本发明涉及活性成分阿哌沙班(apixaban)的杂质，所述杂质可以在合成阿哌沙班期间产生；用于识别和/或定量这些杂质的方法；和用于在阿哌沙班及其合成前体中去除所述杂质或限制所述杂质存在的合成方法。本发明还涉及这些二聚体杂质在分析方法中的用途。
背景技术：
：阿哌沙班为一种用作治疗静脉血栓栓塞性事件的抗凝剂的活性药物成分。此外，它还显示出治疗急性冠状动脉综合征(acs)、脑血管缺血和癌症的前景。以下化学式(i)所示的阿哌沙班具有化学名1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-[4-(2-氧代哌啶-1-基)苯基]-4,5-二氢吡唑并[5,4-c]吡啶-3-甲酰胺和casrn503612-47-3。已经描述数种制备阿哌沙班的方法。具体地，wo2007/001385公开一种多千克规模的合成方法。具体地，wo2007/001385在实施例6中公开一种根据以下反应流程对10kg规模的阿哌沙班乙酯进行酰胺化反应来制备阿哌沙班的方法：根据所述程序，使用在丙二醇中的无水氨并且在90℃下进行反应至少12小时，获得分离的摩尔产率为94.6％的阿哌沙班。jian'anjing和yafeiji的syntheticcommunications,43,72-79,2013公开一种合成阿哌沙班的成本有效的策略，在所述公开第74页流程3中所概述。另一种制备阿哌沙班的方法公开在wo03/049681中；特别是在实施例54至56中，其描述了从化合物10(阿哌沙班的中间物)开始制备所述活性药物成分的合成途径。具体地，在实施例54中，在部分b的最后一节中，借助于氢氧化铵溶液与etoac的混合物产生3-吗啉-4-基-1-[4-(2-氧代-哌啶-1-基)-苯基]-5,6-二氢-1h-吡啶-2-酮(63)；最后在通过快速柱色谱法纯化后获得化合物63。却在同一实施例的部分a中借助于过滤并且继而依序用乙醇和乙醚洗涤来制备不同的化合物，被称为铜(i)，一种催化剂。所得铜(i)催化反应以产生化合物63，因此不进行上述过滤和依序用乙醇和乙醚洗涤来产生化合物63，而是仅需要去除铜(i)。获得阿哌沙班中间物的另一种方法公开在cn104030972中。特别在实施例1中公开获得化合物(i)(即阿哌沙班的中间物)的方法。具体地，在步骤(3)中，所述化合物借助于添加水接着过滤获得；最后产生产率为74.0％并且纯度高于98.5％的化合物(i)。在实验室实验中，惊讶地发现文献中公开的用于制备阿哌沙班的多种合成途径提供被高分子量杂质污染的产物。所述高分子杂质的存在，特别是以高于0.10％的量存在，在诸如阿哌沙班的药物活性物质中是不可接受的。技术实现要素：因此，本发明解决的问题是提供一种用于制备阿哌沙班的改善的方法，所述方法使得可以制备具有低含量的高分子量杂质的阿哌沙班。这个问题通过权利要求书中所述的制备阿哌沙班的方法得以解决，所述权利要求书的定义为本说明书的组成部分。具体地，在第一方面中，本发明提供一种制备基本上不含以下结构(ii)和/或(iii)的二聚体杂质的活性成分阿哌沙班的方法：另一方面，本发明提供一种测定阿哌沙班中的式(ii)和/或式(iii)的二聚体杂质的方法。另一方面，本发明提供作为新化学实体的式(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)和(vii)的化合物。另一方面，本发明提供分离的式(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)和(vii)的杂质在确定阿哌沙班的样品或其前体中所述杂质的身份和/或量的方法中作为“参考标志物”和/或“参考标准物”的用途。附图说明图1显示现有技术程序中合成阿哌沙班的总流程，其包括以杂质的化学结构和量表示的所述杂质经过所述合成过程的携带情况。图2显示根据本发明方法的合成阿哌沙班的总流程，根据包含步骤a)至d)的方法获得，并且所述总流程包括以杂质的化学结构和量表示的所述杂质经过所述合成过程的携带情况。图3显示通过lc-ms测量的式(ii)的阿哌沙班的二聚体杂质的uv谱。图4显示通过lc-ms测量的式(iii)的阿哌沙班的二聚体杂质的uv谱。具体实施方式本发明的目的是一种制备式(i)阿哌沙班的方法：所述阿哌沙班包含少于0.10％的以下阿哌沙班的二聚体杂质：以下结构(ii)的(e)-6,6'-(4,4'-(二氮烯-1,2-二基)双(4,1-亚苯基))双(1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-3-甲酰胺)：和/或以下阿哌沙班的二聚体杂质：以下结构(iii)的(z)-1,2-双(4-(3-氨甲酰基-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5-二氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-6(7h)-基)苯基)二氮烯氧化物：其中所述方法包括以下步骤：a)制备式(ix)的3-吗啉基-1-(4-(2-氧代哌啶-1-基)苯基)-5,6-二氢吡啶-2(1h)-酮在c1-c3醇与水的混合物中的溶液：b)过滤步骤a)中制备的溶液以去除以下二聚体杂质：式(vi)的(e)-1,1'-(4,4'-(二氮烯-1,2-二基)双(4,1-亚苯基))双(3-吗啉基-5,6-二氢吡啶-2(1h)-酮)和/或式(vii)的杂质(z)-1,2-双(4-(3-吗啉基-2-氧代-5，6-二氢吡啶-1(2h)-基)苯基)二氮烯氧化物：c)在滤液中获得包含纯化的式(ix)化合物的溶液，d)将步骤c)的式(ix)化合物转化为式(i)阿哌沙班；或替代地，用以下步骤代替步骤a)至d)：e)制备式(viii)的1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(4-(2-氧代哌啶-1-基)苯基)-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯在c1-c4醇中的溶液：f)过滤步骤e)中制备的溶液以去除以下二聚体杂质：下式(iv)的(e)-6,6'-(4,4'-(二氮烯-1,2-二基)双(4,1-亚苯基))双(1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯)和/或式(v)的杂质(z)-1,2-双(4-(3-(乙氧基羰基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5-二氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-6(7h)-基)苯基)二氮烯氧化物：g)在滤液中获得包含纯化的式(viii)化合物的溶液，h)任选地，分离固体形式的纯化的式(viii)化合物，并且重复步骤e)至g)一次或多次，i)将步骤g)或h)的式(viii)化合物转化为式(i)阿哌沙班。实际上，已经惊讶地发现过滤包含式(ix)化合物的醇水溶液和/或式(viii)化合物的醇溶液有可能选择性地分别去除式(vi)和(vii)、式(iv)和(v)的相关二聚体杂质。因此，所述杂质以固体形式保留在过滤器上，并且同时，所有量的纯化产物被收集到滤过的溶液中。保留在过滤器上的固体物质实际上不含式(ix)或(viii)的产物，而仅含有式(vi)和(vii)或(iv)和(v)的二聚体杂质以及任选的其它无机助滤剂和/或活性炭。