专利名称：氟取代的2-芳基-3,5-二氰基-4-吲唑基-6-甲基-1,4-二氢吡啶和其用途的制作方法
氟取代的2-芳基-3, 5- ニ氰基-4-吲唑基-6-甲基-1, 4- ニ氢卩比D定和其用途本发明涉及具有蛋白质酪氨酸激酶抑制活性的新的氟取代的2-芳基-3，5-ニ氰基-4-(1Η-吲唑-5-基)-6-甲基-1，4- ニ氢吡啶衍生物、其制备方法和其用于治疗C-Met-介导的疾病或C-Met-介导的病症的用途，尤其是癌症及其它增通病症。癌症是最普遍的疾病之一。在世界范围内，在2002年，超过四百四十万人诊断患有乳房、结肠、卵巣、肺或前列腺癌，超过二百五十万人死于这些破坏性疾病(Globocan2002 Report, http://www-dep. iarc. fr/globocan/downloads. htm)。单独在美国，在2005年，预计有一百二十五万以上新的病例，并且超过五十万人因癌症而死去。预计这些新的病例的大部分是结肠癌( 100000)、肺癌( 170000)、乳房癌( 210000)和前列腺癌( 230000)。在下ー个十年，预计癌症的发病率和流行率增加大约15%以上，反映了 I. 4%的平
均增长率(American Cancer Society, Cancer Facts and Figures 2005; http://www.cancer, org/docroot/STT/content/STT_lx_Cancer_Facts_Figures_2007. asp)。癌症的产生有许多途径，这也是它们难以治疗的理由之一。一个途径是由癌蛋白将细胞转化，这种癌蛋白是通过基因突变由正常细胞蛋白产生的，基因突变导致这些蛋白的非生理性激活。能够衍生许多癌蛋白的ー个蛋白家族是酪氨酸激酶(例如src激酶)，尤其是受体酪氨酸激酶(RTKs)。在过去的二十年，许多研究方法已经说明了受体酪氨酸激酶(RTK)介导的信号在调节哺乳动物细胞生长方面的重要性。近来，临床上使用酪氨酸激酶的选择性小分子抑制剂作为抗肿瘤发生药剂已经取得了效果。C-Met受体还是受体酪氨酸激酶。在80年代初，当从化学诱导的人骨肉瘤细胞系(其含有Met基因的激酶域，其中Met基因在它的N-末端与ニ聚域融合)中分离出突变Met时，确定了它的致癌潜力[C.S. Cooper et al. , Nature 311: 29-33(1984)]。细胞Met蛋白是以单链190 kd前体物形式合成的异ニ聚体跨膜蛋白[G. A.Rodrigues 等人，Mol. Cell Biol. 11: 2962-70 (1991)]。该前体物在氨基酸残基 307 之后进行细胞内裂解，形成通过ニ硫桥连接的50 kd α -链和145 kd α -链。α -链完全存在于胞外，而β-链横跨质膜。β -链由N端sema域组成,其与α-链一起介导配体结合。β_链的胞外域的其余部分由半胱氨酸富集域和四个免疫球蛋白域组成，并且继之以横跨膜域和胞内域。胞内域包括近膜域、激酶域和C端域，其介导下游信号。配体结合时，诱导受体的ニ聚化，并且激酶域在近膜域(Υ1003)、激酶的激活环(Υ1234和Υ1235)和羧基终端域(Υ1349和Υ1356)被酪氨酸自磷酸化步骤的级联激活。磷酸化的Υ1349和Υ1356包含多个底物引入位点，用于结合下游C-Met信号所必需的衔接蛋白[C. Ponzetto等人，Cell77: 261-71(1994)]。c_Met信号的一种最重要的底物是衔接蛋白(scaffolding adaptorprotein) Gabl,其通过特殊的磷酸酪氨酸结合位点(称为mbs met结合位点)与Y1349或Y1356结合，导致独特延长的胞内信号。