用去氧胆酸纯化番茄红素的方法
【专利摘要】本发明涉及一种用去氧胆酸纯化番茄红素的方法，该方法包括以下步骤：⑴将番茄红素含量为4~8%的番茄红素油树脂用强极性有机溶剂溶解后，得到番茄红素油树脂溶液；⑵所述番茄红素油树脂溶液中加入去氧胆酸，在避光条件下加入弱极性有机溶剂，过滤后得到去氧胆酸番茄红素的包合物；⑶所述去氧胆酸番茄红素的包合物中加入饱和碳酸氢钠的水溶液，而后用所述弱极性有机溶剂萃取后，分别得到萃取液和水相；⑷所述萃取液经蒸发浓缩后，得到番茄红素晶体；⑸所述水相中加入盐酸，调节pH=1，使去氧胆酸从水相中析出，经过滤洗涤后，即得可重复使用的固体去氧胆酸。本发明提取率高、操作简单、产品品质好。
【专利说明】用去氧胆酸纯化番茄红素的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及食品、保健品及药品【技术领域】，尤其涉及用去氧胆酸纯化番茄红素的方法。
【背景技术】
[0002]番茄红素是一种天然的抗氧化剂，它的抗氧化性是β_胡萝卜素的两倍，是维生素E的十倍，其能够有效地减少人类癌症以及心脏病的发病率。此外，番茄红素有着巨大的需求量，不仅可用于制药工业，还能用于食品工业、化妆品等。但是目前其应用受到的主要限制是从天然产物中提取出来的番茄红素油树脂中番茄红素的含量一般是6%。因此，对于番茄红素油树脂的纯化是一个很有应用价值的问题。
[0003]番茄红素油树脂的纯化方法目前已有多种方法，主要有⑴有机溶剂法，如专利CN102126911A中利用烷烃类溶剂首先进行结晶，而后将结晶物用烷烃类溶剂进行洗脱，原理即洗脱所用的有机溶剂可以将结晶物中的油相溶解，但是基本上不溶解番茄红素。⑵色谱法，如专利CN1405235利用反相色谱分离纯化真空浓缩冷冻得到99%以上纯度的番茄红素。该类办法优点在于得到的番茄红素的纯度较高，缺点是操作复杂，且设备运行成本较高。⑶结晶法，如专利CN1472183主要是利用有机溶剂在较高温度及氮气保护下，将番茄红素油树脂溶于有机相中，而后冷却结晶，得到高纯度的番茄红素。该法的缺点是番茄红素的得率较低，大部分番茄红素留在了母液中。⑷大孔树脂吸附分离法，如专利CN1439678A主要是利用大孔树脂吸附番茄红素油树脂，然后用流动相洗脱β_胡萝卜素等物质，最后将吸附在树脂上面的番茄红素洗脱下来，浓缩，结晶，得到番茄红素。很明显，这样的操作方法需要大量的有机溶剂进行洗脱。(5)再如传统的采用柱层析法、重结晶法、高效液相制备色谱法、皂化法等，但这些纯化方法或所需设备昂贵，或操作复杂，或效率较低。
【发明内容】
[0004]本发明所要解决的技术问题是提供一种提取率高、操作简单、产品品质好的用去氧胆酸纯化番茄红素的方法。
[0005]为解决上述问题，本发明所述的用去氧胆酸纯化番茄红素的方法，包括以下步骤:
⑴将番茄红素含量为4~8%的番茄红素油树脂用其质量的20-30倍的强极性有机溶剂溶解后，得到番茄红素油树脂溶液；
⑵所述番茄红素油树脂溶液中加入与所述番茄红素油树脂等质量的去氧胆酸，在避光条件下用冰水浴控制温度在0°C，搅拌f 3h后加入弱极性有机溶剂，过滤后得到去氧胆酸番茄红素的包合物；所述弱极性有机溶剂为所述番茄红素油树脂质量的15~25倍；
⑶所述去氧胆酸番茄红素的包合物中加入其质量的20-90倍的饱和碳酸氢钠的水溶液，而后用所述弱极性有机溶剂萃取后，分别得到萃取液和水相；所述弱极性有机溶剂为所述去氧胆酸番茄红素的包合物 质量的80-100倍；⑷所述萃取液经35~45°C蒸发浓缩后，得到番茄红素晶体；
(5)所述水相中加入质量浓度为2~8%的盐酸，调节pH=l，使去氧胆酸从水相中析出，经过滤洗涤后，即得可重复使用的固体去氧胆酸。
[0006]所述步骤⑴中的强极性有机溶剂是指乙酸乙酯、二氯甲烷、甲苯中的一种。
