本发明涉及一种奥贝胆酸的中间体－7-酮基石胆酸(3α-羟基-7-酮-5β-胆甾烷-24-酸)的化学合成方法，属有机化学合成领域。
背景技术：
原发性胆汁性肝硬化(primarybiliarycirrhosis,pbc)是一种慢性肝内胆汁淤积性疾病，表现为进行性非化脓性小胆管炎，最终可发展为肝硬化、肝癌，甚至肝衰竭。奥贝胆酸(商品名ocaliva)是美国intercept制药公司开发的法尼醇受体x(farnesoidxreceptor，fxr)的强效激动剂，用于治疗原发性胆汁性肝硬化。此外，奥贝胆酸对于非酒精性脂肪肝炎(nash)也有较好的治疗效果，目前该适应症处于iii期临床阶段。奥贝胆酸的化学合成主要采用7-酮基石胆酸为起始原料。因此，研发环境友好、收率高、低成本、适合产业化的7-酮基石胆酸合成路线就显得尤为重要。
7-酮基石胆酸的合成主要有两种方法。
其一是采用鹅去氧胆酸为原料，电解或氧化制备7-酮基石胆酸(cn1912192a，中国医药工业杂志，2015，46(10)：1058-1059等)。但是其合成原料鹅去氧胆酸价格昂贵，不便于工业化生产；
其二是采用胆酸为原料的化学合成方法，主要有以下几条合成路线。
路线一是用胆酸与氯甲酰乙酯反应选择性保护3a-羟基，nbs选择性氧化7a-羟基，然后与三氯氧磷对12a-羟基进行脱水，氢氧化钠水解，二氧化铂加氢还原不饱和双键，得到7-酮基石胆酸(journaloflabelledcompoundsandradiopharmaceuticals,1979,16(3):421-434.)。此方法制备7-酮基石胆酸过程中需要用到较危险和昂贵的试剂(如pocl3、pto2)，反应时间长，产率低(26％)，不适合用于大生产，反应式如下所示：
路线二是胆酸进行甲酯化后，3a-羟基和7a-羟基乙酰化保护，次氯酸钠氧化12a-羟基，黄鸣龙还原c-12位羰基，c-24位酯基水解，次溴酸钠氧化c-7位羟基为酮，得到7-酮基石胆酸(wo2014020024a1)。此方法制备7-酮基石胆酸过程中需要用到高温的黄鸣龙反应，对设备要求较高，产率低(58.94％)，不适合用于大生产，反应式如下所示：
技术实现要素：
为了克服现有技术的缺陷，本发明是在现有技术(tetrahedron:asymmetry,2000,11(17):3463-3466)的基础上，优化其反应条件后，进一步进行3α-羟基的醚化、12α-羟基的甲磺酸酯化，消除、加氢、水解等反应，合成7-酮基石胆酸。本发明旨在提供一种采用胆酸为原料，环境友好、收率高、低成本、适合产业化的7-酮基石胆酸合成路线。
本发明是通过以下技术方案实现的：
步骤a，在溶剂中，式(1)所示的胆酸与nbs发生选择性氧化反应，得到式(2)化合物；
步骤b，在酸催化剂的作用下，式(2)化合物与醇类发生酯化反应，得到式(3)化合物；
步骤c，在有机溶剂中，式(3)化合物与咪唑和氯硅烷发生缩合反应，得到式(4)化合物；
步骤d，在有机溶剂中，在催化剂的作用下，式(4)化合物与甲磺酰氯(mscl)发生缩合反应，得到式(5)化合物；
步骤e，在有机溶剂中，式(5)化合物在乙酸钾的作用下发生消除反应，得到式(6)化合物；
生成的式(6)化合物可通过以下两种方法制备目标式(9)化合物：
方法一：
步骤f，在有机溶剂中，在酸的作用下，式(6)化合物c-3位发生酯基水解反应，得到式(7)化合物；
步骤g，在溶剂中，式(7)化合物c-24位酯基在碱作用下水解，得到式(8)化合物；
步骤h，在溶剂中，式(8)化合物在钯碳催化下发生氢化还原反应，得到式(9)化合物7-酮基石胆酸；
方法二：
