本发明属医药技术领域，涉及一种超临界流体萃取文冠果种仁油及其制剂的制备方法及用途。
背景技术：
文冠果(Xanthoceras sorbifoBa Bunge)为无患子科(Sapindaceae)文冠果属植物，是防风固沙、水土保持和园林绿化的优良树种，主要分布于我国北方辽宁、吉林、河北、山东、甘肃、宁夏、内蒙古、山西、河南等省区。《中国民族药志》中记载文冠果种仁为蒙古族习用药材，具有益气、安神、润五脏、养血生肌、久服轻健的功效，可用于治疗小儿遗尿症、尿频、尿失禁、小儿智力低下、老年痴呆、帕金森综合症等疾病【卫生部药品生物制品检定所，中国民族药志，人民卫生出版社，1984：130-132】。文冠果种仁曾列入1977年版《中国药典》【国家药典委员会，1977版中华人民共和国药典. 一部. 北京：化学工业出版社，1977年】。文冠果种仁含油率平均为59.86％，其中含有多种脂肪酸，特别含有大量的不饱和脂肪酸，总含量高达92%，脂肪酸组分分别为：棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸，其中尤以亚油酸含量为最高，可高达52.78%，是用于治疗高血压的主要成分；油酸含量达31.8l%【1. 柴春山，戚建莉，蔡国军，等. 文冠果籽油含量及其脂肪酸组分的变异分析. 经济林研究，2013, 31 (2): 100-103；2. 邓红，何玲，孙俊. 文冠果油的冷榨提取及理化性质研究. 西南农业大学学报:自然科学版，2006, 28 (6): 1027-1031】。文冠果种仁油易于人体吸收消化，具有降低胆固醇、软化血管、防治心血管系统疾病等药用价值，可以改善和协调人体内分泌，促进骨骼、大脑和神经系统发育，预防老年疾病。【王力华. 文冠果食用和药用价值. 中国医药指南，2006, (10): 41-43】。文冠果种仁油还可作为护肤化妆品原料、精密仪器润滑油，并且能够用于开发生物柴油。另外，文冠果种仁脱去油脂后，原料残渣可用于提取三萜类总皂苷，用于治疗小儿遗尿症、尿频、尿失禁、小儿智力低下、老年痴呆、帕金森综合症等疾病，在新药开发方面具有极高的实用价值和广阔的市场前景。文冠果种仁中的蛋白质含量丰富且氨基酸种类齐全，富含人体所需的谷氨酸、精氨酸、天冬氨酸和丝氨酸等17种氨基酸。文冠果蛋白质的氨基酸评分高于花生，蛋白质优于花生蛋白，具有较高的营养价值 【吴丽清，郑战伟，付凤奇. 文冠果营养成分分析及食用价值研究. 农产品加工，2010, (11): 93-95】；且文冠果蛋白加工特性良好，是一种优良的蛋白质资源，适用于做食品添加剂，或开发植物蛋白饮料。
目前，文冠果种仁油的常规提取提取方法主要包括：传统压榨法和有机溶剂浸出法。压榨法出油率低，高温压榨条件下油脂中的不饱和脂肪酸被严重破坏，且易导致药渣中蛋白质变性；传统有机溶剂浸出法，生产周期长，有机溶媒用量大，生产成本高，且溶剂不容易回收，对操作人员身体损害大，增加对环境的污染。超临界CO2流体萃取与传统工艺相比，不存在溶剂残留的问题，而且采用二氧化碳做溶剂，来源丰富，使用安全，萃取选择性好，油和粕的质量高；具有工艺简单、生产周期短、产品中无溶剂残留、操作条件温和、不破坏不饱和脂肪酸和蛋白质活性等优点，适合工业化生产。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种利用超临界CO2流体萃取制备文冠果种仁油的方法，该工艺过程简单，出油率高，油和粕的品质好，低碳环保。用这种方法制备出的文冠果种仁油，可通过添加药用辅料制成软胶囊、微囊、环糊精包和制剂、滴丸剂等剂型，用于开发防治高血压、高脂血症、心血管系统疾病的保健品，具有极高的实用价值和广阔的市场前景。