本发明方法的一个优点在于允许制备如下阿哌沙班和其式(ix)和(viii)的前体，其含有少于0.10％的分别是式(ii)和(iii)、式(vi)和(vii)、式(iv)和(v)的各二聚体杂质。本发明方法的另一个极重要的优点在于所述方法极有效地降低二聚体杂质的水平，并且同时极有效地去除二聚体杂质而避免任何产物损失，即以几乎定量的产率提供产物。这个结果当然优于通过任何其它再结晶方法可获得的结果，在所述任何其它再结晶方法中，尽管理论上可以获得相同的二聚体杂质降低水平，但被纯化产物的产率必定比通过本发明方法获得的几乎定量的产率低得多。此外，如图1所示，已经观察到所述二聚体杂质很难去除，实际上，其存在于阿哌沙班合成方法的各步骤中，因为在中间物分离期间，其并会不损失，因此以高的二聚体杂质含量到达产物阿哌沙班中，贯穿方法的所有合成步骤。最后，必须考虑到，因为阿哌沙班的这些二聚体杂质具有高分子量，所以其在hplc分析时显示高的相对保留时间，或极经常地，在针对分析阿哌沙班和其相关杂质(如异构体杂质)的分析方法中，所述二聚体杂质被色谱柱保留，并且在大多数情况下，其不能被洗脱，从而保留在柱头上。因此，确定所述二聚体杂质的存在并非显而易见，并且，因此，因为测定二聚体杂质的存在并非显而易见。针对所述杂质的去除或减少的方法的情况也如此。下式(ix)化合物可以根据syntheticcommunication,2013,第43卷,第72-79页中所公开的合成方法制备：下式(viii)的化合物可以根据上述文章中的方法制备：根据本发明方法制备的阿哌沙班包含少于0.10％的式(ii)和(iii)的阿哌沙班的二聚体杂质中的每一种，其中0.10％通过分析hplca/a％测定。所述测定可以使用实施例8中所述的分析方法便利地进行。在本发明方法的步骤a)中，制备式(ix)的3-吗啉基-1-(4-(2-氧代哌啶-1-基)苯基)-5,6-二氢吡啶-2(1h)-酮在c1-c3醇与水的混合物中的溶液：制备式(ix)化合物的溶液是指将固体形式的式(ix)化合物溶解在c1-c3醇与水的混合物中，或替代地，将(ix)溶解在c1-c3醇中，然后添加水。替代地，制备式(ix)化合物的溶液还可以通过在c1-c3醇与水的混合物中将另一种化合物(即前体)转化为式(ix)化合物来实现。替代地，制备式(ix)化合物的溶液还可以通过在c1-c3醇中将另一种化合物(即前体)转化为式(ix)化合物，然后添加水来实现。替代地，制备式(ix)化合物的溶液还可以通过在另一种溶剂中将另一种化合物(即前体)转化为式(ix)化合物，然后将所述溶剂换成c1-c3醇与水的混合物或换成c1-c3醇然后添加水来实现。根据一个优选实施方式，另一种化合物(即前体)可以是例如式(x)化合物：根据一个优选实施方式，式(x)化合物转化为式(ix)化合物借助于与氯戊酰氯反应来进行。根据一个优选实施方式，在c1-c3醇与水的混合物中，c1-c3醇为乙醇。根据一个优选实施方式，溶剂换为c1-c3醇、然后添加水。更优选地，溶剂的转换用乙醇进行，然后添加水。本发明方法的步骤a)中制备的式(ix)的3-吗啉基-1-(4-(2-氧代哌啶-1-基)苯基)-5,6-二氢吡啶-2(1h)-酮：在c1-c3醇与水的混合物中的溶液为乳白色溶液或少量固体物质的微悬浮液或悬浮液，典型地，所述不溶性物质的量以式(ix)化合物重量计少于5重量％。实际上，在所述溶液中，式(vi)和(vii)的二聚体杂质以不溶性固体形式保留，因此证明了化合物(ix)的溶液或由式(vi)和(vii)的二聚体杂质构成的少量固体物质的微悬浮液或悬浮液的乳白色外观。式(ix)化合物则完全溶解在c1-c3醇和水的溶液中。在c1-c3醇与水的混合物中，c1-c3醇为选自甲醇、乙醇和正丙醇或异丙醇的一元醇溶剂。在本发明方法的步骤a)中，与式(ix)化合物相比，c1-c3醇的量为2至30体积。体积是指每单位产物溶剂的体积，因此，例如1体积为每千克1升，或每克1毫升或每毫克1微升。因此，10体积是指例如每千克物质(在这种情形下，是指每千克式(ix)化合物)10升。根据本发明方法的一个优选实施方式，在步骤a)中，与式(ix)化合物相比，c1-c3醇的量为5至20体积。根据本发明方法的一个更优选实施方式，在步骤a)中，与式(ix)化合物相比，c1-c3醇的量为10至15体积，再次更优选地，体积为约13体积。在本发明方法的步骤a)中，与式(ix)化合物相比，水的量为0.5至20体积。根据本发明方法的一个优选实施方式，在步骤a)中，与式(ix)化合物相比，水的量为1至15体积。根据本发明方法的一个更优选实施方式，在步骤a)中，与式(ix)化合物相比，水的量为7至13体积，更优选地，为约10体积。根据本发明方法的一个优选实施方式，在步骤a)中，c1-c3醇的量为5至20体积，并且水的量为1至15体积，两者均与式(ix)化合物相比。根据本发明方法的一个更优选实施方式，在步骤a)中，c1-c3醇的量为10至15体积，并且水的量为7至13体积，两者均与式(ix)化合物相比，再次更优选地，c1-c3醇的量为约13体积，并且水的量为约10体积，两者均与式(ix)化合物相比。具体地，在步骤a)中，混合物中水的量与c1-c3醇的量之间的体积比包含在水与c1-c3醇的所述混合物中2.4％至80％(v/v％)水的范围内，优选在上述水与c1-c3醇的混合物中6.25％至60％(v/v％)水的范围内，并且更优选在上述水与c1-c3醇的混合物中35％至50％(v/v％)水的范围内。根据本发明方法的一个优选实施方式，在步骤a)中，c1-c3醇为乙醇。根据本发明方法的一个更优选实施方式，在步骤a)中，乙醇的量为10至15体积，并且水的量为7至13体积，两者均与式(ix)化合物相比，再次更优选地，乙醇的量为约13体积，并且水的量为约10体积，两者均与式(ix)化合物相比。本发明方法的步骤a)可以在20℃至120℃之间的温度进行。根据本发明方法的一个优选实施方式，步骤a)在30℃至50℃之间的温度进行。根据本发明方法的一个优选实施方式，步骤a)在40℃至45℃之间的温度进行。根据本发明方法的一个更优选实施方式，步骤a)在30℃至50℃之间的温度进行，并且乙醇的量为10至15体积且水的量为7至13体积，两者均与式(ix)化合物相比。更优选地，步骤a)在40℃至45℃之间的温度进行，并且乙醇的量为约13体积且水的量为约10体积，两者均与式(ix)化合物相比。根据本发明方法的一个优选实施方式，在步骤a)中，进一步添加助滤剂和/或活性炭。在制备步骤a)的溶液后，在步骤b)中，过滤所述溶液以去除式(vi)和(vii)的二聚体杂质。可以在滤纸、或滤纸板或硅藻土板上过滤步骤a)中制备的溶液。根据本发明方法的一个优选实施方式，在步骤b)中，借助于硅藻土板进行。本发明方法的步骤b)可以在20℃至120℃之间的温度进行。根据本发明方法的一个优选实施方式，步骤b)在30℃至50℃之间的温度进行。根据本发明方法的一个优选实施方式，步骤b)在40℃至45℃之间的温度进行。根据本发明方法的一个优选实施方式，在步骤b)中，进一步用在已进行过滤的相同温度预热的c1-c3醇溶剂洗涤过滤器。不溶性的式(vi)和(vii)的杂质以固体物质形式保留在过滤器上，并且在如下情形下，即其中在步骤a)中进一步添加助滤剂和/或活性炭或在步骤b)中在硅藻土板上进行过滤，这些物质也被包含在滤饼上。在步骤c)中，在滤液中获得包含纯化的式(ix)化合物的溶液。在步骤d)中，根据已知的现有技术方法(如syntheticcommunications,43；72-79,2013中公开的方法或优选wo2007/001385中公开的方法)将步骤c)中获得的式(ix)化合物转化为式(i)阿哌沙班。