本发明属于药物合成技术领域，具体涉及奥贝胆酸的合成方法及其中间体。
背景技术：
奥贝胆酸(obeticholicacid)，化学名3α,7α-二羟基-6α-乙基-5β-胆甾烷-24-酸，又称int-747或6α-乙基鹅去氧胆酸，由美国intercept制药公司研发，其机制主要是通过激动法尼醇x受体，调节相关基因，影响胆汁酸的合成、分泌、转运和吸收。奥贝胆酸具有治疗原发性胆汁性肝硬化(pbc)、非酒精性脂肪性肝炎(nash)等疾病的功能。其中奥贝胆酸作为治疗原发性胆汁性肝硬化(pbc)的临床药物，已在2016年被fda批准上市；作为治疗非酒精性脂肪性肝炎(nash)的药物，正在进行三期临床试验。统计表明全球范围内，nash的发病率为2-3％。nash近年来逐渐代替病毒性肝炎，成为欧美发达国家最主要的肝病。目前fda还没有批准任何一种用于治疗非酒精性脂肪性肝炎的药物，但是已经授予奥贝胆酸治疗非酒精性脂肪肝炎的突破性疗法认定。奥贝胆酸是nash迎来的第一个三期临床药物，汤森路透预测奥贝胆酸在2020年销售将达26亿美元。
奥贝胆酸的关键合成步骤主要有两条途径：(1)以鹅去氧胆酸为原料，经过选择性氧化7-羟基，保护3-羟基，烷基化并酯化，羰基还原和酯水解，五步反应制得奥贝胆酸(wo02072598a)。路线(a)中的关键步骤(烷基化)的收率较低，只有12％，导致总收率较低，为3％；在该步骤中，文献(steroids，2012，77，1335-1338)使用碘乙烷代替溴乙烷，使这步收率提高到37％，但是总收率仍然较低，为20％(路线(b))。此外，以鹅去氧胆酸为原料，成本较高。
(2)以鹅去氧胆酸为原料，经过选择性氧化7-羟基，苄基化，经两步硅醚化、羟醛缩合，水解，硼氢化钠还原，pd/c催化加氢，制得奥贝胆酸(j.med.chem，2012，55，84-93)。或以7-酮基石胆酸为原料，经酯化，经硅醚化、羟醛缩合，水解，pd/c催化加氢，硼氢化钠还原，制得奥贝胆酸(cn101203526b)。总收率分别为32％(路线c)和25％路线(d)，虽然总收率有所提高，但是分别以鹅去氧胆酸和7-酮基石胆酸为原料，成本都比较高。
技术实现要素：
本发明克服现有技术的上述缺陷，提供一种高效、简便的合成奥贝胆酸的化学方法，采用廉价的胆酸为原料，合成奥贝胆酸。本发明合成方法新颖、成本低、收率高、环境友好，便于工业化生产。
奥贝胆酸的结构如式(i)所示：
本发明提供的奥贝胆酸的合成方法，包括以下步骤：
(a)在溶剂中，式(1)所示的胆酸溶和n-溴代琥珀酰亚胺(nbs)发生选择性氧化反应，选择性氧化7位羟基，得到式(2)化合物；
(b)在催化剂的作用下，式(2)化合物溶解与醇发生酯化反应，得到式(3)化合物；
(c)在溶剂中，式(3)化合物与酸酐、碱发生酯化反应，得到式(4)化合物；
(d)在溶剂中，式(4)化合物在吡啶的作用下，12位羟基与甲磺酰氯(mscl)发生缩合反应，得到式(5)化合物；
(e)在溶剂中，式(5)化合物和乙酸钾发生消除反应，得到式(6)化合物；
(f)在溶剂中，式(6)化合物和碱发生水解反应，选择性水解3位的酯基，得到式(7)化合物；
(g)在溶剂中，式(7)化合物与三甲基氯硅烷、强碱发生缩合反应，得到式(8)硅醚化合物；
(h)在溶剂中，在路易斯酸的作用下，式(8)化合物和乙醛发生羟醛缩合反应，得到式(9)化合物；
合成的式(9)化合物，可通过以下三种方法合成目标化合物式(i)奥贝胆酸：
方法一：
(i)在溶剂中，式(9)化合物与碱发生水解反应，得到式(10)化合物；
(j)在溶剂中，在催化剂的作用下，在氢气压力下，式(10)化合物通过氢化还原反应，还原烯键得到式(11)化合物；
