作为细胞增殖抑制剂的吡嗪酮的制作方法

专利名称：作为细胞增殖抑制剂的吡嗪酮的制作方法
技术领域：
本发明涉及抑制动物来源的微管功能的方法，所述方法使所述微管与式1的化合物，包括其前药及其所有的药学上可接受的盐、N-氧化物、水合物、溶剂合物、晶体形式或几何和立体异构体接触。
本发明涉及抑制不期望的动物细胞增殖的方法，所述方法包括使所述细胞或其中不期望所述细胞增殖的组织或器官与式1的化合物接触并且其中所述化合物抑制微管功能。
本发明还涉及治疗个体体内的细胞过度增殖性病症的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的式1的化合物，包括其所有的前药、其药学上可接受的盐、N-氧化物、水合物、溶剂合物、晶体形式或几何和立体异构体。
本发明还涉及治疗个体体内的癌症的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的式1的化合物，包括其所有的前药、其药学上可接受的盐、N-氧化物、水合物、溶剂合物、晶体形式或几何和立体异构体。
本发明还涉及式1的化合物作为用于个体体内细胞过度增殖性病症的治疗的用途。
本发明还涉及式1的化合物在用于个体体内的细胞过度增殖性病症的治疗性和/或预防性治疗的药物的制备中的用途。
发明详述 在本发明的整个说明书中，词语“包括(comprise)”或其变体如“包括(comprises)”或“包括(comprising)”应被理解为意指涵盖所示元素、整数、或步骤、或者元素、整数或步骤的组，但不排除任何其它元素、整数、或步骤、或者元素、整数或步骤的组。
此外，除非明确相反地说明，“或(者)”是指包含性的“或(者)”而不是排他性的“或(者)”。例如，条件A或B由以下任一情况满足A为真(或存在)且B为假(或不存在)，A为假(或不存在)且B为真(或存在)，以及A和B二者都为真(或存在)。
此外，本发明的元素或组分前面的不定冠词“a”和“an”无意限制所述元素或组分出现(即发生)的数目。因此“a”或“an”应该被理解为包括一个或至少一个，并且除非数目明显是指单数，所述元素或组分的单数词形式也包括复数词形式。例如，本发明的组合物包含生物学有效量的式1化合物应该被认为所述组合物包含一种或至少一种式1的化合物。
“抑制微管功能”指通过任何作用机理，包括抑制聚合、引起微管蛋白聚集体的低聚或高级形式的解聚、或稳定聚合的微管蛋白或微管结构，来中断微管蛋白聚合和解聚的动态过程。
“个体”或“需要治疗的动物”可以是需要治疗的人，但也可以是需要治疗的其它动物，例如伴侣动物(例如狗、猫等)、农场动物(例如牛、猪、马、鸡等)和实验室动物(例如大鼠、小鼠、豚鼠等)。因此，除了例如人类的个体外，本发明的方法可以治疗各种其它哺乳动物，包括其它灵长类动物。例如，可以治疗哺乳动物，包括但不限于牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、豚鼠、大鼠或其它牛、羊、马科、犬科、猫科、啮齿动物或鼠科动物。而且，所述方法也可以在其它物种如鸟类(例如鸡)中实践。
因此，“动物细胞”是在包括人和包括上面例举的那些的动物体内发现或产生的细胞。所述动物可以是哺乳动物或非哺乳动物包括上面提到的鸟类。
“治疗有效量”是与没有治疗时的典型临床结果相比，产生由治疗所致的改善的临床结果的化合物的量。“改善的临床结果”包括接受治疗的个体的更长的预期寿命或不希望的症状的缓解。它还可以包括减缓或阻止肿瘤生长速率、引起肿瘤尺寸收缩、降低转移速率和/或降低异常或不期望的增殖和/或血管发生的速率。它还可以包括抑制微管功能。
“有效量”或“足够量”指有效压抑、抑制或消退(regress)不期望的活性的化合物或组合物的量。
术语化合物的“给药”和“给药”化合物应该被理解为指向需要治疗的个体提供本发明的化合物。
本文所用的术语“组合物”意指包括包含特定量的特定成分的产品以及由特定量的特定成分的组合直接或间接产生的任何产品。
“药学上可接受的”或“生理学上可接受的”指化合物的盐、N-氧化物、水合物、溶剂合物、晶体形式、几何和立体异构体或载体、稀释剂或赋形剂必须与制剂中的其它成分相容并且一般对动物细胞系统无害。
本文所用的“细胞过度增殖性病症”意指个体体内以存在不期望的增殖细胞为特征的任何疾病状态，其中所述细胞增殖是所述疾病状态的原因。
在以上叙述中，单独使用或在复合词例如“烷硫基”或“卤代烷基”中使用的术语“烷基”包括直链或支链烷基，如甲基、乙基、正丙基、异丙基或不同的丁基、戊基或己基异构体。“烯基”包括直链或支链烯，如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基和不同的丁烯基、戊烯基和己烯基异构体。“烯基”还包括多烯，如1，2-丙二烯基和2，4-己二烯基。“炔基”包括直链或支链炔，如乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基和不同的丁炔基、戊炔基和己炔基异构体。“炔基”也可以包括含有多个三键的部分，如2，5-己二炔基。“烷氧基”包括例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基和不同的丁氧基、戊氧基和己氧基异构体。“烷氧基烷基”指在烷基上的烷氧基取代。“烷氧基烷基”的例子包括CH3OCH2、CH3OCH2CH2、CH3CH2OCH2、CH3CH2CH2CH2OCH2和CH3CH2OCH2CH2。“二烷氧基烷基”指在烷基上的二烷氧基取代。“二烷氧基烷基”的例子包括(CH3O)2CH2、(CH3O)2CH2CH2、(CH3CH2O)2CH2和(CH3CH2O)2CH2CH2。“烷硫基”包括支链或直链烷硫基部分如甲硫基、乙硫基和不同的丙硫基、丁硫基、戊硫基和己硫基异构体。“烷基亚磺酰基”包括烷基亚磺酰基的两种对映异构体。“烷基亚磺酰基”的例子包括CH3S(O)、CH3CH2S(O)、CH3CH2CH2S(O)、(CH3)2CHS(O)和不同的丁基亚磺酰基、戊基亚磺酰基和己基亚磺酰基异构体。“烷基磺酰基”的例子包括CH3S(O)2、CH3CH2S(O)2、CH3CH2CH2S(O)2、(CH3)2CHS(O)2和不同的丁基磺酰基、戊基磺酰基和己基磺酰基异构体。“烷基氨基”、“二烷基氨基”等与以上例子类似地定义。“烷基环烷基氨基”指用一个氨基取代的烷基和环烷基。“烷基环烷基氨基”的例子包括甲基环丙基氨基和甲基环己基氨基。“环烷基”包括例如环丙基、环丁基、环戊基和环己基。“环烯基”包括如环戊烯基和环己烯基的基团以及如1，3-和1，4-环己二烯基的具有多于一个双键的基团。“环烷基烷基”的例子包括环丙基甲基、环戊基乙基和与直链或支链烷基键合的其它环烷基部分。“烷基环烷基”指在环烷基基团上的烷基取代。例子包括4-甲基环己基和3-乙基环戊基。“烷基环烷基烷基”指在环烷基烷基部分上的烷基取代。例子包括4-甲基环己基甲基和3-乙基环戊基甲基。“烷基环烷基环烷基”指在环烷基部分上的烷基环烷基取代。例子包括4-甲基-4-环己基环己基和2-甲基-2-环丙基环丙基。术语“碳环”指其中形成环骨架的原子只选自碳的环。术语“芳环体系”指其中多环体系是芳香性的完全不饱和的碳环和杂环。“芳香性”指每个环原子基本上处于同一平面并且具有与所述环平面垂直的p-轨道，并且其中(4n+2)个π电子(其中n是0或正整数)与环缔合以符合休克尔规则。术语“非芳香性碳环体系”指完全饱和碳环以及部分或完全不饱和的碳环，其中所述环体系内没有环是芳香性的。术语“非芳族杂环体系”指完全饱和杂环以及部分或完全不饱和的杂环，其中所述环体系内没有环是芳香性的。所述杂环体系可以通过代替任何可用的碳或氮上的氢，经由所述碳或氮连接。术语“杂芳环”指完全芳香性杂环，其中至少一个环原子不是碳并包含独立选自氮、氧和硫的1-4个杂原子，条件是每个杂环包括至多4个氮、至多2个氧和至多2个硫。术语“杂芳族双环体系”指这样的双环，其中包含至少一个杂原子并且其中所述双环体系的至少一个环是芳香性的。杂芳环或杂双环体系可以通过代替任何可用的碳或氮上的氢，经由所述碳或氮连接。本领域技术人员会理解，由于氮需要可用的孤对电子来氧化成氧化物，因此并非所有的含氮杂环都能够形成N-氧化物；本领域技术人员会识别能够形成N-氧化物的含氮杂环。本领域技术人员还会认识到叔胺能够形成N-氧化物。用于制备杂环和叔胺的N-氧化物的合成方法是本领域技术人员熟知的，包括用过氧酸如过氧乙酸和间氯过氧苯甲酸(MCPBA)、过氧化氢、烷基过氧化氢如叔丁基过氧化氢、过硼酸钠和双环氧乙烷(dioxirane)如二甲基双环氧乙烷来氧化杂环和叔胺。这些用于制备N-氧化物的方法已在文献中得到广泛描述和综述，参见例如T.L.Gilchrist，Comprehensive Organic Synthesis，vol.7，pp748-750；S.V.Ley，Ed.，Pergamon Press；M.Tisler和B.Stanovnik，ComprehensiveHeterocyclic Chemistry，vol.3，pp 18-20；A.J.Boulton和A.McKillop，Eds.，Pergamon Press；M.R.Grimmett和B.R.T.Keene，Advances inHeterocyclic Chemistry，vol.43，pp149-161，A.R.Katritzky，Ed.，AcademicPress；M.Tisler和B.Stanovnik，Advances in Heterocyclic Chemistry，vol.9，pp 285-291；A.R.Katritzky和A.J.Boulton，Eds.，Academic Press；以及G.W.H.Cheeseman和E.S.G.Werstiuk，Advances in Heterocyclic Chemistry，vol.22，pp 390-392，A.R.Katritzky和A.J.Boulton，Eds.，Academic Press。
在单独或在复合词语如“卤代烷基”中，术语“卤素”包括氟、氯、溴或碘。此外，当用于复合词语如“卤代烷基”时，所述烷基可以是用相同或不同的卤素原子部分或完全取代的。“卤代烷基”的例子包括F3C、ClCH2、CF3CH2和CF3CCl2。术语“卤代烯基”、“卤代炔基”、“卤代环烷基”、“卤代烷氧基”、“卤代烷硫基”等与术语“卤代烷基”类似地定义。“卤代烯基”的例子包括(Cl)2C＝CHCH2和CF3CH2CH＝CHCH2。“卤代炔基”的例子包括HC≡CCHCl、CF3C≡C、CCl3C≡C和FCH2C≡CCH2。“卤代烷氧基”的例子包括CF3O、CCl3CH2O、HCF2CH2CH2O和CF3CH2O。“卤代烷硫基”的例子包括CCl3S、CF3S、CCl3CH2S和ClCH2CH2CH2S。“卤代烷基亚磺酰基”的例子包括CF3S(O)、CCl3S(O)、CF3CH2S(O)和CF3CF2S(O)。“卤代烷基磺酰基”的例子包括CF3S(O)2、CCl3S(O)2、CF3CH2S(O)2和CF3CF2S(O)2。“三烷基甲硅烷基”包括连接到硅原子并通过硅原子连接的3个支链和/或直链烷基，例如三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基和叔丁基二甲硅烷基。
取代基中碳原子的总数用前缀“Ci-Cj”表示，其中i和j是1-8的数字。例如，C1-C4烷基磺酰基指甲磺酰基至丁磺酰基；C4环烷基烷基指环丙基甲基；C5环烷基烷基指例如环丙基乙基或环丁基甲基；C6环烷基烷基指用烷基取代的包含总共六个碳原子的各种环大小的环烷基，例子包括环戊基甲基、1-环丁基乙基、2-环丁基乙基和2-环丙基丙基。“烷基羰基”的例子包括C(O)CH3、C(O)CH2CH2CH3和C(O)CH(CH3)2。“烷氧羰基”的例子包括CH3OC(＝O)、CH3CH2OC(＝O)、CH3CH2CH2OC(＝O)、(CH3)2CHOC(＝O)和不同的丁氧羰基和戊氧羰基异构体。“烷基氨基羰基”的例子包括CH3NHC(＝O)-、CH3CH2NHC(＝O)-、CH3CH2CH2NHC(＝O)-、CH3)2CHNHC(＝O)-和不同的丁基氨基羰基或戊基氨基羰基异构体。“二烷基氨基羰基”的例子包括(CH3)2NC(＝O)-、(CH3CH2)2NC(＝O)-、CH3CH2(CH3)NC(＝O)-、(CH3)2CHN(CH3)C(＝O)-和CH3CH2CH2(CH3)NC(＝O)-。在上面的叙述中，当式1化合物由一个或多个杂环组成时，所有取代基均通过代替任何可用碳或氮上的氢，经由所述碳或氮与这些环相连。
当化合物被带有表示取代基数目大于1的下标的所述取代基取代时，则所述取代基独立地选自所定义的取代基组。此外，当所述下标指示范围例如(R)i-j时，则取代基的数目可以选自i-j之间的整数(含端值)。
当基团包含可以是氢的取代基如R3、R4、R5、R6、R7、R10、R11、R12、R13、R14、R16、R22、R23、R25、R26、R31、R32或R33时，则当该取代基为氢时，应认识到这相当于所述基团未被取代。当R2和R7结合到一起作为-N＝C(R16)-时，左手的键被连接作为R2，右手的键被连接作为R7。结合关于R1、R2、R4、R5、R6、R22、R23、R30、R31、R32、J、G1和G2所列的基团，术语“任选取代的”指未取代的或具有至少一个非氢取代基的基团。这些基团可以用所能容纳的那么多的任选取代基通过在任何可用碳或氮原子上用非氢取代基代替氢来取代。通常，任选取代基(当存在时)的数目为1-5。关于R2所述的用至多5个取代基任选取代的5-或6-元杂芳环的例子包括展示1例举的环H-1至H-24(其中每个R20独立地是R24，且r是0-5的整数)和展示3例举的环U-62(其中环中的N是未取代的)。关于J所述的用至多5个取代基任选取代的5-或6-元杂芳环的例子包括展示1例举的环H-1至H-24，其中每个R20独立地是R29且r是0-5的整数。关于G2所述的用至多4个取代基任选取代的5-或6-元杂芳环的例子包括展示1例举的环H-1至H-24，其中每个R20独立地是R18且r是0-4的整数。关于R26所述的用至多4个取代基任选取代的5-或6-元杂芳环的例子包括展示1例举的环H-1至H-24，其中每个R20独立地是R36且r是0-4的整数。关于R2所述的用1-5个取代基任选取代的8-、9-或10-元杂芳族双环的例子包括展示2例举的环B-1至B-39，其中每个R20独立地是R24且r是0-5的整数。关于J所述的用1-5个取代基任选取代的8-、9-或10-元杂芳族双环的例子包括展示2例举的环B-1至B-39，其中每个R20独立地是R29且r是0-5的整数。关于R2所述的各自用至多5个取代基任选取代的5-或6-元饱和或部分饱和杂环的例子包括展示3例举的环U-20至U-68，其中4个R20独立地是R24且r是0-5的整数。关于G1所述的任选包括选自C(＝O)、C(＝S)、S(O)和S(O)2的1或2个环成员并用1-4个取代基任选取代的3-至7-元非芳族碳环或杂环的例子包括展示3例举的环U-1至U-77，其中R20是R17且r是0-4的整数。尽管R20基团出现在展示1、展示2和展示3所示的结构中，但注意它们并非必然存在，因为它们是任选的取代基。需要取代以满足化学价的氮原子用H或R20取代。注意当展示3例举的环U-54或U-62的氮是未取代的时，则U-54或U-62具有6-元芳环结构并属于展示1例举的基团。注意展示1的一些H基团只能用少于4个R20基团取代，如关于G2所述(例如H-1至H-24)。注意展示2的一些B基团只能用少于5个R20基团取代(例如B-5至B-9、B-21至B-23、B-25至B-27和B-37至B-39)。注意展示3的一些U基团只能用少于5个R20基团取代(例如U-1、U-6、U-10、U-11、U-16至U-19、U-24至U-40、U-54、U-56至U-60、U-62至U-64和U-66至U-68)。注意当(R20)r和H、B或U基团之间的连接点示为浮动的时，则(R20)r可以与H、B或U基团的任何可用碳原子或氮原子相连。注意当H、B或U基团的连接点示为浮动的时，则H、B或U基团可以通过代替氢原子，经由H、B或U基团的任何可用碳原子或氮原子与式1的剩余部分相连。
展示1

展示2

展示3


本发明的化合物可以作为一种或多种立体异构体存在。各种立体异构体包括对映异构体、非对映异构体、阻转异构体和几何异构体。本领域技术人员会理解，当一种立体异构体相对于其他立体异构体富集时，或者当其与其他立体异构体分离时，可能更具活性和/或可能表现出有利的效果。另外，本领域技术人员知道如何分离、富集和/或选择性地制备所述立体异构体。因此，本发明包括选自式1、其N-氧化物和药学上合适的盐的化合物。本发明的化合物可以作为立体异构体的混合物、单独的立体异构体或旋光活性形式存在。例如，当R1是2-甲基丁基时，式1在用星号(*)标出的碳原子处具有手性中心。本发明包括外消旋混合物，还包括与所述外消旋混合物相比富集的式1的对映异构体的化合物。

本发明包括式1化合物的基本上纯的对映异构体，例如式1m和式1m’(式1，其中R1是2-甲基丁基)。
当化合物是对映异构体富集的时，一种对映异构体的存在量大于其它对映异构体，富集程度可以通过表述“对映异构体过量”(“ee”)来定义，该表述的定义为(2x-1)·100％，其中x是混合物中主要对映异构体的摩尔分数(例如20ee％对应于60:40对映异构体比率)。
对于其中R1是2-甲基丁基的式1化合物，相信更具活性的对映异构体是这样的对映异构体，其中连接到用星号(*)标出的碳原子上的氢原子处于由与用星号(*)标出的碳原子相连的三个非氢原子所限定的平面之下，如式1m所示。在式1m中用星号(*)标出的碳原子具有S构型。
优选地，本发明的组合物具有至少50％对映异构体过量；更优选至少75％对映异构体过量；还更优选至少90％对映异构体过量；最优选至少94％对映异构体过量的活性更高的异构体。特别要注意活性更高的异构体的对映异构体纯的实施方案。
尤其是，当J是在环的邻位用R29取代的苯环、或类似的萘、5-或6-元杂芳环或者8-、9-或10-元杂芳族双环体系时，其中R29如发明概述中对J环或环体系取代基所述，则式1具有区分两种阻转异构体(手性旋转异构体)的手性轴。式1的阻转异构体是可以分离的，因为围绕着连接J的单键的旋转受阻或被大大地阻滞了。本发明包括这种阻转异构体的外消旋混合物。而且还包括与所述外消旋混合物相比富集的式1n或1n’的阻转异构体的化合物。

