1.一种定性检测CYP2D6基因分型的焦磷酸测序引物对,其特征在于,所述CYP2D6基因检测的多态性位点为CYP2D6C188T和/或CYP2D6G4268C,所述引物对包括:
(1)对于CYP2D6C188T等位基因,
扩增引物为:
CYP2D6C188T正向扩增引物:
5’-GCCGTGATAGTGGCCATCTT-3’;
CYP2D6C188T反向扩增引物:
5’-TCGAAGCAGTATGGTGTGTTCT-3’;
CYP2D6C188T测序引物:5’-GGCAGGGGGCCTGGT-3’;
其中,所述CYP2D6C188T正向扩增引物的5’端进行生物素标记;
(2)对于CYP2D6G4268C等位基因,
扩增引物为:
CYP2D6G4268C正向扩增引物:
5’-CATGGTGTCTTTGCTTTCCT-3’;
CYP2D6G4268C反向扩增引物:
5’-GGCACAGCACAAAGCTCAT-3’;
CYP2D6G4268C测序引物:5’-CTCATAGGGGGATGG-3’;
其中,所述CYP2D6G4268C正向扩增引物的5’端进行生物素标记。
2.一种定性检测CYP2D6基因分型的焦磷酸测序试剂盒,其特征在于,所述CYP2D6基因检测的多态性位点为CYP2D6C188T和/或CYP2D6G4268C,所述试剂盒包括:
(1)对于CYP2D6C188T等位基因,
CYP2D6C188T正向扩增引物:
5’-GCCGTGATAGTGGCCATCTT-3’;
PCR反应液1,所述PCR反应液1含有CYP2D6C188T反向扩增引物:5’-TCGAAGCAGTATGGTGTGTTCT-3’;
CYP2D6C188T测序引物:5’-GGCAGGGGGCCTGGT-3’;
其中,所述CYP2D6C188T正向扩增引物的5’端进行生物素标记;
(2)对于CYP2D6G4268C等位基因,
CYP2D6G4268C正向扩增引物:
5’-CATGGTGTCTTTGCTTTCCT-3’;
PCR反应液2,所述PCR反应液2含有CYP2D6G4268C反向扩增引物:5’-GGCACAGCACAAAGCTCAT-3’;
CYP2D6G4268C测序引物:5’-CTCATAGGGGGATGG-3’;
其中,所述CYP2D6G4268C正向扩增引物的5’端进行生物素标记。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括:
CYP2D6C188T阳性对照品1,其为插有SEQ ID NO.8所示核苷酸序列的CYP2D6C188T野生纯合子质粒;
CYP2D6C188T阳性对照品2,其为所述CYP2D6C188T野生纯合子质粒与插有SEQ ID NO.9所示核苷酸序列的CYP2D6C188T突变纯合子质粒组成的质粒混合物;
CYP2D6C188T阳性对照品3,其为插有SEQ ID NO.9所示核苷酸序列的CYP2D6C188T突变纯合子质粒;
CYP2D6G4268C阳性对照品1,其为插有SEQ ID NO.10所示核苷酸序列的CYP2D6G4268C野生纯合子质粒;
CYP2D6G4268C阳性对照品2,其为所述CYP2D6G4268C野生纯合子质粒与插有SEQ ID NO.11所示核苷酸序列的CYP2D6G4268C突变纯合子质粒组成的质粒混合物;
CYP2D6G4268C阳性对照品3,其为插有SEQ ID NO.11所示核苷酸序列的CYP2D6G4268C突变纯合子质粒;
其中,质粒载体为pMD18-T质粒。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述CYP2D6C188T阳性对照品2中所述CYP2D6C188T突变纯合子质粒和所述CYP2D6C188T野生纯合子质粒的数量比为1:1;所述CYP2D6G4268C阳性对照品2中所述CYP2D6G4268C突变纯合子质粒和所述CYP2D6G4268C野生纯合子质粒的数量比为1:1。
5.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括:质控品和空白对照品,所述质控品的序列为:TAYGGTTTGCA。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述空白对照品为超纯水。
7.权利要求1所述的引物对在制备用于检测CYP2D6基因分型的试剂中的应用。