专利名称：鱿精蛋白的提取工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及鱼精蛋白的提取工艺，特别是一种以鱿鱼精巢为原料提取鱿精蛋白的工艺。
目前，鱿鱼一般用于制作鱿鱼丝，附加值较低。鱼精蛋白可用作药用资源及天然食品防腐剂。国内已开发出以黄鱼、鲤鱼等的精巢为原料提取鱼精蛋白。其中以鲤鱼精巢为原料提取鲤精蛋白，其工艺是鲤鱼精巢经打浆制成匀浆，用1N硫酸溶液酸解1小时，过滤成滤液，然后用pH为3硫铵0.2摩尔去除杂蛋白制得提取液，再用硫酸铵0.4摩尔盐析、沉淀，用热水复溶静置透析除盐精制、沉淀，用乙醚洗涤，洗涤液冻干即成鲤鱼精蛋白。采用这种工艺路线，提取的鲤精蛋白纯度较低，且匀浆时即出现胶状物，该方法不适合于鱿精蛋白的提取，对于鱿精蛋白的提取方法还没有报道。
本发明的目的在于提供一种较稳定的有较高得率和纯度的鱿精蛋白的提取工艺。
本发明的目的是采取如下工艺方法来实现其目的本发明以成熟鱿鱼精巢为原料经匀浆→酸解→抽提→过滤→沉淀→离心去沉淀，上清液再抽提→离心，然后经透析、浓缩、真空干燥而成。其中鱿鱼精巢的匀浆过程采用浓度为0.05-1.0M的柠檬酸溶液，用量为150-450％(鱿鱼精巢的重量百分比)，均匀打浆制得匀浆液；匀浆液酸解工艺采用浓度为0.5-2.0M的硫酸溶液，用量为60-150％(与匀浆液的重量百分比)，温度控制在20-40℃，时间为0.5-3.5小时；酸解液的抽提工艺，采用浓度为0.05-0.35M的氯化钠溶液，重复两次，并采用80目滤布过滤；过滤后的上清液内加入浓度为95％的冷乙醇(温度为0-10℃)进行沉淀；然后采用冷冻离心除去沉淀物，离心温度为0-10℃；对上述离心后的上清液再采用浓度为20-50％的三氯乙酸进行抽提，用量为30-50％(与上清液的体积比)；再采用冷冻离心，并经透析、浓缩、真空干燥而制成成品。
本发明的匀浆工艺的最佳条件是采用浓度为0.1M的柠檬酸溶液，最佳用量是300-400％(鱿鱼精巢的重量百分比)。
本发明的酸解工艺的最佳条件是浓度为1.5M的硫酸溶液，最佳用量是100％(与匀浆液的重量百分比)，控制酸解最佳温度为40℃，最佳酸解时间为1小时。
本发明与现有技术相比具有实质性特点和突出的进步采用约3-4倍量的浓度为0.1M的柠檬酸或醋酸溶液进行匀浆，有效地解决了匀浆液匀浆时出现胶状物的问题，使得整个提取工艺较为稳定；匀浆液采用约1倍量的浓度为1.5M的硫酸溶液进行酸解1小时，并控制酸解温度在40℃左右，酸解充分，有效地提高了鱿精蛋白的提取得率；鱿精蛋白可用作保健食品的添加剂，开发了鱿鱼的新用途，增加了鱿鱼产品的附加值；充分利用了海洋药物资源。
实施例1取100克成熟鱿鱼精巢组织，加入300克浓度为0.1M的柠檬酸溶液中混合均匀打浆，在匀浆液内加入400克浓度为1.5M的硫酸溶液，调整温度至40℃左右，搅拌酸解约1小时。上述酸解液采用浓度为0.5M的氢氧化钠溶液中和至pH值为7左右，然后加入浓度为0.15M的氯化钠溶液进行抽提(溶液用量为400ml，重复两次)。上述抽提液用80目滤布过滤。过滤后的滤液内加入浓度为95％、温度为0℃的冰冷乙醇(冷乙醇的用量为200ml)沉淀，并经冷冻离心(8000g×10分钟，0℃)除去沉淀。离心后的上清液内再加入50％体积(相对上清液的体积比)、浓度为30％的三氯乙酸溶液进行抽提，重复操作抽提1次后，再冷冻离心(10000g×20分钟，0℃)，即制得鱿精蛋白硫酸盐；再经透析、浓缩，并真空干燥，得到0.633克鱿精蛋白硫酸盐，得率为2.3％(以干品计)。
