1.测定怀疑含有维生素D分析物的样品中的维生素D分析物的量的方法,所述方法包括:
(a) 在测定介质中组合提供:
(i) 所述样品,
(ii) 对所述维生素D分析物的差向异构体特异性的维生素D差向异构体结合配偶体,其中所述维生素D差向异构体结合配偶体不在任何可检测的程度上结合所述维生素D分析物,和
(iii) 对所述维生素D分析物特异性的维生素D结合配偶体;
(b) 在所述维生素D差向异构体结合配偶体与所述维生素D分析物的差向异构体结合以及所述维生素D结合配偶体与所述维生素D分析物结合的条件下孵育所述测定介质以形成维生素D结合配偶体结合的复合物;且
(c) 测定所述维生素D结合配偶体结合的复合物的量,并将所述维生素D结合配偶体结合的复合物的量与所述样品中的维生素D分析物的量关联。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述维生素D结合配偶体包含信号产生系统的成员或固体支持物。
3.根据权利要求2所述的方法,其中所述维生素D结合配偶体包含信号产生系统的成员,其为标记。
4.根据权利要求1所述的方法,其中所述组合进一步包含维生素D类似物,其中所述维生素D类似物包含信号产生系统的成员。
5.根据权利要求4所述的方法,其中所述信号产生系统的成员是标记。
6.根据权利要求4所述的方法,其中所述维生素D类似物是下式化合物:
(R1)p-(L)q-Z,其中
或H,其中至少一个R1不是H,
Y是O、S、CR或NR4,
X是-O-(CH2)n-C(O)-、-(CH2)w-C(O)-、-(CH2)w-C(O)-(CH2)x-C(O)-、-(CH2)w-C(O)-NH(CH2)y-C(O)-或-NR3-C(O)-,
R独立地是H或烷基,
R2独立地是H或烷基,
R3、R4、R5和R6独立地是H或烷基,或者R4和R5可以一起形成键,或者R5和R6可以一起形成键,或者R和R5可以一起形成键,
R11是H、烷基或酰基,
n是0至10的整数,
w是1至10的整数,
x是1至10的整数,
y是1至10的整数,
p是1至10的整数,
L是连接基团,
q是0或1,且
Z是标记。
7.根据权利要求1所述的方法,其中所述维生素D差向异构体结合配偶体针对下式化合物产生,或针对所述化合物中的两种或更多种的混合物产生:
(R1)p-(L)q-Z,其中
或H,其中至少一个R1不是H,
Y是O、S、CR或NR4,
X是-O-(CH2)n-C(O)-、-(CH2)w-C(O)-、-(CH2)w-C(O)-(CH2)x-C(O)-、-(CH2)w-C(O)-NH(CH2)y-C(O)-或-NR3-C(O)-,
R独立地是H或烷基,
R2独立地是H或烷基,
R3、R4、R5和R6独立地是H或烷基,或者R4和R5可以一起形成键,或者R5和R6可以一起形成键,或者R和R5可以一起形成键,
R11是H、烷基或酰基,
n是0至10的整数,
w是1至10的整数,
x是1至10的整数,
y是1至10的整数,
p是1至10的整数,
L是连接基团,
q是0或1,且
Z是免疫原性载体。
8.根据权利要求7所述的方法,
其中在所述化合物中,
或H,其中至少一个R1不是H;或
其中在所述化合物中,
或H,其中至少一个R1不是H。
9.根据权利要求7所述的方法,其中在所述化合物中,
(R1)p-(L)q-是NHR1-(CH2)r-NR1-((CH2)r-NR1)s-(CH2)r-NR7-,其中
R1独立地是
或H,其中至少一个R1不是H,
r独立地是1至10的整数,
s是1至10的整数,且
R7是H或烷基。
10.根据权利要求9所述的方法,其中在所述化合物中,r是2,s是1,R7是H,且一个R1是
或
其中在所述化合物中,r是2,s是1,R7是H,且两个R1是
或
其中在所述化合物中,r是2,s是1,R7是H,且三个R1是
。
11.根据权利要求1所述的方法,其中所述维生素D差向异构体结合配偶体针对下式化合物产生,或针对所述化合物中的两种或更多种的混合物产生:
NHR1’-(CH2)r’-NR1’’-((CH2)r’-NR1’’’)s’-(CH2)r’-NR7’-Z’,其中
R1’、R1’’或R1’’’各自独立地选自
和H,
其中R1’、R1’’或R1’’’中的至少一个不是H,
n’是1至10的整数,
r’独立地是1至10的整数,
s’是1至10的整数,
R7’是H或烷基,
R11’是H、烷基或酰基,且
Z’是聚(氨基酸)免疫原性载体或非聚(氨基酸)免疫原性载体。
12.测定怀疑含有维生素D分析物的样品中的维生素D分析物的量的方法,所述方法包括:
(a) 在测定介质中组合提供:
(i) 所述样品,
(ii) 捕获抗体,其为对所述维生素D分析物特异性的维生素D抗体,和
(iii) 对所述维生素D分析物的差向异构体特异性的维生素D差向异构体抗体,其中所述维生素D差向异构体抗体不在任何可检测的程度上结合所述维生素D分析物;
(b) 在所述维生素D抗体结合所述维生素D分析物以形成维生素D抗体结合的复合物和所述维生素D差向异构体抗体结合所述维生素D分析物的差向异构体的条件下孵育所述测定介质;
(c) 将所述维生素D抗体结合的复合物与结合所述维生素D抗体结合的复合物中的所述维生素D分析物的检测抗体组合,其中所述检测抗体包含信号产生系统的成员,和
(d) 测量由所述信号产生系统产生的信号,并将所述信号的量与所述样品中的所述维生素D分析物的量关联。
13.根据权利要求12所述的方法,其中进一步包括从所述介质分离所述抗体结合的复合物。
14.根据权利要求12所述的方法,其中所述捕获抗体包含固体支持物。
15.根据权利要求12所述的方法,其中所述捕获抗体包含颗粒,其中所述颗粒是磁性颗粒或所述颗粒包含光敏剂或化学发光化合物之一。
16.根据权利要求12所述的方法,其中所述维生素D差向异构体抗体针对下式化合物产生,或针对所述化合物中的两种或更多种的混合物产生:
(R1)p-(L)q-Z,其中
或H,其中至少一个R1不是H,
Y是O、S、CR或NR4,
X是-O-(CH2)n-C(O)-、-(CH2)w-C(O)-、-(CH2)w-C(O)-(CH2)x-C(O)-、-(CH2)w-C(O)-NH(CH2)y-C(O)-或-NR3-C(O)-,
R独立地是H或烷基,
R2独立地是H或烷基,
R3、R4、R5和R6独立地是H或烷基,或者R4和R5可以一起形成键,或者R5和R6可以一起形成键,或者R和R5可以一起形成键,
R11是H、烷基或酰基,
n是0至10的整数,
w是1至10的整数,
x是1至10的整数,
y是1至10的整数,
p是1至10的整数,
L是连接基团,
q是0或1,且
Z是免疫原性载体。
17.根据权利要求7所述的方法,其中在所述化合物中,
(R1)p-(L)q-是NHR1-(CH2)r-NR1-((CH2)r-NR1)s-(CH2)r-NR7-
其中R1独立地是
或H,其中至少一个R1不是H,
r独立地是1至10的整数,
s是1至10的整数,且
R7是H或烷基。
18.根据权利要求17所述的方法,其中在所述化合物中,r是2,s是1,R7是H,且一个R1是
;或
其中在所述化合物中,r是2,s是1,R7是H,且两个R1是
;或
其中在所述化合物中,r是2,s是1,R7是H,且三个R1是
。
19.根据权利要求12所述的方法,其中所述维生素D差向异构体抗体针对下式化合物产生,或针对所述化合物中的两种或更多种的混合物产生:
NHR1’-(CH2)r’-NR1’’-((CH2)r’-NR1’’’)s’-(CH2)r’-NR7’-Z’,其中
R1’、R1’’或R1’’’各自独立地选自
和H,且
其中R1’、R1’’或R1’’’中的至少一个不是H,
n’是1至10的整数,
r’独立地是1至10的整数,
s’是1至10的整数,
R7’是H或烷基,
R11’是H、烷基或酰基,且
Z’是聚(氨基酸)免疫原性载体或非聚(氨基酸)免疫原性载体。
20.根据权利要求7所述的方法,
其中在所述化合物中,
或H,其中至少一个R1不是H;或
其中在所述化合物中,
或H,其中至少一个R1不是H。