专利名称：一种新奥苷肽粉状固体的制备方法
一种新奥苷肽粉状固体的制备方法所属领域本发明属于生物化工技术领域，具体涉及一种新奥苷肽的提取方法，特别是一种从发酵液中分离提取新奥苷肽的方法。
背景技术：
近年来，我国研究开发了一系列的核苷类农用抗生素。如，具有胞苷骨架的核苷类抗生素武夷霉素，嘧肽霉素，多抗菌素(polyoxin)，含有胞嘧啶核苷肽类结构的宁南霉素、 云南霉素及庆丰霉素等。以上核苷类农用抗生素均为通过微生物发酵产生，而微生物菌株发酵产生的核苷类活性物质的量往往很低，加之在发酵液中还有与核苷类活性物质共存的其它大量杂质和副产物，如有微生物细胞、蛋白质、色素、其它细胞代谢产物及末用完的培养基等，从发酵液中提取分离核苷类活性物质也是一个比较复杂的过程。目前，源自微生物发酵产生的核苷类农用抗生素的提取主要有两种提取方法，一种是离子交换方法，包括发酵液的酸化，固液分离，离子交换层析，浓缩等；另一种方法是膜提取方法，通过采用微滤膜微滤，再超滤，纳滤和喷雾干燥等。本实验室在进行抗生素的研究过程中，发现一株放线菌经发酵能产生具有广谱抗菌生物活性的嘧啶核苷肽类物质，尤其对革兰氏阳性菌、植物病毒的抑制活性很强，如有很强的抗植物病毒病如烟草、辣椒、番茄花叶病毒病等的活性。发明者命名该放线菌产生的嘧啶核苷肽类抗菌物质为新奥甘肽(或新奥霉素)，主要成分是一种新的尿嘧啶核苷肽 (1-尿嘧啶-4肌氨酰-丝氨酰氨基-1，4- 二脱氧-β -D-吡喃葡萄糖醛酸)(专利申请号 200910060121. 4)，化学结构为
权利要求
1.一种新奥苷肽粉状固体的制备方法，其特征是包括以下步骤(1)粗膏制备发酵液先加热升温至60°c，保持10-60分钟，然后将发酵液温度降至 30°C以下；加入助滤剂，充分搅拌，放置10-30分钟，再加入絮凝剂，充分搅拌，用型号为 600-2000目的滤布进行过滤，滤液在真空度-0. 08MPa至-0. 09Mpa,水浴温度60 70°C或 50 55 °C条件下浓缩得粗膏；(2)纯化精制所得粗膏与100 200目的柱层析硅胶混合，其比例为粗膏硅胶= 1 1 2. 5，搅拌均勻，在40°C条件下真空干燥，磨碎，过100目筛，用GlOO 200的硅胶填柱，其质量是上柱搅拌物料的5 10倍，进行硅胶柱层析，采用氯仿甲醇=80 20 20 80 二元洗脱剂进行梯度洗脱，下柱液以薄层层析分析结果分段采集，减压下蒸馏回收洗脱溶剂，浓缩物经干燥得到新奥苷肽粉状产品。
2.根据权利要求1所述的一种新奥苷肽粉状固体的制备方法，其特征在于所述的发酵液由产生新奥苷肽的放线菌或其遗传改良菌株发酵产生。
3.根据权利要求1所述的一种新奥苷肽粉状固体的制备方法，其特征在于所述的助滤剂为活性碳或珍珠岩或高岭土或硅藻土。
4.根据权利要求1所述的一种新奥苷肽粉状固体的制备方法，其特征在于所述的絮凝剂为明矾或聚氯化铝或三价铁盐。
5.根据权利要求1所述的一种新奥苷肽粉状固体的制备方法，其特征在于加入的助滤剂的质量克占发酵液的体积毫升的百分比为0. 1% -3. 0% ；加入的絮凝剂的质量克占发酵液的体积毫升的百分比为0.01% -0. 1%。
全文摘要
本发明属于生物化工技术领域，具体涉及一种新奥苷肽的提取方法，特别是一种从发酵液中分离提取新奥苷肽的方法。一种新奥苷肽粉状固体的制备方法，包括以下步骤(1)粗膏制备发酵液先加热升温灭菌，再加入助滤剂和絮凝剂，过滤，浓缩得粗膏；(2)纯化精制所得粗膏与柱层析硅胶混合，真空干燥，磨碎，过筛，硅胶柱层析，减压蒸馏回收洗脱溶剂，浓缩干燥得到新奥苷肽粉状产品。本发明具有使用有机溶剂耗用少，获得的新奥苷肽产品纯度高，易于工业化等优点。
文档编号C07K5/083GK102321153SQ20111026182
公开日2012年1月18日 申请日期2011年9月6日 优先权日2011年9月6日
发明者周金燕, 杨杰, 肖亮, 谭红, 钟娟 申请人:中国科学院成都生物研究所