编码新型疱疹抗原的核酸分子、包含所述核酸分子的疫苗及其使用方法与流程

发明领域

本发明涉及编码人疱疹家族病毒(herp)蛋白及其片段的核酸序列；改进的疱疹疫苗、改进的用于诱导针对疱疹的免疫应答的方法、改进的用于针对疱疹病毒预防性和/或治疗性免疫个体的方法。

发明背景

疱疹病毒科(疱疹病毒或疱疹家族病毒)是具有相对大的复杂基因组的囊膜、双链dna病毒的家族名称。它们在大量脊椎动物宿主的细胞核中复制，包括在人中分离的八种变体，多种各自在马、牛、鼠、猪、鸡、龟、蜥蜴、鱼中，并且甚至在一些无脊椎动物，例如牡蛎中。人疱疹病毒感染具地方性以及性接触是传播多种疱疹病毒的重要方法，所述多种疱疹病毒包括单纯性疱疹病毒1和2(hsv-1、hsv-2)、也包括人巨细胞病毒(hhv-5)以及可能包括卡波西肉瘤疱疹病毒(hhv-8)。遗传性疱疹的日益流行和新生儿感染的对应增加以及在人癌症中作为辅因子的艾普斯登-巴尔病毒(epstein-barrvirus)(hhv-4)和卡波西肉瘤疱疹病毒使得急切需要更好理解该复杂、以及极其成功的病毒家族。

所有疱疹病毒病毒粒子的病毒粒子结构均由四种结构元件组成：1.核心：核心由形成环形的dsdna的单一线性分子组成。2.衣壳：围绕核心的是由162个衣壳粒构成的具有100nm直径的二十面体衣壳。3.被膜：在衣壳和囊膜之间的是无定形、有时不对称、称为被膜的特征物。它由病毒酶组成，其中一些是控制细胞的化学过程和将它们转化生成病毒粒子所需的，其中一些抵御宿主细胞的即时应答，以及另外一些的功能尚不清楚。4.囊膜：囊膜是病毒粒子的外层以及由改变的宿主膜和十二种独特的病毒糖蛋白构成。它们在电子显微图中作为嵌入囊膜中短刺突出现。

疱疹病毒基因组的长度范围为120至230kbp，它具有31％至75％g+c含量的碱性组合物以及含有60至120个基因。因为复制发生在细胞核内，所以疱疹病毒既能使用宿主的转录机制又能使用dna修复酶以支持具有复杂基因阵列的大基因组。疱疹病毒基因，类似于它们真核宿主的基因，没有排列在操纵子中，并且在大部分情况下，它们具有单独的启动子。然而，不同于真核基因，极其少的疱疹病毒基因被剪接。

基因被表征为细胞培养中生长必需或者非必需的。必需基因调节转录以及它们是构建病毒粒子所需要的。大部分的非必需基因用于增强病毒生长的细胞环境，使病毒抵御宿主免疫系统以及促进细胞间扩散。大量非必需基因实际上是体内感染中生长所需要的。仅在实验室细胞培养的受限环境中，它们是非必需的。所有疱疹病毒基因组含有直接和倒转的冗长末端重复。有六个末端重复排列，并且理解这些重复子如何在病毒中成功作用是目前令人感兴趣的研究部分。

表征疱疹病毒科家族的成员的四种生物性能是：疱疹病毒表达参与核酸的代谢(例如胸苷激酶)、dna合成(例如dna解旋酶/引发酶)和蛋白的加工(例如蛋白激酶)的酶；疱疹病毒在细胞核内合成病毒基因组以及组装衣壳；它们产生的病毒感染不可避免伴随细胞破坏；以及疱疹病毒能够在它们宿主中形成和维持潜伏状态以及在细胞应力下再激活。潜伏状态包括维持在细胞核中病毒基因组稳定，仅有限地表达病毒基因的少量亚型。

疱疹病毒家族，其包括巨细胞病毒和单纯疱疹病毒，可在受感染个体的体液(包括尿液、唾液、母乳、血液、眼泪、精液和阴道液)中找到。

在美国，50％至80％的40岁成年人为hcmv阳性，并且没有治愈者。虽然大部分感染是“沉默式”，但hcmv能够导致未出生的婴儿和免疫缺失人群患病。hcmv阳性母亲能够导致唐氏综合征(downsyndrome)、胎儿酒精综合征和神经管缺陷。而且，约33％的第一次被hcmv感染的妇女在怀孕时传递病毒给未出生的婴儿。目前，150个婴儿中有1个出生就有先天性hcmv感染以及750个婴儿中有1个由于hcmv出生就有先天性或者发育成永久性残疾。而且，hcmv在发展中国家和社会经济条件较差的地区很广泛。因此，开发针对hcmv的预防性和/或治疗性疫苗将降低世界上与病毒相关疾病和疾患的发病率和医疗费用。

目前报道使用减毒/灭活病毒或重组蛋白的疫苗策略产生最好约35％的效能水平。由于识别诸如gb、gh、gm和gn的病毒糖蛋白的抗体(ab)在保护条件下观察到，据认为，针对这些病毒表面靶中和ab的引发是重要的。而且，已知t细胞表位出现在包括ul83(pp65)的特定病毒蛋白中，其特异性限定靶向pp65表位的基于t细胞的疫苗方法。

已经研究用于接种针对动物和人疾病的核酸序列的直接施用，并且大量尝试集中在核酸递送的有效和高效方法以生成期望抗原的必需表达，从而得到免疫原应答，并最终取得该技术的成功。

dna疫苗具有超过诸如减毒活疫苗和基于重组蛋白疫苗的传统接种方法的多种概念上的优势。dna疫苗安全、稳定、容易生产、以及在人体中耐受性好，临床前试验表明几乎没有质粒整合的证据[martin,t.，等人，质粒dna疟疾疫苗：在肌内注射后基因组整合的可能性.humgenether,1999.10(5):第759-68页；nichols,w.w.,等人，至宿主细胞基因组内的可能dna疫苗整合.annnyacadsci,1995.第772:30-9页]。此外，由于疫苗的效能不受对载体的预先存在的抗体滴度的影响的事实，dna疫苗完全适于重复施用[chattergoon,m.,j.boyer,和d.b.weiner，遗传免疫：疫苗和免疫治疗的新纪元.fasebj,1997.11(10):第753-63页]。然而，dna疫苗的临床采用的一个主要障碍是当转移至较大动物时平台的免疫原性降低[liu,m.a.和j.b.ulmer,质粒dna疫苗的人临床试验.advgenet,2005.55:第25-40页]。在dna疫苗免疫原的工程化中目前技术进展包括密码子优化、rna优化以及免疫球蛋白前导序列的加入提高了dna疫苗的表达和免疫原性[andre,s.,等人，通过使用具有优化的密码子用途的合成gp120序列进行dna接种来引发增强的免疫应答.jvirol,1998.72(2):第1497-503页；deml,l.,等人，密码子用途优化对编码人免疫缺陷病毒1型gag蛋白的dna候选疫苗的表达和免疫原性的多重效应.jvirol,2001.75(22):第10991-1001页；laddy,d.j.,等人，基于共有区的针对禽流感的新型dna疫苗的免疫原性.vaccine,2007.25(16):第2984-9页；frelin,l.,等人，密码子优化和mrna扩增有效增强丙型肝炎病毒非结构3/4a基因的免疫原性.genether,2004.11(6):第522-33页]，以及在质粒递送体系中最近开发的技术，例如电穿孔[hirao,l.a.,等人，通过电穿孔进行的皮内/皮下免疫提高了猪和恒河猴中质粒疫苗递送和效能.vaccine,2008.26(3):第440-8页；luckay,a.,等人，质粒dna疫苗设计和体内电穿孔对在恒河猴中所得疫苗特异性免疫应答的效应.jvirol,2007.81(10):第5257-69页；ahlen,g.,等人，体内电穿孔通过增加局部dna摄取、蛋白表达、炎症和cd3+细胞的浸润来增强丙型肝炎病毒非结构3/4adna的免疫原性.jimmunol,2007.179(7):第4741-53页]。此外，研究已表明，如与单独的天然抗原相比，使用共有免疫原能够增加细胞免疫应答的幅度(breadth)[yan,j.,等人，通过基于工程化的hiv-1亚型b共有区的囊膜dna疫苗引发的增强的细胞免疫应答.molther,2007.15(2):第411-21页；rolland,m.,等人，人免疫缺陷病毒1型祖蛋白的祖先树中心的重建和功能).jvirol,2007.81(16):第8507-14页]。

递送诸如质粒dna的核酸序列的一种方法是电穿孔(ep)技术。在人临床试验中使用该技术来递送抗癌药物，例如博来霉素，以及在许多临床前研究中用于大量动物种类中。

仍然需求编码疱疹病毒抗原的核酸构建体和用于诱导针对疱疹病毒的免疫应答的组合物。仍然需求既经济又有效的针对疱疹病毒的有效疫苗。

发明概述

在本发明的一方面中，存在核酸分子，其包含编码选自以下的一种或多种蛋白的疱疹病毒抗原的编码序列：包含seqidno:2的蛋白；与seqidno:2具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:4的蛋白；与seqidno:4具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:6的蛋白；与seqidno:6具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:8的蛋白；与seqidno:8具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:10的蛋白；与seqidno:10具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:12的蛋白；与seqidno:12具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:14的蛋白；与seqidno:14具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:16的蛋白；与seqidno:16具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:18的蛋白；与seqidno:18具有95％同源性的蛋白；包含包含seqidno:20的蛋白的蛋白；与seqidno:20具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:85的蛋白，与seqidno:85具有95％同源性的蛋白；包含hsv1-gh(直至seqidno:87的位置838的n-末端区)的蛋白，与hsv1-gh具有95％同源性的蛋白；包含hsv1-gl(从seqidno:87的位置846起的c-末端区)的蛋白，与hsv1-gl具有95％同源性的蛋白；包含hsv1-gc(直至seqidno:89的位置511的n-末端区)的蛋白，与hsv1-gc具有95％同源性的蛋白；包含hsv1-gd(从seqidno:89的位置519起的c-末端区)的蛋白，与hsv1-gd具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:91的蛋白，与seqidno:91具有95％同源性的蛋白；包含hsv2-gh(直至seqidno:93的位置838的n-末端区)的蛋白，与hsv2-gh具有95％同源性的蛋白；包含hsv2-gl(从seqidno:93的位置846起的c-末端区)的蛋白，与hsv2-gl具有95％同源性的蛋白；包含hsv2-gc(直至seqidno:95的位置480的n-末端区)的蛋白，与hsv2-gc具有95％同源性的蛋白；包含hsv2-gd(从seqidno:95的位置488起的c-末端区)的蛋白，与hsv2-gd具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:97的蛋白，与seqidno:97具有95％同源性的蛋白；包含vzv-gh(直至seqidno:99的位置841的n-末端区)的蛋白，与vzv-gh具有95％同源性的蛋白；包含vzv-gl(从seqidno:99的位置849起的c-末端区)的蛋白，与vzv-gl具有95％同源性的蛋白；包含vzv-gm(直至seqidno:101的位置435的n-末端区)的蛋白，与vzv-gm具有95％同源性的蛋白；包含vzv-gn(从seqidno:101的位置443起的c-末端区)的蛋白，与vzv-gn具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:103的蛋白，与seqidno:103具有95％同源性的蛋白；包含cehv1-gh(直至seqidno:105的位置858的n-末端区)的蛋白，与cehv1-gh具有95％同源性的蛋白；包含cehv1-gl(从seqidno:105的位置866起的c-末端区)的蛋白，与cehv1-gl具有95％同源性的蛋白；包含cehv1-gc(直至seqidno:107的位置467的n-末端区)的蛋白，与cehv1-gc具有95％同源性的蛋白；包含cehv1-gd(从seqidno:107的位置475起的c-末端区)的蛋白，与cehv1-gd具有95％同源性的蛋白；包含vzv-ge(直至seqidno:109的位置623的n-末端区)的蛋白，与vzv-ge具有95％同源性的蛋白；包含vzv-gi(从seqidno:109的位置631起的c-末端区)的蛋白，与vzv-gi具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:111的蛋白，与seqidno:111具有95％同源性的蛋白；以及包含seqidno:113的蛋白，与seqidno:113具有95％同源性的蛋白；及其包含至少10个氨基酸的免疫片段。

在一些例子中，以上示出的蛋白包含信号肽，例如ige信号肽(seqidno:61)(例如seqidno:22、24、26、28、30、32、34、36、38和40)和/或抗原标签，例如ha标签(seqidno:62)(例如seqidno:42、44、46、48、50、52、54、56、58和60)。而且，以上示出的一种或多种蛋白可彼此连接以形成融合蛋白。在一些例子中，蛋白可通过蛋白裂解位点例如弗林蛋白酶位点的方式来连接(seqidno:63)(例如seqidno:65、67、69、71、73、75、87、89、93、95、99、101、105和107)。

也提供核酸分子，其包含编码以上示出的一种或多种蛋白分子的序列。在一些实施方案中，核酸分子包含选自以下的序列：包含seqidno:1的核酸序列；与seqidno:1具有95％同源性的核酸序列；包含seqidno:3的核酸序列；与seqidno:3具有95％同源性的核酸序列；包含seqidno:5的核酸序列；与seqidno:5具有95％同源性的核酸序列；包含seqidno:7的核酸序列；与seqidno:7具有95％同源性的核酸序列；包含seqidno:9的核酸序列；与seqidno:9具有95％同源性的核酸序列；包含seqidno:11的核酸序列；与seqidno:11具有95％同源性的核酸序列；包含seqidno:13的核酸序列；与seqidno:13具有95％同源性的核酸序列；包含seqidno:15的核酸序列；与seqidno:15具有95％同源性的核酸序列；包含seqidno:17的核酸序列；与seqidno:17具有95％同源性的核酸序列；包含seqidno:19的核酸序列；与seqidno:19具有95％同源性的核酸序列；包含seqidno:86的核酸序列；与seqidno:86具有95％同源性的核酸序列；包含编码hsv1-gh的dna序列的核酸序列；与编码hsv1-gh的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码hsv1-gl的dna序列的核酸序列；与编码hsv1-gl的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码hsv1-gc的dna序列的核酸序列；与编码hsv1-gc的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码hsv1-gd的dna序列的核酸序列；与编码hsv1-gd的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含seqidno:92的核酸序列；与seqidno:92具有95％同源性的核酸序列；包含编码hsv2-gh的dna序列的核酸序列；与编码hsv2-gh的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码hsv2-gl的dna序列的核酸序列；与编码hsv2-gl的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码hsv2-gc的dna序列的核酸序列；与编码hsv2-gc的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码hsv2-gd的dna序列的核酸序列；与编码hsv2-gd的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含seqidno:98的核酸序列；与seqidno:98具有95％同源性的核酸序列；包含编码vzv-gh的dna序列的核酸序列；与编码vzv-gh的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码vzv-gl的dna序列的核酸序列；与编码vzv-gl的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码vzv-gm的dna序列的核酸序列；与编码vzv-gm的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码vzv-gn的dna序列的核酸序列；与编码vzv-gn的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含seqidno:104的核酸序列；与seqidno:104具有95％同源性的核酸序列；包含编码cehv1-gh的dna序列的核酸序列；与编码cehv1-gh的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码cehv1-gl的dna序列的核酸序列；与编码cehv1-gl的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码cehv1-gc的dna序列的核酸序列；与编码cehv1-gc的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码cehv1-gd的dna序列的核酸序列；与编码cehv1-gd的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码vzv-ge的dna序列的核酸序列；与编码vzv-ge的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码vzv-gi的dna序列的核酸序列；与编码vzv-gi的dna序列具有95％同源性的核酸序列；包含seqidno:112的核酸序列；与seqidno:112具有95％同源性的核酸序列；和包含seqidno:114的核酸序列；与seqidno:114具有95％同源性的核酸序列；及其包含编码含有至少10个氨基酸的免疫片段的核酸序列的片段。

在一些例子中，核酸序列编码蛋白，其进一步包含信号肽，例如ige信号肽(编码seqidno:61的dna序列)(例如seqidno:21、23、25、27、29、31、33、35、37和39)和/或抗原标签，例如ha标签(编码seqidno:62的dna序列)(例如seqidno:41、43、45、47、49、51、53、55、57和59)。而且，一种或多种核酸序列可彼此连接以形成编码融合蛋白的嵌合基因。在一些例子中，核酸序列编码通过蛋白裂解位点例如弗林蛋白酶位点的方式来连接的蛋白(编码seqidno:63的dna序列)(例如seqidno:64、66、68、70、72、74、88、90、94、96、100、102、106、108和110)。

在一些实施方案中，也提供包含编码以上示出的一种或多种蛋白分子的序列的核酸分子，所述核酸分子不同的第二核酸序列组合，其中第二核酸序列编码选自以下的蛋白：hcmvgb、hcmvgm、hcmvgn、hcmvgh、hcmvgl、hcmvgo、hcmv-ul131a、hcmv-ul130、hcmv-ul128、hcmv-ul83、hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gc、hsv1-gd、hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gc、hsv2-gd、vzv-gb、vzv-gh、vzv-gl、vzv-gm、vzv-gn、vzv-ge、vzv-gi、vzv-gc、vzv-gk、cehv1-gb、cehv1-gh、cehv1-gl、cehv1-gc和cehv1-gd。优选地，使hcmv序列与不同的第二hcmv序列组合；使hsv1序列与不同的第二hsv1序列组合；使hsv2序列与不同的第二hsv2序列组合；使cehv1序列与不同的第二cehv1序列组合；以及使vzv序列与不同的第二vzv序列组合。

本发明的另一方面包括包含本文提供的一种或多种核酸分子的组合物。

本发明的一些方面提供诱导针对疱疹病毒抗原的免疫应答的方法，其包括施用本文提供的核酸分子。优选地，疱疹病毒抗原包含hcmv、hsv1、hsv2、cehv1和vzv抗原。

本发明的另一方面提供保护个体免受疱疹病毒感染的方法，其包括施用本文提供的核酸分子。在一些实施方案中，个体是已经诊断具有疱疹病毒感染的个体。

在本发明的另一方面中，存在选自以下的蛋白：包含seqidno:2的蛋白；与seqidno:2具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:4的蛋白；与seqidno:4具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:6的蛋白；与seqidno:6具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:8的蛋白；与seqidno:8具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:10的蛋白；与seqidno:10具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:12的蛋白；与seqidno:12具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:14的蛋白；与seqidno:14具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:16的蛋白；与seqidno:16具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:18的蛋白；与seqidno:18具有95％同源性的蛋白；包含包含seqidno:20的蛋白的蛋白；与seqidno:20具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:85的蛋白，与seqidno:85具有95％同源性的蛋白；包含hsv1-gh(直至seqidno:87的位置838的n-末端区)的蛋白，与hsv1-gh具有95％同源性的蛋白；包含hsv1-gl(从seqidno:87的位置846起的c-末端区)的蛋白，与hsv1-gl具有95％同源性的蛋白；包含hsv1-gc(直至seqidno:89的位置511的n-末端区)的蛋白，与hsv1-gc具有95％同源性的蛋白；包含hsv1-gd(从seqidno:89的位置519起的c-末端区)的蛋白，与hsv1-gd具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:91的蛋白，与seqidno:91具有95％同源性的蛋白；包含hsv2-gh(直至seqidno:93的位置838的n-末端区)的蛋白，与hsv2-gh具有95％同源性的蛋白；包含hsv2-gl(从seqidno:93的位置846起的c-末端区)的蛋白，与hsv2-gl具有95％同源性的蛋白；包含hsv2-gc(直至seqidno:95的位置480的n-末端区)的蛋白，与hsv2-gc具有95％同源性的蛋白；包含hsv2-gd(从seqidno:95的位置488起的c-末端区)的蛋白，与hsv2-gd具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:97的蛋白，与seqidno:97具有95％同源性的蛋白；包含vzv-gh(直至seqidno:99的位置841的n-末端区)的蛋白，与vzv-gh具有95％同源性的蛋白；包含vzv-gl(从seqidno:99的位置849起的c-末端区)的蛋白，与vzv-gl具有95％同源性的蛋白；包含vzv-gm(直至seqidno:101的位置435的n-末端区)的蛋白，与vzv-gm具有95％同源性的蛋白；包含vzv-gn(从seqidno:101的位置443起的c-末端区)的蛋白，与vzv-gn具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:103的蛋白，与seqidno:103具有95％同源性的蛋白；包含cehv1-gh(直至seqidno:105的位置858的n-末端区)的蛋白，与cehv1-gh具有95％同源性的蛋白；包含cehv1-gl(从seqidno:105的位置866起的c-末端区)的蛋白，与cehv1-gl具有95％同源性的蛋白；包含cehv1-gc(直至seqidno:107的位置467的n-末端区)的蛋白，与cehv1-gc具有95％同源性的蛋白；包含cehv1-gd(从seqidno:107的位置475起的c-末端区)的蛋白，与cehv1-gd具有95％同源性的蛋白；包含vzv-ge(直至seqidno:109的位置623的n-末端区)的蛋白，与vzv-ge具有95％同源性的蛋白；包含vzv-gi(从seqidno:109的位置631起的c-末端区)的蛋白，与vzv-gi具有95％同源性的蛋白；包含seqidno:111的蛋白，与seqidno:111具有95％同源性的蛋白；和包含seqidno:113的蛋白，与seqidno:113具有95％同源性的蛋白；及其包含至少10个氨基酸的免疫片段。

在一些实施方案中，提供诱导针对疱疹病毒感染的免疫应答的方法，其包括向个体递送本文提供的蛋白。在一些实施方案中，个体是已经诊断具有疱疹病毒感染的个体。

本发明的一方面涉及生成针对疱疹家族病毒的多价疫苗的方法，其包括：进行系统发生和分子进化分析以评估在疱疹病毒的临床相关和公开市售的靶蛋白序列之间的多样性；由以下选择至少两种靶蛋白序列：a)多种蛋白的特异性、临床相关亚群；或者b)高度保守的蛋白；由选择的靶蛋白序列生成共有序列；以及将来自生成步骤的共有靶蛋白序列克隆至一种或多种表达构建体中，用于制备多价疫苗。在一些实施方案中，选择的步骤包括选择靶蛋白，这些靶蛋白彼此相关、作为通过疱疹病毒表达的生物复合物的一部分。在一些实施方案中，选择的靶蛋白是表面抗原。在一些实施方案中，表面抗原选自：gh、gl、gm、gn、gc和gd。在一些实施方案中，表面抗原是gh和gl。在一些实施方案中，多种蛋白的特异性、临床相关亚群进一步包含培养传代没有超过四次的疱疹病毒的选择性临床相关菌株。在一些实施方案中，选择多种蛋白的特异性、临床相关亚群的步骤进一步包括选择培养中传代没有超过六次的疱疹病毒的临床相关菌株。在一些实施方案中，疱疹家族病毒选自：cmv、hsv1、hsv2、vzv、cehv1、ebv、玫瑰疹病毒属、卡波西肉瘤相关疱疹病毒以及muhv。

本发明的另一方面包括生成针对疱疹家族病毒的多价疫苗的方法，其包括：进行系统发生和分子进化分析以评估在疱疹病毒的临床相关和公开市售的靶蛋白序列之间的多样性；由以下选择至少两种靶蛋白序列：a)多种蛋白的特异性、临床相关亚群；或者b)高度保守的蛋白；由选择的靶蛋白序列生成共有序列；以及将来自生成步骤的共有靶蛋白序列克隆至一种或多种表达构建体中，用于制备多价疫苗。使用已知和市售的药学上可接受的赋形剂能够配制表达构建体。在一些实施方案中，多价疫苗也能够包括已知疫苗佐剂，优选il-12、il-15、il-28和rantes。

在一些实施方案中，疱疹家族病毒选自：cmv、hsv1、hsv2、vzv、cehv1、ebv、玫瑰疹病毒属、卡波西肉瘤相关疱疹病毒或muhv，以及优选cmv、hsv1、hsv2、cehv1或vzv。

在一些实施方案中，选择的靶蛋白是彼此相关、作为通过疱疹病毒表达的生物复合物一部分的那些。优选地，选择的靶蛋白是表面抗原，更优选地，为抗原gh、gl、gm、gn、gc和gd，以及甚至更优选地，表面抗原为gh和gl。

在一些实施方案中，选择多种蛋白的特异性、临床相关亚群的步骤进一步包括选择培养中传代没有超过四次、以及优选没有超过六次的疱疹病毒的临床相关菌株。

本发明的一方面涉及针对疱疹家族病毒的疫苗，其包含两种或更多种抗原的编码序列。在一些实施方案中，在相同载体(例如质粒)上提供两种或更多种这些抗原以确保两种抗原在相同细胞上共表达。所提供的抗原的各种排列是不同的布置，其中提供编码这些多抗原的质粒，其包括两种或更多种这些抗原提供在相同载体上的实施方案。例如，观察到来自hcmv和hsv1的gh和gl抗原的组合的共表达提供抗原转运至细胞表面，在缺乏彼此下表达蛋白时这不会发生。数据显示：gh和gl的共表达比在没有彼此下表达蛋白时更有效地提供免疫靶。根据本发明的一方面，多抗原可作为编码序列递送以提供有效的疫苗。在一些实施方案中，在单一载体，例如单一质粒上提供多抗原的编码序列。

附图简述

图1是用作具有疱疹病毒编码序列插入物的质粒骨架的pvax1变体的图谱。pvax1变体的序列示出在seqidno:76中。

图2是在实施例1中描述的质粒1的质粒图谱。质粒1也称为phcmvgb或phcmvgb_pvax1。phcmvgb_pvax1的序列示出在seqidno:77中。

图3是在实施例1中描述的质粒2的质粒图谱。质粒2也称为phcmvgmgn或phcmvgmgn_pvax1。phcmvgmgn_pvax1的序列示出在seqidno:78中。

图4是在实施例1中描述的质粒3的质粒图谱。质粒3也称为phcmvghgl或phcmvghgl_pvax1。phcmvghgl_pvax1的序列示出在seqidno:79中。

图5是在实施例1中描述的质粒4的质粒图谱。质粒4也称为phcmvgo或phcmvgo_pvax1。phcmvgo_pvax1的序列示出在seqidno:80中。

图6是在实施例1中描述的质粒5的质粒图谱。质粒5也称为phcmvgul或phcmvgul_pvax1。phcmvgul_pvax1的序列示出在seqidno:81中。

图7是在实施例1中描述的经修饰的质粒1的质粒图谱。经修饰的质粒1不同于质粒1之处在于经修饰的质粒1不含有连接hcmvgb抗原序列的编码序列的ha标签的编码序列。经修饰的质粒1也称为phcmvgb或phcmv_gb_pvax1。phcmv_gb_pvax1的序列示出在seqidno:82中。

图8是在实施例1中描述的经修饰的质粒3的质粒图谱。经修饰的质粒3不同于质粒3之处在于经修饰的质粒3不含有连接hcmvgh和gl抗原序列的编码序列的ha标签的编码序列。经修饰的质粒3也称为phcmvghgl或phcmv_ghgl_pvax1。phcmv_ghgl_pvax1的序列示出在seqidno:83中。

图9是在实施例1中描述的经修饰的质粒6的质粒图谱。经修饰的质粒6不同于质粒6(未显示)之处在于经修饰的质粒6不含有连接hcmvgu83抗原序列的编码序列的ha标签的编码序列。经修饰的质粒6也称为phcmvgu83或phcmv_ul83_pvax1。phcmv_ul83_pvax1的序列示出在seqidno:84中。

图10显示使用质粒1识别hcmv-gb的优势免疫表位的试验数据。

图11显示使用质粒3识别hcmv-gh和hcmv-gl的优势免疫表位的试验数据。

图12显示使用质粒2识别hcmv-gm和hcmv-gn的优势免疫表位以及使用质粒4识别hmcv-go的优势免疫表位的试验数据。

图13显示使用经修饰的质粒6识别hcmv-ul83的优势免疫表位以及使用质粒5识别hcmv-ul131a、hcmv-ul130和hcmv-ul128的优势免疫表位的试验数据。

图14显示来自使用hcmv蛋白免疫的小鼠的小鼠血清的中和抗体滴度。数据表示为具有95％ci的3个值的几何均值。使用延长存活时间的hff(人包皮成纤维细胞)细胞。

图15显示dna疫苗数据的概况。

图16a-e显示图谱，其显示(a)两组小鼠均经35μg的phcmv-np免疫两次，其中遗传序列不同、来自病毒(天然)或者在小鼠中表达优化(经优化)，但编码的氨基酸是同一的。在第二次免疫之后8天收获脾细胞以及通过elispot来分析np-特异性t细胞。(b)使用有或者没有ep的phcmv-np、具有ep(n＝10)、或者具有2x10⁵pfuhcmvi.p.(n＝5)的pvax免疫小鼠两次。在第二次免疫或hcmv急性感染之后8周使用20ld50hcmvi.c.攻击小鼠以及显示存活率数据。(c)使用或没有ep免疫小鼠一次、两次、三次或四次、使用具有ep的pvax免疫四次、或者hcmv急性感染小鼠。在各次免疫之后、或者在hcmv感染之后60天评估np-特异性igg应答7天，以及显示数据。(d)使用35μg的具有ep的phcmv-np或者45μg的具有ep的phcmv-gp来免疫小鼠两次，以及随后8天评估病毒蛋白特异性t细胞免疫。(e)给予小鼠单次注射35μg的具有ep的phcmv-np或者45μg的具有ep的phcmv-gp、具有ep(n＝10)的pvax、或者2x10⁵pfuhcmvi.p.(n＝5)以及在接种或感染之后8周随后使用20ld50hcmvi.c.攻击。显示各组小鼠的存活率数据。