[0007]所述步骤⑵或所述步骤⑶中的弱极性有机溶剂是指石油醚、乙醚、正己烷中的一种或几种。
[0008]本发明与现有技术相比具有以下优点:
1、由于本发明采用了分子包合法，能够利用去氧胆酸选择性包合油树脂中的番茄红素(参见图1~ 4)，因此，提取率高，所得产品品质好。
[0009]2、由于本发明所用到的提取剂去氧胆酸能够通过加入碳酸氢钠溶液的方式转化为钠盐，使其溶解于水相中，通过加酸的方式使其转变为去氧胆酸，从而从水相中析出而加以回收利用，因此，不仅操作简单，而且由于去氧胆酸能够重复利用而具有较好的利用前景。【专利附图】
【附图说明】
[0010]下面结合附图对本发明的【具体实施方式】作进一步详细的说明。
[0011]图1为本发明紫外吸收光谱图。其中A为番茄红素油树脂溶液，B为番茄红素油树脂包合后的残余液。
[0012]图2为未纯化的番茄红素油树脂液相色谱图。
[0013]图3为纯化后的番茄红素油树脂液相色谱图。
[0014]图4为番茄红素标准样品的液相色谱图。
[0015]上述液相色谱条件为:色谱柱:Alltima C18(4.6 X 250mm, 5 μ m);流动相:甲醇-乙醚(1:1);检测波长:472nm ;流速:1.2mL.L-1 ;柱温:30°C。
【具体实施方式】
[0016]实施例1用去氧胆酸纯化番茄红素的方法，包括以下步骤:
⑴将番茄红素含量为4%的番茄红素油树脂用其质量的20倍的强极性有机溶剂乙酸乙酯溶解后，得到番茄红素油树脂溶液。
[0017]⑵番茄红素油树脂溶液中加入与番茄红素油树脂等质量的去氧胆酸，在避光条件下用冰水浴控制温度在0°c，搅拌Ih后加入弱极性有机溶剂石油醚，过滤后得到去氧胆酸番茄红素的包合物。
[0018]其中:弱极性有机溶剂为番茄红素油树脂质量的15倍。
[0019]⑶去氧胆酸番茄红素的包合物中加入其质量的40倍的饱和碳酸氢钠的水溶液，在去氧胆酸溶解的同时，内部包合的番茄红素同时也被释放出来，而后用弱极性有机溶剂萃取后，分别得到萃取液和水相。
[0020]其中:弱极性有机溶剂为去氧胆酸番茄红素的包合物质量的80倍。
[0021]⑷萃取液经35°C蒸发浓缩后，得到番茄红素晶体。该固体番茄红素纯度经分析为78%，产率为70%。
[0022] (5)水相中加入质量浓度为2%的盐酸，调节pH=l，使去氧胆酸从水相中析出，经过滤洗涤后，即得可重复使用的固体去氧胆酸。
[0023]该固体去氧胆酸的回收率为52%。
[0024]实施例2用去氧胆酸纯化番茄红素的方法，包括以下步骤:
⑴将番茄红素含量为8%的番茄红素油树脂用其质量的30倍的强极性有机溶剂二氯甲烷溶解后，得到番茄红素油树脂溶液。
[0025]⑵番茄红素油树脂溶液中加入与番茄红素油树脂等质量的去氧胆酸，在避光条件下用冰水浴控制温度在0°c，搅拌3h后加入弱极性有机溶剂乙醚，过滤后得到去氧胆酸番茄红素的包合物。
[0026]其中:弱极性有机溶剂为番茄红素油树脂质量的25倍。
[0027]⑶去氧胆酸番茄红素的包合物中加入其质量的20倍的饱和碳酸氢钠的水溶液，在去氧胆酸溶解的同时，内部包合的番茄红素同时也被释放出来，而后用弱极性有机溶剂萃取后，分别得到萃取液和水相。
[0028]其中:弱极性有机溶剂为去氧胆酸番茄红素的包合物质量的100倍。
[0029]⑷萃取液经45°C蒸发浓缩后，得到番茄红素晶体。该固体番茄红素纯度经分析为84%，产率为82%。
[0030](5)水相中加入质量浓度为8%的盐酸，调节pH=l，使去氧胆酸从水相中析出，经过滤洗涤后，即得可重复使用的固体去氧胆酸。
[0031]该固体去氧胆酸回收率为67%。
[0032]实施例3用去氧胆酸纯化番茄红素的方法，包括以下步骤:
⑴将番茄红素含量为5%的番茄红素油树脂用其质量的22倍的强极性有机溶剂甲苯溶解后，得到番茄红素油树脂溶液。
[0033]⑵番茄红素油树脂溶液中加入与番茄红素油树脂等质量的去氧胆酸，在避光条件下用冰水浴控制温度在0°c，搅拌2h后加入弱极性有机溶剂正己烷，过滤后得到去氧胆酸番茄红素的包合物。
[0034]其中:弱极性有机溶剂为番茄红素油树脂质量的20倍。
[0035]⑶去氧胆酸番茄红素的包合物中加入其质量的50倍的饱和碳酸氢钠的水溶液，在去氧胆酸溶解的同时，内部包合的番茄红素同时也被释放出来，而后用弱极性有机溶剂萃取后，分别得到萃取液和水相。
[0036]其中:弱极性有机溶剂为去氧胆酸番茄红素的包合物质量的90倍。
[0037]⑷萃取液经40°C蒸发浓缩后，得到番茄红素晶体。该固体番茄红素纯度经分析为70%，产率为75%。
[0038](5)水相中加入质量浓度为5%的盐酸，调节pH=l，使去氧胆酸从水相中析出，经过滤洗涤后，即得可重复使用的固体去氧胆酸。
[0039]该固体去氧胆酸回收率为70%。
[0040]实施例4用去氧胆酸纯化番茄红素的方法，包括以下步骤:
⑴将番茄红素含量为6%的番茄红素油树脂用其质量的24倍的强极性有机溶剂乙酸乙酯溶解后，得到番茄红素油树脂溶液。
[0041]⑵番茄红素油树脂溶液中加入与番茄红素油树脂等质量的去氧胆酸，在避光条件下用冰水浴控制温度在0°c，搅拌1.5h后加入弱极性有机溶剂，过滤后得到去氧胆酸番茄红素的包合物。
[0042]其中:弱极性有机溶剂为番茄红素油树脂质量的17倍。
[0043]弱极性有机溶剂是指石油醚与乙醚等体积混合而成的溶剂。
[0044]⑶去氧胆酸番茄红素的包合物中加入其质量的60倍的饱和碳酸氢钠的水溶液，在去氧胆酸溶解的同时，内部包合的番茄红素同时也被释放出来，而后用弱极性有机溶剂萃取后，分别得到萃取液和水相。
[0045]其中:弱极性有机溶剂为去氧胆酸番茄红素的包合物质量的85倍。
[0046]⑷萃取液经37°C蒸发浓缩后，得到番茄红素晶体。该固体番茄红素纯度经分析为80%，产率为65%。
[0047](5)水相中加入质量浓度为3%的盐酸，调节pH=l，使去氧胆酸从水相中析出，经过滤洗涤后，即得可重复使用的固体去氧胆酸。
[0048]该固体去氧胆酸纯度回收率为49%。
[0049]实施例5用去氧胆酸纯化番茄红素的方法，包括以下步骤:
⑴将番茄红素含量为7%的番茄红素油树脂用其质量的26倍的强极性有机溶剂二氯甲烷溶解后，得到番茄红素油树脂溶液。 [0050]⑵番茄红素油树脂溶液中加入与番茄红素油树脂等质量的去氧胆酸，在避光条件下用冰水浴控制温度在0°c，搅拌2.5h后加入弱极性有机溶剂，过滤后得到去氧胆酸番茄红素的包合物。
[0051]其中:弱极性有机溶剂为番茄红素油树脂质量的22倍。
[0052]弱极性有机溶剂是指石油醚与正己烷等体积混合而成的溶剂。
[0053]⑶去氧胆酸番茄红素的包合物中加入其质量的70倍的饱和碳酸氢钠的水溶液，在去氧胆酸溶解的同时，内部包合的番茄红素同时也被释放出来，而后用弱极性有机溶剂萃取后，分别得到萃取液和水相。
[0054]其中:弱极性有机溶剂为去氧胆酸番茄红素的包合物质量的95倍。
[0055]⑷萃取液经42°C蒸发浓缩后，得到番茄红素晶体。该固体番茄红素纯度经分析为90%，产率为87%。
[0056](5)水相中加入质量浓度为4%的盐酸，调节pH=l，使去氧胆酸从水相中析出，经过滤洗涤后，即得可重复使用的固体去氧胆酸。
[0057]该固体去氧胆酸回收率为65%。
[0058]实施例6用去氧胆酸纯化番茄红素的方法，包括以下步骤:
⑴将番茄红素含量为4.5%的番茄红素油树脂用其质量的28倍的强极性有机溶剂甲苯溶解后，得到番茄红素油树脂溶液。