(k)在溶剂中，在金属氢化物的作用下，式(11)化合物发生还原反应，得到立体选择性还原产物式(i)奥贝胆酸。
方法二：
(l)在溶剂中，在催化剂的作用下，式(9)化合物和碱，金属氢化物经一步反应，得到
立体选择性还原产物式(i)奥贝胆酸。
方法三：
(i)在溶剂中，式(9)化合物与碱发生水解反应，得到式(10)化合物；
(m)在溶剂中，在碱性条件下，在金属氢化物的作用下，式(10)化合物发生还原反应，得到立体选择性还原产物式(12)化合物；
(n)在溶剂中，在催化剂的作用下，在氢气压力下，式(12)化合物通过氢化还原反应，还原烯键，得到式(i)奥贝胆酸；
所述合成方法的反应路线如下：
其中，r1为c1～c20的烷基；r2为c1～c20烷基酰基。
优选地，所述r1选自甲基(-ch3)、乙基(-ch2ch3)、丙基(-ch2ch2ch3)、丁基(-ch2ch2ch2ch3)；r2选自乙酰基(-coch3)、丙酰基(-coch2ch3)、丁酰基(-coch2ch2ch3)。
本发明采用胆酸为原料，优化tetrahedron:asymmetry11(2000)3463-34663中化合物(4)3α-乙酰氧基-7-酮-12α-羟基胆酸甲酯的合成方法，合成化合物(4)。
本发明步骤(a)中，所述溶剂选自丙酮、四氢呋喃、1，4-二氧六环、水等中的一种或多种；优选地，为丙酮和水的混合溶剂；进一步优选地，为丙酮：水(体积比)＝3：1的混合溶剂。
本发明步骤(a)中，所述式(1)化合物、n-溴代琥珀酰亚胺(nbs)的摩尔比为1：(1～5)；优选地，为1：1.6。
本发明步骤(a)中，所述选择性氧化反应的温度为0～40℃；优选地，为室温25℃。
本发明步骤(a)中，所述选择性氧化反应的时间为1～4h；优选地，为2h。
本发明步骤(a)优选在避光条件下进行。
在一具体实施方式中，所述步骤(a)具体按照如下步骤进行：将式(1)化合物胆酸溶于溶剂中，加入n-溴代琥珀酰亚胺(nbs)，避光反应。反应结束后，加入亚硫酸氢钠，旋蒸除去部分溶剂，倒入水中，抽滤，烘干，得到式(2)化合物。
本发明步骤(b)中，所述醇可同时作为溶剂和反应原料，选自甲醇、乙醇、丙醇、丁醇等，优选地，为甲醇。
本发明步骤(b)中，所述催化剂选自浓硫酸、对甲苯磺酸、浓盐酸等中的一种或多种；优选地，为浓硫酸。
本发明步骤(b)中，所述式(2)化合物、催化剂的摩尔比为1:0.1-1；优选地，为1:1。
本发明步骤(b)中，所述酯化反应的温度为0～70℃；优选地为70℃。
本发明步骤(b)中，所述酯化反应的时间为2～4h；优选地，为2h。
在一具体实施方式中，所述步骤(b)具体按照如下步骤进行：将式(2)化合物溶于醇类溶剂中，加入催化剂，加热反应。反应结束后，旋蒸除去溶剂，加入水、二氯甲烷萃取，饱和食盐水洗，有机相减压浓缩至干，得到式(3)化合物。
本发明步骤(c)中，所述酸酐选自乙酸酐、丙酸酐、丁酸酐等；优选地，为乙酸酐。
本发明步骤(c)中，所述溶剂选自二氯甲烷、四氢呋喃等中的一种或多种，优选地，为二氯甲烷。
本发明步骤(c)中，所述催化剂为碱，选自吡啶、dmap、三乙胺等中的一种或多种；优选地，为吡啶和dmap。
步骤(c)中，式(3)化合物与酸酐的摩尔比为1：(1～5)；优选地，为1：1.3。
步骤(c)中，当催化剂选用吡啶和dmap时，所述式(3)化合物与酸酐、吡啶和dmap的摩尔比为1：(1～5)：(1～5)：(0.1～1)；优选地，为1：1.3：2：0.5。
本发明步骤(c)中，所述酯化反应的温度为0～40℃；优选地，为室温25℃。
本发明步骤(c)中，所述酯化反应的时间为1～4h；优选地，为2h。
在一具体实施方式中，所述步骤(c)具体按照如下步骤进行：将式(3)化合物溶于溶剂中，加入催化剂，和酸酐反应。反应结束后，加稀盐酸洗，水洗，饱和氯化钠溶液洗，有机相减压浓缩至干得式(4)化合物。
