专利名称：具有抗增殖活性的茚满酰胺的制作方法
本申请要求2004年10月15日提交的美国临时申请序号60/619,072的权益，该临时申请内容通过引用整体结合到本文中。
本发明涉及新化合物和他们的制备方法及其用于制备治疗紊乱，特别是过度增殖紊乱的药物的用途。
各种苯甲酰胺作为抗增殖剂已在WO2003/092688(AstraZeneca)、WO 2003/087057(AstraZeneca)、US2004/0142953(MethylGene)、WO 2002/069947(MethylGene)、WO2003/024448(MethylGene)、WO 2004/069823(MethylGene)、WO2004/035525(MethylGene)、WO 2004/052838(Roche)、WO2004/069803(Roche)、JP 2003/137866(Sankyo)、JP 11302173(Mitsui)和WO 2004/058234(Schering AG)中描述。
本发明一个实施方案提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐 其中A表示
m、n、p、q和r表示0、1、2或3；R1表示羟基、烷氧基、氨基或烷氨基；R2表示氢、烷基或卤素；R3表示氢、烷基或卤素；R4表示氢或烷基；R5表示氢、烷基或卤素；R6表示氢；或R6表示烷基，其中烷基可被0、1或2个选自卤素、羟基、烷氧基、氨基和烷氨基的取代基取代；或R6表示烷基羰基；或R6表示烷氨基羰基；或R6表示烷基磺酰基；R7表示氢或烷基；R8表示氢或烷基；R9表示氢、烷基、卤素、羟基或烷氧基；R10表示氢、烷基、卤素、羟基或烷氧基；R11表示氢、苯基或苯并噻唑基；R12表示任选被1个或2个独立选自烷基、烷氧基和卤素的取代基取代的吡啶基、噻唑基或吲哚基；或R12表示任选被1个或2个独立选自烷基、烷氧基、卤素和氨基的取代基取代的苯基；
R13表示任选被1个或2个独立选自烷基、烷氧基和卤素的取代基取代的吡啶基或苯基；R14表示任选被1个或2个独立选自烷基、烷氧基和卤素的取代基取代的烷基或苯基；R15表示氢、任选被1个或2个独立选自烷基、烷氧基和卤素的取代基取代的吡啶基、吡啶氧基、苯氧基或苯基；R16表示氢或烷基；X表示氧或硫。
本发明化合物可包含一个或多个不对称中心，这取决于所需的不同取代基的位置和性质。不对称碳原子可存在(R)或(S)构型。某些情况下，由于围绕特定键的旋转受限，例如，连接特定化合物两个取代芳环的中心键也将产生不对称性。环的取代基也可能存在顺式或反式构型，双键上的取代基可以Z型或E型存在。本发明范围包括所有构型(包括对映异构体和非对映异构体)。优选的化合物为具有本发明化合物的绝对构型的那些，所述化合物产生更多所需的生物活性。本发明化合物的分离的、纯化的或部分纯化的异构体或其外消旋混合物都包括在本发明范围内。所述异构体的纯化和所述异构体混合物的分离可通过本领域已知的标准技术完成。
对于包含一个或多个不对称中心的化合物，分别采用(±)、(+)或(-)来描述外消旋混合物、具有正旋光性或负旋光性的对映异构体。结构或化学名前没有(+)或(-)符号的情况下，描述的化合物为具有所示相对立体结构的外消旋混合物。
本发明还涉及化合物的互变体，这取决于化合物的结构，。
本发明所称的盐优选为本发明化合物药学上可接受的盐。
化合物(I)药学上可接受的盐包括无机酸、羧酸和磺酸的酸加成盐，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸、富马酸、马来酸和安息香酸的盐。
化合物(I)的药学上可接受的盐还包括惯用碱的盐，例如且优选碱金属盐(如钠盐和钾盐)、碱土金属盐(如钙盐和镁盐)和铵盐，所述铵盐衍生自氨或具有1-16个碳原子的有机胺，如作为实例且优选的乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二异丙胺、一乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二环己基胺、二甲基氨基乙醇、普鲁卡因、二苄胺、N-甲基吗啉、二氢枞胺、精氨酸、赖氨酸、乙二胺和甲基哌啶。
本发明所称的溶剂化物为与溶剂分子络合形成固态或液态复合物的化合物形式。水合物是溶剂化物的特殊形式，其中所述溶剂是水。
就本发明而言，除非另有说明，取代基具有如下含义烷基表示直链或支链烷基，一般具有1-6个碳原子，或在一个实施方案中，1-4个碳原子，或另一个实施方案中，1-3个碳原子，示例性代表甲基、乙基、正丙基、异丙基、叔丁基、正戊基和正己基。
烷氧基表示直链或支链烃基，具有1-6个碳原子，或在一个实施方案中，1-4个碳原子，或另一个实施方案中，1-3个碳原子并通过氧原子连接，示例性代表甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、戊氧基、异戊氧基、己氧基、异己氧基。术语“烷氧基”和“烷基氧”经常作为同义词使用。
烷氨基表示具有一个或两个(独立选择的)烷基取代基的烷氨基，示例性代表甲氨基、乙氨基、正丙氨基、异丙氨基、叔丁氨基、正戊氨基、正己氨基、N，N-二甲氨基、N，N-二乙氨基、N-乙基-N-甲氨基、N-甲基-N-丙氨基、N-异丙基-N-正丙氨基、N-叔丁基-N-甲氨基、N-乙基-N-正戊氨基和N-正己基-N-甲氨基。
烷氨基羰基表示具有一个或两个(独立选择的)烷基取代基的烷氨基羰基，示例性代表甲基氨基羰基、乙基氨基羰基、正丙基氨基羰基、异丙基氨基羰基、叔丁基氨基羰基、正戊基氨基羰基、正己基氨基羰基、N，N-二甲基氨基羰基、N，N-二乙基氨基羰基、N-乙基-N-甲基氨基羰基、N-甲基-N-正丙基氨基羰基、N-异丙基-N-正丙基氨基羰基、N-叔丁基-N-甲基氨基羰基、N-乙基-N-正戊基氨基羰基和N-己基-N-甲基氨基羰基。
烷基羰基表示具有一个烷基取代基的羰基，示例性代表甲基羰基或乙基羰基。
烷基磺酰基表示*-S(O)2烷基，示例性代表甲基磺酰基或乙基磺酰基。
卤素表示氟、氯、溴或碘。
键后面的A*或划过键的 表示分子中的连接点。
在另一实施方案中，除了中间体外，化学上不稳定的化合物不属于本发明范围。例如化学上不稳定的化合物为两个氮或氧取代基连接到单个脂族碳原子的那些。化学上不稳定的化合物的另一实例可为烷氧基连接到烯烃的不饱和碳原子形成烯醇醚的那些。此外，连接到氧的脂族碳原子不可还带有氯、溴或碘取代基，且当烷基连接到O、S或N且带有羟基取代基时，则所述羟基被至少两个碳原子从烷基连接的O、S或N处分开。
本发明另一实施方案提供了式(I)的化合物，其中A表示 本发明另一实施方案提供了式(I)的化合物，其中A表示
本发明另一实施方案提供了式(I)的化合物，其中R1表示羟基或氨基；R2表示氢；R3表示氢；R4表示氢；R5表示氢；R6表示氢；或R6表示烷基。
本发明另一实施方案提供了式(II)的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或盐的溶剂化物 其中R1表示羟基、烷氧基、氨基或烷氨基R2表示氢、烷基或卤素；R3表示氢、烷基或卤素；R4表示氢或烷基；R5表示氢、烷基或卤素；
R6表示氢；或R6表示烷基，其中烷基可被0、1或2个选自卤素、羟基、烷氧基、氨基和烷氨基的取代基取代；或R6表示烷基羰基；或R6表示烷氨基羰基；或R6表示烷基磺酰基；R7表示氢、烷基、甲氧基甲基或甲氧基乙基；R8表示氢或烷基；R9表示氢、烷基、卤素、羟基或烷氧基；R10表示氢、烷基、卤素、羟基或烷氧基；本发明另一实施方案提供了式(II)的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或盐的溶剂化物，其中R1表示羟基或氨基；R2表示氢、烷基或卤素；R3表示氢；R4表示氢；R5表示氢；R6表示氢；或R6表示烷基，其中烷基可被0、1或2个选自卤素、羟基、烷氧基、氨基或烷氨基的取代基取代；或R6表示烷基羰基；或R6表示烷氨基羰基；或R6表示烷基磺酰基；R7表示氢；R8表示氢；R9表示氢；R10表示氢。
本发明另一实施方案提供了式(II)的化合物，其中R6不是氢。
本发明另一实施方案提供了式(II)的化合物，其中R1是具有一个烷基取代基的烷氨基。
本发明另一实施方案提供了式(II)的化合物，其中R1是氨基。
一般而言，本发明中使用的化合物可通过本领域中已知的标准技术、已知方法的类似方法和/或本文中描述的方法，采用可购得或按照常规化学方法制备的原料制备。用于制备本发明化合物的特定方法取决于所需的特定化合物。胺是否被取代、分子各位置上可能的特定取代基的选择等因素都影响本发明特定化合物制备路径。本领域中普通技术人员容易识别这些因素。
本发明化合物的通用合成方法在下面流程图I-IV中描述。原料和/或中间体或购得或按照如文献步骤或特定实施例中描述的步骤中描述的类似方法制备。
式(I)化合物的右手部分、任选取代的N-苯基丙烯酰胺可通过形成以下进一步描述的结合A或结合A和B制备。左手部分可通过形成结合C制备。
对于本领域中技术人员显然能够理解合成步骤的次序取决于原料有效性和官能团相容性且不同化合物合成步骤的次序可变化。除了以下反应外，还包括保护和脱保护反应，这对于本领域技术人员而言是显然的。除非另有说明，以下所用的基团A和R1-R16如上所定义的。
结合A结合A是分子的任选取代的茚满部分的羰基化。
流程I
结合B结合B是任选取代的丙烯酸酯和任选取代的苯胺之间酰胺的形成。它可通过流程II中概述的两条路经实现。
流程II 结合C结合C可通过流程III中所示的任选取代的2，3-二氢-2-茚酮的还原胺化或还原后进一步处理形成。所述任选取代的色胺或购得或按照类似于文献步骤中描述的方法制备(如Tetrahedron Letters(2004)，45(15)，3123-3126；Journal of Medicinal Chemsitry，(1998)，41，3831-3844和Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters(2003)，13，1301-1305)。
流程III R6＝烷基进一步处理如果分子中存在如下官能团，可进行流程IV中所列转化。
流程IV