本发明方法通过以下步骤实现：文冠果种子去皮得文冠果种仁，40～50℃条件下烘干6～12 h，控制含水量低于8%，粉碎，过10～100目筛，装入萃取釜内。萃取温度30～60℃，萃取压力25～35 Mpa，CO2流量10～180 L/h，分离釜Ⅰ温度为35～45℃，分离釜Ⅰ压力为5～20 Mpa，分离釜Ⅱ温度为25～35℃，分离釜Ⅱ压力为2～10 Mpa，萃取时间为60～200 min，收集萃取馏分，得文冠果种仁油。萃取釜内剩余物料为含丰富蛋白质的文冠果种仁药渣，可供提取三萜总皂苷，萃取完毕后残渣中含油量低于4%。制得的文冠果种仁油出油率不低于50%，经GC-MS检测，不饱和脂肪酸含量可达75%以上。
文冠果种仁提取油脂后，残渣可用于提取三萜类总皂苷，用于治疗小儿遗尿症、尿频、尿失禁、小儿智力低下、老年痴呆、帕金森综合症等疾病，在新药开发方面具有极高的实用价值和广阔的市场前景。
提取文冠果种仁油后药渣含丰富蛋白质，文冠果蛋白质优于花生蛋白，具有较高的营养价值，加工特性良好，是一种优良的蛋白质资源，适用于做食品添加剂，或开发植物蛋白饮料。
本发明的优点是：
1．本发明利用超临界CO2流体萃取分离技术，制备高品质的文冠果种仁油，不饱和脂肪酸含量高达75%以上，并可通过添加各种药用辅料制成多种剂型，开发出防治高血压、高脂血症、心血管系统疾病的保健品；
2．本发明设计合理，工艺简单，节能环保。采用超临界CO2流体萃取分离技术，获得高品质的文冠果种仁油，无环境污染，操作简便快捷，成本较低，非常适合工业化生产；
所得到的高品质的文冠果种仁油，通过添加各种药用辅料可制成软胶囊、微囊、环糊精包和制剂、滴丸剂等剂型。
所制备的文冠果种仁油微囊，可采用流化床制备法、喷雾干燥制备法、乳化成型法。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
实施例1超临界CO2流体萃取分离技术制备高品质的文冠果种仁油
将文冠果种子去皮，得文冠果种仁，50℃条件下烘干8 h，控制含水量低于8%，粉碎，过60目筛，装入萃取釜内。萃取温度40℃，萃取压力28 Mpa，CO2流量80 L/h，分离釜Ⅰ温度为35℃，分离釜Ⅰ压力为25 Mpa，分离釜Ⅱ温度为25℃，分离釜Ⅱ压力为8 Mpa，萃取时间为150 min，收集萃取馏分，得文冠果种仁油。萃取釜内剩余物料为含丰富蛋白质的文冠果种仁药渣，可供提取三萜总皂苷，萃取完毕后残渣中含油量低于4%。制得的文冠果种仁油出油率不低于70%，经GC-MS检测，不饱和脂肪酸含量可达84%以上。
实施例2一种采用超临界CO2流体萃取分离技术制备高品质的文冠果种仁油的方法
取新鲜文冠果种子5 kg，剥壳分离得文冠果种仁，45℃条件下烘干10 h，控制含水量低于6%，粉碎，过30目筛，装入萃取釜内。萃取温度45℃，萃取压力35 Mpa，CO2流量160 L/h，分离釜Ⅰ温度为40℃，分离釜Ⅰ压力为10 Mpa，分离釜Ⅱ温度为30℃，分离釜Ⅱ压力为6 Mpa，萃取时间为120 min，收集萃取馏分，得文冠果种仁油。萃取釜内剩余物料为含丰富蛋白质的文冠果种仁药渣，可供提取三萜总皂苷，萃取完毕后残渣中含油量低于3.6%。制得的文冠果种仁油出油率不低于80%，经GC-MS检测，不饱和脂肪酸含量可达90%以上。
实施例3 乳化成型法制备文冠果种仁油微囊
具体方法步骤如下：
1. 采用超临界CO2流体萃取分离技术制备高品质的文冠果种仁油
2. 有机相的制备：取适量的文冠果种仁油，在30～120 rpm不断搅拌下缓慢加入到乙酸乙酯中，超声并搅拌使其溶解均匀，再向溶液中加入适量囊材乙基纤维素， 继续搅拌直至溶解，所得混悬液为有机相；
3. 水相的制备：在室温下，将一定量的乙酸乙酯加入到蒸馏水中，形成乙酸乙酯饱和的水溶液，再向其中加入适量的吐温-80，在30～120 rpm转速下搅拌均匀得水相；
4. 乳化过程：
