吉西他滨衍生物的制作方法

相关申请的交叉引用

本申请要求于2015年4月28日提交的标题为“核苷酸化合物及其用途”的美国临时申请第62/154041号和于2015年2月25日提交的标题为“核苷酸化合物及其用途”的美国临时申请第62/120789号的优先权，其全部内容整体援引加入。

本发明公开了药学和化学领域的组合物和方法。一些公开的实施方案涉及核苷酸化合物、药物组合物及其制备方法和使用方法。在一些实施方案中，这样的核苷酸化合物是有用的抗病毒和抗代谢剂。

发明背景

提供下列背景描述以帮助理解本发明，但不承认其是(或描述)本发明的现有技术。

核苷/核苷酸及其衍生物化合物已广泛用作抗病毒和抗代谢治疗剂以治疗诸如hiv、hcv和hbv的病毒性疾病及实体肿瘤。尽管在具有改善的治疗活性和药代动力学性质的新一代基于核苷(酸)的药物的领域中有显著进步，但仍然需要新的药剂来对抗耐药性和遗传异质性。

发明概述

本发明描述了新的吉西他滨衍生物的核苷和核苷酸化合物(诸如磷酸酯和氨基磷酸酯)，其制备及其用途。一些实施方案涉及前药用于治疗病毒性疾病和各种癌的用途，所述病毒性疾病和各种癌包括但不限于肝炎、肝纤维化、脂肪肝、疟疾、hiv、hpv、非小细胞肺癌、胰腺癌、膀胱癌、乳腺癌、肝癌、淋巴瘤和其他类型的肿瘤。

一些实施方案涉及式i的化合物或其立体异构体或互变异构体或药学上可接受的盐：

其中：

r¹是卤素、氢同位素或任选被取代的c1-c6烷基；

r²选自or⁵和nr⁵r⁶；

r³选自h、任选被取代的c1-c6烷基、任选被取代的c1-c6杂烷基、和任选被取代的c1-c6烷酰基；

r⁴选自h、单磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯，和

或者r³和r⁴可任选地连接；

r⁵选自h、氘、任选被取代的c1-c8烷基、任选被取代的c1-c8烷酰基、任选被取代的芳酰基和任选被取代的杂芳酰基；

r⁶选自氘、任选被取代的c1-c8烷酰基、任选被取代的芳酰基和任选被取代的杂芳酰基；或者当r¹是氘时，r⁶是h；

r⁷是苯基或萘基；

r⁸和r⁹独立地是c1-c6烷基；

r¹⁰选自h、任选被取代的c1-c8烷基、任选被取代的c1-c8烷酰基、任选被取代的芳酰基和任选被取代的杂芳酰基；

r¹¹和r¹²是氘；或者r¹¹是氘且r¹²是氢；或者r¹²是氘且r¹¹是氢。

在一些实施方案中，所述化合物选自：

和其立体异构体或药学上可接受的盐。

一些实施方案涉及治疗疾病、病症或病况的方法，其包括向有此需要的个体给药有效量的任意上述化合物。

在一些实施方案中，所述疾病是病毒性疾病。

在一些实施方案中，所述疾病是某些类型的癌症。

一些实施方案还包括向有此需要的个体给药有效量的至少一种另外的治疗剂。

在一些实施方案中，所述个体是哺乳动物。

在一些实施方案中，所述个体是人类。

一些实施方案涉及在细胞中抑制病毒或肿瘤复制的方法，其包括使所述细胞与任意上述化合物接触。

在一些实施方案中，所述细胞是体内的。

在一些实施方案中，所述细胞是离体的。

在一些实施方案中，所述细胞是哺乳动物的。

在一些实施方案中，所述细胞是人类的。

发明详述

本实施方案涉及关于新的生物活性核苷衍生物化合物(诸如核苷磷酸酯、核苷氨基磷酸酯(phosphonamidate))的组合物和方法，其制备和其用途。这些化合物及其立体异构体和药学上可接受的盐由式i或其立体异构体或互变异构体或药学上可接受的盐表示：