图17a-j显示来自所显示的公开市售来源的hcmv推定疫苗蛋白免疫原的系统发生树的示意图。使用clustalw来多重对比氨基酸序列以及通过最大似然方法来进行聚类分析。通过引导程序分析(bootstrapanalysis)来验证无根系统发生树的重要性以及在主要节点处通过星号标记重要支撑值(≥80％；1,000引导程序重复次数(bootstrapreplicate))。示出主要报道的基因型，百分比为所有全长序列的氨基酸同源性位置，并示出参照菌株；ad-ad169、dv-davis、jh-jhc、jp-jp、ml-merlin、to-toledo、tn-towne、vr-vr1814。也显示dna疫苗编码的hcmv免疫原(vac)。定标线条表示每位点处氨基酸的位置以及使用mega版本5来进行分析。

图18a-d显示结构相关的hcmv免疫原诱导强大免疫的初期共表达的图谱和图像，包括：a)显示免疫的hcmv：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a和ul83结构域的图谱(也参见相同数据的不同图形显示的图10-13)；b)显示免疫应答的性质的图像；c)hcmv：ul83、go、gb、gmgn、ul和ghgl的图像；以及d)hcmv：ul83、go、gb、gmgn、ul和ghgl的cd44+ifng+t细胞百分比。

图19a-b显示以下中和数据的图谱：a)hcmv：gb、gmgn、ghgl、go、ul和ul83的50％中和水平；以及b)仅cmv、血清反应阳性的血清和经hcmv-ghgl免疫的血清的50％中和水平。

图20a-b显示图谱，其示出以下中和水平：a)通过经hsv1-gb和hsv1-gcgd免疫的血清针对hsv-1(菌株ns)的中和；以及b)通过经hsv2-gb和hsv2-gcgd免疫的血清针对hsv-2(菌株ms)的中和。

发明详述

1.定义

本文所使用的术语仅为了描述特定实施方案，而不是旨在限制。如在说明书和所附权利要求中所使用，除非文本中另有明确说明，否则单数形式“一个/一种(a)”、“一个/一种(an)”和“该/所述(the)”包括复数指示物。

列举本文的数值范围时，明确涵盖在各精确值之间的各介入数字。例如，对于6-9的范围，除了6和9之外，还涵盖数字7和8，以及对于6.0-7.0的范围，明确涵盖数字6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6,9和7.0。

a.佐剂

如本文所使用的“佐剂”是指加入本文所述的dna质粒疫苗以增强通过dna质粒和本文此后描述的编码核酸序列编码的抗原的免疫原性的任何分子。

b.抗体

如本文所使用的“抗体”是指种类igg、igm、iga、igd或ige的抗体或片段、其片段或衍生物，包括fab、f(ab')2、fd以及单链抗体、双链抗体(diabody)、双特异性抗体、双功能性抗体及其衍生物。抗体可以是由哺乳动物的血清样品分离的抗体、多克隆抗体、亲和性纯化的抗体或其混合物，其表现出对期望的表位或来源于其的序列的足够的结合亲和力。

c.编码序列

如本文所使用的“编码序列”或“编码核酸”是指包含编码蛋白的核苷酸序列的核酸(rna或dna分子)。编码序列可以进一步包括可操作连接包括启动子的调控元件的起始和终止信号以及能够在施加核酸的个体或哺乳动物的细胞中指导表达的聚腺苷酸化信号。

d.互补

如本文所使用的“互补”或“互补的”是指核酸可以在核酸分子的核苷酸或者核苷酸类似物之间进行沃森-克里克(watson-crick)(例如，a-t/u和c-g)或者胡斯坦(hoogsteen)碱基配对。

e.共有区或共有序列

如本文所使用的“共有区”或“共有序列”是指基于特定疱疹家族病毒的多种亚型(包括hcmv、hsv1、hsv2、cehv1、vzv、艾普斯登-巴尔病毒(ebv)、玫瑰疹病毒属(或者疱疹嗜淋巴细胞病毒)、卡波西肉瘤相关的疱疹病毒和鼠γ疱疹病毒(muhv-4)，优选hcmv、hsv1、hsv2、cehv1、vzv，以及更优选为hcmv、hsv1、hsv2和vzv抗原)的对比分析的多肽序列。可制备编码共有多肽序列的核酸序列。可使用包含含有共有序列的蛋白质和/或编码此类蛋白质的核酸分子的疫苗，从而诱导针对特定hcmv抗原的多种亚型或血清型的广泛免疫。

f.恒定电流

如本文所使用的“恒定电流”是指通过组织、或界定所述组织的细胞在递送至相同组织的电脉冲持续时间内接受或感受到的电流。电脉冲由本文所述的电穿孔装置递送。因为本文所提供的电穿孔装置具有反馈元件，优选具有瞬时反馈，所以在电脉冲持续时间内在所述组织中该电流保持在恒定安培数下。反馈元件可测定在脉冲持续时间内组织(或细胞)的电阻以及可使电穿孔装置改变它的电能输出(例如，增加电压)，从而在相同组织中电流在电脉冲过程中(以微秒计)、以及不同脉冲之间保持恒定。在一些实施方案中，反馈元件包括控制器。

g.电流反馈或反馈

“电流反馈”或“反馈”可交换使用以及是指所提供的电穿孔装置的积极应答，其包括测定组织在电极之间的电流以及相应地改变通过ep装置递送的能量输出以维持电流水平恒定。在启动脉冲序列或电流处理之前由用户预先设置该恒定水平。通过电穿孔组件，例如，电穿孔装置的控制器可完成反馈，所以本文中电路能够连续监控在电极之间组织的电流以及比较监控的电流(或组织内电流)以预先设置电流和连续进行能量输出调节以维持监控的电流在预先设置的水平。因为反馈回路是模拟闭合回路反馈，所以它可以立即反馈。

h.分散式电流

如本文所使用的“分散式电流”是指由本文所述的电穿孔装置的各种针形电极阵列递送的电流模式，其中该模式最小化、或者优选地消除在待电穿孔的任何组织区域上与电穿孔相关的热应力。

i.电穿孔

如本文交互使用的“电穿孔”、“电透化(electro-permeabilization)”或“电动强化(electro-kineticenhancement)”(“ep”)是指使用跨膜电场脉冲在生物膜中诱导微观路径(孔)；它们的存在使得诸如质粒、寡核苷酸、sirna的生物分子、药物、离子和水从细胞膜的一侧穿过至另一侧。

j.反馈机制

如本文所使用的“反馈机制”是指通过软件或硬件(或固件)来进行处理，该处理接受和比较使用当前值(优选电流)的期望组织(在递送能量脉冲之前、期中和/或之后)的电阻，以及调节递送的能量脉冲以达到设置值。通过模拟闭合回路电路可以进行反馈机制。

k.片段

如本文对于核酸序列所使用的“片段”是指在哺乳动物中编码能够诱发免疫应答的多肽的核酸序列或其部分，其与全长野生型菌株疱疹家族病毒(包括hcmv、hsv1、hsv2、cehv1、vzv、艾普斯登-巴尔病毒(ebv)、玫瑰疹病毒属(或者疱疹嗜淋巴细胞病毒)、卡波西肉瘤相关的疱疹病毒以及鼠γ疱疹病毒(muhv-4)，优选hcmv、hsv1、hsv2、cehv1、vzv，以及更优选hcmv、hsv1、hsv2和vzv抗原)交叉反应。片段可以为dna片段，其选自编码以下所示的蛋白片段的各种核苷酸序列的至少之一。

对于多肽序列的“片段”是指在哺乳动物中编码能够诱发免疫应答的多肽，其与全长野生型菌株疱疹家族病毒(包括hcmv、hsv1、hsv2、cehv1、vzv、艾普斯登-巴尔病毒(ebv)、玫瑰疹病毒属(或者疱疹嗜淋巴细胞病毒)、卡波西肉瘤相关的疱疹病毒以及鼠γ疱疹病毒(muhv-4)，优选hcmv、hsv1、hsv2、cehv1、vzv，以及更优选hcmv、hsv1、hsv2和vzv抗原)交叉反应。共有蛋白的片段可包含至少10％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％或至少95％的共有蛋白。

l.遗传构建体

如本文所使用的术语“遗传构建体”是指包含编码蛋白的核苷酸序列的dna或rna分子。编码序列包括可操作连接包括启动子的调控元件的起始和终止信号以及能够在施加核酸分子的个体的细胞中直接表达的聚腺苷酸化信号。如本文所使用的术语“可表达形式”是指含有必要调控元件的基因构建体，该调控元件可操作连接编码蛋白的编码序列，使得当该基因构建体在个体细胞中存在时，编码序列会被表达。

m.同一的

在两种或更多种核酸或多肽序列的文本中如本文所使用的“同一的”或“同一性”是指序列具有在指定的区域内相同的残基的规定百分比。通过以下方式可以计算百分比：最佳地对比两个序列，在指定的区域内比较两个序列，测定在相同残基出现在两个序列处的位置数目以得到匹配位置的数目，将匹配位置的数目除以指定的区域中位置的总数，以及将结果乘以100以得到序列同一性的百分比。在两个序列具有不同长度或者对比得到一个或多个交错的端点以及比较的指定的区域仅包括单一序列的情况下，则单一序列的残基包括在计算的分母中而非分子中。当比较dna和rna时，可将胸腺嘧啶(t)和尿嘧啶(u)视为等同的。可通过人工或使用计算机序列运算法，例如blast或blast2.0来计算同一性。

n.电阻

当讨论反馈机制时可使用“电阻”以及根据欧姆定律电阻可转换为电流，因此能够使用预先设置的电流来比较。

o.免疫应答

如本文所使用的“免疫应答”是指宿主的免疫系统(例如哺乳动物的免疫系统)响应抗原的引入的激活，所述抗原例如疱疹家族病毒，包括hcmv、hsv1、hsv2、cehv1、vzv、艾普斯登-巴尔病毒(ebv)、玫瑰疹病毒属(或者疱疹嗜淋巴细胞病毒)、卡波西肉瘤相关的疱疹病毒和鼠γ疱疹病毒(muhv-4)，优选hcmv、hsv1、hsv2、cehv1、vzv，以及更优选hcmv、hsv1、hsv2和vzv共有抗原。免疫应答可以为细胞或体液应答或两者的形式。

p.核酸

如本文所使用的“核酸”或“寡核苷酸”或“多核苷酸”是指共价连接在一起的至少两个核苷酸。单链的描述也定义了互补链的序列。因此，核酸也涵盖描述的单链的互补链。核酸的许多变体可用于与给定核酸相同目的。因此，核酸也涵盖基本上同一的核酸及其互补序列。单链提供在严格杂交条件下可与靶序列杂交的探针。因此，核酸也涵盖在严格杂交条件下杂交的探针。

核酸可以为单链或双链，或者可含有双链和单链序列的一部分。核酸可以为dna(基因组和cdna)、rna或杂交体，其中核酸可含有脱氧核糖核苷酸和核糖核苷酸的组合，以及包括尿嘧啶、腺嘌呤、胸腺嘧啶、胞嘧啶、鸟嘌呤、肌苷、黄嘌呤次黄嘌呤、异胞嘧啶和异鸟嘌呤的碱基的组合。通过化学合成方法或者通过重组方法可得到核酸。

q.可操作连接

如本文所使用的“可操作连接”是指基因的表达是在与其空间上连接的启动子的控制下进行。启动子可位于在它控制下的基因的5'(上游)或3'(下游)。在启动子和基因之间的距离可与启动子所源自的基因中启动子和其控制的基因之间的距离大致相同。如本领域所已知，该距离的变化可被调节而不丧失启动子功能。

r.启动子

如本文所使用的“启动子”是指能够赋予、激活或增加细胞中核酸表达的合成或天然来源的分子。启动子可包含一种或多种特异性转录调控序列以进一步增加所述基因的表达和/或改变其空间表达和/或时间表达。启动子也可包含远端增强子或抑制元件，其可位于远离转录起始位点多达数千碱基对。启动子可源于包括病毒、细菌、真菌、植物、昆虫和动物的来源。启动子对于其中发生表达的细胞、组织或器官或对于表达发生所处的发育阶段，或响应外界刺激例如生理应激、病原体、金属离子或诱导剂，可组成型地或差异地调节基因组件(genecomponent)的表达。启动子的代表性例子包括噬菌体t7启动子、噬菌体t3启动子、sp6启动子、lac操纵子-启动子、tac启动子、sv40后期启动子、sv40早期启动子、rsv-ltr启动子、cmvie启动子、sv40早期启动子或sv40晚期启动子以及cmvie启动子。

s.信号肽

“信号肽和前导序列”本文可交互使用以及是指在疱疹家族病毒(包括hcmv、hsv1、hsv2、cehv1、vzv、艾普斯登-巴尔病毒(ebv)、玫瑰疹病毒属(或者疱疹嗜淋巴细胞病毒)、卡波西肉瘤相关的疱疹病毒和鼠γ疱疹病毒(muhv-4)，优选hcmv、hsv1、hsv2、cehv1、vzv，以及更优选hcmv、hsv1、hsv2和vzv蛋白)的氨基末端处的氨基酸序列。信号肽/前导序列通常指导蛋白的定位。本文所使用的信号肽/前导序列优选便于蛋白由产生其的细胞分泌。信号肽/前导序列通常从蛋白的其余部分裂解，一旦由细胞分泌其通常称为成熟蛋白。信号肽/前导序列在蛋白的n末端处连接。相对于本文所提及连接信号肽或前导序列至蛋白的n末端，信号肽/前导序列替代蛋白的n末端甲硫氨酸。因此，例如，seqidno:22是具有连接在seqidno:2的n末端处的信号肽/前导序列的seqidno:2。seqidno:2的n末端残基能够为任何残基，但如果它通过起始序列来编码，则它是甲硫氨酸。在seqidno:2的n末端处信号肽/前导序列的连接消除n末端甲硫氨酸。如本文所使用，其旨在，seqidno:22包含具有在seqidno:2的n末端处连接的信号肽/前导序列的seqidno:2，而不论seqidno:2的n末端xaa残基是否消除。类似地，seqidno:22的编码序列包含具有信号肽/前导序列的编码序列的seqidno:2的编码序列，该信号肽/前导序列连接编码seqidno:2的编码序列的5’端。在seqidno:2的编码序列中起始密码子可以为nnn，但当信号肽/前导序列的编码序列连接编码seqidno:2的编码序列的5’端时它被消除。如本文所使用，其旨在，seqidno:22的编码序列包含具有信号肽/前导序列的编码序列的seqidno:2的编码序列，信号肽/前导序列连接在nnn出现处seqidno:2的编码序列的5’端处。因此，例如，其旨在，seqidno:21包含具有连接在seqidno:1的5’端处、替代nnn的信号肽/前导序列的编码序列的seqidno:1。在一些实施方案中，nnn是在seqidno:1的5’端处的起始密码子。其进一步旨在，提供没有末端xaa的seqidno:2、4、6、8、10、1214、16、18和20以及提供没有nnn的seqidno:1、3,5、7、9、1113、15、17和19。

t.严格杂交条件

如本文所使用的“严格杂交条件”是指在其下第一核酸序列(例如，探针)与第二核酸序列(例如，靶)例如在核酸的复杂混合物中杂交的条件。严格条件为序列依赖性的，并且在不同环境下不同。严格的条件可经选择比在限定的离子强度ph下特异性序列的热熔点(tm)低约5-10℃。tm可以是(在确定的离子强度、ph和核酸浓度下)50％的与靶互补的探针与靶序列平衡杂交时所处的温度(当靶序列过量存在时，在tm下，50％的探针被平衡地占据)。严格的条件可以为以下那些：在ph7.0至8.3下盐浓度小于约1.0m钠离子，例如约0.01-1.0m钠离子浓度(或其他盐)，并且对于短探针(例如，约10-50个核苷酸)温度为至少约30℃以及对于长探针(例如，大于约50个核苷酸)为至少约60℃。加入诸如甲酰胺的去稳定剂也可以达到严格条件。对于选择性或特异性杂交，阳性信号可以为背景杂交的至少2至10倍。示例性的严格杂交条件包括以下条件：50％甲酰胺、5xssc和1％sds、在42℃下孵育；或者5xssc、1％sds、在65℃下孵育；在65℃下在0.2xssc和0.1％sds中洗涤。

u.基本上互补

如本文所使用的“基本上互补”是指在8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、180、270、360、450、540、630、720、810、900、990、1080、1170、1260、1350、1440、1530、1620、1710、1800、1890、1980、2070或更多个核苷酸或氨基酸的区域范围内第一序列与第二序列的互补序列具有至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、97％、98％或99％同一性，或者两个序列在严格杂交条件下杂交。

v.基本上同一

如本文所使用的“基本上同一”是指在8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、180、270、360、450、540、630、720、810、900、990、1080、1170、1260、1350、1440、1530、1620、1710、1800、1890、1980、2070或更多个核苷酸或氨基酸的区域范围内第一序列和第二序列具有至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、97％、98％或99％同一性，或者就核酸而言，如果第一序列与第二序列的互补序列基本上互补的情况。

w.亚型或血清型

“亚型”或“血清型”：如本文可交互使用，并且当提及疱疹病毒时，是指疱疹病毒的遗传变体，以便一种亚型通过免疫系统识别而与不同亚型分开。

x.变体

如本文所使用的关于核酸的“变体”是指：(i)参照核苷酸序列的一部分或片段；(ii)参照核苷酸序列或其部分的互补序列；(iii)与参照核酸序列或其互补序列基本上同一的核酸；或者(iv)与参照核酸、其互补序列或其基本上同一的序列在严格的条件下杂交的核酸。

就肽或多肽而言的“变体”与氨基酸序列的不同之处在于氨基酸的插入、缺失或者保守取代，但保留至少一种生物活性。变体也可以指具有与参照蛋白基本上同一的氨基酸序列的蛋白，参照蛋白具有保留至少一种生物活性的氨基酸序列。氨基酸的保守取代，即，使用类似性质(例如，亲水性、电荷区大小和分布)的不同氨基酸来替代氨基酸在本领域中通常认为仅包含较小改变。通过考虑如本领域所理解的氨基酸的亲水性指数可以部分识别这些较小改变。kyte等人，j.mol.biol.157:105-132(1982)。氨基酸的亲水性指数基于它的疏水性和电荷的考虑。本领域中已知，类似亲水性指数的氨基酸可以被取代并且仍然保留蛋白功能。在一方面中，具有±2的亲水性指数的氨基酸被取代。也可使用氨基酸的亲水性来揭示可导致保留蛋白生物功能的取代。在肽的环境下氨基酸的亲水性的考虑允许计算该肽的最大局部平均亲水性，这是种已经报道使抗原性和免疫原性较好相互关联的有用测定方法。美国专利no.4,554,101通过引用全部并入本文中。如本领域所理解，具有类似亲水性值的氨基酸的取代可以得到保留诸如免疫原性的生物活性的肽。可使用具有在±2内的亲水性值的氨基酸彼此进行取代。氨基酸的疏水性指数和亲水性值都受到氨基酸的特定侧链的影响。与观察一致，如通过疏水性、亲水性、电荷、大小和其他性质所揭示，应理解与生物功能相容的氨基酸取代取决于氨基酸的相对相似性，特别是那些氨基酸的侧链的相对相似性。

y.载体

如本文所使用的“载体”是指含有复制起点的核酸序列。载体可以为载体、噬菌体、细菌人工染色体或酵母人工染色体。载体可以为dna或rna载体。载体可以为自主复制染色体外载体，以及优选地为dna质粒。

2.包括hcmv、hsv1、hsv2、cehv1和vzv,抗原的疱疹病毒

在本发明的一方面中，提供生成用于针对各种疱疹家族病毒的新型疱疹病毒抗原以增加通过各病毒抗原(ag)引起的可能免疫幅度的方法。

首先检查系统发生多样性以评估多态性和帮助生成临床相关的共有氨基酸序列。使用mega版本5(tamura,peterson,stecher,nei,和kumar2011)可进行系统发生和分子进化分析以评估用于生成共有疫苗ag的临床相关和公开市售的疱疹靶蛋白序列之间的多样性。使用具有1,000个引导程序重复次数的引导程序方法的邻近系统发生重建分析可用于生成具有辐射视图的引导程序共有树(bootstrapconsensustree)。

在实施例中以下示出生成各疱疹免疫原的共有氨基酸序列的策略。通常，来自高度保守疱疹蛋白的共有序列可用于疫苗免疫原，而来自特异性、临床相关亚群的共有序列可用于高度变化的蛋白。

通过使用用于序列对比的载体nti软件(英杰公司(invitrogen))选取公开市售(基因库(genbank))和临床相关菌株(在组织培养物种传代没有超过六次)的共有区可生成疱疹疫苗蛋白的氨基酸序列。优选地，无论是2种还是多种抗原，可将抗原组合在疫苗配制物中，作为具有单一抗原的多载体或者其中具有多种抗原的单一载体。在一些实施方案中，多于2种或更多种的特异性疱疹病毒抗原存在于一种疫苗配制物中。当多种抗原存在于载体(例如dna质粒，例如，phcmv-ghgl或hsv1-ghgl)中时，这些抗原通过裂解位点，优选弗林蛋白酶位点，例如，seqidno:63来分隔用于共表达结构相关的高分子。合成包括密码子的dna疫苗的遗传优化和用于在人和所有基因中蛋白表达的rna优化以及将其亚克隆为经修饰的pvax1哺乳动物表达载体(基因技术公司(geneart)，雷根斯堡，德国或金斯瑞公司(genscript)，皮斯卡塔韦(piscataway)，新泽西州)。

在另一方面中，本文提供能够在哺乳动物中引起针对一种或多种疱疹病毒(包括hcmv、hsv1、hsv2、cehv1和vzv血清型)的免疫应答的抗原。抗原可包括使它们对免疫原特别有效的表位，针对免疫原可诱导抗疱疹病毒免疫应答。疱疹病毒抗原可包含全长翻译产物、其变体、其片段或其组合。疱疹病毒抗原可以为源于多种不同序列的野生型序列或共有序列。

已经识别编码不同疱疹病毒(包括hcmv、hsv1、hsv2、cehv1和vzv蛋白)的各种核酸序列用于单独使用或者在各组合中作为针对疱疹病毒的疫苗的一部分使用，这些核酸序列可诱导针对免疫原性蛋白的免疫应答以及用于预防性和治疗性疫苗中。可选择地，可使用蛋白自身。免疫原性蛋白包括gb、gm、gn、gh、gl、go、ge、gi、gk、gc、gd、ul128、ul130、ul-131a、ul-83(pp65)，无论其来自hcmv、hsv1、hsv2、cehv1，还是vzv，以及疫苗可包含选自该组的一种或多种免疫原性蛋白和/或疫苗可包含编码选自该组的一种或多种免疫原性蛋白的一种或多种核酸序列。

鉴于临床分离物的进化趋异和在流行性传播人菌株之间的广泛遗传差异，生成各免疫原性蛋白的共有氨基酸序列。gb、gm、gh、gl、ge、gi、gk、gc、gd、ul128、ul130、ul-131a和ul-83(pp65)的共有氨基酸序列基于截止2010年初的人临床分离物的序列。由于gn蛋白的巨大进化趋异，仅生成表示最流行血清型(gn-4)的七种血清型之一(gn-4c)的共有序列。类似地，在go的情况下，由于报道特定血清型连接gn-4c血清型，由八种血清型之一(go-5)得到共有氨基酸序列。

在一些实施方案中，可提供具有信号肽的共有疱疹病毒抗原。在一些实施方案中，ige前导序列(seqidno:61)连接n末端。如本文所描述，当提及连接共有序列的n末端的信号肽时，其旨在特别地包括其中共有序列的n末端xaa残基被信号肽取代的实施方案。即，如本文所使用的xaa旨在表示任何氨基酸或者没有氨基酸。包含在seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、85、91、97、103、111和113中本文所示的共有序列的蛋白、以及蛋白hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gc、hsv1-gd、hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gc、hsv2-gd、vzv-gh、vzv-gl、vzv-gm、vzv-gn、cehv1-gh、cehv1-gl、cehv1-gc、cehv1-gd、vzv-ge和vzv-gi可包含没有n末端xaa的那些序列。

在一些实施方案中，疱疹病毒抗原，无论有或没有信号肽，均可包含抗原标签，例如ha标签(seqidno:62，其分别包含在seqidno:42、44、46、48、50、52、54、56、58和60中)。抗原标签可用于检测表达。ha标签是用于该目的的共同抗原标签。而且，可使以上示出的一种或多种蛋白彼此连接以形成融合蛋白。在一些例子中，蛋白通过诸如弗林蛋白酶位点的蛋白裂解位点(seqidno:63，其分别包含在seqidno:65、67、69、71、73、75、87、89、93、95、99、101、105、107和109中)的方式来连接。

提供共有蛋白hcmv-gb(seqidno:2)、共有蛋白hcmv-gm(seqidno:4)、共有蛋白hcmv-gn(seqidno:6)、共有蛋白hcmv-gh(seqidno:8)、共有蛋白hcmv-gl(seqidno:10)、共有蛋白hcmv-go(seqidno:12)、共有蛋白hcmv-ul128(seqidno:14)、共有蛋白hcmv-ul130(seqidno:16)、共有蛋白hcmv-ul-131a(seqidno:18)、共有蛋白hcmv-ul-83(pp65)(seqidno:20)、共有蛋白hsv1-gbseqidno:85、共有蛋白hsv1-gh(直至seqidno:87的位置838的n-末端区)、共有蛋白hsv1-gl(从seqidno:87的位置846起的c-末端区)、共有蛋白hsv1-gc(直至seqidno:89的位置511的n-末端区)、共有蛋白hsv1-gd(从seqidno:89的位置519起的c-末端区)、共有蛋白hsv2-gb(seqidno:91)、共有蛋白hsv2-gh(直至seqidno:93的位置838的n-末端区)、共有蛋白hsv2-gl(从seqidno:93的位置846起的c-末端区)、共有蛋白hsv2-gc(直至seqidno:95的位置480的n-末端区)、共有蛋白hsv2-gd(从seqidno:95的位置488起的c-末端区)、共有蛋白vzv-gb(seqidno:97)、共有蛋白vzv-gh(直至seqidno:99的位置841的n-末端区)、共有蛋白vzv-gl(从seqidno:99的位置849起的c-末端区)、共有蛋白vzv-gm(直至seqidno:101的位置435的n-末端区)、共有蛋白vzv-gn(从seqidno:101的位置443起的c-末端区)、共有蛋白cehv1-gb(seqidno:103)、共有蛋白cehv1-gh(直至seqidno:105的位置858的n-末端区)、共有蛋白cehv1-gl(从seqidno:105的位置866起的c-末端区)、共有蛋白cehv1-gc(直至seqidno:107的位置467的n-末端区)、共有蛋白cehv1-gd(从seqidno:107的位置475起的c-末端区)、共有蛋白vzv-ge(直至seqidno:109的位置623的n-末端区)、共有蛋白vzv-gi(从seqidno:109的位置631起的c-末端区)、共有蛋白vzv-gc(seqidno:111)和共有蛋白vzv-gk(seqidno:113)。生成氨基酸序列，在各特定情况下，其包含在疱疹病毒免疫原性蛋白共有序列的n末端处的ige前导序列。因此，也提供具有连接共有蛋白hcmv-gb(seqidno:22)的ige前导序列的蛋白、具有连接共有蛋白hcmv-gm(seqidno:24)的ige前导序列的蛋白、具有连接共有蛋白hcmv-gn(seqidno:26)的ige前导序列的蛋白、具有连接共有蛋白hcmv-gh(seqidno:28)的ige前导序列的蛋白、具有连接共有蛋白hcmv-gl(seqidno:30)的ige前导序列的蛋白、具有连接共有蛋白hcmv-go(seqidno:32)的ige前导序列的蛋白、具有连接共有蛋白hcmv-ul128(seqidno:34)的ige前导序列的蛋白、具有连接共有蛋白hcmv-ul130(seqidno:36)的ige前导序列的蛋白、具有连接共有蛋白hcmv-ul-131a(seqidno:38)的ige前导序列的蛋白、具有连接共有蛋白hcmv-ul-83(pp65)(seqidno:40)的ige前导序列的蛋白。使用的ige前导序列是(seqidno:62)。也提供实施方案，其中ha标签在共有序列的c末端处连接。相应地，也提供具有ige前导序列的蛋白，该ige前导序列连接在c末端(seqidno:42)处具有ha标签的共有蛋白hcmv-gb；具有连接共有蛋白hcmv-gm(seqidno:44)的ige前导序列的蛋白；具有连接共有蛋白hcmv-gn(seqidno:46)的ige前导序列的蛋白；具有连接共有蛋白hcmv-gh(seqidno:48)的ige前导序列的蛋白；具有连接共有蛋白hcmv-gl(seqidno:50)的ige前导序列的蛋白；具有连接共有蛋白hcmv-go(seqidno:52)的ige前导序列的蛋白；具有连接共有蛋白hcmv-ul128(seqidno:54)的ige前导序列的蛋白；具有连接共有蛋白hcmv-ul130(seqidno:56)的ige前导序列的蛋白；具有连接共有蛋白hcmv-ul-131a(seqidno:58)的ige前导序列的蛋白；具有连接共有蛋白hcmv-ul-83(pp65)(seqidno:60)的ige前导序列的蛋白。在一些实施方案中，也提供核酸构建体，其中两种或更多种疱疹病毒抗原表达为通过蛋白水解裂解位点彼此连接的融合蛋白。弗林蛋白酶蛋白裂解位点(seqidno:63)是蛋白裂解位点的例子，其在通过构建体表达的融合蛋白中可连接疱疹病毒抗原。