将有机相在30～120 rpm搅拌速度下，缓慢匀速加入到均匀的水相中，制成水包油(O/W型)的乳状溶液，保持该转速搅拌30 min，至形成均匀的小液滴；
5. 微囊成型：在乳液中缓慢滴入过量的蒸馏水，保持转速在30～120 rpm，持续搅拌1 h，随着乙酸乙酯挥发，乙基纤维素析出形成微囊，用5%稀乙醇溶液洗涤3次，干燥，即得文冠果种仁油微囊。
经检测上述乳化成型法制备的文冠果种仁油微囊，包封率不低于45%（GC法，重量百分比）。
实施例4喷雾干燥技术制备文冠果种仁油微囊
将占微囊总重量30%～40%的文冠果种仁油，与适量的单甘油酯和大豆磷脂混合乳化剂(质量比1:1)混合均匀制备囊心；将占微囊总重量60%～70%的明胶与壳聚糖混合物，或明胶与蔗糖混合物，或明胶与糊精混合物（质量比1:1～1:4）溶解于60℃～90℃的热水中，搅拌均匀制备囊材相溶液；将囊心相缓缓倒入囊材溶液中趁热搅拌混合，通入高压匀质机，60℃～80℃条件下均质乳化3次，均质压力通常为10～50MPa，得到粒径均一的乳化液后，在喷雾干燥塔内，进风温度60℃～150℃，出风温度70℃～90℃，进料流量500～750 ml/h，雾化压力0.1～2 MPa，进行喷雾干燥，即得到文冠果种仁油微胶囊产品，包封率不低于85%（GC法，重量百分比）。
实施例5流化床技术制文冠果种仁油微囊
在室温下，将占微囊总重量60%～70%的阿拉伯胶与聚乙烯醇(PVA)混合物，明胶与壳聚糖混合物，或明胶与蔗糖混合物，或明胶与糊精混合物（质量比1:1～1:4）溶解于60℃～90℃的热水中，搅拌均匀制备囊材相溶液；将占微囊总重量30%～40%的文冠果种仁油，与适量的单甘油酯和大豆磷脂混合乳化剂(质量比1:1)混合均匀制备囊心；将囊心相缓缓倒入囊材溶液中趁热搅拌混合，用高剪切分散乳化机 10000 rpm剪切30 s～2 min，得稳定的O/W型白色乳剂；料液流速 2.5 ml/min，雾化压力 0.1～2 MPa，进风温度60℃～150℃，出风温度70℃～90℃，即得到文冠果种仁油微胶囊产品，包封率不低于75%（GC法，重量百分比）。
实施例6压制法制备文冠果种仁油软胶囊
将一定比例的明胶、甘油和蒸馏水配置于溶胶罐中，60～200 rpm搅拌速度下，80℃～110℃使其熔融，在真空度-0.1 MPa以下和温度80℃～100℃之间，进行2 h脱气，将上述胶液放入保温箱，在80℃～90℃之间机压制胶片；选取压制合格的胶片及处方量文冠果种仁油通过软胶囊机压制成软胶囊。将压制成的软胶囊在网机内20℃～30℃温度下吹风定形，定形3～4 h后进行整形；将整形后的软胶囊用75%乙醇洗涤去油，置于网机内吹风干燥6 h，将干燥好的软胶囊精选除去废胶囊后，进行铝塑包装。
实施例7文冠果种仁油滴丸的制备
取高品质文冠果种仁油25 g，加入75 g的熔融混合基质PEG6000：PEG4000 (1:1)，搅拌均匀后转移至贮液瓶中，密闭并保温在75℃，用定量泵滴丸机由上往下滴制，冷却剂为二甲基硅油，滴头口径（内/外径）：2.1/2.5 mm，滴速：30丸/分钟，滴距：8 cm，每丸25 mg，收集滴丸，吸去表面冷却剂，干燥，即得。
实施例8文冠果种仁油环糊精包合物的制备
先将β-环糊精(β-CD)、或羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)、或磺丁基醚-β-环糊精(SEB-β-CD)与蒸馏水按照1: 6～10的比例混合，16℃～25℃条件下恒温搅拌使溶解，然后加入与环糊精质量比为1: 4～6的文冠果种仁油，将三者搅拌均匀后，混合物料加入到胶体磨或球磨机内，研磨10～20 min，研磨后的物料在室温下静置过夜，真空抽滤，40℃～60℃条件下常压干燥，或在0.1 MPa压力下真空干燥，即得文冠果种仁油环糊精包合物。。