技术总结
本发明提供了一种寡雄腐霉原生质体的制备和再生方法，包括如下步骤：a.菌丝孢子混合体制备；b.原生质体制备；c.原生质体纯化；d.原生质体再生。本发明采用含有lysing enzyme、cellulase、lyticase的复合酶系对寡雄腐霉的菌丝体进行酶解而得到寡雄腐霉原生质体，此原生质体通过以甘露醇为渗透压稳定剂的再生培养基液体振荡培养的途径再生。本发明所述方法制备的寡雄腐霉原生质体数量较多，产量较高，活性好；通过液体培养再生途径可获得较高再生率，可达1.25%。此方法操作简便，稳定性好，获得的寡雄腐霉原生质体完全能够满足后期基因遗传转化、细胞融合培养等研究应用。本发明还提供一种制备寡雄腐霉原生质体的复合酶解液，是寡雄腐霉原生质体制备过程的关键因素，该酶解液适合进一步的开发应用。
技术研发人员：周剑平;王沛雅;祝英;王治业;彭轶楠;巩晓芳;杨晖
受保护的技术使用者：周剑平;王治业;王沛雅
文档号码：201610542589
技术研发日：2016.07.12
技术公布日：2016.11.16