根据本发明的总是基于相同发明构思的代替性方法，用以下步骤e)至i)代替上述步骤a)至d)。在步骤e)中，制备式(viii)的1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(4-(2-氧代哌啶-1-基)苯基)-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯在c1-c4醇中的溶液：在步骤e)中制备所述化合物(viii)的溶液可以类似于对于步骤a)中的式(ix)化合物所述(包括所有已经描述的变化形式)进行。c1-c4醇选自由以下物质组成的一元醇的组：甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、仲丁醇和叔丁醇。根据本发明方法的一个优选实施方式，在步骤e)中，c1-c4醇为乙醇。在本发明方法的步骤e)中，与式(viii)化合物相比，c1-c4醇的量为3至20体积。根据本发明方法的一个优选实施方式，在步骤e)中，与式(viii)化合物相比，c1-c4醇的量为5至15体积，更优选地为约10体积。根据本发明方法，步骤e)在40℃至醇的沸点之间的温度进行。根据本发明方法的一个更优选实施方式，步骤e)在醇的沸点的温度(即在回流温度)进行。根据本发明方法的一个优选实施方式，步骤e)在乙醇的沸点下用与式(viii)化合物相比10体积的乙醇进行。根据本发明方法的一个优选实施方式，在步骤e)中进一步添加助滤剂和/或活性炭。根据本发明方法的一个更优选实施方式，在步骤e)中进一步添加活性炭。在制备步骤e)的溶液后，在步骤f)中，过滤所述溶液以去除式(iv)和/或式(v)的二聚体杂质。可以在滤纸、或滤纸板或硅藻土板上过滤步骤e)中制备的溶液。本发明方法的步骤f)可以在40℃至醇的沸点之间的温度进行。根据本发明方法的一个优选实施方式，步骤f)在醇的沸点进行。根据本发明方法的一个优选实施方式，在步骤f)中，进一步用在已进行过滤的相同温度预热的c1-c4醇溶剂洗涤过滤器。不溶性的式(iv)和(v)的杂质以固体物质形式保留在过滤器上，并且在如下情形下，即其中在步骤e)中进一步添加助滤剂和/或活性炭或在步骤f)中在硅藻土板上进行过滤，这些物质也被包含在滤饼上。任选地，特别是在纯化的式(viii)化合物中式(iv)和(v)的残余杂质仍高于0.10％的情形下，可以在步骤h)中以固体形式分离纯化的式(viii)化合物并且可以通过重复步骤e)至g)一次或多次来进一步纯化。在步骤i)中，根据已知的现有技术方法(如syntheticcommunications,43；72-79,2013或wo2007/001385中公开的方法)将步骤g)或h)中获得的纯化的式(viii)化合物转化为式(i)阿哌沙班。根据本发明方法的一个优选实施方式，阿哌沙班包含少于0.10％的以下阿哌沙班的二聚体杂质：下式(iii)的(z)-1,2-双(4-(3-氨甲酰基-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5-二氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-6(7h)-基)苯基)二氮烯氧化物：其中在步骤b)中去除式(vii)的二聚体杂质，或者在步骤f)中去除式(v)的杂质。式(iii)的二聚体杂质和其前体具有特定的结构，因为其携带电子电荷而使其更具极性，所以其更难溶于有机溶剂中，并且同时，其因此能更容易地在本发明的步骤b)或f)中被去除。根据本发明方法的一个优选实施方式，阿哌沙班包含少于0.01％的式(ii)和/或式(iii)的二聚体杂质。根据本发明方法的一个优选实施方式，阿哌沙班含有通过hplca/a％测定的0.00％至0.02％的式(ii)和/或式(iii)的二聚体杂质，并且所述方法包括将式(ix)化合物转化为阿哌沙班，并且其中所述式(ix)化合物包含通过hplca/a％测定的在0.1％至2％之间的量的式(vi)和/或式(vii)的二聚体杂质。根据本发明方法的一个优选实施方式，阿哌沙班含有通过hplca/a％测定的0.02％至0.10％的式(ii)和/或式(iii)的二聚体杂质，并且所述方法包括将式(ix)化合物转化为阿哌沙班，并且其中所述式(ix)化合物包含通过hplca/a％测定的在2％至5％之间的量的式(vi)和/或式(vii)的二聚体杂质。具体地，从包含2％至5％的量的式(vi)和/或式(vii)的二聚体杂质的式(ix)化合物开始，遵循如先前所述包含步骤a)、b)、c)和d)的本发明方法，获得含有0.02％至0.10％的式(ii)和/或式(iii)的二聚体杂质的阿哌沙班。根据本发明方法的一个优选实施方式，在步骤d)或步骤i)中获得的阿哌沙班具有n-1形式。阿哌沙班n-1形式是指具有被称为n-1的多晶型物形式的阿哌沙班，所述多晶型物形式为被充分表征和制备的固体形式，在ep3009435的实施例中，所述形式被定义为是阿哌沙班的热力学稳定形式。此外，特别是在所述申请的实验部分实施例3中通过若干种技术(如ft-ir、dsc、tga和x-rpd)表征阿哌沙班形式n-1，其数据以引用的方式被包括在本文中。根据本发明方法的一个优选实施方式，所述方法包括以下步骤a)、b)、c)，从而获得纯化的化合物(ix)，并且包含连续步骤e)、f)、g)、h)、i)，因此获得式(i)的阿哌沙班。实际上，通过进行步骤a)至c)和进行步骤e)至i)二者，有可能在阿哌沙班中实现最低水平的式(ii)和/或(iii)的杂质。具体地，所述式(ii)和/或式(iii)的二聚体杂质的水平进一步减少是因为组合使用本发明方法的所有步骤。这些结果借助于以下方法获得，从步骤a)开始，在步骤b)中进行过滤以去除式(vi)二聚体杂质和/或式(vii)二聚体杂质，最后获得包含纯化的式(ix)化合物的溶液。将最新的化合物转化为式(viii)化合物，在步骤e)接着步骤f)后，过滤式(viii)化合物以去除式(iv)二聚体杂质和/或式(v)二聚体杂质，因此在步骤g)中获得包含纯化的式(viii)化合物的溶液，任选地可以进行步骤h)，最后在步骤i)中将化合物(viii)转化为式(i)阿哌沙班，因此其含有少量的式(ii)二聚体杂质和或式(iii)二聚体杂质。具体地，已经描述的包含步骤a)、b)、c)和d)的本发明方法是优选的，因为其允许较早地减少二聚体杂质，即在制备阿哌沙班的方法的早期步骤中减少二聚体杂质的量，从而避免了携带二聚体杂质经过合成过程并且避免了具有较高附加价值的更高级中间物的损失。此外，包含步骤a)、b)、c)和d)的所述方法是优选的，因为其更有效地减少了二聚体杂质，特别是式(vi)二聚体杂质和式(vii)二聚体杂质，即其以更高的程度从二聚体杂质提供纯化。在开发本发明方法期间，已经发现一些杂质的存在，在合成期间很难去除，并且最后污染最终的药物产品阿哌沙班。具体地，已经在合成早期观察到污染式(ix)和(viii)的合成前体中间物的杂质的存在，其为在hplc色谱中具有高的相对保留时间的杂质。因此，本发明的另一惊讶方面是发现所述杂质在阿哌沙班和其前体中的存在，并且惊讶地发现了所述杂质的性质、结构和来源。实际上，已经惊讶地发现，在借助于硫化钠进行的式(xi)化合物向式(x)化合物转化期间：式(vi)和(vii)的二聚体杂质作为所述反应的副产物形成：此外，已经惊讶地发现，所述杂质经过阿哌沙班合成过程前进，进行相同的化学转化，从而产生式(viii)化合物的式(iv)和(v)的二聚体杂质，接着产生化合物阿哌沙班的式(ii)和(iii)的二聚体杂质。