专利名称：：一类克洛皂苷及其制法与抗高致病h5n1流感病毒的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一类新的克洛皂苷，制备这类克洛皂苷的方法，含有这类克洛皂苷的药物组合物，以及这类克洛皂苷在制备抗流感病毒药物，尤其是抗高致病H5m流感病毒的药物中的应用；属于化学药物
技术领域：
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背景技术：
：甲型流感病毒属于正粘病毒科，基因组由8个单链节段式的负链RNA组成，编码至少10种蛋白血凝素蛋白(Hemagglutinin,HA)、神经氨酸酶(Neuraminidase,ΝΑ)、聚合Sl(Polymerasebasicprotein1，PBl；Polymerasebasicprotein1，PB2；Polymeraseacidicprotein,PA)、核蛋白(Nucleoprotein,NP)、基质蛋白(Matrixprotein1，Ml；Matrixprotein2,M2)^nI^JSS(Non-structuralproteinl,NSl；Non-structuralprotein2，NS2)。野生水禽是甲型流感病毒的原生宿主，当经过变异，甲型流感病毒会感染其它物种(包括人类)。H5m高致病流感病毒即是如此，1997年在中国香港首次证实了H5W高致病流感病毒感染人类的病例，说明该病毒已具备以人为宿主的跨种属传播的能力。WHO的数据显示，截止至2008年2月22日，全世界共有368人感染H5W高致病流感病毒，其中的234人死亡(死亡率63.6%)(http://www.who.int/csr/disease/avian_influenza/country/cases_table_2008_02_26/en/index,html,2008.),并且传播速度和范围未见下降趋势。目前，临床上针对甲型流感病毒的药物主要有两个靶点M2离子通道抑制剂和神经氨酸酶抑制剂。前者包括有Amantadine和Rimantadine，后者包括Oseltamivir和Zanamivir等(J.Clin.Virol.30，(2004):115_133)。但由于流感病毒的高变异性，目前已经对所有M2离子通道抑制剂产生耐药性(自2007年起，美国FDA已经禁止这类药物用作流感治疗药物)；因而神经氨酸酶抑制剂几乎是唯一一类临床用药，但自2006年起，在泰国和越南出现了对该类药物耐药的H5m高致病流感病毒株(NipponRinsho.64,(2006)1845-1852；AntiviralRes.73(2007):228_231)。同时，还是由于流感病毒的高变异性，目前尚无一劳永逸的针对流感病毒的疫苗。血凝素蛋白(HA)是流感病毒表面的糖蛋白，其主要功能是与宿主细胞表面的受体(唾液酸)相互识别、结合，并介导病毒进入宿主细胞，即病毒感染的第一步。因此，若能在这个环节上阻断流感病毒的入侵，则可以有效地进行预防和治疗。留体皂苷在自然界中分布广泛，主要集中在单子叶植物的百合科(Liliaceae)、薯蓣科(Dioscoreaceae)和龙舌兰科(Agavaceae)等植物中；在双子叶植物的豆禾斗(Fabaceae)、玄参禾斗(Scrophulariaceae)、漠藜禾斗(Zygophyllaceae)>苦木禾斗(Simaroubiaeae)和茄科(Solanaceae)的少数植物中也有分布。自上世纪七十年代以来，在海洋动物中也发现了许多留体皂苷迹。留体皂苷具有广泛的药理活性，主要有抗真菌、抗细菌、抗病毒、细胞毒性、抗肿瘤、心血管活性、抗炎、护肝、抑制血小板凝聚等药理活性，是一类颇有前景的药物。一些研究结果表明皂苷中的糖链与其生物活性有着密切的关系，因而皂苷研究日益引起国内外学者的极大兴趣。薯蓣皂苷Dioscin(diosgenin3-0--chacotrioside)是最具代表性的螺旋甾烷类皂苷，它广泛存在于蔬菜和传统药用植物中，对肿瘤细胞具有抑制作用，而且该活性与3-0-糖链结构密切相关。