本发明步骤(d)中，所述溶剂为非质子溶剂，选自二氯甲烷、四氢呋喃、1，4-二氧六环、乙腈、甲苯、氯仿、丙酮、吡啶等中的一种或多种；优选地，为二氯甲烷。
本发明步骤(d)中，所述式(4)化合物与mscl、催化剂的摩尔比为：1：(1～10)：(1～10)；优选地，为1：5：5。
本发明步骤(d)中，所述缩合反应的温度为20～40℃；优选地，为25℃。
本发明步骤(d)中，所述缩合反应的时间为5～10h；优选地，为8h。
本发明步骤(d)中，所述催化剂为有机碱，选自吡啶、三乙胺、二乙胺、乙二胺、dmap、三乙烯二胺、n，n-二异丙基乙胺等中的一种或多种。
在一具体实施方式中，所述步骤(d)具体按照如下步骤进行：将式(4)化合物溶于非质子溶剂中，加入甲磺酰氯(mscl)，吡啶，在合适的温度下反应。反应结束后，加入稀盐酸，两相分离，饱和氯化钠溶液洗，有机相减压浓缩至干，得到式(5)化合物。
本发明步骤(e)中，所述溶剂为高沸点溶剂，选自n-甲基吡咯烷酮(nmp)、n，n-二甲基甲酰胺(dmf)、n，n-二甲基丙烯基脲(dmpu)、二甲基亚砜(dmso)等中的一种或多种；优选地，为n-甲基吡咯烷酮(nmp)。
本发明步骤(e)中，所述式(5)化合物与乙酸钾的摩尔比为1：(1～20)；优选地，为1：(1～10)；进一步优选地，为1：10。
本发明步骤(e)中，所述消除反应的温度为100～130℃；优选地，为125℃。
本发明步骤(e)中，所述消除反应的时间为5～10h；优选地，为8h；进一步优选地，为125℃反应8h。
在一具体实施方式中，所述步骤(e)具体按照如下步骤进行：将式(5)化合物溶于高沸点溶剂中，加入乙酸钾，在合适的温度下反应。反应结束后，倒入水中，用二氯甲烷萃取，水洗、饱和氯化钠溶液洗，有机相减压浓缩至干，得到式(6)化合物。
本发明步骤(f)中，所述碱选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸钠、碳酸钾等中的一种或多种；优选地，为氢氧化钠。
本发明步骤(f)中，所述溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇、水、四氢呋喃等中的一种或多种；优选地，为甲醇。
本发明步骤(f)中，所述式(6)化合物与碱的摩尔比为1：(1～5)；优选地，为1：1.2。
本发明步骤(f)中，所述水解反应的温度为20～40℃；优选地，为25℃。
本发明步骤(f)中，所述水解反应时间为10～100min；优选地，为1h；进一步优选地，为25℃反应1h。
在一具体实施方式中，所述步骤(f)具体按照如下步骤进行：将式(6)化合物溶解在合适的溶剂中，加入碱，在合适的温度下反应。反应结束后，加水和二氯甲烷萃取，然后水洗，饱和氯化钠溶液洗，有机相减压浓缩至干，得到式(7)化合物。
本发明步骤(g)中，所述溶剂为醚类溶剂，选自四氢呋喃或二氧六环等中的一种或多种；优选地，为四氢呋喃。
本发明步骤(g)中，所述强碱选自二异丙基氨锂、正丁基锂，叔丁基锂等中的一种或多种；优选地，为二异丙基氨锂。
本发明步骤(g)中，式(7)化合物、三甲基氯硅烷、强碱的摩尔比为1:1～10；优选地，为1:10。
本发明步骤(g)中，所述缩合反应的温度是-78～0℃；优选地，为-78～-60℃。
本发明步骤(g)中，所述缩合反应的时间为0.5～3h；优选地，为2h。
本发明步骤(g)中，优选先将其他物质进行混合，然后在惰性条件下加入强碱。
在一具体实施方式中，所述步骤(g)具体按照如下步骤进行：将式(7)化合物溶于醚类溶剂中，降温至0℃以下，加入三甲基氯硅烷，所得溶液在惰性条件下滴入强碱中，混合液控制在合适温度下搅拌反应。反应结束后，加入饱和碳酸氢钠溶液，用乙酸乙酯萃取，水洗、饱和氯化钠溶液洗，有机相减压浓缩至干，得到式(8)化合物。