本发明化合物展现有用的药理学和药动学性能。因此它们适用作治疗人类和动物紊乱的药物。
因为其药理学性能，本发明化合物单独或与其它活性组分结合用于治疗或预防过度增殖紊乱。
本发明另一实施方案涉及采用上述化合物(包括其盐和对应组合物)治疗哺乳动物过度增殖紊乱的方法。所述方法包括给予患者一定量的能有效治疗所述患者的过度增殖紊乱的本发明化合物或其药学上可接受的盐。就本发明而言，患者是需要治疗特定过度增殖紊乱的哺乳动物，包括人。过度增殖紊乱包括但不局限于乳癌、呼吸道癌、脑癌、生殖器癌、消化道癌、尿道癌、眼癌、肝癌、皮肤癌、头癌和颈癌、甲状腺癌、副甲状腺癌及它们的远端转移等实体瘤。这些紊乱还包括淋巴癌、肉瘤和白血病。
乳癌的实例包括，但不局限于浸润性导管癌、浸润性小叶癌、导管原位癌和小叶原位癌。
呼吸道癌的实例包括，但不局限于小细胞和非小细胞肺癌及支气管腺瘤和胸膜肺母细胞瘤。
脑癌的实例包括，但不局限于脑干和hypophtalmic脑胶质瘤、小脑和大脑星细胞瘤、髓母细胞瘤、室管膜瘤及神经外胚层和松果体瘤。
男性生殖器官瘤包括，但不局限于前列腺和睾丸癌。女性生殖器官瘤包括，不局限于子宫内膜、子宫颈、卵巢、阴道和阴户癌及子宫瘤。
消化道癌包括，但不限于肛门、结肠、结肠直肠、食管、胆囊、胃、胰腺、直肠、小肠和唾液腺癌。
尿路瘤包括，但不局限于膀胱、阴茎、肾、肾盂、输尿管和尿道癌。
眼癌包括但不局限于眼内黑素瘤和视网膜母细胞瘤。
肝癌的实例包括，但不局限于肝细胞癌(带有或没有纤维板层变异体的肝细胞癌)、胆管癌(肝内胆管癌)和混合细胞型胆管癌。
皮肤癌包括，但不局限于鳞状细胞癌、卡波西(Kaposi)肉瘤、恶性黑色素瘤、美克耳(Merkel)细胞皮肤癌和非黑色素瘤皮肤癌。
头颈部癌包括，但不局限于喉/下咽骨/鼻咽/口咽癌，唇和口腔癌。
淋巴瘤包括，但不局限于艾滋病相关淋巴瘤、非何杰金(Hodgkin)淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、何杰金疾病和中枢神经系统淋巴瘤。
肉瘤包括，但不局限于软组织肉瘤、骨肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、淋巴肉瘤和横纹肌肉瘤。
白血病包括，但不局限于急性髓细胞白血病、急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病和多毛细胞白血病。
这些紊乱已在人体上得到研究，在其它哺乳动物上也存在类似的病因学，且可通过使用本发明药物组合物治疗。
本发明另一实施方案提供了含有至少一种本发明化合物的药物。本发明另一实施方案提供了含有至少一种本发明化合物和一种或多种药理学安全赋形剂或载体的药物及其用于上述目的的用途。
活性化合物可全身和/或局部起作用。为此，可以合适的方式给药，如通过口服、非肠道、肺部、鼻、舌下、舌、口腔、直肠、真皮、透皮、眼用或耳用给药或植入或移植。活性化合物可以适合这些给药方式的形式使用。
合适的口服形式为现有技术中的那些，它们通过快速释放活性化合物和/或改良或受控的方式起作用且含有结晶和/无定形和/或溶解的活性化合物，例如片剂(其为不带膜的或带膜的，如带肠溶衣或一定延迟时间后溶解的膜或控制活性化合物释放的不溶性膜)、在口腔中迅速分解的片剂或膜/圆片、或膜/注射剂、胶囊(如硬或软胶囊)、糖衣药丸、药丸、粉剂、乳液、悬浮液和溶液。使用形式的总述已在Remington′s Pharmaceutical Sciences，第18版，1990，MackPublishing Group，Enolo中公开。
非肠道给药可通过如下方式进行避免吸收步骤(如通过静脉、动脉、心脏、脊柱或腰椎给药)或包括吸收(如通过肌肉、皮下、皮内或腹腔给药)。合适的非肠道给药形式如溶液、悬浮液、乳液、注射剂和无菌粉末状注射和输注配方。这种非肠道药物组合物已在Part8，Chapter 84 of Remington′s Pharmaceutical Sciences，第18版，1990，Mack Publishing Group，Enolo中描述。
其它给药方式的合适给药形式如吸入设备(如粉末吸入器、喷雾器等)、滴鼻剂、溶液和喷雾；舌用、舌下或口服给药用片剂或膜/圆片，或胶囊、栓剂、耳和眼用制剂、阴道胶囊、水悬浮液(洗液或摇匀的混合物)、亲油悬浮液、药膏、乳剂、透皮治疗体系、乳液、糊状物、泡沫、隔离粉、植入物或移植物。
活性化合物可以技术人员已知的方式并按照现有技术采用惰性、无毒、药学上合适的辅助物转变成上述给药形式。后者(辅助物)包括如赋形剂(如微晶纤维素、乳糖、甘露糖醇等)、溶剂(如液态聚乙二醇)、乳化剂和分散剂或润湿剂(如十二烷基硫酸钠、聚氧山梨糖醇油酸酯、粘合剂(如聚乙烯吡咯烷酮)、合成和/或天然聚合物(如清蛋白)、稳定剂(如抗坏血酸等抗氧剂)、染料(如氧化铁等无机颜料)或调味和/或调香剂。
需要使用的活性成分总剂量一般将为每天约0.01mg/kg-约200mg/kg，且优选约0.1mg/kg-约20mg/kg体重。单位剂量可含有约0.5mg-约1500mg活性成分，且每天可给药一次或多次。注射给药(包括静脉、肌肉、皮下和非肠道)注射和采用输注技术的日剂量将优选0.01-200mg/kg(总体重)。直肠的日给药方案将优选0.01-200mg/kg(总体重)。阴道的日给药方案将优选0.01-200mg/kg(总体重)。局部的日给药方案将优选每日一到四次给药0.1-200mg。透皮浓度将优选维持日剂量0.01-200mg/kg。吸入的日给药方案将优选0.01-100mg/kg(总体重)。
然而，根据体重、给药方式、个别患者对活性化合物的反应、制剂类型和给药时间或间隔，可能必然偏离上述量。
如果用作活性化合物，本发明化合物优选分离成或多或少纯态，即或多或少不含合成步骤产生的残余物。纯度可通过化学师或药剂师已知的方法确定(参见Remington′s Pharmaceutical Sciences，第18版，1990，Mack Publishing Group，Enolo)。优选所述化合物超过99％纯(w/w)，同时必要的情况下，可采用超过95％、90％或85％的纯度。
除非另有说明，如下测试和实施例中的百分比按重量计算(w/w)；份按重量计算。针对液体/液体溶液报道的溶剂比、稀释比和浓度各自以体积计。
A.实施例缩写和首字母组合词当使用以下缩写和符号时，它们具有如下意义[α]D旋光性AcOH 乙酸Boc 叔丁基羧基CDI 羰基二咪唑DCM 二氯甲烷DIBAL二异丁基氢化铝DMAP 4-二甲基氨基吡啶DMF N，N-二甲基甲酰胺DIPEA二异丙基乙胺DMSO 二甲亚砜dppf 双(二苯基膦)二茂铁dppp 双(二苯基膦)丙烷EA 元素分析EDCI 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐ES 电喷Et3N三乙胺Et2O乙醚EtOAc乙酸乙酯GC-MS气相色谱法-质谱法h小时
Hex 己烷HOBT 1-羟基苯并三唑水合物HPLC 高效液相色谱法iPrOH 2-丙醇LC/MS 液相色谱法/质谱法Me甲基MeOH 甲醇min 分钟NaBH(OAc)3三乙酰氧基硼氢化钠NMR 核磁共振波谱法OTBDMS叔丁基(二甲基)甲硅烷氧基OMe 甲氧基Pd(OAc)2醋酸钯(II)PyBOP 六氟磷酸溴三吡咯烷-1-基磷RfTLC保留因子RT保留时间(HPLC)rt室温TBDMS 叔丁基二甲基甲硅氧基TFA 三氟乙酸THF 四氢呋喃TLC 薄层色谱法实验步骤LC/MS法HPLC-电喷雾质谱(HPLC ES-MS)采用以下设备获得Hewlett-Packard 1100 HPLC，配置四个泵、可变波长检测器(设定在254nm)、YMC Pro C18柱(2×23mm，120A)以及Finnigan LCQ离子阱质谱仪(电喷雾电离)。根据来源离子数量用不同离子时间在120-1200amu进行光谱扫描。洗脱液为A2％乙腈/水和0.02％TFA；洗脱液B2％水/乙腈和0.018％TFA。使用从10％至95％B(3.5min)的洗脱梯度流速为1.0mL/min，起始停留0.5分钟，95％B最终停留0.5分钟。总运行时间6.5分钟。
NMR法质子(1H)核磁共振(NMR)谱用以下设备检测Varian Mercury(300MHz)或Bruker Avance(500MHz)光谱仪，用Me4Si(δ0.00)或残余质子化溶剂(CHCl3δ7.26；MeOHδ3.30；DMSOδ2.49)作为标准物。各合成实例的NMR数据(其中一些没有显示于以下详细表征中)与其对应的结构鉴定一致。
旋光性纯化对映异构体的旋光性用以下设备检测Perkin-Elmer 241旋光仪，室温，钠D线。计算[α]D并和所用的溶剂和浓度(g/100mL)一起列出。
由Robertson Microlit Labs，Madison NJ进行元素分析。元素分析的结果(有些进行了但没有显示于以下详细表征中)，与其对应的结构鉴定一致。
制备化合物实施例2(±)-N-(2-氨基苯基)-1-{(2-羟乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酰胺
步骤1制备中间体A，1-氧代茚满-5-甲酸乙酯向5-溴-1-二氢茚酮(200mg，0.95mmol)、1，3-双(二苯基膦基)丙烷(98mg，0.24mmol)、EtOH(9mL)和三乙胺(959mg，9.48mmol)在DMF(9mL)的溶液中加入Pd(OAc)2(43mg，0.19mmol)。将所得溶液在1个大气压CO、70℃搅拌4小时。将反应混合物冷却到室温并用水稀释。用EtOAc萃取所得混合物两次并将合并的有机层用水和盐水洗涤。所述有机层用Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩获得粗产物。然后用25M biotage(15％EtOAc/己烷)洗脱纯化获得浅黄色固体1-氧代茚满-5-甲酸乙酯(122mg，63％)1H-NMR(DMSO-d6)δ8.12(s，1H)，7.92-7.95(m，1H)，7.73(d，1H)，4.32-4.37(m，2H)，3.17(t，2H)，2.68-2.72(m，2H)，1.35(t，3H).