图1描绘了阿哌沙班合成过程中杂质的来源和携带情况。此外，考虑到杂质的所述携带，前述包含步骤a)、b)、c)和d)的方法具有如下优点：在合成早期减少二聚体杂质，即减少了进入式(ix)化合物的式(vi)二聚体杂质和/或式(vii)二聚体杂质的量，从而减少了后续中间物和阿哌沙班中相应的相关二聚体杂质。因此，本发明一方面是阿哌沙班或其前体的二聚体杂质，其选自以下的组：a)下式(ii)的(e)-6,6'-(4,4'-(二氮烯-1,2-二基)双(4,1-亚苯基))双(1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-3-甲酰胺)：b)下式(iii)的(z)-1,2-双(4-(3-氨甲酰基-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5-二氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-6(7h)-基)苯基)二氮烯氧化物：c)下式(vi)的(e)-1,1'-(4,4'-(二氮烯-1,2-二基)双(4,1-亚苯基))双(3-吗啉基-5,6-二氢吡啶-2(1h)-酮)：d)下式(vii)的(z)-1,2-双(4-(3-吗啉基-2-氧代-5,6-二氢吡啶-1(2h)-基)苯基)二氮烯氧化物：e)下式(iv)的(e)-6,6'-(4,4'-(二氮烯-1,2-二基)双(4,1-亚苯基))双(1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯)：f)下式(v)的(z)-1,2-双(4-(3-(乙氧基羰基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5-二氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-6(7h)-基)苯基)二氮烯氧化物：上述阿哌沙班或其前体的二聚体杂质为黄色粉末。具体地，图3和图4中报道了通过hplc/dad检测器获得的阿哌沙班的二聚体杂质的uv-vis谱。因此，二聚体杂质是阿哌沙班有颜色的原因。具体地，所述杂质赋予阿哌沙班以黄色。因此，期望阿哌沙班不含所述杂质而显示白色。另一方面，已经发现阿哌沙班和其前体的所述二聚体杂质，特别是式(ii)和(iii)的阿哌沙班的杂质，特别不溶于任何溶剂。下式(iii)的(z)-1,2-双(4-(3-氨甲酰基-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5-二氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-6(7h)-基)苯基)二氮烯氧化物：其为式(i)阿哌沙班的优选二聚体杂质。所述杂质为黄色粉末。具体地，所述式(iii)的二聚体杂质具有如下uv谱，如图4所示，其在360-370nm处显示较高的吸收。因此，所述二聚体杂质为显示亮黄色的物质。化学反应的产物很少为纯度足以满足管理标准的单一化合物。反应中所用试剂的副反应所产生的副产物也可能存在于分离的产物中。在活性成分(如阿哌沙班)生产过程的一些步骤中，一般借助于高效液相色谱法(hplc)、lc/ms、气相色谱法(gc)或薄层色谱法(tlc)分析纯度，以确定其是否适用于后续处理并且最后适用于药物产品。一般来说，杂质用光谱法进行识别，因此将色谱峰位置(如色谱图的峰位置)或tlc板上的斑点与其关联。将峰位置与特定杂质关联之后，样品中的杂质可以就其在色谱中的相对位置进行识别，其中色谱中的位置用在柱中注入样品与杂质洗脱通过检测器之间的分钟数测量。色谱中的位置已知为保留时间并且保留时间之间的比率已知为相对保留时间。药物领域的技术人员知晓相对纯的化合物可以用作参考标准物。参考标准物类似于参考标志物，但前者不仅可以用于检测杂质，而且可以用于定量活性成分的样品中所存在的杂质的量。如本领域技术人员所已知，过程杂质的控制通过了解其化学结构、合成途径和识别影响最终产品中杂质的量的参数(例如借助于doe)而大大改善。阿哌沙班的杂质，包括未完全反应的中间物、原材料的杂质、反应副产物、降解产物以及其它产物，可能影响含有阿哌沙班的药物形式的质量和效率。因此，需要一种确定杂质水平的方法，其中特别关注阿哌沙班样品中阿哌沙班的二聚体杂质，特别是大量生产药物阿哌沙班时。因此，发现了一种测定阿哌沙班中的下式(ii)和/或下式(iii)的阿哌沙班的二聚体杂质的方法：实际上，式(ii)和/或式(iii)的二聚体杂质可以根据以下分析方法使用：在阿哌沙班中识别和/或定量式(ii)和式(iii)的所述二聚体杂质。一种用于检测或识别阿哌沙班中的式(ii)和/或式(iii)的二聚体杂质的方法，其包括以下步骤：a)向阿哌沙班样品中添加已知量的式(ii)和/或式(iii)的二聚体杂质，b)对步骤a)的阿哌沙班样品进行hplc或lc/ms分析，c)检测式(ii)和/或式(iii)的二聚体杂质的hplc或lc/ms峰；或，a1)借助于hplc或lc/ms分析式(ii)和/或式(iii)的二聚体杂质，b1)借助于hplc或lc/ms分析阿哌沙班样品，c1)通过比较保留时间或相对保留时间来检测式(ii)和/或式(iii)的二聚体杂质的hplc或lc/ms峰；或借助于lc/ms分析检测[m+1]+等于751或767amu的峰来检测。除识别阿哌沙班中的杂质峰以外，根据本发明的另一方面，还已发现一种定量阿哌沙班中的下式(ii)和/或下式(iii)的阿哌沙班的二聚体杂质的方法：其包括以下步骤：a)借助于hplc或lc/ms测量阿哌沙班样品中对应于式(ii)和/或式(iii)的每个单一二聚体杂质的峰面积，所述阿哌沙班样品具有未知量的这些化合物，b)借助于hplc或lc/ms测量对应于含有已知量的式(ii)和/或式(iii)的二聚体杂质的“参考标准物”的峰面积，c)通过比较步骤a)中测量的面积与步骤b)中测量的面积来确定阿哌沙班中二聚体杂质的量。根据本发明方法的一个优选实施方式，用于测定阿哌沙班中的下式(iii)的阿哌沙班的二聚体杂质的方法：和用于定量阿哌沙班中的式(iii)二聚体杂质的方法包括前述每一个步骤，分别地，对于用于测定阿哌沙班中二聚体杂质的方法，包含a)至c1)，并且对于用于定量阿哌沙班中二聚体杂质的方法，包含a)至c)。本发明的另一方面在于以下阿哌沙班的二聚体杂质：a)式(ii)二聚体杂质：b)式(iii)二聚体杂质：可以用作用于识别和/或定量式(i)阿哌沙班中的所述二聚体杂质的“参考标志物”或“参考标准物”：根据本发明方法的一个优选实施方式，阿哌沙班的二聚体杂质为式(iii)的二聚体杂质：其可以用作用于识别和/或定量式(i)阿哌沙班中的所述二聚体杂质的“参考标志物”或“参考标准物”。此外，以下二聚体杂质可以用作用于识别和/或定量以下相关化合物中的所述二聚体杂质的“参考标志物”或“参考标准物”：c)在下式(x)的化合物中：式(iv)二聚体杂质和/或式(v)二聚体杂质：d)在下式(xi)的化合物中：式(vi)二聚体杂质和/或式(vii)二聚体杂质：根据本发明方法的一个优选实施方式，通过lc/ms执行用于定量阿哌沙班中的在1至100百万分率之间的量的下式(ii)和/或下式(iii)的阿哌沙班的二聚体杂质的量的方法：根据本发明的另一方面，式(ii)和/或式(iii)的阿哌沙班的二聚体杂质：可以根据包括以下步骤的方法制备：a)制备式(ix)的3-吗啉基-1-(4-(2-氧代哌啶-1-基)苯基)-5,6-二氢吡啶-2(1h)-酮在c1-c3醇与水的混合物中的溶液：b)过滤步骤a)中制备的溶液，c)收集过滤器上的固体，其包含以下二聚体杂质：式(vi)二聚体杂质和/或式(vii)二聚体杂质：d)分离式(vi)和(vii)的二聚体杂质，e)将步骤d)的式(vi)和/或式(vii)的杂质转化为式(ii)和/或(iii)的阿哌沙班的二聚体杂质。