本发明步骤(h)中，所述溶剂选自二氯甲烷、二氯乙烷、四氢呋喃、乙腈、氯仿、甲苯、丙酮等中的一种或多种；优选地，为二氯甲烷。
本发明步骤(h)中，所述路易斯酸选自三氟化硼乙醚、三氟化硼乙腈；优选地，为三氟化硼乙醚。
本发明步骤(h)中，优选地，式(8)化合物和乙醛先加入溶剂中，然后在低温条件下加入路易斯酸，进行羟醛缩合反应，得到式(9)化合物；其中，所述低温为-78～-40℃，优选地，为-78～-60℃。
本发明步骤(h)中，式(8)化合物、乙醛、路易斯酸的摩尔比为1:1～5:1～10；优选地，为1:2:10。
本发明步骤(h)中，所述羟醛缩合反应的温度为-78～0℃；优选地，为-60℃。
本发明步骤(h)中，所述羟醛缩合反应的时间为0.5～3h；优选地，为2h。
在一具体实施方式中，所述步骤(h)具体按照如下步骤进行：式(8)化合物溶于合适的溶剂中，加入乙醛，惰性条件下降至低温，滴加路易斯酸溶液进行羟醛缩合反应，然后反应由低温缓慢升至室温。反应结束后，加入饱和碳酸氢钠溶液，分离有机相，水洗，饱和氯化钠溶液洗，有机相减压浓缩至干得式(9)化合物。
本发明步骤(i)中，所述溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇、水、四氢呋喃、丙酮等中的一种或多种；优选地，为甲醇。
本发明步骤(i)中，所述碱选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸钾、碳酸钠等中的一种或多种；优选地，为氢氧化钠。
本发明步骤(i)中，式(9)化合物、碱的摩尔比为1：(1～5)；优选地，为1：3。
本发明步骤(i)中，所述水解反应的温度为50～110℃；优选地，为100℃。
本发明步骤(i)中，所述水解反应的时间为1～6h；优选地，为3h。
在一具体实施方式中，所述步骤(i)具体按照如下步骤进行：式(9)化合物溶解在合适的溶剂中，加入碱，在合适的温度下反应。反应结束后，加入稀盐酸，分离有机相，水洗、饱和氯化钠溶液洗，有机相减压浓缩至干，得到式(10)化合物。
本发明步骤(j)中，所述催化剂为钯碳；进一步优选地，为重量百分比5％的钯碳。
本发明步骤(j)中，所述氢气压力为0.1～10mpa；优选地，为4mpa。
本发明步骤(j)中，所述溶剂选自水、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、叔丁醇、四氢呋喃等中的一种或多种；优选地，为甲醇。
本发明步骤(j)中，所述式(10)化合物、催化剂的质量比为1：(0.01～0.4)；优选地，为1：0.1。
本发明步骤(j)中，所述氢化还原反应的温度为50～110℃；优选地，为70℃。
本发明步骤(j)中，所述氢化还原反应的时间为4～24h；优选地，为24h。
在一具体实施方式中，所述步骤(j)具体按照如下步骤进行：氢化反应釜中加入合适的溶剂，催化剂和式(10)化合物，加热条件下反应。反应结束后，抽滤滤除催化剂，滤液减压浓缩至干，加入30％的氢氧化钠溶液，回流5个小时后，倒入磷酸中，抽滤得到式(11)化合物。
本发明步骤(k)中，所述溶剂选自水、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、叔丁醇、四氢呋喃等中的一种或多种；优选地，为水。
本发明步骤(k)中，所述金属氢化物选自硼氢化钠、硼氢化钾等中的一种或多种；优选地，为硼氢化钠。
本发明步骤(k)中，式(11)化合物、金属氢化物的摩尔比为1:5；优选地，为1；1.1。