其中：

r¹是卤素、氢同位素或任选被取代的c1-c6烷基；

r²选自or⁵和nr⁵r⁶；

r³选自h、任选被取代的c1-c6烷基、任选被取代的c1-c6杂烷基、和任选被取代的c1-c6烷酰基；

r⁴选自h、单磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯，和

或者r³和r⁴可任选地连接；

r⁵选自h、氘、任选被取代的c1-c8烷基、任选被取代的c1-c8烷酰基、任选被取代的芳酰基和任选被取代的杂芳酰基；

r⁶选自氘、任选被取代的c1-c8烷酰基、任选被取代的芳酰基和任选被取代的杂芳酰基；或者当r¹是氘时，r⁶是h；

r⁷是苯基或萘基；

r⁸和r⁹独立地是c1-c6烷基；

r¹⁰选自h、任选被取代的c1-c8烷基、任选被取代的c1-c8烷酰基、任选被取代的芳酰基和任选被取代的杂芳酰基；

r¹¹和r¹²是氘；或者r¹¹是氘且r¹²是氢；或者r¹²是氘且r¹¹是氢。

某些磷酸酯衍生物的药物是高电荷(highlycharged)化合物，其由于在胃肠道中吸收差而通常具有差的口服生物利用度。某些药物是高度亲脂性化合物，其由于在胃肠道中吸收差而通常具有差的口服生物利用度。在一些实施方案中，式i的化合物具有优于母体药物/药剂的口服生物利用度。

式i的化合物具有不对称中心，其中立体化学是未指定的，通常当提及式i的化合物时，包括这些化合物的非对映异构体混合物及单独的立体异构体。

某些式i的化合物含有杂环，其中双键可互变异构化为不同的构型，通常当提及式i的化合物时，包括这些化合物的互变异构体混合物及单独的互变异构体。

本文提供的化合物、组合物和方法的一些实施方案包括包含本文提供的化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。

一些实施方案还包括向有此需要的个体给药有效量的第二种或多种治疗剂与本文提供的化合物的组合。

本文提供的化合物、组合物和方法的一些实施方案包括治疗病毒性疾病的方法，其包括向有此需要的个体给药有效量的本文提供的化合物。

本文提供的化合物、组合物和方法的一些实施方案包括治疗各种类型的癌症的方法，其包括向有此需要的个体给药有效量的本文提供的化合物。

在一些实施方案中，所述个体是哺乳动物。

在一些实施方案中，所述个体是人类。

本文提供的化合物、组合物和方法的一些实施方案包括在细胞中测试化合物的方法，其包括使所述细胞与请求保护的化合物接触。

在一些实施方案中，所述细胞是体内的。

在一些实施方案中，所述细胞是离体的。

在一些实施方案中，所述细胞是哺乳动物的。

在一些实施方案中，所述细胞是人类的。

定义

根据本公开和如本文使用的，除非另外明确说明，下列术语用下列含义定义。应当理解，上文的一般描述和下文的详细描述都仅是示例性和说明性的，并不限制请求保护的主题。在本申请中，除非另外具体说明，单数形式的使用包括复数形式。在本申请中，除非另外说明，“或(者)”的使用意指“和/或”。此外，术语“包括/包含(including)”及其他形式(诸如“includes”和“included”)的使用是非限制性的。

如本文使用的，范围和量可表达为“大约”具体的值或范围。“大约”还包括准确的量。因此“大约10％”意指“大约10％”以及“10％”。

如本文使用的，“任选的”或“任选地/任选存在的”意指其后所描述的事件或情况确实发生或不发生，并且该描述包括所述事件或情况发生的情形以及不发生的情形。例如，任选被取代的基团意指所述基团未被取代或被取代。

除非上下文另外清楚地指明，如本文使用的，单数形式的“a”、“an”和“the”包括复数的所指物。因此，例如，提及包含“治疗剂”的组合物包括具有一种或多种治疗剂的组合物。

术语“烷基”是指具有至多且包括10个碳原子的的饱和脂族基团(包括直链、支链和环状基团)。合适的烷基包括甲基、乙基、正丙基、异丙基和环丙基。所述烷基可任选地被1-3个取代基取代。