发明内容本发明要解决的技术问题是提供一类新的克洛皂苷化合物；本发明要解决的另一个技术问题是提供这类克洛皂苷化合物的制备方法；本发明要解决的又一个技术问题是提供含有这类克洛皂苷化合物的药物组合物；本发明要解决的再一个技术问题是提供这类克洛皂苷化合物在制备抗流感病毒药物，尤其是抗高致病H5m流感病毒药物中的应用。具体而言，为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案本发明涉及的克洛皂苷化合物如通式(I)所示权利要求如通式(I)所示的克洛皂苷，其中，R1、R2独立的选自氢、葡萄糖基、阿拉伯糖基、鼠李糖基、半乳糖基、木糖基、核糖基、甘露糖基、2氨基葡萄糖基、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、山梨糖基、阿洛糖基、阿洛酮糖基，或由这些单糖23个组成的直链或支链寡糖基；R3选自H、C1C18直链或支链的烷酰基。F2009100842456C00011.tif2.制备权利要求1所述的克洛皂苷的方法，其特征在于，包括如下步骤3.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，用苄基保护时；反应的碱选自NaH；催化剂选自四丁基碘化铵；溶剂选自四氢呋喃，N，N-二甲基甲酰胺。4.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，脱除苷元上的苄基保护基使用Pd-C和H2；脱保护基反应的溶剂选自四氢呋喃、甲醇、乙醇、二氯甲烷、水中的一种或多种的混合物；反应在有机胺存在的条件下进行。5.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，所述的糖基供体上的保护基选自乙酰基、苯甲酰基、叔戊酰基、苄基；所述的糖基供体的活化基团选自三氯乙酰亚胺酯、乙硫苷、苯硫苷或对-甲苯硫苷；糖苷化反应的在路易斯酸催化剂存在的条件下进行；所述糖苷化反应中的有机溶剂选自C1-C4的氯代烷烃、甲苯或乙醚；糖苷化反应在3Α-5A型硅铝酸盐分子筛存在的条件下进行；糖苷化反应的淬灭剂选自硫代硫酸钠、有机胺。6.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，脱除糖基上的苯甲酰基保护基使用CH3ONa；脱保护基反应的溶剂选自四氢呋喃、甲醇、乙醇、二氯甲烷、水中的一种或多种的混合物；脱保护基反应完成后使用阳离子树脂(H+)中和反应液至中性。7.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，步骤(7)选择性的保护葡萄糖上3，6-OHs使用位阻试剂1-(苯甲酰基)苯并三唑；有机溶剂优选为C1-C4的氯代烷烃、甲苯或乙醚；反应在有机胺存在的条件下进行。8.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，酯化反应的缩合试剂选自1，3二环己基碳二亚胺、二吡啶碳酸酯、1-(3_二甲胺丙基)-3_乙基碳酰亚胺盐酸盐、1，3_二异丙基碳酰亚胺、4-吡咯烷基吡啶；催化剂选自4-二甲氨基吡啶(DMAP)，4-吡咯烷基吡啶。9.根据权利要求2的制备方法，其特征在于，各步骤的产物可以通过重结晶或硅胶柱纯化。10.根据权利要求的制备方法，其特征在于，所述的硅胶柱纯化时使用的洗脱剂是选自石油醚、正己烷、环己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇中一种或多种的混合物；所述重结晶纯化中的溶剂优选为三氯甲烷、(^-(；的烷基醇、乙酸乙酯、丙酮、正己烷、石油醚、环己烷、二氯甲烷、水中一种或多种的混合物。11.一种药物组合物，其特征在于，含有作为有效成分的通式(I)所示的克洛皂苷和药效学上可接受的载体。12.根据权利要求11的药物组合物，其特征在于，还含有其它的抗病毒药。13.权利要求1所述的克洛皂苷在制备预防或治疗抗流感病毒的药物中的应用。14.根据权利要求13的应用，其特征在于，所述的流感病毒为H5N1、H5N2。全文摘要本发明公开了一类克洛皂苷及其制法与抗高致病H5N1流感病毒的应用。本发明以天然产物薯蓣苷元为原料，通过结构修饰首先在C-6位引入羟基，得到克洛皂苷元，然后在C-3位引入糖基，得到系列克洛皂苷，最后在C-6羟基引入不同酰基得到系列化合物。药理实验表明，它们对H5N1高致病流感病毒的侵入宿主细胞过程有明显的抑制作用，可以用作预防或治疗抗流感病毒的药物。本发明还涉及本发明化合物与其它抗病毒药的联合用药以及包含它们的药物组合物。文档编号C07J75/00GK101935335SQ20091008424公开日2011年1月5日申请日期2009年5月18日优先权日2009年5月18日发明者曹颖莉,李英霞,郭颖申请人:中国医学科学院药物研究所;中国海洋大学