本发明步骤(k)中，所述还原反应的温度为50～110℃；优选地，为100℃。
本发明步骤(k)中，所述还原反应的时间为1～8h；优选地，为4h。
在一具体实施方式中，所述步骤(k)具体按照如下步骤进行：式(11)化合物溶解在合适的溶剂中，加入金属氢化物，加热条件下反应。反应结束后，加入稀盐酸，二氯甲烷萃取，水洗，饱和氯化钠溶液洗，有机相减压浓缩至干得目标化合物式(i)奥贝胆酸。
本发明步骤(l)中，所述溶剂选自水、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、叔丁醇、四氢呋喃等中的一种或多种；优选地，为水。
本发明步骤(l)中，所述反应的温度是50～110℃；优选地，为100℃。
本发明步骤(l)中，所述反应的时间为3-24h；优选地，为24h。
本发明步骤(l)中，所述碱性水溶液是氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸钾、碳酸钠等中的一种或多种；优选地，为氢氧化钠；进一步优选地，为质量分数30％的氢氧化钠水溶液。
本发明步骤(l)中，所述催化剂为钯碳；优选地，为钯碳(重量百分比5％)。
本发明步骤(l)中，所述氢气压力为0.1～10mpa，其中优选4mpa。
本发明步骤(l)中，所述金属氢化物为硼氢化钠、硼氢化钾；优选地，为硼氢化钠。
在一具体实施方式中，所述步骤(l)具体按照如下步骤进行：化合物(9)溶解在碱性水溶液中，加入催化剂，金属氢化物，加热条件下反应。反应结束后，加入磷酸，抽滤，烘干得目标化合物式(i)奥贝胆酸。
本发明步骤(m)中，所述溶剂选自水、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、叔丁醇、四氢呋喃等中的一种或多种；优选地，为水。
本发明步骤(m)中，所述碱性条件的ph为9～14；优选地，ph为14。可通过加入常见碱来调节ph，所述碱包括但不限于naoh、koh等。
本发明步骤(m)中，所述金属氢化物选自硼氢化钠nabh4、硼氢化钾等中的一种或多种；优选地，为硼氢化钠。
本发明步骤(m)中，式(10)化合物、金属氢化物的摩尔比为1：(1～5)；优选地，为1：1.1。
本发明步骤(m)中，所述还原反应的温度为50～110℃；优选地，为100℃。
本发明步骤(m)中，所述还原反应的时间为1～8h；优选地，为4h。
在一具体实施方式中，所述步骤(m)具体按照如下步骤进行：式(10)化合物溶解在合适的溶剂中，加入金属氢化物，加热条件下反应。反应结束后，加入稀盐酸，二氯甲烷萃取，水洗，饱和氯化钠溶液洗，有机相减压浓缩至干得式(12)化合物。
本发明步骤(n)中，所述催化剂为钯碳；进一步优选地，为重量百分比5％的钯碳。
本发明步骤(n)中，所述氢气压力为0.1～10mpa；优选地，为4mpa。
本发明步骤(n)中，所述溶剂选自水、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、叔丁醇、四氢呋喃等中的一种或多种；优选地，为甲醇。
本发明步骤(n)中，所述式(12)化合物、催化剂的质量比为1：(0.01～0.4)；优选地，为1：0.1。
本发明步骤(n)中，所述氢化还原反应的温度为50～110℃；优选地，为70℃。
本发明步骤(n)中，所述氢化还原反应的时间为4～24h；优选地，为24h。
在一具体实施方式中，所述步骤(n)具体按照如下步骤进行：氢化反应釜中加入合适的溶剂，催化剂和式(12)化合物，加热条件下反应。反应结束后，抽滤滤除催化剂，滤液减压浓缩至干，加入30％的氢氧化钠溶液，回流5个小时后，倒入磷酸中，抽滤得目标化合物式(i)奥贝胆酸。