或替代地，用以下步骤代替步骤a)至e)：f)制备式(viii)的1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(4-(2-氧代哌啶-1-基)苯基)-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯在c1-c4醇中的溶液：g)过滤步骤f)中制备的溶液，h)收集过滤器上的固体，其包含以下二聚体杂质：式(iv)二聚体杂质和/或式(v)二聚体杂质：i)分离式(iv)和/或式(v)的二聚体杂质，j)将步骤i)的式(iv)化合物和/或化合物(v)转化为式(ii)和/或式(iii)的阿哌沙班的二聚体杂质。分离步骤d)和i)可以借助于色谱分离(如通过制备型hplc、制备型tlc或通过传统色谱柱)进行。在后者的情形下，可以方便地用硅胶填充传统色谱柱，并且通过用庚烷/acoet的混合物，优选梯度洗脱，使化合物分离。将步骤d)的式(vi)和/或式(vii)的杂质转化为式(ii)和/或(iii)的阿哌沙班的二聚体杂质的步骤e)遵循现有技术中公开的将式(ix)化合物转化为式(viii)化合物的相同方法，其显著差异为用式(vi)和/或式(vii)的杂质代替起始材料，即化合物(ix)。具体地，遵循这个方法，得到式(iv)杂质和/或式(v)杂质。随后，将最后获得的杂质(iv)和/或(v)转化为式(ii)和/或(iii)的阿哌沙班的杂质遵循现有技术中公开的将式(viii)化合物转化为式(i)化合物的相同方法进行，其显著差异为用式(iv)和/或式(v)的杂质代替起始材料，即化合物(viii)。现有技术关于制备阿哌沙班的方法，包括通过用硫化钠还原来制备式(x)化合物，如syntheticcommunications,43；72-79,2013中公开的方法，提供含有在0.28％至1.0％之间的量的式(ii)和(iii)的杂质的阿哌沙班。本发明的另一方面为阿哌沙班自身，因为本发明方法允许制备含有通过hplca/a％测定的0.00％至0.10％的式(ii)和/或式(iii)的二聚体杂质的阿哌沙班；所述量受限于式(vi)和/或(vii)的第一杂质的起始量，其在制备式(x)化合物期间产生并且被带入式(ix)化合物中而不改变化学结构和相对量。具体地，从式(ix)化合物中存在的在5％至2％之间的量的式(vi)和/或式(vii)的二聚体杂质开始，遵循本发明方法，特别是步骤a)至d)，允许将所述二聚体杂质减少或去除，达到阿哌沙班中包含通过hplca/a％测定的0.10％至0.02％的量的式(ii)和/或(iii)的杂质的程度。替代地，从式(ix)化合物中存在的包含在2％至0％之间的量的式(vi)和/或式(vii)的二聚体杂质开始，遵循本发明方法，特别是步骤a)至d)，可以将所述二聚体杂质减少或去除，达到阿哌沙班中包含通过hplca/a％测定的0.02％至0.00％的量的式(ii)和/或(iii)的杂质的程度(参见图2)。因此，本发明的另一方面为最终产物阿哌沙班，通过hplca/a％测定，其具有极少量的式(ii)和/或式(iii)的二聚体杂质。因此，具体地，本发明的另一方面为含有通过hplca/a％测定的0.02％至0.10％的式(ii)和/或式(iii)的二聚体杂质的阿哌沙班，所述阿哌沙班通过步骤a)至d)的本发明的方法获得，所述步骤包括将包含通过hplca/a％测定的在5％至2％之间的量的式(vi)和/或式(vii)的二聚体杂质的式(ix)化合物转化为阿哌沙班。根据另一方面，通过hplca/a％测定，含有0.02％至0.10％的式(ii)和/或式(iii)的二聚体杂质的阿哌沙班通过本发明的步骤e)至i)的方法获得，所述方法包括将包含通过hplca/a％测定的在2％至5％之间的量的式(iv)和/或式(v)的二聚体杂质的式(viii)化合物转化为阿哌沙班。在这种情形下，必须执行重复纯化步骤的任选步骤h)一次或多次。图1显示合成阿哌沙班的总流程，其包括以杂质的化学结构和量的形式表示的所述杂质经过所述合成过程的携带情况，所述量基于现有技术方法。通过比较显示合成阿哌沙班的总流程的图2，所述流程包括根据本发明的方法(步骤a)至d))，本发明产生的作用很明显，因为中间物(ix)中并且接着最终阿哌沙班中的杂质的量比现有方法中低得多(参见图1)。注意到，经过所述方法的式(iv)和式(v)的杂质的量似乎增加，特别是在将式(ix)化合物转化为化合物(viii)期间。这是因为与分子(vi)和(vii)相比，分子(iv)和(v)的芳香性增加，所以产生增加的吸附，即检测器的响应增加。因此，这种增加仅仅是表面的，并非所述杂质实际量的真实情况。作为本发明的另一方面，应该考虑到阿哌沙班的二聚体杂质包含偶氮或氧化偶氮官能团，从而为偶氮或氧化偶氮化合物，因此，根据2006年emea颁布的“guidelineonthelimitsofgenotoxicimpurities”和2014年6月23日颁布的线路指南ichm7的规定，很可能存在严重的致癌风险。实际上，氧化偶氮化合物是一组具有通式结构rn＝n+(o-)r的共同官能团的化合物，所述官能团存在于一些阿哌沙班的二聚体杂质中，即式(vii)二聚体杂质，式(v)二聚体杂质和式(iii)二聚体杂质。因此，必须发出与所述二聚体杂质的潜在遗传毒性有关的警报。实验部分化合物使用iupac命名法的基本规则命名。质子磁共振(nmr)谱在varian仪器上在400mhz或在bruker仪器上在300mhz和400mhz记录。使用残余溶剂线作为内标，以ppm(δ)报告化学位移。分裂峰图形被称为s，单峰；d，双重峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；b，宽峰。nmr谱在20℃至30℃范围内的温度记录。紫外线-可见光(uv-vis)通过hplc/dad检测器获得。下表列出所用缩写：t温度eq.当量tea三乙胺thf四氢呋喃nmr核磁共振hplc高效液相色谱法lc-ms液相色谱-质谱法uv-vis紫外线-可见光dad二极管-阵列检测器实施例1：制备包含以下相关二聚体杂质的式(ix)化合物：式(vi)的(e)-1,1'-(4,4'-(二氮烯-1,2-二基)双(4,1-亚苯基))双(3-吗啉基-5,6-二氢吡啶-2(1h)-酮)和式(vii)的(z)-1,2-双(4-(3-吗啉基-2-氧代-5,6-二氢吡啶-1(2h)-基)苯基)二氮烯氧化物：比较实施例合成流程：式(x)化合物可以根据journalsyntheticcommunication,2013,第43卷,第72-79页，特别是根据第76页题为“1-(4-aminophenyl)-3-(morpholin-4-yl)-5,6-dihydropyridin-2(1h)-one(13)”的段落中公开的方法，从式(xi)化合物开始制备。因此，式(x)化合物根据以下方法制备。在t＝40/45℃下，在20分钟内，将九水合硫酸钠(197g，2.5eq.)在水(350ml)中的溶液加入到式(xi)化合物(100g，1.0eq.)与甲醇(1000ml)的混合物中。在t＝40/45℃下搅拌混合物另外2小时以实现反应完成。接着在减压和tmax＝45℃下蒸馏混合物，直到去除900ml溶剂。