步骤2制备中间体B，(±)-1-{[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸乙酯盐酸盐将色胺(114mg，0.71mmol)、中间体A，1-氧代茚满-5-甲酸乙酯(138mg，0.68mmol)和甲醇钛(233mg，1.36mmol)在CH2Cl2中的混合物室温搅拌过夜。将NaBH(OAc)3(357mg，1.69mmol)加入到混合物中并再搅拌一天。用1N HCl(3mL)终止反应而固体从溶液中沉淀出来，将其过滤并用CH2Cl2洗涤获得浅绿色固体1-{[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸乙酯盐酸盐(256mg，98％)LC/MS[M+H]349.1，RT 2.44min。
1H-NMR(DMSO-d6)δ10.95(s，1H)，9.51(s，1H)，9.36(s，1H)，7.84-7.89(m，3H)，7.57(d，1H)，7.35(d，1H)，7.24(d，1H)，7.6.97-7.09(m，2H)，4.88(t，1H)，4.28-4.33(m，2H)，2.91-3.23(m，6H)，2.47-2.54(m，1H)，2.22-2.27(m，1H)，1.32(t，3H).
步骤3制备中间体C，(±)-1-{(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基}[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸乙酯向中间体B，(±)-1-{[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸乙酯盐酸盐(500mg，1.30mmol)的二氯乙烷(15mL)溶液中加入(叔丁基二甲基甲硅氧基)乙醛(249mg，1.43mmol)、AcOH(93mg，1.56mmol)，然后加入NaBH(OAc)3(385mg，1.82mmol)。室温下保持1小时后，加入饱和NaHCO3来终止反应并用CH2Cl2萃取所得混合物两次。合并的有机层用水和盐水洗涤并浓缩获得粗残留物。然后用40M Biotage(15％EtOAc/己烷)洗脱纯化，获得无色油1-{(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸乙酯(572mg，87％)LC/MS[M+H]507.3，RT 3.07min.1H-NMR(DMSO-d6)δ10.71(s，1H)，7.74-7.76(m，2H)，7.27-7.36(m，3H)，7.09(d，1H)，7.02(t，1H)，6.87(t，1H)，4.62(t，1H)，4.26-4.31(m，2H)，3.57-3.65(m，2H)，2.55-2.93(m，8H)，2.20-2.24(m，1H)，1.88-1.93(m，1H)，1.31(t，3H)，0.85(s，9H)，0.00(s，6H).
步骤4制备中间体D，(±)-1-{(2-羟乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸乙酯向中间体C，1-{(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸乙酯(570mg，1.12mmol)在甲醇(5mL)中的溶液内加入5％TFA水溶液(10mL)。将混合物在40℃搅拌2小时。用饱和NaHCO3终止反应并用EtOAc萃取混合物两次。合并的有机层用盐水洗涤并浓缩获得粗残余物。用25M Biotage(50％EtOAc/己烷)洗脱纯化，获得无色油1-{(2-羟乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸乙酯(392mg，89％)LC/MS[M+H]393.2，RT 2.31min.1H-NMR(DMSO-d6)δ10.70(s，1H)，7.74-7.75(m，2H)，7.26-7.37(m，3H)，7.08(d，1H)，6.99(t，1H)，6.86(t，1H)，4.59(t，1H)，4.25-4.35(m，3H)，3.44-349(m，2H)，2.87-2.92(m，2H)，2.66-2.79(m，4H)，2.56(t，2H)，2.19-2.21(m，1H)，1.88-1.93(m，1H)，1.31(t，2H).
步骤5制备中间体E，(±)-1-{(2-羟乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸盐酸盐向中间体D，1-{(2-羟乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸乙酯(371mg，0.95mmol)在甲醇(10mL)中的溶液内加入KOH水溶液(529mg KOH、2mL水)，沉淀出白色固体并加入THF(1mL)。将混合物室温搅拌过夜。将1N HCl加入反应混合物来调整pH＜1并用乙酸乙酯萃取混合物三次。合并的有机层用Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩得到(±)-1-{(2-羟乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸HCl盐(227mg，60％)LC/MS[M+H]365.1，RT 1.83min.1H-NMR(DMSO-d6)δ10.89and10.98(s，1H)，10.22(s，1H)，7.80-8.02(m，3H)，7.20-7.41(m，2H)，6.93-7.21(m，3H)，5.26-5.55(m，2H)，3.83-4.25(m，4H)，3.48-3.82(m，2H)，2.87-3.23(m，5H)，2.69-2.86(m，1H).
步骤6制备化合物实施例2，(±)-N-(2-氨基苯基)-1-{(2-羟乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酰胺向1-{(2-羟乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸盐酸盐(121mg，0.30mmol)在CH2Cl2中的溶液内加入1，2-苯二胺(75mg，0.69mmol)、EDCI(86mg，0.45mmol)、三乙胺(122mg，1.21mmol)，然后加入HOBt(61mg，0.45mmol)。将混合物室温搅拌过夜。用NaHCO3终止反应并用CH2Cl2萃取两次。合并的有机层用盐水洗涤并浓缩得到粗产物。用反相HPLC(10-50％CH3CN/水)以流速为25mL/min洗脱纯化。将相应洗脱份合并并用饱和NaHCO3去碱和用EtOAc萃取。有机层用Na2SO4干燥、过滤并浓缩得到N-(2-氨基苯基)-1-{(2-羟乙基)[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酰胺油状物(68mg，50％)LC/MS[M+H]455.2，RT 1.98min.1H-NMR(DMSO-d6)δ10.71(s，1H)，9.56(s，1H)，7.76-7.78(m，2H)，7.27-7.38(m，3H)，7.10-7.14(m，2H)，6.88-7.02(m，3H)，6.74-6.76(m，1H)，6.53-6.60(m，1H)，4.86(s，2H)，4.61(t，1H)，4.34(t，1H)，3.45-3.51(m，2H)，2.70-2.94(m，6H)，2.57(t，2H)，2.21-2.25(m，1H)，1.91-1.98(m，1H).
按照化合物实施例2步骤1、2和6相同方法制备化合物实施例1。
制备化合物实施例3(±)-1-{乙酰基[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}-N-(2-氨基苯基)茚满-5-甲酰胺 步骤1制备中间体F，(±)-1-{乙酰基[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸乙酯向0℃下中间体B，1-{[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸乙酯盐酸盐(200mg，0.52mmol)在CH2Cl2(5mL)中的溶液内加入乙酰氯(49mg，0.62mmol)和Et3N(79mg，0.78mmol)。将混合物室温搅拌过夜。用水猝灭并用CH2Cl2萃取两次。将合并的有机层浓缩且粗产物用25S biotage(50％EtOAc/己烷)洗脱纯化，得到白色固体1-{乙酰基[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸乙酯(166mg，82％)LC/MS[M+H]391.3，RT 3.24min.1H-NMR(DMSO-d6)δ10.79and10.68(s，1H)，7.76-7.85(m，2H)，6.76-7.36(m，6H)，5.86and5.55(t，1H)，4.26-4.32(m，2H)，2.73-3.43(m，6H)，2.37-2.46(m，1H)，2.15and2.22(s，3H)，1.98-2.03(m，1H)，1.31(t，3H).
步骤2制备中间体G，(±)-1-{乙酰基[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸按照化合物实施例2步骤5相同的方法进行反应。
LC/MS[M+H]363.1，RT 2.69min.1H-NMR(DMSO-d6)δ12.82(s，1H)，10.69and10.81(s，1H)，7.70-7.88(m，2H)，6.75-7.39(m，7H)，5.55and5.87(t，1H)，3.17-3.50(m，2H)，2.68-3.13(m，4H)，2.30-2.55(m，1H)，2.22and2.15(s，3H)，1.94-2.15(m，1H).
步骤3制备化合物实施例3按照化合物实施例2步骤6相同的方法进行反应。分离出产物，为一对旋转体(rotomer)LC/MS[M+H]453.2，RT2.59min.1H-NMR(DMSO-d6)δ10.82and10.70(s，1H)，9.59-9.66(d，1H)，7.75-7.94(m，2H)，7.07-7.37(m，4H)，6.81-7.04(m，3H)，6.71-6.78(dd，1H)，6.60-6.61(dd，1H)，5.87-5.97and5.51-5.62(m，1H)，4.86(s，2H)，3.39-3.51and3.19-3.31(m，2H)，2.75-3.13(m，4H)，2.35-2.50and2.52-2.55(m，1H)，2.24and2.18(s，3H)，and1.98-2.15(m，2H).