术语“任选被取代的”或“被取代(的)”包括被1-4个取代基取代的基团，所述取代基独立地选自低级烷基、低级芳基、低级芳烷基、低级环烷基、低级杂环烷基、羟基、低级烷氧基、低级芳基氧基、全卤代烷氧基、芳烷氧基、低级杂芳基、低级杂芳基氧基、低级杂芳基烷基、低级杂芳烷氧基、叠氮基、氨基、卤素、低级烷硫基、氧代基、低级酰基烷基、低级羧基酯、羧基、甲酰氨基、硝基、低级酰氧基、低级氨基烷基、低级烷基氨基芳基、低级烷基芳基、低级烷基氨基烷基、低级烷氧基芳基、低级芳基氨基、低级芳烷基氨基、低级烷基磺酰基、低级甲酰氨基烷基芳基、低级甲酰氨基芳基、低级羟基烷基、低级卤代烷基、低级烷基氨基烷基羧基、低级氨基甲酰氨基烷基、氰基、低级烷氧基烷基、低级全卤代烷基、磷酸酯、膦酸酯或氨基磷酸酯和低级芳基烷氧基烷基。“被取代的芳基”和“被取代的杂芳基”是指被1-6个取代基取代的芳基和杂芳基。这些取代基选自低级烷基、低级烷氧基、低级全卤代烷基、卤素、羟基、氰基和氨基。

术语“杂烷基”是指含有至少一个杂原子(诸如1-3个杂原子)的烷基。合适的杂原子包括氧、硫和氮。

术语“杂烷酰基”是指-c(o)-杂烷基。

术语“烷酰基”是指-c(o)-烷基。

术语“酰氧基”是指-oc(o)r，其中r是烷基或杂烷基。

术语“烷氧基”或“烷基氧基”是指or，其中r是烷基或杂烷基，其均任选地被取代。

术语“羧基”是指c(o)oh。

术语“氧代(基)”是指＝o基团。

术语“氨基”是指nrr其中r和r各自独立地选自氢、烷基、芳基、芳烷基和杂环烷基，除了氢之外其余基团均任选地被取代；并且r和r可形成环系。

术语“酰基氨基”是指-nrc(o)r其中r和r各自独立地选自h、烷基或杂烷基。

术语“卤素”或“卤代”是指f、cl、br和i。

术语“卤代烷基”是指含有至少一个卤素(在另一方面，1-3个卤素原子)的烷基。合适的卤素原子包括f、cl和br。

术语“卤代酰基”是指-c(o)-卤代烷基。

术语“烯基”是指具有2-12个原子并且含有至少一个碳碳双键的不饱和基团，并且其包括直链、支链和环状基团。烯基可任选地被取代。合适的烯基包括烯丙基。

术语“炔基”是指具有2-12个原子并且含有至少一个碳碳三键的不饱和基团，并且其包括直链、支链和环状基团。炔基可任选地被取代。合适的炔基包括乙炔基。

术语“氨基烷基”是指基团nr2-烷基，其中r选自h、烷基、芳基、芳烷基和杂环烷基。

术语“烷硫基”是指基团烷基-s-。

术语“酰氨基”是指如在nr2c(o)-、rc(o)nr-、nr2s(＝o)2-和rs(＝o)2-nr-中的酰基或磺酰基旁的nr2基团，其中r包括h、烷基、芳基、芳烷基和杂环烷基。

术语“全卤代”是指其中脂族基团或芳基上的每个c-h键都被c-卤代键代替的基团。合适的全卤代烷基包括cf3和cfcl2。

术语“芳基”是指芳族基团，其中形成环的各个原子都是碳原子。芳基环可通过五、六、七、八、九或多于九个碳原子形成。芳基可任选地被取代。芳基的实例包括但不限于苯基、萘基、菲基、蒽基、四氢萘基、芴基、茚基和茚满基。

术语“杂芳基”是指芳族基团，其中至少一个形成芳族环的原子是杂原子。杂芳基环可通过三、四、五、六、七、八、九或多于九个原子形成。杂芳基可任选地被取代。杂芳基的实例包括但不限于包含一个氧或硫原子或至多四个氮原子，或者一个氧或硫原子和至多两个氮原子的组合的芳族c3-8杂环基，以及它们的被取代的衍生物以及苯并和吡啶并稠合(例如通过成环碳原子之一连接)衍生物。在一些实施方案中，杂芳基任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤代、羟基、氨基、氰基、硝基、烷基酰氨基、酰基、c1-6-烷氧基、c1-6-烷基、c1-6-羟基烷基、c1-6-氨基烷基、c1-6-烷基氨基、烷基次磺酰基(sulfenyl)、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、氨磺酰基或三氟甲基。杂芳基的实例包括但不限于呋喃、苯并呋喃、噻吩、苯并噻吩、吡咯、吡啶、吲哚、噁唑、苯并噁唑、异噁唑、苯并异噁唑、噻唑、苯并噻唑、异噻唑、咪唑、苯并咪唑、吡唑、吲唑、四唑、喹啉、异喹啉、哒嗪、嘧啶、嘌呤和吡嗪、呋咱(furazan)、1,2,3-噁二唑、1,2,3-噻二唑、1,2,4-噻二唑、三唑、苯并三唑、蝶啶、酚噁唑、噁二唑、苯并吡唑、喹嗪、噌啉、酞嗪、喹唑啉和喹噁啉的未取代和单取代或双取代衍生物。在一些实施方案中，所述取代基是卤素、羟基、氰基、o-c1-6-烷基、c1-6-烷基、羟基-c1-6-烷基和氨基-c1-6-烷基。

