体外感染PRRSV建立猪肺泡巨噬细胞氧化应激模型的方法与流程

技术特征：

1.一种体外处理PRRSV建立猪肺泡巨噬细胞氧化应激模型的方法，其特征在于：采用PRRSV体外处理猪肺泡巨噬细胞，病毒浓度为TCID₅₀是10^-5.5/0.1mL的PRRSV病毒原液的10⁰-10^-3，处理时间为4-24h。

2.根据权利要求1所述的体外处理PRRSV建立猪肺泡巨噬细胞氧化应激模型的方法，其特征在于：所述病毒浓度为TCID₅₀是10^-5.5/0.1mL的PRRSV病毒原液的10^-1，处理时间为8h。

3.根据权利要求1所述的体外处理PRRSV建立猪肺泡巨噬细胞氧化应激模型的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)设细胞对照组和病毒液组，细胞对照组加入无血清RPMI 1640培养液，病毒组加入等量用不含血清的RPMI 1640培养液稀释的病毒液，37℃，5％CO₂培养箱中吸附2小时；弃去病毒液，PBS缓冲液清洗3次后加入含5％FBS的RPMI 1640培养液后继续培养；

(2)分别收集细胞上清液或细胞，用于测定表征氧化应激模型的相关指标。

4.根据权利要求3所述的体外处理PRRSV建立猪肺泡巨噬细胞氧化应激模型的方法，其特征在于：所述猪肺泡巨噬细胞为3D4/2。

5.根据权利要求3所述的体外处理PRRSV建立猪肺泡巨噬细胞氧化应激模型的方法，其特征在于：所述病毒液组中病毒浓度为TCID₅₀是10^-5.5/0.1mL的PRRSV病毒原液的10⁰、10^-1、10^-2、10^-3。

6.根据权利要求3所述的体外处理PRRSV建立猪肺泡巨噬细胞氧化应激模型的方法，其特征在于：所述收集细胞上清液或细胞在培养后第4h、8h、12h、24h。

7.根据权利要求3所述的体外处理PRRSV建立猪肺泡巨噬细胞氧化应激模型的方法，其特征在于：所述相关指标包括NO、ROS、GSH、GSSG、XOD、MPO和iNOS。