专利名称：白花蛇舌草悬浮细胞培养制备半乳糖醇的制作方法
技术领域：
本发明是关于半乳糖醇的制造方法，更具体地说，是关于从白花蛇舌草悬浮细胞系培养 液中制备半乳糖醇的方法。
背景技术：
半乳糖醇属于生化试剂，主要用于细菌鉴别,培养基配方方面，是微生物研究防病治病必不 可少的重要糖类，半乳糖醇注射液是治疗类风湿必不可少的重要药物，将半乳糖醇与溴化氢作 用，可以制造1，6-二溴-1,6-二脱氧半乳糖醇，它是一种极好的细胞抑制剂,治疗脊髓白血病时, 优于传统的1,6-二溴-1，6-二脱氧甘露糖醇,而且有效剂量明显少，它还可以用于药品赋形剂,明 显提高药品的外观片与稳定性。
目前，半乳糖醇主要由两种方法制备， 一种是由半乳糖加氢制得，由于自然界中半乳糖 量比较少，而且总是与其它糖混合在一起，半乳糖与其他糖类的分离与提取难度较大，半乳 糖醇的生产与制备难度比较大；另一种是从部分中药中提取；最近禹城福田药业从木糖醇母 液中模拟流动床分离得到半乳糖醇无色单斜柱状晶体。无论哪种方法，半乳糖醇的纯化均比 较困难，收率低，造成市场价格较高，尚不能工业化生产。
发明内容
本发明是从白花蛇舌草悬浮细胞系培养液中制备得到半乳糖醇，具有分离简单，纯度高 的优点，可以显著克服现有半乳糖醇制备方法的缺点。白花蛇舌草悬浮细胞系已公开发表在 《海峡药学》2006年第18巻6期132-134页论文《白花蛇舌草细胞悬浮培养的建立与条件优 化》中。
本发明通过下述技术方案予以实现将白花蛇舌草悬浮细胞系培养液4000rpm离心20分 钟，取沉淀，用原培养液体积1/3的水10 20分钟超声溶解，浓缩至2 3ml浓縮液/300ml， 用3 5倍浓缩液体积的丙酮沉淀离心,沉淀加1 3倍浓缩液体积的氯仿溶解,-4'C冷藏放置 过夜，得到的白色细小碎结晶即为半乳糖醇。
所述水提液最好经超声10 20分钟，丙酮沉淀体积最好为3 5倍浓縮液体积，氯仿体 积l倍浓缩液体积即可，结晶温度为-4'C。
下面结合附图和实施例对本发明专利进一步说明。 图l是从白花蛇舌草悬浮细胞系培养液中制备半乳糖醇流程图。 图2是半乳糖醇结构图。
具体实施例方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步的描述
将白花蛇舌草悬浮细胞培养液4000rpm离心20分钟，取沉淀，用1/3倍培养液体积的水 10 20分钟超声溶解，浓縮至2 3ml浓縮液/300ml培养液，用3 5倍浓缩液体积的丙酮沉 淀，离心后取沉淀加1 3倍浓縮液体积的氯仿溶解,-4'C冷藏放置过夜，得到的白色细小碎 结晶即为半乳糖醇。
上述工艺条件不需再进行进一步纯化，所得半乳糖醇为色谱纯，如想进一步精制，可用 氯仿洗。
下面是制备半乳糖醇的实施例。通过实施例可以了解不同制备工艺条件对半乳糖醇纯度 及含量的影响。
实施例l:
取白花蛇舌草悬浮细胞培养液4000rpm离心20分钟，取沉淀，用1/3倍培养液体积的水 IO分钟超声溶解，浓縮至2 3ml浓縮液/300ml培养液，用3倍浓縮液体积的丙酮沉淀，离 心后取沉淀加1倍浓縮液体积的氯仿溶解,_4°0冷藏放置过夜，半乳糖醉得率为0. 2g/L培养 液左右。
实施例2:
取白花蛇舌草悬浮细胞培养液4000rpm离心20分钟，取沉淀,用1/3倍培养液体积的水 20分钟超声溶解，浓縮至2 3ml浓缩液/300ml培养液，用4倍浓縮液体积的丙酮沉淀，离 心后取沉淀加2倍浓縮液体积的氯仿溶解,-4°0冷藏放置过夜，半乳糖醇得率为0. 3g/L培养 液左右。
实施例3:取白花蛇舌草悬浮细胞培养液4000rpm离心20分钟，取沉淀,用1/3倍培养液体积的水 20分钟超声溶解，浓縮至2 3ml浓縮液/300ml培养液，用5倍浓縮液体积的丙酮沉淀，离
心后取沉淀加3倍浓縮液体积的氯仿溶解,-4'C冷藏放置过夜，半乳糖醇得率为0. 5g/L培养
液左右。
权利要求
1.一种半乳糖醇的制备方法，其特征是以白花蛇舌草悬浮细胞系为原料，经如下加工工艺过程制备而成的1)水提粗品将白花蛇舌草悬浮细胞系细胞培养液离心，得沉淀物，用原培养液体积1/3的水超声溶解，然后浓缩至2～3ml浓缩液/300ml培养液；2)精制将浓缩液用丙酮沉淀后离心，取沉淀用氯仿溶解，冷藏过夜即得结晶。
2. 根据权利要求l所述制造半乳糖醇的方法，其特征在于，水提液浓縮至2 3ml浓縮液/300ml 培养液。
3. 根据权利要求l所述制造半乳糖醇的方法，其特征在于，用3 5倍体积丙酮沉淀。
4. 根据权利要求l所述制造半乳糖醇的方法，其特征在于在氯仿中得白色细小碎结晶。
全文摘要
本发明公开了一种从白花蛇舌草悬浮细胞系培养液中制备半乳糖醇的方法，利用本方法可以显著提高半乳糖醇纯度，且具有分离步骤简单，原料可再生的优点，可以显著克服现有半乳糖醇制备方法的缺点。白花蛇舌草悬浮细胞系已公开发表在《海峡药学》2006年第18卷6期132-134页论文《白花蛇舌草细胞悬浮培养的建立与条件优化》中。本发明通过下述技术方案予以实现将白花蛇舌草悬浮细胞系培养液4000rpm离心20分钟，取沉淀，用原培养液体积1/3的水10～20分钟MHz超声溶解，浓缩至2～3ml浓缩液/300ml，用3～5倍浓缩液体积的丙酮沉淀离心，沉淀加1～3倍浓缩液体积的氯仿溶解，-4℃冷藏放置过夜，得到的白色细小碎结晶即为半乳糖醇。
文档编号C07C31/26GK101289370SQ20081002550
公开日2008年10月22日 申请日期2008年5月7日 优先权日2008年5月7日
发明者于瑞莲, 沈文斌, 旻 王 申请人:中国药科大学