术语“芳酰基”是指-c(o)-芳基。

术语“杂芳酰基”是指-c(o)-杂芳基。

短语“治疗有效量”意指部分或完全改善、减弱或消除特定疾病或病况的一种或多种症状，或者防止、改变或延迟特定疾病或病况的一种或多种症状的发作的化合物或化合物的组合的量。这样的量可以单剂量的形式给药，或者可按照给药方案给药，由此其是有效的。可能需要重复给药以实现期望的结果(例如疾病和/或病况的治疗)。

术语“药学上可接受的盐”包括式i的化合物和从本发明的实施方案的化合物与有机或无机酸或碱的结合衍生出的它们的前药的盐。适合的酸包括乙酸、己二酸、苯磺酸、(+)-7,7-二甲基-2-氧代双环[2.2.1]庚烷-1-甲磺酸、柠檬酸、1,2-乙二磺酸、十二烷基磺酸、富马酸、葡庚糖酸、葡糖酸、葡糖醛酸、马尿酸、盐酸、半乙醇酸(hemiethanolicacid)、hbr、hcl、hi、2-羟基乙磺酸、乳酸、乳糖酸、马来酸、甲磺酸、甲基溴酸(methylbromideacid)、甲基硫酸、2-萘磺酸、硝酸、油酸、4,4’-亚甲基双-[3-羟基-2-萘甲酸]、磷酸、聚半乳糖醛酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、磺基水杨酸、鞣酸、酒石酸、对苯二甲酸(terphthalicacid)和对甲苯磺酸。

在任何给定的取代基的数目未指明时(例如“卤代烷基”)，可存在一个或多个取代基。例如，“卤代烷基”可包含一个或多个相同或不同的卤素。例如，“卤代烷基”包括取代基cf3、chf2和ch2f中的每一个。

术语“患者”是指被治疗的动物，其包括哺乳动物，诸如犬、猫、母牛、马、羊和人。在一些实施方案中，所述患者是雄性或雌性哺乳动物。在一些实施方案中，所述患者是男人或女人。

如本文使用的术语“前药”是指当向生物系统给药时，由自发的化学反应、酶催化的化学反应和/或代谢化学反应或者其各自的组合而产生生物活性化合物的任何化合物。使用在体内裂解的、与例如ho-、hs-、hooc-、hoopr2-的官能团(其与药物相关)连接的基团来形成标准前药。标准前药包括但不限于羧酸酯，其中所述基团是烷基、芳基、芳烷基、酰氧基烷基、烷氧基羰氧基烷基，以及羟基、硫基和胺的酯，其中连接的基团是酰基、烷氧基羰基、氨基羰基、磷酸酯或硫酸酯。所说明的基团是示例性的而不是穷举，并且本领域技术人员可制备其它已知的多种前药。式i的化合物的这样的前药在本发明范围之内。前药必须经历一些形式的化学转化以生成具有生物活性的化合物或者作为生物活性化合物的前体的化合物。在一些情况中，所述前药是生物活性的，其活性通常低于药物本身，并且用于通过改善口服生物利用度、药效半衰期等来改善药效或安全性。化合物的前药形式可用于例如改善生物利用度、诸如通过掩蔽或减小不良性质(如苦味或胃肠道刺激性)来改善个体的可接受性、改变如用于静脉内使用的溶解度、提供延长或持续释放或递送、改善配制的便利性或提供化合物的定位递送。

