一种脱除银杏酸的银杏内酯制备方法与流程

本发明属于有机化合物提取制备技术领域，具体涉及一种脱除银杏酸的银杏内酯制备方法。

背景技术：

目前银杏内酯的产品应用领域较广泛，涉及茶、食品、保健品、药品等各种行业与产品。但目前国内银杏内酯产品比较严重的问题是纯度较低，杂质较多，有害因子含量高，不仅在应用过程中，产生一系列的副作用与不良反应，也严重限制了其应用范围。作为功能性食品配料，安全性是第一要素，盲目的将药用银杏叶提取物直接转化为食用，在保留了其功能性之外，还带来了许多安全隐患。由于目前行业内诸多企业科学技术不到位，生产出的银杏叶提取物中不仅含有高致敏性与免疫毒性的银杏酸，而且通过添加非银杏叶“辅料”或以非法工艺提取以追求巨额利润，这些产品在食品范围内的应用，很大程度上成为影响广大人民群众健康的重大因素。

技术实现要素：

为了弥补现有技术的不足，本发明所要解决的技术问题是提供一种脱除银杏酸的银杏内酯制备方法，该方法可有效提高银杏内酯的产品质量，减少银杏酸的含量。

为解决上述技术问题，本发明提供一种脱除银杏酸的银杏内酯制备方法，包括以下步骤：

（1）银杏叶提取物的制备；

（2）银杏内酯溶液的制备：

i. 树脂预处理：大孔树脂用95%乙醇浸泡24h，蒸馏水洗涤后备用;

ii. 吸附:将步骤（1）中所得银杏叶提取物溶于70%乙醇溶液，用步骤i中的大孔树脂以2-4BV/h的流速吸附；

iii.洗脱：用无水乙醇以2-4BV/h的流速洗脱15-17倍柱体积，得到精制的银杏内酯溶液；

（3）银杏酸的脱除：

a．树脂预处理：离子交换树脂通过乙醇浸泡、水洗、酸洗、碱洗等预处理；

b．将步骤（2）iii中所制得的银杏内酯溶液以3-5BV/h的流速流过经过步骤a处理的离子交换树脂吸附柱，所得穿透液即得脱除银杏酸的银杏内酯溶液，经干燥，得脱除银杏酸的银杏内酯。

进一步的，步骤（2）中所述大孔树脂为DA201、DM301、AB-8或S-8大孔树脂。

进一步的，所述步骤（3）中所述离子交换树脂为D918阴离子交换树脂。

本发明有益效果：利用本发明所提供的一种脱除银杏酸的银杏内酯制备方法，乙醇提取、“两柱”吸附-脱洗等工艺过程精制的银杏提取物产品中银杏酸含量为0.92 mg/kg，远小于国际标准（5PPm），达到了食品级的要求，所提取制备的银杏内酯的安全性和品质得到有效保障。

附图说明

图1为实施例1-8中大孔树脂对银杏内酯的静态吸附量A1；

图2为实施例1-8中大孔树脂对银杏内酯的静态吸附量B1。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步具体说明。本发明中所述实施例仅用于说明解释本发明而不对本发明的范围构成限制。需说明的是，本发明中未具体阐述的方法步骤等一般属于本领域的常规技术手段。

实施例1:

（1）利用本领域技术人员所熟知的常规方法提取银杏叶提取物。

（2）银杏内酯溶液的制备：

i. 树脂预处理：选取DA201用95%乙醇浸泡24h，蒸馏水洗涤后备用;

ii. 吸附:将步骤（1）中所得银杏叶提取物溶于70%乙醇溶液，用步骤i中的DA201大孔树脂柱以3 BV/h的流速吸附，银杏内酯的静态吸附量为8.26 mg/g，吸附率为72.52%。

iii.洗脱：用无水乙醇以3 BV/h的流速洗脱，洗脱量为15倍柱体积，收集洗脱液，得到精制的银杏内酯溶液；

（3）银杏酸的脱除：

a．树脂预处理：选取D918阴离子交换树脂，通过乙醇浸泡、水洗、酸洗、碱洗等预处理；

b．将步骤（2）iii中所制得的银杏内酯溶液以4 BV/h的流速流过经过步骤a处理的D918阴离子交换树脂吸附柱，所得穿透液即得脱除银杏酸的银杏内酯溶液，经干燥，得脱除银杏酸的银杏内酯。

（4）利用高效液相色谱法并结合蒸发光散射检测器对本发明所制备的产物中银杏内酯含量进行测定，其中色谱柱：美国Alltech公司Platinum C18，250mm×4.6mm，5µm；高效液相色谱条件为：以甲醇-水为流动相进行梯度洗脱：A为甲醇，B为水，0-4min，A从5%升到14%，维持2min，2min内从14%升到20%，维持2min，5min内从20%升到80%，5min内从80%降到50%，3min内从50%降到5%，维持2min。进样体积：20μl；漂移管温度：70.0℃；载气压力：40psi；检测器增益500，喷雾器模式：冷却，动力级别70%。检测结果如表1所示。

（5）利用液相色谱分析法对本发明所制备的产物中银杏酸含量进行测定，色谱柱：美国Alltech公司Platinum C18，250mm×4.6mm，5µm；流动相：含有3%磷酸的甲醇；检测波长：310nm；流速：1ml/min；进样体积：20μl。检测结果如表1所示。

由表1可知，通过乙醇提取、“两柱”吸附-脱洗等工艺过程精制的银杏提取物产品中银杏酸含量为0.92 mg/kg，远小于国际标准（5 PPm），达到了食品级的要求，使得本发明所提取制备的银杏内酯的安全性和品质得到有效保障。

本发明实施例2-8，除步骤（2）ii中大孔树脂与实施例1不同外，其他步骤均相同，实施例2-8中所采用大孔树脂依次为DM301、DM130、X-5、S-8、D3520、D101、AB-8，并对各树脂对银杏内酯的吸附能力进行检测，结果如图1和图2所示。

在静态条件下，用DM301、DM130、X-5、DA201、S-8、D3520、D101、AB-8等8种树脂对银杏叶粗提物进行吸附试验，图1和图2反映了8种不同类型的大孔吸附树脂的静态吸附量和吸附率。从结果可看出，DA201、S-8、DM301、AB-8等4种大孔树脂对银杏内酯的吸附率较高。