专利名称：一种利用肠衣提取肝素钠的工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种肝素钠工艺，特别涉及一种利用肠衣提取肝素钠的工艺。
背景技术：
肝素钠是粘多糖硫酸酯类抗凝血药。肝素钠是由猪或牛的肠粘膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐，属粘多糖类物质。肝素钠粗品是制造肝素钠药物的重要原料，其制备过程是动物的小肠粘膜经酶解、吸附、脱附、沉淀后，再进行最后的烘干即可得到粗品肝素钠。现有技术中的动物肠衣肝素钠的提取工艺有以下两种盐解法提取、酶解法提取和酶解加盐解法提取。该工艺的缺点在于分解不完全，残留量比较大。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种利用肠衣提取肝素钠的工艺，能够利用双作用机械振动作用，加速肝素与蛋白的结合部位切断，有利于肝素在溶剂中的溶解和下一步的分离纯化。为解决上述技术问题，本发明的技术方案为一种利用肠衣提取肝素钠的工艺，步骤主要包括原料处理、酶解提取、吸附、脱附、沉淀和烘干，其创新点在于所述酶解提取工序中，将小肠粘膜和料液混合后的混合液首先置于振动酶解机中加入蛋白酶进行振动酶解，振动酶解机振动频率为250HZ，振动时间为20-35min ;然后再将该混合液置于超声机中继续酶解，超声机的超声波发射功率为240— 270W，超声波发射总持续时间7-9min，单次超声波发射持续时间10-12S。本发明的优点在于在酶解时，利用振动酶解机进行振动，通过其机械振动来初步加速切断肝素与蛋白的连接，然后再由超声机的超声波对混合液作用，使得混合液中每个气泡的破裂时产生能量极大的冲击波，相当于瞬间产生几百度的高温和高达上千个大气压，利用该空化作用来进一步加速切断肝素与蛋白的连接，有利于肝素在溶剂中的溶解和下一步的分离纯化。采用该提取工艺提取肝素钠，比单独的酶法提取量提高18-23 %，比单独的超声波法提取量提高13-16%，提取时间节省了 30-72min。提取率提高，生产周期减少。
具体实施例方式步骤主要包括原料处理、酶解提取、吸附、脱附、沉淀和烘干。上述步骤具体为
一、原料处理将新鲜的猪鲜肠(或冷冻猪鲜肠自然解冻之后)用清水仔细清洗去除内外污物和外部皮肤脂肪后，绞碎成糜状，并在充分搅拌下，加入等量的水混合均匀。
二、酶解提取先将上述原料在充分搅拌下，将小肠粘膜溶液和料液进行配比，将单根小肠与料液按体积比作单根小肠加水2. 4L的比例进行混合，选其混合后的ph值为8—9。再加入事先已经绞碎的新鲜胰浆作为酶解剂(所加入的猪胰浆按照原料液实际重量的1%-1. 5%为宜)进行酶解。
特别之处酶解 提取工序中，采用双作用振动酶解。将小肠粘膜溶液和料液混合后的混合液首先置于振动酶解机中加入蛋白酶进行振动酶解，振动酶解机为市面上常见的由振动电机驱动的振动机械。振动酶解机振动频率为250HZ，振动时间为20-35min ;然后再将该混合液置于超声机中继续酶解，超声机的超声波发射功率为240—270W，超声波发射总持续时间7-9min，单次超声波发射持续时间10-12S。实施例I :
振动酶解机振动时间20min，超声机的发射功率240W，总持续时间7min，单次超生波发射持续时间10S。单根小肠肝素钠产量为0. 61mg0实施例2:
振动酶解机振动时间29min，超声机的发射功率255W，总持续时间8min，单次超生波发射持续时间HS。单根小肠肝素钠产量为0. 63mg0实施例3:
振动酶解机振动时间35min，超声机的发射功率270W，总持续时间9min，单次超生波发射持续时间12S。单根小肠肝素钠产量为0. 67mg0三、离子交换吸附；先将上述酶解提取液冷却至室温，仔细捞除浮于液面的油脂薄片层，控制升温至45度，停止加热，在搅拌下加入事先预处理好的D-254型树脂已有效的吸附料液中的肝素钠成分，新树脂的用量一般为料液的2. 55-3%，用过后的再生熟知应酌情加大其用量，搅拌、吸附处理3个小时后静置过滤，滤液可作为生产治疗冠心病的新药冠心舒的原料。将上述已经吸附有肝素成分的D-254树脂先用清水充分漂洗，干净后，再用大约一倍的I. 2mol/L氯化钠溶液对洗涤好的D-254树脂进行肝素钠操作第一次洗脱液为树脂体积的I. 5倍左右，大约洗脱4小时，第二次洗脱为树脂体积的0. 5倍左右，洗脱时间为I小时。滤干树脂，将洗脱液予以合并。将上述所得的洗脱液调节到PH=IO-Il,搅拌30分钟后，静置6小时，然后仔细的析出上层清液，下部沉淀物尽量的抽滤至干。合并清液和滤液，精细调节PH=6. 0-6. 5，加入I. 5倍量的95%乙醇沉淀过夜，翌日，仔细地烘吸出上层清液，收集下部沉淀物，抽滤至干(母液可套用于调PH值前的洗脱液中)。经真空烘干，即得肝素钠粗品。
权利要求
1.一种利用肠衣提取肝素钠的工艺，步骤主要包括原料处理、酶解提取、吸附、脱附、沉淀和烘干，其特征在于所述酶解提取工序中，将小肠粘膜和料液混合后的混合液首先置于振动酶解机中加入蛋白酶进行振动酶解，振动酶解机振动频率为250HZ，振动时间为20-35min ;然后再将该混合液置于超声机中继续酶解，超声机的超声波发射功率为240—270W，超声波发射总持续时间7-9min，单次超声波发射持续时间10-12S。
全文摘要
本发明涉及一种利用肠衣提取肝素钠的工艺，步骤主要包括原料处理、酶解提取、吸附、脱附、沉淀和烘干，其创新点在于所述酶解提取工序中，将小肠粘膜和料液混合后的混合液首先置于振动酶解机中加入蛋白酶进行振动酶解，振动酶解机振动频率为250HZ，振动时间为20-35min；然后再将该混合液置于超声机中继续酶解，超声机的超声波发射功率为240—270W，超声波发射总持续时间7-9min，单次超声波发射持续时间10-12S。采用该提取工艺提取肝素钠，比单独的酶法提取量提高18-23%，比单独的超声波法提取量提高13-16%，提取时间节省了30-72min。提取率提高，生产周期减少。
文档编号C08B37/10GK102633907SQ201210131368
公开日2012年8月15日 申请日期2012年5月2日 优先权日2012年5月2日
发明者费正明, 费正海, 费苹, 陈明全, 陈跃建, 陈银芳 申请人:如皋市永兴肠衣有限公司