术语“立体异构体”是指r⁸基团和通过单键连接至磷原子的核苷的相对或绝对空间关系，并且是指单个异构体或者单个异构体的任意组合，诸如外消旋混合物和非对映异构混合物。例如，以下结构a、b、c和d显示四种可能的单个异构体。结构a和d(或者b和c)是一对两个对映异构体(或者称作旋光异构体)。

术语“互变异构体”是指双键可以多于一种构型存在的异构体。例如，式i的化合物的碱基团可以以下互变异构体形式存在。

术语“治疗”疾病包括抑制疾病(延缓或阻滞或部分阻滞其进展)、提供疾病的症状或副作用的缓解(包括姑息治疗)和/或缓解疾病(引起疾病消退)。

术语“生物药剂”是指具有生物活性的化合物，或者具有可用于诊断目的的分子性质的化合物(如带有放射性同位素或重原子的化合物)。

制剂

所公开的化合物可单独使用，或与其它治疗联合使用。当与其它药剂联合使用时，可将这些化合物以每日剂量或每日剂量的适当部分给药(例如，每天2次)。在治疗计划中，可将所述化合物在另一药剂的疗程之后、在另一药剂的疗法的疗程期间给药，作为治疗方案的一部分给药，或者可在用另一药剂的疗法之前给药。

药学上可接受的盐的实例包括醋酸盐、己二酸盐、苯磺酸盐、溴化物、樟脑磺酸盐、氯化物、柠檬酸盐、乙二磺酸盐、丙酸酯十二烷基硫酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、马尿酸盐、海克酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、甲基溴化物、甲基硫酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、磺基水杨酸盐、鞣酸盐、酒石酸盐、对苯二甲酸盐、甲苯磺酸盐和三乙基碘。

含有活性成分的组合物可以是适合用于预定的给药方法的任何形式。在一些实施方案中，本文中所述的方法和/或组合物中的化合物可通过口服给药、直肠给药、经粘膜给药、肠道给药、肠内给药、局部给药、透皮给药、鞘内给药、静脉内给药、肌内给药、心室内给药、腹膜内给药、鼻内给药、眼内给药和/或肠胃外给药来提供。

当将所述化合物通过口服给药进行给药时，可制备例如片剂、糖锭剂(troch)、锭剂(lozenge)、水性或油性混悬剂、可分散性粉末或颗粒剂、乳剂、硬或软胶囊剂、糖浆剂或酏剂。用于口服使用的组合物可根据本领域已知用于制备药物组合物的任何方法制备，并且这样的组合物可含有一种或多种物质，包括甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂，以提供适口的制剂。含有与非毒性药学上可接受的赋形剂(其适合用于制备片剂)混合的活性成分的片剂是可接受的。这些赋形剂可以是例如惰性稀释剂，如碳酸钙或碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；造粒剂和崩解剂，如玉米淀粉或藻酸；粘合剂，如淀粉、明胶或阿拉伯胶；以及润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可以是未包衣的，或者可将其通过已知技术(包括微囊化)包衣以延迟胃肠道中的崩解和吸收，并由此提供较长时间的持续作用。例如，可使用延迟材料，如单独或与蜡一起的单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。

用于口服使用的制剂还可以硬明胶胶囊剂的形式存在，其中可将活性成分与惰性固体稀释剂(如磷酸钙或高岭土)混合；或以软明胶胶囊剂的形式存在，其中可将活性成分与水或油介质(如花生油、液状石蜡或橄榄油)混合。

适用于肠胃外给药的制剂包括水性和非水性等渗无菌注射溶液剂，其可包含例如抗氧化剂、缓冲液、抑菌剂和使得制剂与预期受者的血液等渗的溶质；以及水性和非水性无菌混悬剂，其可包含助悬剂和增稠剂。所述制剂可在单位剂量或多剂量的密封容器(例如安瓿和小瓶)中提供，并可以在冷冻干燥(冻干)条件下储存(其仅需使用前即刻加入无菌液体载体(例如注射用水))。注射溶液剂和混悬剂可由之前描述种类的无菌粉末、颗粒剂和片剂制备。

在一些实施方案中，单位剂量制剂含有每日剂量或单位、每日亚剂量或者其适宜部分的药物。然而会理解，如本领域技术人员所熟知，任何特定患者的具体剂量水平会取决于多种因素，其包括所用具体化合物的活性；被治疗个体的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；给药时间和给药途径；排泄速率；之前已给药的其它药物；以及进行治疗的特定疾病的严重性。

