石杉碱甲发酵液提取的优化工艺技术的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种石杉碱甲发酵液提取的优化工艺技术。在发酵法制备石杉碱甲的工艺流程中，石杉碱甲提取工艺的优化非常重要，直接决定了产品得率和品质。我们经过多次研究实验，获得了优化的工艺方法：1、将发酵处理液在76mmHg，85℃条件下真空浓缩20倍。2、加入稀氨水，调节pH值为9.0。3、加入氯仿萃取，分离萃取液，加入1％NaOH与氯仿液再次萃取。4、用1％HCl与氯仿液反复萃取。5、脱色：在pH为1～1.5条件下，用活性炭脱色。6、结晶：用氯仿萃取并蒸干后，固体物质用丙酮溶解，4-5℃静置24h左右，得到结晶体。7、重结晶：将得到的第一次结晶体用丙酮溶解，进行重结晶。8、将晶体于65℃左右温度条件下烘干，检测，可得纯度为98％以上的纯品。
【专利说明】石杉碱甲发酵液提取的优化工艺技术
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种抗老年痴呆原料药石杉碱甲的发酵液提取的优化工艺技术。
【背景技术】
[0002] 目前，国内外有一些机构和个人在开展利用石杉植物的多种内生菌（包括真菌和 细菌）发酵生产石杉碱甲的技术研究，但实验研究的成品得率一直非常低下，在发酵法制 备石杉碱甲的工艺流程中，石杉碱甲提取工艺的优化非常重要，直接决定了产品得率和品 质。我们经过多次研究实验，获得了优化的工艺方法，可得纯度为98%以上的纯品，具有十 分重要的意义。
【发明内容】
[0003] 石杉碱甲是我国首次从蕨类植物蛇足石杉中分离得到的一种活性物质，它对中枢 乙酰胆碱酯酶具有高效、可逆、高选择的抑制作用，有强效、高选择性的抗乙酰胆碱酯酶活 性及提高学习和改善老年人记忆功能的作用。由于石杉碱甲仅存在于石杉科植物中，随着 石杉碱甲被分离并应用于临床，掀起了研究开发的热潮，人们便开始对石杉科植物进行掠 夺式开发，加上该植物对环境要求苛刻、分布星散、生长缓慢、资源更新周期长，使其资源越 来越匮乏。中国作为石杉野生资源主要分布区，其商业可开采量不足200吨，远不能满足市 场对药源的需求，已成为制约石杉碱甲开发的瓶颈。
[0004] 在发酵法制备石杉碱甲的工艺流程中，石杉碱甲提取工艺的优化非常重要，直接 决定了产品得率和品质。我们经过多次研究实验，获得了优化的工艺方法：
[0005] 1、将发酵处理液在76mmHg，85°C条件下真空浓缩20倍。
[0006] 2、加入稀氨水，调节pH值为8. 6-9.0。
[0007] 3、加入氯仿萃取，分离萃取液，加入1% NaOH与氯仿液再次萃取。
[0008] 4、用1% HC1与氯仿液反复萃取。
[0009] 5、脱色：在pH为1?1. 5条件下，用活性炭脱色。
[0010] 6、结晶：用氯仿萃取并蒸干后，固体物质用丙酮溶解，4-5°C静置24h左右，得到结 晶体。
[0011] 7、重结晶：将得到的第一次结晶体用丙酮溶解，进行重结晶。
[0012] 8、将晶体于65°C左右温度条件下烘干，检测，可得纯度为98%以上的纯品。
【具体实施方式】
[0013] 实施例1 :
[0014] 提取工艺方法：
[0015] 1、将发酵处理液在76mmHg，85°C条件下真空浓缩20倍。
[0016] 2、加入稀氨水，调节pH值为9. 0。
[0017] 3、加入氯仿萃取，分离萃取液，加入1% NaOH与氯仿液再次萃取。
[0018] 4、用1% HC1与氯仿液反复萃取。
[0019] 5、脱色：在pH为1.4条件下，用活性炭脱色。
[0020] 6、结晶：用氯仿萃取并蒸干后，固体物质用丙酮溶解，5°C静置24h左右，得到结晶 体。
[0021] 7、重结晶：将得到的第一次结晶体用丙酮溶解，进行重结晶。
[0022] 8、将晶体于65°C左右温度条件下烘干，检测，可得纯度为98. 8%以上的纯品。
【权利要求】
1.石杉碱甲发酵液提取的优化工艺技术，其特征在于包括以下工艺步骤： 将发酵处理液在76mmHg，85°C条件下真空浓缩20倍；加入稀氨水，调节pH值为9. 0 ;力口 入氯仿萃取，分离萃取液，加入1 % NaOH与氯仿液再次萃取；用1 % HC1与氯仿液反复萃取； 脱色：在pH为1?1. 5条件下，用活性炭脱色；结晶：用氯仿萃取并蒸干后，固体物质用丙 酮溶解，4-5°C静置24h左右，得到结晶体；重结晶：将得到的第一次结晶体用丙酮溶解，进 行重结晶；将晶体于65°C左右温度条件下烘干，检测，可得纯度为98%以上的纯品。
【文档编号】C07D221/22GK104151245SQ201310172254
【公开日】2014年11月19日 申请日期:2013年5月13日 优先权日:2013年5月13日
【发明者】王玲, 兰时乐, 肖宏 申请人:湖南佰伦科技有限公司