当本发明的化合物包含碱性基团如胺时，所述化合物的盐包括与无机或有机酸如氢溴酸、盐酸、硝酸、磷酸、硫酸、乙酸、丁酸、富马酸、乳酸、马来酸、丙二酸、草酸、丙酸、水杨酸、酒石酸、琥珀酸、4-甲苯磺酸或戊酸形成的酸加成盐。
当本发明的化合物含有酸性基团例如羧酸或酚时，所述化合物的盐还包括与有机碱(例如吡啶、氨或三乙胺)或无机碱(例如钠、钾、锂、钙、镁或钡的氢化物、氢氧化物或碳酸盐)形成的盐。
本发明的实施方案还包括 实施方案A抑制动物细胞的不期望的增殖的方法，所述方法包括使所述细胞或其中不期望所述细胞增殖的组织或器官与式1的化合物接触，其中R1是NR4R5、-N＝CR19R21、OR6、G1或G2；或者是C1-C8烷基、C2-C8烯基、C3-C8炔基、C3-C8环烷基、C3-C8环烯基、C4-C8环烷基烷基、C4-C8烷基环烷基、C4-C8环烯基烷基或C4-C8烷基环烯基，它们各自用独立选自卤素、氰基、硝基、羟基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4烷基氨基、C1-C4烷基亚磺酰基、C1-C4烷基磺酰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基羰基、C3-C6三烷基甲硅烷基、G1和G2的一个或多个取代基任选取代。
实施方案A1实施方案A的方法，其中R1是C1-C8烷基、C1-C8卤代烷基、C3-C8环烷基、C4-C8环烷基烷基、NR4R5、-N＝CR19R21、G1或G2。
实施方案A2实施方案A1的方法，其中R1是C2-C6烷基、C2-C6卤代烷基、C4-C8环烷基烷基、NR4R5、G1或G2。
实施方案A3实施方案A2的方法，其中R1是C2-C6烷基、C2-C6卤代烷基或C4-C8环烷基烷基。
实施方案A4实施方案A3的方法，其中R1是C3-C6烷基、C3-C6卤代烷基或C4-C6环丙基烷基。
实施方案A5实施方案A2的方法，其中R1是NR4R5。
实施方案A6实施方案A2的方法，其中R1是G1。
实施方案A7实施方案A2的方法，其中R1是G2。
实施方案A8实施方案A5的方法，其中R4和R5各自独立地是H、C1-C8烷基或C1-C8卤代烷基。
实施方案A9实施方案A8的方法，其中R4和R5各自独立地是H、C3-C6烷基或C3-C6卤代烷基。
实施方案A10实施方案A6的方法，其中G1是5-至6-元非芳族碳环或杂环，任选包含选自C(＝O)、C(＝S)、S(O)和S(O)2的1或2个环成员。
实施方案A11实施方案A10的方法，其中G1是任选包含选自C(＝O)的1或2个环成员的5-至6-元非芳族碳环或杂环。
实施方案A12实施方案A7的方法，其中G2是用独立选自R18的1-4个取代基任选取代的苯环。
实施方案A13实施方案A7的方法，其中G2是5-或6-元杂芳环，每个环或环体系均用独立选自R18的1-4个取代基任选取代。
实施方案A14抑制不期望的动物细胞增殖的方法，所述方法包括使所述动物细胞或其中不期望所述细胞增殖的组织或器官与式1的化合物接触，其中A是O或S。
实施方案A15实施方案A14的方法，其中A是O。
实施方案A16给药式1化合物的方法，其中R2是氰基、-NR8N＝CR9R10、-ON＝CR9R10、-NR8NR11R12、-ONR11R12、-CR13＝NOR14、-CR13＝NNR11R12、-C(W)NR22R23或-NR8C(＝O)R26。
实施方案A17实施方案A16的方法，其中R2是氰基、-R8N＝CR9R10、-CR13＝NOR14、-CR13＝NNR11R12、-C(W)NR22R23或-NR8C(＝O)R26。
实施方案A18实施方案A17的方法，其中R2是氰基、-C(W)NR22R23或-NR8C(＝O)R26。
实施方案A19实施方案A18的方法，其中R2是氰基、-CONH2或-NHC(＝O)CH3。
实施方案A20实施方案A18的方法，其中W是O。
实施方案A21实施方案A18的方法，其中R22和R23各自独立地是H或C1-C4烷基。
实施方案A22抑制不期望的动物细胞增殖的方法，所述方法包括使所述动物细胞或其中不期望所述细胞增殖的组织或器官与式1的化合物接触，其中R2是5-或6-元杂芳环，每个环均用选自R24的至多5个取代基任选取代；或者是5-或6-元饱和或部分饱和杂环，任选包含选自C(＝O)、C(＝S)、S(O)或S(O)2的1-3个环成员，并用独立选自R24的至多5个取代基任选取代。
实施方案A23实施方案A22的方法，其中R2是5-或6-元杂芳环，每个环均用选自R24的至多4个取代基任选取代；或者是5-或6-元饱和或部分饱和杂环，任选包含选自C(＝O)的1-3个环成员，并用独立选自R24的至多5个取代基任选取代。
实施方案A24实施方案A23的方法，其中R2是5-或6-元杂芳环，每个环均用选自R24的至多3个取代基任选取代；或者是5-或6-元饱和或部分饱和杂环，任选包含选自C(＝O)的1-2个环成员，并用独立选自R24的至多3个取代基任选取代。
实施方案A25实施方案A24的方法，其中R2是5-或6-元杂芳环，每个环均用独立选自R24的至多3个取代基任选取代。
实施方案A26实施方案A25的方法，其中R2是5-元杂芳环，每个环均用独立选自R24的至多3个取代基任选取代。
实施方案A27实施方案A25的方法，其中R2是6-元杂芳环，每个环均用独立选自R24的至多3个取代基任选取代。
实施方案A28实施方案A25的方法，其中R2是1H-吡唑-1-基、1H-1，2，4-三唑-1-基、1H-吡唑-3-基或2-吡啶基，它们各自用独立选自R24的至多3个取代基任选取代。
实施方案A29实施方案A28的方法，其中R2是1H-吡唑-1-基、1H-1，2，4-三唑-1-基或2-吡啶基，它们各自用独立选自R24的至多3个取代基任选取代。
实施方案A30实施方案A28的方法，其中R2是1H-吡唑-1-基或1H-1，2，4-三唑-1-基。
实施方案A31实施方案A28的方法，其中R2是2-吡啶基。
实施方案A32实施方案A22的方法，其中每个R24独立地是卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C6环烷基、C1-C6卤代烷基、C2-C6卤代烯基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C1-C6烷硫基或C3-C6三烷基甲硅烷基。
实施方案A33实施方案A32的方法，其中每个R24独立地是卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基或C1-C6卤代烷氧基。
实施方案A34实施方案A33的方法，其中每个R24独立地是卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基或氰基。
实施方案A35实施方案A34的方法，其中每个R24独立地是卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基或氰基。
实施方案A36实施方案A28的方法，其中R2是1H-吡唑-1-基、1H-1，2，4-三唑-1-基、1H-吡唑-3-基或2-吡啶基，它们各自用独立选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基或氰基的1-3个取代基任选取代。
实施方案A37实施方案A28的方法，其中R2是1H-吡唑-1-基、1H-1，2，4-三唑-1-基或2-吡啶基，它们各自用独立选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基或氰基的1-3个取代基任选取代。
实施方案A38抑制不期望的动物细胞增殖的方法，所述方法包括使所述动物细胞或其中不期望所述细胞增殖的组织或器官与式1的化合物接触，其中R3是卤素、氰基、C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基或-CHO。
实施方案A39实施方案A36的方法，其中R3是卤素、氰基、C1-C6烷基或C1-C4卤代烷基。
实施方案A40实施方案A37的方法，其中R3是卤素、氰基或C1-C6烷基。
实施方案A41实施方案A38的方法，其中R3是卤素、氰基或C1-C3烷基。
实施方案A42实施方案A39的方法，其中R3是氯、氟、溴或甲基。
实施方案A43抑制不期望的动物细胞增殖的方法，所述方法包括使所述动物细胞或其中不期望所述细胞增殖的组织或器官与式1的化合物接触，其中J是C1-C8烷基、C2-C8烯基、C3-C8炔基、C3-C8环烷基、C3-C8环烯基、C4-C8环烷基烷基，它们各自用独立选自卤素、氰基、硝基、羟基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基羰基、C1-C4烷基氨基和C2-C6二烷基氨基的一个或多个取代基任选取代；或者是苯基、苄基、萘、5-或6-元杂芳环，每个环均用独立选自R29和R30的至多5个取代基任选取代。
实施方案A44实施方案A43的方法，其中J是C1-C6烷基、C2-C6烯基、C3-C6炔基、C3-C6环烷基、C3-C6环烯基、C4-C6环烷基烷基，它们各自用独立选自卤素、氰基、硝基、羟基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷基氨基和C2-C6二烷基氨基的一个或多个取代基任选取代；或者是苯基、苄基、5-或6-元杂芳环，每个环均用独立选自R29和R30的至多4个取代基任选取代。
实施方案A45实施方案A44的方法，其中J是苯基、苄基、5-或6-元杂芳环，每个环均用独立选自R29和R30的至多4个取代基任选取代。
实施方案A46实施方案A45的方法，其中J是苯基、苄基、5-或6-元杂芳环，每个环均用独立选自卤素、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6卤代烷基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C1-C6烷基氨基、C2-C6二烷基氨基和R30的至多4个取代基任选取代。
实施方案A47实施方案A46的方法，其中J是在2、4和6位用独立选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和R30的取代基任选取代的苯基。
实施方案A48实施方案A47的方法，其中J是在2、4和6位用独立选自氯、氟、甲基、甲氧基和R30的取代基任选取代的苯基。
实施方案A49给药式1化合物的方法，其中Y是O或NR31。
实施方案A50实施方案A49的方法，其中Y是O或NH。
实施方案A51实施方案A50的方法，其中Y是O。
实施方案A52给药式1化合物的方法，其中X是C1-C6亚烷基、C2-C6亚烯基或C3-C6亚环烷基。
实施方案A53实施方案A52的方法，其中X是C1-C6亚烷基或C2-C6亚烯基。
实施方案A54实施方案A53的方法，其中X是C2-C4亚烷基或C2-C4亚烯基。
实施方案A55实施方案A54的方法，其中X是C3-C4亚烷基。
实施方案A56抑制不期望的动物细胞增殖的方法，所述方法包括使所述动物细胞或其中不期望所述细胞增殖的组织或器官与式1的化合物接触，其中Q是NR32R33或OR35。
实施方案A57实施方案A56的方法，其中Q是NR32R33。
实施方案A58实施方案A57的方法，其中R32和R33各自独立地是H或C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基或C3-C6炔基；或者当与R32和R33各自所连接的氮原子任选结合到一起时，R32和R33形成用R34任选取代的具有4-6个环原子的杂环。
实施方案A59实施方案A58的方法，其中R32和R33各自独立地是H或C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C6环烷基或C3-C6卤代环烷基；或者当与R32和R33各自所连接的氮原子任选结合到一起时，R32和R33形成用R34任选取代的具有4-6个环原子的杂环。
实施方案A60实施方案A59的方法，其中R32和R33各自独立地是H或C2-C6烷基或C2-C6卤代烷基。
实施方案A61实施方案A60的方法，其中R32和R33各自独立地是H或C2-C6烷基。
实施方案A62实施方案A58的方法，其中R34是卤素或C2-C6烷基。
实施方案A63实施方案A56的方法，其中R35是H、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C6环烷基或C3-C6卤代环烷基。
实施方案A64实施方案A63的方法，其中R35是H、C1-C6烷基或C1-C6卤代烷基。
实施方案A65实施方案A64的方法，其中R35是H或C1-C6烷基。
实施方案A66实施方案A1-A65中任一项的方法，其中所述式1化合物抑制微管功能。
实施方案A67实施方案A1-A66中任一项的方法，其中所述不期望的细胞增殖发生在个体体内并且其中所述接触通过向所述个体给药治疗有效量的式1化合物而实现。
实施方案A68实施方案A67的方法，其中所述不期望的细胞增殖导致肿瘤生长。
实施方案A69实施方案A68的方法，其中所述肿瘤选自乳腺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌、白血病、淋巴瘤、黑色素瘤、肾癌、肝癌、骨髓瘤、多发性骨髓瘤、间皮瘤、中枢神经系统肿瘤、卵巢癌、前列腺癌、软组织或骨的肉瘤、头颈癌、食管癌、胃癌、膀胱癌、视网膜母细胞瘤、鳞状细胞癌、睾丸癌、阴道癌和神经内分泌相关的肿瘤。
实施方案A70实施方案A69的方法，其中所述肿瘤是癌性的。
本发明包括实施方案A1-A65的组合。如下例示实施方案A1-A65的组合 实施方案B1抑制不期望的细胞增殖的方法，所述方法包括使所述细胞或其中不期望所述细胞增殖的组织或器官与式1的化合物接触，其中 A是O或S； R1是C2-C6烷基、C2-C6卤代烷基、C3-C8环烷基、C4-C8环烷基烷基、NR4R5、G1或G2； R2是氰基、-C(W)NR22R23或-NR8C(＝O)R26；或者是5-或6-元杂芳环；或者是5-或6-元饱和或部分饱和的杂环，任选包含选自C(＝O)的1-3个环成员； W是O或S； R3是卤素、氰基或C1-C6烷基； X是C1-C6亚烷基或C2-C6亚烯基； R4和R5独立地是H、C1-C8烷基或C1-C8卤代烷基；并且 J是用独立选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基和R30的取代基任选取代的苯基。
实施方案B2实施方案B1的方法，其中 A是O； R1是C2-C6烷基、C2-C6卤代烷基、C4-C8环烷基烷基、G1或G2； R2是5-或6-元杂芳环、氰基、-CONH2或-NHC(＝O)CH3； R3是卤素、氰基或C1-C3烷基； X是C3-C4亚烷基或C2-C4亚烯基；并且 J是在2、3、4和6位用独立选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基和R30的取代基任选取代的苯基。
实施方案B3实施方案B2的方法，其中 R1是C3-C6烷基、C3-C6卤代烷基、C4-C8环烷基烷基或用独立选自R18的1-4个取代基任选取代的苯基； R2是5-或6-元杂芳环，每个环均用独立选自R24的至多3个取代基任选取代；或者是-CONH2或-NHC(＝O)CH3； R3是氟、氯、溴或甲基； X是C3-C4亚烷基；并且 J是在2、3、4和6位用独立选自氯和氟、甲基和R30的取代基任选取代的苯基。
实施方案B4实施方案B3的方法，其中 R2是1H-吡唑-1-基、1H-1，2，4-三唑-1-基、1H-吡唑-3-基或2-吡啶基，它们各自用独立选自卤素、氰基、C1-C6烷基或C1-C4卤代烷基的1-3个取代基任选取代；或者是-CONH2； Y是O或NR31；并且 Q是NR32R33或OR35。
实施方案B5实施方案B4的方法，其中 R2是1H-吡唑-1-基、1H-1，2，4-三唑-1-基、1H-吡唑-3-基或2-吡啶基，它们各自用独立选自卤素、氰基、C1-C4烷基或C1-C3卤代烷基的1-3个取代基任选取代；或者是-CONH2； Y是O或NH；并且 R32、R33和R35各自独立地是H或C1-C4烷基或C1-C3卤代烷基。
实施方案B6抑制不期望的细胞增殖的方法，所述方法包括使所述细胞或其中不期望所述细胞增殖的组织或器官与选自下列的式1化合物接触 5-氯-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物482)， 5-氯-1-环丙基甲基-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物481)， 5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮， 6-氯-5-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-3，4-二氢-4-[(2S)-2-甲基丁基]-3-氧代吡嗪酰胺(化合物486)， 6-氯-5-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-3，4-二氢-4-[(2S)-2-甲基丁基]-3-氧代吡嗪酰胺， 6-氯-5-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-3，4-二氢-3-氧代-4-(3，3，3-三氟-2-甲基丙基)吡嗪酰胺， 6-氯-5-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-3，4-二氢-3-氧代-4-(3，3，3-三氟-2-甲基丙基)吡嗪酰胺， 5-氯-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-1-(3-氟苯基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮， 5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-(3-氟苯基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮， 5-氯-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-3-(1H-吡唑-1-基)-1-(3，3，3-三氟-2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物485)， 5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-3-(1H-吡唑-1-基)-1-(3，3，3-三氟-2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮， 5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(3-甲基-1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物494)， 5-氯-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-1[(2S)-2-甲基丁基]-3-(3-甲基-1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物498)， 5-氯-6-[2-氯-6-氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(3-甲基-1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮， 5-氯-6-[2-氯-6-氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物493)， 5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物502)， 5-氯-1-[(2S)-2-甲基丁基)-3-(1H-吡唑-1-基)-6-(2，4，6-三氟苯基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物155)， 5-氯-1-[(2S)-2-甲基丁基)-3-(1H-吡唑-1-基)-6-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物457)，和 5-氯-1-[(2S)-2-甲基丁基)-3-(1H-3-甲基-吡唑-1-基)-6-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物490)。
实施方案B7实施方案B1-B6中任一项的方法，其中所述式1化合物抑制微管功能。
实施方案B8实施方案B1-B6中任一项的方法，其中所述不期望的细胞增殖发生在个体体内并且其中所述接触通过向所述个体给药治疗有效量的式1化合物而实现 实施方案B9实施方案B8的方法，其中所述不期望的细胞增殖导致肿瘤生长。
实施方案B10实施方案B9的方法，其中所述肿瘤选自乳腺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌、白血病、淋巴瘤、黑色素瘤、肾癌、肝癌、骨髓瘤、多发性骨髓瘤、间皮瘤、中枢神经系统肿瘤、卵巢癌、前列腺癌、软组织或骨的肉瘤、头颈癌、食管癌、胃癌、膀胱癌、视网膜母细胞瘤、鳞状细胞癌、睾丸癌、阴道癌和神经内分泌相关的肿瘤。
实施方案B11实施方案B10的方法，其中所述肿瘤是癌性的。
实施方案C1式1的化合物或其盐，其中 R1是NR4R5、-N＝CR19R21、OR6、G1或G2；或者是C1-C8烷基、C2-C8烯基、C3-C8炔基、C3-C8环烷基、C3-C8环烯基、C4-C8环烷基烷基、C4-C8烷基环烷基、C5-C10烷基环烷基烷基、C7-C14烷基环烷基环烷基、C4-C8环烯基烷基或C4-C8烷基环烯基，它们各自用独立选自卤素、氰基、硝基、羟基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4烷基氨基、C1-C4烷基亚磺酰基、C1-C4烷基磺酰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基羰基、C3-C6三烷基甲硅烷基、G1和G2的一个或多个取代基任选取代； A是O、S或NR7； R7是H、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C2-C6烷基羰基或C2-C6烷氧羰基； R2是氰基、-NR8N＝CR9R10、-ON＝CR9R10、-NR8NR11R12、-ONR11R12、-CR13＝NOR14、-CR13＝NNR11R12、-C(W)NR22R23、-NR8C(O)R26、-NR8C(O)NR27或-NR8C(O)OR28；或者 R2是5-或6-元杂芳环或者8-、9-或10-元杂芳族双环体系，每个环或环体系均用独立选自R24的至多5个取代基任选取代；或者是5-或6-元饱和或部分饱和杂环，任选包含选自C(＝O)、C(＝S)、S(O)或S(O)2的1-3个环成员，并用独立选自R24的至多5个取代基任选取代；或者 R2和R7结合到一起作为-N＝C(R16)-； W是O、S或＝NR25； R3是H、卤素、氰基、C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基、C3-C6炔基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4卤代烷硫基、C2-C5烷氧羰基、羟基羰基、-SCN或-CHO； R4和R5各自独立地是H；或者是C1-C8烷基、C3-C8烯基、C3-C8炔基、C3-C8环烷基、C3-C8环烯基、C4-C8环烷基烷基或C4-C8环烯基烷基，它们各自用独立选自卤素、氰基、C1-C6烷氧基、C1-C6硫烷基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6二烷基氨基、-SCN和C3-C6三烷基甲硅烷基的1-4个取代基任选取代；或者 R4和R5结合到一起作为-(CH2)3-、-(CH2)4-、-(CH2)5-、-(CH2)6-、-CH2CH2OCH2CH2-或CH2CH(CH3)OCH(CH3)CH2-； R6是H；或者是C1-C8烷基、C3-C8烯基、C3-C8炔基、C3-C8环烷基、C3-C8环烯基、C4-C8环烷基烷基或C4-C8环烯基烷基，它们各自用独立选自卤素、氰基、C1-C6烷氧基、C1-C6硫烷基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6二烷基氨基、-SCN和C3-C6三烷基甲硅烷基的1-4个取代基任选取代； 每个R8独立地是H、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基； R9是C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基； R10是H、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；或者 R9和R10结合到一起作为-(CH2)3-、-(CH2)4-、-(CH2)5-或-(CH2)6-； R11是H、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基； R12是H、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C2-C3烷基羰基或C2-C3烷氧羰基；或者 R11和R12结合到一起作为-(CH2)4-、-(CH2)5、-CH2CH2OCH2CH2-或-CH2CH(CH3)OCH(CH3)CH2-； R13是H、NH2、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基； R14是H、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基； R16是H、卤素、氰基、C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4卤代烷硫基或C2-C5烷氧羰基； J是苯基、苄基、萘、5-或6-元杂芳环或者8-、9-或10-元杂芳族双环体系，每个环或环体系均用独立选自R30的1-2个取代基取代并用独立选自R29的至多4个取代基任选取代； R29是卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C6环烷基、C1-C6卤代烷基、C2-C6卤代烯基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C6烷基亚磺酰基、C1-C6烷基磺酰基、C1-C6卤代烷硫基、C1-C6卤代烷基亚磺酰基、C1-C6卤代烷基磺酰基、C1-C6烷基氨基、C2-C6二烷基氨基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基氨基羰基、C3-C6二烷基氨基羰基或C3-C6三烷基甲硅烷基； R30是-Y-X-Q； Y是O、S(O)p、NR31或直接的键； X是C1-C6亚烷基、C2-C6亚烯基、C3-C6亚炔基、C3-C6亚环烷基或C3-C6亚环烯基，它们各自用独立选自卤素、氰基、硝基、羟基、(＝O)、C1-C6烷氧基和C1-C6卤代烷氧基的一个或多个取代基任选取代； Q是NR32R33、OR35或S(O)pR35； R31是H或C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基硫代羰基、C2-C6烷氧基硫代羰基、C4-C8环烷基羰基、C4-C8环烷氧基羰基、C4-C8环烷基硫代羰基或C4-C8环烷氧基硫代羰基； R32和R33各自独立地是H；或者是C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基、C3-C6炔基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基硫代羰基、C2-C6烷氧基硫代羰基、C4-C8环烷基羰基、C4-C8环烷氧基羰基、C4-C8环烷基硫代羰基或C4-C8环烷氧基硫代羰基；或者当与各自所连接的氮原子任选结合到一起时，R32和R33形成用R34任选取代的具有3-6个环原子的杂环； R34是卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基或C1-C6烷氧基； 每个R35独立地是H、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基、C3-C6炔基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基硫代羰基、C2-C6烷氧基硫代羰基、C4-C8环烷基羰基、C4-C8环烷氧基羰基、C4-C8环烷基硫代羰基或C4-C8环烷氧基硫代羰基； p是0、1或2； G1是3-至7-元非芳族碳环或杂环，任选包含选自C(＝O)、C(＝S)、S(O)和S(O)2的1或2个环成员并用独立选自R17的1-4个取代基任选取代； G2是苯环、5-或6-元杂芳环，每个环或环体系均用独立选自R18的1-4个取代基任选取代； 每个R17独立地是C1-C2烷基、C1-C2卤代烷基、卤素、氰基、硝基或C1-C2烷氧基； 每个R18独立地是C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、C3-C6环烷基、C1-C4卤代烷基、C2-C4卤代烯基、C2-C4卤代炔基、C3-C6卤代环烷基、卤素、氰基、硝基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4烷基亚磺酰基、C1-C4烷基磺酰基、C1-C4烷基氨基、C2-C8二烷基氨基、C3-C6环烷基氨基、(C1-C4烷基)(C3-C6环烷基)氨基、C2-C4烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基氨基羰基、C3-C8二烷基氨基羰基或C3-C6三烷基甲硅烷基； R19和R21各自独立地是H、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基或C3-C8环烷基；或者 R19和R21结合到一起作为-(CH2)4-、-(CH2)5、-CH2CH2OCH2CH2-或-CH2CH(CH3)OCH(CH3)CH2-； R22和R23各自独立地是H；或者是C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C3-C8环烷基或C4-C8环烷基烷基，它们各自用独立选自卤素、氰基、C1-C6烷氧基、C1-C6硫烷基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6二烷基氨基、-SCN和C3-C6三烷基甲硅烷基的1-4个取代基任选取代；或者 R22和R23结合到一起作为-(CH2)4-、-(CH2)5、-CH2CH2OCH2CH2-或-CH2CH(CH3)OCH(CH3)CH2-； 每个R24独立地是卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C6环烷基、C1-C6卤代烷基、C2-C6烷氧基烷基、C3-C6二烷氧基烷基、C2-C6卤代烯基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C6烷基亚磺酰基、C1-C6烷基磺酰基、C1-C6卤代烷硫基、C1-C6卤代烷基亚磺酰基、C1-C6卤代烷基磺酰基、C1-C6烷基氨基、C2-C6二烷基氨基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基氨基羰基、C3-C6二烷基氨基羰基或C3-C6三烷基甲硅烷基； R25是H、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；并且 R26是H、C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基或C3-C6炔基；或者是苯环、5-或-6-元杂芳环，每个环或环体系均用独立选自R36的1-4个取代基任选取代； R36是C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、C3-C6环烷基、C1-C4卤代烷基、C2-C4卤代烯基、C2-C4卤代炔基、C3-C6卤代环烷基、卤素、氰基、硝基、C1-C4烷氧基或C1-C4卤代烷氧基；并且 R27和R28各自独立地是C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基或C3-C6炔基；或者是用独立选自C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、C3-C6环烷基、C1-C4卤代烷基、卤素、氰基、硝基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷氧基的1-4个取代基任选取代的苯环。
实施方案C2实施方案C1的化合物，其中R1是C1-C8烷基、C1-C8卤代烷基、C3-C8环烷基、C4-C8环烷基烷基、NR4R5、-N＝CR19R21、G1或G2。
实施方案C3实施方案C2的化合物，其中R1是C2-C6烷基、C2-C6卤代烷基、C4-C8环烷基烷基、NR4R5、G1或G2。
实施方案C4实施方案C3的化合物，其中R1是C2-C6烷基、C2-C6卤代烷基或C4-C8环烷基烷基。
实施方案C5实施方案C4的化合物，其中R1是C3-C6烷基、C3-C6卤代烷基或C4-C6环丙基烷基。
实施方案C6实施方案C5的化合物，其中R1是NR4R5。
实施方案C7实施方案C2的化合物，其中R1是G1。
实施方案C8实施方案C2的化合物，其中R1是G2。
实施方案C9实施方案C3的化合物，其中R4和R5各自独立地是H、C1-C8烷基或C1-C8卤代烷基。
实施方案C10实施方案C9的化合物，其中R4和R5各自独立地是H、C3-C6烷基或C3-C6卤代烷基。
实施方案C11实施方案C7的化合物，其中G1是5-至6-元非芳族碳环或杂环，任选包含选自C(＝O)、C(＝S)、S(O)和S(O)2的1或2个环成员。
实施方案C12实施方案C11的化合物，其中G1是5-至6-元非芳族碳环或杂环，任选包含选自C(＝O)的1或2个环成员。
实施方案C13实施方案C8的化合物，其中G2是用独立选自R18的1-4个取代基任选取代的苯环。
实施方案C14实施方案C8的化合物，其中G2是5-或6-元杂芳环，每个环或环体系均用独立选自R18的1-4个取代基任选取代。
实施方案C15实施方案C1的化合物，其中A是O或S。
实施方案C16实施方案C15的化合物，其中A是O。
实施方案C17实施方案C1的化合物，其中R2是氰基、-NR8N＝CR9R10、-ON＝CR9R10、-NR8NR11R12、-ONR11R12、-CR13＝NOR14、-CR13＝NNR11R12、-C(W)NR22R23或-NR8C(＝O)R26。
实施方案C18实施方案C17的化合物，其中R2是氰基、-R8N＝CR9R10、-CR13＝NOR14、-CR13＝NNR11R12、-C(W)NR22R23或-NR8C(＝O)R26。
实施方案C19实施方案C18的化合物，其中R2是氰基、-C(W)NR22R23或-NR8C(＝O)R26。
实施方案C20实施方案C19的化合物，其中R2是氰基、-CONH2或-NHC(＝O)CH3。
实施方案C21实施方案C19的化合物，其中W是O。
实施方案C22实施方案C19的化合物，其中R22和R23各自独立地是H或C1-C4烷基。
实施方案C23实施方案C1的化合物，其中R2是5-或6-元杂芳环，每个环均用选自R24的至多5个取代基任选取代；或者是5-或6-元饱和或部分饱和杂环，任选包含选自C(＝O)、C(＝S)、S(O)或S(O)2的1-3个环成员，并用独立选自R24的至多5个取代基任选取代。
实施方案C24实施方案C23的化合物，其中R2是5-或6-元杂芳环，每个环均用选自R24的至多4个取代基任选取代；或者是5-或6-元饱和或部分饱和杂环，任选包含选自C(＝O)的1-3个环成员，并用独立选自R24的至多5个取代基任选取代。
实施方案C25实施方案C24的化合物，其中R2是5-或6-元杂芳环，每个环均用选自R24的至多3个取代基任选取代；或者是5-或6-元饱和或部分饱和杂环，任选包含选自C(＝O)的1-2个环成员，并用独立选自R24的至多3个取代基任选取代。
实施方案C26实施方案C25的化合物，其中R2是5-或6-元杂芳环，每个环均用独立选自R24的至多3个取代基任选取代。
实施方案C27实施方案C26的化合物，其中R2是5-元杂芳环，每个环均用独立选自R24的至多3个取代基任选取代。
实施方案C28实施方案C26的化合物，其中R2是6-元杂芳环，每个环均用独立选自R24的至多3个取代基任选取代。
实施方案C29实施方案C26的化合物，其中R2是1H-吡唑-1-基、1H-1，2，4-三唑-1-基、1H-吡唑-3-基或2-吡啶基，它们各自用独立选自R24的至多3个取代基任选取代。
实施方案C29a实施方案C29的化合物，其中R2是1H-吡唑-1-基、1H-1，2，4-三唑-1-基或2-吡啶基，它们各自用独立选自R24的至多3个取代基任选取代。
实施方案C30实施方案C29的化合物，其中R2是1H-吡唑-1-基或1H-1，2，4-三唑-1-基。
实施方案C31实施方案C29的化合物，其中R2是2-吡啶基。
实施方案C32实施方案C23的化合物，其中每个R24独立地是卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C6环烷基、C1-C6卤代烷基、C2-C6卤代烯基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C1-C6烷硫基或C3-C6三烷基甲硅烷基。
实施方案C33实施方案C32的化合物，其中每个R24独立地是卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基或C1-C6卤代烷氧基。
实施方案C34实施方案C33的化合物，其中每个R24独立地是卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基或氰基。
实施方案C35实施方案C34的化合物，其中每个R24独立地是卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基或氰基。
实施方案C36实施方案C29的化合物，其中R2是1H-吡唑-1-基、1H-1，2，4-三唑-1-基、1H-吡唑-3-基或2-吡啶基，它们各自用独立选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基或氰基的1-3个取代基任选取代。
实施方案C36a实施方案C36的化合物，其中R2是1H-吡唑-1-基、1H-1，2，4-三唑-1-基或2-吡啶基，它们各自用独立选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基或氰基的1-3个取代基任选取代。
实施方案C37实施方案C1的化合物，其中R3是卤素、氰基、C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基或-CHO。
实施方案C38实施方案C37的化合物，其中R3是卤素、氰基、C1-C6烷基或C1-C4卤代烷基。
实施方案C39实施方案C38的化合物，其中R3是卤素、氰基或C1-C6烷基。
实施方案C40实施方案C39的化合物，其中R3是卤素、氰基或C1-C3烷基。
实施方案C41实施方案C40的化合物，其中R3是氯、氟、溴或甲基。
实施方案C42实施方案C1的化合物，其中J是苯基、苄基、萘、5-或6-元杂芳环或者8-、9-或10-元杂芳族双环体系，每个环或环体系均用选自R30的一个取代基取代并用独立选自卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C6环烷基、C1-C6卤代烷基、C2-C6卤代烯基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C6烷基亚磺酰基、C1-C6烷基磺酰基、C1-C6卤代烷硫基、C1-C6卤代烷基亚磺酰基、C1-C6卤代烷基磺酰基、C1-C6烷基氨基、C2-C6二烷基氨基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基氨基羰基、C3-C6二烷基氨基羰基和C3-C6三烷基甲硅烷基的至多4个取代基任选取代。
实施方案C43实施方案C42的化合物，其中J是苯基、苄基、5-或6-元杂芳环，每个环或环体系均用选自R30的一个取代基取代并用独立选自卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C6环烷基、C1-C6卤代烷基、C2-C6卤代烯基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C1-C6烷基氨基、C2-C6二烷基氨基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基氨基羰基和C3-C6二烷基氨基羰基的至多4个取代基任选取代。
实施方案C44实施方案C43的化合物，其中J是苯基、苄基、5-或6-元杂芳环，每个环或环体系均用选自R30的一个取代基取代并用独立选自卤素、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6卤代烷基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C1-C6烷基氨基和C2-C6二烷基氨基的至多4个取代基任选取代。
实施方案C45实施方案C44的化合物，其中J是苯基，其用选自R30的一个取代基取代并用独立选自卤素、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6卤代烷基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C1-C6烷基氨基和C2-C6二烷基氨基的至多4个取代基任选取代。
实施方案C46实施方案C45的化合物，其中J是苯基，其在4位用选自R30的一个取代基取代并用独立选自卤素、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6卤代烷基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C1-C6烷基氨基和C2-C6二烷基氨基的至多4个取代基任选取代。
实施方案C47实施方案C46的化合物，其中J是在4位用选自R30的一个取代基取代的苯基。
实施方案C48实施方案C1的化合物，其中Y是O或NR31。
实施方案C49实施方案C48的化合物，其中Y是O或NH。
实施方案C50实施方案C49的化合物，其中Y是O。
实施方案C51实施方案C1的化合物，其中X是C1-C6亚烷基、C2-C6亚烯基或C3-C6亚环烷基。
实施方案C52实施方案C51的化合物，其中X是C1-C6亚烷基或C2-C6亚烯基。
实施方案C53实施方案C52的化合物，其中X是C2-C4亚烷基或C2-C4亚烯基。
实施方案C54实施方案C53的化合物，其中X是C3-C4亚烷基。
实施方案C55实施方案C1的化合物，其中Q是NR32R33或OR35。
实施方案C56实施方案C55的化合物，其中Q是NR32R33。
实施方案C57实施方案C56的化合物，其中R32和R33各自独立地是H或C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基或C3-C6炔基；或者当与R32和R33各自所连接的氮原子任选结合到一起时，R32和R33形成用R34任选取代的具有4-6个环原子的杂环。
实施方案C58实施方案C57的化合物，其中R32和R33各自独立地是H或C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C6环烷基或C3-C6卤代环烷基；或者当与各自所连接的氮原子任选结合到一起时，R32和R33形成用R34任选取代的具有4-6个环原子的杂环。
实施方案C59实施方案C58的化合物，其中R32和R33各自独立地是H或C2-C6烷基或C2-C6卤代烷基。
实施方案C60实施方案C59的化合物，其中R32和R33各自独立地是H或C2-C6烷基。
实施方案C61实施方案C57的化合物，其中R34是卤素或C2-C6烷基。
实施方案C62实施方案C55的化合物，其中R35是H、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C6环烷基或C3-C6卤代环烷基。
实施方案C63实施方案C62的化合物，其中R35是H、C1-C6烷基或C1-C6卤代烷基。
实施方案C64实施方案C63的化合物，其中R35是H或C1-C6烷基。
本发明包括实施方案C1-C64的组合。如下例示实施方案C1-C64的组合 实施方案D1实施方案C1的化合物，其中 A是O或S； R1是C2-C6烷基、C2-C6卤代烷基、C3-C8环烷基、C4-C8环烷基烷基、NR4R5、G1或G2； R2是氰基、-C(W)NR22R23或-NR8C(＝O)R26；或者是5-或6-元杂芳环；或者是5-或6-元饱和或部分饱和的杂环，任选包含选自C(＝O)的1-3个环成员； W是O或S； R3是卤素、氰基或C1-C6烷基； X是C1-C6亚烷基或C2-C6亚烯基； R4和R5独立地是H、C1-C8烷基或C1-C8卤代烷基；并且 J是用R30取代的苯基。
实施方案D2实施方案D1的化合物，其中 A是O； R1是C2-C6烷基、C2-C6卤代烷基、C4-C8环烷基烷基、G1或G2； R2是5-或6-元杂芳环、氰基、-CONH2或-NHC(＝O)CH3； R3是卤素、氰基或C1-C3烷基； X是C3-C4亚烷基或C2-C4亚烯基；并且 J是在4位用R30取代的苯基。
实施方案D3实施方案D2的化合物，其中 R1是C3-C6烷基、C3-C6卤代烷基、C4-C8环烷基烷基或用独立选自R18的1-4个取代基任选取代的苯基； R2是5-或6-元杂芳环，每个环均用独立选自R24的至多3个取代基任选取代；或者是-CONH2或-NHC(＝O)CH3； R3是氟、氯、溴或甲基； Y是O或NH； X是C3-C4亚烷基； Q是NR32R33或OR35； R32和R33各自独立地是H或C2-C6烷基或C2-C6卤代烷基；并且 R35是H、C1-C6烷基或C1-C6卤代烷基。
实施方案D4实施方案D3的化合物，其中 R2是1H-吡唑-1-基、1H-1，2，4-三唑-1-基、1H-吡唑-3-基或2-吡啶基，它们各自用独立选自卤素、氰基、C1-C6烷基或C1-C4卤代烷基的1-3个取代基任选取代；或者是-CONH2； Y是NH；并且 Q是NR32R33。
实施方案D5实施方案D4的化合物，其中 R2是1H-吡唑-1-基、1H-1，2，4-三唑-1-基、1H-吡唑-3-基或2-吡啶基，它们各自用独立选自卤素、氰基、C1-C4烷基或C1-C3卤代烷基的1-3个取代基任选取代；或者是-CONH2；并且 R32、R33和R35各自独立地是H或C1-C4烷基或C1-C3卤代烷基。
实施方案D6实施方案C1的化合物，选自 5-氯-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物482)， 5-氯-1-环丙基甲基-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物481)， 5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮， 6-氯-5-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-3，4-二氢-4-[(2S)-2-甲基丁基]-3-氧代吡嗪酰胺(化合物486)， 6-氯-5-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-3，4-二氢-4-[(2S)-2-甲基丁基]-3-氧代吡嗪酰胺， 6-氯-5-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-3，4-二氢-3-氧代-4-(3，3，3-三氟-2-甲基丙基)吡嗪酰胺， 6-氯-5-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-3，4-二氢-3-氧代-4-(3，3，3-三氟-2-甲基丙基)吡嗪酰胺， 5-氯-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-1-(3-氟苯基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮， 5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-(3-氟苯基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮， 5-氯-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-3-(1H-吡唑-1-基)-1-(3，3，3-三氟-2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物485)， 5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-3-(1H-吡唑-1-基)-1-(3，3，3-三氟-2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮， 5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(3-甲基-1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物494)， 5-氯-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-1[(2S)-2-甲基丁基]-3-(3-甲基-1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物498)， 5-氯-6-[2-氯-6-氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(3-甲基-1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮， 5-氯-6-[2-氯-6-氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物493)， 5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物502)， 5-氯-1-[(2S)-2-甲基丁基)-3-(1H-吡唑-1-基)-6-(2，4，6-三氟苯基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物155)， 5-氯-1-[(2S)-2-甲基丁基)-3-(1H-吡唑-1-基)-6-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物457)，和 5-氯-1-[(2S)-2-甲基丁基)-3-(1H-3-甲基-吡唑-1-基)-6-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物490)。
还要注意抑制不期望的动物细胞增殖的方法，所述方法包括使所述动物细胞或其中不期望所述细胞增殖的组织或器官与式1化合物接触，其中 R1是NR4R5、-N＝CR19R21、OR6、G1或G2；或者是C1-C8烷基、C2-C8烯基、C3-C8炔基、C3-C8环烷基、C3-C8环烯基、C4-C8环烷基烷基、C4-C8烷基环烷基、C4-C8环烯基烷基或C4-C8烷基环烯基，它们各自用独立选自卤素、氰基、硝基、羟基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4烷基氨基、C1-C4烷基亚磺酰基、C1-C4烷基磺酰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基羰基、C3-C6三烷基甲硅烷基、G1和G2的一个或多个取代基任选取代。
还要注意式1化合物或其盐，其中 R1是NR4R5、-N＝CR19R21、OR6、G1或G2；或者是C1-C8烷基、C2-C8烯基、C3-C8炔基、C3-C8环烷基、C3-C8环烯基、C4-C8环烷基烷基、C4-C8烷基环烷基、C4-C8环烯基烷基或C4-C8烷基环烯基，它们各自用独立选自卤素、氰基、硝基、羟基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4烷基氨基、C1-C4烷基亚磺酰基、C1-C4烷基磺酰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基羰基、C3-C6三烷基甲硅烷基、G1和G2的一个或多个取代基任选取代。
要注意其中包含实施方案C1-C64和D1-D6中任一项的化合物或其药学上可接受的盐和任选生理学上可接受的载体的组合物。
要注意抑制不期望的动物细胞增殖的方法，所述方法包括使动物细胞与实施方案C1-C64和D1-D6中任一项的化合物或包含所述化合物的组合物接触。
还要注意上述方法，其中所述动物细胞被包含在不期望所述细胞增殖的组织或器官内。
还要注意上述方法，其中所述式1化合物抑制微管功能。
还要注意上述方法，其中聚合被抑制。
还要注意上述方法，其中聚合的微管蛋白或微管结构被稳定化。
可以通过下列方法和路线1-20所述变体中的一种或多种来制备式1的化合物。下面式1-32化合物中R1、R2、R3、R11、R12、R13、R14、R19、R21、R22、R23、A和J的定义如以上发明概述中所定义。式1a-1t的化合物是式1化合物的各种子集。
可以按照路线1所示制备其中R2是通过N连接的杂环的式1化合物。在酸受体的存在下，式3的包含NH的杂环与式2化合物(其中X1是合适的离去基团，如卤素(例如Cl、Br、I)、OS(O)2CH3(甲磺酸酯)、OS(O)2CF3、OS(O)2Ph-p-CH3(对甲苯磺酸酯)或路线1所示的其它离核体)的反应得到其中R2是N-连接杂环的式1化合物。用于该反应的合适酸受体包括无机碱如碱金属或碱土金属(例如锂、钠、钾、铯)的氢化物、醇盐、碳酸盐、磷酸盐和氢氧化物，和有机碱如三乙胺、吡唑、N，N-二异丙基乙胺和1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯。优选的酸受体是碳酸钾和氢氧化钾。多种溶剂都适合该反应，包括例如但不限于N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、乙腈和丙酮以及这些溶剂的混合物。该反应可以在约0-200℃、优选约20-80℃之间进行。
路线1
如路线2所示，可以在酸受体的存在下，通过使式4的适当亲核体与式2的化合物反应来合成其中R2是腙、肟、肼衍生物或羟胺衍生物的式1化合物。优选的溶剂包括N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、乙腈和丙酮。酸受体如叔胺、碱碳酸盐、碱氢氧化物和碱氢化物可以用于该反应。碳酸钾和叔胺如三乙胺对于腙和肼是优选的酸受体。碱金属氢化物如氢化钠对肟和羟胺是优选的酸受体。
路线2
可以按照路线3所示合成式1a和1b式的化合物。式2化合物与氰化物盐的反应得到式1a的化合物。该反应可以在质子溶剂或非质子溶剂中进行。优选的溶剂是N，N-二甲基甲酰胺、低级醇和这些溶剂与水的混合物。该反应可以在0-200℃、优选60-120℃的温度下成功进行。1b式的化合物可以由式1a的化合物与硫化氢或其它硫化物源的反应获得。该反应可以在多种溶剂和温度下进行。优选在低级醇与水的混合物中反应。关于使用铵作为硫化物源的便利方法参见Bagley等，Synlett，2004，2615-261。
路线3
如路线4所示，可以通过其中X1是卤素的式2化合物与式5化合物的过渡金属催化反应来获得其中R2是C-连接杂环的式1化合物。卤代吡嗪酮的过渡金属催化的交叉偶联反应可从Hoornaert等的著作Tetrahedron，1991，47，9259-9268和Tetrahedron Letters，2004，45，1885-1888的中知道。式5的各种有机金属杂环可以在钯或镍催化下反应。关于适用于该反应的有机金属杂环的合成，参见Gribble和Li，“Palladium in HeterocyclicChemistry”，Pergamon Press，Amsterdam，2000，411页。该书还描述了适合进行路线4所述的交叉偶联反应的多种催化剂和反应条件。当所述金属是镁时，所述偶联不一定需要添加过渡金属催化剂。
路线4
也可以通过将式2的卤素取代的吡嗪酮转化成有机金属衍生物，然后进行交叉偶联反应来获得其中R2是C-连接杂环的式1化合物，如路线5所示。最优选所述有机金属吡嗪酮是通过双金属试剂如六甲基二锡与式2化合物在钯催化下的反应而制备的。也可以使用其它试剂如频那醇基乙硼烷(pinacolatodiborane)。所得的式6锡化合物可以通过与式7的卤代杂环的钯催化偶联而转换成式1的化合物。这种制备杂环锡化合物的例子可以在Majeed等，Tetrahedron，1989，45，993-1006中找到。
路线5
可以通过式1c的卤代吡嗪酮与适当的亲核体的反应来合成式1d的化合物(即式1，其中R3是烷氧基、硫烷基或氰基)，如路线6所示。在约0-160℃的温度下，在非质子溶剂中用适当的亲核体处理式1c的化合物。在氰化物和硫烷基亲核体的情况下，所述反应在溶剂如N，N-二甲基甲酰胺和N-甲基吡咯烷酮中进行得最好。在醇盐的情况下，所述反应在醇(所述醇盐由其产生)中进行得最好。碱金属如氢化钠是适当的酸受体。在氰化物的情况下，酸受体是不必要的。
路线6
可以通过涉及式1c化合物的过渡金属催化反应，在式1化合物中引入是烷基、烯基、炔基或环烷基的R3基团，如路线7所示。所述烷基、烯基、炔基或环烷基金属种类可以得自B、Sn、Si、Mg、Al或Zn。用于偶联的条件如前面路线4所述，而且用于这些转换的条件的描述可以在Gribble和Li(“Palladium in Heterocyclic Chemistry”，Pergamon Press，Amsterdam，2000)中找到。关于吡嗪酮的其它钯催化反应的典型方法可以在Tetrahedron，2005，61，3953-3962中找到。对于炔基化合物，Sonogashira反应是最有用的。对于烯基底物，Heck和Stille反应是最有用的。对于烷基和环烷基，Kumada和Suzuki偶联是非常有用的。
路线7
可以通过式8的氰基胺与草酰卤的反应，来制备其中X4是卤素的式9化合物(上面式2的子集)，如路线8所示。所述反应用过量的草酰卤进行。所述反应在惰性溶剂如1，2-二氯苯、甲苯、氯苯或二甲苯中，在约60-150℃的高温下进行得最好。在一些情况下，如果在添加草酰卤后向混合物中添加N，N-二甲基甲酰胺，则所述反应在约20-约60℃的较低温度下进行。添加卤化物源如卤化四烷基铵或卤化三烷基铵有时能导致更高的产物收率和/或更低的反应温度。这类环化反应可以在J.HeterocyclicChemistry，1983，20，919-923，Bull Soc.Chim.Belg.1994，103，583-589，J.Med.Chem.，2005，48，1910-1918和Tetrahedron，2004，60，11597-11612以及其中引用的参考文献中找到。
路线8
路线9显示了如何能够通过Strecker反应制备式8的化合物。这种公知的反应涉及式10的醛和式11的胺与氰化物源的反应。可以使用式10的游离醛，或者可以在添加前将它用亚硫酸氢钠处理以形成亚硫酸氢盐加合物。式11的胺可以是游离碱的形式或者作为酸加成盐。可以使用多种溶剂和氰化物源。对于其中R1是芳基的情况，路易斯酸如氯化铟(III)的存在可能是有益的。(关于典型条件，例如参见Ranu等，Tetrahedron，2002，58，2529-2532)。该反应已经成为大量综述的主题。关于该反应的条件和变化，参见下列参考文献和其中引用的参考文献D.T.Mowry，ChemicalReviews，1948，42，236，H.Groeger，Chemical Reviews，2003，103，2795-2827和M.North在“Comprehensive Organic Functional Group Transformations”A.R.Katritsky，O.Meth-Cohn和C.W.Rees编辑，第3卷，615-617；Pergamon，Oxford，1995中。
路线9
如路线10中所见，可以通过式1a的化合物与式12的有机金属试剂反应以形成式13的酮，然后与式14的羟胺和肼反应，来制备式1e的化合物。式1a与有机金属试剂优选格氏试剂(Grignard)和锂衍生物的反应可以在-100℃至25℃的温度下进行。优选地，所述反应在乙醚或四氢呋喃中进行，在-50℃至-78℃开始，然后将反应混合物温热到20-25℃。可以通过在多种溶剂和温度下与式14的试剂反应，将式13的酮转化成式1e的化合物。用于该转换的优选溶剂包括任选与水混合的低级醇、四氢呋喃和二噁烷。最优选使用乙醇。所述反应可以在0-120℃的温度下进行，最通常在所用溶剂的回流温度下完成。
路线10
如路线11所示，可以通过式2化合物与式15化合物反应，然后与氧化剂和式16的胺反应，来制备式1f的各种酰胺。将式15的化合物用强碱如六甲基二硅基氨基钠(sodium hexamethyldisilazide)、氢化钠、或1，8-二氮杂双环-[5.4.0]十一碳-7-烯处理，并添加到式2的化合物中。该混合物进一步用氧化剂如过乙酸、叔丁基过氧化氢、次氯酸钠、间氯过苯甲酸、过氧化镍或其它氧化剂处理。最后添加式16的胺以得到式1f的化合物。优选-20℃至80℃的反应温度，最优选20-30℃的温度。可以使用多种溶剂，优选四氢呋喃。关于将这种酰胺形成技术用于多种杂环卤化物的综述，参见Zhang，Synlett，2004，2323-2326。
路线11
如路线12所示，可以通过下列反应将式1g的化合物转化成式1j的化合物。可以通过用强酸处理将式1g的化合物转化成式17的化合物。可以成功地使用多种酸。三氟乙酸是用于该转换的优选酸。所述反应通常在约20-30℃、在惰性溶剂如二氯甲烷中进行。多种试剂都可以将式17的化合物转化成式1h的化合物。许多胺化剂是文献中已知的并且在Vedejs，Org.Lett.，2003，7，4187-4190和其中引用的参考文献中进行了一定程度的详细讨论。优选的试剂是O-二(对甲氧基苯基)氧膦基羟胺。优选存在碱如氢化钠。式1h化合物与式18的醛和酮的反应得到式1i的化合物。所述反应可以在酸的存在下、在有或没有溶剂的情况下进行。适当的溶剂包括四氢呋喃、二氯甲烷或低级醇。可以通过标准还原技术将式1i的化合物还原成式1j的化合物。通常，这些反应通过在溶剂如低级醇或四氢呋喃中的硼系还原剂如硼氢化钠或三乙酰氧基硼氢化钠与式1i化合物的反应来进行。也可以使用本领域技术人员已知的其它还原技术。还原亚胺型键的方法和技术的概略可以在Organic Reactions，(New York)2002，59，1-714中找到。
路线12