制备化合物实施例4(±)-N-(2-氨基苯基)-1-{[(乙基氨基)羰基][2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酰胺
步骤1制备中间体H，(±)1-{[(乙基氨基)羰基][2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸乙酯0℃下，向中间体B，1-{[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸乙酯盐酸盐(200mg，0.52mmol)在CH2Cl2(5mL)中的溶液内加入异氰酸乙酯(41mg，0.57mmol)和Et3N(79mg，0.78mmol)。保持室温2小时后，用水猝灭反应物并用CH2Cl2萃取混合物两次。将合并的有机层浓缩且粗产物用25 S biotage(50％EtOAc/己烷)洗脱纯化，得到无色油状物1-{[(乙基氨基)羰基][2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸乙酯(215mg，98％)LC/MS[M+H]4203，RT 332min.1H-NMR(DMSO-d6)δ10.70(s，1H)，7.78-7.81(m，2H)，7.22-7.25(m，2H)，7.12(d，1H)，6.95-7.00(m，2H)，6.79-6.83(m，1H)，6.40(t，1H)，5.68(t，1H)，4.25-4.31(m，2H)，3.10-3.21(m，3H)，2.95-3.02(m，2H)，2.75-2.85(m，3H)，2.33-2.37(m，1H)，1.92-1.95(m，1H)，1.30(t，3H)，1.17(t，3H).
步骤2制备中间体I，(±)-1-{[(乙基氨基)羰基][2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸按照化合物实施例2步骤5相同的方法进行反应。
LC/MS[M+H]392.3，RT 2.77min.1H-NMR(DMSO-d6)δ10.71(s，1H)，7.74-7.82(m，2H)，7.16-7.28(m，2H)，7.07-7.15(d，1H)，6.92-7.04(m，2H)，6.77-6.86(t，1H)，6.34-6.46(m，1H)，5.60-5.74(t，1H)，3.08-3.28(m，3H)，2.91-3.07(m，2H)，2.70-2.89(m，3H)，2.29-2.42(m，1H)，1.88-2.01(m，1H)，1.05(t，3H).
步骤3制备化合物实施例4按照化合物实施例2步骤6相同的方法进行反应。
LC/MS[M+H]482.5，RT 2.69min.1H-NMR(DMSO-d6)δ10.72(s，1H)，9.60(s，1H)，7.78-7.88(m，2H)，7.09-7.28(m，4H)，6.82-7.04(m，4H)，6.71-6.77(d，1H)，6.56(t，1H)，6.43(t，1H)，5.71(t，1H)，4.88(s，2H)，3.11-3.31(m，3H)，2.94-3.07(m，2H)，2.77-2.91(m，3H)，2.30-2.44(m，1H)，1.88-2.03(m，1H)，1.08(t，3H).
制备化合物实施例5(±)-N-(2-氨基苯基)-1-[[2-(1H-吲哚-3-基)乙基](甲磺酰基)氨基]茚满-5-甲酰胺 步骤1制备中间体J，(±)-1-[[2-(1H-吲哚-3-基)乙基](甲磺酰基)氨基]茚满-5-甲酸乙酯0℃下，向中间体B，1-{[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酸乙酯盐酸盐(200mg，0.52mmol)在CH2Cl2(5mL)中的溶液内加入甲磺酰氯(71mg，0.62mmol)和Et3N(79mg，0.78mmol)。将混合物室温搅拌过夜。用水猝灭反应物并用CH2Cl2萃取混合物两次。将合并的有机层浓缩且然后粗产物用25S biotage(40％EtOAc/己烷)洗脱纯化，得到白色固体1-[[2-(1H-吲哚-3-基)乙基](甲磺酰基)氨基]茚满-5-甲酸乙酯(164mg，74％)
LC/MS[M+H]427.0，RT 3.42min.1H-NMR(DMSO-d6)δ10.73(s，1H)，7.85-7.87(m，2H)，7.51(d，1H)，7.24(d，1H)，6.94-6.98(m，2H)，6.85(d，1H)，6.76-6.78(m，1H)，5.43(t，1H)，4.28-4.33(m，2H)，3.32(s，3H)，2.87-3.18(m，6H)，2.61-2.68(m，1H)，2.04-2.09(m，1H)，1.32(t，3H).
步骤2制备中间体K，(±)-1-[[2-(1H-吲哚-3-基)乙基](甲磺酰基)氨基]茚满-5-甲酸按照化合物实施例2步骤5相同的方法进行反应。
LC/MS[M+H]398.8，RT 2.87min.1H-NMR(DMSO-d6)δ12.89(s，1H)，10.72(s，1H)，7.81-7.92(m，2H)，7.44-7.52(d，1H)，7.19-7.27(d，1H)，6.90-7.02(m，2H)，6.70-6.88(m，2H)，5.42(t，1H)，3.09-3.20(m，1H)，3.11(s，3H)，2.81-3.07(m，4H)，2.60-2.72(m，1H)，2.45-2.57(m，1H)，1.99-2.12(m，1H).
步骤3制备化合物实施例5按照化合物实施例2步骤6相同的方法进行反应。
LC/MS[M+H]489.1，RT 2.79min.1H-NMR(DMSO-d6)δ10.74(s，1H)，9.67(s，1H)，7.86-7.95(m，2H)，7.46-7.52(d，1H)，7.21-7.26(d，1H)，7.10-7.17(d，1H)，6.88-7.02(m，4H)，6.72-6.86(m，2H)，6.57(t，1H)，5.44(t，1H)，4.88(s，2H)，3.12(s，3H)，2.84-3.13(m，5H)，2.63-2.77(m，1H)，2.47-2.59(m，1H)，2.03-2.15(m，1H).
制备化合物实施例6(±)-N-(2-氨基苯基)-1-{乙基[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酰胺
步骤1制备中间体L，(2-氨基苯基)氨基甲酸叔丁酯向冷却的苯-1，2-二胺(30g，277.4mmol)在THF(400mL)中的溶液内缓慢加入二碳酸二叔丁酯(58.1g，266.3mmol)。将混合物加热到室温并搅拌过夜。用饱和NaHCO3猝灭反应物并然后将混合物浓缩除去大部分溶剂。将水加入混合物中并收集有机层，用盐水洗涤、Na2SO4干燥、过滤和浓缩得到粗料。将粗料与乙醚/己烷混合物(70％)一起研成粉两次，得到白色固体(2-氨基苯基)氨基甲酸叔丁酯(43.8g，76％)。
LC/MS[M+H]208.8，RT 1.51min.1H-NMR(DMSO-d6)δ8.258(s，1H)，7.156(d，1H)，6.784-6.826(m，1H)，6.638-6.661(m，1H)，6.474-6.515(m，1H)，4.803(s，2H)，1.452(s，9H).
步骤2制备中间体M，(2-{[(1-氧代-2，3-二氢-1H-茚-5-基)羰基]氨基}苯基)氨基甲酸叔丁酯向溴茚酮(1.8g，8.5mmol)、(2-氨基苯基)氨基甲酸叔丁酯(3.6g，17.1mmol)、dppf(1.2g，2.1mmol)、DIPEA(4.4g，34.1mmol)在DMF(20mL)中的混合物内加入Pd(OAc)2(0.4g，1.7mmol)。将所得溶液在70℃一个大气压一氧化碳下搅拌过夜。用水猝灭反应物并使得混合物通过celite垫。然后用EtOAc萃取滤出液三次。合并的有机层用盐水洗涤并然后真空浓缩得到粗残余物。首先用40M biotage(20％EtOAc/己烷)、然后用30％乙酸乙酯/己烷洗脱纯化先得到稍微不纯的固体。再通过用己烷研碎进一步纯化到纯产物(1.16g，37％)。
LC/MS[M+Na]389.1，RT 2.94min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.97(s，1H)，8.73(s，1H)，8.09(s，1H)，7.90-7.97(d，1H)，7.70-7.79(d，1H)，7.49-7.57(m，2H)，7.09-7.24(m，2H)，3.14-3.22(m，2H)，2.68-2.77(m，2H)，1.45(s，9H).
步骤3制备中间体N，(±)(2-{[(1-{[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}-2，3-二氢-1H-茚-5-基)羰基]氨基}苯基)氨基甲酸叔丁酯将色胺(230mg，1.4mmol)、(2-{[(1-氧代-2，3-二氢-1H-茚-5-基)羰基]氨基}苯基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.4mmol)和Ti(OMe)4(470mg，2.7mmol)在二氯甲烷(250mL)中的混合物室温搅拌过周末。将NaBH(OAc)3(719.8mg，3.4mmol)加入反应混合物中并室温搅拌6小时。加入1N HCl猝灭反应物并加入饱和NaHCO3中和混合物。然后用二氯甲烷萃取混合物两次。合并的有机层用盐水洗涤并真空浓缩得到粗残余物。用25M(100％乙酸乙酯)洗脱纯化，得到固体(2-{[(1-{[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}-2，3-二氢-1H-茚-5-基)羰基]氨基}苯基)氨基甲酸叔丁酯(549mg，79％)。
LC/MS[M+1]511.2，RT 2.68min.1H-NMR(DMSO-d6)δ10.75(s，1H)，9.74(s，1H)，8.70(s，1H)，7.68-7.79(m，2H)，7.36-7.59(m，4H)，7.27-7.34(d，1H)，7.08-7.22(m，3H)，6.88-7.07(m，2H)，4.25(t，1H)，2.72-3.04(m，6H)，2.29-2.44(m，1H)，1.72-1.86(m，1H)，1.44(s，9H).
步骤4制备中间体O，(±)(2-{[(1-{乙基[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}-2，3-二氢-1H-茚-5-基)羰基]氨基}苯基)氨基甲酸叔丁酯按照化合物实施例2步骤3相同的方法进行反应
LC/MS[M+1]539.2，RT 2.93min.1H-NMR(DMSO-d6)δ10.72(s，1H)，9.75(s，1H)，8.72(s，1H)，7.71-7.79(m，2H)，7.43-7.58(m，2H)，7.24-7.39(m，3H)，7.05-7.21(m，3H)，6.99(t，1H)，6.87(t，1H)，4.64(t，1H)，2.52-2.99(m，8H)，2.11-2.25(m，1H)，1.87-2.00(m，1H)，1.42(s，9H)，1.09(t，3H).