[0059]⑵番茄红素油树脂溶液中加入与番茄红素油树脂等质量的去氧胆酸，在避光条件下用冰水浴控制温度在o°c，搅拌1.Sh后加入弱极性有机溶剂，过滤后得到去氧胆酸番茄红素的包合物。
[0060]其中:弱极性有机溶剂为番茄红素油树脂质量的18倍。
[0061]弱极性有机溶剂是指乙醚与正己烷等体积混合而成的溶剂。
[0062]⑶去氧胆酸番茄红素的包合物中加入其质量的80倍的饱和碳酸氢钠的水溶液，在去氧胆酸溶解的同时，内部包合的番茄红素同时也被释放出来，而后用弱极性有机溶剂萃取后，分别得到萃取液和水相。
[0063]其中:弱极性有机溶剂为去氧胆酸番茄红素的包合物质量的82倍。
[0064]⑷萃取液经36°C蒸发浓缩后，得到番茄红素晶体。该固体番茄红素纯度经分析为86%，产率为73%。
[0065](5)水相中加入质量浓度为6%的盐酸，调节pH=l，使去氧胆酸从水相中析出，经过滤洗涤后，即得可重复使用的固体去氧胆酸。
[0066]该固体去氧胆酸回收率为72%。
[0067]实施例7用去氧胆酸纯化番茄红素的方法，包括以下步骤:
⑴将番茄红素含量为5.5%的番茄红素油树脂用其质量的29倍的强极性有机溶剂乙酸乙酯溶解后，得到番茄红素油树脂溶液。
[0068]⑵番茄红素油树脂溶液中加入与番茄红素油树脂等质量的去氧胆酸，在避光条件下用冰水浴控 制温度在0°c，搅拌2.4h后加入弱极性有机溶剂，过滤后得到去氧胆酸番茄红素的包合物。
[0069]其中:弱极性有机溶剂为番茄红素油树脂质量的24倍。
[0070]弱极性有机溶剂是指石油醚、乙醚、正己烷等体积混合而成的溶剂。
[0071]⑶去氧胆酸番茄红素的包合物中加入其质量的90倍的饱和碳酸氢钠的水溶液，在去氧胆酸溶解的同时，内部包合的番茄红素同时也被释放出来，而后用弱极性有机溶剂萃取后，分别得到萃取液和水相。
[0072]其中:弱极性有机溶剂为去氧胆酸番茄红素的包合物质量的92倍。
[0073]⑷萃取液经44°C蒸发浓缩后，得到番茄红素晶体。该固体番茄红素纯度经分析为82%，产率为70%。
[0074](5)水相中加入质量浓度为7%的盐酸，调节pH=l，使去氧胆酸从水相中析出，经过滤洗涤后，即得可重复使用的固体去氧胆酸。
[0075]该固体去氧胆酸回收率为62%。
【权利要求】
1.用去氧胆酸纯化番茄红素的方法，包括以下步骤: (1)将番茄红素含量为4~8%的番茄红素油树脂用其质量的20-30倍的强极性有机溶剂溶解后，得到番茄红素油树脂溶液； (2)所述番茄红素油树脂溶液中加入与所述番茄红素油树脂等质量的去氧胆酸，在避光条件下用冰水浴控制温度在0°C，搅拌f 3h后加入弱极性有机溶剂，过滤后得到去氧胆酸番茄红素的包合物；所述弱极性有机溶剂为所述番茄红素油树脂质量的15~25倍； (3)所述去氧胆酸番茄红素的包合物中加入其质量的20-90倍的饱和碳酸氢钠的水溶液，而后用所述弱极性有机溶剂萃取后，分别得到萃取液和水相；所述弱极性有机溶剂为所述去氧胆酸番茄红素的包合物质量的80-100倍； (4)所述萃取液经35~45°C蒸发浓缩后，得到番茄红素晶体； (5)所述水相中加入质量浓度为2~8%的盐酸，调节pH=l，使去氧胆酸从水相中析出，经过滤洗涤后，即得可重复使用的固体去氧胆酸。
2.如权利要求1所述的用去氧胆酸纯化番茄红素的方法，其特征在于:所述步骤⑴中的强极性有机溶剂是指乙酸乙酯、二氯甲烷、甲苯中的一种。
3.如权利要求1所述的用去氧胆酸纯化番茄红素的方法，其特征在于:所述步骤⑵或所述步骤⑶中的弱极性有机溶剂是指石油醚、乙醚、正己烷中的一种或几种。
【文档编号】C07C11/21GK103910597SQ201410113272
【公开日】2014年7月9日 申请日期:2014年3月25日 优先权日:2014年3月25日
【发明者】龙海涛, 蒲陆梅, 李静, 王农, 吴龙婷 申请人:甘肃农业大学