通过如路线13所示的两步方法，可以由式19的烯胺化合物合成其中A是NH并且R2是腈的式1k化合物。所述烯胺与[[[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基]亚氨基]丙二腈在碱如吡啶或三乙胺的存在下、在多种溶剂中反应以提供式20的化合物。优选的溶剂包括氯仿、二氯甲烷和N，N-二甲基甲酰胺。在第二步中，式20的化合物与式1l的胺反应以得到期望的式1k的化合物。这些方法的例子可以在Lang等，Helv.Chem.Acta.，1986，69，1025-103中找到。
路线13
式19的烯胺的合成是本领域公知的。关于制备方法的综述，参见例如Hickmott等，Tetrahedron，1982，38，1975-2050和Tetrahedron，1982，38，3363-3446。
如路线14所示，通过酸水解，可以由其中A是NH并且R2是腈的式1k化合物合成其中A是NH并且R2是CONH2的式1l的化合物。可以使用试剂如三氟乙酸和三氟乙酸/硫酸混合物。该反应可以在约0-200℃、优选约20-80℃进行。
路线14
如路线15所示，可以通过式22化合物与式21化合物(其中Z1是合适的离去基团如卤素(例如F、Cl、Br、I)、OS(O)2CH3(甲磺酸酯(methanesulfone))、OS(O)2CF3、OS(O)2Ph-p-CH3(对甲苯磺酸酯(p-toluenesulfone))等，优选氟化物)的反应，来制备式1m的化合物。该反应在强碱如金属氢化物、碱金属氢氧化物或碱金属碳酸盐的存在下，在存在或不存在合适的非质子溶剂如N，N-二甲基甲酰胺和二甲基亚砜的情况下进行。该反应的合适温度范围是约0-150℃。当Z1处于式21的苯环的4-位并且至少两个取代基R20a是吸电子基团如氟化物时，该反应进行得特别良好。
路线15
其中每个R20a独立地是上面发明概述中所定义的R29，r是0-4的整数，而且Y、X和Q如上面发明概述中所定义。
如路线16所示，式1m的化合物也可以由式1n的化合物(其中Y是杂原子如O或N，G1是合适的保护基团如烷基，优选Y是氧且G1是CH3)制备。在这种优选情况下，用合适的脱保护试剂将式1n的化合物脱保护以形成式23的化合物。在存在或不存在溶剂如二氯甲烷和二氯乙烷的情况下，在约-80℃至120℃的温度下，可以使用合适的脱保护试剂如BBr3、AlCl3和HBr的乙酸溶液(参见Greene T.W.等在“Protective Groups inOrganic Synthesis”中)。
路线16
其中Z2是合适的离去基团如卤素(例如Cl、Br、I)、OS(O)2CH3(甲磺酸酯)、OS(O)2CF3、OS(O)2Ph-p-CH3(对甲苯磺酸酯)等。
然后联合碱如金属氢化物、碱金属氢氧化物或碱金属碳酸盐，在存在或不存在合适的非质子溶剂如N，N-二甲基甲酰胺和二甲基亚砜的情况下，在0℃-120℃使式23的化合物与烷化剂24反应。特别值得注意的方法在N，N-二甲基甲酰胺的存在下，在70℃使用Ca2CO3。
路线17

