本发明涉及的是抗病毒检测技术领域，具体的说是一种中草药的抗病毒功能的检测方法。
背景技术：
随着集约化、高密度养殖的迅速发展，养殖业频繁爆发疾病，造成了重大的经济损失，成为了目前影响海水养殖稳定发展的关键问题。其中，病毒由于其传播速度快，能够在短时间内造成养殖个体大量死亡，是目前养殖业中最为普遍、又危害极为严重的病害。并且其宿主范围广，从鱼类、两栖类、爬行类直到哺乳类都有病例报道，有些还是人畜共患病原。
本发明针对以上缺陷，提供了一种中草药抗病毒功能的检测方法，便于抗病毒。
技术实现要素：
本发明的目的在于针对现有技术的缺陷和不足，提供了一种中草药的抗病毒功能的检测方法。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：
一种中草药的抗病毒功能的检测方法，步骤如下：
一、样品处理
1、中草药预处理：将选择的中草药产品，如果是固体或制剂，进行标准熬煮成为液体汤药；如果是液体产品，直接进行1500rpm离心5min,去除沉淀；
2、用0.45μm滤器过滤上述过程得到的上清液为样品，放-20℃冰箱中保存；
二、样品最佳浓度的选择
1、设置不同浓度梯度50％(即250ul完全培养基+250ul中草药样品)、10％、1％、0.1％，28℃孵育epc细胞24h；
2、观察epc细胞的存活情况，选择合适浓度；
三、抗病毒功能检测
1、实验前先用选择好的样品浓度孵育epc细胞24h，并设立不加中草药样品和用epc中草药样品的对照组；
2、所有孔吸出原培养基用0.1moisvcv孵育细胞1h后，吸出培养基再用10％fbs+mem培养基孵育细胞，观察24h时细胞的病变情况并收集样品；
3、提取上述样品rna，反转录为cdna，分别检测与抗病毒反应相关的mx1的转录水平以及svcv-g的复制水平。
本发明的有益效果为：中草药具有明显的抗病毒效果，不但能够提高养殖生物的免疫力，提高对外界环境的抗逆性，还具有无毒、无药物残留、使用安全方便的优点，具有一定的适用性。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施方式，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施方式仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例：
一种中草药的抗病毒功能的检测方法，步骤如下：
一、样品处理
1、中草药预处理：将选择的中草药产品，如果是固体或制剂，进行标准熬煮成为液体汤药；如果是液体产品，直接进行1500rpm离心5min,去除沉淀；
2、用0.45μm滤器过滤上述过程得到的上清液为样品，放-20℃冰箱中保存；
二、样品最佳浓度的选择
1、设置不同浓度梯度50％(即250ul完全培养基+250ul中草药样品)、10％、1％、0.1％，28℃孵育epc细胞24h；
2、观察epc细胞的存活情况，选择合适浓度；
三、抗病毒功能检测
1、实验前先用选择好的样品浓度孵育epc细胞24h，并设立不加中草药样品和用epc中草药样品的对照组；
2、所有孔吸出原培养基用0.1moisvcv孵育细胞1h后，吸出培养基再用10％fbs+mem培养基孵育细胞，观察24h时细胞的病变情况并收集样品；
3、提取上述样品rna，反转录为cdna，分别检测与抗病毒反应相关的mx1的转录水平以及svcv-g的复制水平。
实验检测结果
运用50％浓度中草药样品进行实验检测，发现epc细胞6h内死亡，死亡率高达90％；10％浓度中草药样品对epc细胞有较大毒性，死亡率40％；1％浓度中草药样品对细胞几乎没有损伤。
实验证明，所筛选的中草药具有明显的抗病毒效果。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。