蛋白可与各特异性共有抗原的本文所提供的任何蛋白序列具有同源性。一些实施方案涉及与本文的共有蛋白序列具有95％同源性的免疫原性蛋白。一些实施方案涉及与本文的共有蛋白序列具有96％同源性的免疫原性蛋白。一些实施方案涉及与本文的共有蛋白序列具有97％同源性的免疫原性蛋白。一些实施方案涉及与本文的共有蛋白序列具有95％同源性或者在一些情况下具有98％同源性的免疫原性蛋白。一些实施方案涉及与本文的共有蛋白序列具有99％同源性的免疫原性蛋白。

共有蛋白的片段可含有至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％或至少55％至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的共有蛋白。可提供各特异性共有抗原的本文所提供的任何蛋白序列的免疫片段。免疫片段可含有至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％或至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的各特异性共有抗原的本文所提供的任何蛋白序列。

可提供具有各特异性共有抗原的本文所提供的任何蛋白序列的氨基酸序列同源性免疫片段的蛋白的免疫片段。这些免疫片段可包含至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％或至少55％至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的与各特异性共有抗原的本文所提供的任何蛋白序列具有95％同源性的蛋白。一些实施方案涉及与本文的共有蛋白序列的免疫片段具有96％同源性的免疫片段。一些实施方案涉及与本文的共有蛋白序列的免疫片段具有97％同源性的免疫片段。一些实施方案涉及与本文的共有蛋白序列的免疫片段具有95％同源性或者在一些情况下98％同源性的免疫片段。一些实施方案涉及与本文的共有蛋白序列的免疫片段具有99％同源性的免疫片段。

3.遗传序列、构建体和质粒

可常规生成编码seqidno:2、seqidno:4、seqidno:6、seqidno:8、seqidno:10、seqidno:12、seqidno:14、seqidno:16、seqidno:18、seqidno:20、seqidno:22、seqidno:24、seqidno:26、seqidno:28、seqidno:30、seqidno:32、seqidno:34、seqidno:36、seqidno:38、seqidno:40、seqidno:42、seqidno:44、seqidno:46、seqidno:48、seqidno:50、seqidno:52、seqidno:54、seqidno:56、seqidno:58、seqidno:60、共有蛋白hsv1-gbseqidno:85、共有蛋白hsv1-gh(直至seqidno:87的位置838的n-末端区)、共有蛋白hsv1-gl(从seqidno:87的位置846起的c-末端区)、共有蛋白hsv1-gc(直至seqidno:89的位置511的n-末端区)、共有蛋白hsv1-gd(从seqidno:89的位置519起的c-末端区)、共有蛋白hsv2-gb(seqidno:91)、共有蛋白hsv2-gh(直至seqidno:93的位置838的n-末端区)、共有蛋白hsv2-gl(从seqidno:93的位置846起的c-末端区)、共有蛋白hsv2-gc(直至seqidno:95的位置480的n-末端区)、共有蛋白hsv2-gd(从seqidno:95的位置488起的c-末端区)、共有蛋白vzv-gb(seqidno:97)、共有蛋白vzv-gh(直至seqidno:99的位置841的n-末端区)、共有蛋白vzv-gl(从seqidno:99的位置849起的c-末端区)、共有蛋白vzv-gm(直至seqidno:101的位置435的n-末端区)、共有蛋白vzv-gn(从seqidno:101的位置443起的c-末端区)、共有蛋白cehv1-gb(seqidno:103)、共有蛋白cehv1-gh(直至seqidno:105的位置858的n-末端区)、共有蛋白cehv1-gl(从seqidno:105的位置866起的c-末端区)、共有蛋白cehv1-gc(直至seqidno:107的位置467的n-末端区)、共有蛋白cehv1-gd(从seqidno:107的位置475起的c-末端区)、共有蛋白vzv-ge(直至seqidno:109的位置623的n-末端区)、共有蛋白vzv-gi(从seqidno:109的位置631起的c-末端区)、共有蛋白vzv-gc(seqidno:111)和共有蛋白vzv-gk(seqidno:113)以及同源蛋白的核酸序列、免疫片段和同源蛋白的免疫片段。因此，可提供编码与共有序列具有至多95％同源性、与共有序列具有至多96％同源性、与共有序列具有至多96％同源性、与共有序列具有至多97％同源性、与共有序列具有至多98％同源性以及至多99％的免疫原性蛋白的核酸分子。类似地，也提供给编码本文所示的免疫片段的核酸序列以及与本文所示蛋白同源的蛋白的免疫片段。

生成编码共有氨基酸序列的核酸分子。疫苗可包含编码免疫原性蛋白的一种或多种共有形式的一种或多种核酸序列，免疫原性蛋白选自在人中生成最佳稳定性和表达的该组序列。本文提供编码共有蛋白hcmv-gb(seqidno:1)的核酸序列、编码共有蛋白hcmv-gm(seqidno:3)的核酸序列、编码共有蛋白hcmv-gn(seqidno:5)的核酸序列、编码共有蛋白hcmv-gh(seqidno:7)的核酸序列、编码共有蛋白hcmv-gl(seqidno:9)的核酸序列、编码共有蛋白hcmv-go(seqidno:11)的核酸序列、编码共有蛋白hcmv-ul128(seqidno:13)的核酸序列、编码共有蛋白hcmv-ul130(seqidno:15)的核酸序列、编码共有蛋白hcmv-ul-131a(seqidno:17)的核酸序列、编码共有蛋白hcmv-ul-83(pp65)(seqidno:19)的核酸序列、编码共有蛋白hsv1-gb(seqidno:86)的核酸序列、编码共有蛋白hsv1-gh(seqidno:88的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点之前)的核酸序列；编码共有蛋白hsv1-gl(seqidno:88的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点之后)的核酸序列；编码共有蛋白hsv1-gc(seqidno:90的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点前)的核酸序列；编码共有蛋白hsv1-gd(seqidno:90的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点后)的核酸序列；编码共有蛋白hsv2-gb(seqidno:92)的核酸序列；编码共有蛋白hsv2-gh(seqidno:94的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点前)的核酸序列；编码共有蛋白hsv2-gl(seqidno:94的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点之后)的核酸序列；编码共有蛋白hsv2-gc(seqidno:96的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点前)的核酸序列；编码共有蛋白hsv2-gd(seqidno:96的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点之后)的核酸序列；编码共有蛋白vzv-gb(seqidno:98)的核酸序列；编码共有蛋白vzv-gh(seqidno:100的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点前)的核酸序列；编码共有蛋白vzv-gl(seqidno:100的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点之后)的核酸序列；编码共有蛋白vzv-gm(seqidno:102的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点前)的核酸序列；编码共有蛋白vzv-gn(seqidno:102的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点之后)的核酸序列；编码共有蛋白cehv1-gb(seqidno:104)的核酸序列；编码共有蛋白cehv1-gh(seqidno:106的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点前)的核酸序列；编码共有蛋白cehv1-gl(seqidno:106的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点之后)的核酸序列；编码共有蛋白cehv1-gc(seqidno:108的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点前)的核酸序列；编码共有蛋白cehv1-gd(seqidno:108的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点之后)的核酸序列；编码共有蛋白vzv-ge(seqidno:110的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点前)的核酸序列；编码共有蛋白vzv-gi(seqidno:110的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点之后)的核酸序列；编码共有蛋白vzv-gc(seqidno:112)的核酸序列；以及编码共有蛋白vzv-gk(seqidno:114)的核酸序列。此外，生成在优化、共有编码核酸序列的5’端处并入ige前导序列的编码序列的核酸序列，其编码在共有氨基酸序列的n末端处具有ige前导序列的蛋白。提供编码连接共有蛋白hcmv-gb(seqidno:21)的ige前导序列的核酸序列；编码连接共有蛋白hcmv-gm(seqidno:23)的ige前导序列的核酸序列；编码连接共有蛋白hcmv-gn(seqidno:25)的ige前导序列的核酸序列；编码连接共有蛋白hcmv-gh(seqidno:27)的ige前导序列的核酸序列；编码连接共有蛋白hcmv-gl(seqidno:29)的ige前导序列的核酸序列；编码连接共有蛋白hcmv-go(seqidno:31)的ige前导序列的核酸序列；编码连接共有蛋白hcmv-ul128(seqidno:33)的ige前导序列的核酸序列；编码连接共有蛋白hcmv-ul130(seqidno:35)的ige前导序列的核酸序列；编码连接共有蛋白hcmv-ul-131a(seqidno:37)的ige前导序列的核酸序列；编码连接共有蛋白hcmv-ul-83(pp65)(seqidno:39)的ige前导序列的核酸序列。核酸序列编码ige前导序列(dna编码seqidno:61)。提供编码连接共有蛋白hcmv-gb的ige前导序列的核酸序列，共有蛋白hcmv-gb具有在c末端(seqidno:42)处ha标签；编码连接共有蛋白hcmv-gm的ige前导序列的核酸序列，共有蛋白hcmv-gm具有在c末端(seqidno:43)处ha标签；编码连接共有蛋白hcmv-gn的ige前导序列的核酸序列，共有蛋白hcmv-gn具有在c末端(seqidno:45)处ha标签；编码连接共有蛋白hcmv-gh的ige前导序列的核酸序列，共有蛋白hcmv-gh具有在c末端(seqidno:47)处ha标签；编码连接共有蛋白hcmv-gl的ige前导序列的核酸序列，共有蛋白hcmv-gl具有在c末端(seqidno:49)处ha标签；编码连接共有蛋白hcmv-go的ige前导序列的核酸序列，共有蛋白hcmv-go具有在c末端(seqidno:51)处ha标签；编码连接共有蛋白hcmv-ul128的ige前导序列的核酸序列，共有蛋白hcmv-ul128具有在c末端(seqidno:53)处ha标签；编码连接共有蛋白hcmv-ul130的ige前导序列的核酸序列，共有蛋白hcmv-ul130具有在hcmv-c末端(seqidno:55)处ha标签；编码连接共有蛋白hcmv-ul-131a的ige前导序列的核酸序列，共有蛋白hcmv-ul-131a具有在c末端(seqidno:57)处ha标签；编码连接共有蛋白hcmv-ul-83(pp65)的核酸序列，共有蛋白hcmv-ul-83(pp65)具有在c末端(seqidno:59)处ha标签。

一些实施方案涉及编码与本文的核酸编码序列具有95％同源性的免疫原性蛋白的核酸分子。一些实施方案涉及编码与本文的核酸编码序列具有96％同源性的免疫原性蛋白的核酸分子。一些实施方案涉及编码与本文的核酸编码序列具有97％同源性的免疫原性蛋白的核酸分子。一些实施方案涉及编码与本文的核酸编码序列具有98％同源性的免疫原性蛋白的核酸分子。一些实施方案涉及编码与本文的核酸编码序列具有99％同源性的免疫原性蛋白的核酸分子。在一些实施方案中，与本文公开的共有蛋白的编码序列具有同源性的具有本文公开的编码序列的核酸分子包括编码连接编码本文公开的同源蛋白序列的编码序列的5’端的ige前导序列的序列。

一些实施方案涉及以下的片段：seqidno:1、seqidno:3、seqidno:5、seqidno:7、seqidno:9、seqidno:11、seqidno:13、seqidno:15、seqidno:17、seqidno:19、seqidno:21、seqidno:23、seqidno:25、seqidno:27、seqidno:29、seqidno:31、seqidno:33、seqidno:35、seqidno:37、seqidno:39、seqidno:41、seqidno:43、seqidno:45、seqidno:47、seqidno:49、seqidno:51、seqidno:53、seqidno:55、seqidno:57、seqidno:59、seqidno:86、编码共有蛋白hsv1-gh(seqidno:88的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点之前)的核酸序列、编码共有蛋白hsv1-gl(seqidno:88的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点之后)的核酸序列、编码共有蛋白hsv1-gc(seqidno:90的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点前)的核酸序列、编码共有蛋白hsv1-gd(seqidno:90的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点后)的核酸序列、seqidno:92、编码共有蛋白hsv2-gh(seqidno:94的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点前)的核酸序列、编码共有蛋白hsv2-gl(seqidno:94的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点之后)的核酸序列、编码共有蛋白hsv2-gc(seqidno:96的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点前)的核酸序列、编码共有蛋白hsv2-gd(seqidno:96的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点之后)的核酸序列、seqidno:98、编码共有蛋白vzv-gh(seqidno:100的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点前)的核酸序列、编码共有蛋白vzv-gl(seqidno:100的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点之后)的核酸序列、编码共有蛋白vzv-gm(seqidno:102的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点前)的核酸序列、编码共有蛋白vzv-gn(seqidno:102的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点之后)的核酸序列、seqidno:104、编码共有蛋白cehv1-gh(seqidno:106的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点前)的核酸序列、编码共有蛋白cehv1-gl(seqidno:106的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点之后)的核酸序列、编码共有蛋白cehv1-gc(seqidno:108的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点前)的核酸序列、编码共有蛋白cehv1-gd(seqidno:108的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点之后)的核酸序列、编码共有蛋白vzv-ge(seqidno:110的n-末端部分，在弗林蛋白酶位点前)的核酸序列、编码共有蛋白vzv-gi(seqidno:110的c-末端部分，在弗林蛋白酶位点之后)的核酸序列、seqidno:112和seqidno:114。片段可以为各特异性共有抗原的本文所提供的任何核苷酸序列的至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％或至少55％至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％。片段可以与各特异性共有抗原的本文所提供的任何核苷酸序列的片段具有至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％同源性。

本文提供可包含编码本文所公开的疱疹病毒抗原的核酸序列的遗传构建体，包括共有蛋白序列、与共有蛋白序列具有同源性的序列、共有蛋白序列的片段和与共有蛋白序列的片段具有同源性的序列。遗传构建体可作为功能性染色体外分子存在于细胞中。遗传构建体可以为线性微型染色体，包括着丝粒、调聚物(telomer)或质粒或粘粒。

遗传构建体也可以为重组病毒载体的基因组的一部分，包括重组腺病毒、重组腺病毒相关病毒和重组牛痘。遗传构建体可以为在生活在细胞中减毒活微生物或重组细菌载体中遗传物质的一部分。

遗传构建体可包含用于核酸的编码序列的基因表达的调控元件。调控元件可以为启动子、增强子、起始密码子、终止密码子或聚腺苷酸化信号。

核酸序列可构成可以为载体的遗传构建体。载体可以能够在哺乳动物中以有效诱发哺乳动物的免疫应答的量表达抗原。载体可以为重组的。载体可包含编码抗原的异源性核酸。载体可以为质粒。载体可用于利用编码抗原的核酸转染细胞，培养转化的宿主细胞，在其中可表达抗原的条件下维持所述细胞。

在一些实施方案中，可在单一载体上提供一种抗原的编码序列。

在一些实施方案中，可在单一载体上提供两种或更多种不同抗原的编码序列。在一些实施方案中，编码序列可具有控制表达的单独的启动子。在一些实施方案中，编码序列可具有控制表达的单独的启动子以及分开编码序列的ires序列。ires序列的存在导致转录产物的单独翻译。在一些实施方案中，编码序列可具有控制表达的单独的启动子以及分隔抗原的编码序列的编码蛋白水解裂解肽序列的编码序列。生成单独的翻译产物，然后通过识别蛋白酶裂解位点的蛋白酶将其处理以生成单独的蛋白分子。所使用的蛋白酶裂解位点通常被内源性存在于表达发生的细胞中的蛋白酶识别。在一些实施方案中，可包含蛋白酶的单独的编码序列以提供产生多蛋白翻译产物所需要的蛋白酶的生成。在一些实施方案中，载体包含一种、两种、三种、四种或更多种hcmv抗原、hsv1抗原、hsv2抗原、vzv抗原或cehv1抗原的编码序列。

在一些实施方案中，hcmv抗原gm和gn的编码序列包含在相同载体上。在一些实施方案中，hcmv抗原共有gm和共有gn4-c的编码序列包含在相同载体上。在一些实施方案中，hcmv抗原gm和gn的编码序列包含在相同载体上以及在单一启动子的控制下。在一些实施方案中，hcmv抗原共有gm和共有gn4-c的编码序列包含在相同载体上以及在单一启动子的控制下。在一些实施方案中，hcmv抗原gm和gn的编码序列包含在相同载体上、在单一启动子的控制下以及通过蛋白水解裂解位点的编码序列连接。在一些实施方案中，hcmv抗原共有gm和共有gn4-c的编码序列包含在相同载体上、在单一启动子的控制下以及通过蛋白水解裂解位点的编码序列连接。在一些实施方案中，hcmv抗原gh和gl的编码序列包含在相同载体上。在一些实施方案中，hcmv抗原共有gh和共有gl的编码序列包含在相同载体上。在一些实施方案中，hcmv抗原gh和gl的编码序列包含在相同载体上和在单一启动子的控制下。在一些实施方案中，hcmv抗原共有gh和共有gl的编码序列包含在相同载体上和在单一启动子的控制下。在一些实施方案中，hcmv抗原gh和gl的编码序列包含在相同载体上、在单一启动子的控制下以及通过蛋白水解裂解位点的编码序列连接。在一些实施方案中，hcmv抗原共有gh和共有gl的编码序列包含在相同载体上、在单一启动子的控制下以及通过蛋白水解裂解位点的编码序列连接。

在一些实施方案中，hcmv抗原/陪伴分子蛋白ul128、ul130和ul-131a的编码序列包含在相同载体上。在一些实施方案中，hcmv抗原/陪伴分子蛋白共有ul128、共有ul130和共有ul-131a的编码序列包含在相同载体上。在一些实施方案中，hcmv抗原/陪伴分子蛋白ul128、ul130和ul-131a的编码序列包含在相同载体上和在单一启动子的控制下。在一些实施方案中，hcmv抗原/陪伴分子蛋白共有ul128、共有ul130和共有ul-131a的编码序列包含在相同载体上和在单一启动子的控制下。在一些实施方案中，hcmv抗原/陪伴分子蛋白ul128、ul130和ul-131a的编码序列包含在相同载体上、在单一启动子的控制下以及通过蛋白水解裂解位点的编码序列连接。在一些实施方案中，hcmv抗原/陪伴分子蛋白共有ul128、共有ul130和共有ul-131a的编码序列包含在相同载体上、在单一启动子的控制下以及通过蛋白水解裂解位点的编码序列连接。

在一些实施方案中，hsv1抗原gh和gl的编码序列包含在相同载体上、以及在一些情况下在单一启动子的控制下、以及在一些情况下与蛋白水解裂解位点(优选弗林蛋白酶裂解位点)的编码序列连接在一起。在一些实施方案中，hsv1抗原gc和gd的编码序列包含在相同载体上，以及在一些情况下在单一启动子的控制下，以及在一些情况下与蛋白水解裂解位点(优选弗林蛋白酶裂解位点)的编码序列连接在一起。在一些实施方案中，hsv2抗原gh和gl的编码序列包含在相同载体上，以及在一些情况下在单一启动子的控制下，以及在一些情况下与蛋白水解裂解位点(优选弗林蛋白酶裂解位点)的编码序列连接在一起。在一些实施方案中，hsv2抗原gc和gd的编码序列包含在相同载体上，以及在一些情况下在单一启动子的控制下，以及在一些情况下与蛋白水解裂解位点(优选弗林蛋白酶裂解位点)的编码序列连接在一起。在一些实施方案中，vzv抗原gh和gl的编码序列包含在相同载体上，以及在一些情况下在单一启动子的控制下，以及在一些情况下与蛋白水解裂解位点(优选弗林蛋白酶裂解位点)的编码序列连接在一起。在一些实施方案中，vzv抗原gm和gn的编码序列包含在相同载体上，以及在一些情况下在单一启动子的控制下，以及在一些情况下与蛋白水解裂解位点(优选弗林蛋白酶裂解位点)的编码序列连接在一起。在一些实施方案中，cehv1抗原gh和gl的编码序列包含在相同载体上，以及在一些情况下在单一启动子的控制下，以及在一些情况下与蛋白水解裂解位点(优选弗林蛋白酶裂解位点)的编码序列连接在一起。在一些实施方案中，cehv1抗原gc和gd的编码序列包含在相同载体上，以及在一些情况下在单一启动子的控制下，以及在一些情况下与蛋白水解裂解位点(优选弗林蛋白酶裂解位点)的编码序列连接在一起。在一些实施方案中，vzv抗原ge和gi的编码序列包含在相同载体上，以及在一些情况下在单一启动子的控制下，以及在一些情况下与蛋白水解裂解位点(优选弗林蛋白酶裂解位点)的编码序列连接在一起。

本文所公开的任何蛋白的编码序列可单独提供为单一编码序列。类似地，本文所公开的不同蛋白的任意组合的编码序列可提供在单独的载体上，或具有它自己的启动子、与ires序列连接或者作为多蛋白的单一编码序列，其中通过蛋白水解裂解位点连接个别蛋白。

在本文所示出的各种和每种情况下，可优化编码序列的稳定性和高水平的表达。在一些情况下，选择密码子以减少rna的二级结构形成，例如由于分子内键合而形成的。

载体可包含编码抗原的异源性核酸并且可进一步包含可以为抗原编码序列的上游的起始密码子和可以为抗原编码序列的下游的终止密码子。起始和终止密码子可以在具有抗原编码序列的框架中。载体也可包含可操作连接抗原编码序列的启动子。可操作连接抗原编码序列的启动子可以为来自猿猴病毒40(sv40)的启动子；小鼠乳腺癌病毒(mmtv)启动子；人类免疫缺陷病毒(hiv)启动子，例如牛免疫缺陷病毒(biv)长末端重复序列(ltr)启动子；莫洛尼氏病毒(moloneyvirus)启动子；禽白血病病毒(alv)启动子；巨细胞病毒(cmv)启动子，例如cmv立即早期启动子；艾普斯登巴尔病毒(ebv)启动子；或者劳氏肉瘤病毒(rsv)启动子。启动子也可以为来自人基因的启动子，例如人肌动蛋白、人肌球蛋白、人血红蛋白、人肌肉肌酸或人金属硫蛋白。启动子也可以为组织特异性启动子，例如天然或合成的肌肉或皮肤特异性启动子。这些启动子的例子描述在美国专利申请公开no.us20040175727中，其内容整体并入本文中。

载体也可包含聚腺苷酸化信号，其可以为疱疹抗原编码序列的下游。聚腺苷酸化信号可以为sv40聚腺苷酸化信号、ltr聚腺苷酸化信号、牛生长激素(bgh)聚腺苷酸化信号、人生长激素(hgh)聚腺苷酸化信号或人β-珠蛋白聚腺苷酸化信号。sv40聚腺苷酸化信号可以为来自pcep4载体(英杰公司，圣地亚哥，加利福尼亚州)的聚腺苷酸化信号。

载体也可在共有疱疹抗原编码序列的上游包含增强子。增强子可以为dna表达必需的。增强子可以为人肌动蛋白、人肌球蛋白、人血红蛋白、人肌肉肌酸或病毒增强子，例如来自cmv、ha、rsv或ebv的。多核苷酸功能增强描述在美国专利no.5,593,972、5,962,428和wo94/016737中，其内容各自通过引用全部并入。

载体也可包含哺乳动物复制起点以在细胞中使载体维持在染色体外以及生成载体的多种拷贝。载体可以为来自英杰公司(圣地亚哥，加利福尼亚州)的pvax1、pcep4或prep4，其可包含艾普斯登巴尔病毒复制起点和细胞核抗原ebna-1编码区，在其可产生高拷贝附加型复制而不整合。载体可以为pvax1或pvax1变体(图1)，其具有包含在seqidno:76中那些的变化。变体pvax1质粒是主链载体质粒pvax1(英杰公司，卡尔斯巴德加利福尼亚州)的2998个碱基对变体。cmv启动子位于碱基137-724处。t7启动子/引发位点位于碱基664-683处。多克隆位点位于碱基696-811处。牛gh聚腺苷酸化信号位于碱基829-1053处。卡那霉素抗性基因位于碱基1226-2020处。puc起点位于碱基2320-2993处。基于由英杰公司市售的pvax1的序列，在用作本文示出的质粒1-6的主链的pvax1的序列中发现以下突变：

c>g241在cmv启动子中

c>t1942牛生长激素聚腺苷酸化信号(bghpolya)的主链、下游

a>-2876卡那霉素基因的主链、下游

c>t3277在puc复制起点(ori)高拷贝数突变中(参见nucleicacidresearch1985)

g>c3753在rnaseh位点的pucori上游的每个端点中

在cmv启动子的主链、上游中碱基对2、3和4由act变为ctg。

载体的主链可以为pav0242。载体可以为复制缺陷型腺病毒5型(ad5)载体。

载体也可包含可良好地适应于在施用载体的哺乳动物或人细胞中基因表达的调控序列。共有疱疹抗原编码序列可包含密码子，其可以使在宿主细胞中更有效地转录编码序列。

载体可以为pse420(英杰公司，圣地亚哥，加利福尼亚州)，其可用于在大肠杆菌(e.coli)中产生蛋白。载体也可以为pyes2(英杰公司，圣地亚哥，加利福尼亚州)，其能够用于在酵母的酿酒酵母菌株中产生蛋白。载体也能够具有maxbac^tm完整杆状病毒表达体系(英杰公司，圣地亚哥，加利福尼亚州)，其可用于在昆虫细胞中产生蛋白。载体也可以为pcdnai或pcdna3(英杰公司，圣地亚哥，加利福尼亚州)，其可用于在诸如中国仓鼠卵巢(cho)细胞的哺乳动物细胞中产生蛋白。载体可以为通过常规技术和容易获得的起始材料，包括通过引用全部并入的sambrook等人，分子克隆实验室手册，第二版，冷泉港(1989)，产生蛋白的表达载体或体系。

4.药物组合物

本文提供根据本发明的药物组合物，其包含约1纳克至约10mg的dna。在一些实施方案中，根据本发明的药物组合物包含介于以下之间的量：1)至少10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100纳克，或至少1、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195、200、205、210、215、220、225、230、235、240、245、250、255、260、265、270、275、280、285、290、295、300、305、310、315、320、325、330、335、340、345、350、355、360、365、370、375、380、385、390、395、400、405、410、415、420、425、430、435、440、445、450、455、460、465、470、475、480、485、490、495、500、605、610、615、620、625、630、635、640、645、650、655、660、665、670、675、680、685、690、695、700、705、710、715、720、725、730、735、740、745、750、755、760、765、770、775、780、785、790、795、800、805、810、815、820、825、830、835、840、845、850、855、860、865、870、875、880、885、890、895.900、905、910、915、920、925、930、935、940、945、950、955、960、965、970、975、980、985、990、995或1000微克，或至少1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5或10mg或更多；以及2)至多和包括15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100纳克，或者至多和包括1、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95,100、105、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195、200、205、210、215、220、225、230、235、240、245、250、255、260、265、270、275、280、285、290、295、300、305、310、315、320、325、330、335、340、345、350、355、360、365、370、375、380、385、390、395、400、405、410、415、420、425、430、435、440、445、450、455、460、465、470、475、480、485、490、495、500、605、610、615、620、625、630、635、640、645、650、655、660、665、670、675、680、685、690、695、700、705、710、715、720、725、730、735、740、745、750、755、760、765、770、775、780、785、790、795、800、805、810、815、820、825、830、835、840、845、850、855、860、865、870、875、880、885、890、895.900、905、910、915、920、925、930、935、940、945、950、955、960、965、970、975、980、985、990、995或1000微克，或者至多和包括1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5或10mg。在一些实施方案中，根据本发明的药物组合物包含约5纳克至约10mg的dna。在一些实施方案中，根据本发明的药物组合物包含约25纳克至约5mg的dna。在一些实施方案中，药物组合物含有约50纳克至约1mg的dna。在一些实施方案中，药物组合物含有约0.1至约500微克的dna。在一些实施方案中，药物组合物含有约1至约350微克的dna。在一些实施方案中，药物组合物含有约5至约250微克的dna。在一些实施方案中，药物组合物含有约10至约200微克的dna。在一些实施方案中，药物组合物含有约15至约150微克的dna。在一些实施方案中，药物组合物含有约20至约100微克的dna。在一些实施方案中，药物组合物含有约25至约75微克的dna。在一些实施方案中，药物组合物含有约30至约50微克的dna。在一些实施方案中，药物组合物含有约35至约40微克的dna。在一些实施方案中，药物组合物含有约100至约200微克dna。在一些实施方案中，药物组合物包含约10微克至约100微克的dna。在一些实施方案中，药物组合物包含约20微克至约80微克的dna。在一些实施方案中，药物组合物包含约25微克至约60微克的dna。在一些实施方案中，药物组合物包含约30纳克至约50微克的dna。在一些实施方案中，药物组合物包含约35纳克至约45微克的dna。在一些优选的实施方案中，药物组合物含有约0.1至约500微克的dna。在一些优选的实施方案中，药物组合物含有约1至约350微克的dna。在一些优选的实施方案中，药物组合物含有约25至约250微克的dna。在一些优选的实施方案中，药物组合物含有约100至约200微克dna。