另ー个重要的底物是衔接蛋白Grb2。根据细胞环境，这些衔接子介导各种胞内信号途径的激活，如通过ERK/MAPK、PI3K/Akt、Ras、JNK、STAT、NFk B和β-连环蛋白的信号途径。c-Met唯一地被肝细胞生长因子(HGF)(亦称扩散因子)和它的剪接变体(它是其ロ隹一已知的生物学活性配体)激活[L. Naldini等人,itocogefle 6: 501-4(1991)]。HGF具有独特的结构，其显示了与纤溶酶原家族的蛋白酶的相似性。它由氨基-終端域、继之以四个kringle域和丝氨酸蛋白酶同源域组成，其没有酶催活性。与c_Met相似，HGF是以非活性的单链前体物(pro-HGF)形式合成的，其在细胞外被丝氨酸蛋白酶(例如纤溶酶原激活物和凝血因子)分解，并且转 变为ニ硫化物连接的活性α-和β-链杂ニ聚体。HGF高度亲合性地结合硫酸こ酰肝素粘蛋白，这会使它保持主要与胞外基质结合，并限制它的扩散。晶体结构分析表明，HGF形成ニ聚体，当它其与c-Met结合时，可以诱导受体的ニ聚化。HGF被间质细胞表达，并且它与c-Met的结合(这种结合尤其是在上皮细胞中广泛地表达)在各种组织(包括上皮、内皮、神经元和造血细胞)中导致多向性(pleiotropic)效应。这种效应一般包括ー种或所有下列现象i)促有丝分裂的刺激作用；通过HGF对肝细胞的促有丝分裂活性来鉴定HGF ;ii)侵入和迁移的刺激作用；在独立的实验方法中，基于HGF对细胞运动性(“扩散”)的诱导，将HGF确定为扩散因子；和iii)形态发生(小管发生)的刺激作用。在胶原基质中，HGF诱导犬肾脏细胞的支管的形成。此外，源自于遗传改变的小鼠和细胞培养实验的证据表明，c-Met起存活受体的作用，并且保护细胞免于细胞凋亡[N. Tomita 等人，CYrcWaiio/ 107: 1411-1417 (2003) ; S. Ding 等人，BloocI 101: 4816-4822(2003) ; Q. Zeng等人，プ Biol. Chem. 277: 25203-25208(2002);N. Horiguchi 等人，0/7じ0ダ<9/7<9 21: 1791-1799 (2002) ; A. Bardelli 等人，J. 15:6205-6212(1996) ; P. Longati 等)K,Cell Death Differ. 3: 23-28(1996) ; E. M. Rosen,Symp. Soc. Exp. Biol. 47: 227-234(1993)]。由于HGF协调这些生物过程的实施，导致特异性遗传程序，被称为“侵入性生长”。在正常情况下，c-Met和HGF对小鼠的胚胎发育是不可缺少的，尤其是胎盘和肝的形成和四肢体节的成肌细胞的方向性迁移。c-Met或HGF基因的遗传性破环产生相同的表型，这显示了它们的独特相互作用。还没有充分了解c-Met/HGF在成年有机体中的生理作用，但实验证据说明，它们与创伤愈合、组织再生、红细胞生成和组织动态平衡有夫。癌蛋白TPR-MET的鉴别首先表明了 c_Met可以在致肿瘤性中起一定作用。其它确实证据源自于许多不同的实验方法。在人和鼠的细胞系中，c-Met或HGF的超表达诱导致肿瘤性和转移性的表型(当在裸鼠中表达时)。在小鼠中，c-Met或HGF的转基因超表达诱导致肿瘤性。最使人感兴趣的是，已经在偶发和遗传性乳头状肾癌(HPRC)以及在其它癌症类型(例如肺、胃、肝、头和颈、卵巢和脑癌)中确定了 c-Met的歧义突变或激活受体的突变。显著的是，HPRC家族中的特异性c-Met突变与疾病分离，在c-Met激活和人癌症之间形成因果联系[L. Schmidt 等人,舱た Genet. 