテスク社制造的No.017-27)2mg一起制备的。在其10～14天后，再次同样地在腹腔内免疫OVA1μg/アラム2mg。在第2次免疫的4天后，在小鼠的腹腔内施加5μg/ml的OVA生理食盐液0.2ml，引起细胞因子产生以及嗜酸细胞浸润。再过6小时后，使用二氧化碳气体使小鼠安乐死，在腹腔内注入pH为7.2的0.01M磷酸缓冲生理食盐水(PBS)2ml，充分揉搓腹部，然后回收腹腔内液。冷却回收液，并使用小型离心机以10000rpm的速度、在4℃下、离心10分钟，然后回收上清液，直至测定时，在-80℃下冷冻保藏。通过与试验例1和试验例2相同的ELISA法测定IL-5和INF-γ浓度。受试化合物在最终诱发的OVA腹腔内给药1小时前皮下或者经口给药。药效评价是通过与溶剂对照比较的抑制率(％)来表示的。结果是，本发明化合物具有药效。
试验例4(对小鼠的抗原(OVA)诱发嗜酸细胞浸润的药效评价试验)按照与试验例3相同的方法，回收由于OVA所引起的最终诱发24小时后的腹腔内液，然后直至测定时，在-80℃下冷冻保存。腹腔内回收液中的嗜酸细胞数的评价是参考Strath等在Journal of ImmunologicalMethods，1985年Vol.83，第209-215页所述的方法并部分修改，通过测定嗜酸性粒细胞过氧化物酶(Eosinophil peroxidase(EPO))活性进行的。即，在0.1mL包含3mM-邻苯二胺、0.1％TritonX-100、8.8mM-过氧化氢的0.05M-Tris-HCL(pH8.0)的基质缓冲液中加入0.05mLPBS稀释样品液，在室温下反应30分钟，然后添加0.05mL的4M-硫酸溶液停止酶反应。使用492nm的测定波长并使用微板读数器测定吸光度A1。另外，使用包含作为EPO阻滞剂的10mM-3-氨基-1，2，4-三唑(AMT)的上述基质缓冲液同时进行同样的操作，测定吸光度A2，求出嗜酸细胞所产生的吸光度(A1-A2)。受试化合物在最终诱发的OVA腹腔内给药1小时前皮下或者经口给药。药效评价是通过与溶剂对照比较的抑制率(％)来表示的。结果是，本发明化合物具有药效。
另外，作为本申请的优先权主张的基础的日本专利申请第2004-040444号(2003年2月17日向日本特许厅提出申请)的全部说明书的内容在此引为参考，并且作为本发明的说明书的公开内容包括在本发明中。
权利要求
1.式(I)所表示的硫代酰胺类化合物或其盐 [式中、A为氮原子、N-氧化物、C-NO2或C-CN；Hal为卤素原子；M1为可以被取代的烷基、可以被取代的链烯基、可以被取代的炔基、可以被取代的环烷基、可以被取代的环烯基、可以被取代的芳基、可以被取代的杂环基、可以被取代的氨基、氧原子、硫原子、SO或SO2；M2为可以被取代的氨基、氧原子、硫原子或单键；R1为卤素原子、氰基、硝基、可以被取代的烷基、可以被取代的烷氧基、可以被取代的烷基硫基、可以被取代的氨基或者可以被取代的杂环基；R2、R3、R4及R5各自独立地为氢原子、可以被取代的烷基、氰基或烷基氧基羰基；R6为卤素原子、氰基、硝基、可以被取代的烷基、可以被取代的链烯基、可以被取代的炔基、可以被取代的环烷基、可以被取代的环烯基、可以被取代的芳基、可以被取代的杂环基、可以被取代的氨基或B-Q基(B为羰基、羰基氧基、氧基羰基、氧原子、硫原子、SO或SO2；Q为氢原子、可以被取代的烷基、可以被取代的链烯基、可以被取代的炔基、可以被取代的环烷基、可以被取代的环烯基、可以被取代的芳基、可以被取代的杂环基或者可以被取代的氨基)；Cy为环烷基、环烯基、芳基或杂环基；k、p及q各自独立地为0～3的整数；r为0～5的整数]。
2.如权利要求1所述的化合物或其盐，其中，上述p及q为0。
3.包含权利要求1所述的化合物或其盐作为有效成分的细胞因子产生抑制剂。
4.如权利要求3所述的细胞因子产生抑制剂，其中，细胞因子为Th1型细胞因子。
5.如权利要求3所述的细胞因子产生抑制剂，其中，细胞因子为干扰素γ。
6.如权利要求3所述的细胞因子产生抑制剂，其中，细胞因子为Th2型细胞因子。
7.如权利要求3所述的细胞因子产生抑制剂，其中，细胞因子为白介素5。
8.包含如权利要求1所述的化合物或其盐作为有效成分的伴随免疫机能的异常亢进的疾病的治疗或预防药物。
9.如权利要求8所述的治疗或预防药物，其中，伴随免疫机能的异常亢进的疾病为选自荨麻疹、食物过敏、过敏性休克、嗜酸细胞增加综合征、哮喘、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎及异位性皮炎的至少一种。
10.如权利要求8所述的治疗或预防药物，其中，伴随免疫机能的异常亢进的疾病为全身性自身免疫疾病。
11.如权利要求8所述的治疗或预防药物，其中，伴随免疫机能的异常亢进的疾病为选自慢性风湿性关节炎、I型糖尿病、桥本甲状腺炎、重症肌无力症及多发性硬化症的至少一种脏器特异性自身免疫疾病。
12.如权利要求1所述的化合物或其盐的制造方法，其中，使式(II) (式中、A、R1、Hal及k定义如上述权利要求1，L为离去基)所表示的化合物，与式(III) (式中、M1、M2、R2、R3、R4、R5、R6、Cy、p、q及r定义如上述权利要求1)所表示的化合物反应。
13.如权利要求1所述的化合物或其盐的制造方法，其中，使式(IV) (式中、A、R1、Hal、k、M1、M2、R2、R3、R4、R5、R6、Cy、p、q及r定义如上述权利要求1)所表示的化合物与硫羰基化试剂反应。
全文摘要
本发明提供一种作为伴随免疫机能的异常亢进的疾病的预防或治疗药物有用的细胞因子产生抑制剂。该细胞因子产生抑制剂包含式(I)所表示的硫代酰胺类化合物或其盐作为有效成分 [式中，A为N、NO、C－NO
文档编号C07D277/74GK1918118SQ20058000504
公开日2007年2月21日 申请日期2005年2月16日 优先权日2004年2月17日
发明者加藤文法, 木村博彦, 玉井清, 山元一浩, 佐野光夫, 森新家, 冈田隆士, 植木寿彦, 东久美子 申请人:石原产业株式会社