根据待使用的施用方式来配制根据本发明的药物组合物。在药物组合物为可注射的药物组合物的情况下，它们为无菌、无热原和无颗粒的。优选使用等渗配制物。通常，等渗性的添加剂可包括氯化钠、葡聚糖、甘露醇、山梨醇和乳糖。在一些情况下，优选诸如磷酸缓冲盐水的等渗溶液。稳定剂包括凝胶和白蛋白。在一些实施方案中，将血管收缩剂加入配制物。

优选地，药物组合物是疫苗，以及更优选地为dna疫苗。

本文提供能够在哺乳动物中生成针对疱疹病毒抗原的免疫应答的疫苗。疫苗可包含如上所讨论的遗传构建体。疫苗能够包含多种载体，其各自涉及一种或多种疱疹病毒抗原。疫苗可包含一种或多种核酸序列，其编码一种或多种共有疱疹病毒抗原。当疫苗包含多于一种共有疱疹病毒核酸序列，所有这些序列可存在于单一核酸分子上或者这些序列各自可存在于不同核酸分子上。可选择地，包含多于一种共有疱疹病毒核酸序列的疫苗可包含具有单一共有疱疹病毒-核酸序列的核酸分子以及具有多于一种的共有疱疹病毒核酸序列的核酸分子。此外，包含一种或多种共有疱疹病毒核酸序列的疫苗可进一步包含一种或多种疱疹病毒抗原的编码序列。

疫苗可包含本文所示的免疫原性蛋白的一种或多种共有形式和/或疫苗可包含一种或多种核酸序列，其编码选自该组的免疫原性蛋白的一种或多种共有形式。疫苗可包含本文所示的免疫原性蛋白的一种或多种共有形式以及具有除了本文所公开的共有序列的序列(包括野生型序列)的免疫原性疱疹病毒蛋白和/或疫苗可包含编码选自该组的免疫原性蛋白的一种或多种共有形式的一种或多种核酸序列以及编码具有除了本文所公开的共有序列的序列(包括野生型序列)的其他免疫原性疱疹病毒蛋白的核酸分子。

尽管不受科学理论的限制，可用于广泛诱发针对疱疹病毒的免疫应答(体液、细胞或两者)的疫苗可包含编码选自一种或多种疱疹病毒抗原的一种或多种以下核酸序列：a)对于hcmv：共有gb、共有gm、共有gn4-c、共有gh、共有gl、共有go-5、共有ul128、共有ul130、共有ul131a、共有ul83；b)对于hsv1：共有gb、共有gh、共有gl、共有gc和共有gd；c)对于hsv2：共有gb、共有gh、共有gl、共有gc和共有gd；d)对于cehv1：共有gb、共有gh、共有gl、共有gc和共有gd；以及e)对于vzv：共有gb、共有gh、共有gl、共有gc和共有gk、共有gm、共有gn、共有ge和共有gi；与以上任何共有疱疹抗原具有同源性的蛋白；以上任何共有疱疹抗原的片段；以及与以上任何共有疱疹抗原具有同源性的蛋白的片段。此外，包含任何以上核酸序列的疫苗可进一步包含编码选自以下的一种或多种蛋白的一种或多种核酸序列：a)对于hcmv：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a和ul83；b)对于hsv1：gb、gh、gl、gc和gd；c)对于hsv2：gb、gh、gl、gc和gd；d)对于cehv1：gb、gh、gl、gc和gd；以及e)对于vzv：gb、gh、gl、gc、gk、gm、gn、ge和gi。可选择地，替代或除了以上示出的任何编码序列之外，疫苗可包含一种或多种蛋白分子。

疫苗可包含共有蛋白gb的编码序列(seqidno:2和/或seqidno:22和/或seqidno:42)。疫苗可包含共有蛋白gb的编码序列(seqidno:2和/或seqidno:22和/或seqidno:42)以及gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含共有蛋白gb的编码序列(seqidno:2和/或seqidno:22和/或seqidno:42)以及选自以下的一种或多种编码序列：(seqidno:4)、(seqidno:6)、(seqidno:8)、(seqidno:10)、(seqidno:12)、(seqidno:14)、(seqidno:16)、(seqidno:18)、(seqidno:20)、(seqidno:24)、(seqidno:26)、(seqidno:28)、(seqidno:30)、(seqidno:32)、(seqidno:34)、(seqidno:36)、(seqidno:38)、(seqidno:40)、(seqidno:44)、(seqidno:46)、(seqidno:48)、(seqidno:50)、(seqidno:52)、(seqidno:54)、(seqidno:56)、(seqidno:58)、(seqidno:60)。

疫苗可包含编码共有蛋白gb的特异性编码序列seqidno:1和/或seqidno:21和/或seqidno:41。疫苗可包含共有蛋白gb编码序列seqidno:1和/或seqidno:21和/或seqidno:41以及gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含gb编码序列(seqidno:1和/或seqidno:21和/或seqidno:41)以及共有蛋白编码序列(seqidno:3)、(seqidno:5)、(seqidno:7)、(seqidno:9)、(seqidno:11)、(seqidno:13)、(seqidno:15)、(seqidno:17)、(seqidno:19)、(seqidno:23)、(seqidno:25)、(seqidno:27)、(seqidno:29)、(seqidno:31)、(seqidno:33)、(seqidno:35)、(seqidno:37)、(seqidno:39)(seqidno:43)、(seqidno:45)、(seqidno:47)、(seqidno:49)、(seqidno:51)、(seqidno:53)、(seqidno:55)、(seqidno:57)和(seqidno:59)。

疫苗可包含共有蛋白gm的编码序列(seqidno:4和/或seqidno:24和/或seqidno:44)。疫苗可包含共有蛋白gm的编码序列(seqidno:4和/或seqidno:24和/或seqidno:44)以及gb、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含共有蛋白gm的编码序列(seqidno:4和/或seqidno:24和/或seqidno:44)以及以下的一种或多种的编码序列：(seqidno:2)、(seqidno:6)、(seqidno:8)、(seqidno:10)、(seqidno:12)、(seqidno:14)、(seqidno:16)、(seqidno:18)、(seqidno:20)、(seqidno:22)、(seqidno:26)、(seqidno:28)、(seqidno:30)、(seqidno:32)、(seqidno:34)、(seqidno:36)、(seqidno:38)、(seqidno:40)、(seqidno:42)、(seqidno:46)、(seqidno:48)、(seqidno:50)、(seqidno:52)、(seqidno:54)、(seqidno:56)、(seqidno:58)和(seqidno:60)。

疫苗可包含编码共有蛋白gm的特异性编码序列seqidno:3和/或seqidno:23和/或seqidno:43。疫苗可包含共有蛋白gm编码序列seqidno:3和/或seqidno:23和/或seqidno:43以及gb、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含gm编码序列(seqidno:3和/或seqidno:23和/或seqidno:43)以及共有蛋白编码序列(seqidno:1)、(seqidno:5)、(seqidno:7)、(seqidno:9)、(seqidno:11)、(seqidno:13)、(seqidno:15)、(seqidno:17)、(seqidno:19)、(seqidno:21)、(seqidno:25)、(seqidno:27)、(seqidno:29)、(seqidno:31)、(seqidno:33)、(seqidno:35)、(seqidno:37)、(seqidno:39).seqidno:41)、(seqidno:45)、(seqidno:47)、(seqidno:49)、(seqidno:51)、(seqidno:53)、(seqidno:55)、(seqidno:57)和(seqidno:59)。

疫苗可包含共有蛋白gn的编码序列(seqidno:6和/或seqidno:26和/或seqidno:46)。疫苗可包含共有蛋白gn的编码序列(seqidno:6和/或seqidno:26和/或seqidno:46)以及gb、gm、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含共有蛋白gn的编码序列(seqidno:6和/或seqidno:26和/或seqidno:46)以及以下的一种或多种的编码序列：(seqidno:2)、(seqidno:4)、(seqidno:8)、(seqidno:10)、(seqidno:12)、(seqidno:14)、(seqidno:16)、(seqidno:18)、(seqidno:20)、(seqidno:22)、(seqidno:24)、(seqidno:28)、(seqidno:30)、(seqidno:32)、(seqidno:34)、(seqidno:36)、(seqidno:38)、(seqidno:40).seqidno:42)、(seqidno:44)、(seqidno:48)、(seqidno:50)、(seqidno:52)、(seqidno:54)、(seqidno:56)、(seqidno:58)和(seqidno:60)。

疫苗可包含编码共有蛋白gn的特异性编码序列seqidno:5和/或seqidno:25和/或seqidno:45。疫苗可包含共有蛋白gn编码序列seqidno:5和/或seqidno:25和/或seqidno:45以及gb、gm、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含gn编码序列(seqidno:5和/或seqidno:25和/或seqidno:45)以及共有蛋白编码序列(seqidno:1)、(seqidno:3)、(seqidno:7)、(seqidno:9)、(seqidno:11)、(seqidno:13)、(seqidno:15)、(seqidno:17)、(seqidno:19)、(seqidno:21)、(seqidno:23)、(seqidno:27)、(seqidno:29)、(seqidno:31)、(seqidno:33)、(seqidno:35)、(seqidno:37)、(seqidno:39)、(seqidno:41)、(seqidno:43)、(seqidno:47)、(seqidno:49)、(seqidno:51)、(seqidno:53)、(seqidno:55)、(seqidno:57)和(seqidno:59)。

疫苗可包含共有蛋白gh的编码序列(seqidno:8和/或seqidno:28和/或seqidno:48)。疫苗可包含共有蛋白gh的编码序列(seqidno:8和/或seqidno:28和/或seqidno:48)以及gb、gm、gn、gl、go、ul128、ul130、ul131a和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含共有蛋白gh的编码序列(seqidno:8和/或seqidno:28和/或seqidno:48)以及以下的一种或多种编码序列：(seqidno:2)、(seqidno:4)、(seqidno:6)、(seqidno:10)、(seqidno:12)、(seqidno:14)、(seqidno:16)、(seqidno:18)、(seqidno:20)、(seqidno:22)、(seqidno:24)、(seqidno:26)、(seqidno:30)、(seqidno:32)、(seqidno:34)、(seqidno:36)、(seqidno:38)、(seqidno:40)、(seqidno:42)、(seqidno:44)、(seqidno:46)、(seqidno:50)、(seqidno:52)、(seqidno:54)、(seqidno:56)、(seqidno:58)、(seqidno:60)。

疫苗可包含编码共有蛋白gh的特异性编码序列seqidno:7和/或seqidno:27和/或seqidno:47。疫苗可包含共有蛋白gh编码序列seqidno:7和/或seqidno:27和/或seqidno:47以及gb、gm、gn、gl、go、ul128、ul130、ul131a和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含gh编码序列(seqidno:7和/或seqidno:27和/或seqidno:47)以及共有蛋白编码序列(seqidno:1)、(seqidno:3)、(seqidno:5)、(seqidno:9)、(seqidno:11)、(seqidno:13)、(seqidno:15)、(seqidno:17)、(seqidno:19)、(seqidno:21)、(seqidno:23)、(seqidno:25)、(seqidno:29)、(seqidno:31)、(seqidno:33)、(seqidno:35)、(seqidno:37)、(seqidno:39)、(seqidno:41)、(seqidno:43)、(seqidno:45)、(seqidno:49)、(seqidno:51)、(seqidno:53)、(seqidno:55)、(seqidno:57)以及(seqidno:59)。

疫苗可包含共有蛋白gl的编码序列(seqidno:10和/或seqidno:30和/或seqidno:50)。疫苗可包含共有蛋白gl的编码序列(seqidno:10和/或seqidno:30和/或seqidno:50)以及gb、gm、gn、gh、go、ul128、ul130、ul131a和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含共有蛋白gl的编码序列(seqidno:10和/或seqidno:30和/或seqidno:50)以及以下的一种或多种编码序列：(seqidno:2)、(seqidno:4)、(seqidno:6)、(seqidno:8)、(seqidno:12)、(seqidno:14)、(seqidno:16)、(seqidno:18)、(seqidno:20)、(seqidno:22)、(seqidno:24)、(seqidno:26)、(seqidno:28)、(seqidno:32)、(seqidno:34)、(seqidno:36)、(seqidno:38)、(seqidno:40)、(seqidno:42)、(seqidno:44)、(seqidno:46)、(seqidno:48)、(seqidno:52)、(seqidno:54)、(seqidno:56)、(seqidno:58)、(seqidno:60)。

疫苗可包含编码共有蛋白gl的特异性编码序列seqidno:9和/或seqidno:29和/或seqidno:49。疫苗可包含共有蛋白gl编码序列seqidno:9和/或seqidno:29和/或seqidno:49以及gb、gm、gn、gh、go、ul128、ul130、ul131a和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含gl编码序列(seqidno:9和/或seqidno:29和/或seqidno:49)以及共有蛋白编码序列(seqidno:1)、(seqidno:3)、(seqidno:5)、(seqidno:7)、(seqidno:11)、(seqidno:13)、(seqidno:15)、(seqidno:17)、(seqidno:19)、(seqidno:21)、(seqidno:23)、(seqidno:25)、(seqidno:27)、(seqidno:31)、(seqidno:33)、(seqidno:35)、(seqidno:37)、(seqidno:39)、(seqidno:41)、(seqidno:43)、(seqidno:45)、(seqidno:47)、(seqidno:51)、(seqidno:53)、(seqidno:55)、(seqidno:57)和(seqidno:59)。

疫苗可包含共有蛋白go的编码序列(seqidno:12和/或seqidno:32和/或seqidno:52)。疫苗可包含共有蛋白go的编码序列(seqidno:12和/或seqidno:32和/或seqidno:52)以及gb、gm、gn、gh、gl、ul128、ul130、ul131a和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含共有蛋白go的编码序列(seqidno:12和/或seqidno:32和/或seqidno:52)以及以下的一种或多种的编码序列：(seqidno:2)、(seqidno:4)、(seqidno:6)、(seqidno:8)、(seqidno:10)、(seqidno:14)、(seqidno:16)、(seqidno:18)、(seqidno:20)、(seqidno:22)、(seqidno:24)、(seqidno:26)、(seqidno:28)、(seqidno:30)、(seqidno:34)、(seqidno:36)、(seqidno:38)、(seqidno:40)(seqidno:42)、(seqidno:44)、(seqidno:46)、(seqidno:48)、(seqidno:50)、(seqidno:54)、(seqidno:56)、(seqidno:58)、(seqidno:60)。

疫苗可包含编码共有蛋白go的特异性编码序列seqidno:11和/或seqidno:31和/或seqidno:51。疫苗可包含共有蛋白go编码序列seqidno:11和/或seqidno:31和/或seqidno:51以及gb、gm、gn、gh、gl、ul128、ul130、ul131a和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含go编码序列(seqidno:11和/或seqidno:31和/或seqidno:51)以及共有蛋白编码序列(seqidno:1)、(seqidno:3)、(seqidno:5)、(seqidno:7)、(seqidno:9)、(seqidno:13)、(seqidno:15)、(seqidno:17)、(seqidno:19)、(seqidno:21)、(seqidno:23)、(seqidno:25)、(seqidno:27)、(seqidno:29)、(seqidno:33)、(seqidno:35)、(seqidno:37)、(seqidno:39)、(seqidno:41)、(seqidno:43)、(seqidno:45)、(seqidno:47)、(seqidno:49)、(seqidno:53)、(seqidno:55)、(seqidno:57)和(seqidno:59)。

疫苗可包含共有蛋白ul128的编码序列(seqidno:14和/或seqidno:34和/或seqidno:54)。疫苗可包含共有蛋白ul128的编码序列(seqidno:14和/或seqidno:34和/或seqidno:54)以及gb、gm、gn、gh、gl、go、ul130、ul131a和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含共有蛋白ul128的编码序列(seqidno:14和/或seqidno:34和/或seqidno:54)以及以下的一种或多种编码序列：(seqidno:2)、(seqidno:4)、(seqidno:6)、(seqidno:8)、(seqidno:10)、(seqidno:12)、(seqidno:16)、(seqidno:18)、(seqidno:20)、(seqidno:22)、(seqidno:24)、(seqidno:26)、(seqidno:28)、(seqidno:30)、(seqidno:32)、(seqidno:36)、(seqidno:38)、(seqidno:40)、(seqidno:42)、(seqidno:44)、(seqidno:46)、(seqidno:48)、(seqidno:50)、(seqidno:52)、(seqidno:56)、(seqidno:58)、(seqidno:60)。

疫苗可包含编码共有蛋白ul128的特异性编码序列seqidno:13和/或seqidno:33和/或seqidno:53。疫苗可包含共有蛋白ul128编码序列seqidno:13和/或seqidno:33和/或seqidno:53以及gb、gm、gn、gh、gl、go、ul130、ul131a和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含ul128编码序列(seqidno:13和/或seqidno:33和/或seqidno:53)以及共有蛋白编码序列(seqidno:1)、(seqidno:3)、(seqidno:5)、(seqidno:7)、(seqidno:9)、(seqidno:11)、(seqidno:15)、(seqidno:17)、(seqidno:19)、(seqidno:21)、(seqidno:23)、(seqidno:25)、(seqidno:27)、(seqidno:29)、(seqidno:31)、(seqidno:35)、(seqidno:37)、(seqidno:39)、(seqidno:41)、(seqidno:43)、(seqidno:45)、(seqidno:47)、(seqidno:49)、(seqidno:51)、(seqidno:55)、(seqidno:57)和(seqidno:59)。

疫苗可包含共有蛋白ul130的编码序列seqidno:16和/或seqidno:36和/或seqidno:56)。疫苗可包含共有蛋白ul130的编码序列(seqidno:16和/或seqidno:36和/或seqidno:56)以及gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul131a和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含共有蛋白ul130的编码序列(seqidno:16和/或seqidno:36和/或seqidno:56)以及以下的一种或多种编码序列：(seqidno:2)、(seqidno:4)、(seqidno:6)、(seqidno:8)、(seqidno:10)、(seqidno:12)、(seqidno:14)、(seqidno:18)、(seqidno:20)、(seqidno:22)、(seqidno:24)、(seqidno:26)、(seqidno:28)、(seqidno:30)、(seqidno:32)、(seqidno:34)、(seqidno:38)、(seqidno:40)、(seqidno:42)、(seqidno:44)、(seqidno:46)、(seqidno:48)、(seqidno:50)、(seqidno:52)、(seqidno:54)、(seqidno:58)、(seqidno:60)。

疫苗可包含编码共有蛋白ul130的特异性编码序列(seqidno:15和/或seqidno:35和/或seqidno:55)。疫苗可包含共有蛋白ul130编码序列seqidno:15和/或seqidno:35和/或seqidno:55以及gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul131a和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含ul130编码序列(seqidno:15和/或seqidno:35和/或seqidno:55)以及共有蛋白编码序列(seqidno:1)、(seqidno:3)、(seqidno:5)、(seqidno:7)、(seqidno:9)、(seqidno:11)、(seqidno:13)、(seqidno:17)、(seqidno:19)、(seqidno:21)、(seqidno:23)、(seqidno:25)、(seqidno:27)、(seqidno:29)、(seqidno:31)、(seqidno:33)、(seqidno:37)、(seqidno:39)、(seqidno:41)、(seqidno:43)、(seqidno:45)、(seqidno:47)、(seqidno:49)、(seqidno:51)、(seqidno:53)、(seqidno:57)和(seqidno:59)。

疫苗可包含共有蛋白ul131a的编码序列(seqidno:18和/或seqidno:38和/或seqidno:58)。疫苗可包含共有蛋白ul131a的编码序列(seqidno:18和/或seqidno:38和/或seqidno:58)以及gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含共有蛋白ul131a的编码序列(seqidno:18和/或seqidno:38和/或seqidno:58)以及以下的一种或多种编码序列：(seqidno:2)、(seqidno:4)、(seqidno:6)、(seqidno:8)、(seqidno:10)、(seqidno:12)、(seqidno:14)、(seqidno:16)、(seqidno:20)、(seqidno:22)、(seqidno:24)、(seqidno:26)、(seqidno:28)、(seqidno:30)、(seqidno:32)、(seqidno:34)、(seqidno:36)和(seqidno:40)、(seqidno:42)、(seqidno:44)、(seqidno:46)、(seqidno:48)、(seqidno:50)、(seqidno:52)、(seqidno:54)、(seqidno:56)和(seqidno:60)。

疫苗可包含编码共有蛋白ul131a的特异性编码序列seqidno:17和/或seqidno:37和/或seqidno:57。疫苗可包含共有蛋白ul131a编码序列seqidno:17和/或seqidno:37和/或seqidno:57以及gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130和ul83的一种或多种编码序列。疫苗可包含ul131a编码序列(seqidno:17和/或seqidno:57和/或seqidno:37)以及共有蛋白编码序列(seqidno:1)、(seqidno:3)、(seqidno:5)、(seqidno:7)、(seqidno:9)、(seqidno:11)、(seqidno:13)、(seqidno:15)、(seqidno:19)、(seqidno:21)、(seqidno:23)、(seqidno:25)、(seqidno:27)、(seqidno:29)、(seqidno:31)、(seqidno:33)、(seqidno:35)、(seqidno:39)、(seqidno:41)、(seqidno:43)、(seqidno:45)、(seqidno:47)、(seqidno:49)、(seqidno:51)、(seqidno:53)、(seqidno:55)和(seqidno:59)。

疫苗可包含共有蛋白ul83的编码序列seqidno:20和/或seqidno:40和/或seqidno:6)。疫苗可包含共有蛋白ul83的编码序列(seqidno:20和/或seqidno:40和/或seqidno:60)以及gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130和ul131a的一种或多种编码序列。疫苗可包含共有蛋白ul83的编码序列(seqidno:20和/或seqidno:40和/或seqidno:60)以及以下的一种或多种编码序列：(seqidno:2)、(seqidno:4)、(seqidno:6)、(seqidno:8)、(seqidno:10)、(seqidno:12)、(seqidno:14)、(seqidno:16)、(seqidno:18)、(seqidno:22)、(seqidno:24)、(seqidno:26)、(seqidno:28)、(seqidno:30)、(seqidno:32)、(seqidno:34)、(seqidno:36)、(seqidno:38)、(seqidno:42)、(seqidno:44)、(seqidno:46)、(seqidno:48)、(seqidno:50)、(seqidno:52)、(seqidno:54)、(seqidno:56)和(seqidno:58)。

疫苗可包含编码共有蛋白ul83的特异性编码序列seqidno:19和/或seqidno:39和/或seqidno:59。疫苗可包含共有蛋白ul83编码序列seqidno:19和/或seqidno:39和/或seqidno:59以及gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130和ul131a的一种或多种编码序列。疫苗可包含ul83编码序列(seqidno:19和/或seqidno:39和/或seqidno:59)以及共有蛋白编码序列(seqidno:1)、(seqidno:3)、(seqidno:5)、(seqidno:7)、(seqidno:9)、(seqidno:11)、(seqidno:13)、(seqidno:15)、(seqidno:17)、(seqidno:21)、(seqidno:23)、(seqidno:25)、(seqidno:27)、(seqidno:29)、(seqidno:31)、(seqidno:33)、(seqidno:35)、(seqidno:37)、(seqidno:41)、(seqidno:43)、(seqidno:45)、(seqidno:47)、(seqidno:49)、(seqidno:51)、(seqidno:53)、(seqidno:55)和(seqidno:57)。

疫苗可包含编码共有蛋白hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gl、hsv-gc或hsv1-gd的特异性编码序列，其任选具有ige前导序列和/或ha标签。疫苗可包含编码共有hsv1蛋白的特异性编码序列任意一种、以及任意一种或多种其他hsv1共有蛋白的一种或多种编码序列。疫苗可包含hsv1编码序列(dna序列)以及任意一种或多种其他hsv1编码序列的共有hsv1编码序列。

疫苗可包含编码共有蛋白hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gc或hsv2-gd的特异性编码序列，其任选具有ige前导序列和/或ha标签。疫苗可包含编码共有hsv2蛋白的特异性编码序列任意一种、以及任意一种或多种其他hsv2共有蛋白的一种或多种编码序列。疫苗可包含hsv2编码序列(dna序列)以及任意一种或多种其他hsv2编码序列的共有hsv2编码序列。

疫苗可包含编码共有蛋白cehv1-gb、cehv1-gh、cehv1-gl、cehv1-gc或cehv1-gd的特异性编码序列，其任选具有ige前导序列和/或ha标签。疫苗可包含编码共有cehv1蛋白的特异性编码序列任意一种、以及任意一种或多种其他cehv1共有蛋白的一种或多种编码序列。疫苗可包含cehv1编码序列(dna序列)以及任意一种或多种其他cehv1编码序列的共有cehv1编码序列。

疫苗可包含编码共有蛋白vzv-gb、vzv-gh、vzv-gl、vzv-gc、vzv-gk、vzv-gm、vzv-gn、vzv-ge或vzv-gi的特异性编码序列，其任选具有ige前导序列和/或ha标签。疫苗可包含编码共有vzv蛋白的特异性编码序列任意一种、以及任意一种或多种其他vzv共有蛋白的一种或多种编码序列。疫苗可包含vzv编码序列(dna序列)以及任意一种或多种其他vzv编码序列的共有vzv编码序列。

一些可选择的实施方案包括包含编码一种或多种疱疹病毒抗原的免疫片段的核酸序列、与疱疹病毒抗原具有同源性的一种或多种蛋白、以及与疱疹病毒抗原具有同源性的一种或多种蛋白的免疫片段的那些。一些可选择的实施方案包括包含一种或多种疱疹病毒抗原蛋白、一种或多种疱疹病毒抗原的免疫片段、与疱疹病毒抗原具有同源性的一种或多种蛋白、以及与疱疹病毒抗原具有同源性的一种或多种蛋白的免疫片段的那些。

一些实施方案提供产生针对疱疹病毒蛋白的免疫应答的方法，其包括向个体施用一种或多种组合物，其共同包含一种或多种编码序列或者本文所述的组合。一些实施方案提供为个体预防性接种针对疱疹病毒感染的方法，其包括施用一种或多种组合物，其共同包含一种或多种编码序列或者本文所述的组合。一些实施方案提供为已经被疱疹病毒感染的个体治疗性接种疱疹病毒的方法，其包括施用一种或多种组合物，其共同包含一种或多种编码序列或者本文所述的组合。

疫苗可以为dna疫苗。dna疫苗可包含多种相同或不同的质粒，其包含一种或多种共有疱疹病毒核酸序列。dna疫苗可包含一种或多种核酸序列，其编码一种或多种共有疱疹病毒抗原。当dna疫苗包含多于一种的共有疱疹病毒核酸序列时，所有这些序列可存在于单一质粒上，或者这些序列可以各自存在于不同质粒上，或者一些质粒可包含单一共有疱疹病毒核酸序列，而其他质粒具有多于一种的共有疱疹病毒核酸序列。此外，dna疫苗可进一步包含一种或多种疱疹病毒抗原的一种或多种共有编码序列。这些另外的编码序列可以在来自彼此和来自包含一种或多种共有序列的质粒的相同或不同质粒上。

dna疫苗公开在美国专利no.5,593,972、5,739,118、5,817,637、5,830,876、5,962,428、5,981,505、5,580,859、5,703,055和5,676,594中，其通过引用全部并入本文中。dna疫苗可进一步包含抑制它整合至染色体内的元素或试剂。疫苗可以为疱疹病毒抗原的rna。可以将rna疫苗引入细胞内。