化合物的合成

以下用于制备化合物的操作说明用于制备所述化合物的一般操作。例如通过将非对映异构体通过柱色谱法和/或结晶的组合分离，或者通过手性活化的磷酸酯中间体的对映选择性合成，可制备包含磷中心处的单个异构体的光学纯前药。

路线i描述衍生式i的化合物的3-羟基的一般策略。第一策略从用标准保护基(诸如烷基甲硅烷基或酰基)保护结构1的化合物的伯羟基开始，以得到结构2的化合物。烷基化或酰化后脱保护得到结构3的核苷产物。

路线i：

路线ii描述衍生式i的化合物的4'-氨基的一般策略。用标准保护基(诸如烷基甲硅烷基或酰基)保护结构4的化合物的二羟基得到结构5的化合物。用标准酰化剂(诸如酰氯、酸酐或脲)酰化氨基后脱保护产生结构6的化合物。

路线ii

路线iii描述式i的氨基磷酸酯衍生物的一般合成操作。将结构7的核苷衍生物用结构8的氯化磷处理，以得到结构9的终产物。

路线iii

实施例

如下文所述制备一些式i的生物活性化合物。

实施例1

(2s)-2-(((((2r,3r,5r)-5-(4-苯甲酰氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2h)-基)-4,4-二氟-3-羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氧基)丙酸异丙酯(化合物101)

根据路线i-iii的合成策略，由5'-氟-吉西他滨制备两个非对映异构体的混合物的形式的化合物101。[m+h]⁺c28h29f3n3o10p计算值：655.15。

实施例2

(2s)-2-(((((2r,3r,5r)-4,4-二氟-5-(5-氟-2-氧代-4-(2-丙基戊酰氨基)嘧啶-1(2h)-基)-3-羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氧基)丙酸异丙酯

根据路线i-iii的合成策略，由5'-氟-吉西他滨制备两个非对映异构体的混合物的形式的化合物102。[m+h]⁺c29h39f3n3o10p计算值：677.23。

生物学实施例

使用方法的实施例包括以下。应理解，以下是实施例，并且所述方法不仅限于这些实施例。

实施例a：体外抗病毒活性试验

在标准试验中测试三磷酸酯形式的新的核苷对纯化的病毒聚合酶(诸如hcv或hbv)的抗病毒活性。

方法：

通过标准的核苷酸合成从相应的核苷制备测试核苷三磷酸酯。

实施例b：体外抗增殖活性试验

在各种癌症细胞系中测试新的化合物相对参比化合物吉西他滨的抗肿瘤活性。

实施例c：口服给药活性化合物及其前药后的组织分布

在大鼠中测定口服给药后特定组织中产生三磷酸核苷的效率。

方法：

将核苷类似物和它们的前药以5-20mg/kg通过口服强饲向禁食的大鼠给药。通过hplc-uv测定活性剂和前药在血浆和门静脉中的浓度，并且通过lc-ms使用标准色谱法测量肝、骨骼肌、心脏、肾、小肠和其它器官中的浓度。结果证明了前药化合物的肝靶向性，并提供了前药相对于活性剂改善的安全性的证据。

在本说明书中使用的表示成分的量、反应条件等的全部数值在所有情况下理解为通过术语“约”修饰。因此，除非有相反说明，本文中示出的数值参数是近似值，其可根据寻求获得的期望性质而改变。至少，并且不试图将等同理论的应用限制到要求本申请优先权的任何申请中的任何权利要求的范围，应根据有效数字的数值和普通的约数方法对各个数字参数进行解释。

以上说明书公开数种方法和材料。可对本发明的方法和材料进行修改，也可对制备方法和设备进行修改。根据对本文中公开的本发明的公开内容或实践的考虑，这样的修改对本领域技术人员会是明显的。因此，不意图将本发明局限于本文中公开的具体实施方案内，相反，本发明涵盖来自本发明实际范围和精神内的所有修改和替换。

将本文中所有引用的参考文献(包括但不限于公布和未公布的申请、专利和参考文献)以其整体援引加入本文，并因此为本说明书的一部分。如果援引加入的出版物和专利或专利申请与本说明书中包含的公开内容相矛盾，本说明书意图替代和/或优先于任何这样相矛盾的材料。