步骤i，在溶剂中，式(6)化合物在钯碳催化下发生氢化还原反应，得到式(10)化合物；
步骤j，在有机溶剂中，式(10)化合物在酸的作用下发生水解反应，得到式(11)化合物；
步骤k，在溶剂中，式(11)化合物在碱作用下发生水解反应，得到式(9)化合物7-酮基石胆酸。
所述反应过程如路线(1)所示：
其中，r1为c1～c8的烷基；r2为烷基硅烷基。
优选地，r1选自甲基(-ch3)、乙基(-ch2ch3)、丙基(-ch2ch2ch3)、丁基(-ch2ch2ch2ch3)；r2选自三甲基硅基(tms)、三乙基硅基(tes)、叔丁基二甲基硅基(tbs)、三异丙基硅基(tips)、叔丁基二苯基硅基(tbdps)等。
进一步优选地，r1为甲基(-ch3)；r2为叔丁基二甲基硅基(tbs)。
步骤a中，所述式(1)化合物和n-溴代琥珀酰亚胺(nbs)的摩尔比为1：(1～5)；优选地为1：1.6。
步骤a中，所述溶剂选自丙酮、四氢呋喃、1，4-二氧六环、水等中的一种或多种；优选地，为丙酮和水的混合溶剂，其中，丙酮：水(体积比)＝3：1。
步骤a中，所述选择性氧化反应的温度为0～40℃；优选地，为室温25℃。
步骤a中，所述选择性氧化反应的时间为1～4h；优选地，为2h；进一步优选地，为室温25℃反应2h。
在一个具体实施方式中，所述步骤a包括：取式(1)所示的胆酸溶解在溶剂中，加入nbs，得到式(2)化合物。
步骤b中，所述醇类为甲醇、乙醇、丙醇、丁醇等中的一种或多种；优选地为甲醇。
步骤b中，所述酸催化剂选自浓硫酸、对甲苯磺酸等中的一种或多种；优选地，为浓硫酸。
步骤b中，式(2)化合物、酸催化剂的摩尔比1：(0.01-1)；优选地，为1：0.1。
步骤b中，所述酯化反应的温度为0～70℃；优选地，为70℃。
步骤b中，所述酯化反应的时间为2～4h；优选地，为2h；进一步优选地，为70℃反应2h。
在一个具体实施方式中，所述步骤b包括：取式(2)化合物溶解在溶剂中，加入浓硫酸，得到式(3)化合物。
步骤c中，所述式(3)化合物与有机碱和氯硅烷的摩尔比为：1：(1～10)：(1～10)；优选地，为1：(1～5)：(1～5)；进一步优选地，为1：2：2。
步骤c中，所述有机溶剂为高沸点溶剂，选自n-甲基吡咯烷酮(nmp)、n,n-二甲基甲酰胺(dmf)、n,n-二甲基丙烯基脲(dmpu)、二甲基亚砜(dmso)等中的一种或多种；优选地，n,n-二甲基甲酰胺(dmf)。
步骤c中，所述有机碱作用为束缚酸，选自咪唑、吡啶、三乙胺；优选地，为咪唑。
步骤c中，所述缩合反应的温度为60℃～150℃；优选地，为100℃。
步骤c中，所述缩合反应的时间为2～10h；优选地，为4h；进一步优选地，为100℃反应4h。
在一个具体实施方式中，所述步骤c包括：取式(3)化合物溶解在溶剂中，依次加入咪唑，烷基氯硅烷，反应得到式(4)化合物。
步骤d中，所述式(4)化合物与mscl和有机碱的摩尔比为：1：(1～20)：(2～20)；1：(1～10)：(2～10)；优选地为1：5：5，或1：10：10。
步骤d中，所述有机溶剂选自二氯甲烷、四氢呋喃、1，4-二氧六环、乙腈、二氯乙烷等中的一种或多种；优选地，为二氯甲烷。
步骤d中，所述催化剂为有机碱，选自吡啶、三乙胺、二乙胺、dmap等中的一种或多种；优选地，为吡啶。
步骤d中，所述缩合反应的温度为20～40℃；优选地，为室温25℃。
步骤d中，所述缩合反应的时间为5～10h；优选地，为8h；进一步优选地，为室温25℃反应8h。
步骤d中，所述缩合反应优选在氮气保护下进行。
在一个具体实施方式中，所述步骤d包括：取式(4)化合物溶解在溶剂中，依次加入mscl，催化剂，氮气保护反应，得到式(5)化合物。
