褐藻多糖硫酸酯提取方法
【专利摘要】本发明涉及一种植物原料药的提取方法，即褐藻多糖硫酸酯提取方法。经三次板框滤布过滤、硅藻土真空转鼓吸附过滤、滤液采用特型500电渗析脱盐等步骤提取，提高了褐藻糖的含量，≥27mg/粒。提高了水解硫酸基含量，≥25mg/粒，提取效果显著。
【专利说明】褐藻多糖硫酸酯提取方法
[0001]【技术领域】
本发明涉及一种植物原料药的提取方法，即褐藻多糖硫酸酯提取方法。制剂商品名称:
海昆肾喜胶囊。
【背景技术】
[0002]在现有技术中，慢性肾功能衰竭，是慢性肾脏疾病或累计肾脏系统性疾病所引起的慢性肾功能减退，以及由此产生的各种临床症状和代谢紊乱所组成的综合症。该病属于疑难病症，现国际、国内西医界尚无特效方法，中医药在延缓慢性肾衰竭病程进展方面有一定的疗效，现有中药治疗慢性肾衰的药物中少有二类中药。褐藻多糖硫酸酯原料药(制剂商品名称；海昆肾喜胶囊)作为海洋植物海带中提取的二类药物(国家药品标准YBZ00902003-2008)，具有原材料成本低，来源容易，功效显著的特点。褐藻多糖硫酸酯是从海洋藻类海带中提取的有效成分，是自然界中少有的硫酸酯离子型多糖。经过中国科学院海洋研究所和吉林长龙药业公司的协力合作，褐藻多糖硫酸酯原料药和海昆肾喜胶囊获得国家新药证书，实现产业化，为广大慢性肾病患者开辟了一条新的治疗途径，取得了一定得经济和社会效益。功能与主治:化浊排毒，用于慢性肾功能衰竭(代偿期、失代偿期和尿毒症早期)湿浊症。症见恶心，呕吐，纳差，腹胀，身重困倦，尿少，浮肿，苔厚腻。湿浊证是慢性肾衰的最常见的中医证型，针对慢性肾衰湿浊证的药物在临床应用范围广，适用病员众多，并且海昆肾喜胶囊服用量小，无增加胃肠道负担和水负荷过多之忧，同时对慢性肾衰湿浊证主要症状及症候积分也有明显的改善作用，无常见的治疗肾衰竭药物胃肠道反应大及腹泻等副作用，故该药有其优势及独特性。褐藻多糖硫酸酯原料药制法:取海带445Kg，加16倍量的水，室温浸泡2.5小时，浸泡液加氢氧化钠，调节pH值至12，生成碱凝聚物，压榨脱水，得到干固物，加水44800ml、盐酸23.8kg，搅拌，溶解；静置12小时，加2450g硅藻土滤过，滤液加氢氧化钠调节PH值至4 一 5，加乙醇使含醇量达60%，静罩12小时，滤过，沉淀物烘干，烘干的沉淀物加 十倍量的水溶解，加盐酸调节PH值至5 - 6，加活性炭700g，滤过，用732型阳离子树脂脱盐，加浓氨试液调节pH值至中性，减压浓缩至21000ml，加10%氯化钠溶液70ml，加乙醇使含醇量达72%，搅拌生成絮状沉淀，静置12小时，滤过，沉淀用95%乙醇洗涤一次，真空干燥，粉碎，密闭保存。本品以干燥品计，含褐藻糖不得少于25 %，含水解硫酸基不得少于22%。其缺点是:采用常规硅藻土过滤，对海洋生物特有的褐藻胶不易分离去除。采用阴阳离子交换树脂法脱盐，对于原料及生产工艺过程产生的大量盐成份脱盐效果差。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是针对上述不足而提供一种改进的方法，保证有效成分析出，提取效果更好的褐藻多糖硫酸酯提取方法。
[0004]本发明的技术解决方案是:褐藻多糖硫酸酯的提取方法，其步骤如下:
(I)干海带称量后切段，加水浸泡2-6小时，控制室温8-32°C。[0005](2)取浸泡液加碱调pH值12，生成碱凝聚物。
[0006](3)取凝聚物一次板框滤布过滤(压紧压力0.4~0.6Mpa，过滤周期一般为2.0~
8.0h,脱水时间一般为:1.0~5.5h,卸泥时间一般为:1.0~2.5h ;滤布50目)，取滤饼。采用板框滤布过滤，过滤后的滤饼有更高的含固率和优良的分离效果。
[0007](4)滤饼加酸溶解，调节pH值3.5。
[0008](5) 二次板框滤布过滤(压紧压力0.4~0.6MPa)，取滤液，弃去滤饼残渣。
[0009]溶液调pH值4-5。
[0010](6)三次板框滤布过滤(压紧压力0.4~0.6Mpa)，取滤液。采用累计三次板框滤布过滤，较用硅藻土过滤成本少，拥用更快的滤速和较好的澄明效果，且化学性质稳定。
[0011](7)滤液加乙醇调至乙醇浓度70%，形成沉淀，取沉淀物，上清液回收乙醇。
[0012](8)沉淀物用水和盐酸溶解，调pH值2-3，搅拌溶解8小时，静止沉淀12小时。
[0013](9)硅藻土真空转鼓吸附过滤(转鼓转速为每转0.1至10分钟。操作真空的绝对压力为(0.25~0.8)X10帕)。采用本步骤，使得海洋生物特有的褐藻胶容易分离去除，具有分离效果好，处理量大，可连续工业大生产的优势。
[0014](10)滤液采用特型500电渗析脱盐(淡、浓水压力达到0.05-0.1Mpa )，脱盐液加浓氨水中和至中性；特型500是指:额定产量为5立方米/小时。采用特型500电渗析脱盐技术，对于原料及生产工艺过程产生的大量盐成份，具有脱盐彻底，处理量大，环保，实现连续工业化大生产。
[0015](11)药液浓缩，加 活性炭脱色。
[0016](12)浓缩液加10%氯化钾，二次加乙醇使含醇量达70%，静止得沉淀物，离心，滤饼用95%乙醇洗涤。
[0017](13)滤饼在60°C下真空减压干燥4小时。
[0018](14)粉碎干燥物，制得乳白色或浅黄色粉末的褐藻多糖硫酸酯。
[0019]糖尿病肾病是与代谢异常(如多元醇代谢异常、非酶糖基化)、细胞因子及血管活性因子等有关。早起多无症状血压可正常或偏高。用放射免疫法测定尿微量白蛋白排出量>200微克/分钟，此期叫做隐匿性肾病，或早期肾病。如能积极控制高血压及高血糖，病变可望好转。
[0020]因此研究毒副作用小，药效确切，剂量小的糖尿病肾病新药是当务之急，也是人类之急需。在临床试验中，通过对慢性肾衰同时并发糖尿病肾病患者服用海昆肾喜胶囊的临床试验结果分析，我们发现病人的蛋白尿、浮肿、高血压等同时明显改善。针对这一现象，我们针对褐藻多糖硫酸酯具有良好的调理血糖、血压作用，褐藻多糖硫酸酯通过多途径多靶点调节脂质代谢紊乱，可通过抑制外源性脂质吸收、促进内源性脂质代谢激活脂质代谢酶和增加胆汁酸排泄三个方面调节脂质代谢，并通过抗脂质过氧化及减少脂质在组织中的沉积来抑制动脉粥样硬化的发展。作为多糖类天然海洋毒副作用小，药效确切，容易被病人接受，因此增加其糖尿病肾病作用的适应症，能够满足部分糖尿病肾病人的临床需要，也有利于扩大褐藻多糖硫酸酯的销售规模。