疫苗能够为包含以上所述遗传构建体或抗原的重组疫苗。疫苗也能以以下形式包含一种或多种共有疱疹病毒抗原：一种或多种蛋白亚单位、包含一种或多种共有疱疹病毒抗原的一种或多种灭活病毒粒子、或者包含一种或多种共有疱疹病毒抗原的一种或多种减毒病毒粒子。减毒疫苗可以为减毒活疫苗、灭活疫苗和使用重组载体以递送编码一种或多种共有疱疹病毒抗原的外源基因的疫苗、以及亚单位和糖蛋白疫苗。减毒活疫苗、使用重组载体递送外源性抗原的疫苗、亚单位疫苗和糖蛋白疫苗的例子描述在美国专利no.:4,510,245；4,797,368；4,722,848；4,790,987；4,920,209；5,017,487；5,077,044；5,110,587；5,112,749；5,174,993；5,223,424；5,225,336；5,240,703；5,242,829；5,294,441；5,294,548；5,310,668；5,387,744；5,389,368；5,424,065；5,451,499；5,453,364；5,462,734；5,470,734；5,474,935；5,482,713；5,591,439；5,643,579；5,650,309；5,698,202；5,955,088；6,034,298；6,042,836；6,156,319和6,589,529中，其各自通过引用方式并入本文中。

疫苗可包含涉及来自世界特定区域的疱疹病毒血清型的载体和/或蛋白。疫苗也可以涉及来自世界多个地区的疱疹病毒血清型。

所提供的疫苗可用于诱导包括治疗或预防免疫应答的免疫应答。可生成针对共有疱疹病毒抗原以及也广泛涉及疱疹病毒的多种亚型的抗体和/或杀伤性t细胞。可分离这些抗体和细胞。

疫苗可进一步包含药学上可接受的赋形剂。药学上可接受的赋形剂可以为功能性分子，例如媒介物、佐剂、载体或稀释剂。药学上可接受的赋形剂可以为转染促进剂，其可包括表面活性剂，例如免疫刺激复合物(iscoms)；费氏不完全佐剂；lps类似物，包括单磷酰基脂质a；胞壁肽；醌类似物；小囊泡，例如鲨鱼烯和鲨鱼烯；透明质酸；脂质；脂质体；钙离子；病毒蛋白；聚阴离子；聚阳离子；或纳米粒子；或者其他已知转染促进剂。

转染促进剂是聚阴离子；聚阳离子，包括聚-l-谷氨酸(lgs)；或者脂质。转染促进剂是聚-l-谷氨酸盐，以及更优选地聚-l-谷氨酸盐以小于6mg/ml的浓度存在于疫苗中。转染促进剂也可包括表面活性剂，例如免疫刺激复合物(iscoms)；费氏不完全佐剂；lps类似物，包括单磷酰基脂质a；胞壁肽；醌类似物和小囊泡，例如鲨鱼烯和鲨鱼烯；以及也可以连同遗传构建体一起施用透明质酸。在一些实施方案中，dna载体疫苗也可包括转染促进剂，例如脂质；脂质体，包括卵磷脂脂质体或其他本领域已知的其他脂质体，例如dna-脂质体混合物(参见例如w09324640)；钙离子；病毒蛋白；聚阴离子；聚阳离子；或者纳米粒子；或者其他已知转染促进剂。优选地，转染促进剂是聚阴离子；聚阳离子，包括聚-l-谷氨酸盐(lgs)；或者脂质。在疫苗中转染剂的浓度小于4mg/ml、小于2mg/ml、小于1mg/ml、小于0.750mg/ml、小于0.500mg/ml、小于0.250mg/ml、小于0.100mg/ml、小于0.050mg/ml或者小于0.010mg/ml。

药学上可接受的赋形剂可以为佐剂。佐剂可以为在可选择质粒中表达的其他基因或者在疫苗中作为蛋白连同以上质粒一起递送。佐剂可以选自：α-干扰素(ifn-α)；β-干扰素(ifn-β)；γ-干扰素；血小板衍生的生长因子(pdgf)；tnfα；tnfβ；gm-csf；表皮生长因子(egf)；皮肤t细胞吸引趋化因子(ctack)；上皮胸腺表达的趋化因子(teck)；粘膜相关上皮细胞趋化因子(mec)；il-12；il-15；mhc；cd80；cd86，包括具有缺失的信号序列以及任选包括来自ige的信号肽的il-15。佐剂可以为il-12、il-15、il-28、ctack、teck、血小板衍生的生长因子(pdgf)、tnfα、tnfβ、gm-csf、表皮生长因子(egf)、il-1、il-2、il-4、il-5、il-6、il-10、il-12、il-18或其组合。

可用于佐剂的其他试剂包括编码mcp-1、mip-la、mip-1p、il-8、rantes、l-选择蛋白、p-选择蛋白、e-选择蛋白、cd34、glycam-1、madcam-1、lfa-1、vla-1、mac-1、pl50.95、pecam、icam-1、icam-2、icam-3、cd2、lfa-3、m-csf、g-csf、il-4、il-18的突变形式、cd40、cd40l、血管生长因子、成纤维细胞生长因子、il-7、神经生长因子、血管内皮生长因子、fas、tnf受体、flt、apo-1、p55、wsl-1、dr3、tramp、apo-3、air、lard、ngrf、dr4、dr5、killer、trail-r2、trick2、dr6、半胱天冬酶ice、fos、c-jun、sp-1、ap-1、ap-2、p38、p65rel、myd88、irak、traf6、ikb、非活性nik、sapk、sap-1、jnk、干扰素应答基因、nfkb、bax、trail、trailrec、trailrecdrc5、trail-r3、trail-r4、rank、rank配体、ox40、ox40配体、nkg2d、mica、micb、nkg2a、nkg2b、nkg2c、nkg2e、nkg2f、tap1、tap2的那些及其功能性片段。

疫苗能够进一步包含如在1994年4月1日提交的通过引用全部并入的美国专利序列no.5,739,118中所描述的遗传疫苗促进剂。

5.递送的方法

本文提供递送药物配制物(优选疫苗)的方法，用于提供疱疹病毒抗原的遗传构建体和蛋白，其包含使得它们对于可诱导针对疱疹病毒感染的免疫应答特别有效的免疫原的表位。可提供递送疫苗或接种的方法以诱导治疗性和/或预防性免疫应答。接种方法能够在哺乳动物中生成针对多种疱疹病毒亚型的免疫应答。可以向个体递送疫苗以调节哺乳动物的免疫系统的活性和增强免疫应答。疫苗的递送可以为作为核酸分子的ha抗原的转染，该核酸分子表达在细胞中以及递送至细胞的表面，通过其免疫系统识别和诱导细胞、体液、或细胞和体液应答。通过向哺乳动物施用如本文所讨论的相关疱疹病毒家族疫苗，疫苗的递送可用于在哺乳动物中诱导或引起针对多种疱疹病毒、特异性疱疹家族的免疫应答。

在向哺乳动物递送疫苗，从而向哺乳动物的细胞内递送载体后，转染的细胞将表达和分泌对应一种或多种疱疹病毒抗原。这些分泌的蛋白或者合成抗原被免疫系统识别为外源性物质，其引起的免疫应答，所述免疫应答包括：针对抗原产生抗体和特异性针对抗原的t细胞应答。在一些例子中，使用本文讨论的疫苗接种的哺乳动物具有引发的免疫系统以及无论通过体液、细胞或是两者，当使用相关疱疹病毒菌株攻击时，引发的免疫系统使得可快速清除后续的疱疹病毒。可以将疫苗递送至个体以调节个体的免疫系统的活性，从而增强免疫应答。

疫苗可以以dna疫苗的形式递送，递送dna疫苗的方法描述在美国专利no.4,945,050和5,036,006中，两者均通过引用全部并入。

可以向哺乳动物施用疫苗以诱发在哺乳动物中免疫应答。哺乳动物可以为人、非人灵长类、牛、猪、羊、山羊、羚羊、野牛、水牛、牛科动物、鹿、刺猬、象类、驼羊、羊驼、小鼠、大鼠或鸡，以及优选人、牛、猪或鸡。

a.联合治疗

可联合一种或多种疱疹病毒抗原来施用药物组合物，优选疫苗。可联合蛋白或基因编码佐剂来施用疫苗，其可包括：α-干扰素(ifn-α)、β-干扰素(ifn-β)、γ-干扰素、il-12、il-15、il-28、ctack、teck、血小板衍生的生长因子(pdgf)、tnfα、tnfβ、gm-csf、表皮生长因子(egf)、il-1、il-2、il-4、il-5、il-6、il-10、il-12、il-18、mcp-1、mip-la、mip-1p、il-8、rantes、l-选择蛋白、p-选择蛋白、e-选择蛋白、cd34、glycam-1、madcam-1、lfa-1、vla-1、mac-1、pl50.95、pecam、icam-1、icam-2、icam-3、cd2、lfa-3、m-csf、g-csf、il-4、il-18的突变形式、cd40、cd40l、血管生长因子、成纤维细胞生长因子、il-7、神经生长因子、血管内皮生长因子、fas、tnf受体、flt、apo-1、p55、wsl-1、dr3、tramp、apo-3、air、lard、ngrf、dr4、dr5、killer、trail-r2、trick2、dr6、半胱天冬酶ice、fos、c-jun、sp-1、ap-1、ap-2、p38、p65rel、myd88、irak、traf6、ikb、非活性nik、sapk、sap-1、jnk、干扰素应答基因、nfkb、bax、trail、trailrec、trailrecdrc5、trail-r3、trail-r4、rank、rank配体、ox40、ox40配体、nkg2d、mica、micb、nkg2a、nkg2b、nkg2c、nkg2e、nkg2f、tap1、或tap2、或其功能性片段。

b.施用途径

可通过包括口服、胃肠外、舌下、透皮、直肠、经粘膜、局部、通过吸入、通过颊部施用、胸膜内、静脉内、动脉内、腹膜内、皮下、肌内、鼻内、硬膜内和关节内或其组合的不同途径来施用疫苗。对于兽医学使用，依照常规兽医学实践，可将组合物作为适合接受的配制物来施用。兽医能够容易地确定最适合于特定动物的给药方案和施用途径。可通过普通注射器、无针注射装置、“微粒轰击基因枪”或其他物理方法，例如电穿孔(“ep”)、“流体动力学方法”或超声波施用疫苗。

可通过包括利用和不利用体内电穿孔的dna注射(也称为dna接种)、脂质体介导的、纳米粒子促进的、诸如重组腺病毒的重组载体、重组腺病毒相关病毒和重组牛痘的多种众所周知的技术向哺乳动物递送疫苗的载体。可通过dna注射连同体内电穿孔递送疱疹病毒抗原。

c.电穿孔

可使用电穿孔装置经由疫苗的质粒的电穿孔完成疫苗的施用，该电穿孔装置可被配置成将有效地引起可逆的孔在细胞膜上形成的能量脉冲递送至哺乳动物的期望的组织，以及优选地，能量的脉冲是类似于由用户预先设定的电流输入的恒定电流。电穿孔装置可包括电穿孔组件和电极部件或者手柄部件。电穿孔组件可包括和整合电穿孔装置的各种元件中一种或多种元件，其包括：控制器、电流波形发生器、电阻测试器、波形记录器、输入元件、状态报告元件、通信端口、存储器组件、电源和电源开关。使用诸如ep体系(因诺维制药公司(inoviopharmaceuticals,inc.)，布卢贝尔(bluebell)，宾夕法尼亚州)或者elgen电穿孔器(因诺维制药公司，布卢贝尔，宾夕法尼亚州)的体内电穿孔装置可完成电穿孔以便于质粒对细胞的转染。

电穿孔组件可用作电穿孔装置的一种元件，并且其他元件是与电穿孔组件连通的独立元件(或组件)。电穿孔组件可用作电穿孔装置的多于一种元件，其可与电穿孔组件分开的电穿孔装置的其他元件连通。作为一种电子机械或机械装置一部分存在的电穿孔装置的元件可以不受限制，因为所述元件可用作一个装置或者用作彼此连通的独立元件。电穿孔组件能够递送在期望组织中产生恒定电流并且包括反馈机制的能量脉冲。电极部件可包括在空间排列中具有多个电极的电极阵列，其中电极部件接收来自电穿孔组件的能量脉冲以及将所述能量脉冲通过电极递送至期望组织。多种电极中至少一种在能量脉冲的递送过程中是中性的，并测定在期望组织中电阻，将电阻通讯至电穿孔组件。反馈机制可接收测定的电阻以及可调节通过电穿孔组件递送的能量脉冲，从而维持恒定电流。

多种电极可以以分散模式来递送能量脉冲。多种电极可通过在编程序列下控制电极以分散式模式递送能量脉冲，并且所述编程序列通过用户输入至电穿孔组件。编程序列可包括按顺序递送的多个脉冲，其中利用至少两个有源电极(一个中性电极测量电阻)递送多个脉冲的各脉冲，并且其中利用至少两个有源电极(一个中性电极测量阻抗)中的不同电极递送多个脉冲的后续脉冲。

通过硬件或软件可进行反馈机制。通过模拟闭合环电路可进行反馈机制。反馈可每50μs、20μs、10μs或1μs发生一次，但优选为实时反馈或即时反馈(即，与如通过测定应答时间的可获得技术测定基本上同时)。中性电极可测定在期望组织中的电阻以及将阻抗通信至反馈机制，并且反馈机制应答电阻以及调节能量脉冲以维持恒定电流为预设电流类似的值。反馈机制可在能量脉冲递送过程中连续且即时地保持恒定电流。

可促进本发明的dna疫苗递送的电穿孔装置和电穿孔方法的例子包括在draghia-akli,等人的美国专利no.7,245,963、smith,等人提交的美国专利公开2005/0052630中描述的那些，其内容据此通过引用整体并入。可用于促进dna疫苗递送的其他电穿孔装置和电穿孔方法包括在2007年10月17日提交的共同未决和共同拥有的美国专利申请序列no.11/874072中提供的那些，其根据35usc119(e)要求2006年10月17日提交的美国临时申请序列no.60/852,149和2007年10月10日提交的60/978,982的权益，其全部据此通过引用整体并入。

通过draghia-akli等人的美国专利no.7,245,963描述标准电极体系以及用于促进生物分子引入至体内或植物中选定组织的细胞内的用途。标准电极体系可包括多个针形电极；皮下注射针；提供从可编程的恒流脉冲控制器向多个针形电极的导电性连接的电连接器；以及电源。操作员可握住固定在承载结构上的多个针形电极以及将其牢固插入至体内或植物中选定的组织。然后通过皮下注射针将生物分子递送至选定的组织内。将可编程的恒流脉冲控制器激活并且将恒流电脉冲施加至多个针形电极。施加的恒流电脉冲促进生物分子引入至多种电极之间的细胞内。将美国专利no.7,245,963的全部内容据此通过引用并入。

由smith等人提交的美国专利公开2005/0052630描述了电穿孔装置，其可用于有效地促进生物分子引入至体内或植物中选定的组织的细胞内。电穿孔装置包括由软件或固件规定其操作的电动装置(“ekd装置”)。根据用户控制和脉冲参数的输入，ekd装置在阵列的电极之间产生一系列可编程恒流脉冲模式，并且允许存储和获取电流波形数据。电穿孔装置也包括具有针形电极阵列的可更换电极盘、注射针用中心注射通道以及可移动引导盘。将美国专利公开2005/0052630的全部内容据此通过引用并入。

在美国专利no.7,245,963和美国专利公开2005/0052630中描述的电极阵列和方法不仅可适用于深度穿透至诸如肌肉的组织，也适用于深度穿透至其他组织或器官。由于电极阵列的配置，也可将注射针(用于递送选择的生物分子)完全插入靶器官内，并且垂直于靶组织在由电极预先划分的区域中进行注射施用。美国专利no.7,245,963和美国专利公开2005/005263中描述的电极优选20mm长和21规(gauge)。

此外，在涵盖的一些实施方案包括并入的电穿孔装置及其用途，有在以下专利中描述的那些电穿孔装置：1993年12月28日授权的美国专利5,273,525；2000年8月29日授权的美国专利6,110,161；2001年7月17日授权的6,261,281；以及2005年10月25日授权的6,958,060；以及2005年9月6日授权的美国专利6,939,862。而且，涵盖主题的专利提供于在2004年2月24日授权的美国专利6,697,669，其涉及使用多种装置的任一种递送dna，以及2008年2月5日授权的美国专利7,328,064，其描绘了本文包括的注射dna的方法。将以上专利通过引用整体并入。

d.制备疫苗的方法

本文提供用于制备包含本文讨论的dna疫苗的dna质粒的方法。在最终亚克隆至哺乳动物表达质粒的步骤之后，可使用本领域已知方法，将dna质粒用于在大规模发酵罐中接种细胞培养物。

可使用已知装置和技术的组合配制或制备与本发明的ep装置一起使用的dna质粒，但优选使用在2007年5月23日提交的授权、共同未决的美国临时申请美国序列no.60/939,792中描述的优化质粒制备技术来制备它们。在一些例子中，可以在大于或等于10mg/ml的浓度下配制在这些研究中使用的dna质粒。除了在美国专利序列no.60/939792中描述的那些(包括在2007年7月3日授权的授权专利、美国专利no.7,238,522中描述那些)之外，制备技术也包括或整合本领域普通技术人员通常所已知的那些各种装置和方案。将以上引用的申请和专利，美国专利序列no.60/939,792和美国专利no.7,238,522分别据此通过引用整体并入。

实施例

在以下实施例中进一步举例说明本发明。应当理解，这些实施例虽然示出本发明的优选实施方案，但仅以举例说明的方式给出。由以上讨论和这些实施例，本领域技术人员可确定该发明的必要特征，并且在不背离其精神和范围下，可对本发明进行各种改变和变动以使它适于各种用途和条件。因此，根据上述说明，除了本文所显示和描述的那些变动外，本发明的各种变动对于本领域技术人员来说是显而易见的。这些修订也旨在落入所附权利要求的范围内。

实施例1生成遗传疱疹抗原和表达构建体

采用集中在疱疹病毒家族的糖蛋白、陪伴分子蛋白和基质蛋白的dna疫苗策略。为了增加通过各病毒抗原(ag)引发的可能免疫幅度，首先检查系统发生多样性以评估多态性和帮助产生临床相关的共有氨基酸序列。

遗传和统计分析

使用mega版本5(tamura,peterson,stecher,nei,和kumar2011)进行系统发生和分子进化分析以评估用于生成共有疫苗ag的临床相关和公开市售的疱疹靶蛋白序列之间的多样性。使用具有1,000个引导程序重复次数的引导程序方法的邻近系统发生重建分析用于生成具有辐射视图的引导程序共有树。显示hcmv的p-距离，例如(图17)。

所有值记录为平均值±sem。通过使用anova和邓奈特检验(post-hocdunnett’stest)来进行组间分析以校正与一组对照(经hcmv感染)相比的多组比较。使用graphpadprism(graphpad软件有限公司(graphpadsoftwareinc.)，拉荷亚，加利福尼亚州)或者社会科学(socialsciences)(spss，芝加哥，伊利诺州)的统计程序包(statisticalpackage)来进行所有统计分析。

以下示出生成各疱疹免疫原的共有氨基酸序列的策略。通常，来自高度保守的疱疹蛋白的共有序列用于疫苗免疫原，而来自特异性、临床相关亚群的共有序列用于高度变化的蛋白。

通过使用用于序列对比的载体nti软件(英杰公司)选取公开市售(基因库)和临床相关菌株(在组织培养物种传代没有超过六次)的共有区生成疱疹疫苗蛋白的氨基酸序列。一些质粒(vzvghgl、vzvgegi、vzvgmgn、hsv1ghgl、hsv1gcgd、hsv2ghgl、hsv2gcgd、cehv1ghgl、cehv1gcgd、pcmv-ghgl、pcmv-gmgn和pcmv-ul)表达多种疱疹蛋白，其通过用于结构相关的高分子的共表达的裂解位点(弗林蛋白酶位点seqidno:63)来分隔。合成包括密码子的dna疫苗的遗传优化和用于在人和所有基因中蛋白表达的rna优化以及将其亚克隆为经修饰的pvax1哺乳动物表达载体(基因技术公司，雷根斯堡，德国或金斯瑞公司，皮斯卡塔韦，新泽西州)。

hcmv特异性分析

hcmvgb的系统发生分析证实四种主要变体(gb1-gb4)和一种非质子性变体(gb5)的存在(图17a)。由于gb蛋白在临床和低传代的菌株(～86％同一)之间相对保守，我们选择这些序列的共有区以表示我们dna疫苗编码的ag。疫苗序列与gb1基因型系统发生上最紧密，发现在一些情况下可解释大部分临床上具有严重症状的个体。

接着，hcmvgciii融合复合物的组分，gh、gl和go开发为作为dna疫苗评估的候选免疫原。除了包括由骨髓移植患者中分离的最新报道的jhc菌株的可能的第三组之外[jung等人，virusres.2011年6月；158(1-2):298]，gh的系统发生分析证实两种主要基因型的存在(图17b)。分析证实在gh之间氨基酸低水平的变化(～7％)，其可解释为什么抗-ghmab看起来活性更广。由于其高度保守水平，dna疫苗共有免疫原落入gh1和gh2之间以及与推定第三gh组和jhc临床分离物最紧密。尽管同样高度保守(～91％)，但gl蛋白的系统发生分析分组不那么明显(图17c)。一旦将gl的氨基酸序列由充分传代的菌株去除，所得到的dna共有免疫原在树上与jhc和merlin临床分离物最紧密，而与ad169和towne实验室培养的菌株相隔甚远。传统定义的gciii复合物的第三种组分是go，其高度糖基化，以及在5’端高度变化。由于go多态性高(～55％)，我们选择靶免疫原的go5基因型组的共有序列，因为该组之前已经描述与gn-4c基因型遗传上相关，其为最大gn-4变化组和具有最大血清阳性率(图17f)。在go5亚群内同一性为～99％，因此，共有ag从系统发生上归类至也包括merlin和jp临床分离物的该亚群。

新型候选疫苗免疫原hcmvgm和gn在er中通过共价二硫键和非共价相互作用异源二聚化以形成病毒染性复合物。尽管gm在cmv之间高度保守(～95％)，但gn是可变的(～45)。由于在gm之间该相对高的同一性，所有临床相关序列的共有区决定我们候选疫苗免疫原(图17d)。相反地，由于gn的高度修饰性质，以及它的特征在于大部分唯一o-连接的糖，gn-4亚型的共有区用作疫苗免疫原，这是因为该亚群据报道在北美、欧洲、中国和澳大利亚中所有临床分离物中最为普遍(图17e)。因此，该序列与gn4b亚型系统发生上最紧密，其直接出现在gn4a和gn4c组之间，所有这些构成gn4组。

目前，据显示，ul128、ul130和ul131a可形成具有gh和gl的五元复合物，而不是gciii融合复合物的gh/gl/go的常规定义的缔合。而且，已经描述该复合物引起可能的mab。由于相对高水平的氨基酸保守，一旦由高度传代和实验室培养的菌株(～87％的ul128、～86％的ul130和～73％的ul131a)中去除，则共有序列用于候选疫苗免疫原的各基因中(图17g-i)。ul128疫苗序列系统发生上归类为包括merlin和davis分离物、以及ad169菌株的组中。然而，ul130和ul131a序列两者与towne和ad169实验室菌株系统发生上分别相隔甚远，由于这些基因的缺失或突变，它们已经丧失感染内皮细胞、上皮细胞和白细胞的能力。并且最后，选择ul83蛋白(pp65)，由于它在最近疫苗策略中用作t细胞靶。因为通过大量病毒特异性cd8t细胞识别，根据对hcmv的细胞免疫应答中显著作用，首先激活该蛋白。在cmv中该蛋白高度保守以及当没有计算与许多出版的序列相关的3’截断时，其具有～97％同一性(图17j)。因此，ul83蛋白的共有区用于靶疫苗ag以及系统发生上与jp、vr1814、merlin和ad169菌株类似，但其进一步来自towne、toledo和jhc菌株。

接下来将全长候选cmv免疫原用于构建质粒dna疫苗。将各ag遗传上优化用于在人中表达、商业合成、然后亚克隆至修饰的pvax1哺乳动物表达载体内。此外，连同相同dna疫苗质粒来编码用于构建功能性病毒粒子表面复合物的需要异源性相互作用的蛋白。多种表达蛋白的质粒ghgl、gmgn和pul编码在免疫原之间的普遍存在的内切蛋白水解弗林蛋白酶裂解位点以促进翻译后裂解和修饰。以这种方式，结构和功能相关蛋白的共表达可能促进大分子复合物的形成，这可更好地表达临床和病毒相关的b细胞表位决定簇。在进行表达需要共表达；对于细胞内转运和末端碳水化合物修饰，gh需要gl的共表达的情况下，这特别重要[spaete,1993#1195]，并且类似地，当在没有gh下表达时，gl仍然定位在er中。

一种质粒包括907-9个氨基酸蛋白的hcmv-gb编码序列，hcmv-gb形成同二聚体以及是i型膜蛋白。另外的质粒包括hcmv-gm的编码序列，hcmv-gm是连接hcmv-gn的编码序列的373个氨基酸蛋白，hcmv-gn为139个氨基酸蛋白。hcmv-gm和gn蛋白形成异源二聚体以及参与传染性。另外的质粒包括hcmv-gh的编码序列，hcmv-gh是连接gl的编码序列的740个氨基酸蛋白，gl为278个氨基酸蛋白。hcmv-gh蛋白和hcmv-gl蛋白形成参与病毒融合的具有hcmv-go-gciii复合物的异源三聚体。hcmv-gh和gl蛋白也可在er中形成二硫键连接的异源二聚体。另外的质粒包括hcmv-go的编码序列，hcmv-go形成具有hcmv-gh和gl的前述异源三聚体的472个氨基酸蛋白。另外的质粒编码hcmv-pul(ul128)的编码序列，hcmv-pul(ul128)是140个氨基酸蛋白、连接hcmv-ul130的编码序列；hcmv-ul130是连接hcmv-ul131a的编码序列的215个氨基酸蛋白；hcmv-ul131a为77个氨基酸蛋白。这三种蛋白用作hcmv-go的陪伴分子。另外的质粒编码hcmv-gul83(pp65)；hcmv-gul83(pp65)是t细胞靶蛋白。

在一个实施方案中，hcmv共有氨基酸序列(seqidno:2、seqidno:4、seqidno:6、seqidno:8、seqidno:10、seqidno:12、seqidno:14、seqidno:16、seqidno:18和seqidno:20)的十种编码序列(seqidno:1、seqidno:3、seqidno:5、seqidno:7、seqidno:9、seqidno:11、seqidno:13、seqidno:15、seqidno:17和seqidno:19)包含在六种单独的表达载体质粒上。提供gb(质粒1)、(质粒4)go和gul83(经修饰的质粒6)的单一基因构建体。为编码gm和gn(质粒2)、gh和gl(质粒3)、和ul128、ul130和ul131a(质粒5)的构建体提供编码融合蛋白的嵌合基因，将其表达为单独的多蛋白。在融合蛋白的各种情况下，在多蛋白中不同抗原的编码序列连接编码弗林蛋白酶蛋白裂解位点(seqidno:63)的序列。融合蛋白的编码序列也包括在多蛋白的n末端处ige信号肽(seqidno:61)的编码序列以及ha标签(seqidno:62)的编码序列，该ha标签在多蛋白中连接在各hcmv抗原的c末端处。在多蛋白的蛋白水解裂解位点处处理为单独的蛋白之后，各蛋白包含ha标签。分别提供单一抗原构建体的编码序列以及包括在各翻译产物的n末端处的ige信号肽(seqidno:61)的编码序列。也分别提供gb和go的编码序列以及ha标签(seqidno:62)的编码序列，使得各hcmv抗原蛋白的c末端包含ha标签。在经修饰的质粒6中gul83的编码序列不含有ha标签的编码序列。然而，可将经修饰的质粒6的另外的形式构建为含有ha标签(seqidno:62)的编码序列，使得hcmv抗原蛋白的c末端包含ha标签。

使用本文所公开的变体pvax1(图1，seqidno:76)可分别制备质粒1-6和经修饰的质粒1-6。

质粒1(图2)是具有插入物的变体pvax1，该插入物具有可操作连接seqinno:41的调控元件，即，seqinno:41为编码连接共有gb的ige前导序列，该共有gb连接ha标签，从而编码蛋白seqidno:42。

质粒2(图3)是具有插入物的变体pvax1，该插入物具有可操作连接核酸序列seqidno:64的调控元件，该核酸序列seqidno:64编码连接共有gm的ige前导序列，该共有gm连接ha标签，该ha标签连接弗林蛋白酶蛋白裂解位点，该弗林蛋白酶蛋白裂解位点连接共有gn4-c的核酸序列，该核酸序列连接ha标签，从而编码融合蛋白seqidno:65。

质粒3(图4)是具有插入物的变体pvax1，该插入物具有可操作连接核酸序列seqidno:66的调控元件，该核酸序列seqidno:66编码连接共有gh的ige前导序列，该共有gh连接ha标签，该ha标签连接弗林蛋白酶蛋白裂解位点，该弗林蛋白酶蛋白裂解位点连接共有gl的核酸序列，该核酸序列连接ha标签，从而编码融合蛋白seqidno:67。

质粒4(图5)是具有插入物的变体pvax1，该插入物具有可操作连接核酸序列seqidno:51的调控元件，该核酸序列seqidno:51编码连接共有go-5的ige前导序列，该共有go-5连接ha标签，从而编码蛋白seqidno:52。