步骤e中，所述式(5)化合物与碱的摩尔比为1：(1～20)；优选地，为1：(1～10)；进一步优选地，为1：10。
步骤e中，所述有机溶剂为高沸点溶剂，选自n-甲基吡咯烷酮(nmp)、n,n-二甲基甲酰胺(dmf)、n,n-二甲基丙烯基脲(dmpu)、二甲基亚砜(dmso)等中的一种或多种；优选地，为n-甲基吡咯烷酮(nmp)。
步骤e中，所述碱选自乙酸钾、碳酸钾、氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸钠；优选地，为乙酸钾。
步骤e中，所述消除反应的温度为100～130℃；优选地，为130℃。
步骤e中，所述消除反应的时间为5～10h；优选地，为8h；进一步优选地，为130℃反应8h。
步骤e中，所述消除反应优选在氮气保护下进行。
在一个具体实施方式中，所述步骤e包括：取式(5)化合物溶解在溶剂中，加入乙酸钾，氮气保护反应，得到式(6)化合物。
生成的式(6)化合物可通过以下两种方法制备目标式(9)化合物：
方法一：
步骤f中，所述有机溶剂选自乙酸乙酯、甲醇、乙醇、二氯甲烷、二氯乙烷、1,4二氧六环；优选地，为乙酸乙酯。
步骤f中，所述酸选自盐酸hcl，甲酸、乙酸、硫酸；优选地，为盐酸hcl。
步骤f中，所述式(6)化合物与酸的摩尔比为1：(1-10)；优选地，为1：5。
步骤f中，所述酯基水解反应的温度为20～40℃；优选地，为室温25℃。
步骤f中，所述酯基水解反应的时间为1～5h；优选地，为2h；进一步优选地，为室温25℃反应2h。
在一个具体实施方式中，所述步骤f包括：取式(6)化合物溶解在hcl的乙酸乙酯溶液中，反应得到式(7)化合物。
步骤g中，所述碱优选为无机碱，选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸钠、碳酸钾等中的一种或多种；优选地，为氢氧化钠。
步骤g中，所述式(7)化合物与碱的摩尔比为1：(1～20)；优选地1：(1～5)；进一步优选地，为1：4。
步骤g中，所述溶剂选自甲醇、四氢呋喃、乙醇、异丙醇、叔丁醇、水等中的一种或多种；优选地，为甲醇、四氢呋喃或其混合溶剂，其中，当为混合溶剂时，甲醇与四氢呋喃的体积比为(1～5)：1，优选地为4：1。
步骤g中，所述水解反应的温度为20～80℃；优选地，为70℃。
步骤g中，所述水解反应的时间为2～10h；优选地，为3h。
步骤g中，所述水解反应优选在回流状态下进行。
在一个具体实施方式中，所述步骤g包括：取式(7)化合物溶解在甲醇或四氢呋喃或其混合溶剂中，加入无机碱，回流反应得到式(8)化合物。
步骤h中，所述式(8)化合物与钯碳(质量百分数5％)的重量比为1：(0.01～0.4)；优选地，为1：0.1。
步骤h中，所述氢化还原反应的条件为：氢气的压力范围为0.1～10mpa，优选地为4mpa。
步骤h中，所述氢化还原反应的温度为60～80℃；优选地，为70℃。
步骤h中，所述氢化还原反应的时间为4～15h；优选地，为8h；进一步优选地，为70℃反应8h。
步骤h中，所述溶剂选自甲醇、四氢呋喃、乙醇、异丙醇、叔丁醇、水等中的一种或多种；优选地，为甲醇、四氢呋喃或其混合溶剂，其中，当为混合溶剂时，甲醇与四氢呋喃的体积比为(1～10)：1，优选地为4：1。
在一个具体实施方式中，所述步骤h包括：取式(8)化合物溶解在甲醇或四氢呋喃或其混合溶剂中，加入钯碳，保持氢气加压反应，得到式(9)7-酮基石胆酸。
方法二：
步骤i中，所述式(6)化合物与钯碳(质量百分数5％)的重量比为1：(0.01～0.4)；优选地为1：0.1。