路线17列出了使用烷化剂25，与式23的化合物得到式10的化合物的情况，所述烷化剂中G2是保护基团，Z3是离去基团如卤素(例如Cl、Br、I)、OS(O)2CH3(甲磺酸酯)、OS(O)2CF3、OS(O)2Ph-p-CH3(对甲苯磺酸酯)等。最优选地，所述保护基团G2是苄基，但也可以使用其它基团如三烷基硅烷和酯。在使用苄基的情况下，使用钯催化的氢化进行脱保护(参见Greene T.W.等在“Protective Groups in Organic Synthesis”中)得到式1p的化合物。
路线18
如路线18所示，在碱如NaH、Cs2CO3或三乙胺的存在下，在非质子溶剂如N，N-二甲基甲酰胺中，在约-10℃至50℃的温度下，可以由式26的化合物(其中Y是O、S或HNR)开始，其与式27的化合物(其中Z4是合适的离去基团如卤素(例如Cl、Br、I)、OS(O)2CH3(甲磺酸酯)、OS(O)2CF3、OS(O)2Ph-p-CH3(对甲苯磺酸酯)等)反应来制备1q型化合物。然后在合适的非质子溶剂如四氢呋喃或乙醚中，在约-80℃至0℃的温度下，用强碱如n-BuLi处理所得的式28化合物，然后添加N，N-二甲基甲酰胺以获得式29的醛，然后对其进行上述方法以获得式1q的化合物。
路线19
使用各种偶联剂，联合钯催化的偶联反应，可以由式1r的化合物合成式1t的化合物(其中Z4是离去基团如卤素(例如F、Cl、Br、I)、OS(O)2CH3(甲磺酸酯)、OS(O)2CF3、OS(O)2Ph-p-CH3(对甲苯磺酸酯)等)。具体地，路线19例示在Pd和Cu催化剂和碱如三乙胺的存在下，在约20-150℃的温度下，可以使式1r的化合物与式30的化合物进行Sonogashira反应(参见Sonogashira，K.在Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions中；Diederich，F.，Stang，P.J.，Eds.；Wiley-VCHNew York，1998；第5章)，以得到式1s的化合物。根据普通方法，在氢气的存在下用Pd催化剂还原式1s的化合物，产生式1t的化合物。
路线20
可以通过定向金属化制备邻位卤化的苯甲醛。通过式31的母体化合物与卤素源的反应，可以制备式32的某些化合物(其中R20b是取代基如质子、卤素或烷基、R20c是卤素、Y是O，并且G3是烷基)，如路线20所示。在一个例子中，在非质子溶剂如四氢呋喃或乙醚中，在-100℃至0℃的温度下，取代的二氨基乙烷如N，N，N’-三甲基乙二胺联合过量的烷基锂如正丁基锂或仲丁基锂与式31的醛反应。进一步添加卤素源如N-氯代琥珀酰亚胺、六氯乙烷、

或碘甲烷作为合适的亲电体，得到式32的化合物。该方法的例子可以在Comins，D.L.和Brown，J.D.，J.Org.Chem.，1984，49，1078-1083中找到。
认识到上面所述关于制备式1的化合物的一些试剂和反应条件可能与中间体中存在的某些官能团不相容。在这些情况下，在合成中引入保护/脱保护步骤或官能团相互转化会有助于获得期望的产物。保护基的使用和选择对于化学合成领域的技术人员而言会是清楚的(参见例如T.W.Greene；P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，2nd ed.；WileyNew York，1991)。本领域技术人员会认识到，在某些情况下，如任何单独的路线所示，在引入给定的试剂后，可能必须进行未详细描述的额外的常规合成步骤以完成式1的化合物的合成。本领域技术人员还会认识到，可能必须以不同于制备式1的化合物的具体顺序所指的顺序进行上述路线中所述步骤的组合。
本领域技术人员还会认识到，可以对本文描述的式1的化合物和中间体进行各种亲电反应、亲核反应、自由基反应、有机金属反应、氧化反应和还原反应以添加取代基或修饰已有的取代基。
无需进一步说明，相信本领域技术人员利用以上描述可以最大限度地利用本发明。因此以下实施例应理解为仅是举例说明，而不以任何方式限制公开内容。下列实施例中的步骤例示在整体合成转换中用于各步骤的方法，而且用于各步骤的原料可以不必通过其它实施例或步骤所述的方法的具体制备操作来制备。除了色谱溶剂混合物或另有说明，百分比为按重量计。除非另有说明，色谱溶剂混合物的份数和百分比为按体积计。MPLC指硅胶上的中压液相色谱法。HPLC指高效液相色谱法。1H NMR谱报告为自四甲基硅烷向低场方向位移的ppm值；“s”指单峰，“d”指双峰，“t”指三重峰，“m”指多重峰，“dd”指双重双峰(doublet of doublet)，“ddd”指双重双重双峰，“br s”指宽单峰。
实施例1 5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物1)的制备 步骤A2，6-二氟-α-[(2-甲基丙基)氨基]苯乙腈的制备
向异丁胺(2.92g，40mmol)和氰化钠(1.94g，40mmol)的水(40mL)溶液中添加2，6-二氟苯甲醛(5.7g，40mmol)的甲醇(40mL)溶液。以使得温度保持在低于35℃的速率进行添加。将反应混合物在室温下搅拌18h。将混合物在水(150mL)和二氯甲烷(150mL)之间分配。有机层用水(2×50mL)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)并减压蒸发，得到油。使用己烷作为洗脱液的硅胶快速色谱法纯化并合并适当的馏分，得到4.92g标题化合物，为油。
1H NMR(CDCl3)δ 8.4(br s，1H)，7.3-7.2(m，1H)，6.9(m，2H)，3.5(m，2H)，2.0(m，1H)，0.9(m，6H)。
步骤B3，5-二氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮的制备
在25℃搅拌草酰氯(3.34g，26mmol)的氯苯(35mL)溶液并通过加液漏斗添加2.46g(80％纯度，9mmol)2，6-二氟-α-[(2-甲基丙基)氨基]-苯乙腈(即实施例1步骤A的产物)。将所得反应混合物在70℃加热18h并在90℃加热24h。减压蒸发溶剂以剩下油。使用乙酸乙酯/己烷梯度(1:9-2:3)对该残余物进行硅胶色谱纯化，合并适当的馏分，得到1.2g标题化合物，为油，其在静置后固化。该产物具有足够的纯度以用于后续反应。
1H NMR(CDCl3)δ 7.6(m，1H)，7.1(m，1H)，7.0(m，1H)，3.7(m，2H)，1.9(m，1H)，0.9(m，3H)，0.7(d，3H)。
步骤C5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物1)的制备
将溶于N，N-二甲基甲酰胺(2mL)的3，5-二氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例1步骤B的产物)(200mg，0.6mmol)、吡唑(45mg，0.66mmol)和碳酸钾(166mg，1.2mmol)的混合物在60℃加热18h。将混合物在乙酸乙酯(20mL)和水(10mL)之间分配。有机层用水洗涤(3×10mL)。使用己烷/乙酸乙酯梯度(1:9-2:3)作为洗脱液对蒸发后的残余物进行硅胶色谱纯化，得到60mg标题化合物，即本发明的化合物，为油，其在后来固化，在118-119℃熔化。
1H NMR(CDCl3)δ 9.1(m，1H)，7.9(m，1H)，7.5(m，1H)，7.1(m，2H)，6.5(m，1H)，3.8(d，2H)，2.0(m，1H)，0.8(d，6H)。
实施例2 5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(2-吡啶基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物2)的制备
将3，5-二氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例1步骤B的产物)(200mg，0.6mmol)、三丁基甲锡烷基吡啶(LancasterSynthesis，240mg，0.63mmol)和氯化双(三苯基膦基)钯(II)(20mg，0.03mmol)的混合物在甲苯中在110℃加热18h。混合物通过

硅藻土助滤剂垫过滤，并用乙酸乙酯漂洗。将溶剂减压蒸发。使用乙酸乙酯/己烷梯度(1:9-2:3)对蒸发后的残余物进行硅胶色谱纯化，合并适当的馏分，得到56mg标题产物，即本发明的化合物，为油。
1H NMR(CDCl3)δ 8.86(m，1H)，8.43(m，1H)，7.83(m，1H)，7.59(m，1H)，7.38(m，1H)，7.12(m，2H)，3.79(d，2H)，2.00(m，1H)，0.79(d，6H). 实施例3 6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物342)的制备
将5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例1步骤C的产物)(0.70g，1.92mmol)、三乙胺(0.40mL，2.88mmol)和10％炭载钯(50mg，0.471mmol)在乙酸乙酯(10mL)中的混合物在50psi(345kPa)氢压力下振摇过夜。反应混合物通过

硅藻土助滤剂过滤。用旋转蒸发器除去溶剂。将残余物溶于乙酸乙酯并用水洗涤。将有机层干燥，并用旋转蒸发器除去溶剂。残余物通过硅胶快速色谱法纯化(1-33％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到110mg标题产物，即本发明的化合物，为油，其在后来固化，在91-92℃熔化。
1H NMR(CDCl3)δ 9.10(s，1H)，7.86(s，1H)，7.54(m，1H)，7.31(s，1H)，7.09(m，2H)，6.50(s，1H)，3.80(d，2H)，2.04(m，1H)，0.78(d，6H)。
实施例4 5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物271)、1-氨基-5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-3-(1H-吡唑-1-)-2(1H)-吡嗪酮(化合物400)和5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-[(1-甲基亚乙基)氨基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物392)的制备 步骤A2，6-二氟-α-[[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]苯乙腈的制备
向亚硫酸氢钠(19.9g，0.191mol)的水(180mL)和甲醇(18mL)溶液中添加2，6-二氟苯甲醛(25.95g，0.182mol)。将反应混合物在室温下搅拌15分钟。观察到轻微放热到30℃。然后添加氰化钠(8.93g，0.182mol)，并将反应混合物搅拌25分钟。将反应混合物冷却到10℃并滴加4-甲氧基苄胺(24.99g，0.182mol)。将反应混合物加热到65℃保持5h并使其冷却到室温过夜。反应混合物用乙醚(200mL)稀释并用盐水洗涤(2×100mL)。水层用乙醚萃取一次。将有机层合并，干燥(MgSO4)，过滤并减压浓缩，得到51.26g标题化合物，为油。
1H NMR(CDCl3)δ 7.37-7.28(m，3H)，6.96(t，2H)，6.88(d，2H)，4.94(s，1H)，4.05(d，1H)，3.89(d，1H)，3.81(s，3H)，2.27(s，1H)。
步骤B3，5-二氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-[(4-甲氧基苯基)-甲基]-2(1H)-吡嗪酮的制备
向2，6-二氟-α-[[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]苯乙腈(即实施例4步骤A的产物)(48.8g，0.169mol)的氯苯(550mL)溶液中滴加草酰氯(64.45g，0.507mol)，同时将温度保持低于15℃。然后将反应混合物温热至室温并搅拌30分钟。然后添加盐酸三乙胺(46.6g，0.338mol)并将反应混合物加热到80℃保持2h。使反应混合物在室温下搅拌过夜。然后将所得混合物减压浓缩，并通过硅胶快速色谱法纯化(25％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到31.2g标题化合物，为油。
1H NMR(CDCl3)δ 7.55(s，1H)，7.02(dd，2H)，6.77-6.67(m，4H)，5.04(s，2H)，3.75(s，3H)。
步骤C5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-[(4-甲氧基苯基)-甲基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物271)的制备
向3，5-二氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-[(4-甲氧基苯基)-甲基]-2(1H)-吡嗪酮(即实施例4步骤B的产物)(20g，50.0mmol)的乙腈(250mL)溶液中添加吡唑(3.43g，60.0mmol)和碳酸氢钾(20.74g，150mmol)，并在60℃搅拌3h。然后将反应混合物冷却到室温并倒入冰水(500mL)中。在搅拌10分钟后，将所得沉淀物过滤，用冷水漂洗并干燥，得到21.17g标题产物，即本发明的化合物，为灰白色固体。
1H NMR(CDCl3)δ 9.13(d，1H)，7.90(d，1H)，7.54(s，1H)，7.05-6.97(m，2H)，6.83-6.75(m，2H)，6.74-6.68(m，2H)，6.52(dd，1H)，5.13(s，2H)，3.75(s，3H)。
步骤D5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮的制备
将5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-[(4-甲氧基苯基)-甲基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例4步骤C的产物)(21.17g，49.0mmol)的三氟乙酸(37mL，493mmol)溶液回流搅拌6h并使其冷却到室温过夜。将反应混合物减压浓缩，并使用100％二氯甲烷作为洗脱液对所得粗油进行硅胶快速色谱法纯化。将其从甲醇中重结晶，得到6.07g标题化合物，为油。
1H NMR(CDCl3)δ 12.74(s，1H)，8.63(d，1H)，7.84(s，1H)，7.44(ddd，1H)，7.02(t，2H)，6.64(s，1H)。
步骤E1-氨基-5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物400)的制备
在大约-78℃，向氢化钠(55％油分散体，42.5mg，0.974mmol)的四氢呋喃(8mL)浆中添加1-氨基-5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例4步骤D的产物)(250mg，0.812mmol)的四氢呋喃(11mL)溶液。将反应混合物在-78℃搅拌15分钟，然后在0℃再搅拌15分钟。然后添加[[双(4-甲氧基苯基)氧膦基]氧基]氨基甲酸1，1-二甲基乙酯(262mg，8.93mmol)，并使反应混合物温热至室温过夜。然后将反应混合物减压浓缩并通过MPLC纯化(0-100％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到36mg标题产物，即本发明的化合物，为油。
1H NMR(CDCl3)δ 9.12-9.03(m，1H)，7.91(s，1H)，7.64-7.49(m，1H)，7.17-7.05(m，2H)，6.54(s，1H)，5.43(s，2H)。
步骤F5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-[(1-甲基亚乙基)-氨基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物392)的制备
向1-氨基-5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例4步骤E的产物)(36mg，0.111mmol)的丙酮(10mL)溶液中添加2M的氯化氢乙醚溶液(2mL)和4

