技术总结
本发明公开了一种融合蛋白表达纯化方法，包括以下实验用品：1ul重组的pET32a质粒、BL21(DE3)菌株、100ug/ml氨苄青霉素、0.5mM的IPTG、PBS缓冲液、220rpm、2M尿素、50mMTris、300mMNaCl、1mMDTT、溶菌酶、0.2%TritonX‑100、5mL NI‑NTA、EK酶、镍琼脂糖亲和层析和SK3071 非干扰型蛋白浓度测定试剂盒，包括以下实验过程：融合蛋白的原核表达、融合蛋白的纯化和分析纯化后融合蛋白。本融合蛋白表达纯化方法，将(500mM咪唑)含目标蛋白洗脱液透析到1M尿素，4℃透析过夜，将透析过夜的样品加入EK酶，酶切后的蛋白过镍琼脂糖亲和层析，去除标签和EK酶，通过SDS‑PAGE电泳和灰度分析，检测分析纯化后融合蛋白的纯度，使其相比较非融合型表达载体具有表达量高、外源蛋白分离纯化简单、回收率高、分离纯化工艺简便和成本低的优点。
技术研发人员：淦志兵
受保护的技术使用者：上海柏根生物科技有限公司
文档号码：201710020569
技术研发日：2017.01.12
技术公布日：2017.05.10