步骤i中，所述氢化还原反应的条件为：氢气的压力范围为0.1～10mpa；优选地为4mpa。
步骤i中，所述氢化还原反应的温度为60～80℃；优选地，为70℃。
步骤i中，所述氢化还原反应的时间为4～15h；优选地，为8h；进一步优选地，为70℃反应8h。
步骤i中，所述溶剂选自甲醇、四氢呋喃、乙醇、异丙醇、叔丁醇、水等中的一种或多种；优选地，为甲醇、四氢呋喃或其混合溶剂，当为混合溶剂时，甲醇与四氢呋喃的体积比为(1～10)：1，优选地为4：1。
在一个具体实施方式中，所述步骤i包括：取式(6)化合物溶解在甲醇或四氢呋喃或其混合溶剂中，加入钯碳，保持氢气加压，反应得到式(10)化合物。
步骤j中，所述有机溶剂选自乙酸乙酯、甲醇、乙醇、二氯甲烷、二氯乙烷、1,4二氧六环；优选地，为乙酸乙酯。
步骤j中，所述酸选自盐酸hcl、甲酸、乙酸、硫酸；优选地，为盐酸hcl。
步骤j中，所述式(10)化合物与酸的摩尔比为1：(1-10)；优选地，为1：5。
步骤j中，所述水解反应的温度为20～40℃；优选地，为室温25℃。
步骤j中，所述水解反应的时间为1～5h；优选地，为2h；进一步优选地，为室温25℃反应2h。
在一个具体实施方式中，所述步骤j包括：取式(10)化合物溶解在hcl的乙酸乙酯溶液中，反应得到式(11)化合物。
步骤k中，所述溶剂选自甲醇、四氢呋喃、乙醇、异丙醇、叔丁醇、水等中的一种或多种；优选地，为甲醇、四氢呋喃或其混合溶剂，当为混合溶剂时，甲醇与四氢呋喃的体积比为(1～5)：1，优选地为4：1。
步骤k中，所述碱优选为无机碱，选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸钠、碳酸钾等中的一种或多种；优选地，为氢氧化钠。
步骤k中，所述式(11)化合物与碱的摩尔比为1：(1～20)；优选地，为1：(1～5)；进一步优选地，为1：4。
步骤k中，所述水解反应的温度为20～80℃；优选地，为70℃。
步骤k中，所述水解反应的时间为2～10h；优选地为3h。
步骤k中，所述水解反应优选在回流状态下进行。
在一个具体实施方式中，所述步骤k包括：式(11)化合物溶解在甲醇或四氢呋喃或其混合溶剂中，加入无机碱回流反应，得到式(9)7-酮基石胆酸。
本发明还提出了3-烷基硅醚-7-羰基-12-甲磺酰氧基-5β-胆酸酯和3-烷基硅醚-7-羰基-5β-11-胆烯酸酯化合物，其结构如式(5)、(6)所示：
其中，r1为c1～c8的烷基；r2为烷基硅烷基。
优选地，r1为c1～c8的烷基；r2为c1～c10烷基硅烷基。
优选地，r1选自甲基(-ch3)、乙基(-ch2ch3)、丙基(-ch2ch2ch3)、丁基(-ch2ch2ch2ch3)；r2选自三甲基硅基(tms)、三乙基硅基(tes)、叔丁基二甲基硅基(tbs)、三异丙基硅基(tips)、叔丁基二苯基硅基(tbdps)等。
进一步优选地，r1为甲基(-ch3)；r2为叔丁基二甲基硅基(tbs)。
本发明的有益效果优点在于：本发明合成奥贝胆酸的中间体7-酮基石胆酸采用廉价的胆酸为原料，采用胆酸为原料，经过7α-羟基的选择性氧化(步骤a)、侧链羧基的酯化(步骤b)、3α-羟基的醚化(步骤c)、12α-羟基的甲磺酸酯化(步骤d)，消除(步骤e)、加氢(步骤h，i)、水解(步骤f，g，k)等反应，合成所述奥贝胆酸的中间体7-酮基石胆酸，操作步骤简单，环境友好，收率高38％～44％，低成本，适合产业化生产。
具体实施方式
结合以下具体实施例，对本发明作进一步的详细说明。实施本发明的过程、条件、实施方法等，除以下专门提及的内容之外，均为本领域的普遍知识和公知常识，本发明没有特别限制内容。