分子筛。然后将反应混合物在室温下搅拌过夜。将所得混合物减压浓缩，得到40mg标题产物，即本发明的化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.10(s，1H)，7.90(s，1H)，7.54-7.45(m，1H)，7.12-7.03(m，1H)，7.03-6.95(m，1H)，6.51(s，1H)，2.10(s，3H)，1.94(s，3H)。
实施例5 5-氯-6-(1-甲基丙基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物424)的制备 步骤A3-甲基-2-[(2-甲基丙基)氨基]戊腈的制备
在室温下向亚硫酸氢钠(2.31g，22.2mmol)的水(20mL)和甲醇(2mL)溶液中添加2-甲基丁醛(1.82g，21.1mmol)。然后将反应混合物搅拌15分钟，并添加氰化钠(1.09g，22.2mmol)。将反应混合物再搅拌20分钟。然后在冰水浴中冷却混合物，并在大约2分钟内添加异丁胺(1.70g，23.2mmol)的甲醇(4mL)溶液。将反应混合物在0℃搅拌15分钟，然后加热到35℃保持2h。然后将反应混合物用乙酸乙酯萃取(2×20mL)，合并的有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)并浓缩，得到3.1g标题化合物，为黄色油。
1H NMR(CDCl3)δ 3.41-3.33(m，1H)，2.71-2.65(m，1H)，2.44-2.36(m，1H)，1.79-1.66(m，2H)，1.66-1.54(m，1H)，1.39-1.29(m，1H)，1.10-1.03(m，3H)，0.97-0.89(m，9H)。
步骤B3，5-二氯-6-(1-甲基丙基)-1-(2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮的制备
在室温下，将3-甲基-2-[(2-甲基丙基)氨基]戊腈(即实施例5步骤A的产物)(3.1g，18.4mmol)的氯苯(12mL)溶液在20分钟内添加到草酰氯(11.7g，92.1mmol)的氯苯(43mL)溶液中。然后滴加N，N-二甲基甲酰胺(3mL)。然后将反应混合物加热到95℃过夜。将反应混合物减压浓缩，并将残余物通过MPLC纯化(0-100％梯度的乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到3.7g标题化合物，为固体。
1H NMR(CDCl3)δ 4.22-4.08(m，1H)，4.02-3.92(m，1H)，3.02-2.88(m，1H)，2.09-1.98(m，2H)，1.97-1.87(m，1H)，1.45(d，3H)，1.02-0.91(m，9H)。
步骤C5-氯-6-(1-甲基丙基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物424)的制备
将3，5-二氯-6-(1-甲基丙基)-1-(2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例5步骤B的产物)(0.30g，1.09mmol)、吡唑(0.081g，1.20mmol)和碳酸钾(0.30g，2.17mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(4mL)中的混合物在60℃加热过夜。然后将反应混合物减压浓缩。残余物通过MPLC纯化(0-100％梯度的乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到0.22g标题产物，即本发明的化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 8.96(br s，1H)，7.83(br s，1H)，6.45(br s，1H)，4.40-4.15(m，1H)，4.16-3.97(m，1H)，3.12-2.92(m，1H)，2.16-2.01(m，2H)，2.02-1.88(m，1H)，1.49(d，3H)，1.05-0.98(m，6H)，0.98-0.92(m，3H)。
实施例6 5-氯-6-(2-氯-4-氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物53)的制备 步骤A2-氯-4-氟-α-[(2-甲基丙基)氨基]苯乙腈的制备
在室温下，向亚硫酸氢钠(1.53g，14.8mmol)在去离子水(14mL)和甲醇(1.3mL)的混合物中的溶液内添加2-氯-4-氟苯甲醛(2.23g，14.1mmol)。将反应混合物搅拌15分钟，并添加氰化钠(0.724g，14.8mmol)。将反应混合物再搅拌20分钟。用冰水浴冷却反应混合物，并在大约2分钟内添加异丁胺(1.13g，15.5mmol)的甲醇(2.67mL)溶液。将反应混合物在0℃搅拌15分钟，然后加热到35℃保持2h。然后将所得混合物用乙酸乙酯萃取(2×20mL)，合并的有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)并浓缩，得到3.09g标题化合物，为黄色油。
1H NMR(CDCl3)δ 7.65-7.61(m，1H)，7.22-7.18(m，1H)，7.10-7.04(m，1H)，5.01(s，1H)，2.70-2.64(m，1H)，2.58-2.51(m，1H)，1.81-1.71(m，1H)，0.97-0.92(m，6H)。
步骤B3，5-二氯-6-(2-氯-4-氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮的制备
在室温下，将溶于氯苯(8mL)的2-氯-4-氟-α-[(2-甲基丙基)氨基]苯乙腈(即实施例6步骤A的产物)(3.09g，12.8mmol)溶液在20分钟内滴加到草酰氯(8.15g，64.2mmol)的氯苯(30mL)溶液中。然后将反应混合物加热到100℃过夜。减压除去溶剂，并且残余物通过MPLC纯化(0-100％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到2.13g标题化合物，为固体。
1H NMR(CDCl3)δ 7.38-7.31(m，2H)，7.23-7.17(m，1H)，4.02-3.95(m，1H)，3.38-3.30(m，1H)，2.01-1.90(m，1H)，0.82(d，3H)，0.72(d，3H)。
步骤C5-氯-6-(2-氯-4-氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物53)的制备
将3，5-二氯-6-(2-氯-4-氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例6步骤B的产物)(0.350g，1.00mmol)、吡唑(0.075g，1.10mmol)和碳酸钾(0.276g，2.00mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(4mL)中的混合物加热到60℃过夜。将反应混合物减压浓缩，并将残余物通过MPLC纯化(0-100％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到0.256g标题产物，即本发明的化合物，为在137-139℃熔化的固体。
1H NMR(CDCl3)δ 9.10(d，1H)，7.89(d，1H)，7.48-7.38(m，1H)，7.37-7.30(m，1H)，7.27-7.14(m，1H)，6.56-6.46(m，1H)，4.16-4.03(m，1H)，3.48-3.36(m，1H)，2.08-1.91(m，1H)，0.84(d，3H)，0.75(d，3H)。
实施例7 5-氯-6-(2-氯-4-氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮的阻转异构体的分离(化合物302)和(化合物303)
在由Daicel Chemical Industries，LTD.生产的

OJ分析HPLC柱上纯化5-氯-6-(2-氯-4-氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例6步骤C的产物)(40mg，0.10mmol)(0.1％甲酸在49.9％甲醇和50％乙腈的混合物中作为洗脱液，1mL/min)，在18.9分钟的保留时间得到16mg第二标题产物，即本发明的化合物303，并在22.6分钟的保留时间得到16.5mg第一标题产物，即本发明的化合物302。
5-氯-6-(2-氯-4-氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物302)的1H NMR(CDCl3)δ 9.10(br s，1H)，7.89(br s，1H)，7.42-7.37(m，1H)，7.36-7.31(m，1H)，7.24-7.16(m，1H)，6.51(br s，1H)，4.17-4.04(m，1H)，3.46-3.34(m，1H)，2.09-1.93(m，1H)，0.85(d，3H)，0.75(d，3H)。
5-氯-6-(2-氯-4-氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物303)的1H NMR(CDCl3)δ 9.09(br s，1H)，7.89(br s，1H)，7.42-7.36(m，1H)，7.36-7.31(m，1H)，7.23-7.17(m，1H)，6.52(br s，1H)，4.16-4.04(m，1H)，3.45-3.34(m，1H)，2.09-1.93(m，1H)，0.84(d，3H)，0.75(d，3H)。
实施例8 6-氯-4-(3-氟苯基)-3，4-二氢-3-氧代-5-(2，4，6-三氟苯基)吡嗪酰胺(化合物414)的制备 步骤A2，4，6-三氟-α-[(3-氟苯基)氨基]苯乙腈的制备
在室温下，向2，4，6-三氟苯甲醛(3.20g，20.0mmol)的四氢呋喃(25mL)溶液中依次添加3-氟苯基苯胺(2.02g，18.2mmol)、氰化钾(4.74g，72.7mmol)和氯化铟(III)(4.02g，18.2mmol)。然后将反应混合物搅拌过夜。反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯萃取(2×100mL)。将有机萃取物干燥(MgSO4)，过滤并浓缩，得到5.33g标题化合物，为油。
1H NMR(CDCl3)δ 7.25(m，1H)，6.81(m，2H)，6.62(m，1H)，6.53(m，2H)，5.64(d，1H)，4.42(d，1H)。
步骤B3，5-二氯-1-(3-氟苯基)-6-(2，4，6-三氟苯基)-2(1H)-吡嗪酮的制备
在室温下，滴加草酰氯(8.30mL，95.2mmol)来处理2，4，6-三氟-α-[(3-氟苯基)氨基]苯乙腈(即实施例8步骤A的产物)(5.33g，19.0mmol)的氯苯(20mL)溶液。将所得混合物加热到100℃保持2.5h。然后添加一滴N，N-二甲基甲酰胺，并继续加热过夜。将反应混合物冷却到室温，并减压浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法纯化(15-30％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到6.49g标题化合物，为油。
1H NMR(CDCl3)δ 7.35(m，1H)，6.94(m，2H)，6.64(m，2H)。
步骤C6-氯-4-(3-氟苯基)-3，4-二氢-3-氧代-5-(2，4，6-三氟苯基)吡嗪酰胺(化合物414)的制备
向3，5-二氯-1-(3-氟苯基)-6-(2，4，6-三氟苯基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例8步骤B的产物)(0.39g，1.00mmol)的四氢呋喃(5mL)溶液中添加1H-苯并三唑-1-乙腈(0.24g，1.50mmol)和双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂(1.0M的四氢呋喃溶液，2.5mL，2.50mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1.5h。然后添加氨的二噁环烷溶液(0.5M，6mL，3.0mmol)并将反应混合物再搅拌10分钟。向反应混合物中滴加过乙酸(32wt.％乙酸溶液，0.84mL)，并将所得混合物在室温下搅拌3h。然后添加饱和亚硫酸氢钠水溶液(50mL)，并用乙酸乙酯萃取(2×50mL)反应混合物。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，过滤，并减压浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法纯化(50-80％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到0.15g标题产物，即本发明的化合物，为油。
1H NMR(CDCl3)

8.98(s，2H)，7.63(m，2H)，7.40(m，1H)，7.12(m，2H)，6.24(s，1H)。
实施例9 5-溴-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物99)和5-甲基-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物149)的制备 步骤A3，5-二溴-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮的制备
在低于30℃的温度下，向草酰溴(8.66g，40.1mmol)的氯苯(40mL)溶液中添加2，6-二氟-α-[(2-甲基丙基)氨基]苯乙腈(即实施例1步骤A的产物)(3.0g，13.3mmol)的氯苯(20mL)溶液。将反应混合物在室温下搅拌45分钟。然后添加催化量的N，N-二甲基甲酰胺，并将反应混合物在100℃加热18h。用旋转蒸发器除去溶剂。残余物通过硅胶快速色谱法纯化(5％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到2g标题化合物，为在125-126℃熔化的固体。
1H NMR(CDCl3)δ 7.6(m，1H)，7.1(m，2H)，3.7(d，2H)，1.9(m，1H)，0.7(d，6H)。
步骤B5-溴-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物99)的制备
将3，5-二溴-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例9步骤A的产物)(1.4g，3.3mmol)、吡唑(248mg，3.6mmol)和碳酸钾(1.3g，9.9mmol)在乙腈(10mL)中的混合物作为反应混合物在80℃加热2h，然后在60℃加热过夜。然后另添加吡唑(100mg)，并在80℃加热2h。用水稀释反应混合物，并将所得固体过滤。将过滤的固体用二氯甲烷溶解，通过

硅藻土柱(Varian)并减压浓缩以剩下油。残余物用己烷和乙醚的混合物研磨，得到1.05g标题产物，即本发明的化合物，为在111-112℃熔化的白色固体。
1H NMR(CDCl3)δ 9.0(d，1H)，7.8(s，1H)，7.6(m，1H)，7.1(m，2H)，6.5(d，1H)，3.8(d，2H)，1.9(m，1H)，0.7(d，6H)。
步骤C5-甲基-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物149)的制备
在低于10℃的温度，在氮氛下，向5-溴-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例9步骤B的产物)(200mg，0.48mmol)和四(三苯基膦)钯(16mg，0.015mmol)的二甲氧基乙烷(5mL)溶液中滴加2M三甲基铝的己烷溶液(0.26mL，0.51mmol)。将反应混合物温热至室温，然后在80℃加热约90分钟。所得混合物用冰-水浴冷却并用饱和氯化铵水溶液(10mL)终止反应。反应混合物用乙酸乙酯稀释，并用盐水洗涤分离的有机层。将所得有机层通过

硅藻土柱(Varian)并减压浓缩以得到油。该残余物通过硅胶快速色谱法纯化(5-40％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到44mg标题产物，即本发明的化合物，为在105-106℃熔化的白色固体。
1H NMR(CDCl3)

9.12(s，1H)，7.86(s，1H)，7.58(m，1H)，7.10(m，2H)，6.48(s，1H)，3.77(d，2H)，2.17(s，3H)，1.95(m，1H)，0.75(d，6H)。
实施例10 6-氯-5-(2，6-二氟苯基)-3，4-二氢-4-(2-甲基丙基)-3-氧代吡嗪腈(化合物5)的制备
将3，5-二氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例1步骤B的产物)(200mg，0.6mmol)和氰化钠(31mg，0.63mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(2mL)中的混合物在60℃加热过夜。反应混合物用水稀释并用乙醚萃取。将有机层分离并用水洗涤，通过

硅藻土柱(Varian)并减压浓缩以得到油。该残余物通过硅胶快速色谱法纯化(10-20％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到70mg标题产物，即本发明的化合物，为在100-102℃熔化的白色固体。
1H NMR(CDCl3)δ 7.6(m，lH)，7.1(m，2H)，3.7(d，2H)，1.9(m，1H)，0.7(m，6H)。
实施例11 5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物85)的制备
向4-碘-1-甲基-1H-咪唑(0.31g，1.50mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中添加溴化乙基镁(3.0M四氢呋喃溶液，0.50mL，1.50mmol)。将反应混合物在室温下搅拌15分钟，并添加3，5-二氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例10步骤A的产物)(0.50g，1.50mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后用饱和氯化铵水溶液(1mL)终止反应。使所得混合物通过

硅藻土柱(Varian)并减压浓缩以得到油。该残余物通过硅胶快速色谱法纯化(5％甲醇的乙酸乙酯溶液作为洗脱液)，得到150mg标题产物，即本发明的化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 8.35(s，1H)，7.59(s，1H)，7.58-7.51(m，1H)，7.08(t，2H)，3.78-3.74(m，5H)，2.01-1.92(m，1H)，0.76(d，6H)。
实施例12 5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(5-甲基-2-吡啶基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物209)的制备 步骤A5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-3-碘-1-(2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮的制备
向3，5-二氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例10步骤A的产物)(0.50g，1.50mmol)的乙腈(10mL)溶液中添加碘化钠(0.34g，2.25mmol)、氢碘酸(10滴)和丙酮(1mL)。将所得混合物回流加热2h并使其冷却到室温。将反应混合物用乙醚稀释，过滤，并真空浓缩。将残余物通过用二氯甲烷洗涤的

硅藻土柱(Varian)，并减压浓缩以得到油。该残余物使用Bond

SI硅胶柱(Varian)纯化并用二氯甲烷作为洗脱液，得到620mg标题化合物。
1H NMR(CDCl3)

7.62-7.55(m，1H)，7.10(t，2H)，3.68(d，2H)，1.93(s，1H)，0.77-0.73(m，6H)。
步骤B5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-3-(5-甲基-2-吡啶基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物209)的制备
向5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-3-碘-1-(2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例12步骤A的产物)(0.50g，1.18mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液中添加四(三苯基膦)钯(0)(0.13g，0.12mmol)和4-甲基-2-吡啶基溴化锌(Aldrich，0.5M四氢呋喃溶液，3.54mL，1.77mmol)。将所得混合物在80℃加热过夜并真空浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法纯化(20％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液作为洗脱液)，提供380mg标题产物，即本发明的化合物。
1H NMR(CDCl3)

8.68(s，1H)，8.40(s，1H)，7.65-7.57(m，2H)，7.12(t，2H)，3.79(d，2H)，2.44(s，3H)，2.04-1.99(m，1H)，0.78(d，6H)。
实施例13 5-氯-6-(2，6-二氟苯基)-3-甲酰胺基-1-(2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物422)的制备
在室温下，向3，5-二氯-6-(2，6-二氟苯基)-1-(2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例10步骤A的产物)(500mg，1.5mmol)和4

分子筛(8.0g)的N，N-二甲基甲酰胺(6mL)溶液中添加氢化钠(55％的在矿物油中的分散体，0.297g，3.75mmol)。将反应混合物搅拌15分钟，并添加甲酰胺(0.203g，4.5mmol)。将反应混合物在60℃搅拌3h，然后通过烧结玻璃料过滤并减压浓缩。残余物通过MPLC纯化(20-100％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到258mg标题化合物，即本发明的化合物，为油。
1H NMR(CDCl3)

9.41(d，1H)，9.15-9.08(m，1H)，7.62-7.53(m，1H)，7.14-7.07(m，2H)，3.71(d，2H)，1.94-1.84(m，1H)，0.76(d，6H)。
实施例14 5-(2，4-二氟苯基)-3，4-二氢-3-亚氨基-6-甲基-4-(2-甲基丁基)吡嗪腈(化合物471)和N-[3-氰基-6-(2，4-二氟苯基)-5-甲基-1-(2-甲基丁基)-2(1H)-亚吡嗪基]乙酰胺(化合物475)的制备 步骤A4-[1-(2，4-二氟苯基)-1-丙烯基]吗啉的制备
以使温度保持低于-10℃的速率向1-(2，4-二氟苯基)-1-丙酮(17g，100mmol)和吗啉(35mL，400mmol)的甲苯(350mL)溶液中滴加1M氯化钛(IV)的甲苯(50mL，50mmol)溶液。在添加完成后，将反应混合物温热到室温并搅拌过夜。然后将其通过

硅藻土助滤剂过滤。用旋转蒸发器除去溶剂，得到16g标题化合物，为油。
1H NMR(CDCl3)δ 7.28(m，1H)，6.89(dd，1H)，6.82(dd，1H)，4.82(q，1H)，3.68(m，4H)，2.72(m，4H)，1.46(d，3H)。
步骤B[[2-(2，4-二氟苯基)-1-甲基-2-(4-吗啉基)乙烯基]-亚氨基]丙二腈的制备
在0℃，向4-[1-(2，4-二氟苯基)-1-丙烯基]吗啉(即实施例14步骤A的产物)(8.0g，34mmol)和[[[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基]亚氨基]丙二腈(8.3g，34mmol)的乙醚(250mL)溶液中滴加吡啶(3.0mL，37mmol)的乙醚(50mL)溶液。在添加完成后，将反应混合物温热到室温并搅拌三天。将反应混合物用己烷稀释，并滤除固体。使用旋转蒸发器从滤液中除去溶剂。残余物用氯丁烷研磨，然后用水研磨。将所得固体在真空烘箱中干燥，得到7.1g标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 7.24(m，1H)，7.05(dd，1H)，6.99(dd，1H)，3.74(m，4H)，2.99(m，4H)，2.45(s，3H)。
步骤C5-(2，4-二氟苯基)-3，4-二氢-3-亚氨基-6-甲基-4-(2-甲基丁基)吡嗪腈(化合物471)的制备
在室温下，向[[2-(2，4-二氟苯基)-1-甲基-2-(4-吗啉基)乙烯基]亚氨基]丙二腈(即实施例14步骤B的产物)(2.0g，6.3mmol)的氯仿(20mL)溶液中添加2-甲基丁胺(0.87mL，7.6mmol)。将反应混合物放置过夜。用旋转蒸发器除去溶剂。残余物通过MPLC纯化(15-30％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到标题化合物的不纯样品(0.87g)。该材料进一步通过MPLC纯化(20-30％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到0.4g标题产物，即本发明的化合物，为红色油。
1H NMR(CDCl3)δ 7.25(m，1H)，7.08(dd，1H)，7.02(dd，1H)，3.76(br s，1H)，3.60(br s，1H)，1.92(m，1H)，1.90(s，3H)，0.72(m，6H)。
步骤DN-[3-氰基-6-(2，4-二氟苯基)-5-甲基-1-(2-甲基丁基)-2(1H)-亚吡嗪基]乙酰胺(化合物475)的制备
将5-(2，4-二氟苯基)-3，4-二氢-3-亚氨基-6-甲基-4-(2-甲基丁基)吡嗪腈(即实施例14步骤C的产物)(0.13g，0.41mmol)溶于乙酸酐(2mL)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后用旋转蒸发器浓缩。添加乙醚，并用1N氢氧化钠水溶液洗涤有机层。将其干燥(NaSO4)并用旋转蒸发浓缩。残余物通过MPLC纯化(30-50％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到90mg标题产物，即本发明的化合物，为粘性油。
1H NMR(CDCl3)δ 7.25(m，1H)，7.14(dd，1H)，7.07(dd，1H)，3.96(br s，1H)，3.84(br s，1H)，2.31(s，3H)，2.09(s，3H)，1.82(m，1H)，1.17(m，1H)，1.01(m，1H)，0.72(m，6H)。
实施例15 5-氯-6-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-(2-甲基丁基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物451)、5-氯-6-(2，6-二氟-4-羟基苯基)-1-(2-甲基丁基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物453)和5-氯-6-[4-[2-(二甲氨基)乙氧基]-2，6-二氟苯基]-1-(2-甲基丁基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物479)的制备 步骤A2，6-二氟-4-甲氧基苯甲醛的制备
将3，5-二氟茴香醚(5g，34.7mmol)溶于四氢呋喃(73mL)并冷却到-78℃。缓慢添加正丁基锂的溶液(2.5四氢呋喃溶液，2.5mL，2.50mmol)，并将反应混合物在-78℃搅拌1.5h。此时，添加N，N-二甲基甲酰胺(10mL)，并将反应物在-78°C搅拌10分钟，然后在0℃再搅拌10分钟。然后用50mL 1M HCl将反应混合物终止反应。将反应混合物用乙酸乙酯萃取(3×50mL)，将有机层合并，用MgSO4干燥，浓缩，并且通过MPLC纯化(0-20％梯度的乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)粗油，得到5.45g标题产物，为黄色蓬松固体。
1H NMR(CDCl3)δ 10.20(s，1H)，6.49(d，2H)，3.87(s，3H)。
步骤B2，6-二氟-4-甲氧基-α-[(2-甲氧丁基)氨基]苯乙腈的制备
在室温下，向亚硫酸氢钠(1.03g，9.9mmol)在去离子水(20mL)和甲醇(2.0mL)的混合物中的溶液添加2，6-二氟-4-甲氧基苯甲醛(即实施例15步骤A的产物)(1.62g，9.4mmol)。将反应混合物搅拌15分钟，并添加氰化钠(0.49g，9.9mmol)。将反应混合物再搅拌20分钟并用冰水浴冷却。在大约2分钟内添加甲基丁胺(0.90g，10.4mmol)的甲醇(4.0mL)溶液，并将所得反应混合物在0℃搅拌15分钟，然后加热到35℃保持2h。然后用乙酸乙酯萃取(2×40mL)所得混合物，将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)并浓缩，得到2.51g标题产物，为油。
1H NMR(CDCl3)δ 6.51(m，2H)，4.83(br s，1H)，3.80(s，3H)，2.76(m，1H)，2.52(m，1H)，1.49(m，2H)，1.17(m，1H)，0.90(m，6H)。
步骤C3，5-二氯-6-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-(2-甲基丁基)-2(1H)-吡嗪酮的制备
在室温下，将2，6-二氟-4-甲氧基-α-[(2-甲氧丁基)氨基]苯乙腈(即实施例15步骤B的产物)(2.51g，9.4mmol)的氯苯(10mL)溶液在20分钟内滴加到草酰氯(5.94g，46.8mmol)的氯苯(25mL)溶液中。然后将反应混合物加热到100℃过夜。然后添加N，N-二甲基甲酰胺(0.5mL)，并将反应混合物再加热2h。然后将反应混合物减压浓缩并通过MPLC纯化(0-100％梯度的乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)所得残余物，得到2.88g标题产物，为油。
1H NMR(CDCl3)δ 6.61(m，2H)，3.90(s，3H)，3.76(m，2H)，1.70(m，1H)，1.20(m，1H)，1.03(m，1H)，0.74(m，6H)。
步骤D5-氯-6-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-(2-甲基丁基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物451)的制备
将3，5-二氯-6-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-(2-甲基丁基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例15步骤C的产物)(1.0g，2.65mmol)、吡唑(0.20g，2.92mmol)和碳酸钾(0.73g，5.30mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(12mL)中的混合物加热到60℃过夜。将反应混合物减压浓缩，并将残余物通过MPLC纯化(0-100％梯度的乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到0.676g标题产物，即本发明的化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.09(m，1H)，7.88(m，1H)，6.63(m，2H)，6.50(m，1H)，3.87(m，5H)，1.75(m，1H)，1.25(m，1H)，1.05(m，1H)，0.74(m，6H)。
步骤E5-氯-6-(2，6-二氟-4-羟基苯基)-1-(2-甲基丁基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物453)的制备
在-78℃，向5-氯-6-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-(2-甲基丁基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例15步骤D的产物)(0.676g，1.65mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中缓慢添加三溴化硼的溶液(1M二氯甲烷溶液，6.61mL，6.61mmol)。将反应混合物温热到室温过夜。然后将反应混合物冷却到0℃并用饱和氯化铵水溶液终止反应。将反应混合物用二氯甲烷(2×40mL)和乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将有机层合并，用MgSO4干燥并浓缩。将粗残余物通过MPLC纯化(0-100％梯度的乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，获得0.344g标题产物，即本发明的化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 10.53(br s，1H)，9.24(d，1H)，7.94(d，1H)，6.74(d，2H)，6.57(m，1H)，3.90(d，2H)，1.76(m，1H)，1.26(m，1H)，1.05(m，1H)，0.77(m，6H)。
步骤F5-氯-6-[4-[2-(二甲氨基)乙氧基]-2，6-二氟苯基]-1-(2-甲基丁基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物479)的制备
向5-氯-6-(2，6-二氟-4-羟基苯基)-1-(2-甲基丁基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例15步骤E的产物)(0.314g，0.80mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中添加碳酸铯(1.30g，3.98mmol)。将反应混合物加热到70℃保持10分钟，然后添加固体2-氯-N，N-二甲基乙胺盐酸盐(0.344g，2.39mmol)。将反应混合物再加热2.25h。然后滤除固体，并将反应混合物浓缩。将粗残余物通过MPLC纯化(0-20％梯度的甲醇的二氯甲烷溶液作为洗脱液)，获得0.123g标题产物，即本发明的化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.09(m，1H)，7.88(m，1H)，6.65(m，2H)，6.50(m，1H)，4.12(m，2H)，3.85(m，2H)，2.77(m，2H)，2.36(s，6H)，1.73(m，1H)，1.24(m，1H)，1.04(m，1H)，0.75(m，6H)。
实施例16 5-氯-1-(2，2，3，3，3-五氟丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-6-(2，4，6-三氟苯基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物468)的制备 步骤A2，2，3，3，3-五氟-N-[(2，4，6-三氟苯基)亚甲基]-1-丙胺的制备
使用Dean-Stark装置将2，4，6-三氟苯甲醛(4.51g，28.00mmol)和2，2，3，3，3-五氟丙胺(4.20g，28.17mmol)在甲苯(30mL)中的混合物回流加热过夜。使反应混合物冷却到室温并真空浓缩，提供6.55g标题产物。该化合物具有足够的纯度以用于后续反应。
1H NMR(CDCl3)δ 8.50(s，1H)，6.80-6.72(m，2H)，4.23-4.16(m，2H)。
步骤B2，4，6-三氟-α-[(2，2，3，3，3-五氟丙基)氨基]苯乙腈的制备
用氰化三甲基甲硅烷(18.0mL，135.1mmol)处理2，2，3，3，3-五氟-N-[(2，4，6-三氟苯基)亚甲基]-1-丙胺(即实施例16步骤A的产物)(6.55g，22.50mmol)、碘化锌(7.18g，22.50mmol)和5