质粒5(图6)是具有插入物的变体pvax1，该插入物具有可操作连接核酸序列seqidno:68的调控元件，该核酸序列seqidno:68编码连接共有ul131a的ige前导序列，该共有ul131a连接ha标签，该ha标签连接弗林蛋白酶蛋白裂解位点，该弗林蛋白酶蛋白裂解位点连接共有ul130，该共有ul130连接ha标签，该ha标签连接弗林蛋白酶蛋白裂解位点，该弗林蛋白酶蛋白裂解位点连接共有ul128，该共有ul128连接ha标签，从而编码融合蛋白seqidno:69。

经修饰的质粒6(图9)是具有插入物的变体pvax1，该插入物具有可操作连接seqidno:39的调控元件；即，seqidno:39为编码ige前导序列的核酸序列，ige前导序列连接共有ul-83(pp65)，从而编码蛋白seqidno:40。

如果连接u83翻译产物的ha标签是所需的，则质粒6(图7)可用于替代经修饰的质粒6。质粒6可以为具有插入物的变体pvax1，该插入物具有可操作连接seqidno:59的调控元件；即，seqidno:59为编码ige前导序列的核酸序列，该ige前导序列连接共有ul-83(pp65)，从而编码蛋白seqidno:60。

在一些实施方案中，可修饰质粒1-5，使得没有ha标签的编码序列。

经修饰的质粒1(图7)可以为具有插入物的本文描述的变体pvax1，该插入物具有可操作连接seqinno:21的调控元件，即，seqinno:21为编码ige前导序列的核酸序列，该ige前导序列连接共有gb，从而编码蛋白seqidno:22。

经修饰的质粒2可以为具有插入物的本文所述的变体pvax1，该插入物具有可操作连接核酸序列seqidno:70的调控元件，该核酸序列seqidno:70编码连接共有gm的ige前导序列，该共有gm连接弗林蛋白酶蛋白裂解位点，该弗林蛋白酶蛋白裂解位点连接共有gn4-c的核酸序列，从而编码融合蛋白seqidno:71。

经修饰的质粒3(图8)可以为具有插入物的本文所述的变体pvax1，该插入物具有可操作连接核酸序列seqidno:72的调控元件，该核酸序列seqidno:72编码ige前导序列，该ige前导序列连接共有gh，该共有gh连接弗林蛋白酶蛋白裂解位点，该弗林蛋白酶蛋白裂解位点连接共有gl的核酸序列，从而编码融合蛋白seqidno:73。

经修饰的质粒4可以为具有插入物的本文所述的变体pvax1，该插入物具有可操作连接核酸序列seqidno:31的调控元件，该核酸序列seqidno:31编码连接共有go-5的ige前导序列，从而编码蛋白seqidno:32。

经修饰的质粒5可以为具有插入物的本文所述的变体pvax1，该插入物具有可操作连接核酸序列seqidno:74的调控元件，该核酸序列seqidno:74编码连接共有ul131a的ige前导序列，该共有ul131a连接弗林蛋白酶蛋白裂解位点，该弗林蛋白酶蛋白裂解位点连接共有ul130，该共有ul130连接弗林蛋白酶蛋白裂解位点，该弗林蛋白酶蛋白裂解位点连接共有ul128，从而编码融合蛋白seqidno:75。

在一些实施方案中，包含这六种质粒的组合物是抗-hcmv疫苗的例子。在抗-hcmv疫苗的一些实施方案中，两种或更多种组合物共同包含这六种质粒。一些实施方案提供生成针对hcmv蛋白的免疫应答的方法，其包括向个体施用一种或多种组合物，该一种或多种组合物共同包含这六种质粒的每一种。一些实施方案提供针对hcmv感染预防性接种个体的方法，其包括施用一种或多种组合物，该一种或多种组合物共同包含这六种质粒的每一种。一些实施方案提供治疗性接种已经感染hcmv的个体的方法，其包括施用一种或多种组合物，该一种或多种组合物共同包含这六种质粒的每一种。

其他疱疹病毒的分析：

类似于以上hcmv，类似的策略用于识别hsv1、hsv2、cehv1和vzv的抗原。

对于来自家族vzv、cehv1、hsv1和hsv的疱疹病毒，考虑以下抗原，根据用于以上cmv的类似标准，制备共有抗原和克隆至例如cmv的类似的载体中：考虑表面抗原囊膜gb、gh、gl、gm、gn、go、ge、gi和gk。

构建用于优化相关蛋白的新生共表达的质粒。总之，构建表达hcmvgb、gm/gn、gh/gl、go、ul128-131和ul83；vzvghgl、gegi、gmgn、gb、gc和gk；hsv1gb、ghgl、gcgd；hsv2gb、ghgl、gcgd；和cehv1gb、ghgl和gcgd的21个质粒，在高度优化的dna疫苗中，构建优化相关蛋白的新生共表达的质粒。总之，构建在高度优化的dna疫苗中表达hcmvgb、gm/gn、gh/gl、go、ul128-131和ul83；vzvghgl、gegi、gmgn、gb、gc和gk；hsv1gb、ghgl、gcgd；hsv2gb、ghgl、gcgd；和cehv1gb、ghgl和gcgd的21个质粒。

质粒7-21分别对应克隆至本文公开的变体pvax1(图1，seqidno:76)载体内的以下vzvghgl、gegi、gmgn、gb、gc和gk；hsv1gb、ghgl、gcgd；hsv2gb、ghgl、gcgd；和cehv1gb、ghgl和gcgd编码序列的每一种。在一些实施方案中，pvax1具有插入物，该插入物具有可操作连接疱疹抗原的编码核酸序列的调控元件，该编码核酸序列包括连接抗原的ige前导序列的编码序列(编码氨基酸序列seqidno:61)。在一些实施方案中，可将质粒7-21修饰，使得ha标签的编码序列(编码氨基酸序列seqidno:62)连接抗原的n-末端。

实施例2

在一些实施方案中，施用包含hcmv：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83的每一种的编码序列的组合物；或者多种组合物，其共同包含以下的每一种的编码序列：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83。组合物包含gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83的每一种的编码序列；或者组合物的组合共同包含gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的编码序列。在一些实施方案中，疫苗包含编码gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的一种或多种编码序列，该一种或多种编码序列具有选自seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60的序列。在一些实施方案中，一种或多种的编码序列选自seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。在一些实施方案中，在疫苗中一种或多种的编码序列选自：seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。在一些实施方案中，疫苗包含编码序列seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17和19的每一种。在一些实施方案中，疫苗包含在seqidno:21、23、25、27、29、31、33、35、37和39中编码序列的每一种。在一些实施方案中，疫苗包含在seqidno:41、43、45、47、49、51、53、55、57和59中编码序列的每一种。

实施例3

在一些实施方案中，施用包含以下九种编码序列的组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83；或者共同包含以下九种编码序列的多种组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83。组合物可包含以下九种的编码序列：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83；或者共同包含以下九种的编码序列的组合物的组合：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83。以下组合9-1至9-10可存在于这些疫苗中：9-1gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a；9-2gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul83；9-3gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul131a、ul83；9-4gb、gm、gn、gh、gl、go、ul130、ul131a、ul83；9-5gb、gm、gn、gh、gl、ul128、ul130、ul131a、ul83；9-6gb、gm、gn、gh、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；9-7gb、gm、gn、gl、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；9-8gb、gm、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；9-9gb、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；和9-10gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、ul83。在一些实施方案中，这些疫苗包含编码gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的的一种或多种的编码序列，编码序列具有选自seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60的序列。在一些实施方案中，一种或多种的编码序列选自seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。在一些实施方案中，在疫苗中一种或多种的编码序列选自seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。

实施例4

在一些实施方案中，施用包含以下八种编码序列的组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83；或者多种组合物共同包含以下八种的编码序列：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83。组合物可包含以下八种的编码序列：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83；或者共同包含以下八种编码序列的组合物的组合：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83。以下组合8-1至8-45可存在于八种抗原疫苗中：8-1:gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130；8-2:gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul131a；8-3:gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul83；8-4:gb、gm、gn、gh、gl、go、ul130、ul131a；8-5:gb、gm、gn、gh、gl、go、ul130、ul83；8-6:gb、gm、gn、gh、gl、go、ul131a、ul83；8-7:gb、gm、gn、gh、gl、ul128、ul130、ul131a；8-8:gb、gm、gn、gh、gl、ul128、ul130、ul83；8-9:gb、gm、gn、gh、gl、ul128、ul131a、ul83；8-10:gb、gm、gn、gh、gl、ul130、ul131a、ul83；8-11:gb、gm、gn、gh、go、ul128、ul130、ul131a；8-12:gb、gm、gn、gh、go、ul128、ul130、ul83；8-13:gb、gm、gn、gh、go、ul128、ul131a、ul83；8-14:gb、gm、gn、gh、go、ul130、ul131a、ul83；8-15:gb、gm、gn、gh、ul128、ul130、ul131a、ul83；8-16:gb、gm、gn、gl、go、ul128、ul130、ul131a；8-17:gb、gm、gn、gl、go、ul128、ul130、ul83；8-18:gb、gm、gn、gl、go、ul128、ul131a、ul83；8-19:gb、gm、gn、gl、go、ul130、ul131a、ul83；8-20:gb、gm、gn、gl、ul128、ul130、ul131a、ul83；8-21:gb、gm、gn、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；8-22:gb、gm、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a；8-23:gb、gm、gh、gl、go、ul128、ul130、ul83；8-24:gb、gm、gh、gl、go、ul128、ul131a、ul83；8-25:gb、gm、gh、gl、go、ul130、ul131a、ul83；8-26:gb、gm、gh、gl、ul128、ul130、ul131a、ul83；8-27:gb、gm、gh、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；8-28:gb、gm、gl、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；8-29:gb、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a；8-30:gb、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul83；8-31:gb、gn、gh、gl、go、ul128、ul131a、ul83；8-32:gb、gn、gh、gl、go、ul130、ul131a、ul83；8-33:gb、gn、gh、gl、ul128、ul130、ul131a、ul83；8-34:gb、gn、gh、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；8-35:gb、gn、gl、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；8-36:gb、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；8-37:gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a；7-x:8-38:gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul83；8-39:gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul131a、ul83；8-40:gm、gn、gh、gl、go、ul130、ul131a、ul83；8-41:gm、gn、gh、gl、gl、ul128、ul130、ul131a、ul83；8-42:gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；8-43:gm、gn、gl、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；8-44:gm、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；和8-45:gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、ul83。在一些实施方案中，这些疫苗包含编码以下的每一种的一种或多种编码序列：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a，该编码序列具有选自以下的序列：seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。在一些实施方案中，一种或多种的编码序列选自seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。在一些实施方案中，在疫苗中一种或多种的编码序列选自seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。

实施例5

在一些实施方案中，施用包含以下七种的编码序列的组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83，或者共同包含以下七种的编码序列的多种组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83。组合物可包含以下七种的编码序列：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83，或者组合物的组合共同包含以下七种的编码序列：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83。以下组合7-1至7-120可存在于七种抗原疫苗中：7-1:gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128；7-2:gb、gm、gn、gh、gl、go、ul130；7-3:gb、gm、gn、gh、gl、go、ul131a；7-4:gb、gm、gn、gh、gl、go、ul83；7-5:gb、gm、gn、gh、gl、ul128、ul130；7-6:gb、gm、gn、gh、gl、ul128、ul131a；7-7:gb、gm、gn、gh、gl、ul128、ul83；7-8:gb、gm、gn、gh、gl、ul130、ul131a；7-9:gb、gm、gn、gh、gl、ul130、ul83；7-10:gb、gm、gn、gh、gl、ul131a、ul83；7-11:gb、gm、gn、gh、go、ul128、ul130；7-12:gb、gm、gn、gh、go、ul128、ul131a；7-13:gb、gm、gn、gh、go、ul128、ul83；7-14:gb、gm、gn、gh、go、ul130、ul131a；7-15:gb、gm、gn、gh、go、ul130、ul83；7-16:gb、gm、gn、gh、go、ul131a、ul83；7-17:gb、gm、gn、gh、ul128、ul130、ul131a；7-18:gb、gm、gn、gh、ul128、ul130、ul83；7-19:gb、gm、gn、gh、ul128、ul130、ul131a；7-20:gb、gm、gn、gh、ul128、ul130、ul83；7-21:gb、gm、gn、gh、ul128、ul131a、ul83；7-22:gb、gm、gn、gh、ul130、ul131a、ul83；7-23:gb、gm、gn、gl、go、ul128、ul130；7-24:gb、gm、gn、gl、go、ul128、ul131a；7-25:gb、gm、gn、gl、go、ul128、ul83；7-26:gb、gm、gn、gl、go、ul130、ul131a；7-27:gb、gm、gn、gl、go、ul130、ul83；7-28:gb、gm、gn、gl、go、ul131a、ul83；7-29:gb、gm、gn、gl、ul128、ul130、ul131a；7-30:gb、gm、gn、gl、ul128、ul130、ul83；7-31:gb、gm、gn、gl、ul128、ul130、ul131a；7-32:gb、gm、gn、gl、ul128、ul130、ul83；7-33:gb、gm、gn、gl、ul128、ul131a、ul83；7-34:gb、gm、gn、gl、ul130、ul131a、ul83；7-35:gb、gm、gn、go、ul128、ul130、ul131a；7-36:gb、gm、gn、go、ul128、ul130、ul83；7-37:gb、gm、gn、go、ul128、ul131a、ul83；7-38:gb、gm、gn、go、ul130、ul131a、ul83；7-39:gb、gm、gn、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-40:gb、gm、gh、gl、go、ul128、ul130；7-41:gb、gm、gh、gl、go、ul128、ul131a；7-42:gb、gm、gh、gl、go、ul128、ul83；7-43:gb、gm、gh、gl、go、ul130、ul131a；7-44:gb、gm、gh、gl、go、ul130、ul83；7-45:gb、gm、gh、gl、go、ul131a、ul83；7-46:gb、gm、gh、go、ul128、ul130、ul131a；7-47:gb、gm、gh、go、ul128、ul130、ul83；7-48:gb、gm、gh、go、ul128、ul131a、ul83；7-49:gb、gm、gh、go、ul130、ul131a、ul83；7-50:gb、gm、gh、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-51:gb、gm、gl、go、ul128、ul130、ul131a；7-52:gb、gm、gl、go、ul128、ul130、ul83；7-53:gb、gm、gl、go、ul128、ul131a、ul83；7-54:gb、gm、gl、go、ul130、ul131a、ul83；7-55:gb、gm、gl、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-56:gb、gm、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-57:gb、gn、gh、gl、go、ul128、ul130；7-58:gb、gn、gh、gl、go、ul128、ul131a；7-59:gb、gn、gh、gl、go、ul128、ul83；7-60:gb、gn、gh、gl、go、ul130、ul131a；7-61:gb、gn、gh、gl、go、ul130、ul83；7-62:gb、gn、gh、gl、go、ul131a、ul83；7-63:gb、gn、gh、gl、ul128、ul130、ul131a；7-64:gb、gn、gh、gl、ul128、ul130、ul83；7-65:gb、gn、gh、gl、ul128、ul131a、ul83；7-66:gb、gn、gh、gl、ul130、ul131a、ul83；7-67:gb、gn、gh、go、ul128、ul130、ul131a；7-68:gb、gn、gh、go、ul128、ul130、ul83；7-69:gb、gn、gh、go、ul128、ul131a、ul83；7-70:gb、gn、gh、go、ul130、ul131a、ul83；7-71:gb、gn、gh、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-72:gb、gn、gl、go、ul128、ul130、ul131a；7-73:gb、gn、gl、go、ul128、ul130、ul83；7-74:gb、gn、gl、go、ul128、ul131a、ul83；7-75:gb、gn、gl、go、ul130、ul131a、ul83；7-76:gb、gn、gl、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-77:gb、gn、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-78:gb、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a；7-79:gb、gh、gl、go、ul128、ul130、ul83；7-80:gb、gh、gl、go、ul128、ul131a、ul83；7-81:gb、gh、gl、go、ul130、ul131a、ul83；7-82gb、gh、gl、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-83:gb、gh、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-84:gb、gl、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-85:gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130；7-86:gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul131a；7-87:gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul83；7-88:gm、gn、gh、gl、go、ul130、ul131a；7-89:gm、gn、gh、gl、go、ul130、ul83；7-90:gm、gn、gh、gl、go、ul131a、ul83；7-91:gm、gn、gh、gl、gl、ul128、ul130、ul131a；7-92:gm、gn、gh、gl、gl、ul128、ul130、ul83；7-93:gm、gn、gh、gl、gl、ul128、ul131a、ul83；7-94:gm、gn、gh、gl、gl、ul130、ul131a、ul83；7-95:gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a；7-96:gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul83；7-97:gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul131a、ul83；7-98:gm、gn、gh、gl、go、ul130、ul131a、ul83；7-99:gm、gn、gh、gl、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-100:gm、gn、gl、go、ul128、ul130、ul131a；7-101:gm、gn、gl、go、ul128、ul130、ul83；7-102:gm、gn、gl、go、ul128、ul131a、ul83；7-103:gm、gn、gl、go、ul130、ul131a、ul83；7-104:gm、gn、gl、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-105:gm、gn、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-106:gm、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a；7-107:gm、gh、gl、go、ul128、ul130、ul83；7-108:gm、gh、gl、go、ul128、ul131a、ul83；7-109:gm、gh、gl、go、ul130、ul131a、ul83；7-110:gm、gh、gl、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-111:gm、gh、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-112:gm、gl、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-113:gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a；7-114:gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul83；7-115:gn、gh、gl、go、ul128、ul131a、ul83；7-116:gn、gh、gl、go、ul130、ul131a、ul83；7-117:gn、gh、gl、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-118:gn、gh、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-119:gn、gl、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；7-120:gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、ul83。在一些实施方案中，这些疫苗包含编码gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的的一种或多种编码序列，该编码序列具有选自以下的序列：seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。在一些实施方案中，一种或多种的编码序列选自：seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。在一些实施方案中，在疫苗中一种或多种的编码序列选自seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。

实施例6

在一些实施方案中，施用包含以下六种的编码序列的组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83；或者共同包含以下六种的编码序列的多种组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83。组合物可包含以下六种的编码序列：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83；或者共同包含以下六种的编码序列的组合物的组合：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83。以下组合6-1至6-210可存在于七种抗原疫苗中：6-1:gb、gm、gn、gh、gl、go；6-2:gb、gm、gn、gh、gl、ul128；6-3:gb、gm、gn、gh、gl、ul130；6-4:gb、gm、gn、gh、gl、ul131a；6-5:gb、gm、gn、gh、gl、ul83；6-6:gb、gm、gn、gh、go、ul128；6-7:gb、gm、gn、gh、go、ul130；6-8:gb、gm、gn、gh、go、ul131a；6-9:gb、gm、gn、gh、go、ul83；6-10:gb、gm、gn、gh、ul128、ul130；6-11:gb、gm、gn、gh、ul128、ul131a；6-12:gb、gm、gn、gh、ul128、ul83；6-13:gb、gm、gn、gh、ul130、ul131a；6-14:gb、gm、gn、gh、ul130、ul83；6-15:gb、gm、gn、gh、ul131a、ul83；6-16:gb、gm、gn、gl、go、ul128；6-17:gb、gm、gn、gl、go、ul130；6-18:gb、gm、gn、gl、go、ul131a；6-19:gb、gm、gn、gl、go、ul83；6-20:gb、gm、gn、gl、ul128、ul130；6-21:gb、gm、gn、gl、ul128、ul131a；6-22:gb、gm、gn、gl、ul128、ul83；6-23:gb、gm、gn、gl、ul130、ul131a；6-24:gb、gm、gn、gl、ul130、ul83；6-25:gb、gm、gn、gl、ul131a、ul83；6-26:gb、gm、gn、go、ul128、ul130；6-27:gb、gm、gn、go、ul128、ul131a；6-28:gb、gm、gn、go、ul128、ul83；6-29:gb、gm、gn、go、ul130、ul131a；6-30:gb、gm、gn、go、ul130、ul83；6-31:gb、gm、gn、go、ul131a、ul83；6-32:gb、gm、gn、ul128、ul130、ul131a；6-33:gb、gm、gn、ul128、ul130、ul83；6-34:gb、gm、gn、ul128、ul131a、ul83；6-35:gb、gm、gn、ul130、ul131a、ul83；6-36:gb、gm、gh、gl、go、ul128；6-37:gb、gm、gh、gl、go、ul130；6-38:gb、gm、gh、gl、go、ul131a；6-39:gb、gm、gh、gl、go、ul83；6-40:gb、gm、gh、gl、ul128、ul130；6-41:gb、gm、gh、gl、ul128、ul131a；6-42:gb、gm、gh、gl、ul128、ul83；6-43:gb、gm、gh、gl、ul130、ul131a；6-44:gb、gm、gh、gl、ul130、ul83；6-45:gb、gm、gh、gl、ul131a、ul83；6-46:gb、gm、gh、go、ul128、ul130；6-47:gb、gm、gh、go、ul128、ul131a；6-48:gb、gm、gh、go、ul128、ul83；6-49:gb、gm、gh、go、ul130、ul131a；6-50:gb、gm、gh、go、ul130、ul83；6-51:gb、gm、gh、go、ul131a、ul83；6-52:gb、gm、gh、ul128、ul130、ul131a；6-53:gb、gm、gh、ul128、ul130、ul83；6-54:gb、gm、gh、ul128、ul131a、ul83；6-55:gb、gm、gh、ul130、ul131a、ul83；6-56:gb、gm、gl、go、ul128、ul130；6-57:gb、gm、gl、go、ul128、ul131a；6-58:gb、gm、gl、go、ul128、ul83；6-59:gb、gm、gl、go、ul130、ul131a；6-60:gb、gm、gl、go、ul130、ul83；6-61:gb、gm、gl、go、ul131a、ul83；6-62:gb、gm、gl、ul128、ul130、ul131a；6-63:gb、gm、gl、ul128、ul130、ul83；6-64:gb、gm、gl、ul128、ul131a、ul83；6-65:gb、gm、gl、ul130、ul131a、ul83；6-66:gb、gm、go、ul128、ul130、ul131a；6-67:gb、gm、go、ul128、ul130、ul83；6-68:gb、gm、go、ul128、ul131a、ul83；6-69:gb、gm、go、ul130、ul131a、ul83；6-70:gb、gm、ul128、ul130、ul131a、ul83；6-71:gb、gn、gh、gl、go、ul128；6-72:gb、gn、gh、gl、go、ul130；6-73:gb、gn、gh、gl、go、ul131a；6-74:gb、gn、gh、gl、go、ul83；6-75:gb、gn、gh、gl、ul128、ul130；6-76:gb、gn、gh、gl、ul128、ul131a；6-77:gb、gn、gh、gl、ul128、ul83；6-78:gb、gn、gh、gl、ul130、ul131a；6-79:gb、gn、gh、gl、ul130、ul83；6-80:gb、gn、gh、gl、ul131a、ul83；6-81:gb、gn、gh、go、ul128、ul130；6-82:gb、gn、gh、go、ul128、ul131a；6-83:gb、gn、gh、go、ul128、ul83；6-84:gb、gn、gh、go、ul130、ul131a；6-85:gb、gn、gh、go、ul130、ul83；6-86:gb、gn、gh、go、ul131a、ul83；6-87:gb、gn、gh、ul128、ul130、ul131a；6-88:gb、gn、gh、ul128、ul130、ul83；6-89:gb、gn、gh、ul128、ul131a、ul83；6-90:gb、gn、gh、ul130、ul131a、ul83；6-91:gb、gn、gl、go、ul128、ul130；6-92:gb、gn、gl、go、ul128、ul131a；6-93:gb、gn、gl、go、ul128、ul83；6-94:gb、gn、gl、go、ul130、ul131a；6-95:gb、gn、gl、go、ul130、ul83；6-96gb、gn、gl、go、ul131a、ul83；6-97:gb、gn、gl、ul128、ul130、ul131a；6-98:gb、gn、gl、ul128、ul130、ul83；6-99:gb、gn、gl、ul128、ul131a、ul83；6-100:gb、gn、gl、ul130、ul131a、ul83；6-101:gb、gn、go、ul128、ul130、ul131a；6-102:gb、gn、go、ul128、ul130、ul83；6-103:gb、gn、go、ul128、ul131a、ul83；6-104:gb、gn、go、ul130、ul131a、ul83；6-105:gb、gn、ul128、ul130、ul131a、ul83；6-106:gb、gh、gl、go、ul128、ul130；6-107:gb、gh、gl、go、ul128、ul131a；6-108:gb、gh、gl、go、ul128、ul83；6-109:gb、gh、gl、go、ul130、ul131a；6-110:gb、gh、gl、go、ul130、ul83；6-111:gb、gh、gl、go、ul131a、ul83；6-112:gb、gh、gl、ul128、ul130、ul131a；6-113:gb、gh、gl、ul128、ul130、ul83；6-114:gb、gh、gl、ul128、ul131a、ul83；6-115:gb、gh、gl、ul130、ul131a、ul83；6-116:gb、gh、go、ul128、ul130、ul131a；6-117:gb、gh、go、ul128、ul130、ul83；6-118:gb、gh、go、ul128、ul131a、ul83；6-119:gb、gh、go、ul130、ul131a、ul83；6-120:gb、gh、ul128、ul130、ul131a、ul83；6-121:gb、gl、go、ul128、ul130、ul131a；6-122:gb、gl、go、ul128、ul130、ul83；6-123:gb、gl、go、ul128、ul131a、ul83；6-124:gb、gl、go、ul130、ul131a、ul83；6-125:gb、gl、ul128、ul130、ul131a、ul83；6-126:gb、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；6-127:gm、gn、gh、gl、go、ul128；6-128:gm、gn、gh、gl、go、ul130；6-129:gm、gn、gh、gl、go、ul131a；6-130:gm、gn、gh、gl、go、ul83；6-131:gm、gn、gh、gl、ul128、ul130；6-132:gm、gn、gh、gl、ul128、ul131a；6-133:gm、gn、gh、gl、ul128、ul83；6-134:gm、gn、gh、gl、ul130、ul131a；6-135:gm、gn、gh、gl、ul130、ul83；6-136:gm、gn、gh、gl、ul131a、ul83；6-137:gm、gn、gh、go、ul128、ul130；6-138:gm、gn、gh、go、ul128、ul131a；6-139:gm、gn、gh、go、ul128、ul83；6-140:gm、gn、gh、go、ul130、ul131a；6-141:gm、gn、gh、go、ul130、ul83；6-142:gm、gn、gh、go、ul131a、ul83；6-143:gm、gn、gh、ul128、ul130、ul131a；6-144:gm、gn、gh、ul128、ul130、ul83；6-145:gm、gn、gh、ul128、ul131a、ul83；6-146:gm、gn、gh、ul130、ul131a、ul83；6-147:gm、gn、gl、go、ul128、ul130；6-148:gm、gn、gl、go、ul128、ul131a；6-149:gm、gn、gl、go、ul128、ul83；6-150:gm、gn、gl、go、ul130、ul131a；6-151:gm、gn、gl、go、ul130、ul83；6-152:gm、gn、gl、go、ul131a、ul83；6-153:gm、gn、gl、ul128、ul130、ul131a；6-154:gm、gn、gl、ul128、ul130、ul83；6-155:gm、gn、gl、ul128、ul131a、ul83；6-156:gm、gn、gl、ul130、ul131a、ul83；6-157:gm、gn、go、ul128、ul130、ul131a；6-158:gm、gn、go、ul128、ul130、ul83；6-159:gm、gn、go、ul128、ul131a、ul83；6-160:gm、gn、go、ul130、ul131a、ul83；6-161:gm、gn、ul128、ul130、ul131a、ul83；6-162:gm、gh、gl、go、ul128、ul130；6-163:gm、gh、gl、go、ul128、ul131a；6-164:gm、gh、gl、go、ul128、ul83；6-165:gm、gh、gl、go、ul130、ul131a；6-166:gm、gh、gl、go、ul130、ul83；6-167:gm、gh、gl、go、ul131a、ul83；6-168:gm、gh、gl、ul128、ul130、ul131a；6-169:gm、gh、gl、ul128、ul130、ul83；6-170:gm、gh、gl、ul128、ul131a、ul83；6-171:gm、gh、gl、ul130、ul131a、ul83；6-172:gm、gh、go、ul128、ul130、ul131a；6-173:gm、gh、go、ul128、ul130、ul83；6-174:gm、gh、go、ul128、ul131a、ul83；6-175:gm、gh、go、ul130、ul131a、ul83；6-176:gm、gh、ul128、ul130、ul131a、ul83；6-177:gm、gl、go、ul128、ul130、ul131a；6-178:gm、gl、go、ul128、ul130、ul83；6-179:gm、gl、go、ul128、ul131a、ul83；6-180:gm、gl、go、ul130、ul131a、ul83；6-181:gm、gl、ul128、ul130、ul131a、ul83；6-182:gm、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；6-183:gn、gh、gl、go、ul128、ul130；6-184:gn、gh、gl、go、ul128、ul131a；6-185:gn、gh、gl、go、ul128、ul83；6-186:gn、gh、gl、go、ul130、ul131a；6-187:gn、gh、gl、go、ul130、ul83；6-188:gn、gh、gl、go、ul131a、ul83；6-189:gn、gh、gl、ul128、ul130、ul131a；6-190:gn、gh、gl、ul128、ul130、ul83；6-191:gn、gh、gl、ul128、ul131a、ul83；6-192:gn、gh、gl、ul130、ul131a、ul83；6-193:gn、gh、go、ul128、ul130、ul131a；6-194:gn、gh、go、ul128、ul130、ul83；6-195:gn、gh、go、ul128、ul131a、ul83；6-196:gn、gh、go、ul130、ul131a、ul83；6-197:gn、gh、ul128、ul130、ul131a、ul83；6-198:gn、gl、go、ul128、ul130、ul131a；6-199:gn、gl、go、ul128、ul130、ul83；6-200:gn、gl、go、ul128、ul131a、ul83；6-201:gn、gl、go、ul130、ul131a、ul83；6-202gn、gl、ul128、ul130、ul131a、ul83；6-203:gn、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；6-204:gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a；6-205:gh、gl、go、ul128、ul130、ul83；6-206:gh、gl、go、ul128、ul131a、ul83；6-207:gh、gl、go、ul130、ul131a、ul83；6-208:gh、gl、ul128、ul130、ul131a、ul83；6-209:gh、go、ul128、ul130、ul131a、ul83；和6-210:gl、go、ul128、ul130、ul131a、ul83。在一些实施方案中，这些疫苗包含编码gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的的一种或多种编码序列，该编码序列具有选自以下的序列：seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。在一些实施方案中，一种或多种的编码序列选自seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。在一些实施方案中，在疫苗中一种或多种的编码序列选自seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。