16: 68-73 (1997) ; B. Zbar 等人,doV. CancerRes. 75: 163-201(1998)]。具有最强转变活性的激活突变位于激活环(D1228N/H和Y1230H/D/C)和相邻的P+1环(M1250T)中。在催化环附近和在激酶域的A叶(lobe)之内已经发现了其它的较弱的突变。此外，在肺肿瘤中，已经在c-Met的近膜域观察到ー些突变，其不直接激活激酶，而是通过使蛋白抵抗遍在泛素化作用(ubiquitination)和随后的降解而使蛋白稳定[M. Kong-Beltran等人,feflcer Tfes. 66: 283-9 (2006) ; T. E. Taher 等人，J. Immunol. 169: 3793-800(2002) ; P. Peschard等人，#ο7· Cell 8: 995-1004(2001)]。有趣的是，在各种癌症中，c-Met的体细胞突变与侵入性提高和大范围的转移病变有夫。尽管种系和体细胞突变的频率很低(低于5%)，但在没有突变的情况下，已经观察到通过旁分泌或自分泌机理导致c-Met信号失调的其它主要机理。在源自于间质细胞的肿瘤中，例如骨肉瘤或横纹肌肉瘤，已经观察到旁分泌激活，其生理性地产生HGF，并且在恶性胶质瘤和乳房癌中，其是外胚层起源的(of ectodermal origin)。然而，最常见的病例是C-Met过度表达的癌，这种过度表达在结肠、胰腺、胃、乳房、前列腺、卵巣和肝癌中可以观察到。正如在胃和肺肿瘤细胞系中所观察到的那样，超表达可以例如通过基因增殖产生。最近，在对EGF受体抑制获得抗性的肺肿瘤细胞系中检测到了 c-Met 的超表达[J. A. Engelmann 等人，5bi<9/ c<9 316: 1039-1043(2007)]。超表达c-Met的ー些上皮肿瘤还共同表达HGF，产生自分泌c-Met/HGF刺激环，并由此防止对基质细胞衍生的HGF的需要。总之，已经发现C-Met在人癌症中的异常激活典型地与预后差有夫，而与特定机理无关[J. G. Christensen 等人，feflcer Zeii. 225: 1-26(2005)]。 总之，已经进行了许多体外和体内试验，验证C-Met作为重要的癌症靶向，详细ー览表可以在 http : //www. vai. org/met 中看到[C. Birchmeier 等人，舱た Rev. Mol.Cell Biol. 4: 915-25 (2003)]。为了衰减人肿瘤中的异常Met信号，已经采取了ー些策略，包括HGF拮抗剂和小分子抑制剂，还有其它的策略。目前临床上开发了许多小分子抑制剂，例如 ARQ-197 (Arqule)，foretinib (XL-880, Exelixis/GSK)和 PH-2341066 (Pfizer);近来已经对它们进行了评述[J. J. Cui, Expert Opin. Ther. Patents 17: 1035-45(2007)]。在WO 2006/066011-A2中，已经描述了卤代烷基取代的3_氰基_1，4_ ニ氢吡啶衍生物(在4位具有芳基或杂芳基)作为留体受体和钙通道活性的调节剂，由此特别可用于治疗心血管疾病。在WO 2006/074419-A2中，已经主张了使用4-苯基-1,4-ニ氢吡啶衍生物来治疗阿尔茨海默氏病的方法。近来已经在WO 2008/071451-A1中公开了具有c_Met激酶抑制活性的各种取代的3_氰基-4-杂芳基-1，4-ニ氢吡啶。然而，在这种新结构类别的c-Met抑制剂的进ー步调查期间，候选化合物常常受到不能令人满意的ロ服生物利用率的连累，由大鼠中的血液清除率测定数据可知，这种ロ服生物利用率显著地低于最初期望的ロ服生物利用率。