分子筛(22.5g)在二氯甲烷(25mL)中的混合物，并将反应混合物加热回流过夜。在冷却到室温后，将反应混合物通过

硅藻土助滤剂过滤并真空浓缩。将反应残余物用甲醇(100mL)和10％碳酸氢钠水溶液(20mL)处理，并用乙醚萃取(2×50mL)所得混合物。分离醚相，用MgSO4干燥，并真空浓缩。所得粗残余物通过硅胶快速色谱法纯化(5-10％梯度的乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，提供1.0g标题产物。
1H NMR(CDCl3)δ 6.86-6.74(m，2H)，5.04(d，1H)，3.55-3.30(m，2H)，2.27-2.21(m，1H)。
步骤C3，5-二氯-1-(2，2，3，3，3-五氟丙基)-6-(2，4，6-三氟苯基)-2(1H)-吡嗪酮的制备
在室温下，将草酰氯(4.33mL，49.65mmol)滴加到2，4，6-三氟-α-[(2，2，3，3，3-五氟丙基)氨基]苯乙腈(即实施例16步骤B的产物)(3.16g，9.93mmol)在氯苯(20mL)中的混合物内。将所得混合物加热到100℃保持3h，然后使其冷却到室温。然后添加一滴N，N-二甲基甲酰胺。将反应混合物再加热到100℃过夜。然后再使反应混合物冷却到室温并真空浓缩，提供粗残余物，将其通过硅胶快速色谱法纯化(10％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，提供0.47g标题产物。
1H NMR(CDCl3)δ 6.94-6.89(m，2H)，4.65-4.45(m，2H)。
步骤D5-氯-1-(2，2，3，3，3-五氟丙基)-3-(1H-吡唑-1-基)-6-(2，4，6-三氟苯基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物468)的制备
将3，5-二氯-1-(2，2，3，3，3-五氟丙基)-6-(2，4，6-三氟苯基)-2(1H)-吡嗪酮(即实施例16步骤C的产物)(0.47g，1.10mmol)和吡唑(0.15g，2.20mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物加热到60℃过夜。将反应混合物冷却到室温并真空浓缩。对所得残余物进行硅胶快速色谱法(10％-20％梯度的乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)以提供部分纯化的材料。用己烷和正丁基氯的混合物研磨该材料，提供0.30g标题产物，即本发明的化合物，为在147-149℃熔化的白色固体。
1H NMR(CDCl3)δ 9.05(d，1H)，7.93(d，1H)，6.94-6.88(m，2H)，6.55(s，1H)，4.75-4.50(m，2H)。
实施例17 5-氯-6-[2-氯-6-氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物493)的制备 步骤AN-(3-氯丙基)-N-甲基氨基甲酸苯基甲酯的制备
在0℃，将N-甲基-3-氯丙胺盐酸盐(1.11g，7.7mmol)、氯甲酸苄酯(1.45g，8.5mmol)和N，N-二异丙基乙胺(2.24g，17.3mmol)的混合物溶于二氯甲烷(25mL)。将反应混合物温热到室温过夜。然后将反应混合物减压浓缩并通过MPLC纯化(0-100％梯度的乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，提供1.57g标题产物。
1H NMR(CDCl3)δ 7.36(m，4H)，7.33(m，1H)，5.13(s，2H)，3.54(m，2H)，3.44(t，2H)，2.96(s，3H)，2.04(m，2H)。
步骤BN-[3-[4-[3-氯-1，6-二氢-1-[(2S)-2-甲基丁基]-6-氧代-5-(1H-吡唑-1-基)-2-吡嗪基]-3，5-二氟苯氧基]丙基]-N-甲基氨基甲酸苯基甲酯的制备
向5-氯-6-(2，6-二氟-4-羟基苯基)-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮(按照与实施例15步骤E相似的方法，使用(S)-(-)-2-甲基丁胺制备)(0.35g，0.89mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液中添加干活化的4

分子筛(3.0g)。将反应混合物在室温下搅拌3h。添加碘化四丁基铵(0.065g，0.18mmol)和N-(3-氯丙基)-N-甲基氨基甲酸苯基甲酯(即实施例17步骤A的产物)(0.641g，2.66mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(1mL)溶液，并将反应混合物在室温下搅拌15分钟。然后添加碳酸铯(0.867g，2.66mmol)并且再搅拌15分钟。然后将反应混合物加热到75℃保持2h，然后冷却到室温。在通过

硅藻土助滤剂过滤除去分子筛和碳酸铯后，将反应混合物减压浓缩。粗油通过MPLC纯化(0-100％梯度的乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，提供0.442g标题产物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.09(d，1H)，7.88(d，1H)，7.33(m，5H)，6.59(m，1H)，6.50(m，2H)，5.11(s，2H)，4.00(m，2H)，3.85(m，2H)，3.51(t，2H)，2.98(s，3H)，2.10(m，2H)，1.72(m，1H)，1.20(m，1H)，1.03(m，1H)，0.74(m，6H)。
步骤C5-氯-6-[2-氯-6-氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮的制备
将N-[3-[4-[3-氯-1，6-二氢-1-[(2S)-2-甲基丁基]-6-氧代-5-(1H-吡唑-1-基)-2-吡嗪基]-3，5-二氟苯氧基]丙基]-N-甲基氨基甲酸苯基甲酯(即实施例17步骤B的产物)(0.44g，7.36mmol)溶于甲醇(50mL)并用氮冲洗。添加氯化氢(1M乙醚溶液，4mL)，然后添加炭载钯(10％wt/wt，0.117g，0.110mmol)并继续用氮冲洗。将包含氢气的气球连通到反应混合物内并将反应混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物通过

硅藻土助滤剂过滤，并减压浓缩。将反应混合物再溶于甲醇，过滤，然后浓缩，提供0.35g标题产物，即本发明的化合物。
1H NMR(甲醇-d4)δ 9.08(d，1H)，8.23(m，1H)，7.89(d，1H)，6.91(m，2H)，6.59(s，1H)，4.22(t，2H)，3.87(m，2H)，3.23(m，2H)，2.75(s，3H)，2.21(m，2H)，1.73(m，1H)，1.24(m，1H)，1.06(m，1H)，0.73(m，6H)。
实施例18 5-氯-6-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-2(1H)-吡嗪酮(化合物490)的制备
将3，5-二氯-6-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-1-[2(S)-甲基丁基]-2(1H)-吡嗪酮(按照实施例15步骤C化合物的方法制备)(0.5g，1.33mmol)、(1-甲基-1H-吡唑-3-基)三丁基锡烷(0.447g，1.20mmol)和反式-二氯双(三苯基膦)钯(II)(0.042g，0.06mmol)在甲苯(10mL)中的混合物加热回流过夜。将反应混合物减压浓缩，并将所得残余物通过MPLC纯化(0-100％梯度的乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液)，得到0.37g标题产物，即本发明的化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 7.44(d，1H)，7.40(d，1H)，6.61(m，2H)，4.05(s，3H)，3.88(s，3H)，3.81(m，2H)，1.77(m，1H)，1.25(m，1H)，1.01(m，1H)，0.74(m，6H)。
通过本文上述的方法连同本领域已知的方法，可以制备下列的表1至7的化合物。在表中使用下列简写，其中t指叔，s指仲，n指正，i指异，c指环，Me指甲基，Et指乙基，Pr指丙基，i-Pr指异丙基，Bu指丁基，Hex指己基，Ph指苯基，OMe指甲氧基，OEt指乙氧基，SMe指甲硫基，S(O)指亚磺酰基，S(O)2指磺酰基，CN指氰基，NO2指硝基，2-Cl-4-F指2-氯-4-氟，其它取代基简写类似地定义。
表1a