实施例2取100克成熟鱿鱼精巢组织，加入300克浓度为1.0M的醋酸溶液混合均匀打浆，在匀浆液内加入240克浓度为1.0M的硫酸溶液，调整温度至30℃左右，搅拌酸解0.5小时；酸解液采用浓度为0.5M的氢氧化钠溶液调整pH值至7，然后加入浓度为0.1M的氯化钠溶液抽提(用量为300ml，重复两次)；抽提液用四层纱布过滤，过滤后的滤液内加入浓度为95％、温度为0℃的冰冷乙醇(用量为150ml)进行沉淀，然后离心除去沉淀。离心后的上清液中加入30％体积(相对上清液的体积比)、浓度为20％的三氯乙酸溶液进行抽提，并重复操作1次后，然后冷冻离心(8000g×20分钟，10℃)，即制得鱿精蛋白硫酸盐，再经透析、浓缩，并真空干燥，得到0.510克鱿精蛋白硫酸盐，得率为1.85％(以干品计)。
权利要求
1.一种鱿精蛋白的提取工艺，其特征是(1)将鱿鱼精巢置入浓度为0.05-1.0M的柠檬酸溶液中，用量为150-450％(鱿鱼精巢的重量百分比)，混合均匀打浆；(2)将上述匀浆液内加入浓度为0.5-2.0M的硫酸溶液进行酸解，温度控制在20-45℃，时间为0.5-3.5小时，硫酸溶液的用量为60-150％(与匀浆液的重量百分比)；(3)在上述酸解液内加入浓度为0.05-0.35M的氯化钠溶液进行抽提并过滤；(4)将过滤后的上清液内加入浓度为95％，温度为0℃-10℃的冷乙醇进行沉淀，然后采用冷冻离心，温度为0℃-10℃；(5)将离心后的上清液内再加入浓度为20-50％的三氯乙酸溶液中进行抽提，用量为30-50％(与上清液的体积比)，再冷冻离心，然后经透析、浓缩、真空干燥得成品。
2.根据权利要求1所述的鱿精蛋白的提取工艺，其特征是将鱿鱼精巢置入浓度为0.05-1.0M的醋酸溶液中，用量为150-450％(鱿鱼精巢的重量百分比)，混合均匀打浆。
3.根据权利要求1所述的鱿精蛋白的提取工艺，其特征是匀浆的最佳条件是加入浓度为0.1M的柠檬酸溶液中，最佳用量是300-400％。
4.根据权利要求2所述的鱿精蛋白的提取工艺，其特征是匀浆的最佳条件是加入浓度为0.1M的醋酸溶液中，最佳用量是300-400％。
5.根据权利要求1所述的鱿精蛋白的提取工艺，其特征是酸解的最佳条件是加入浓度为1.5M的硫酸溶液，最佳用量是100％，温度控制在40℃，时间为1小时。
全文摘要
一种鱿精蛋白的提取工艺,其提取方法为以鱿鱼精巢原料,经柠檬酸溶液均匀打浆、用硫酸溶液酸解、氯化钠溶液抽提,然后过滤、用冷乙醇沉淀、冷冻离心除去沉淀物,离合后的上清液再用氯化钠溶液抽提、冷冻离心,并经透析、浓缩、真空干燥而制成成品。本发明有效地解决了匀浆液匀浆时出现胶状物问题,制成的鱿精蛋白纯度高、收率高。
文档编号C07K1/00GK1257078SQ9812208
公开日2000年6月21日 申请日期1998年12月11日 优先权日1998年12月11日
发明者钟立人, 毋瑾超, 张燕平 申请人:杭州商学院, 钟立人, 毋瑾超