步骤5制备化合物实施例6，(±)-N-(2-氨基苯基)-1-{乙基[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酰胺将中间体O，(±)-(2-{[(1-{乙基[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}-2，3-二氢-1H-茚-5-基)羰基]氨基}苯基)氨基甲酸叔丁酯(82mg，0.15mmol)和TFA(1mL)在CH2Cl2(3mL)中的混合物室温搅拌4小时。将反应物真空浓缩且粗残余物用反相HPLC(10-50％CH3CN/水)以流速为25mL/min洗脱纯化。合并相应的馏分并用饱和NaHCO3去碱。将有机层浓缩得到固体N-(2-氨基苯基)-1-{乙基[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}茚满-5-甲酰胺(31mg，47％)。
LC/MS[M+1]439.2，RT 2.09min.1H-NMR(DMSO-d6)δ10.71(s，1H)，9.57(s，1H)，7.73-7.82(m，2H)，7.24-7.38(m，3H)，7.06-7.17(m，2H)，6.83-7.05(m，3H)，6.72-6.78(d，1H)，6.58(t，1H)，4.87(s，2H)，4.63(t，1H)，2.49-3.01(m，8H)，2.12-2.24(m，1H)，1.87-2.01(m，1H)，1.09(t，3H).
或者，用4N HCl(1，4-二氧杂环己烷溶液)的MeOH溶液替代在TFA的CH2Cl2溶液得到相同结果。
按照化合物实施例6步骤1、2、3和5相同方法制备化合物实施例7-14。
制备化合物实施例15(±)-(5-{[(2-氨基苯基)氨基]羰基}-2，3-二氢-1H-茚-1-基)氨基甲酸吡啶-3-基甲酯
步骤1制备中间体P，[2-({[(1Z)-1-(羟肟基)-2，3-二氢-1H-茚-5-基]羰基}氨基)苯基]氨基甲酸叔丁酯向中间体M，(2-{[(1-氧代-2，3-二氢-1H-茚-5-基)羰基]氨基}苯基)氨基甲酸叔丁酯(16.2g，44.2mmol)和盐酸羟胺(6.1g，88.4mmol)在H2O(14mL)/EtOH(440mL)的混合物中加入NaOAc(7.3g，88.4mmol)。将所得混合物搅拌过夜。早上，将水(800mL)加入稠悬浮液中并将混合物搅拌15分钟。固体通过过滤收集、用H2O洗涤两次并真空干燥得到白色固体[2-({[(1Z)-1-(羟亚氨基)-2，3-二氢-1H-茚-5-基]羰基}氨基)苯基]氨基甲酸叔丁酯(16.8g，99％收率)LC/MS[M+H]381.7，RT 3.02min.1H-NMR(DMSO-d6)δ11.11(s，1H)，9.84(s，1H)，8.71(s，1H)，7.89(s，1H)，7.80-7.84(m，1H)，7.65(d，1H)，7.47-7.55(m，2H)，7.10-7.20(m，2H)，3.03-3.09(m，2H)，2.82-2.87(m，2H)，1.43(s，9H).
步骤2制备中间体Q，(±)-(2-{[(1-氨基-2，3-二氢-1H-茚-5-基)羰基]氨基}苯基)氨基甲酸叔丁酯用氮冲洗3-颈瓶并加入披钯碳(Degussa型)(3.36g)。在N2正向流下，将20mL MeOH加入瓶中。将中间体P，[2-({[(1Z)-1-(羟亚氨基)-2，3-二氢-1H-茚-5-基]羰基}氨基)苯基]氨基甲酸叔丁酯溶解于MeOH(120mL)和EtOAc(40mL)的混合物中并将所得溶液加入瓶中。然后用氢气清洗瓶并将混合物搅拌过夜。早上，通过celite垫过滤混合物并浓缩滤出液。粗料通过硅胶垫(60％EtOAc/己烷)洗脱纯化去掉非极性杂质，然后用5％(2N氨水/MeOH)/二氯甲烷洗脱纯化泡沫固体产物(13.5g，83％收率)LC/MS[M+H]367.9，RT 2.18min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.17(s，1H)，8.71(s，1H)，7.71-7.80(m，2H)，7.53-7.57(m，1H)，7.44-7.48(m，2H)，7.10-7.19(m，2H)，4.22(t，1H)，2.86-2.92(m，1H)，2.70-2.81(m，1H)，2.34-2.43(m，1H)，2.08(br s，2H)，1.58-1.69(m，1H)，1.45(s，9H).
步骤3制备中间体R，(±)-{5-[({2-[(叔丁氧羰基)氨基]苯基)氨基]羰基}-2，3-二氢-1H-茚-1-基)氨基甲酸吡啶-3-基甲酯将CDI(3.18g，19.6mmol)溶解于THF(5mL)并冷却到0℃。3-吡啶甲醇(2.14g，19.6mmol)用THF(5mL)稀释并逐滴加入CDI搅拌溶液。1小时后，将混合物加入中间体Q，(±)-(2-{[(1-氨基-2，3-二氢-1H-茚-5-基)羰基]氨基}苯基)氨基甲酸叔丁酯(4.00g，10.9mmol)、Et3N(1.5mL，10.9mmol)和DBU(1.6mL，10.9mmol)在THF(10mL)的溶液中。将反应物室温搅拌过夜。早上，反应混合物用EtOAc稀释、用饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤。收集有机相、用Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩。粗残余物用硅胶色谱纯化，采用60-85％梯度EtOAc/己烷，得到{5-[({2-[(叔丁氧羰基)氨基]苯基)氨基]羰基}-2，3-二氢-1H-茚-1-基)氨基甲酸吡啶-3-基甲酯(3.85g，70％收率)。
LC/MS[M+H]503.0，RT 2.56min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.77(s，1H)，8.69(br s，1H)，8.59(d，1H)，8.52(dd，1H)，7.84(d，1H)，7.73-7.81(m，3H)，7.54(dd，1H)，7.40(dd，1H)，7.30(d，1H).7.10-7.19(m，2H)，5.12(s，2H)，5.04-5.12(m，1H)，2.91-3.00(m，1H)，2.79-2.88(m，1H)，2.37-2.47(m，1H)，1.81-1.93(m，1H)，1.44(s，9H).
步骤4制备化合物实施例15按照化合物实施例6步骤5相同的方法进行反应。
制备化合物实施例17(±)-N-(2-氨基苯基)-1-(乙基{[(2-苯乙基)氨基]羰基}氨基)茚满-5-甲酰胺 步骤1制备中间体S，(±)-[2-({[1-(乙氨基)-2，3-二氢-1H-茚-5-基]羰基}氨基)苯基]氨基甲酸叔丁酯按照化合物实施例2步骤2相同的方法进行反应。
LC/MS[M+1]396.1，RT 2.26min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.75(s，1H)，8.71(s，1H)，7.70-7.78(m，2H)，7.51-7.58(m，1H)，7.41-7.50(m，2H)，7.09-7.21(m，2H)，4.16(t，1H)，2.90-3.03(m，1H)，2.73-2.86(m，1H)，2.55-2.70(m，2H)，2.29-2.41(m，1H)，1.72-1.86(m，1H)，1.45(s，9H)，1.05(t，3H).
步骤2制备中间体T，(±)-[2-({[1-(乙基{[(2-苯基乙基)氨基]羰基}氨基)-2，3-二氢-1H-茚-5-基]羰基}氨基)苯基]氨基甲酸叔丁酯按照化合物实施例4步骤1相同的方法进行反应。
LC/MS[M+Na]565.2，RT 3.60min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.77(s，1H)，8.70(s，1H)，7.71-7.81(m，2H)，7.44-7.59(dd，2H)，7.07-7.34(m，8H)，6.37-6.45(m，1H)，5.71(t，1H)，327-3.36(m，2H)，2.71-3.13(m，6H)，2.26-2.38(m，1H)，1.88-2.03(m，1H)，1.45(s，9H)，0.95(t，3H).
步骤3制备化合物实施例17按照化合物实施例6步骤5相同的方法进行反应。
LC/MS[M+1]443.2，RT 2.69min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.59(s，1H)，7.73-7.87(m，2H)，7.03-7.34(m，7H)，6.89-6.99(m，1H)，6.70-6.79(d，1H)，6.51-6.61(m，1H)，6.41(t，1H)，5.71(t，1H)，4.87(s，2H)，3.26-3.38(m，2H)，2.93-3.14(m，2H)，2.72-2.92(m，4H)，2.25-2.37(m，1H)，1.86-2.00(m，1H)，0.94(t，3H).
按照化合物实施例17相同方法制备化合物实施例18和19。
制备化合物实施例20(±)-N-(2-氨基苯基)-1-[乙基(苯磺酰基)氨基]茚满-5-甲酰胺 步骤1制备中间体U，(±)-{2-[((1-[乙基(苯磺酰基)氨基]-2，3-二氢-1H-茚-5-基}羰基)氨基]苯基}氨基甲酸叔丁酯按照化合物实施例5步骤1相同的方法进行反应。
LC/MS[M+Na]558.1，RT 3.78min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.76(s，1H)，8.71(s，1H)，7.89-7.96(dd，2H)，7.59-7.80(m，5H)，7.43-7.55(m，2H)，7.05-7.21(m，2H)，6.82-6.91(dd，1H)，5.50(t，1H)，2.88-3.02(m，3H)，2.75-2.88(m，1H)，2.13-2.27(m，1H)，1.69-1.83(m，1H)，1.43(s，9H)，0.99(t，3H).
步骤2制备化合物实施例20按照化合物实施例6步骤5相同的方法进行反应。
LC/MS[M+1]436.2，RT 2.82min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.59(s，1H)，7.87-7.99(d，2H)，7.81(s，1H)，7.56-7.76(m，4H)，7.05-7.16(d，1H)，6.82-6.98(m，2H)，6.70-6.77(dd，1H)，6.55(t，1H)，5.49(t，1H)，4.86(s，2H)，2.89-3.04(m，3H)，2.73-2.87(m，1H)，2.14-2.25(m，1H)，1.67-1.84(m，1H)，0.99(t，3H).