表1b






表1c




表1d







表1e




表1f



表1g










表2



表3a


表3b


表3c


表3d


表4a


表4b


表4c


表5a


表5b


表5c


表6a









表6b








表6c








表7a


表7b


表7c


表7d


表7e


表7f


用途 本发明涉及抑制不期望的细胞增殖的方法，所述方法包括使所述细胞或其中不期望所述细胞增殖的组织或器官与式1的化合物、其前药及其所有药学上可接受的盐、N-氧化物、水合物、溶剂合物、晶体形式或几何和立体异构体接触。
可以通过几种机理实现对不期望的细胞增殖的抑制，尤其包括烷化剂、拓扑异构酶抑制剂、核苷酸类似物、抗生素、激素拮抗剂和核酸损伤剂(damaging agents)。一种抑制细胞增殖的药理学上重要的机理是通过损坏微管功能。其中，微管在有丝分裂过程中促进并能使染色体和细胞器运动和分离(Stryer，L.，Biochemistry(1988))。防止或干扰微管功能导致有丝分裂停止并常常导致凋亡。除了肿瘤形成和癌症，许多疾病都以不期望的细胞增殖为特征，防止这些不期望的细胞增殖的化合物和方法对于治疗这些疾病具有特别重要的价值。微管功能对于细胞维持、移动和特殊细胞结构如纤毛和鞭毛的运动也很重要(Stryer，L.，Biochemistry(1988))。
为了正确地起作用，纤毛和鞭毛需要正确的微管功能(U.S.Pat.No.6,162,930)。已知某些化合物可抑制微管蛋白聚合或引起具有改变的形态学和稳定性的微管蛋白聚合物的形成。通过干扰正常微管功能，这些组合物可以用于治疗以异常增殖为特征的那些疾病。
在哺乳动物细胞中，微管功能在真核细胞中起关键作用。因此破坏微管功能可以是防止致病真菌在宿主机体内增殖的有效途径。
微管蛋白是由α和β亚单位组成的不对称二聚物，微管蛋白聚合以形成微管。微管必须是高度动态的以便实现它们的许多功能。在细胞周期的某些阶段，或者在特定细胞类型或细胞器中，需要稳定的微管，例如对于在轴突内传递或对于纤毛和鞭毛运动。微管在细胞周期的G2期过程中组装并参与有丝分裂纺锤体的形成，有丝分裂纺锤体促进姊妹染色单体在细胞分裂过程中的分离。微管在细胞分裂中的重要作用和药物与微管蛋白相互作用以干扰细胞周期的能力使得微管蛋白成为应用包括抗癌药、杀真菌药和除草剂的成功标靶。典型的微管蛋白配体如秋水仙碱、紫杉醇、长春花碱类如长春碱、大环内酯类抗肿瘤药(epothilones)、软海绵素(halicondrins)、苯菌灵和甲苯达唑通过影响微管功能导致细胞周期停止在有丝分裂的G2/M分界线而直接抑制细胞分化。这种机理是这类化合物治疗价值的基础，例如用秋水仙碱治疗痛风，用紫杉醇治疗再狭窄，用紫杉醇、长春碱、大环内酯类抗肿瘤药和软海绵素治疗癌症，用苯菌灵治疗真菌感染以及用甲苯达唑治疗疟疾和蠕虫病(helminthes)。
干扰微管功能可以通过几种方式抑制细胞分裂。稳定微管和抑制微管聚合两者都会防止在细胞周期的几个点所需的细胞骨架重建并且导致抑制细胞从细胞周期的一个阶段进展到下一阶段。已经鉴定出三类主要的的微管蛋白结合药物(即秋水仙碱类似物、长春花碱类和紫杉烷类)，它们各自在β-微管蛋白分子上占据不同的位点。紫杉醇(TaxolTM)和相关的紫杉烷代表一类稳定微管的药物，稳定微管是最终导致微管结构“冻结”，从而使得它们不能重建(Jordan M.A.和Wilson，L.，1998)。有丝分裂的随后停止诱导凋亡机制以引起细胞死亡。许多秋水仙碱类似物(以及结合到与秋水仙碱相同的β-微管蛋白上的位点的几种其它化合物)中断微管蛋白聚合并中断微管形成。长春碱和几种其它长春花属相关的药物结合到与秋水仙碱不同的位点。在长春花属位点结合的化合物防止微管形成并使微管不稳定化(Jordan等，1986；Rai和Wolff(1996))。
本发明涉及被设计成一般在体内或体外抑制不期望的细胞增殖的化合物和方法。尽管不希望受理论的约束，似乎本发明的化合物通过抑制微管功能来实现这个结果。公开的例子显示对微管稳定性的浓度依赖性效力。在低浓度下，所述化合物在整个测定过程中像紫杉醇一样通过稳定微管形成而起作用。在较高浓度下，微管蛋白聚合在测定的初始阶段明显受到抑制，但最终聚合浊度程度超过了紫杉醇。
因此，本发明旨在提供对活跃分裂的细胞有直接或间接毒性的化合物。本发明还涉及用于治疗由细胞过度增殖引起的所述病症的治疗组合物。本发明因此涉及治疗细胞过度增殖性病症的化合物和方法。这种宽泛的病症类型包括肿瘤。所述肿瘤可以是乳腺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌、白血病、淋巴瘤、黑色素瘤、肾癌、肝癌、骨髓瘤、多发性骨髓瘤、间皮瘤、中枢神经系统肿瘤、卵巢癌、前列腺癌、软组织或骨的肉瘤、头颈癌、食管癌、胃癌、膀胱癌、视网膜母细胞瘤、鳞状细胞癌、睾丸癌、阴道癌和神经内分泌相关的肿瘤。所述肿瘤可以是癌性或非癌性的。更广泛地，本发明意在提供用于杀死除肿瘤细胞以外的活跃增殖的细胞如细菌或上皮细胞，和治疗感染(病毒性和细胞性)、炎症和一般增殖性病症的化合物和方法。其它方面涉及提供用于治疗以存在快速增殖为特征的其它细胞过度增殖性病症的方法，所述病症为例如银屑病、血管再狭窄、动脉粥样硬化损伤、炎性疾病、自身免疫疾病或银屑病。炎性疾病包括其中涉及内皮细胞、炎症细胞和肾小球细胞的疾病；其中涉及心肌细胞的心肌梗死；其中涉及肾细胞的肾小球肾炎；其中涉及内皮细胞的移植排斥；和其中涉及某些免疫细胞和/或其它受感染细胞的感染性疾病如HIV感染和疟疾。一个其它方面提供用于治疗由致病真菌的存在而引起的疾病的方法。
在一个实施方案中，本发明的方法用于治疗肉瘤、癌和/或白血病。该主题方法可以单独或作为治疗方案的部分使用的示例性病症包括纤维肉瘤、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、软骨肉瘤、成骨性肉瘤、脉络瘤(choroma)、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管内皮肉瘤、滑膜瘤、间皮瘤、尤因瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、鳞状细胞癌、基底细胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳头状癌、乳头状腺癌、囊腺癌、髓样癌、支气管原癌、肾细胞癌、肝细胞性肝癌、胆管癌、绒毛膜癌、精原细胞瘤、胚胎性癌、维尔姆斯瘤、宫颈癌、睾丸瘤、肺癌、小细胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、胶质瘤、星形细胞瘤、髓母细胞瘤、颅咽管瘤、室管膜瘤、松果体瘤、血管母细胞瘤、听神经瘤、少突神经胶质瘤、脑膜瘤、黑色素瘤、神经母细胞瘤和视网膜母细胞瘤。
在某些实施方案中，本发明的方法用于治疗病症如由乳腺、前列腺、肾、膀胱或结肠的组织形成的癌。
在其它实施方案中，本发明的方法用于治疗在脂肪组织中产生的增生性或肿瘤性病症如脂肪细胞肿瘤(例如脂肪瘤、纤维脂瘤、成脂细胞瘤、脂肪过多症、蛰伏脂肪瘤、血管瘤和/或脂肪肉瘤)。
在再有的其它实施方案中，使用主题组合物和化合物也可以控制感染剂和寄生虫剂(例如细菌、锥虫、真菌等)。例如，本发明的组合物和方法也可以用于治疗其中正常的微管蛋白聚合和功能起作用的疾病。例如，查加斯病是由克鲁斯锥虫(Trypanosoma cruzi)引起的，克鲁斯锥虫是鞭毛虫原生动物，其具有包含微管蛋白、既作为表膜下微管系统又作为鞭毛的组分的主要蛋白质组成。查加斯病的特征在于心脏、消化道和神经系统的损伤。在美洲，该疾病是心肌炎最主要的原因。抑制对寄生虫移动至关重要的微管蛋白聚合会提供有效的治疗。事实上，使用选择性地影响微管蛋白聚合的药物在其它寄生虫疾病的治疗中也是优先的。苯并咪唑是非常有效的抗蠕虫药，二硝基苯胺已经显示出有希望对抗利什曼虫，一种与锥虫密切相关的寄生虫(U.S.Pat.No.6,162,930)。本发明的组合物可以用于接触这些寄生虫或寄生虫感染的位置并从而治疗相关的疾病。
本领域技术人员会理解，包含式1化合物的组合物的剂量取决于所治疗的病症、所用的特定化合物、疾病或病症的类型和严重性、以及其它临床因素如患者的体重、性别、年龄和状况、患者对药物和/或治疗的耐受性和给药途径。本领域技术人员能够根据这些和其它因素确定适当的剂量。
在过度增殖相关的病症的治疗或预防中，适当的剂量水平通常为约0.01-500mg/kg患者体重/天，所述剂量可以以单个或多个剂量给药。优选地，剂量水平为约0.1至约250mg/kg/天；更优选约0.5至约100mg/kg/天。合适的剂量水平可以为约0.01-250mg/kg/天、约0.05-100mg/kg/天或约0.1-50mg/kg/天。在该范围内，所述剂量可以为0.05-0.5、0.5-5或5-50mg/kg/天。对于口服给药，所述组合物优选以片剂形式提供给待治疗的患者，所述片剂形式包含1.0-1000毫克活性成分，特别是1.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、50.0、75.0、100.0、150.0、200.0、250.0、300.0、400.0、500.0、600.0、750.0、800.0、900.0和1000.0毫克活性成分用于根据症状调节剂量。所述化合物可以按每天1-4次、优选每天一或两次的方案给药。
然而，应理解，对于任何特定的患者，具体剂量水平和剂量频率可以变化，并取决于多种因素，包括所用具体化合物的活性、该化合物的代谢稳定性和作用时长、年龄、体重、一般健康、性别、饮食、给药方式和时间、排泄速率、联合用药、特定病症的严重性和接受治疗的主体。
本说明书指示治疗“个体”。除了如人的个体外，本发明的方法还可以治疗多种其它哺乳动物包括其它灵长类。例如，可以治疗哺乳动物包括但不限于牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、豚鼠、大鼠或其它牛、羊、马科、犬科、猫科、啮齿动物或鼠科物种。而且，所述方法也可以在其它物种如鸟类(例如鸡)中实践。
本发明提供了药物组合物，其在药学上可接受的载体或稀释剂中包含至少一种有效量的能够治疗过度增殖相关病症的式1化合物。本发明的组合物可以包含下述其它治疗剂，并可以根据药物制剂领域公知的技术，通过例如使用常规固体或液体载体或稀释剂以及适合期望的给药方式的药用添加剂类型(例如赋形剂、粘合剂、防腐剂、稳定剂、调味剂等)来配制。
式1的化合物可以通过任何合适的方式给药，例如口服，如作为片剂、胶囊、颗粒剂或散剂的形式；舌下；含服；肠胃外，例如通过皮下、静脉内、肌内或脑池内注射或输液技术(例如作为无菌可注射的水或非水溶液或混悬剂)；经鼻，例如通过吸入喷雾；局部，例如作为乳膏或软膏的形式；或经直肠，例如作为栓剂的形式；或者以包含无毒的药学上可接受的载体或稀释剂的剂量单元制剂。所述化合物可以例如以适合速释或缓释的形式给药。速释或缓释可以通过使用包含本发明化合物的合适药物组合物来实现，或者尤其是在缓释的情况下，可以通过使用装置如皮下埋植剂或渗透泵来实现。
用于给药本发明化合物的药物组合物可以方便地以剂量单元形式提供并且可以通过药学领域公知的任何方法来制备。所有方法均包括将活性成分与构成一种或多种助剂的载体结合起来的步骤。通常，所述药物组合物通过将所述活性成分与液体载体或细碎的固体载体或两者均匀且密切地结合，然后如果需要，将产物成型为期望的制剂来制备。在所述药物组合物中，包含足够对疾病的过程或状况产生期望的影响的量的活性目标化合物。
包含活性成分的药物组合物可以是适合口服使用的形式，例如片剂、含片、锭剂、水性或油性混悬剂、可分散的散剂或颗粒剂、乳剂、硬或软胶囊、或糖浆或酏剂。预期用于口服使用的组合物可以根据药物组合物制备领域的任何已知方法制备，而且这些组合物可以包含选自甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂的一种或多种试剂，以便提供药学上美观和可口的制剂。片剂包含活性成分与适合制备片剂的无毒的药学上可接受的赋形剂的混合物。这些赋形剂可以是例如惰性稀释剂如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；造粒剂和崩解剂如玉米淀粉或藻酸；粘合剂如淀粉、明胶或阿拉伯胶，以及润滑剂如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。所述片剂可以是未包衣的，或者它们可以通过已知技术包衣以延迟在胃肠道内的崩解和吸收，并从而在更长的时间内提供缓释作用。例如，可以使用延时材料如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。它们也可以被包衣以形成用于控释的渗透泵治疗片。
用于口服使用的剂型也可以作为硬明胶胶囊提供，其中活性成分与惰性稀释剂如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合，或者作为软明胶胶囊提供，其中活性成分与水或油介质如花生油、液体石蜡或橄榄油混合。
水性混悬剂包含活性材料与适合制备水性混悬剂的赋形剂的混合物。这些赋形剂是助悬剂如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、西黄蓍胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂，可以是天然存在的磷脂如卵磷脂、或烯化氧与脂肪酸的缩合产物如聚氧乙烯硬脂酸酯、或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物如十七烯氧基鲸蜡醇(heptadecaethyleneoxycetanol)、或环氧乙烷与得自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯、或环氧乙烷与得自脂肪酸与己糖醇酐的偏酯的缩合产物如聚乙烯山梨糖醇酐单油酸酯。所述水性混悬剂还可以包含一种或多种防腐剂如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯、一种或多种着色剂、一种或多种调味剂和一种或多种甜味剂如蔗糖或糖精。
油性混悬剂可以通过将活性成分悬浮于植物油如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油、或者悬浮于矿物油如液体石蜡中来配制。所述油性混悬剂可以包含增稠剂如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可以添加甜味剂(如上面所列的那些)和调味剂以提供可口的口服制剂。这些组合物可以通过添加抗氧化剂如抗坏血酸来防腐。
适合用于通过添加水来制备水性混悬剂的可分散的散剂和颗粒剂具有活性成分与分散剂或润湿剂、助悬剂和一种或多种防腐剂的混合物。合适的分散剂或润湿剂和助悬剂以上面已经提及的那些为例。也可以存在额外的赋形剂如甜味剂、调味剂和着色剂。
本发明的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。油相可以是植物油如橄榄油或花生油、或者矿物油如液体石蜡或这些的混合物。合适的乳化剂可以是天然存在的树胶如阿拉伯树胶或西黄蓍胶；天然存在的磷脂如大豆磷脂、卵磷脂、和得自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯如山梨糖醇酐单油酸酯、和所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物如聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯。乳剂也可以包含甜味剂和调味剂。
糖浆和酏剂可以用甜味剂如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖来配制。这些制剂也可以包含缓和剂、防腐剂以及调味剂和着色剂。
所述药物组合物可以是无菌可注射水性或油性混悬剂的形式。这种混悬剂可以根据已知技术，使用已经提及的那些合适的分散剂或润湿剂和助悬剂来配制。所述无菌可注射制剂也可以是在无毒的、肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射的溶液剂或混悬剂，例如作为在1，3-丁二醇中的溶液。其中可以使用的合适的载体和溶剂是水、林格氏液和等张氯化钠溶液。此外，通常使用无菌固定油作为溶剂或悬浮介质。为此目的，可以使用任何温和的固定油，包括合成的单酸甘油酯或甘油二酯。此外，脂肪酸如油酸可以用于制备可注射物。
本发明的化合物也可以作为用于药物直肠给药的栓剂形式给药。这些组合物可以通过将药物与合适的无刺激性赋形剂混合而制备，所述赋形剂在常温下为固体，但在直肠温度下为液体并因此会在直肠中熔化而释放药物。这样的材料是可可脂和聚乙二醇。
对于局部使用，可以使用包含本发明化合物的乳膏、软膏、凝胶剂、溶液剂或混悬剂等。(为了该施用目的，局部施用应包括漱口水和含漱液)。
本发明的化合物也可以作为脂质体的形式给药。如本领域已知的，脂质体通常得自磷脂或其它脂质。通过分散于水性介质内的单层或多层含水脂质晶体而形成脂质体。可以使用任何无毒、生理学上可接受的和可代谢的能够形成脂质体的脂质。除了本发明的化合物外，脂质体形式的本发明组合物还可以包含稳定剂、防腐剂、赋形剂等。优选的脂质是天然和合成的磷脂和磷脂酰胆碱类。形成脂质体的方法在本领域是已知的。所述脂质体可以是或可以不是靶向递药系统的部分的形式，例如在用肿瘤特异性抗体包衣的脂质体中。这样的脂质体会被靶向至感兴趣的位点(例如肿瘤细胞)并被其选择性吸收。可以使用其它长循环或“隐形(stealth)”脂质体(U.S.专利5013556)。
一般地，这些脂质体或其它递药系统通常具有靶向部分，即与其缀合的、对感兴趣的靶点(例如肿瘤细胞)具有特异性的配体。例如，肿瘤异于正常组织的一些性质(生化的、结构上的或遗传的)可以被利用以使本发明的化合物集中在、或至少接近靶肿瘤。主要由内皮细胞组成的肿瘤脉管系统天然地异于正常分化的脉管系统。例如，已知肿瘤脉管系统的体系结构是易漏的，通过它们的血流常常是间断的，具有灌注期和闭塞期和后续缺氧期。这种异常的微环境可以由相对于正常脉管系统的肿瘤脉管系统内额外的差别基因表达引起，并反过来导致相对于正常脉管系统的肿瘤脉管系统内额外的差别基因表达。这种异常的体系结构和功能在分子水平上以相对于正常脉管的肿瘤微血管表面标记物的差异为特征，这些差异可以被利用以将脂质体或其它递药系统靶向至感兴趣的位点。脂质体提供将药物与大多数正常组织隔离的额外优点。当用聚乙二醇(PEG)包衣(即隐形脂质体)以将吞噬细胞的摄取最小化并用肿瘤脉管系统特异性靶向部分包衣时，脂质体提供了与非靶向药物相比更长的血浆半衰期、更低的非靶组织毒性和递药以及增强的效力。
其它靶向策略包括但不限于ADEPT(抗体定向的酶前药疗法)、GDEPT(基因定向的EPT)和VDEPT(病毒定向的EPT)。在ADEPT中，通过抗肿瘤相关的标记物的抗体将无活性的前药靶向至肿瘤块。肿瘤内部或周围的酶环境将所述前药转换成活性毒剂，然后该活性毒剂对肿瘤组织起作用。同样，在肿瘤位置的差别基因表达或病毒靶向分别在GDEPT和VDEPT中被用于将前药激活成其活性、毒性形式。其它策略包括靶向差别表达的基因、酶或在例如肿瘤相关的脉管系统上出现的表面标记物以控制肿瘤进程或靶向其它感兴趣的位点(例如内皮细胞、TNF-α、TNF-α受体等)。
而且，可以使用标准药物制剂技术如Remington′s PharmaceuticalSciences，Mack Publishing Company，Easton，Pa.中所述的那些。包裹化合物或包含所述化合物的组合物的其它方法对于本领域技术人员是已知的(Baker等，＂Controlled Release of Biological Active Agents＂，John Wiley和Sons，1986)。
优选的单元剂量制剂是如本文上面所述的包含所给药的成分的每日剂量或单元、每日亚剂量、或其适当份数的那些。
应该理解除了上面明确列出的成分外，本发明的制剂还可以包含一般在本领域与所涉及的制剂类型相关的其它试剂，例如适合口服给药的制剂可以包括调味剂和其它试剂。
此外，所述化合物可以被掺入允许缓释的生物可降解聚合物中，所述聚合物被植入在所期望的递药位置的周围，例如在肿瘤处。生物可降解聚合物及它们的用途详述描述于Brem等，J.Neurosurg.74，441-446(1991)，并且是本领域技术人员熟知的。
本发明的药物组合物和方法还可以包含如本文所述在上面提及的病理状况的治疗中施用的其它治疗活性化合物。根据常规药物原则，本领域普通技术人员可以选择适当的药剂用于联合疗法。治疗药剂的联合可以协同作用以实现对上述各种病症的治疗或预防。使用这种方法，能够用更低剂量的各药剂获得治疗效果，从而减少有害副作用的可能性。
其它治疗药剂的例子包括 酪氨酸激酶抑制剂，尤其例如伊马替尼(GlivecTM)和吉非替尼(IressaTM)，环孢菌素(例如环孢菌素A)，CTLA4-Ig，抗体如ICAM-3、抗-IL-2受体(Anti-Tac)、抗-CD45RB、抗-CD2、抗-CD3(OKT-3)、抗-CD4、抗-CD80、抗-CD86，阻断CD40和gp39之间的相互作用的药剂，例如对CD40和/或gp39(即CD154)特异性的抗体，由CD40和gp39构成的融合蛋白(CD401g和CD8gp39)，NF-κ B功能抑制剂，例如核转位抑制剂，例如脱氧精胍菌素(DSG)，胆固醇生物合成抑制剂如HMG CoA还原酶抑制剂(洛伐他汀和辛伐他汀)，非甾体抗炎药(NSAID)如布洛芬、阿司匹林、对乙酰氨基酚和环氧酶抑制剂如罗非昔布(refecoxib)，甾体如泼尼松龙或地塞米松，金化合物，抗增殖药如甲氨喋呤、FK506(他克莫司，Prograf)、吗替麦考酚酯，抗肿瘤药如硫唑嘌呤、VP-16、依托泊苷、氟达拉滨、顺铂、硼替佐米、多柔比星、阿霉素、安吖啶、喜树碱、阿糖胞苷、吉西他滨、氟脱氧尿苷、美法仑和环磷酰胺，TNF-α抑制剂如替尼达普，抗-TNF抗体或可溶TNF受体，和雷帕霉素(西罗莫司或Rapamune)或其衍生物。
当其它治疗药剂与本发明的化合物组合使用时，它们可以例如以Physician Desk Reference(PDR)中所示的量使用或者另由本领域普通技术人员确定的量使用。
本发明的药物组合物和方法还可以包含如本文所述的其它治疗活性化合物，所述化合物是药物外排系统或药物解毒和排泄系统的已知抑制剂或底物。这些系统包括P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白、肺药蛋白(lungresistance protein)和谷胱甘肽S-转移酶同工酶α、μ、π、σ、θ、ζ和κ。已知抑制或降低这些系统的活性的药物的联合给药可以通过增加治疗药剂在细胞中的量来提高本发明所述化合物的效力。使用这种方法，能够用更低的剂量获得治疗效果，从而减少有害副作用的可能。这些系统的抑制剂或底物的例子包括维拉帕米、丙磺舒、双嘧达莫、依他尼酸、吲哚美辛、柳氮磺吡啶、丁硫氨酸亚砜胺(buthionine sulfoximine)、环孢菌素A和他莫昔芬。
为了更清楚地理解本发明的本质，现在将参考下列非限制性实施例来描述其优选形式。
下列试验证明本发明化合物的微管抑制和抗增殖效力。然而，所述化合物提供的活性不限于这些物种。关于化合物描述，参见索引表A-D。索引表中使用下列简写，其中t指叔，s指仲，n指正，i指异，c指环，Me指甲基，Et指乙基，Pr指丙基，i-Pr指异丙基，Bu指丁基，i-Bu指异丁基，Hex指己基，Ac指乙酰基，c-Hex指环己基，Ph指苯基，OMe指甲氧基，SMe指甲硫基，CN指氰基，NO2指硝基，2-Cl-4-F指2-氯-4-氟，TMS指三甲基甲硅烷基，其它取代基简写类似地定义。简写“Ex.”代表实施例，其后的数字指所述化合物是在哪个实施例中制备的。
索引表A















* 关于1H NMR数据，参见索引表D。
a 化合物302的保留时间为22.6分钟；参见实施例7。
b 化合物303的保留时间为18.9分钟；参见实施例7。
c 化合物302和303互为阻转异构体。
索引表B


*关于1H NMR数据，参见索引表D。
索引表C


* 关于1H NMR数据，参见索引表D。
# MS(AP+)490.1，通过向单氯化合物添加H+(分子量为1)，通过使用大气压化学电离(AP+)的质谱法观察，最高同位素丰度母离子(M+1)的分子量。
## MS(AP+)480.1，通过向单氯化合物添加H+(分子量为1)，通过使用大气压化学电离(AP+)的质谱法观察，最高同位素丰度母离子(M+1)的分子量。
索引表D a 1H NMR数据为从四甲基硅烷向低场的ppm。如下表示偶联(s)-单峰，(d)-双峰，(t)-三重峰，(q)-四重峰，(m)-多重峰，(dd)-双重双峰，(dt)-双重三重峰，(dq)-双重四重峰，(br s)-宽单峰，(td)-三重双峰。
本发明的生物学实施例 抑制微管蛋白聚合的测定 源自牛脑的微管蛋白和用于微管蛋白聚合的试剂购自Cytoskeleton，Denver，CO(Catalog No.HTS02)，并按照Cytoskeleton的推荐进行测定。简言之，将纯度>97％的微管蛋白在GPEM缓冲溶液中溶解成2mg/mL的浓度，所述GPEM缓冲溶液由80mM哌嗪-N，N-双(2-乙磺酸)倍半钠盐、2.0mM氯化镁和0.5mM乙二醇-双(β-氨基乙醚)-N，N，N，N-四乙酸(pH为6.9)组成，并包含5％甘油和1mM GTP(5’-三磷酸鸟苷)。该微管蛋白溶液是新鲜制备的并保存在冰上直到需要为止。
微管蛋白的聚合涉及将100μL蛋白质溶液分配到已经含有10μL受试化合物的半面96孔微量滴定板的孔中，所述板已经在37℃预平衡了30分钟。所有孔中DMSO(二甲基亚砜)的浓度不超过0.5％。在只含10μLDMSO的孔中进行不含化合物的对照反应。
最初将受试化合物溶于DMSO，然后通过将5μL化合物的DMSO溶液吸移至95μL GPEM缓冲液中，在上述GPEM缓冲溶液中进一步稀释10倍成为期望的最终浓度。化合物的浓度范围为0.1-30μM。
通过将4℃的100μL新鲜微管蛋白溶液添加到37℃的所述板中引发聚合，并使用恒温在37℃的SpectraMax读板器(Molecular Devices Corp，CA)，在340nm监测溶液的浊度变化并持续至多10h的延长时间。从在聚合过程中达到的最大浊度中减去零时的浊度，并将各化合物浓度的复制值(replicate values)平均以提供最大浊度值(A340max)。为了比较，将10μM化合物的A340max与10μM紫杉醇(A340p)比较并将比率示于表1。
表1.通过在340nm处的光密度(OD)变化确定的本发明代表例相对于标准紫杉醇(p)对微管蛋白聚合的影响
细胞培养 人横纹肌肉瘤(RD)和鼠神经母细胞瘤(N1E115)细胞系获自AmericanType Culture Collection(ATCC，Rockville，MD)。RD细胞生长在补充有4mM谷氨酰胺(含有10％胎牛血清(ATCC #30-2020))并补充有1％青霉素和1％链霉素的Dulbecco改良伊格尔培养基(DMEM)中。当汇合时，通过传代(约每周一次)维持细胞直到需要为止。N1E115系也培养在含有4mM谷氨酰胺(包含10％新生牛血清(Gibco，Grand Island，NY))的DMEM中并类似地维持。
抑制细胞增殖的测定 使用细胞增殖测定试剂盒，基于由3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑溴化物(MTT)形成不溶的甲

晶体来测定横纹肌肉瘤细胞的增殖。将横纹肌肉瘤细胞培养至105个细胞/mL的密度。将细胞培养物(100μL)分配到96孔板的孔中，使成104个细胞/孔。将板在37℃孵育3h直到细胞牢固粘附到孔表面上为止。
制备包含试验化合物的第二块96孔圆底板，使用DMEM培养基(添加抗生素)将其连续稀释以覆盖感兴趣的浓度范围。将最初溶解化合物的DMSO的最终浓度保持在每孔0.5％的常数，板中化合物的体积为220μL。在孵育3h后，从包含细胞的板中除去培养基并用包含化合物的200μL溶液代替。将细胞再孵育96h，然后使用MTT评价生长抑制。
为了测定化合物的IC50，用由NaCl(120mM)、KCl(3mM)、MgCl2(2mM)、CaCl2(2mM)、D-葡萄糖(25mM)和Herpes(10mM)组成的盐水溶液(pH7.4)漂洗包含细胞的板。留下细胞，浸浴在100μL盐水溶液中，并向其中添加100μL MTT的盐水溶液(12mM)。在37℃继续孵育4h以产生甲

的蓝色，通过在570nm测量光密度将所述颜色定量。通过减去在570nm测量的无细胞孔的MIT溶液的黄色，对所有试验孔进行背景校正。将数据归一化至只含溶剂的对照孔。表2显示由多次实验测定的与紫杉醇平均IC50相比的化合物代表系列的IC50。
表2.本发明代表例相对于标准紫杉醇的抗横纹肌肉瘤(RD)和神经母细胞瘤(N1E115)细胞的活性。