实施例7

在一些实施方案中，施用包含以下五种编码序列的组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83；或者共同包含以下五种编码序列的多种组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83。包含以下五种编码序列的组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83；或者共同包含以下五种编码序列的组合物的组合：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83称为“五种抗原疫苗”。以下组合5-1至5-252可存在于五种抗原疫苗中：5-1:gb、gm、gn、gh、gl；5-2:gb、gm、gn、gh、go；5-3:gb、gm、gn、gh、ul128；5-4:gb、gm、gn、gh、ul130；5-5:gb、gm、gn、gh、ul131a；5-6:gb、gm、gn、gh、ul83；5-7:gb、gm、gn、gl、go；5-8:gb、gm、gn、gl、ul128；5-9:gb、gm、gn、gl、ul130；5-10:gb、gm、gn、gl、ul131a；5-11:gb、gm、gn、gl、ul83；5-12:gb、gm、gn、go、ul128；5-13:gb、gm、gn、go、ul130；5-14:gb、gm、gn、go、ul131a；5-15:gb、gm、gn、go、ul83；5-16:gb、gm、gn、ul128、ul130；5-17:gb、gm、gn、ul128、ul131a；5-18:gb、gm、gn、ul128、ul83；5-19:gb、gm、gn、ul130、ul131a；5-20:gb、gm、gn、ul130、ul83；5-21:gb、gm、gn、ul131a、ul83；5-22:gb、gm、gh、gl、go；5-23:gb、gm、gh、gl、ul128；5-24:gb、gm、gh、gl、ul130；5-25:gb、gm、gh、gl、ul131a；5-26:gb、gm、gh、gl、ul83；5-27:gb、gm、gh、go、ul128；5-28:gb、gm、gh、go、ul130；5-29:gb、gm、gh、go、ul131a；5-30:gb、gm、gh、go、ul83；5-31:gb、gm、gh、ul128、ul130；5-32:gb、gm、gh、ul128、ul131a；5-33:gb、gm、gh、ul128、ul83；5-34:gb、gm、gh、ul130、ul131a；5-35:gb、gm、gh、ul130、ul83；5-36:gb、gm、gh、ul131a、ul83；5-37:gb、gm、gl、go、ul128；5-38:gb、gm、gl、go、ul130；5-39:gb、gm、gl、go、ul131a；5-40:gb、gm、gl、go、ul83；5-41:gb、gm、gl、ul128、ul130；5-42:gb、gm、gl、ul128、ul131a；5-43:gb、gm、gl、ul128、ul83；5-44:gb、gm、gl、ul130、ul131a；5-45:gb、gm、gl、ul130、ul83；5-46:gb、gm、gl、ul131a、ul83；5-47:gb、gm、go、ul128、ul130；5-48:gb、gm、go、ul128、ul131a；5-49:gb、gm、go、ul128、ul83；5-50:gb、gm、go、ul130、ul131a；5-51:gb、gm、go、ul130、ul83；5-52:gb、gm、go、ul131a、ul83；5-53:gb、gm、ul128、ul130、ul131a；5-54:gb、gm、ul128、ul130、ul83；5-55:gb、gm、ul128、ul131a、ul83；5-56:gb、gm、ul130、ul131a、ul83；5-57:gb、gn、gh、gl、go；5-58:gb、gn、gh、gl、ul128；5-59:gb、gn、gh、gl、ul130；5-60:gb、gn、gh、gl、ul131a；5-61:gb、gn、gh、gl、ul83；5-62:gb、gn、gh、go、ul128；5-63:gb、gn、gh、go、ul130；5-64:gb、gn、gh、go、ul131a；5-65:gb、gn、gh、go、ul83；5-66:gb、gn、gh、ul128、ul130；5-67:gb、gn、gh、ul128、ul131a；5-68:gb、gn、gh、ul128、ul83；5-69:gb、gn、gh、ul130、ul131a；5-70:gb、gn、gh、ul130、ul83；5-71:gb、gn、gh、ul131a、ul83；5-72:gb、gn、gl、go、ul128；5-73:gb、gn、gl、go、ul130；5-74:gb、gn、gl、go、ul131a；5-75:gb、gn、gl、go、ul83；5-76:gb、gn、gl、ul128、ul130；5-77:gb、gn、gl、ul128、ul131a；5-78:gb、gn、gl、ul128、ul83；5-79:gb、gn、gl、ul130、ul131a；5-80:gb、gn、gl、ul130、ul83；5-81:gb、gn、gl、ul131a、ul83；5-82:gb、gn、go、ul128、ul130；5-83:gb、gn、go、ul128、ul131a；5-84:gb、gn、go、ul128、ul83；5-85:gb、gn、go、ul130、ul131a；5-86:gb、gn、go、ul130、ul83；5-87:gb、gn、go、ul131a、ul83；5-88:gb、gn、ul128、ul130、ul131a；5-89:gb、gn、ul128、ul130、ul83；5-90:gb、gn、ul128、ul131a、ul83；5-91:gb、gn、ul130、ul131a、ul83；5-92:gb、gh、gl、go、ul128；5-93:gb、gh、gl、go、ul130；5-94:gb、gh、gl、go、ul131a；5-95:gb、gh、gl、go、ul83；5-96:gb、gh、gl、ul128、ul130；5-97:gb、gh、gl、ul128、ul131a；5-98:gb、gh、gl、ul128、ul83；5-99:gb、gh、gl、ul130、ul131a；5-100:gb、gh、gl、ul130、ul83；5-101:gb、gh、gl、ul131a、ul83；5-102:gb、gh、go、ul128、ul130；5-103:gb、gh、go、ul128、ul131a；5-104:gb、gh、go、ul128、ul83；5-105:gb、gh、go、ul130、ul131a；5-106:gb、gh、go、ul130、ul83；5-107:gb、gh、go、ul131a、ul83；5-108:gb、gh、ul128、ul130、ul131a；5-109:gb、gh、ul128、ul130、ul83；5-110:gb、gh、ul128、ul131a、ul83；5-111:gb、gh、ul130、ul131a、ul83；5-112:gb、gl、go、ul128、ul130；5-113:gb、gl、go、ul128、ul131a；5-114:gb、gl、go、ul128、ul83；5-115:gb、gl、go、ul130、ul131a；5-116:gb、gl、go、ul130、ul83；5-117:gb、gl、go、ul131a、ul83；5-118:gb、gl、ul128、ul130、ul131a；5-119:gb、gl、ul128、ul130、ul83；5-120:gb、gl、ul128、ul131a、ul83；5-121:gb、gl、ul130、ul131a、ul83；5-122:gb、go、ul128、ul130、ul131a；5-123:gb、go、ul128、ul130、ul83；5-124:gb、go、ul128、ul131a、ul83；5-125:gb、go、ul130、ul131a、ul83；5-126:gb、ul128、ul130、ul131a、ul83；5-127:gm、gn、gh、gl、go；5-128:gm、gn、gh、gl、ul128；5-129:gm、gn、gh、gl、ul130；5-130:gm、gn、gh、gl、ul131a；5-131:gm、gn、gh、gl、ul83；5-132:gm、gn、gh、go、ul128；5-133:gm、gn、gh、go、ul130；5-134:gm、gn、gh、go、ul131a；5-135:gm、gn、gh、go、ul83；5-136:gm、gn、gh、ul128、ul130；5-137:gm、gn、gh、ul128、ul131a；5-138:gm、gn、gh、ul128、ul83；5-139:gm、gn、gh、ul130、ul131a；5-140:gm、gn、gh、ul130、ul83；5-141:gm、gn、gh、ul131a、ul83；5-142:gm、gn、gl、go、ul128；5-143:gm、gn、gl、go、ul130；5-144:gm、gn、gl、go、ul131a；5-145:gm、gn、gl、go、ul83；5-146:gm、gn、gl、ul128、ul130；5-147:gm、gn、gl、ul128、ul131a；5-148:gm、gn、gl、ul128、ul83；5-149:gm、gn、gl、ul130、ul131a；5-150:gm、gn、gl、ul130、ul83；5-151:gm、gn、gl、ul131a、ul83；5-152:gm、gn、go、ul128、ul130；5-153:gm、gn、go、ul128、ul131a；5-154:gm、gn、go、ul128、ul83；5-155:gm、gn、go、ul130、ul131a；5-156:gm、gn、go、ul130、ul83；5-157:gm、gn、go、ul131a、ul83；5-158:gm、gn、ul128、ul130、ul131a；5-159:gm、gn、ul128、ul130、ul83；5-160:gm、gn、ul128、ul131a、ul83；5-161:gm、gn、ul130、ul131a、ul83；5-162:gm、gh、gl、go、ul128；5-163:gm、gh、gl、go、ul130；5-164:gm、gh、gl、go、ul131a；5-165:gm、gh、gl、go、ul83；5-166:gm、gh、gl、ul128、ul130；5-167:gm、gh、gl、ul128、ul131a；5-168:gm、gh、gl、ul128、ul83；5-169:gm、gh、gl、ul130、ul131a；5-170:gm、gh、gl、ul130、ul83；5-171:gm、gh、gl、ul131a、ul83；5-172:gm、gh、go、ul128、ul130；5-173:gm、gh、go、ul128、ul131a；5-174:gm、gh、go、ul128、ul83；5-175:gm、gh、go、ul130、ul131a；5-176:gm、gh、go、ul130、ul83；5-177:gm、gh、go、ul131a、ul83；5-178:gm、gh、ul128、ul130、ul131a；5-179:gm、gh、ul128、ul130、ul83；5-180:gm、gh、ul128、ul131a、ul83；5-181:gm、gh、ul130、ul131a、ul83；5-182:gm、gl、go、ul128、ul130；5-183:gm、gl、go、ul128、ul131a；5-184:gm、gl、go、ul128、ul83；5-185:gm、gl、go、ul130、ul131a；5-186:gm、gl、go、ul130、ul83；5-187:gm、gl、go、ul131a、ul83；5-188:gm、gl、ul128、ul130、ul131a；5-189:gm、gl、ul128、ul130、ul83；5-190:gm、gl、ul128、ul131a、ul83；5-191:gm、gl、ul130、ul131a、ul83；5-192:gm、go、ul128、ul130、ul131a；5-193:gm、go、ul128、ul130、ul83；5-194:gm、go、ul128、ul131a、ul83；5-195:gm、go、ul130、ul131a、ul83；5-196:gm、ul128、ul130、ul131a、ul83；5-197:gn、gh、gl、go、ul128；5-198:gn、gh、gl、go、ul130；5-199:gn、gh、gl、go、ul131a；5-200:gn、gh、gl、go、ul83；5-201:gn、gh、gl、ul128、ul130；5-202:gn、gh、gl、ul128、ul131a；5-203:gn、gh、gl、ul128、ul83；5-204:gn、gh、gl、ul130、ul131a；5-205:gn、gh、gl、ul130、ul83；5-206:gn、gh、gl、ul131a、ul83；5-207:gn、gh、go、ul128、ul130；5-208:gn、gh、go、ul128、ul131a；5-209:gn、gh、go、ul128、ul83；5-210:gn、gh、go、ul130、ul131a；5-211:gn、gh、go、ul130、ul83；5-212:gn、gh、go、ul131a、ul83；5-213:gn、gh、ul128、ul130、ul131a；5-214:gn、gh、ul128、ul130、ul83；5-215:gn、gh、ul128、ul131a、ul83；5-216:gn、gh、ul130、ul131a、ul83；5-217:gn、gl、go、ul128、ul130；5-218:gn、gl、go、ul128、ul131a；5-219:gn、gl、go、ul128、ul83；5-220:gn、gl、go、ul130、ul131a；5-221:gn、gl、go、ul130、ul83；5-222:gn、gl、go、ul131a、ul83；5-223:gn、gl、ul128、ul130、ul131a；5-224:gn、gl、ul128、ul130、ul83；5-225:gn、gl、ul128、ul131a、ul83；5-226:gn、gl、ul130、ul131a、ul83；5-227:gn、go、ul128、ul130、ul131a；5-228:gn、go、ul128、ul130、ul83；5-229:gn、go、ul128、ul131a、ul83；5-230:gn、go、ul130、ul131a、ul83；5-231:gn、ul128、ul130、ul131a、ul83；5-232:gh、gl、go、ul128、ul130；5-233:gh、gl、go、ul128、ul131a；5-234:gh、gl、go、ul128、ul83；5-235:gh、gl、go、ul130、ul131a；5-236:gh、gl、go、ul130、ul83；5-237:gh、gl、go、ul131a、ul83；5-238:gh、gl、ul128、ul130、ul131a；5-239:gh、gl、ul128、ul130、ul83；5-240:gh、gl、ul128、ul131a、ul83；5-241:gh、gl、ul130、ul131a、ul83；5-242:gh、go、ul128、ul130、ul131a；5-243:gh、go、ul128、ul130、ul83；5-244:gh、go、ul128、ul131a、ul83；5-245:gh、go、ul130、ul131a、ul83；5-246:gh、ul128、ul130、ul131a、ul83；5-247:gl、go、ul128、ul130、ul131a；5-248:gl、go、ul128、ul130、ul83；5-249:gl、go、ul128、ul131a、ul83；5-250:gl、go、ul130、ul131a、ul83；5-251:gl、ul128、ul130、ul131a、ul83；和5-252:go、ul128、ul130、ul131a、ul83。在一些实施方案中，这些疫苗包含编码gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的一种或多种编码序列，该编码序列具有选自以下的序列：seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。在一些实施方案中，一种或多种编码序列选自seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。在一些实施方案中，在疫苗中一种或多种的编码序列选自seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。

实施例8

在一些实施方案中，施用包含以下四种的编码序列的组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83；或者共同包含以下四种的编码序列的多种组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83。组合物可包含以下四种的编码序列：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83；或者共同包含以下四种的编码序列的组合物的组合：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83。以下组合4-1至4-210可存在于四种抗原疫苗中：4-1:gb、gm、gn、gh；4-2:gb、gm、gn、gl；4-3:gb、gm、gn、go；4-4:gb、gm、gn、u128；4-5:gb、gm、gn、u130；4-6:gb、gm、gn、u131a；4-7:gb、gm、gn、u83；4-8:gb、gm、gh、gl；4-9:gb、gm、gh、go；4-10:gb、gm、gh、u128；4-11:gb、gm、gh、u130；4-12:gb、gm、gh、u131a；4-13:gb、gm、gh、u83；4-14:gb、gm、gl、go；4-15:gb、gm、gl、u128；4-16:gb、gm、gl、u130；4-17:gb、gm、gl、u131a；4-18:gb、gm、gl、u83；4-19:gb、gm、go、u128；4-20:gb、gm、go、u130；4-21:gb、gm、go、u131a；4-22:gb、gm、go、u83；4-23:gb、gm、u128；u130；4-24:gb、gm、u128；u131a；4-25:gb、gm、u128；u83；4-26:gb、gm、u130；u131a；4-27:gb、gm、u130；u83；4-28:gb、gm、u131a；u83；4-29:gb、gn、gh、gl；4-31:gb、gn、gh、go；4-32:gb、gn、gh、u128；4-33:gb、gn、gh、u130；4-34:gb、gn、gh、u131a；4-35:gb、gn、gh、u83；4-36:gb、gn、gl、go；4-37:gb、gn、gl、u128；4-38:gb、gn、gl、u130；4-39:gb、gn、gl、u131a；4-40:gb、gn、gl、u83；4-41:gb、gn、go、u128；4-42:gb、gn、go、u130；4-43:gb、gn、go、u131a；4-44:gb、gn、go、u83；4-45:gb、gn、u128；u130；4-46:gb、gn、u128；u131a；4-47:gb、gn、u128；u83；4-48:gb、gn、u130；u131a；4-49:gb、gn、u130；u83；4-50:gb、gn、u131a；u83；4-51:gb、gh、gl、go；4-52:gb、gh、gl、u128；4-53:gb、gh、gl、u130；4-54:gb、gh、gl、u131a；4-55:gb、gh、gl、u83；4-56:gb、gh、go、u128；4-57:gb、gh、go、u130；4-58:gb、gh、go、u131a；4-59:gb、gh、go、u83；4-60:gb、gh、u128；u130；4-61:gb、gh、u128；u131a；4-62:gb、gh、u128；u83；4-63:gb、gh、u130；u131a；4-64:gb、gh、u130；u83；4-65:gb、gh、u131a；u83；4-66:gb、gl、go、u128；4-67:gb、gl、go、u130；4-68:gb、gl、go、u131a；4-69:gb、gl、go、u83；4-70:gb、gl、u128；u130；4-71:gb、gl、u128；u131a；4-72:gb、gl、u128；u83；4-73:gb、gl、u130；u131a；4-74:gb、gl、u130；u83；4-75:gb、gl、u131a；u83；4-76:gb、go、u128；u130；4-77:gb、go、u128；u131a；4-78:gb、go、u128；u83；4-79:gb、go、u130；u131a；4-80:gb、go、u130；u83；4-81:gb、go、u131a；u83；4-82:gb、u128；u130；u131a；4-83:gb、u128；u130；u83；4-84:gb、u128；u131a；u83；4-85:gb、u130；u131a；u83；4-86:gm、gn、gh、gl；4-87:gm、gn、gh、go；4-88:gm、gn、gh、u128；4-89:gm、gn、gh、u130；4-90:gm、gn、gh、u131a；4-91:gm、gn、gh、u83；4-92:gm、gn、gl、go；4-93:gm、gn、gl、u128；4-94:gm、gn、gl、u130；4-95:gm、gn、gl、u131a；4-96:gm、gn、gl、u83；4-97:gm、gn、go、u128；4-98:gm、gn、go、u130；4-99:gm、gn、go、u131a；4-100:gm、gn、go、u83；4-101:gm、gn、u128；u130；4-102:gm、gn、u128；u131a；4-103:gm、gn、u128；u83；4-104:gm、gn、u130；u131a；4-105:gm、gn、u130；u83；4-106:gm、gn、u131a；u83；4-107:gm、gh、gl、go；4-108:gm、gh、gl、u128；4-109:gm、gh、gl、u130；4-110:gm、gh、gl、u131a；4-111:gm、gh、gl、u83；4-112:gm、gh、go、u128；4-113:gm、gh、go、u130；4-114:gm、gh、go、u131a；4-115:gm、gh、go、u83；4-116:gm、gh、u128；u130；4-117:gm、gh、u128；u131a；4-118:gm、gh、u128；u83；4-119:gm、gh、u130；u131a；4-120:gm、gh、u130；u83；4-121:gm、gh、u131a；u83；4-122:gm、gl、go、u128；4-123:gm、gl、go、u130；4-124:gm、gl、go、u131a；4-125:gm、gl、go、u83；4-126:gm、gl、u128；u130；4-127:gm、gl、u128；u131a；4-128:gm、gl、u128；u83；4-129:gm、gl、u130；u131a；4-130:gm、gl、u130；u83；4-131:gm、gl、u131a；u83；4-132:gm、go、u128；u130；4-133:gm、go、u128；u131a；4-134:gm、go、u128；u83；4-135:gm、go、u130；u131a；4-136:gm、go、u130；u83；4-137:gm、go、u131a；u83；4-138:gm、u128；u130；u131a；4-139:gm、u128；u130；u83；4-140:gm、u128；u131a；u83；4-141:gm、u130；u131a；u83；4-142:gn、gh、gl、go；4-143:gn、gh、gl、u128；4-144:gn、gh、gl、u130；4-145:gn、gh、gl、u131a；4-146:gn、gh、gl、u83；4-147:gn、gh、go、u128；4-148:gn、gh、go、u130；4-149:gn、gh、go、u131a；4-150:gn、gh、go、u83；4-151:gn、gh、u128；u130；4-152:gn、gh、u128；u131a；4-153:gn、gh、u128；u83；4-154:gn、gh、u130；u131a；4-155:gn、gh、u130；u83；4-156:gn、gh、u131a；u83；4-157:gn、gl、go、u128；4-158:gn、gl、go、u130；4-159:gn、gl、go、u131a；4-160:gn、gl、go、u83；4-161:gn、gl、u128；u130；4-162:gn、gl、u128；u131a；4-163:gn、gl、u128；u83；4-164:gn、gl、u130；u131a；4-165:gn、gl、u130；u83；4-166:gn、gl、u131a；u83；4-167:gn、go、u128；u130；4-168:gn、go、u128；u131a；4-169:gn、go、u128；u83；4-170:gn、go、u130；u131a；4-171:gn、go、u130；u83；4-172:gn、go、u131a；u83；4-173:gn、u128；u130；u131a；4-174:gn、u128；u130；u83；4-175:gn、u128；u131a；u83；4-176:gn、u130；u131a；u83；4-177:gh、gl、go、u128；4-178:gh、gl、go、u130；4-179:gh、gl、go、u131a；4-180:gh、gl、go、u83；4-181:gh、gl、u128；u130；4-182:gh、gl、u128；u131a；4-183:gh、gl、u128；u83；4-184:gh、gl、u130；u131a；4-185:gh、gl、u130；u83；4-186:gh、gl、u131a；u83；4-187:gh、go、u128；u130；4-188:gh、go、u128；u131a；4-189:gh、go、u128；u83；4-190:gh、go、u130；u131a；4-191:gh、go、u130；u83；4-192:gh、go、u131a；u83；4-193:gh、u128；u130；u131a；4-194:gh、u128；u130；u83；4-195:gh、u128；u131a；u83；4-196:gh、u130；u131a；u83；4-197:gl、go、u128；u130；4-198:gl、go、u128；u131a；4-199:gl、go、u128；u83；4-200:gl、go、u130；u131a；4-201:gl、go、u130；u83；4-202:gl、go、u131a；u83；4-202:gl、u128；u130；u131a；4-203:gl、u128；u130；u83；4-204:gl、u128；u131a；u83；4-205:gl、u130；u131a；u83；4-206:go、u128；u130；u131a；4-207:go、u128；u130；u83；4-208:go、u128；u131a；u83；4-209:go、u130；u131a；u83；和4-210:u128；u130；u131a；u83。在一些实施方案中，这些疫苗包含编码gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的的一种或多种编码序列，该编码序列具有选自以下的序列：seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。在一些实施方案中，一种或多种编码序列选自seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。在一些实施方案中，在疫苗中一种或多种的编码序列选自seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。

实施例9

在一些实施方案中，施用包含以下三种的编码序列的组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83；或者共同包含以下三种的编码序列的多种组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83。包含以下三种的编码序列的组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83；或者共同包含以下三种的编码序列的组合物的组合：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83称为“三种抗原疫苗”。以下组合3-1至3-120可存在于三种抗原疫苗中：3-1:gb、gm、gn；3-2:gb、gm、gh；3-3:gb、gm、gl；3-4:gb、gm、go；3-5:gb、gm、ul128；3-6:gb、gm、ul130；3-7:gb、gm、ul131a；3-8:gb、gm、ul83；3-9:gb、gn、gh；3-10:gb、gn、gl；3-11:gb、gn、go；3-12:gb、gn、ul128；3-13:gb、gn、ul130；3-14:gb、gn、ul131a；3-15:gb、gn、ul83；3-16:gb、gh、gl；3-17:gb、gh、go；3-18:gb、gh、ul128；3-19:gb、gh、ul130；3-20:gb、gh、ul131a；3-21:gb、gh、ul83；3-22:gb、gl、go；3-23:gb、gl、ul128；3-24:gb、gl、ul130；3-25:gb、gl、ul131a；3-26:gb、gl、ul83；3-27:gb、go、ul128；3-28:gb、go、ul130；3-29:gb、go、ul131a；3-30:gb、go、ul83；3-31:gb、ul128、ul130；3-32:gb、ul128、ul131a；3-33:gb、ul128、ul83；3-34:gb、ul130、ul131a；3-35:gb、ul130、ul83；3-36:gb、ul131a、ul83；3-37:gm、gn、gh；3-38:gm、gn、gl；3-39:gm、gn、go；3-40:gm、gn、ul128；3-41:gm、gn、ul130；3-42:gm、gn、ul131a；3-43:gm、gn、ul83；3-44:gm、gh、gl；3-45:gm、gh、go；3-46:gm、gh、ul128；3-47:gm、gh、ul130；3-48:gm、gh、ul131a；3-49:gm、gh、ul83；3-50:gm、gl、go；3-51:gm、gl、ul128；3-52:gm、gl、ul130；3-53:gm、gl、ul131a；3-54:gm、gl、ul83；3-55:gm、go、ul128；3-56:gm、go、ul130；3-57:gm、go、ul131a；3-58:gm、go、ul83；3-59:gm、ul128、ul130；3-60:gm、ul128、ul131a；3-61:gm、ul128、ul83；3-62:gm、ul130、ul131a；3-63:gm、ul130、ul83；3-64:gm、ul131a、ul83；3-65:gn、gh、gl；3-66:gn、gh、go；3-67:gn、gh、ul128；3-68:gn、gh、ul130；3-69:gn、gh、ul131a；3-70:gn、gh、ul83；3-71:gn、gl、go；3-72:gn、gl、ul128；3-73:gn、gl、ul130；3-74:gn、gl、ul131a；3-75:gn、gl、ul83；3-76:gn、go、ul128；3-77:gn、go、ul130；3-78:gn、go、ul131a；3-79:gn、go、ul83；3-80:gn、ul128、ul130；3-81:gn、ul128、ul131a；3-82:gn、ul128、ul83；3-83:gn、ul130、ul131a；3-84:gn、ul130、ul83；3-85:gn、ul131a、ul83；3-86:gh、gl、go；3-87:gh、gl、ul128；3-88:gh、gl、ul130；3-89:gh、gl、ul131a；3-90:gh、gl、ul83；3-91:gh、go、ul128；3-92:gh、go、ul130；3-93:gh、go、ul131a；3-94:gh、go、ul83；3-95:gh、ul128、ul130；3-96:gh、ul128、ul131a；3-97:gh、ul128、ul83；3-98:gh、ul130、ul131a；3-99:gh、ul130、ul83；3-100:gh、ul131a、ul83；3-101:gl、go、ul128；3-102:gl、go、ul130；3-103:gl、go、ul131a；3-104:gl、go、ul83；3-105:gl、ul128、ul130；3-106:gl、ul128、ul131a；3-107:gl、ul128、ul83；3-108:gl、ul130、ul131a；3-109:gl、ul130、ul83；3-110:gl、ul131a、ul83；3-111:go、ul128、ul130；3-112:go、ul128、ul131a；3-113:go、ul128、ul83；3-114:go、ul130、ul131a；3-115:go、ul130、ul83；3-116:go、ul131a、ul83；3-117:ul128、ul130、ul131a；3-118:ul128、ul130、ul83；3-119:ul128、ul131a、ul83；和3-120:ul130、ul131a、ul83。在一些实施方案中，这些疫苗包含编码gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的一种或多种编码序列，该编码序列选自：seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。在一些实施方案中，一种或多种编码序列选自seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。在一些实施方案中，在疫苗中一种或多种的编码序列选自seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。