按照化合物实施例20相同方法制备化合物实施例21-24、28-30、34和50-52。
制备化合物实施例251-[乙酰基(乙基)氨基]-N-(2-氨基苯基)茚满-5-甲酰胺 步骤1制备中间体V，(±)-{2-[({1-[乙酰基(乙基)氨基]-2，3-二氢-1H-茚-5-基}羰基)氨基]苯基}氨基甲酸叔丁酯按照化合物实施例3步骤1相同的方法进行反应。分离出产品为一对旋转体。
LC/MS[M+1]460.1，RT 3.08min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.76-9.84(m，1H)，8.64-8.79(m，1H)，7.69-7.88(m，2H)，7.43-7.58(m，2H)，7.07-7.34(m，3H)，5.49 and 5.87(t，1H)，3.20-3.34 and2.78-2.96(m，2H)，2.97-3.17(m，2H)，2.11 and 2.16(s，3H)，1.95-2.09 and 2.24-2.39(m，2H)，1.42(s，9H)，0.97 and 1.05(t，3H).
步骤2制备化合物实施例25按照化合物实施例6步骤5相同的方法进行反应。分离出产品为一对旋转体。
LC/MS[M+1]338.2，RT 2.08min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.59 and 9.62(s，1H)，7.71-7.90(m，2H)，7.21-7.28and 7.07-7.17(dd，2H)，6.89-6.98(m，1H)，6.71-6.79(d，1H)，6.51-6.62(m，1H)，5.87 and 5.48(t，1H)，4.88(s，2H)，3.20-3.34 and 2.78-2.96(m，2H)，2.97-3.17(m，2H)，2.11 and 2.16(s，3H)，1.95-2.09 and 2.24-2.39(m，2H)，0.97 and 1.05(t，3H).
按照化合物实施例25相同方法制备化合物实施例26、27、31和32。
制备化合物实施例33(±)-(5-{[(2-氨基苯基)氨基]羰基}-2，3-二氢-1H-茚-1-基)乙基氨基甲酸4-氟苯酯。
步骤1制备中间体W，{5-[({2-[(叔丁氧羰基)氨基]苯基}氨基)羰基]-2，3-二氢-1H-茚-1-基}乙基氨基甲酸4-氟苯酯将中间体S(80.0mg，0.20mmol)、氯甲酸4-氟苯酯(42.4mg，0.24mmol)和Et3N(30.7mg，0.30mmol)在DCM(3mL)的混合物搅拌过夜。早上，将溶剂真空蒸发并用反相制备HPLC(15-95％CH3CN/水)，流速25mL/min洗脱纯化粗产物。合并相应洗脱份并用饱和NaHCO3去碱、干燥和浓缩得到固体所需产物(66mg，61％)。
LC/MS[M+Na]556.1，RT3.93min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.81(s，1H)，8.71(s，1H)，7.77-7.89(m，2H)，7.33-7.58(m，3H)，6.99-7.30(m，6H)，5.62(t，1H)，3.22-3.38(m，1H)，3.01-3.22(m，2H)，2.84-2.99(m，1H)，2.41-2.61(m，1H)，2.08-2.28(m，1H)，1.44(s，9H)，1.05-1.24(m，3H).
步骤2制备化合物实施例33按照化合物实施例6步骤5相同的方法进行反应。
LC/MS[M+1]434.3，RT 2.96min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.63(s，1H)，7.78-7.91(m，2H)，7.28-7.46(m，1H)，7.00-7.26(m，5H)，6.90-6.99(m，1H)，6.71-6.79(dd，1H)，6.57(t，1H)，5.60(t，1H)，4.88(s，2H)，3.21-3.37(m，1H)，2.98-3.21(m，2H)，2.82-2.97(m，1H)，2.40-2.56(m，1H)，2.06-2.28(m，1H)，1.06-1.24(m，3H).
制备化合物实施例35(±)-N-(2-氨基苯基)-1-{[(2-甲氧基苯基)磺酰基]氨基}茚满-5-甲酰胺 步骤1制备中间体X，(±)(2-{[(1-{[(2-甲氧基苯基)磺酰基]氨基}-2，3-二氢-1H-茚-5-基)羰基]氨基}苯基)氨基甲酸叔丁酯按照化合物实施例5步骤1相同的方法进行反应。
LC/MS[M+Na]560.1，RT 3.51min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.77(s，1H)，8.71(br s，1H)，7.94(d，1H)，7.81(dd，1H)，7.71-7.75(m，2H)，7.60-7.65(m，1H)，7.54(dd，1H)，7.46(dd，1H)，4.73(q，1H)，3.89(s，3H)，2.84-2.93(m，1H)，2.66-2.77(m，1H)，2.03-2.12(m，1H)，1.74-1.85(m，1H)，1.44(s，9H).
步骤2制备化合物实施例35按照化合物实施例6步骤5相同的方法进行反应。
LC/MS[M+H]438.2，RT 2.53min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.59(s，1H)，7.92(d，1H)，7.81(dd，1H)，7.75-7.78(m，2H)，7.60-7.65(m，1H)，7.24(d，1H)，7.18(d，1H)，7.06-7.15(m，2H)，6.91-6.96(m，1H)，6.75(dd，1H)，6.54-6.59(m，1H)，4.86(s，2H)，4.72(q，1H)，3.89(s，3H)，2.83-2.93(m，1H)，2.65-2.76(m，1H)，2.01-2.10(m，1H)，1.73-1.83(m，1H).
按照化合物实施例35相同方法制备化合物实施例36-42。
制备化合物实施例43(±)-N-(2-氨基苯基)-1-({[(吡啶-4-基甲基)氨基]羰基}氨基)茚满-5-甲酰胺 步骤1制备中间体Y，(±)-{2-[({1-[(1H-咪唑-1-基羰基)氨基]-2，3-二氢-1H-茚-5-基}羰基)氨基]苯基}氨基甲酸叔丁酯将CDI(980mg，6.1mmol)悬浮于THF(5mL)中并将混合物冷却到0℃。将中间体Q(2.0g，5.4mmol)在THF(5mL)中的溶液逐滴加入搅拌的CDI中。30分钟后，将水和CH2Cl2加入反应。收集有机层，再用Na2SO4干燥并浓缩。将粗料在Et2O中研磨得到白色固体(±)-{2-[({1-[(1H-咪唑-1-基羰基)氨基]-2，3-二氢-1H-茚-5-基}羰基)氨基]苯基}氨基甲酸叔丁酯(2.3g，82％收率)。
LC/MS[M+H]462.1，RT 2.58min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.81(s，1H)，8.87(d，1H)，7.72(d，1H)，8.29(s，1H)，7.78-7.85(m，2H)，7.73(t，1H)，7.56(dd，1H)，7.47(dd，1H)，7.45(d，1H)，7.11-7.20(m，2H)，7.03(t，1H)，5.45(q，1H)，3.03-3.12(m，1H)，2.89-2.99(m，1H)，2.52-2.61(m，1H)，2.02-2.12(m，1H)，2.45(s，9H).
步骤2制备中间体Z，(±)-[2-{[(1-({[(吡啶-4-基甲基)氨基]羰基}氨基)-2，3-二氢-1H-茚-5-基}羰基)氨基]苯基}氨基甲酸叔丁酯向中间体Y，(±)-{2-[({1-[(1H-咪唑-1-基羰基)氨基]-2，3-二氢-1H-茚-5-基}羰基)氨基]苯基}氨基甲酸叔丁酯(88mg，0.19mmol)在CH2Cl2(2mL)中的溶液内加入Et3N(27μL，0.19mmol)，然后加入4-(氨基甲基)吡啶(21mg，0.19mmol)。将反应混合物搅拌过夜。将反应混合物浓缩且粗残余物通过硅胶色谱(5％MeOH/DCM)洗脱纯化，得到(±)-[2-({[1-({[(吡啶-4-基甲基)氨基]羰基}氨基)-2，3-二氢-1H-茚-5-基]羰基}氨基)苯基]氨基甲酸叔丁酯(58mg，61％收率)。
LC/MS[M+H]502.1，RT2.34min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.78(s，1H)，8.71(br s，1H)，8.47-8.50(m，2H)，7.75-7.79(m，2H)，7.55(dd，1H)，7.47(dd，1H)，7.32(d，1H)，7.24-7.27(m，2H)，7.11-7.20(m，2H)，6.57(d，1H)，6.49(t，1H)，5.17(q，1H)，4.29(d，2H)，2.91-2.99(m，1H)，2.79-2.89(m，1H)，2.41-2.49(m，1H)，1.74-1.84(m，1H)，1.45(s，9H).
步骤3制备化合物实施例43按照化合物实施例6步骤5相同的方法进行反应。
LC/MS[M+H]402.2，RT 1.10min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.59(s，1H)，8.46-8.51(m，2H)，7.77-7.83(m，2H)，7.29(d，1H)，7.24-7.27(m，2H)，7.14(d，1H)，6.92-6.97(m，1H)，6.76(d，1H)，6.53-6.60(m，2H)，6.45(t，1H)，5.17(q，1H)，4.87(s，2H)，4.29(d，1H)，2.91-2.30(m，1H)，2.78-2.88(m，1H)，2.41-2.49(m，1H)，2.73-2.83(m，1H).
按照化合物实施例43相同方法制备化合物实施例16、44-47、79-112、115-121。
制备化合物实施例48(±)-(5-{[(2-氨基苯基)氨基]羰基}-2，3-二氢-1H-茚-1-基)氨基甲酸苯酯 步骤1制备中间体AA，{5-[({2-[(叔丁氧羰基)氨基]苯基}氨基)羰基]-2，3-二氢-1H-茚-1-基}氨基甲酸苯酯按照化合物实施例33步骤1相同的方法进行反应。
LC/MS[M+Na]510.1，RT 3.59min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.80(s，1H)，8.71(br s，1H)，8.29(d，1H)，7.70-7.84(m，2H)，7.55(dd，1H)，7.48(dd，1H)，7.36-7.45(m，3H)，7.11-7.23(m，5H)，5.13(q，1H)，2.97-3.06(m，1H)，2.83-2.93(m，1H)，2.46-2.55(m，1H)，1.92-2.02(m，1H)，1.45(s，9H).