[0021]本发明的优点是:1、海昆肾喜胶囊原料药褐藻多糖硫酸酯是一种具有独特结构和功能的硫酸酯离子型多糖。本发明对提取工艺进行了改进，工艺路线采用新的酸解、吸附、脱盐、纯化路线，大大缩短生 产周期，降低成本，减少污染，有利于实现规模化生产；应用独特的真空转鼓硅藻土吸附技术，有效地解决了海洋植物中褐藻胶不宜分离的难题，采用的特型电渗析脱盐技术，摒弃了传统离子交换树脂法，具有脱盐效果好、环保、工时短、处理量大，可连动生产等优点。并进行海昆肾喜胶囊的药效学试验研究及临床试验。2、经检测，本方法带来的显著效果是提高了褐藻糖的含量，> 27mg/粒。提高了水解硫酸基含量，^ 25mg/ 粒。
[0022]下面将结合实施例对本发明的实施方式作进一步详细描述。
【具体实施方式】
[0023]实施例1
将8000kg海带于溶解池中加140000kg水，室温浸泡4时，浸泡液加氢氧化钠，调pH值至12，得到碱凝聚物，取凝聚物板框滤布过滤，滤饼加酸溶解，调节pH值3.5，溶液板框滤布过滤，取滤液，弃去滤饼残渣，溶液调PH值4-5，板框滤布过滤，取滤液加乙醇调至乙醇浓度70%，形成沉淀，取沉淀物干燥，得干固物，将干固物粉碎得海带提取物。在搪瓷反应釜中加饮用水900kg，然后投入本批海带提取物，搅拌30分钟，缓缓加入盐酸476kg，加酸完毕继续搅拌8小时，将溶解液转入沉降罐静置不少于12小时，取上清液用49kg硅藻土真空转鼓滤过。滤液采用特型500电渗析脱盐，脱盐液加浓氨水中和至中性。料液用单效蒸发器减压浓缩至420L，浓缩液转移至醇析罐，加1.4L10%的氯化钾溶液，加乙醇使醇量达70%，搅拌30分钟，静置不少于12小时，沉淀物用三足式离心机离心，滤饼用95%乙醇洗涤一次，滤饼用真空减压干燥箱于60°C真空干燥，干燥膏用ZKF-3X型自控粉碎机组粉碎，筛网规格100目，得褐藻多糖硫酸酯，称量为17kg。经含量测定(具体方法符合褐藻多糖硫酸酯原料药国家药品标准YBZ00902003-2008规定)，褐藻糖的含量达到了 25 — 27%，水解硫酸基含量达到22 - 25%以上(见表1 )，`既符合标准要求，又明显提高了褐藻糖、水解硫酸基的含量。
【权利要求】
1.一种褐藻多糖硫酸酯的提取方法，其特征在于步骤如下: (1)干海带称量后切段，加水浸泡2-6小时，控制室温8-32°C； (2)取浸泡液加碱调pH值12，生成碱凝聚物； (3)取凝聚物一次板框滤布过滤，取滤饼； (4)滤饼加酸溶解，调节pH值3.5; (5)二次板框滤布过滤，取滤液，弃去滤饼残渣； 溶液调PH值4-5 ； (6)三次板框滤布过滤,取滤液； (7)滤液加乙醇调至乙醇浓度70%，形成沉淀，取沉淀物，上清液回收乙醇； (8)沉淀物用水和盐酸溶解，调pH值2-3，搅拌溶解8小时，静止沉淀12小时； (9)硅藻土真空转鼓吸附过滤； (10)滤液采用特型500电渗析脱盐，脱盐液加浓氨水中和至中性； (11)药液浓缩，加活性炭脱色； (12)浓缩液加10%氯化钾，二次加乙醇使含醇量达70%，静止得沉淀物，离心，滤饼用95%乙醇洗涤；· (13)滤饼在60°C下真空减压干燥4小时； (14)粉碎干燥物，制得乳白色或浅黄色粉末的褐藻多糖硫酸酯。
【文档编号】C08B37/00GK103848924SQ201410107600
【公开日】2014年6月11日 申请日期:2014年3月22日 优先权日:2014年3月22日
【发明者】徐向夫, 金铁进, 张树军 申请人:吉林省辉南长龙生化药业股份有限公司