本发明还提出了一种3α，7-二(三甲基硅氧基)-5β-胆烷-6，11-二烯-24-酸酯(式8)，3α-羟基-6-亚乙基-7-羰基-5β-胆烷-11-烯-24-酸酯(式9)，3α-羟基-6-亚乙基-7-羰基-5β-胆烷-11-烯-24-酸(式10)化合物，3α，7α-二羟基-6-亚乙基-5β-胆烷-11-烯-24-酸(式12)化合物，其结构分别如下所示：
本发明的有益效果在于，本发明通过以胆酸为原料，合成奥贝胆酸，原料成本低，反应条件温和，后处理简便，成本低，收率高(38.5％-40.3％)，且产品纯度高质量稳定，宜于实现工业化生产。
具体实施方式
结合以下具体实施例，对本发明作进一步详细说明，实施本发明的过程、条件、试剂、实验方法等，除以下专门提及的内容之外，均为本领域的普遍知识和公知常识，本发明没有特别限制内容。
实施例一
1、式(2)化合物的合成：将化合物(1)胆酸(9g，22.0mmol)溶解在200ml丙酮/水(v/v＝3:1)中，避光，缓慢加入nbs(5.7g，31.9mmol)，室温25℃反应2小时。tlc检测反应完全后，加入100ml饱和亚硫酸氢钠溶液淬灭反应，减压除去溶剂至出现白色固体时停止，倒入1l水中后析出大量白色固体，静置析晶，抽滤烘干，得式(2)化合物(8.5g白色固体,产率95％)。直接用于下一步。
2、式(3-1)化合物的合成：将式(2)化合物(8.5g，20.9mmol)溶解在100ml甲醇中，加入浓硫酸1ml，加热回流2小时，减压除去甲醇，加入水30ml，用二氯甲烷(30ml×3)萃取水相。合并有机相，分别用水(50ml)、饱和nacl溶液(50ml)洗涤，无水na2so4干燥，减压浓缩，得到式(3-1)化合物(8.7g白色固体，产率99％)。直接用于下一步。
3、式(4-1)化合物的合成：将式(3-1)化合物(8.7g，20.9mmol)溶解在80ml二氯甲烷中，加入乙酸酐(2.5ml，26.78mmol)，吡啶(3.3ml，41.2mmol)和dmap(125.8mg，1.03mmol)，室温25℃反应2小时。tlc检测反应完全后，减压除去溶剂，加入30ml水，用乙酸乙酯萃取(30ml×3)水相，合并有机相，分别用2m盐酸(50ml)，水(50ml)、饱和nacl溶液(50ml)洗涤，无水na2so4干燥，减压浓缩后硅胶柱层析(pe：ea＝3：1)得到式(4-1)化合物(8.6g白色固体，产率90％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.35(s,5h),5.15–5.07(m,2h),4.68(s,1h),3.99(s,1h),2.00(s,3h),1.19(s,3h),0.96(d,j＝3.6hz,3h),0.65(s,3h).
4、式(5-1)化合物的合成：将式(4-1)化合物(8.6g，18.6mmol)溶解在80ml二氯甲烷中，氮气保护，依次滴加mscl(7.3ml，93mmol)，吡啶(7.5ml，93mmol)，室温25℃反应8小时。tlc检测反应完全后，减压除去溶剂，加入50ml水，用乙酸乙酯萃取(50ml×3)水相，合并有机相，分别用2m盐酸(50ml)，水(50ml)、饱和nacl溶液(50ml)洗涤，无水na2so4干燥，减压浓缩后硅胶柱层析(pe：ea＝5：1)得到式(5-1)化合物(9.5g白色固体，产率95％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ5.12(s,1h),4.70–4.62(m,1h),3.66(s,3h),3.06(s,3h),1.99(s,3h),1.20(s,3h),0.98(d,j＝6.4hz,3h),0.76(s,3h).