将所得浆液冷却到t＝20/25℃，在此温度保持搅拌2小时，接着过滤，用水(2×100ml)洗涤湿滤饼。在减压和t＝65℃下干燥10小时后，获得83g式(x)化合物(92％产率，hplca％：式(x)化合物96.09％)。如此获得的所述式(x)化合物含有以下二聚体杂质：-0.48％(hplca/a％)式(vi)二聚体杂质，-1.39％(hplca/a％)式(vii)二聚体杂质。向4颈圆底烧瓶中装入60g所述式(x)化合物(1.0eq.)(如上所述制备并且含有式(vi)和式(vii)的杂质)、然后装入51.1g三乙胺(tea)(2.3当量)和600ml四氢呋喃(thf)。在t＝0/5℃下，在1-2小时内加入51g氯戊酰氯(1.5当量)在120mlthf中的溶液。在t＝0/5℃下搅拌混合物另外30分钟，之后维持相同温度，在30-45分钟内加入73.9g叔丁醇钾(3.0eq.)在300mlthf中的溶液。在t＝0/5℃下搅拌30分钟后，将混合物温至t＝20/25℃后再维持2小时。检验到反应完成后，在减压和tmax＝35℃下蒸馏批料到残余4体积(240ml)。用480ml水稀释所得浆液并且在相同条件下再次蒸馏到残余9体积(900ml)。在t＝20/25℃下搅拌混合物至少2小时，接着过滤，用水(2×60ml)洗涤湿滤饼。在减压和t＝65℃下干燥至少8小时后，获得64g式(ix)化合物(摩尔产率82％)。此固体含有以下二聚体杂质：-0.17％(hplca/a％)式(vi)二聚体杂质，-1.9％(hplca/a％)式(vii)二聚体杂质。实施例2：制备下式(ix)化合物，本发明的实施例合成流程：式(x)化合物可以根据journalsyntheticcommunication,2013,第43卷,第72-79页，特别是第76页题为“1-(4-aminophenyl)-3-(morpholin-4-yl)-5,6-dihydropyridin-2(1h)-one(13)”的段落中公开的方法，从式(xi)化合物开始制备。因此，根据以下方法制备式(x)化合物。在t＝40/45℃下，在45分钟内，将九水合硫酸钠(197g，2.5eq.)在水(350ml)中的溶液加入到式(xi)化合物(100g，1.0eq.)与甲醇(1000ml)的混合物中。在t＝40/45℃下搅拌混合物另外2小时以实现反应完成。接着在减压和tmax＝45℃下蒸馏混合物，直到去除930ml溶剂。将所得浆液冷却到t＝20/25℃，在此温度保持搅拌1小时，接着过滤，用水(2×100ml)洗涤湿滤饼。在减压和t＝65℃下干燥10小时后，获得82g式(x)化合物(91％产率，hplca％：式(x)化合物96.16％)。如此获得的所述式(x)化合物含有以下二聚体杂质：-0.66％(hplca/a％)式(vi)二聚体杂质，-1.50％(hplca/a％)式(vii)二聚体杂质。向4颈圆底烧瓶中装入80g所述式(x)化合物(1.0eq.)(如上所述制备并且含有式(vi)和式(vii)的杂质)、然后装入68.3g三乙胺(tea)(2.3当量)和800ml四氢呋喃(thf)。在t＝0/5℃下，在1-2小时内加入68.3g氯戊酰氯(1.5当量)在160mlthf中的溶液。在t＝0/5℃下搅拌混合物另外30分钟，之后维持相同温度，在30-45分钟内加入98.1g叔丁醇钾(3.0eq.)在400mlmlthf中的溶液。在t＝0/5℃下搅拌30分钟后，将混合物温至t＝20/25℃后维持另外2小时。检验到反应完成后，在减压和tmax＝35℃下蒸馏批料到残余6体积(480ml)，接着在相同条件下再次用560ml乙醇抽提到残余6体积(480ml)。用720ml乙醇和880ml水稀释所得混合物，接着将所得乳白色溶液加热到t＝40/45℃并且在硅藻土上过滤，用80ml预热的乙醇洗涤(此固体滤饼为实施例3的起始材料)。在减压下蒸馏滤过的溶液到残余6体积(480ml)。将混合物冷却到t＝20/25℃并且在此温度搅拌至少1小时。最后过滤浆液，用水(2×80ml)洗涤湿滤饼。在减压和t＝65℃下干燥至少8小时后，获得90.3g式(ix)化合物(摩尔产率86.8％)。获得的此固体含有以下二聚体杂质：-0.04％(hplca/a％)式(vi)二聚体杂质，-0.09％(hplca/a％)式(vii)二聚体杂质。实施例3：制备下式(vi)和下式(vii)的二聚体杂质向装备有dean-stark装置的圆底烧瓶中装入在乙醇溶液中收集到的不溶性物质(实施例2的固体滤饼，其包含硅藻土和式(vi)和式(vii)的二聚体杂质)并且悬浮在600ml甲苯中。将混合物加热到回流以去除水，直到达到溶剂沸点。将混合物冷却到t＝80/90℃并且过滤。收集固体，其包括式(vi)和式(vii)的二聚体杂质和硅藻土，装入圆底烧瓶中并且添加500ml二氯甲烷。将混合物加热到回流并且过滤，用二氯甲烷(4×100ml)洗涤。接着在减压下浓缩溶液，得到残余物，并且用丙酮溶解残余物以获得可搅拌的浆液。过滤悬浮液，得到5.8g黄色固体，在hplc分析后(图2)，得到以下两种物质的混合物：-16.9％(hplca/a％)式(vi)二聚体杂质，-80.5％(hplca/a％)式(vii)二聚体杂质。还通过nmr分析混合物；因为所述两种杂质的区别仅在于重氮基的氧化态不同，因此它们的1h化学位移重叠并且所得谱图表现为单一物质的光谱。1h-nmr(400mhz,cdcl3,ppm),d:8.32(dd,j1＝8hz,j2＝24hz4h),7.53(m,4h),5.76(bs,2h),3.88(m,12h),2.96(m,8h),2.57(m,4h)。13c-nmr和dept135nmr谱上的芳族碳显示部分不对称性，而两种物质的脂族碳和羰基显示相同的化学位移(100mhz,cdcl3,ppm),d:161.4(c),145.7(c),145.1(c),143.8(c),143.7(c),143.6(c),141.3(c),126.3(ch),125.1(ch),124.6(ch),124.5(ch),123.3(c),122.8(ch),115.1(ch),114.7(ch),66.8(ch2),50.6(ch2),48.5(ch2),23.4(ch2)。hplc-ms：11.3minesi-msm/z＝559(式(vii)二聚体杂质mw558[m+h]+),11.9minesi-msm/z＝543(式(vi)二聚体杂质mw542[m+h]+)。实施例4：从实施例2的式(ix)化合物开始制备式(i)化合物。本发明对阿哌沙班的作用。合成流程：式(viii)化合物可以根据journalsyntheticcommunication,2013,第43卷,第72-79页，特别是第78页题为“ethyl1-(4-methoxyphenyl)-7-oxo-6-(4-(2-oxopiperidin-1-yl)phenyl)-4,5,6,7-tetrahydro-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridine-3-carboxylate(2)”的段落中公开的方法，从根据实施例2制备的式(ix)化合物开始制备。