1.一种多重PCR检测六种致泻大肠埃希氏菌和志贺氏菌用引物组,其中,所述引物组包括SEQ ID NO.1-29所示的引物;所述六种致泻大肠埃希氏菌包括肠道侵袭性大肠埃希氏菌、产肠毒素大肠埃希氏菌、肠道致病性大肠埃希氏菌、肠道出血性大肠埃希氏菌、肠道集聚性大肠埃希氏菌和肠道弥散粘附性大肠埃希氏菌。
2.根据权利要求1所述的引物组,其中,所述引物组还包括SEQ ID NO.31-32所示的引物。
3.六种致泻大肠埃希氏菌和志贺氏菌的检测方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
(1)提取待测样本的总DNA;
(2)以所述总DNA为模板,并使用权利要求1或2所述的引物组,进行多重PCR反应,获得多重PCR扩增后的物料;
(3)对所述多重PCR扩增后的物料进行核酸电泳检测,得到核酸电泳检测的结果。
4.根据权利要求3所述的检测方法,其中,SEQ ID NO.1-28所示的引物的最终使用浓度各自为0.1-0.8μM,SEQ ID NO.29所示的引物的最终使用浓度为0.4-0.8μM。
5.根据权利要求3或4所述的检测方法,其中,多重PCR反应的条件包括如下a-h的步骤:
a:94-96℃,4-6min;
b:94-96℃,15-60s,
c:50-60℃,15-60s,
d:71-73℃,60-120s,进行10-15个b-d的循环;
e:94-96℃,15-60s,
f:55-65℃,15-60s,
g:71-73℃,30-120s,进行30-35个e-g的循环;
h:71-73℃,5-10min。
6.根据权利要求3或4所述的检测方法,其中,所述核酸电泳检测包括核酸凝胶电泳和/或核酸毛细管电泳。
7.一种多重PCR检测六种致泻大肠埃希氏菌和志贺氏菌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1或2所述的引物组和DNA聚合酶;所述六种致泻大肠埃希氏菌包括肠道侵袭性大肠埃希氏菌、产肠毒素大肠埃希氏菌、肠道致病性大肠埃希氏菌、肠道出血性大肠埃希氏菌、肠道集聚性大肠埃希氏菌和肠道弥散粘附性大肠埃希氏菌。
8.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括PCR反应缓冲液和dNTP。
9.权利要求1或2所述的引物组在制备检测六种致泻大肠埃希氏菌和志贺氏菌的试剂盒中的用途;其中,所述六种致泻大肠埃希氏菌包括肠道侵袭性大肠埃希氏菌、产肠毒素大肠埃希氏菌、肠道致病性大肠埃希氏菌、肠道出血性大肠埃希氏菌、肠道集聚性大肠埃希氏菌和肠道弥散粘附性大肠埃希氏菌。