5、式(6-1)化合物的合成：将式(5-1)化合物(9.5g，17.6mmol)溶解在n-甲基吡咯烷酮(80ml)中，加入乙酸钾(17.2g，176mmol)，氮气保护，加热至130℃反应8小时。tlc检测反应完全后，加入水(150ml)，用乙酸乙酯萃取(50ml×3)，合并有机相，分别用水(50ml)、饱和nacl溶液(50ml)洗涤，无水na2so4干燥，减压浓缩后硅胶柱层析(pe：ea＝10：1)得式(6-1)化合物(7.04g白色固体，收率90％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.21(dd,j＝8.4,2.4hz,1h),5.33(dd,j＝8.4,1.2hz,1h),4.74–4.67(m,1h),3.66(s,3h),1.99(s,3h),1.14(s,3h),1.01(d,j＝5.2hz,3h),0.74(s,3h).
6、式(7-1)化合物的合成：取7.04g式(6-1)化合物(15.84mmol)溶解在甲醇(48ml)和四氢呋喃(12ml)的混合溶剂中，加入氢氧化钠(950mg，23.76mmol)，室温搅拌30分钟。tlc检测反应完全后，加入稀盐酸调ph为5左右，减压除去溶剂，加入水(80ml)，用乙酸乙酯萃取(30ml×3)，合并有机相，水洗，饱和nacl溶液(50ml)洗涤，无水na2so4干燥，浓缩，硅胶柱层析(pe：ea＝2：1)纯化，式(7-1)化合物(6.1g白色固体，收率95％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.20(d,j＝10.0hz,1h),5.35(d,j＝10.0hz,1h),3.66(s,3h),3.62(s,1h),1.13(s,3h),1.01(d,j＝6.0hz,3h),0.74(s,3h).
7、式(8-1)化合物的合成：将lda(6ml，1mol/l)溶解在无水thf(5ml)中，降温至-78℃，氮气保护，搅拌10分钟后，加入tmscl(0.63ml,5mmol)，继续搅拌10分钟后，滴加式(7-1)化合物(200mg，0.5mmol)的thf(5ml)溶液。反应1小时后，加入三乙胺(0.7ml，5mmol)。继续反应1小时，tlc检测反应完毕,逐渐升至室温，加入饱和碳酸氢钠淬灭反应。加入水(20ml)，用乙酸乙酯萃取(10ml×3)，合并有机相，水洗，饱和nacl溶液(50ml)洗涤，无水na2so4干燥，浓缩，得淡黄色油状物式(8-1)，直接下一步。
8、式(9-1)化合物的合成：将上一步产物式(8-1)化合物溶解在无水二氯甲烷(20ml)中，加入乙醛(0.056ml，1mmol)，降温至-60℃。搅拌10分钟后，加入三氟化硼乙醚(0.63ml，5mmol)。反应2小时后，逐渐升至室温，然后在35℃下，搅拌1小时。tlc检测反应完毕，加入饱和碳酸氢钠淬灭反应。加入水(20ml)，用乙酸乙酯萃取(10ml×3)，合并有机相，水洗，饱和nacl溶液(50ml)洗涤，无水na2so4干燥，浓缩，硅胶柱层析(dcm：meoh＝40：1)纯化，得式(9-1)化合物(白色固体149mg，2步收率70％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.23(d,j＝10.0hz,1h),6.16(d,j＝6.8hz,1h),5.41(d,j＝10.4hz,1h),3.66(s,3h),3.65–3.62(m,1h),1.69(d,j＝6.4hz,3h),1.01(d,j＝6.0hz,3h),0.98(s,3h),0.73(s,3h).