随后，根据ep申请ep14189007.9的实施例11或wo2007/001385的实施例6中所述的方法进行制备，获得式(i)化合物阿哌沙班，其包含以下阿哌沙班的二聚体杂质：-0.00％的以下结构(ii)的(e)-6,6'-(4,4'-(二氮烯-1,2-二基)双(4,1-亚苯基))双(1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-3-甲酰胺)：-0.01％的以下结构(iii)的(z)-1,2-双(4-(3-氨甲酰基-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5-二氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-6(7h)-基)苯基)二氮烯氧化物：实施例5：从实施例1的式(ix)化合物开始制备式(viii)化合物。比较实施例。合成流程：式(viii)化合物可以根据journalsyntheticcommunication,1013,第43卷,第71-79页，特别是第78页题为“ethyl1-(4-methoxyphenyl)-7-oxo-6-(4-(2-oxopiperidin-1-yl)phenyl)-4,5,6,7-tetrahydro-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridine-3-carboxylate(2)”的段落中公开的方法，从根据实施例1制备的式(ix)化合物开始制备。获得的式(viii)化合物含有以下二聚体杂质：-0.59％的以下结构(iv)的(e)-6,6'-(4,4'-(二氮烯-1,2-二基)双(4,1-亚苯基))双(1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯)：-1.61％的以下结构(v)的(z)-1,2-双(4-(3-(乙氧基羰基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5-二氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-6(7h)-基)苯基)二氮烯氧化物：实施例6：式(viii)化合物的纯化。本发明的效果。向4颈圆底烧瓶中装入10g1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(4-(2-氧代哌啶-1-基)苯基)-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(0.02mol)(式(viii)化合物)，其含有0.21％(hplca/a％)式(iv)的二聚体和0.10％(hplca/a％)式(v)二聚体杂质。将所述化合物悬浮在100ml乙醇中并且将混合物加热到回流，产生乳白色溶液。添加活性炭(1g)，并且回流另外30分钟后，趁热过滤混合物，用预热的乙醇(2×20ml)洗涤。将滤过的溶液冷却到t＝20/25℃并且在此温度搅拌至少2小时。接着过滤浆液，用乙醇(2×10ml)洗涤滤饼。在t＝65℃下在真空下干燥湿固体。所得的7.0g式(viii)化合物(70％摩尔产率)含有：-0.06％(hplca/a％)式(iv)的(e)-6,6'-(4,4'-(二氮烯-1,2-二基)双(4,1-亚苯基))双(1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯)-0.03％(hplca/a％)式(v)的(z)-1,2-双(4-(3-(乙氧基羰基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5-二氢-1h-吡唑并[3,4-c]吡啶-6(7h)-基)苯基)二氮烯氧化物。实施例7：式(viii)化合物的纯化。本发明的效果。从含有0.59％(hplca/a％)式(iv)二聚体和1.80％(hplca/a％)式(v)二聚体杂质的式(viii)化合物开始重复所述实施例。所得式(viii)化合物含有：-0.11％(hplca/a％)式(iv)二聚体杂质-0.36％(hplca/a％)式(v)二聚体杂质。可以通过重复实施例6中所述程序一次或多次来进一步纯化所述化合物(viii)。实施例8：测定以下物质的量的分析方法：-式(ix)和(x)的化合物中式(vi)和式(vii)的二聚体杂质，-式(viii)化合物中式(iv)和式(v)的二聚体杂质，-式(i)阿哌沙班中式(ii)和式(iii)的二聚体杂质。所述化合物可以通过以下hplc方法识别和监视：色谱条件：采用上述条件，预期的保留时间如下所示：化合物保留时间相对保留时间式(ix)化合物8.02min1.14式(x)化合物4.70min0.67式(xi)化合物6.30min0.90式(vi)二聚体杂质11.67min1.66式(vii)二聚体杂质11.10min1.58式(viii)化合物11.37min1.62式(iv)二聚体杂质18.31min2.60式(v)二聚体杂质17.75min2.52式(i)阿哌沙班7.03min1.00式(ii)二聚体杂质12.31min1.75式(iii)二聚体杂质12.00min1.71关于式(i)、(viii)、(ix)和(x)的化合物的说明书和实施例中所述的二聚体杂质的量，特别是用hplca/a％表示的量，可以根据本实施例8中所述的hplc方法进行。用于测定阿哌沙班的二聚体杂质的lc-ms方法。lc参数实施例9：从式(vi)二聚体杂质与式(vii)二聚体杂质的混合物开始制备式(iv)二聚体杂质和式(v)二聚体杂质。合成流程：向圆底烧瓶中加入：通过重做实施例2和3以大规模制备的式(vi)二聚体杂质与式(vii)二聚体杂质的混合物(14g，25mmol，1.0eq.，考虑式(vii)二聚体杂质物质的分子量)、式(xii)化合物(90g，350mmol，7.0eq.)、三乙胺(76g，750mmol，15.0eq.)、碘化钾(8.5g，51mmol，1.0eq.)和乙酸乙酯(1960ml)。将悬浮液加热到回流并且搅拌16小时，接着冷却到t＝20/25℃并且过滤以去除不溶性物质，用乙酸乙酯(3×20ml)洗涤滤饼。在t＝20/25℃下向所得溶液中缓慢添加32％hcl水溶液(72ml，d＝1.16g/ml)并且在此温度搅拌混合物30分钟。过滤浆液并且在t＝20/25℃下将所收集的湿固体悬浮在碳酸钠饱和溶液(50ml)中。在此温度搅拌30min后，过滤混合物并且依序用碳酸钠饱和溶液(50ml)和水(20ml)洗涤湿滤饼。在减压和t＝65℃下干燥8小时后，获得8.4g二聚体杂质混合物(40％产率，hplca％：式(v)的二聚体(mw824)71.3％；式(iv)的二聚体(mw808)12.2％hplca/a％)。实施例10：从式(iii)二聚体杂质和式(ii)二聚体杂质开始制备式(v)二聚体杂质和式(iv)二聚体杂质。合成流程：向1l不锈钢高压釜中加入来自以大规模进行实施例9获得的式(iv)二聚体杂质与式(v)二聚体杂质的混合物(15g，18.5mmol，1.0eq.，考虑式(v)的mw824二聚体杂质物质的分子量)和丙二醇(600ml)。氮气吹扫后，在t＝20/25℃下，加入氨至p＝1.5/2.0巴的稳定内部压力。接着将混合物加热到t＝120℃，使内部压力达到p＝9巴。在此温度40小时后，将混合物冷却到t＝20/25℃并且用丙二醇(30ml)、水(360ml)和乙醇(90ml)稀释。在t＝20/25℃下搅拌所得浆液1小时，最后过滤，用水(60ml)洗涤滤饼。在减压和t＝65℃下干燥湿材料8小时，得到10.3g二聚体杂质混合物(74％产率，hplca％：式(iii)的二聚体mw76648.53％；式(ii)的二聚体mw75034.6％)。实施例11：二聚体杂质混合物的色谱分离和单一杂质的分析测试。分离以下二聚体杂质的分析方法和每个单一二聚体杂质的表征：1.