步骤2制备化合物实施例48按照化合物实施例6步骤5相同的方法进行反应。
LC/MS[M+H]388.1，RT 2.57min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.61(s，1H).8.28(d，1H)，7.79-7.87(m，2H)，7.35-7.42(m，3H)，7.12-7.24(m，4H)，6.92-6.97(m，1H)，6.74-6.78(m，1H)，6.55-6.60(m，1H)，5.12(q，1H)，4.88(s，2H)，3.38-3.47(m，1H)，2.96-3.06(m，1H)，2.83-2.91(m，1H)，1.91-2.01(m，1H).
按照化合物实施例48相同方法制备化合物实施例49。
制备化合物实施例53(±)-1-(乙酰氨基)-N-(2-氨基苯基)茚满-5-甲酰胺 步骤1制备中间体AB，(±)-[2-({[1-(乙酰氨基)-2，3-二氢-1H-茚-5-基]羰基}氨基)苯基]氨基甲酸叔丁基按照化合物实施例3步骤1相同的方法进行反应。
LC/MS[M+Na]432.1，RT 2.84min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.78(s，1H)，8.71(br s，1H)，8.28(d，1H)，7.74-7.79(m，2H)，7.53-7.56(dd，1H)，7.45-7.49(dd，1H)，7.30(d，1H)，7.11-7.19(m，2H)，5.30(q，1H)，2.94-3.02(m，1H)，2.81-2.89(m，1H)，2.38-2.46(m，1H)，1.89(s，3H)，1.77-1.87，1H)，1.45(s，9H).
步骤2制备化合物实施例53按照化合物实施例6步骤5相同的方法进行反应。
LC/MS[M+H]310.1，RT 1.40min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.59(s，1H)，8.27(d，1H)，7.82(s，1H)，7.78(d，1H)，7.27(d，1H)，7.14(d，1H)，6.92-6.97.(ddd，1H)，6.74-6.77(dd，1H)，6.55-6.60(ddd，1H)，5.29(q，1H)，4.87(d，2H)，2.93-3.02(m，1H)，2.81-2.89(m，1H)，2.37-2.46(m，1H)，1.89(s，1H)，1.76-1.86(m，1H).
按照化合物实施例53相同方法制备化合物实施例54-56。
制备化合物实施例57(±)-(5-{[(2-氨基苯基)氨基]羰基}-2，3-二氢-1H-茚-1-基)氨基甲酸3-苯基丙酯
步骤1制备中间体AC，{5-[({2-[(叔丁氧羰基)氨基]苯基}氨基)羰基]-2，3-二氢-1H-茚-1-基}氨基甲酸3-苯基丙酯将3-苯基-1-丙醇(33.0mg，0.24mmol)加入NaH(在矿物油中的60％悬浮液，11.0mg，0.28mmol)在THF(1mL)的搅拌悬浮液中。30分钟，保持搅拌，加入中间体Y，(±)-{2-[({1-[(1H-咪唑-1-基羰基)氨基]-2，3-二氢-1H-茚-5-基}羰基)氨基]苯基}氨基甲酸叔丁酯在THF(1mL)中的溶液。将反应物搅拌2小时，这时加入一滴MeOH来猝灭反应物。将所得混合物浓缩并用硅胶柱(EtOAc/Hex，梯度0％-45％)洗脱纯化残余物，得到{5-[({2-[(叔丁氧羰基)氨基]苯基}氨基)羰基]-2，3-二氢-1H-茚-1-基}氨基甲酸3-苯基丙酯(9.3mg，37％收率)。
LC/MS[M+Na]552.2，RT 3.87min。
步骤2制备化合物实施例57按照化合物实施例6步骤5相同的方法进行反应。
LC/MS[M+H]430.2，RT 2.97min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.59(s，1H)，7.76-7.83(m，3H)，7.65(d，1H)，7.24-7.31(m，3H)，7.11-7.22(m，4H)，6.92-6.96(ddd，1H)，6.74-6.77(dd，1H)，6.55-6.60(ddd，1H)，5.06(q，1H)，4.87(s，2H)，4.00(t，2H)，2.92-3.01(m，1H)，2.78-2.87(m，1H)，2.66(t，2H)，2.38-2.47(m，1H)，1.77-1.93(m，3H).
按照化合物实施例57相同方法制备化合物实施例58-59、74-78。
制备化合物实施例72，(-)-(5-{[(2-氨基苯基)氨基]羰基}-2，3-二氢-1H-茚-1-基)氨基甲酸吡啶-3-基甲酯；和化合物实施例73，(+)-(5-{[(2-氨基苯基)氨基]羰基}-2，3-二氢-1H-茚-1-基)氨基甲酸吡啶-3-基甲酯 通过如下条件将外消旋化合物实施例15，(±)-(5-{[(2-氨基苯基)氨基]羰基}-2，3-二氢-1H-茚-1-基)氨基甲酸吡啶-3-基甲酯(3.00g)分离，得到(-)异构体(RT＝11.20min，1.20g)[α]D(MeOH)＝-65.0(c，1.1)和(+)异构体(RT＝15.00min，1.20g)[α]D(MeOH)＝71.6(c，1.2)ChiracelOD-H 20×250mm，50％(1∶1 MeOH/EtOH)庚烷0.2％Et3N，流速＝15mL/min。总回收率为80％。
制备化合物实施例113(±)-N-(2-氨基苯基)-1-[(苯氨基硫代羰基)氨基]茚满-5-甲酰胺 步骤1制备中间体AD，(±)-{2-[({1-[(苯氨基硫代羰基)氨基]-2，3-二氢-1H-茚-5-基}羰基)氨基]苯基}氨基甲酸叔丁酯0℃下，向中间体Q(150mg，0.14mmol)在THF(4mL)的溶液中加入硫代异氰酸苯酯(60mg，0.45mmol)。30分钟后，将所得混合物浓缩并用硅胶柱(EtOAc/Hex，梯度0％-50％)洗脱纯化，得到{2-[({1-[(苯氨基硫代羰基)氨基]-2，3-二氢-1H-茚-5-基}羰基)氨基]苯基}氨基甲酸叔丁酯(125mg，61％收率)。
LC/MS[M+H]502.9，RT 3.57min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.79(s，1H)，9.55(s，1H)，8.71(br s，1H)，8.15(d，1H)，7.77-7.82(m，2H)，7.53-7.57(dd，1H)，7.44-7.51(m，4H)，7.27-7.33(m，2H)，7.12-7.19(m，2H)，7.06-7.12(m，1H)，5.95-6.03(m，1H)，4.88(s，2H)，2.95-3.04(m，1H)，2.85-2.94(m，1H)，2.53-2.62(m，1H)，1.90-2.00(m，1H)，1.45(s，9H).
步骤2制备化合物实施例113按照化合物实施例6步骤5相同的方法进行反应。
LC/MS [M+H]403.0，RT 2.58min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.61(s，1H)，9.54(s，1H)，8.15(d，1H)，7.79-7.86(m，2H)，7.43-7.50(m，3H)，7.27-7.33(m，2H)，7.14(d，1H)，7.08(t，1H)，6.92-6.97(ddd，1H)，6.74-6.77(dd，1H)，6.55-6.60(ddd，1H)，5.93-6.00(m，1H)，4.88(s，2H)，2.95-3.04(m，1H)，2.85-2.93(m，1H)，2.53-2.61(m，1H)，1.89-1.99(m，1H).
制备化合物实施例114(±)-N-(2-氨基苯基)-1-(1，3-苯并噻唑-2-基氨基)茚满-5-甲酰胺 步骤1制备中间体AE，(±)-[2-({[1-(1，3-苯并噻唑-2-基氨基)-2，3-二氢-1H-茚-5-基]羰基}氨基)苯基]氨基甲酸叔丁酯0℃下，将磺酰氯(44mg，0.32mmol)逐滴加入中间体AD(125mg，0.25mmol)在CH2Cl2(3mL)的溶液中。5分钟后，用水猝灭反应物并用DCM萃取混合物。收集有机层，用氨水(2N，MeOH)去碱并浓缩。粗残余物用硅胶柱(EtOAc/Hex，梯度0％-50％)洗脱纯化，得到[2-({[1-(1，3-苯并噻唑-2-基氨基)-2，3-二氢-1H-茚-5-基]羰基}氨基)苯基]氨基甲酸叔丁酯(78mg，63％收率)。
LC/MS[M+H]501.0，RT 3.24min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.80(s，1H)，8.70(br s，1H)，8.45(d，1H)，7.83(s，1H)，7.75-7.79(m，1H)，7.66-7.69(m，1H)，7.53-7.57(m，1H)，7.40-7.50(m，3H)，7.20-7.25(m，1H)，7.11-7.19(m，2H)，7.01-7.05(m，1H)，5.54(q，1H)，4.87(s，2H)，3.01-3.09(m，1H)，2.89-2.97(m，1H)，2.59-2.68(m，1H)，1.93-2.02(m，1H)，1.45(s，9H).
步骤2制备化合物实施例114按照化合物实施例6步骤5相同的方法进行反应。
LC/MS[M+H]401.0，RT 2.37min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.61(s，1H)，8.45(d，1H)，7.87(s，1H)，7.78(d，1H)，7.66-7.69(dd，1H)，7.34-7.44(m，2H)，7.20-7.25(ddd，1H)，7.14(d，1H)，7.00-7.05(ddd，1H)，6.92-6.96(ddd，1H)，6.74-6.77(dd，1H)，6.55-6.60(ddd，1H)，5.53(q，1H)，3.00-3.09(m，1H)，2.88-2.96(m，1H)，2.59-2.66(m，1H)，1.92-2.01(m，1H).