9、式(10)化合物的合成：将式(9-1)化合物(0.25g，0.58mmol)溶解在甲醇(15ml)中，加入氢氧化钠(70mg，1.74mmol)，水(1ml)，50℃反应3小时。tlc检测反应完毕，加稀盐酸调ph＝5左右，加入水(20ml)，用二氯甲烷萃取(10ml×3)，合并有机相，水洗，饱和nacl溶液(50ml)洗涤，无水na2so4干燥，浓缩，得式(10)化合物，直接下一步。
10、式(11)化合物的合成：将式(10)化合物(240mg，0.58mmol)溶解在甲醇(20ml)中，加入重量百分比5％的钯碳(24mg)，h2(4mpa)，70℃反应24小时。tlc检测反应完毕，硅藻土抽滤，浓缩后，加入naoh溶液(20ml，30％)，回流5小时后，加磷酸酸调ph＝5左右，用二氯甲烷萃取(10ml×3)，合并有机相，水洗，饱和nacl溶液(50ml)洗涤，无水na2so4干燥，浓缩，硅胶柱层析(dcm：meoh＝20：1)纯化，得式(11)化合物(白色固体220mg，2步收率90％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ3.56–3.51(m,1h),1.25(s,3h),1.22(s,3h),0.93(d,j＝6.4hz,3h),0.80(t,j＝7.4hz,3h),0.65(s,3h).
11、式(12)化合物的合成：将式(10)化合物(200mg，0.48mmol)溶解在含naoh(50％，0.5ml)的水(10ml)中，加热至100℃后，加入nabh4(20mg，0.53mmol)的水溶液(2.5ml)，100℃反应4小时。tlc检测反应完毕，加稀盐酸调ph＝5左右，用二氯甲烷萃取(10ml×3)，合并有机相，水洗，饱和nacl溶液(50ml)洗涤，无水na2so4干燥，浓缩，硅胶柱层析(dcm：meoh＝10：1)纯化，得式(12)化合物(白色固体186mg，93％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.12(d,j＝10.4hz,1h),5.68(d,j＝6.4hz,1h),5.40(d,j＝10.0hz,1h),4.15(d,j＝10.0hz,1h),3.71–3.62(m,1h),1.62(d,j＝6.8hz,3h),1.02(d,j＝6.0hz,3h),0.75(d,j＝6.1hz,3h),0.73(s,3h).
12、奥贝胆酸的合成：将式(11)化合物(100mg，0.24mmol)溶解在含naoh(50％，0.2ml)的水(10ml)中，加热回流后，加入nabh4(10mg，0.26mmol)的水溶液(2.5ml)，反应4小时。tlc检测反应完毕，加稀盐酸调ph＝5左右，用二氯甲烷萃取(10ml×3)，合并有机相，水洗，饱和nacl溶液(50ml)洗涤，无水na2so4干燥，浓缩，硅胶柱层析(dcm：meoh＝10：1)纯化，得奥贝胆酸(白色固体93mg，93％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ3.70(s,1h),3.42–3.38(m,1h),0.94(d,j＝6.0hz,3h),0.91–0.87(m,6h),0.66(s,3h).
13、奥贝胆酸的合成：将式(9-1)化合物(0.25g，0.58mmol)溶解在氢氧化钠的水溶液(30％)中(10ml)，加入钯碳(50mg)，nabh4(24mg，0.64mmol)，h2(4mpa)，100℃反应24小时。tlc检测反应完毕，加磷酸调ph＝5左右，抽滤，烘干，得奥贝胆酸(白色固体196mg，80％)1hnmr(400mhz,cdcl3)δ3.70(s,1h),3.42–3.38(m,1h),0.94(d,j＝6.0hz,3h),0.91–0.87(m,6h),0.66(s,3h).
14、奥贝胆酸的合成：将式(12)化合物(200mg，0.48mmol)溶解在甲醇(20ml)中，加入钯碳(20mg)，h2(4mpa)，70℃反应24小时。tlc检测反应完毕，硅藻土抽滤，浓缩后，加入naoh溶液(20ml，30％)，回流5小时后，加磷酸酸调ph＝5左右，用二氯甲烷萃取(10ml×3)，合并有机相，水洗，饱和nacl溶液(50ml)洗涤，无水na2so4干燥，浓缩，硅胶柱层析(dcm：meoh＝20：1)纯化，得奥贝胆酸(白色固体192mg，95％)1hnmr(400mhz,cdcl3)δ3.70(s,1h),3.42–3.38(m,1h),0.94(d,j＝6.0hz,3h),0.91–0.87(m,6h),0.66(s,3h).
本发明保护内容不局限以上实施例。在不背离发明构思的精神和范围下，本领域技术人员能够想到的变化和优点都被包括在本发明中，并且以所附的权利要求书为保护范围。