式(vi)二聚体杂质与式(vii)二聚体杂质的混合物，2.式(iv)二聚体杂质与式(v)二聚体杂质的混合物3.式(ii)二聚体杂质与式(iii)二聚体杂质的混合物。1.式(vi)二聚体杂质与式(vii)二聚体杂质的混合物的色谱分离实施例3中获得的所述混合物的分离通过制备型hplc(agilenttechnologies1200系列)采用以下条件实现：色谱条件：式(vii)二聚体杂质的表征保留时间：11.8min(借助于上述色谱条件获得)。lc-ms(esi+)：m/z＝559,[m+h]+1hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):8.34(d,j＝8.8hz,2h)；8.27(d,j＝8.8hz,2h)；7.51(m,4h)；5.73(m,2h)；3.85(m,12h)；2.93(m,8h)；2.56(m,4h)。13c和dept135nmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):161.3(c)；145.6(c)；145.05(c)；143.7(c)；143.6(c)；143.5(c)；141.3(c)；126.3(ch)；124.6(ch)；124.5(ch)；122.7(ch)；115.2(ch)；114.9(ch)；66.7(ch2)；50.5(ch2)；48.4(ch2)；23.4(ch2)。uv-vis光谱：在350-360nm下具有最大吸收值。式(vi)二聚体杂质的表征保留时间：14.3min(借助于上述色谱条件获得)。lc-ms(esi+)：m/z＝543,[m+h]+1hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):8.00(m,4h)；7.56(m,4h)；5.37(m,2h)；3.73(m,12h)；3.27(m,8h)；2.96(m,4h)。2.式(iv)二聚体杂质与式(v)二聚体杂质的混合物的色谱分离实施例9中获得的所述混合物的分离通过制备型hplc(agilenttechnologies1200系列)采用以下条件实现：色谱条件：式(v)二聚体杂质的表征保留时间：3.0min(借助于上述色谱条件获得)。lc-ms(esi+)：m/z＝825,[m+h]+1hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):8.32(d,j＝9.2hz,2h)；8.24(d,j＝9.2hz,2h)；7.48(m,8h)；6.95(dd,j1＝8.8hzj2＝2hz,4h)；4.49(q,j＝6.8hz,4h)；4.21(m,4h)；3.84(s,6h)；3.36(m,4h)；1.46(t,j＝6.8hz,6h)。13c和dept135nmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):162.1(c)；162.0(c)；160.0(c)；159.9(c)；157.1(c)；145.5(c)；144.7(c)；142.5(c)；141.7(c)；139.1(c)；139.0(c)；126.94(ch)；126.93(ch)；126.4(ch)；125.2(ch)；125.1(ch)；122.79(ch)；113.73(ch)；113.71(ch)；61.33(ch2)；61.29(ch2)；55.5(ch3)；50.9(ch2)；21.6(ch2)；14.4(ch3)；uv-vis光谱：在356-360nm下具有最大吸收值。式(iv)二聚体杂质的表征保留时间：4.0min(借助于上述色谱条件获得)。lc-ms(esi+)：m/z＝809,[m+h]+1hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):7.94(d,j＝8.8hz,4h)；7.50(m,8h)；6.95(d,j＝9.2hz,4h)；4.49(q,j＝7.2hz,4h)；4.22(m,4h)；3.84(s,6h)；3.36(m,4h)；1.46(t,j＝7.2hz,6h)。uv-vis光谱：在356-360nm下具有最大吸收值。3.式(ii)二聚体杂质与式(iii)二聚体杂质的混合物的色谱分离实施例10中获得的所述混合物的分离通过制备型hplc(agilenttechnologies1200系列)采用以下条件实现：色谱条件：因为这些物质的低溶解性，制备5mg/ml溶液并且过滤不溶性物质以获得澄清溶液。式(iii)二聚体杂质的表征保留时间：13.6min(借助于上述色谱条件获得)。lc-ms(esi+)：m/z＝767,[m+h]+1hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):8.28(d,j＝9.2hz,2h)；8.18(d,j＝8.8hz,2h)；7.76(bs,2h)；7.63-7.52(m,8h)；7.47(bs,2h)；7.02(d,j＝8.8hz,4h)；4.17(m,4h)；3.82(s,6h)；3.25(m,4h)。uv-vis光谱：图4所示在360-370nm下具有最大吸收值。式(ii)二聚体杂质的表征保留时间：14.6min(借助于上述色谱条件获得)。lc-ms(esi+)：m/z＝751,[m+h]+1hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):7.93(d,j＝8.8hz,4h)；7.76(bs,2h)；7.63-7.52(m,8h)；7.47(bs,2h)；7.02(d,j＝8.8hz,4h)；4.17(m,4h)；3.82(s,6h)；3.25(m,4h)。uv-vis光谱：图3所示在350-360nm下具有最大吸收值。二聚体杂质的ms和uv谱测定lc参数在实施例1中，使用制备式(ix)化合物的现有技术方法，获得具有大量式(vi)和式(vii)的二聚体杂质的所述化合物。在实施例2中，采用本发明的教导，即过滤化合物(ix)在乙醇和水中的溶液，所得式(ix)化合物中式(vi)和式(vii)的各二聚体杂质的含量低于0.10％。因此，可以通过比较实施例1和实施例2，突出涉及步骤a)至d)的本发明的效果。在实施例3中，式(vi)和式(vii)的杂质通过去除实施例2中由式(vi)和(vii)的二聚体杂质的混合物构成的固体来制备。实施例4提供了证据证明采用本发明方法，最终产物阿哌沙班包含的式(ii)和(iii)的二聚体杂质的含量低于0.10％。实施例5描述根据现有技术方法制备式(viii)化合物，并且获得包含大量(即高于0.50％，hplca/a％)的式(iv)和式(v)的二聚体杂质的化合物(viii)。实施例6提供证明本发明效果的证据，因为根据本发明方法的步骤e)至i)纯化化合物(viii)，从而将杂质(iv)和(v)的初始量从0.21％和0.10％分别减少到0.06％和0.03％。实施例7再次提供证明本发明效果的证据，因为根据本发明方法纯化化合物(viii)，从而在分离的化合物(viii)中将杂质(iv)和(v)的初始量从0.59％和1.80％分别减少到0.11％和0.36％。显而易见地，此实验的产物(viii)可以通过对其进行如实施例6和任选的步骤h)所述的相同实验一次或多次来进一步纯化。通过分析上述实验和所提供的结果，特别是考虑到阿哌沙班中二聚体杂质的水平，可以了解本发明方法所提供的在去除二聚体杂质从而提供基本上不含二聚体杂质的阿哌沙班中的技术效果。当前第1页12