制备化合物实施例122(±)-N-(2-氨基苯基)-1-[(3-吡啶-2-基丙酰基)氨基]茚-5甲酰胺 步骤1制备中间体AF，{2-[({1-[(3-吡啶-3-基丙酰基)氨基]-2，3-二氢-1H-茚-5-基}羰基)氨基]苯基}氨基甲酸叔丁酯将中间体Q(100mg，0.27mmol)、3-吡啶基丙酸(49mg，0.33mmol)、EDCI(78mg，0.41mmol)、HOBT(55mg，0.41mmol)和Et3N(76μL，0.54mmol)溶解于CH2Cl2(3mL)中并将混合物搅拌过夜。早上，将饱和NaHCO3溶液加入反应物。分离有机相、用盐水洗涤并用Na2SO4干燥。粗料采用硅胶色谱(EtOAc/Hex，梯度80％-100％)纯化，得到固体(±){2-[({1-[(3-吡啶-3-基丙酰基)氨基]-2，3-二氢-1H-茚-5-基}羰基)氨基]苯基}氨基甲酸叔丁酯(80mg，58％收率)。
LC/MS[M+H]501.1，RT 2.41min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.77(s，1H)，8.71(br s，1H)，8.44-8.45(m，1H)，8.39-8.41(dd，1H)，8.27(d，1H)，7.76(s，1H)，7.68-7.72(m，1H)，7.62-7.65(ddd，1H)，7.53-7.56(dd，1H)，7.46-7.48(dd，1H)，7.28-7.32(ddd，1H)，7.11-7.19(m，1H)，7.02(d，1H)，5.29(q，1H)，2.79-2.98(m，4H)，2.47-2.52(m，2H)，2.34-2.43(m，1H)，2.71-2.80(m，1H)，1.45(s，9H).
步骤2制备化合物实施例122按照化合物实施例6步骤5相同的方法进行反应。
LC/MS[M+H]401.1，RT 1.20min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.59(s，1H)，8.45(d，1H)，8.40-8.41(dd，1H)，8.26(d，1H)，7.81(s，1H)，7.73(d，1H)，7.62-7.65(ddd，1H)，7.29-7.32(dd，1H)，7.13(d，1H)，6.98-6.99(d，1H)，6.92-6.97(ddd，1H)，6.74-6.77(dd，1H)，6.55-6.60(ddd，1H)，5.29(q，1H)，4.87(s，2H)，2.79-2.98(m，4H)，2.47-2.51(m，2H)，2.34-2.42(m，1H)，1.70-1.80(m，1H).
制备化合物实施例123(±)-N-(2-氨基苯基)-1-{[(吡啶-3-基氧基)乙酰基]氨基}茚满-5-甲酰胺 步骤1制备中间体AG，(±)-(2-{[(1-{[(吡啶-3-基氧基)乙酰基]氨基}-2，3-二氢-1H-茚-5-基)羰基]氨基}苯基)氨基甲酸叔丁酯
0℃下，向3-吡啶氧基乙酸(63mg，0.41mmol)在CH2Cl2(4mL)的溶液中加入几滴DMF，然后加入草酰氯(52mg，0.41mmol)。加入时看到气体逸出。将反应混合物缓慢加热到室温并搅拌1小时，随后浓缩，再溶于CH2Cl2(3mL)。向上述溶液中加入中间体Q(100mg，0.27mmol)和Et3N(76μL，0.54mmol)在CH2Cl2(1mL)中的溶液。1小时后，加入饱和NaHCO3溶液并用CH2Cl2萃取混合物，用盐水洗涤有机层。收集有机相，用Na2SO4干燥并真空浓缩，得到(2-{[(1-{[(吡啶-3-基氧基)乙酰基]氨基}-2，3-二氢-1H-茚-5-基)羰基]氨基}苯基)氨基甲酸叔丁酯(90mg，66％收率)。
LC/MS[M+H]503.1，RT 2.57min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.78(s，1H)，8.71(br s，1H)，8.60(d，1H)，8.31-8.32(dd，1H)，8.17-8.19(dd，1H)，7.79(s，1H)，7.75(d，1H)，7.54-7.56(dd，1H)，7.46-7.48(dd，1H)，7.32-7.40(m，2H)，7.24(d，1H)，7.11-7.19(m，2H)，5.43(q，1H)，4.68(s，2H)，2.97-3.05(m，1H)，2.84-2.92(m，1H)，2.40-2.47(m，1H)，1.92-2.02(m，1H)，1.45(s，9H).
步骤2制备化合物实施例123按照化合物实施例6步骤5相同的方法进行反应。
LC/MS[M+H]403.1，RT 1.34min.1H-NMR(DMSO-d6)δ9.62(s，1H)，8.61(d，1H)，8.31-8.32(dd，1H)，8.17-8.18(dd，1H)，7.84(s，1H)，7.78(d，1H)，7.32-7.40(m，2H)，7.21(d，1H)，7.12-7.15(dd，1H)，6.92-6.96(ddd，1H)，6.75-6.77(dd，1H)，6.55-6.60(ddd，1H)，5.41(q，1H)，4.88(br s，2H)，4.68(s，2H)，2.97-3.04(m，1H)，2.84-2.92(m，1H)，2.39-2.47(m，1H)，1.92-2.02(m，1H).
化合物实施例、其IUPAC名和LC-MS数据清单列于表1中。
B.生理活性体外肿瘤细胞增殖试验用于测试本发明化合物的贴壁肿瘤细胞增殖试验包括Cell Titre-Glo读数，Cell Titre-Glo由Promega建立(Cunningham，BA“A GrowingIssueCell Proliferation Assays.Modern kits ease quantification of cellgrowth”The Scientist 2001，75(13)，26和Crouch，SP等，“The use ofATP bioluminescence as a measure of cell proliferation andcytotoxicity”，Journal of Immunological Methods 1993，160，81-88)。
将HCTl 16细胞(结肠癌，产自ATCC)以3000个细胞/孔接种到96孔板中的10％肽牛血清完全溶媒中并在37℃培养24小时。接种24小时后，以在最终DMSO浓度为0.2％的系列稀释液中最终浓度为10nM-20μM加入测试化合物。在加入测试化合物后细胞在37℃完全增长溶媒中培养72小时。第4天，采用Promega Cell Titer GloLuminescent检测试剂盒，将细胞溶解并将100毫升底物/洗脱液混合物加入各孔中，混合并在室温下培养8分钟。将样品放在发光酶标仪读数测得各孔中细胞溶解产物中存在的ATP量，这对应于该孔中的活细胞数。培养24小时读到的值减去第0天的值。为了确定IC50，采用线性回归分析确定采用这种试验方式能50％抑制细胞增殖的药物浓度。
本发明代表性化合物在用HCTl16进行的试验显示出对肿瘤细胞增殖的明显抑制(10uM，＞50％抑制)。
C.药物组合物的实施例可按照以下将本发明化合物转变成药物制剂片剂组合物100mg实施例1化合物、50mg乳糖(一水合物)、50mg玉米淀粉(天然)、10mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP 25)(产自BASF，Ludwigshafen，Germany)和2mg硬脂酸镁片剂重量为212mg，直径为8mm，曲率半径为12mm。
制备将活性组分、乳糖和淀粉的混合物和5％(m/m)的PVP水溶液制成颗粒。干燥后，将颗粒与硬脂酸镁混合5分钟。混合物采用常规压片机(片剂规格，参见上述)模制。施加的模制力一般为15kN。
口服给药悬浮液组合物1000mg实施例1的化合物、1000mg乙醇(96％)、400mgRhodigel(黄原胶，产自FMC，Pennsylvania，USA)和99g水。
本发明化合物一次剂量100mg由10ml口服悬浮液提供。
制备将Rhodigel悬浮于乙醇中并将活性组分加入该悬浮液中。搅拌加入水。连续搅拌约6小时直到Rhodigel溶胀完成。
权利要求
1.一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐 其中A表示 R11-(CH2)m-*， m、n、p、q和r表示0、1、2或3；R1表示羟基、烷氧基、氨基或烷氨基；R2表示氢、烷基或卤素；R3表示氢、烷基或卤素；R4表示氢或烷基；R5表示氢、烷基或卤素；R6表示氢；或R6表示烷基，其中烷基可用0、1或2个选自卤素、羟基、烷氧基、氨基和烷氨基的取代基取代；或R6表示烷基羰基；或R6表示烷氨基羰基；或R6表示烷基磺酰基；R7表示氢或烷基；R8表示氢或烷基；R9表示氢、烷基、卤素、羟基或烷氧基；R10表示氢、烷基、卤素、羟基或烷氧基；R11表示氢、苯基或苯并噻唑基；R12表示任选被1个或2个独立选自烷基、烷氧基和卤素的取代基取代的吡啶基、噻唑基或吲哚基；或R12表示任选被1个或2个独立选自烷基、烷氧基、卤素和氨基的取代基取代的苯基；R13表示任选被1个或2个独立选自烷基、烷氧基和卤素的取代基取代的吡啶基或苯基；R14表示任选被1个或2个独立选自烷基、烷氧基和卤素的取代基取代的烷基或苯基；R15表示氢，任选被1个或2个独立选自烷基、烷氧基和卤素的取代基取代吡啶基、吡啶氧基、苯氧基或苯基；R16表示氢或烷基；X表示氧或硫。
2.权利要求1的化合物，其中A表示 R11-(CH2)m-*，
3.权利要求1的化合物，其中R1表示羟基或氨基；R2表示氢；R3表示氢；R4表示氢；R5表示氢；R6表示氢；或R6表示烷基。
4.用于紊乱治疗的权利要求1的化合物。
5.一种药物组合物，所述药物组合物包含权利要求1的化合物。
6.权利要求5的药物组合物，所述药物组合物与至少一种药学上可接受的、药学上安全的载体或赋形剂混合。
7.一种制备权利要求6的药物组合物的方法，所述方法包括将至少一种权利要求1的化合物与至少一种药学上可接受的、药学上安全的载体或赋形剂结合，混合该混合物并将所述混合物制成合适给药剂型。
8.权利要求1的化合物在制备用于治疗过度增殖紊乱的药物组合物中的用途。
9.权利要求5的药物组合物，所述药物组合物用于治疗过度增殖紊乱。
10.一种治疗哺乳动物疾病或病症的方法，所述方法包括给予有需要的哺乳动物有效量的权利要求1的化合物。
11.一种治疗哺乳动物过度增殖紊乱的方法，所述方法包括给予有需要的哺乳动物有效量的权利要求1的化合物。
全文摘要
本发明涉及新化合物和其制备方法及其在制备用于治疗紊乱，特别是过度增殖紊乱的药物中的用途。
文档编号C07D213/40GK101080389SQ200580042823
公开日2007年11月28日 申请日期2005年10月14日 优先权日2004年10月15日
发明者Y·王, T·李, E·穆尔 申请人:拜尔药品公司