实施例一
1、式(2)化合物的合成：将胆酸(9g，22.0mmol)溶解在200ml丙酮与水(v/v＝3:1)的混合溶液中，避光，缓慢加入nbs(5.7g，31.9mmol)，室温25℃反应2h。tlc检测反应完全后，加入100ml饱和亚硫酸氢钠溶液淬灭反应，减压除去溶剂至出现白色固体时停止，倒入1l水中后析出大量白色固体，静置析晶，抽滤烘干后，得式(2)化合物(8.5g白色固体,产率95％)。直接用于下一步。
2、式(3-1)化合物的合成：将式(2)化合物(8.5g,20.9mmol)溶解在100ml甲醇中，加入浓硫酸(0.11ml，2.09mmol)，回流反应2h。tlc检测反应完全后，减压除去甲醇，加入30ml水，用二氯甲烷萃取(30ml×3)，合并有机相，水洗，饱和食盐水洗，无水na2so4脱水，减压浓缩，得到式(3-1)化合物(8.7g白色固体，产率99％)，直接用于下一步。
3、式(4-1)化合物的合成：将式(3-1)化合物(8.7g，20.6mmol)溶解在80mldmf中，依次加入咪唑(2.8g，41.2mmol)，tbscl(6.2g，41.2mmol)，100℃反应4h。tlc检测反应完全后，加入200ml水，用乙酸乙酯萃取(30ml×3)水相，合并有机相，水洗，饱和食盐水洗，无水na2so4干燥，减压浓缩，硅胶柱层析(pe:ea＝5:1)纯化，得式(4-1)化合物(白色固体9.2g，产率86％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ3.99(s,1h),3.66(s,3h),3.54(s,1h),1.16(s,3h),0.97(d,j＝4.8hz,3h),0.85(s,9h),0.67(s,3h),0.02(s,6h).
4、式(5-1)化合物的合成：将式(4-1)化合物(9.2g，17.7mmol)溶解在80ml二氯甲烷中，依次加入mscl(6.8ml，88mmol)，吡啶(7.2ml，88mmol)，氮气保护，室温反应8h。tlc检测反应完全后，减压除去溶剂，加入30ml水，用乙酸乙酯萃取(30ml×3)水相，合并有机相，稀盐酸洗，水洗，饱和食盐水洗，无水na2so4干燥，浓缩，硅胶柱层析(pe:ea＝10:1)纯化，得式(5-1)化合物(10.3g白色固体，收率95％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ5.13(s,1h),3.66(s,3h),3.53(s,1h),3.05(s,3h),1.17(s,3h),0.99(d,j＝6.0hz,3h),0.84(s,9h),0.76(s,3h),0.01(s,6h).
5、式(6-1)化合物的合成：将式(5-1)化合物(10.3g，16.8mmol)溶解在80mln-甲基吡咯烷酮中，加入乙酸钾(16.5g，168mmol)，氮气保护，加热至130℃，反应8h。tlc检测反应完全后，加入150ml水，用乙酸乙酯萃取(30ml×3)，合并有机相，水洗，饱和食盐水洗，无水na2so4干燥，浓缩，硅胶柱层析(pe:ea＝10:1)纯化，得式(6-1)化合物(7.62g白色固体，收率74％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.18(d,j＝10.0hz,1h),5.33(d,j＝10.4hz,1h),3.66(s,3h),3.57(s,1h),1.10(s,3h),1.00(d,j＝6.0hz,3h),0.85(s,9h),0.73(s,3h),0.02(s,6h).