*报告为三次重复实验的平均值 **报告为二次重复实验的平均值 这些结果和观察证实式1化合物是有效的细胞毒素。尤其是，针对癌细胞系进行的测定的结果预示个体中的抗癌效力。
权利要求
1.抑制动物细胞的不期望的增殖的方法，所述方法包括使所述细胞与式1的化合物及其所有药学上可接受的盐、N-氧化物、水合物、溶剂合物、晶体形式或几何和立体异构体接触
其中
R1是NR4R5、-N＝CR19R21、OR6、G1或G2；或者是C1-C8烷基、C2-C8烯基、C3-C8炔基、C3-C8环烷基、C3-C8环烯基、C4-C8环烷基烷基、C4-C8烷基环烷基、C5-C10烷基环烷基烷基、C7-C14烷基环烷基环烷基、C4-C8环烯基烷基或C4-C8烷基环烯基，它们各自用独立选自卤素、氰基、硝基、羟基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4烷基氨基、C1-C4烷基亚磺酰基、C1-C4烷基磺酰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基羰基、C3-C6三烷基甲硅烷基、G1和G2的一个或多个取代基任选取代；
A是O、S或NR7；
R7是H、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C2-C6烷基羰基或C2-C6烷氧羰基；
R2是氰基、-NR8N＝CR9R10、-ON＝CR9R10、-NR8NR11R12、-ONR11R12、-CR13＝NOR14、-CR13＝NNR11R12、-C(W)NR22R23、-NR8C(O)R26、-NR8C(O)NR27或-NR8C(O)OR28；或者
R2是5-或6-元杂芳环或者8-、9-或10-元杂芳族双环体系，每个环或环体系均用独立选自R24的至多5个取代基任选取代；或者是5-或6-元饱和或部分饱和杂环，任选包含选自C(＝O)、C(＝S)、S(O)或S(O)2的1-3个环成员，并用独立选自R24的至多5个取代基任选取代；或者
R2和R7结合到一起作为-N＝C(R16)-；
W是O、S或＝NR25；
R3是H、卤素、氰基、C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基、C3-C6炔基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4卤代烷硫基、C2-C5烷氧羰基、羟基羰基、-SCN或-CHO；
R4和R5各自独立地是H；或者是C1-C8烷基、C3-C8烯基、C3-C8炔基、C3-C8环烷基、C3-C8环烯基、C4-C8环烷基烷基或C4-C8环烯基烷基，它们各自用独立选自卤素、氰基、C1-C6烷氧基、C1-C6硫烷基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6二烷基氨基、-SCN和C3-C6三烷基甲硅烷基的1-4个取代基任选取代；或者
R4和R5结合到一起作为-(CH2)3-、-(CH2)4-、-(CH2)5-、-(CH2)6-、-CH2CH2OCH2CH2-或CH2CH(CH3)OCH(CH3)CH2-；
R6是H；或者是C1-C8烷基、C3-C8烯基、C3-C8炔基、C3-C8环烷基、C3-C8环烯基、C4-C8环烷基烷基或C4-C8环烯基烷基，它们各自用独立选自卤素、氰基、C1-C6烷氧基、C1-C6硫烷基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6二烷基氨基、-SCN和C3-C6三烷基甲硅烷基的1-4个取代基任选取代；
每个R8独立地是H、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；
R9是C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；
R10是H、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；或者
R9和R10结合到一起作为-(CH2)3-、-(CH2)4-、-(CH2)5-或-(CH2)6-；
R11是H、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；
R12是H、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C2-C3烷基羰基或C2-C3烷氧羰基；或者
R11和R12结合到一起作为-(CH2)4-、-(CH2)5、-CH2CH2OCH2CH2-或-CH2CH(CH3)OCH(CH3)CH2-；
R13是H、NH2、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；
R14是H、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；
R16是H、卤素、氰基、C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4卤代烷硫基或C2-C5烷氧羰基；
J是C1-C8烷基、C2-C8烯基、C3-C8炔基、C3-C8环烷基、C3-C8环烯基、C4-C8环烷基烷基、C4-C8烷基环烷基、C4-C8环烯基烷基或C4-C8烷基环烯基，它们各自用独立选自卤素、氰基、硝基、羟基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4烷基亚磺酰基、C1-C4烷基磺酰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基羰基、C1-C4烷基氨基、C2-C6二烷基氨基和C3-C6三烷基甲硅烷基的一个或多个取代基任选取代；或者
J是苯基、苄基、萘、5-或6-元杂芳环或者8-、9-或10-元杂芳族双环体系，每个环或环体系均用独立选自R29和R30的至多5个取代基任选取代；
R29是卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C6环烷基、C1-C6卤代烷基、C2-C6卤代烯基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C6烷基亚磺酰基、C1-C6烷基磺酰基、C1-C6卤代烷硫基、C1-C6卤代烷基亚磺酰基、C1-C6卤代烷基磺酰基、C1-C6烷基氨基、C2-C6二烷基氨基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基氨基羰基、C3-C6二烷基氨基羰基或C3-C6三烷基甲硅烷基；
R30是-Y-X-Q；
Y是O、S(O)p、NR31或直接的键；
X是C1-C6亚烷基、C2-C6亚烯基、C3-C6亚炔基、C3-C6亚环烷基或C3-C6亚环烯基，它们各自用独立选自卤素、氰基、硝基、羟基、(＝O)、C1-C6烷氧基和C1-C6卤代烷氧基的一个或多个取代基任选取代；
Q是NR32R33、OR35或S(O)pR35；
R31是H、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基硫代羰基、C2-C6烷氧基硫代羰基、C4-C8环烷基羰基、C4-C8环烷氧基羰基、C4-C8环烷基硫代羰基或C4-C8环烷氧基硫代羰基；
R32和R33各自独立地是H；或者是C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基、C3-C6炔基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基硫代羰基、C2-C6烷氧基硫代羰基、C4-C8环烷基羰基、C4-C8环烷氧基羰基、C4-C8环烷基硫代羰基或C4-C8环烷氧基硫代羰基；或者当与各自所连接的氮原子任选结合到一起时，R32和R33形成用R34任选取代的具有3-6个环原子的杂环；
R34是卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基或C1-C6烷氧基；
每个R35独立地是H、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基、C3-C6炔基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基硫代羰基、C2-C6烷氧基硫代羰基、C4-C8环烷基羰基、C4-C8环烷氧基羰基、C4-C8环烷基硫代羰基或C4-C8环烷氧基硫代羰基；
p是0、1或2；
G1是3-至7-元非芳族碳环或杂环，任选包含选自C(＝O)、C(＝S)、S(O)和S(O)2的1或2个环成员并用独立选自R17的1-4个取代基任选取代；
G2是苯环、5-或6-元杂芳环，每个环或环体系均用独立选自R18的1-4个取代基任选取代；
每个R17独立地是C1-C2烷基、C1-C2卤代烷基、卤素、氰基、硝基或C1-C2烷氧基；
每个R18独立地是C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、C3-C6环烷基、C1-C4卤代烷基、C2-C4卤代烯基、C2-C4卤代炔基、C3-C6卤代环烷基、卤素、氰基、硝基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4烷基亚磺酰基、C1-C4烷基磺酰基、C1-C4烷基氨基、C2-C8二烷基氨基、C3-C6环烷基氨基、(C1-C4烷基)(C3-C6环烷基)氨基、C2-C4烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基氨基羰基、C3-C8二烷基氨基羰基或C3-C6三烷基甲硅烷基；
R19和R21各自独立地是H、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基或C3-C8环烷基；或者
R19和R21结合到一起作为-(CH2)4-、-(CH2)5、-CH2CH2OCH2CH2-或-CH2CH(CH3)OCH(CH3)CH2-；
R22和R23各自独立地是H；或者是C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C3-C8环烷基或C4-C8环烷基烷基，它们各自用选自卤素、氰基、C1-C6烷氧基、C1-C6硫烷基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6二烷基氨基、-SCN和C3-C6三烷基甲硅烷基的1-4个取代基任选取代；或者
R22和R23结合到一起作为-(CH2)4-、-(CH2)5、-CH2CH2OCH2CH2-或-CH2CH(CH3)OCH(CH3)CH2-；
每个R24独立地是卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C6环烷基、C1-C6卤代烷基、C2-C6烷氧基烷基、C3-C6二烷氧基烷基、C2-C6卤代烯基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C6烷基亚磺酰基、C1-C6烷基磺酰基、C1-C6卤代烷硫基、C1-C6卤代烷基亚磺酰基、C1-C6卤代烷基磺酰基、C1-C6烷基氨基、C2-C6二烷基氨基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基氨基羰基、C3-C6二烷基氨基羰基或C3-C6三烷基甲硅烷基；
R25是H、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；并且
R26是H、C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基或C3-C6炔基；或者是苯环、5-或-6-元杂芳环，每个环或环体系均用独立选自R36的1-4个取代基任选取代；
R36是C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、C3-C6环烷基、C1-C4卤代烷基、C2-C4卤代烯基、C2-C4卤代炔基、C3-C6卤代环烷基、卤素、氰基、硝基、C1-C4烷氧基或C1-C4卤代烷氧基；并且
R27和R28各自独立地是C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基或C3-C6炔基；或者是用独立选自C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、C3-C6环烷基、C1-C4卤代烷基、卤素、氰基、硝基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷氧基的1-4个取代基任选取代的苯环。
2.权利要求1的方法，其中
A是O或S；
R1是C2-C6烷基、C2-C6卤代烷基、C3-C8环烷基、C4-C8环烷基烷基、NR4R5、G1或G2；
R2是氰基、-C(W)NR22R23或-NR8C(＝O)R26；或者是5-或6-元杂芳环；或者是5-或6-元饱和或部分饱和的杂环，任选包含选自C(＝O)的1-3个环成员；
W是O或S；
R3是卤素、氰基或C1-C6烷基；
X是C1-C6亚烷基或C2-C6亚烯基；
R4和R5独立地是H、C1-C8烷基或C1-C8卤代烷基；并且
J是用独立选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基和R30的取代基任选取代的苯基。
3.权利要求2的方法，其中
A是O；
R1是C2-C6烷基、C2-C6卤代烷基、C4-C8环烷基烷基、G1或G2；
R2是5-或6-元杂芳环、氰基、-CONH2或-NHC(＝O)CH3；
R3是卤素、氰基或C1-C3烷基；
X是C3-C4亚烷基或C2-C4亚烯基；并且
J是在2、3、4和6位用独立选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基和R30的取代基任选取代的苯基。
4.权利要求3的方法，其中
R1是C3-C6烷基、C3-C6卤代烷基、C4-C8环烷基烷基或用独立选自R18的1-4个取代基任选取代的苯基；
R2是5-或6-元杂芳环，每个环均用独立选自R24的至多3个取代基任选取代；或者是-CONH2或-NHC(＝O)CH3；
R3是氟、氯、溴或甲基；
X是C3-C4亚烷基；并且
J是在2、3、4和6位用独立选自氯和氟、甲基和R30的取代基任选取代的苯基。
5.权利要求4的方法，其中
R2是1H-吡唑-1-基、1H-1，2，4-三唑-1-基、1H-吡唑-3-基或2-吡啶基，它们各自用独立选自卤素、氰基、C1-C6烷基或C1-C4卤代烷基的1-3个取代基任选取代；或者是-CONH2；
Y是O或NR31；并且
Q是NR32R33或OR35。
6.权利要求5的方法，其中
R2是1H-吡唑-1-基、1H-1，2，4-三唑-1-基、1H-吡唑-3-基或2-吡啶基，它们各自用独立选自卤素、氰基、C1-C4烷基或C1-C3卤代烷基的1-3个取代基任选取代；或者是-CONH2；
Y是O或NH；并且
R32、R33和R35各自独立地是H或C1-C4烷基或C1-C3卤代烷基。
7.权利要求1的方法，其中所述化合物选自
5-氯-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-1-环丙基甲基-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
6-氯-5-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-3，4-二氢-4-[(2S)-2-甲基丁基]-3-氧代吡嗪酰胺，
6-氯-5-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-3，4-二氢-4-[(2S)-2-甲基丁基]-3-氧代吡嗪酰胺，
6-氯-5-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-3，4-二氢-3-氧代-4-(3，3，3-三氟-2-甲基丙基)吡嗪酰胺，
6-氯-5-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-3，4-二氢-3-氧代-4-(3，3，3-三氟-2-甲基丙基)吡嗪酰胺，
5-氯-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-1-(3-氟苯基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-(3-氟苯基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-3-(1H-吡唑-1-基)-1-(3，3，3-三氟-2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-3-(1H-吡唑-1-基)-1-(3，3，3-三氟-2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(3-甲基-1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(3-甲基-1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[2-氯-6-氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(3-甲基-1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[2-氯-6-氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-1-[(2S)-2-甲基丁基)-3-(1H-吡唑-1-基)-6-(2，4，6-三氟苯基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-1-[(2S)-2-甲基丁基)-3-(1H-吡唑-1-基)-6-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-2(1H)-吡嗪酮，和
5-氯-1-[(2S)-2-甲基丁基)-3-(1H-3-甲基-吡唑-1-基)-6-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-2(1H)-吡嗪酮。
8.权利要求1-7中任一项的方法，其中所述动物细胞被包含在不期望所述细胞增殖的组织或器官内。
9.权利要求1-8中任一项的方法，其中所述式1的化合物抑制微管功能。
10.权利要求9的方法，其中聚合被抑制。
11.权利要求9的方法，其中聚合的微管蛋白或微管结构被稳定化。
12.式1的化合物，包括其所有的药学上可接受的盐、N-氧化物、水合物、溶剂合物或几何和立体异构体
其中
R1是NR4R5、-N＝CR19R21、OR6、G1或G2；或者是C1-C8烷基、C2-C8烯基、C3-C8炔基、C3-C8环烷基、C3-C8环烯基、C4-C8环烷基烷基、C4-C8烷基环烷基、C5-C10烷基环烷基烷基、C7-C14烷基环烷基环烷基、C4-C8环烯基烷基或C4-C8烷基环烯基，它们各自用独立选自卤素、氰基、硝基、羟基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4烷基氨基、C1-C4烷基亚磺酰基、C1-C4烷基磺酰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基羰基、C3-C6三烷基甲硅烷基、G1和G2的一个或多个取代基任选取代；
A是O、S或NR7；
R7是H、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C2-C6烷基羰基或C2-C6烷氧羰基；
R2是氰基、-NR8N＝CR9R10、-ON＝CR9R10、-NR8NR11R12、-ONR11R12、-CR13＝NOR14、-CR13＝NNR11R12、-C(W)NR22R23、-NR8C(O)R26、-NR8C(O)NR27或-NR8C(O)OR28；或者
R2是5-或6-元杂芳环或者8-、9-或10-元杂芳族双环体系，每个环或环体系均用独立选自R24的至多5个取代基任选取代；或者是5-或6-元饱和或部分饱和杂环，任选包含选自C(＝O)、C(＝S)、S(O)或S(O)2的1-3个环成员，并用独立选自R24的至多5个取代基任选取代；或者
R2和R7结合到一起作为-N＝C(R16)-；
W是O、S或＝NR25；
R3是H、卤素、氰基、C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基、C3-C6炔基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4卤代烷硫基、C2-C5烷氧羰基、羟基羰基、-SCN或-CHO；
R4和R5各自独立地是H；或者是C1-C8烷基、C3-C8烯基、C3-C8炔基、C3-C8环烷基、C3-C8环烯基、C4-C8环烷基烷基或C4-C8环烯基烷基，它们各自用独立选自卤素、氰基、C1-C6烷氧基、C1-C6硫烷基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6二烷基氨基、-SCN和C3-C6三烷基甲硅烷基的1-4个取代基任选取代；或者
R4和R5结合到一起作为-(CH2)3-、-(CH2)4-、-(CH2)5-、-(CH2)6-、-CH2CH2OCH2CH2-或CH2CH(CH3)OCH(CH3)CH2-；
R6是H；或者是C1-C8烷基、C3-C8烯基、C3-C8炔基、C3-C8环烷基、C3-C8环烯基、C4-C8环烷基烷基或C4-C8环烯基烷基，它们各自用独立选自卤素、氰基、C1-C6烷氧基、C1-C6硫烷基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6二烷基氨基、-SCN和C3-C6三烷基甲硅烷基的1-4个取代基任选取代；
每个R8独立地是H、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；
R9是C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；
R10是H、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；或者
R9和R10结合到一起作为-(CH2)3-、-(CH2)4-、-(CH2)5-或-(CH2)6-；
R11是H、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；
R12是H、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C2-C3烷基羰基或C2-C3烷氧羰基；或者
R11和R12结合到一起作为-(CH2)4-、-(CH2)5、-CH2CH2OCH2CH2-或-CH2CH(CH3)OCH(CH3)CH2-；
R13是H、NH2、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；
R14是H、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；
R16是H、卤素、氰基、C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4卤代烷硫基或C2-C5烷氧羰基；
J是苯基、苄基、萘、5-或6-元杂芳环或者8-、9-或10-元杂芳族双环体系，每个环或环体系均用独立选自R30的1-2个取代基取代并用独立选自R29的至多4个取代基任选取代；
R29是卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C6环烷基、C1-C6卤代烷基、C2-C6卤代烯基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C6烷基亚磺酰基、C1-C6烷基磺酰基、C1-C6卤代烷硫基、C1-C6卤代烷基亚磺酰基、C1-C6卤代烷基磺酰基、C1-C6烷基氨基、C2-C6二烷基氨基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基氨基羰基、C3-C6二烷基氨基羰基或C3-C6三烷基甲硅烷基；
R30是-Y-X-Q；
Y是O、S(O)p、NR31或直接的键；
X是C1-C6亚烷基、C2-C6亚烯基、C3-C6亚炔基、C3-C6亚环烷基或C3-C6亚环烯基，它们各自用独立选自卤素、氰基、硝基、羟基、(＝O)、C1-C6烷氧基和C1-C6卤代烷氧基的一个或多个取代基任选取代；
Q是NR32R33、OR35或S(O)pR35；
R31是H或C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基硫代羰基、C2-C6烷氧基硫代羰基、C4-C8环烷基羰基、C4-C8环烷氧基羰基、C4-C8环烷基硫代羰基或C4-C8环烷氧基硫代羰基；
R32和R33各自独立地是H；或者是C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基、C3-C6炔基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基硫代羰基、C2-C6烷氧基硫代羰基、C4-C8环烷基羰基、C4-C8环烷氧基羰基、C4-C8环烷基硫代羰基或C4-C8环烷氧基硫代羰基；或者当与各自所连接的氮原子任选结合到一起时，R32和R33形成用R34任选取代的具有3-6个环原子的杂环；
R34是卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基或C1-C6烷氧基；
每个R35独立地是H、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基、C3-C6炔基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基硫代羰基、C2-C6烷氧基硫代羰基、C4-C8环烷基羰基、C4-C8环烷氧基羰基、C4-C8环烷基硫代羰基或C4-C8环烷氧基硫代羰基；
p是0、1或2；
G1是3-至7-元非芳族碳环或杂环，任选包含选自C(＝O)、C(＝S)、S(O)和S(O)2的1或2个环成员并用独立选自R17的1-4个取代基任选取代；
G2是苯环、5-或6-元杂芳环，每个环或环体系均用独立选自R18的1-4个取代基任选取代；
每个R17独立地是C1-C2烷基、C1-C2卤代烷基、卤素、氰基、硝基或C1-C2烷氧基；
每个R18独立地是C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、C3-C6环烷基、C1-C4卤代烷基、C2-C4卤代烯基、C2-C4卤代炔基、C3-C6卤代环烷基、卤素、氰基、硝基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4烷基亚磺酰基、C1-C4烷基磺酰基、C1-C4烷基氨基、C2-C8二烷基氨基、C3-C6环烷基氨基、(C1-C4烷基)(C3-C6环烷基)氨基、C2-C4烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基氨基羰基、C3-C8二烷基氨基羰基或C3-C6三烷基甲硅烷基；
R19和R21各自独立地是H、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基或C3-C8环烷基；或者
R19和R21结合到一起作为-(CH2)4-、-(CH2)5、-CH2CH2OCH2CH2-或-CH2CH(CH3)OCH(CH3)CH2-；
R22和R23各自独立地是H；或者是C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C3-C8环烷基或C4-C8环烷基烷基，它们各自用选自卤素、氰基、C1-C6烷氧基、C1-C6硫烷基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6二烷基氨基、-SCN和C3-C6三烷基甲硅烷基的1-4个取代基任选取代；或者
R22和R23结合到一起作为-(CH2)4-、-(CH2)5、-CH2CH2OCH2CH2-或-CH2CH(CH3)OCH(CH3)CH2-；
每个R24独立地是卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C6环烷基、C1-C6卤代烷基、C2-C6烷氧基烷基、C3-C6二烷氧基烷基、C2-C6卤代烯基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C6烷基亚磺酰基、C1-C6烷基磺酰基、C1-C6卤代烷硫基、C1-C6卤代烷基亚磺酰基、C1-C6卤代烷基磺酰基、C1-C6烷基氨基、C2-C6二烷基氨基、C2-C6烷基羰基、C2-C6烷氧羰基、C2-C6烷基氨基羰基、C3-C6二烷基氨基羰基或C3-C6三烷基甲硅烷基；
R25是H、C1-C4烷基或C1-C4卤代烷基；并且
R26是H、C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基或C3-C6炔基；或者是苯环、5-或-6-元杂芳环，每个环或环体系均用独立选自R36的1-4个取代基任选取代；
R36是C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、C3-C6环烷基、C1-C4卤代烷基、C2-C4卤代烯基、C2-C4卤代炔基、C3-C6卤代环烷基、卤素、氰基、硝基、C1-C4烷氧基或C1-C4卤代烷氧基；并且
R27和R28各自独立地是C1-C6烷基、C1-C4卤代烷基、C3-C6环烷基、C3-C6卤代环烷基、C2-C6烯基或C3-C6炔基；或者是用独立选自C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、C3-C6环烷基、C1-C4卤代烷基、卤素、氰基、硝基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷氧基的1-4个取代基任选取代的苯环。
13.权利要求12的化合物，其中
A是O或S；
R1是C2-C6烷基、C2-C6卤代烷基、C3-C8环烷基、C4-C8环烷基烷基、NR4R5、G1或G2；
R2是氰基、-C(W)NR22R23或-NR8C(＝O)R26；或者是5-或6-元杂芳环；或者是5-或6-元饱和或部分饱和的杂环，任选包含选自C(＝O)的1-3个环成员；
W是O或S；
R3是卤素、氰基或C1-C6烷基；
X是C1-C6亚烷基或C2-C6亚烯基；
R4和R5独立地是H、C1-C8烷基或C1-C8卤代烷基；并且
J是用R30取代的苯基。
14.权利要求13的化合物，其中
A是O；
R1是C2-C6烷基、C2-C6卤代烷基、C4-C8环烷基烷基、G1或G2；
R2是5-或6-元杂芳环、氰基、-CONH2或-NHC(＝O)CH3；
R3是卤素、氰基或C1-C3烷基；
X是C3-C4亚烷基或C2-C4亚烯基；并且
J是在4位用R30取代的苯基。
15.权利要求14的化合物，其中
R1是C3-C6烷基、C3-C6卤代烷基、C4-C8环烷基烷基或用独立选自R18的1-4个取代基任选取代的苯基；
R2是5-或6-元杂芳环，每个环均用独立选自R24的至多3个取代基任选取代；或者是-CONH2或-NHC(＝O)CH3；
R3是氟、氯、溴或甲基；
Y是O或NH；
X是C3-C4亚烷基或C3-C4亚烯基；
Q是NR32R33或OR35；
R32和R33各自独立地是H或者C2-C6烷基或C2-C6卤代烷基；并且
R35是H、C1-C6烷基或C1-C6卤代烷基。
16.权利要求15的化合物，其中
R2是1H-吡唑-1-基、1H-1，2，4-三唑-1-基、1H-吡唑-3-基或2-吡啶基，它们各自用独立选自卤素、氰基、C1-C6烷基或C1-C4卤代烷基的1-3个取代基任选取代；或者是-CONH2；
Y是NH；
X是C3-C4亚烷基；并且
Q是NR32R33。
17.权利要求16的化合物，其中
R2是1H-吡唑-1-基、1H-1，2，4-三唑-1-基、1H-吡唑-3-基或2-吡啶基，它们各自用独立选自卤素、氰基、C1-C4烷基或C1-C3卤代烷基的1-3个取代基任选取代；或者是-CONH2；并且
R32、R33和R35各自独立地是H或C1-C4烷基或C1-C3卤代烷基。
18.权利要求17的化合物，选自
5-氯-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-1-环丙基甲基-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
6-氯-5-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-3，4-二氢-4-[(2S)-2-甲基丁基]-3-氧代吡嗪酰胺，
6-氯-5-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-3，4-二氢-4-[(2S)-2-甲基丁基]-3-氧代吡嗪酰胺，
6-氯-5-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-3，4-二氢-3-氧代-4-(3，3，3-三氟-2-甲基丙基)吡嗪酰胺，
6-氯-5-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-3，4-二氢-3-氧代-4-(3，3，3-三氟-2-甲基丙基)吡嗪酰胺，
5-氯-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-1-(3-氟苯基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-(3-氟苯基)-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-3-(1H-吡唑-1-基)-1-(3，3，3-三氟-2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-3-(1H-吡唑-1-基)-1-(3，3，3-三氟-2-甲基丙基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(3-甲基-1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[4-[3-(二甲氨基)丙氧基]-2，6-二氟苯基]-1[(2S)-2-甲基丁基]-3-(3-甲基-1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[2-氯-6-氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(3-甲基-1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[2-氯-6-氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1H-吡唑-1-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-6-[2，6-二氟-4-[3-(甲氨基)丙氧基]苯基]-1-[(2S)-2-甲基丁基]-3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-1-[(2S)-2-甲基丁基)-3-(1H-吡唑-1-基)-6-(2，4，6-三氟苯基)-2(1H)-吡嗪酮，
5-氯-1-[(2S)-2-甲基丁基)-3-(1H-吡唑-1-基)-6-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-2(1H)-吡嗪酮，和
5-氯-1-[(2S)-2-甲基丁基)-3-(1H-3-甲基-吡唑-1-基)-6-(2，6-二氟-4-甲氧基苯基)-2(1H)-吡嗪酮。
19.组合物，其包含权利要求12-18中任一项的化合物或其药学上可接受的盐以及生理学上可接受的载体。
20.抑制不期望的动物细胞增殖的方法，所述方法包括使动物细胞与权利要求12、13、14、15、16、17或19中任一项的化合物或组合物接触。
21.权利要求20的方法，其中所述式1化合物抑制微管功能。
22.权利要求21的方法，其中聚合被抑制。
23.权利要求21的方法，其中聚合的微管蛋白或微管结构被稳定化。
全文摘要
本发明涉及抑制不期望的动物细胞增殖的方法，所述方法包括使动物细胞与式1的化合物及其所有药学上可接受的盐、N-氧化物、水合物、溶剂合物或几何和立体异构体接触，其中R1是NR4R5、N＝CR19R21、OR6、G1或G2；或者是各自任选取代的C1-C8烷基、C2-C8烯基；A是O、S或NR7；R2是氰基、NR8-N＝CR9R10或NC(＝O)R30；或者是5-或6-元杂芳环，每个环或环体系均被任选取代；R3是H、卤素、氰基、C1-C6烷基；J是任选取代的C1-C8烷基或苯基；并且R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R19、R21、R30、G1和G2如发明内容中所定义。
文档编号C07D231/10GK101505747SQ200780030993
公开日2009年8月12日 申请日期2007年6月19日 优先权日2006年6月21日
发明者J·F·拜瑞兹耐克, T·M·史蒂文森, P·L·夏普, A·E·塔吉 申请人:杜邦公司