因为ロ服生物利用率还取决于化合物吸收的程度，和这些化合物的药物动力学和物理化学特性，因此假定低溶解度和/或经胃肠道的不充分的滲透性可能导致在吸收方面的这种限制。因此，按照本发明所要解决的技术问题可以在对C-Met激酶具有有效抑制活性的另ー种化合物的鉴定过程中看到，这些化合物显示了溶解度和/或滲透性提高，随后导致ロ服给予这些化合物之后所吸收的部分増加。意外地，现在发现，在大家公认的肠细胞试验中，在6位的甲基处具有ニ氟-或三氟-取代的2-芳基-3，5- ニ氰基-4- (1H-吲唑-5-基)-6-甲基-1，4- ニ氢吡啶衍生物显示出显著提高的体外渗透性能。由此，在一方面，本发明涉及通式(I)的氟取代的2-芳基-3，5-ニ氰基-4-(1Η-吲唑-5-基)-6-甲基-1，4- ニ氢吡啶衍生物
权利要求
1.式⑴的化合物
2.按照权利要求I的式(I)的化合物，其中Ar是苯基，吡啶基，嘧啶基，噻吩基，吡唑基，咪唑基，噁唑基，噻唑基，异噁唑基或异噻 唑基，其各自可以被一或两个独立地选自下列的取代基取代氟，氯，氰基，甲基，二氟甲基， 三氟甲基，乙基，甲氧基，三氟甲氧基和乙氧基，R1是氢或氟，R2是氢，R3是氢或氟，和R4是氢，甲基或乙基，或其可药用盐、水合物和/或溶剂化物。
3.按照权利要求I或2的式(I)的化合物，其中Ar是苯基，吡啶基或噁唑基，其各自可以被一或两个独立地选自下列的取代基取代 氟，氯，甲基，三氟甲基和甲氧基，R1是氢或氟，R2是氢，R3是氢或氟，和R4是甲基，或其可药用盐、水合物和/或溶剂化物。
4.制备仪利要求1全3所足义的式；U)化合物的万法，具特祉在十使式；(11)的咄唑基醛
5.权利要求1至3的任一项所定义的化合物，用于治疗或预防疾病。
6.权利要求1至3的任一项所定义的化合物用于制备药物组合物的用途，该药物组合 物用于治疗或预防细胞增殖病症。
7.权利要求6的用途,其中细胞增殖病症是癌症。
8.药物组合物，其包含权利要求1至3的任一项所定义的化合物或其可药用水合物或 溶剂化物和可药用赋形剂。
9.权利要求8的药物组合物，进一步包含一或多种其它治疗剂。
10.权利要求9的药物组合物，其中其它治疗剂是抗肿瘤药剂。
11.权利要求8至10的任一项所定义的药物组合物，用于治疗或预防细胞增殖病症。
12.治疗或预防哺乳动物的细胞增殖病症的方法，该方法包括给予需要其的哺乳动 物治疗有效量的、权利要求1至3的任一项所定义的一或多种化合物或权利要求8至10的任一项所定义的药物组合物。
13.权利要求12的方法，其中细胞增殖病症是癌症。
14.权利要求13的方法，其中癌症是乳癌，呼吸道癌，脑癌，生殖器官癌，消化道癌，尿 路癌，眼癌，肝癌，皮肤癌，头或颈癌，甲状腺癌，甲状旁腺癌或实质固态瘤的远端转移病变。
15.权利要求13的方法，其中权利要求1至3的任一项所定义的化合物或权利要求8 至10的任一项所定义的药物组合物与手术或放射治疗结合给予。
全文摘要
本发明涉及具有蛋白质酪氨酸激酶抑制活性的新的氟取代的2-芳基-3,5-二氰基-4-(1H-吲唑-5-基)-6-甲基-1,4-二氢吡啶衍生物、其制备方法和其用于治疗c-Met-介导的疾病或c-Met-介导的病症的用途，尤其是癌症及其它增殖病症。
文档编号C07D413/14GK102666525SQ201080050319
公开日2012年9月12日 申请日期2010年11月8日 优先权日2009年11月11日
发明者A.瓦卡洛波洛斯, K.恩格尔, K.齐默曼, M.洛贝尔, M.米歇尔斯, N.托伊施 申请人:拜耳制药股份公司