6、式(7-1)化合物的合成：将式(6-1)化合物(7.38g，10.7mmol)溶解在60ml乙酸乙酯中，滴加hcl/ea溶液(21.4ml，53.5mmol)，室温搅拌2h。tlc检测反应完全后，加入80ml水，用乙酸乙酯萃取(30ml×3)，合并有机相，水洗，饱和食盐水洗，无水na2so4干燥，浓缩，硅胶柱层析(pe:ea＝2:1)纯化，得式(7-1)化合物(3.8g白色固体，收率88％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.20(d,j＝10.0hz,1h),5.35(d,j＝10.0hz,1h),3.66(s,3h),3.62(s,1h),1.13(s,3h),1.01(d,j＝6.0hz,3h),0.74(s,3h).
7、式(8)化合物的合成：将式(7-1)化合物(6.1g，15.05mmol)溶解在48ml甲醇和12ml四氢呋喃的混合溶剂中，加入氢氧化钠(2.4g，60.2mmol)，回流3h。tlc检测反应完全后，加入稀盐酸调ph为5，减压除去溶剂，加入80ml水，用二氯甲烷萃取(30ml×3)，合并有机相，水洗，饱和食盐水洗，无水na2so4干燥，浓缩，硅胶柱层析(dcm:meoh＝20:1)纯化，得式(8)化合物(5.8g白色固体，收率92％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.20(d,j＝10.4hz,1h),5.35(d,j＝10.0hz,1h),3.62(s,1h),1.13(s,3h),1.02(d,j＝6.0hz,3h),0.74(s,3h).
8、式(9)化合物的合成：取式(8)化合物(5.8g，13.8mmol)溶解在48ml甲醇和12ml四氢呋喃的混合溶剂中，加入580mg钯碳，氢气加压至4mpa，加热至70℃反应8h。高锰酸钾显色检测反应完全后，硅藻土抽滤，浓缩，硅胶柱层析(dcm:meoh＝10:1)纯化，得式(9)化合物(7-酮基石胆酸)(5.12g白色固体，收率95％)。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ3.64–3.57(m,1h),1.19(s,3h),0.93(d,j＝5.2hz,3h),0.65(s,3h).
实施例二
1、式(2)化合物的合成：取9g胆酸溶解在200ml丙酮与水(v/v＝3:1)的混合溶液中，避光，待全部溶解后，缓慢加入5.7gnbs(31.9mmol)，室温反应2h。加入100ml饱和亚硫酸氢钠溶液，防止进一步氧化，旋蒸溶剂，当出现白色固体，倒入清水中，大量白色固体析出，静置析晶，抽滤烘干后，得式(2)化合物(8.5g白色固体，收率95％)，直接用于下一步。
2、式(3-1)化合物的合成：式(2)化合物(8.5g，20.8mol)溶解在100ml甲醇中，加入1ml浓硫酸，回流反应2h。tlc检测反应完全后，减压旋蒸溶剂，加入30ml水，用二氯甲烷萃取(30ml×3)，合并有机相，水洗，饱和食盐水洗，无水na2so4脱水，浓缩，得式(3-1)化合物(8.7g白色固体，产率99％)，直接用于下一步。
3、式(4-1)化合物的合成：将式(3-1)化合物(8.7g，20.6mmol)溶解在80mldmf中，依次加入咪唑(2.8g，41.2mmol)，tbscl(6.2g，41.2mmol)，100℃反应4h。tlc检测反应完全后，加入200ml水，用乙酸乙酯萃取(30ml×3)，合并有机相，水洗，饱和食盐水洗，无水na2so4干燥，浓缩，硅胶柱层析(pe:ea＝5:1)纯化，得式(4-1)化合物(9.2g白色固体，产率86％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ3.99(s,1h),3.66(s,3h),3.54(s,1h),1.16(s,3h),0.97(d,j＝4.8hz,3h),0.85(s,9h),0.67(s,3h),0.02(s,6h).
