本发明属于生物工程技术领域，涉及一种血琼脂基础培养基的改良配方，具体涉及一种能满足普通细菌与大部分苛养菌全面需要的血琼脂基础培养基的改良配方。
背景技术：
现有的血琼脂基础培养基基本上是在营养琼脂(由蛋白胨、氯化钠、牛肉浸粉、琼脂组成)的基础上添加绵羊血制成。由于新版2015中国药典的实施，TSA已经全面取代了营养琼脂，在营养成分上营养琼脂不是很全面均衡，而且对于受损细菌的修复能力较差，在现今愈加严格的检测中已经不太适用。同理，在营养琼脂基础上建立的血琼脂基础培养基也就需要进行改良。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种能够提供全面营养、维持细菌渗透压、修复受损细菌的血琼脂培养基的改良配方。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种血琼脂培养基的改良配方，由胰蛋白胨、牛肉浸粉、肝脏消化物、酵母提取物、淀粉、氯化钠、脱纤维羊血和琼脂组成，其中：每1000ml培养基中，含有胰蛋白胨10～20g、牛肉浸粉3～8g、肝脏消化物1～4g、淀粉0.5～2g、酵母粉3～8g、氯化钠3～8g、脱纤维绵羊血40～60ml、琼脂10～20g，pH＝7.2±0.2。
本发明中，所述胰蛋白胨为国产，以新鲜牛肉和牛骨为原料经胰酶消化后制成(这里不能选用进口胰蛋白胨，进口胰蛋白胨为酪蛋白消化产物，缺乏含硫氨基酸)。能够比蛋白胨提供更多的碳氮源、维生素和生长因子。
本发明中，所述牛肉浸粉为国产，以新鲜牛肉为原料，经热处理，过滤、浓缩、干燥制成牛肉原粉，再将牛肉原粉经过水解、固液分离、冷藏、过滤、浓缩及干燥等工序获得。杂质少，能够提供有机酸、核苷酸、矿物质、维生素等。
本发明中，所述肝脏消化物为进口，肝脏酶解产物，能够提供丰富的肝糖原、维生素和氨基酸，对各种细菌有明显的促生长作用，特别是对布鲁氏菌与阿米巴原虫效果极好，另外能够更好地对厌氧菌进行培养。
本发明中，所述淀粉为国产。淀粉能提供部分碳与氮，并促进奈瑟氏菌的生长和增强链球菌的溶血特性，并且能够吸收细菌产生的一些毒素，能够使细菌生长更加良好。
本发明中，所述酵母浸粉为进口，以新鲜酵母为原料，能够提供B族维生素和各种氨基酸以及糖类(主要为糖原和海藻糖)。
本发明中，所述氯化钠为国产，能够维持渗透压。
本发明中，所述脱纤维羊血为自制，所选绵羊健康、未注射抗生素，抽血后脱纤维制得，是细菌生长繁殖的良好营养物质。
本发明的血琼脂培养基改良配方能够提供全面营养，维持细菌渗透压，修复受损细菌。采用本发明优化后的配方，不仅可以满足普通细菌与大部分苛养菌的全面需要，而且有利于细菌的培养与鉴定。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案作进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本发明技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的保护范围中。
实施例1：
本实施例提供的血琼脂培养基的改良配方由胰蛋白胨、牛肉浸粉、肝脏消化物、酵母提取物、淀粉、氯化钠、脱纤维羊血和琼脂组成，其中：每1000ml培养基中，含有胰蛋白胨15g、牛肉浸粉5g、肝脏消化物2.5g、淀粉1g、酵母粉5g、氯化钠5g、脱纤维绵羊血50ml、琼脂15g，pH＝7.2±0.2。
上述培养基的制备步骤如下：将胰蛋白胨、牛肉浸粉、肝脏消化物、淀粉、酵母浸粉、氯化钠、琼脂按照比例混合，加入纯化水定容加热溶解并调节pH值至7.2±0.2，经121℃灭菌15分钟，降温至50℃，按比例加入无菌脱纤维羊血，混匀后灌注平板，冷凝后得到培养基成品，备用。
利用上述成分制成的新型血琼脂基础培养基与经典血琼脂基础培养基进行细菌培养实验对比，结果如表1所示。
所用菌株：脑膜炎奈瑟氏菌(CMCC 29001)、肺炎链球菌(ATCC6305)、乙型溶血性链球菌(CMCC 32210)、粪链球菌(ATCC 29212)。
每种菌都用同一浓度菌液进行涂布培养，并做3组平行实验。
由表1可知，本实施例的培养基配方从实验结果上看，菌检出数与状态均好于经典配方。
表1
实施例2：
本实施例与实施例1不同的是：每1000ml培养基中，含有胰蛋白胨12g、牛肉浸粉4g、肝脏消化物3g、淀粉1.5g、酵母粉6g、氯化钠6g、脱纤维绵羊血45ml、琼脂12g，pH＝7.2±0.2。
实施例3：
本实施例与实施例1不同的是：每1000ml培养基中，含有胰蛋白胨18g、牛肉浸粉6g、肝脏消化物1.5g、淀粉0.5g、酵母粉4g、氯化钠4g、脱纤维绵羊血55ml、琼脂18g，pH＝7.2±0.2。