4、式(5-1)化合物的合成：将式(4-1)化合物(9.2g，17.7mmol)溶解在80ml二氯甲烷中，依次加入mscl(6.8ml，88mmol)，吡啶(7.2ml，88mmol)，氮气保护，室温反应8h。tlc检测反应完全后，减压除去溶剂，加入30ml水，用乙酸乙酯萃取(30ml×3)，合并有机相，稀盐酸洗，水洗，饱和食盐水洗，无水na2so4干燥，浓缩，硅胶柱层析(pe:ea＝10:1)纯化，得式(5-1)化合物(10.3g白色固体，产率95％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ5.13(s,1h),3.66(s,3h),3.53(s,1h),3.05(s,3h),1.17(s,3h),0.99(d,j＝6.0hz,3h),0.84(s,9h),0.76(s,3h),0.01(s,6h).
5、式(6-1)化合物的合成：将式(5-1)化合物(10.3g，16.8mmol)溶解在80mln-甲基吡咯烷酮中，加入16.5g乙酸钾(168mmol)，氮气保护，加热至130℃，反应8h。tlc检测反应完全后，加入150ml水，用乙酸乙酯萃取(30ml×3)，合并有机相，水洗，饱和食盐水洗，无水na2so4干燥，浓缩，硅胶柱层析(pe:ea＝10:1)纯化，得式(6-1)化合物(7.62g白色固体，产率74％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.18(d,j＝10.0hz,1h),5.33(d,j＝10.4hz,1h),3.66(s,3h),3.57(s,1h),1.10(s,3h),1.00(d,j＝6.0hz,3h),0.85(s,9h),0.73(s,3h),0.02(s,6h).
6、式(10-1)化合物的合成：式(6-1)化合物(7.04g，15.84mmol)溶解在48ml甲醇和12ml四氢呋喃的混合溶剂中，加入704mg钯碳，氢气加压至4mpa，加热至70℃反应8h。tlc检测反应完全后，硅藻土抽滤，浓缩，硅胶柱层析(dcm:meoh＝10:1)纯化，得式(10-1)化合物(5.7g白色固体，产率80％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ3.66(s,3h),3.57–3.52(m,1h),1.17(s,3h),0.92–0.91(m,6h),0.86(s,9h),0.64(s,3h),0.02(s,6h).
7、式(11-1)化合物的合成：将式(10-1)化合物(7.38g，10.7mmol)溶解在60ml乙酸乙酯中，滴加hcl/ea溶液(21.4ml，53.5mmol)，室温搅拌2h。tlc检测反应完全后，加入80ml水，用乙酸乙酯萃取(30ml×3)，合并有机相，水洗，饱和食盐水洗，无水na2so4干燥，浓缩，硅胶柱层析(pe:ea＝2:1)纯化，得式(11-1)化合物(3.8g白色固体，产率88％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ3.66(s,3h),3.63–3.60(m,1h),1.19(s,3h),0.91(d,j＝6.4hz,3h),0.65(s,3h).
8、式(9)化合物的合成：将式(11)化合物(5.7g，15.78mmol)溶解在甲醇(48ml)和四氢呋喃(12ml)的混合溶剂中，加入氢氧化钠(2.5g，63.12mmol)，回流3h。tlc检测反应完全后，加入稀盐酸调ph为5，减压除去溶剂，加入水(80ml)，用二氯甲烷萃取(30ml×3)，合并有机相，水洗，饱和食盐水洗，无水na2so4干燥，浓缩，硅胶柱层析(dcm:meoh＝20:1)纯化，得式(9)化合物(7-酮基石胆酸)(4.73g白色固体，产率95％)。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ3.64–3.57(m,1h),1.19(s,3h),0.93(d,j＝5.2hz,3h),0.65(s,3h).
本发明的保护内容不局限于以上实施例。在不背离发明构思的精神和范围下，本领域技术人员能够想到的变化和优点都被包括在本发明中，并且以所附的权利要求书为保护范围。