实施例10

在一些实施方案中，施用包含以下两种的编码序列的组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83；或者共同包含以下两种的编码序列的多种组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83。组合物可包含以下两种的编码序列：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83；或者共同包含以下两种的编码序列的组合物的组合：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a、u83。存在由以下组成的hcmv抗原的集合中具有2个抗原的45个子集(2-1至2-45)。以下组合2-1至2-45可存在于两种抗原疫苗：2-1gb、gm、2-2gb、gn、2-3gb、gh、2-4gb、gl、2-5gb、go、2-6gb、ul128、2-7gb、ul130、2-8gb、ul131a、2-9gb、ul83、2-10gm、gn、2-11gm、gh、2-12gm、gl、2-13gm、go、2-14gm、ul128、2-15gm、ul130、2-16gm、ul131a、2-17gm、ul83、2-18gn、gh、2-19gn、gl、2-20gn、go、2-21gn、ul128、2-22gn、ul130、2-23gn、ul131a、2-24gn、ul832-25gh、gl、2-26gh、go、2-27gh、ul128、2-28gh、ul130、2-29gh、ul131a、2-30gh、ul832-31gl、go、2-32gl、ul128、2-33gl、ul130、2-34gl、ul131a、2-35gl、ul832-36go、ul128、2-37go、ul130、2-38go、ul131a、2-39go、ul832-40ul128、ul130、2-41ul128、ul131a、2-42ul128、ul832-43ul130、ul131a、2-44ul130、ul83和2-45ul131a、ul83。在一些实施方案中，这些疫苗包含编码gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的一种或多种编码序列，该编码序列具有选自以下的序列：seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。在一些实施方案中，一种或多种编码序列选自seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。在一些实施方案中，在疫苗中一种或多种的编码序列选自seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。

实施例11

在一些实施方案中，施用包含以下一种的编码序列的组合物：gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a和ul83。以下组合1-1至1-10可存在于以下一种抗原疫苗中：1-1gb、1-2gm、1-3gn、1-4gh、1-5gl、1-6go、1-7ul128、1-8ul130、1-9ul131a和1-10u83。在一些实施方案中，这些疫苗包含编码gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的一种编码序列，该编码序列选自seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。在一些实施方案中，编码序列选自：seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。在一些实施方案中，在疫苗中编码序列选自seqidno:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57和59。

实施例12

在一些实施方案中，疫苗包含编码序列，该编码序列编码选自gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种或十种抗原的编码序列。在一些实施方案中，疫苗包含编码序列，该编码序列编码选自gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种或十种抗原的编码序列，其中一种或多种所述序列选自seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。在一些实施方案中，疫苗包含编码序列，该编码序列编码选自gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种或十种抗原的编码序列，其中两种或更多种所述序列选自seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。在一些实施方案中，疫苗包含编码序列，该编码序列编码选自gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种或十种抗原的编码序列，其中三种或更多种所述序列选自seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。在一些实施方案中，疫苗包含编码序列，该编码序列编码选自gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种或十种抗原的编码序列，其中四种或更多种所述序列选自seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。在一些实施方案中，疫苗包含编码序列，该编码序列编码选自gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种或十种抗原的编码序列，其中五种或更多种所述序列选自seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。在一些实施方案中，疫苗包含编码序列，该编码序列编码选自gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种或十种抗原的编码序列，其中六种或更多种所述序列选自seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。在一些实施方案中，疫苗包含编码序列，该编码序列编码选自gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种或十种抗原的编码序列，其中七种或更多种所述序列选自seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。在一些实施方案中，疫苗包含编码序列，该编码序列编码选自gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种或十种抗原的编码序列，其中八种或更多种所述序列选自seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。在一些实施方案中，疫苗包含编码序列，该编码序列编码选自gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种或十种抗原的编码序列，其中九种或更多种所述序列选自seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。在一些实施方案中，疫苗包含编码序列，该编码序列编码选自gb、gm、gn、gh、gl、go、ul128、ul130、ul131a的每一种的一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种或十种抗原的编码序列，其中十种或更多种所述序列选自seqidno:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58和60。

实施例13:

hcmv抗原表达

在构建之后，通过免疫印迹法来证实蛋白表达。使用各质粒或空pvax载体(阴性对照)来转染293t细胞，以及在48h之后收获样品，并通过蛋白质免疫印迹法(照片未显示)来分析。使用抗-ha标签ab(数据未显示)和np-特异性多克隆血清(数据未显示)在phcmv-np-转染的293t细胞的细胞裂解物中检测～66kda蛋白的存在，但对照pvax空载体转染的裂解物对ag表达为阴性。通过bradford蛋白测定法将样品的总蛋白归一化，并且样品含有等量的球状微管蛋白。而且，经phcmv-np-转染的293t细胞对来自hcmv免疫和phcmv-np免疫的小鼠(n＝5)、但不是来自经pvax免疫的(n＝5)动物(数据未显示)的血清有反应；如与8.1％的来自hcmv免疫动物和0.7％的来自pvax-转染的小鼠相比较，与经phcmv-np免疫五次的小鼠混合的高免血清平均与16.6％的phcmv-np-转染的细胞反应(数据未显示)。当阳性血清未与pvax-转染的293t细胞反应时，未检测到非特异性结合。而且，蛋白质免疫印迹法证实三种融合蛋白的宿主细胞蛋白水解裂解，这三种融合蛋白通过弗林蛋白酶裂解位点分隔至独立的agsgm、gn、gh、gl、ul128、ul130和ul131a内。

蛋白质印迹分析

通过蛋白质免疫印迹法来证实质粒dna编码的疫苗蛋白的表达。使用fugene转染方法(罗氏公司(roche)，印第安纳波利斯(indianapolis)，印地安那州)来转染293t细胞(1×10⁶细胞)。在四十八小时转染后，使用细胞裂解缓冲剂来分离蛋白，在sds-page(12％)上分馏，以及使用iblotdryblottingsystem(英杰公司，加利福尼亚州，美国)来转染硝化纤维素。使用具有特异性小鼠抗血清(由使用各自质粒dna构建体免疫4-6次的小鼠单独组混合)的snapi.d.蛋白质检测系统(snapi.d.proteindetectionsystem)(密理博(millipore)，马萨诸塞州，美国)来进行免疫检测以及使用ecl检测体系(阿姆森医药生物技术有限公司(amershampharmaciabiotech)，皮斯卡塔韦，新泽西州)由辣根过氧化物酶缀合的山羊抗小鼠igg来视觉化表达的蛋白。

而且，使用质粒dna构建体的每一种的293t细胞的转染足够体外产生共有免疫原，该共有免疫原对由小鼠的重复免疫生成的ab特异性反应。

表位作图

使用来自接种质粒1和一系列hcmv-gb的重叠肽的动物的脾细胞得到数据以确定hcmv-gb的优势免疫表位。elispot数据显示在图10中。

使用来自接种质粒3和一系列hcmv-gh和hcmv-gl的重叠肽的动物的脾细胞得到数据以确定hcmv-gh和hcmv-gl的优势免疫表位。elispot数据显示在图11中。

使用来自接种质粒2和一系列hcmv-gm和hcmv-gn的重叠肽的动物的脾细胞得到数据以确定hcmv-gm和hcmv-gn的优势免疫表位。使用来自接种质粒4和一系列hcmv-go的重叠肽的动物的脾细胞得到数据以确定hcmv-go的优势免疫表位。elispot数据显示在图12中。

使用来自接种质粒5和一系列hcmv-ul131a、hcmv-ul130和hcmv-ul128的重叠肽接种的动物的脾细胞得到数据以确定hcmv-ul131a、hcmv-ul130和hcmv-ul128的优势免疫表位。使用来自接种质粒6和一系列hcmv-ul83的重叠肽的动物的脾细胞得到数据以确定hcmv-ul83的优势免疫表位。elispot数据显示在图13中。

表位分析也参见图18a。

实施例14：

hcmv质粒免疫和小鼠

6-8周龄的成年雌鼠c57bl/6(h-2^b)购自杰克逊实验室(jacksonlaboratory)(巴尔港(barharbor)，缅因州)以及依照动物照顾和使用委员会组织(institutionalanimalcareandusecommittee)批准的方案在宾夕法尼亚大学药物研究动物设施处喂养。使用规定剂量的质粒dna通过i.m.注射至胫骨前肌内来免疫小鼠，随后使用如前所述的自适应恒定电流ep微创装置(mid)(因诺维制药公司，布卢贝尔，宾夕法尼亚州)进行体内电穿孔(ep)[khan,2005#727；shedlock,2011#1097]。总共四种0.1amp恒定电流方形波脉冲通过由26-规固体不锈钢电极组成的三角形3-电极阵列作为两组的两次脉冲递送。各脉冲长度为52毫秒，在脉冲组之间三秒的单独的脉冲之间具有1秒延迟。

比较在小鼠的dna接种中hcmvnp蛋白的天然、来源于病毒的dna序列(“天然”或非优化)与优化宿主种类的免疫原性的基因(图16a)。使用35μg的亚克隆至修饰的哺乳动物dna表达载体内以及使用ep递送的“天然”或“优化”基因免疫小鼠(n＝10)两次，以及评估8天后的t细胞免疫。在使用“优化”构建体免疫的小鼠中np-特异性t细胞多2倍(p＝0.0001)，这表明种属特异性基因优化可增强dna疫苗诱导的t细胞免疫。

也评估引发t和b细胞免疫的体内ep递送的作用。类似于以上向小鼠(n＝5-10/组)施用hcmvnpdna疫苗的“优化”形式，但使用或不使用ep递送，以及使用致死性攻击来评估保护功效(图16b)。尽管与对照载体相比时两种疫苗都引发保护性功效，但与没有时仅60％保护相比，在dna接种时ep递送完全受保护。这些数据显示通过ep递送以生成介导针对致死性攻击的保护作用的t细胞的重要作用。对于生成b细胞的ep作用的评估，免疫动物(n＝5/组)几次以及比较在每次使用野生型hcmv注射之后7天产生的ab(图16c)。尽管仅在总计4次免疫之后单独使用dna免疫的动物产生np-特异性ab，在第二次施用之后使用具有ab的ep来递送接受的疫苗。而且，在ep免疫的小鼠的ab应答超过野生型hcmv感染之后的小鼠中的那些，这表明ep递送是增强dna疫苗诱导的免疫的强效技术。

dna接种诱导强大t和b细胞免疫

dna疫苗数据的概况显示在图15中。这些数据显示，观察到通过本文所例证的疫苗诱导的高度有效的免疫应答。hcmv-ghgl数据显示作为具有极好效能的良好疫苗靶的构建体，这提供高中和滴度和ctl表位。这些构建体可作为dna疫苗递送或者用作其他疫苗平台的组分。类似地，hcmv:ul131a、ul130和ul138复合免疫原具有ctl活性以及中和活性，这支持它作为新型疫苗靶的重要性。数据也显示，建立用于疫苗生成的设计的hcv-gmgn，建立用于保护的hcmv-go，并且提供作为可变例子的多种抗原途径的重要性。

对于质粒dna免疫原性的评估，分别使用45μg的各自的质粒疫苗来免疫小鼠(n＝4-6/组)，间隔两周注射以及随后立即注射ep。在第二次免疫之后7-8天处死小鼠，以及进行elispot和facs以评估t细胞免疫。使用新型ghgl疫苗的免疫导致最高水平的t细胞免疫(每一百万脾细胞的～>10,000ifnγ-产生的细胞)，随后为pul(～8,000细胞)。而且，评估各疫苗的表位应答幅度，并且显示联合优化策略的dna接种产生细胞表位的多样性。而且，这些数据显示，在联合体内ep免疫之后，所有六种hcmvdna疫苗构建体在小鼠中均为免疫原性，并且产生可检测的免疫原特异性t细胞应答；并且t细胞免疫原性为以下顺序：ghgl>pul>ul83>gb>gmgn>go(参见图18b-d)。

在每五至六次免疫(间隔两周)之后7-10天，收集和混合各组小鼠的血清样品(n＝5)，然后在最后一次免疫之后至多1个月混合。而且，在每次最后免疫之后(考虑与长期ab应答临床相关的时间点)收集6个月的血清以及使用ad169-egfp病毒感染至寿命延长的人包皮成纤维细胞内的中和测试混合的效应血清的效能。数据证实经gb免疫的动物的中和效能，其支持之前的数据，它表明诱发nab和在一些攻击模型中保护的能力。参见图19a-b。然而，使用新型ghgldna疫苗的免疫产生nab应答，它比gb免疫～2-4倍。令人感兴趣地，通过任何其他免疫原(包括gmgn、go、ul128-131a或ul83)均不能达到这些中和能力水平。然而，对于ul128-131a质粒，这并不是完全预期不到的，因为已知在131a蛋白中ad169载体含有相当大的突变/缺失。最后，与在最后一次免疫之后6个月收集的效应物和记忆血清相比较，各免疫原的中和水平相对稳定。因此，这些数据证实，dna接种以及ep产生强大b细胞应答。总之，本文数据显示在小鼠中dna质粒为免疫原性以及产生强大t和b细胞应答。

已经证实，单独的hcmvgb免疫完全保护豚鼠，但在临床上具有有限的效能。因此，我们接着设计测定连同gbdna疫苗它们的组合是否可增强hcmv特异性免疫。给予小鼠(n＝5/组)多次剂量的单独的gb、gb+ghgl或gb+ghgl+pul质粒，并且评估t和b细胞免疫。实际上，这些质粒的三价配制物诱导最高水平的t和b细胞应答。因此，这些数据证实，通过使用多价质粒dna配制物可增加疫苗诱导的cmv特异性免疫。

与gh/gl的血清反应性与病毒中和相关

图19显示中和数据的图：a)hcmv：gb、gmgn、ghgl、go、ul和ul83的50％中和水平；以及b)单独的cmv、血清阳性的血清和经hcmv-ghgl免疫的血清的50％中和水平。

脾细胞分离和elispot测定法

在使用质粒dna最后免疫之后8天处死小鼠，并收获脾脏和放置在补充有10％fbs、1xanti-anti(英杰公司)和1xβ-me(英杰公司)的rpmi1640培养基(联发科公司(mediatechinc.)，马纳萨斯，弗吉尼亚州)中。使用stomacher机器(苏厄德实验室系统有限公司(sewardlaboratorysystemsinc.)，波希米亚，纽约)通过脾脏的机械破裂来分离脾细胞，并且使用40μm细胞过滤器(bdfalcon公司)来过滤所得产物。使用rbc的裂解用的ack裂解缓冲剂(龙沙(lonza)，瑞士)处理细胞5min，然后在pbs中洗涤脾细胞，并且重新混悬在完全rpmt培养基中。

进行ifnγelispot测定。简而言之，使用抗小鼠ifn-γ捕获抗体来涂覆elispot96-孔板(密理博，比勒利卡，马萨诸塞州)，并在4℃下孵育24h(r&d系统，明尼阿波里斯市，明尼苏达州)。第二天，使用pbs洗涤板，然后使用封闭缓冲液(在pbs中1％bsa和5％蔗糖)来封闭。将来自各动物的每孔中一至两千脾细胞一式三份放置在37℃下的5％co2中以及在rpmi1640(阴性对照)、伴刀豆球蛋白a(cona；阳性对照)、或者如指定的具有单独(与全部疫苗蛋白重叠的单独的肽用于规定的单肽分析(spa))或者混合的15-mer肽(金斯瑞公司)的存在下过夜。在约18-20h的刺激之后，在pbs中洗涤细胞以及在4℃下与生物素化的抗小鼠ifn-γmab(r&d系统，明尼阿波里斯市，明尼苏达州)孵育24h。在pbs中洗涤板，以及将链霉亲和素-碱性磷酸酶(mabtech公司，瑞典)加入各孔，并在室温下孵育2h。在pbs中再次洗涤板，将bcip/nbtplus底物(mabtech公司)加入各孔15-30min，然后使用蒸馏水漂洗板，并在室温下干燥。使用自动elispot读板仪(美国细胞科技责任有限公司(cellulartechnologyltd.)，榭柯高地(shakerheights)，俄亥俄州)来计数斑点。

而且，使用单独的肽(重叠11个氨基酸的15-mer以及分隔它们各自dna疫苗编码的ag的全部长度)来刺激来自免疫的小鼠的脾细胞，也可评估表位应答的幅度，并且数据展示在图10-13和图18a中。为了更好地视觉化用于识别含有表位的肽的阳性t-细胞应答，将各动物的elispot数据描绘为柱形图以及表示为每组ifnγ+应答的总和。仅当它们平均刺激具有80％或更高应答率的至少10个点时，才考虑包含表位的肽仅为阳性。

观察到使用任意六种hcmvdna质粒疫苗的免疫能刺激可测定t-细胞表位的多样性；hcmv-gb诱导x表位、hcmv-gmgn-x、hcmv-ghgl-x、hcmv-go-c、hcmv-pul-x和hcmv-ul83-x。此外，在所有小鼠(在h-2^b小鼠中#5:gp25-39和在h-2^d小鼠中#27:gp151-171)和pebos(在h-2^b小鼠中#4:gp19-33和在h-2^d小鼠中#41:gp241-255)中观察到优势免疫表位，而peboz仅在h-2^d小鼠(#24:139-153、#30:175-189和#66:391-405)中刺激它们。参见图10-13和图18a。而且，包含表位的肽的数据进一步在于表1中表征，其中展示预定的表位序列，并且通过流式细胞术来证实和计算t细胞应答。记录总dna疫苗诱导的ifnγ+应答，并且其为阳性识别表位的平均应答总和-参见表1(见下)。

表1

通过ifnγelispot识别的含有^a表位的肽(≥10个斑点以及≥80％应答率)

通过facs来证实通过elipsot识别的所有肽(获得≥3-5×10⁴cd3+细胞)

各含有表位的肽的对应t细胞的特征在于facs：

通过cd3+/cd44+/ifnγ+细胞的cd4和/或cd8的表达

下划线表示预测的cd8+表位(通过iedb的最优共有序列％排列)

如通过elispot(*)证实的具有共同和/或部分表位的相邻肽

没有描述本文所记载的h-2b表位(iedb70％blast)

关于hcmv抗原的片段，优选片段具有以下各hcmv抗原的以下结构域：

hcmv-gb：氨基酸区25-39(肽#5)；氨基酸区151-165(肽#26)；氨基酸区151-165(肽#26)；氨基酸区361-375(肽#5＝61)；氨基酸区439-453(肽#74)；和/或氨基酸区475-489(肽#80)；

hcmv-gh：氨基酸区61-75(肽#11)；氨基酸区85-99(肽#15)；氨基酸区91-105(肽#15)；氨基酸区175-189(肽#30)；氨基酸区661-675(肽#111)；

hcmv-gl：氨基酸区85-99(肽#15)；

hcmv-ul83：氨基酸区109-123(肽#19)；氨基酸区253-267(肽#43)；

hcmv-ul128：氨基酸区91-105(肽#16)；氨基酸区97-111(肽#17)；氨基酸区103-117(肽#18)；氨基酸区121-135(肽#21)；氨基酸区127-141(肽#22)；氨基酸区163-171(肽#28)；

hcmv-ul130：氨基酸区13-27(肽#3)；氨基酸区43-57(肽#8)；

hcmv-ul131a：氨基酸区61-75(肽#11)；

hcmv-gm：氨基酸区175-189(肽#30)；氨基酸区295-309(肽#50)；

hcmv-gn：氨基酸区1-15(肽#1)；以及

hcmv-go：氨基酸区331-345(肽#56)；氨基酸区337-351(肽#57)。

elisa

为了确定针对hcmvgb、gh或gl的血清ab滴度，在4℃下使用重组蛋白(金斯瑞公司)在规定量或在pbs中稀释的bsa(对照)下涂覆nunc-immunomaxisorp板(nunc公司，罗彻斯特，纽约)过夜。第二天，使用pbs、0.05％吐温20(pbs-t)洗涤板，使用10％bsa/pbs-t封闭1h，并在4℃下使用来自人患者或经免疫动物的血清的连续稀释物孵育过夜。然后将板洗涤六次，并使用均在1:5,000稀释下的山羊抗人igg(南部生物技术公司(southernbiotech))或山羊抗小鼠igg(圣克鲁兹(santacruz)，圣克鲁兹，加利福尼亚州)来检测结合的igg。通过sigmafast^tmo-苯二胺二盐酸盐(opd；阿德里奇化学(sigma-aldrich))来检测结合的酶，并在biotek(威努斯基(winooski)，佛蒙特州)el312e读板仪上测定在450nm下光学密度。往返终点滴度表示为通过使用在graphpadprism(graphpad软件有限公司，拉荷亚，加利福尼亚州)中具有可变斜率的s形剂量相关模型的曲线拟合来计算的10％的最大od。

中和测定法

在每次五至六次免疫(每次间隔两周)之后7-10天收集各组小鼠(n＝5)血清样品以及混合，然后在最后一次免疫之后至多1个月将它们混合。而且，在各最后一次免疫之后收集6个月的血清(考虑长期ab应答临床相关的时间点)以及一起测定用于中和相关感染的能力的混合效应血清。数据证实经gb免疫动物的中和能力，这支持之前的数据，并表明在一些攻击模型中引起nab和保护的能力。然而，使用新型ghgldna疫苗的免疫产生nab应答，它比gb免疫～2-4倍。使用来自经hcmv蛋白和寿命延长的hff(人包皮成纤维细胞)细胞免疫小鼠的小鼠血清来测定中和抗体滴度。数据表示为具有95％ci.的3个数值的几何均值。数据显示在图14中。

令人感兴趣地，通过任何其他免疫原(包括gmgn、go、ul128-131a或ul83)均不能达到这些中和能力水平。最后，与在最后一次免疫之后6个月收集的效应和记忆血清相比较，各免疫原的中和水平相对稳定。因此，这些数据证实，dna接种以及ep产生强大b细胞应答。总之，本文数据显示在小鼠中dna质粒为免疫原性以及产生强大t和b细胞应答。

已经证实，单独的hcmvgb免疫完全保护豚鼠，但在临床上具有有限的效能。因此，我们接着设计测定连同gbdna疫苗它们的组合是否可增强hcmv特异性免疫。给予小鼠(n＝5/组)多次剂量的单独的gb、gb+ghgl或gb+ghgl+pul质粒，并且评估t和b细胞免疫。实际上，这些质粒的三价配制物诱导最高水平的t和b细胞应答。因此，这些数据证实，通过使用多价质粒dna配制物可增加疫苗诱导的cmv特异性免疫。

实施例15:

a)hsv1抗原和在293t细胞中的表达

使用以上实施例1、以及与hcmv相关的以上例子中所提供的相同的策略，选择hsv1抗原以及制备核酸构建体。根据前述选择的hsv1抗原为：gb、gh、gl、gc和gd。而且，制备如本文讨论的组合，其包括hsv1-ghgl和hsv1-gcgd。

据发现，hsv1gb、gc和gd表达在经转染的细胞的表面上，其显示通过细胞有效的翻译、易位、呈递；而且，发现共表达组合的抗原gcgd(数据未显示)。通过与在使用抗原免疫的动物的血清中的前述抗原(1:200稀释)结合的mhc类型i来证实这点，而没有抗原与来自对照(仅载体)的血清结合。

据发现，使用以上相同质粒的免疫体内诱导强效的抗体(数据未显示)。

b)在293t细胞中的hsv2抗原表达

使用以上实施例1、以及与hcmv相关的以上例子中所提供的相同的策略，选择hsv2抗原以及制备核酸构建体。根据前述选择的hsv2抗原为：gb、gh、gl、gc和gd。而且，制备如本文讨论的组合，其包括hsv2-ghgl和hsv2-gcgd。

据发现，hsv2gb、gc、gd、gh和gl表达在经转染的细胞的表面上，其显示通过细胞有效的翻译、易位、呈递；而且，发现共表达组合的抗原gcgd和ghgl(数据未显示)。通过与在使用抗原免疫的动物的血清中的前述抗原(1:200稀释)结合的mhc类型i来证实这点，而没有抗原与来自对照(仅载体)的血清结合。

c)在293t细胞中的cehv1抗原表达

使用以上实施例1、以及与hcmv相关的以上例子中所提供的相同的策略，选择cehv1抗原和制备核酸构建体。根据前述选择的cehv1抗原为：gb、gh、gl、gc和gd。而且，制备如本文讨论的组合，其包括cehv1-ghgl和cehv1-gcgd。

据发现，cehv1gb、gc和gd表达在经转染的细胞的表面上，其显示通过细胞有效的翻译、易位、呈递；而且，发现共表达组合的抗原gcgd(数据未显示)。通过与在使用抗原免疫的动物的血清中的前述抗原(1:200稀释)结合的mhc类型i来证实这点，而没有抗原与来自对照(仅载体)的血清结合。

据发现，使用以上相同质粒的免疫体内诱导强效的抗体(数据未显示)。

d)在293t细胞中的vzv抗原表达

使用以上实施例1、以及与hcmv相关的以上例子中所提供的相同的策略，选择vzv抗原和制备核酸构建体。根据前述选择的vzv抗原为：gb、gh、gl、gc、gk、gm、gn、ge和gi。而且，制备如本文讨论的组合，其包括vzv–ghgl、vzv-gm、gn和vzv-gegi。

如上分析表达在经转染的细胞表面上的vzvgb、gh、gl、gc、gk、gm、gn、ge和gi，其包括组合的抗原ghgl、gm、gn和gegi。通过与在使用抗原免疫的动物的血清中的前述抗原(1:200稀释)结合的mhc类型i来证实这点，而没有抗原与来自对照(仅载体)的血清结合。

据发现，使用以上相同质粒的免疫可能体内诱导强效的抗体(数据未显示)。

实施例16：中和抗体数据

单独使用任一质粒的免疫表现出使用vero细胞的中和活性：对于hsv1，其为hsv1-gb或hsv1-gcgd；以及对于hsv2，其为hsv2-gb或hsv2-gcgd。hsv1质粒中和hsv1临床病毒hsv-1菌株ns，以及hsv2质粒中和hsv2临床病毒hsv2菌株ms。参见图20a和20b。多种具有多效价的疱疹病毒家族特异性质粒的组合可能进一步增加这些疱疹病毒的中和水平。

实施例17hsv1

在2、3、4和5的组合中所列出的五种hsv1抗原的置换可包括以下。两种抗原：hsv1-gb、hsv1-gh；hsv1-gb、hsv1-gl；hsv1-gb、hsv1-gc；hsv1-gb、hsv1-gd；hsv1-gh、hsv1-gl；hsv1-gh、hsv1-gc；hsv1-gh、hsv1-gd；hsv1-gl、hsv1-gc；和hsv1-gl、hsv1-gd。三种抗原：hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gl；hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gc；hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gd；hsv1-gb、hsv1-gl、hsv1-gc；hsv1-gb、hsv1-gl、hsv1-gd；hsv1-gb、hsv1-gc、hsv1-gd；hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gc；hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gd；和hsv1-gl、hsv1-gc、hsv1-gd。四种抗原：hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gc；hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gd；hsv1-gb、hsv1-gl、hsv1-gc、hsv1-gd；hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gc、hsv1-gd；和hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gc、hsv1-gd。五种抗原：hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gc、hsv1-gd。

置换可存在于多种质粒上。在一种质粒上的两种抗原的例子包括：hsv1-gb、hsv1-gh；hsv1-gb、hsv1-gl；hsv1-gb、hsv1-gc；hsv1-gb、hsv1-gd；hsv1-gh、hsv1-gl；hsv1-gh、hsv1-gc；hsv1-gh、hsv1-gd；hsv1-gl、hsv1-gc、hsv1-gl、hsv1-gd。在两种质粒上的两种抗原的例子包括：hsv1-gb、和hsv1-gh；hsv1-gb、和hsv1-gl；hsv1-gb、和hsv1-gc；hsv1-gb、和hsv1-gd；hsv1-gh、和hsv1-gl；hsv1-gh、和hsv1-gc；hsv1-gh、和hsv1-gd；hsv1-gl、和hsv1-gc；和hsv1-gl、和hsv1-gd。在一种质粒上的三种抗原的例子包括：hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gl；hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gc；hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gd；hsv1-gb、hsv1-gl、hsv1-gc；hsv1-gb、hsv1-gl、hsv1-gd；hsv1-gb、hsv1-gc、hsv1-gd；hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gc；hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gd；hsv1-gl、hsv1-gc、hsv1-gd。在两种质粒上的三种抗原的例子包括：hsv1-gb、hsv1-gh、和hsv1-gl；hsv1-gb、hsv1-gh、和hsv1-gc；hsv1-gb、hsv1-gh、和hsv1-gd；hsv1-gb、hsv1-gl、和hsv1-gc；hsv1-gb、hsv1-gl、和hsv1-gd；hsv1-gb、hsv1-gc、和hsv1-gd；hsv1-gh、hsv1-gl、和hsv1-gc；hsv1-gh、hsv1-gl、和hsv1-gd；hsv1-gl、hsv1-gc、和hsv1-gd；hsv1-gb、hsv1-gl、和hsv1-gh；hsv1-gb、hsv1-gc、和hsv1-gh；hsv1-gb、hsv1-gd、和hsv1-gh；hsv1-gb、hsv1-gc、和hsv1-gl；hsv1-gb、hsv1-gd、和hsv1-gl；hsv1-gb、hsv1-gd、和hsv1-gc；hsv1-gh、hsv1-gc、和hsv1-gl；hsv1-gh、hsv1-gd、和hsv1-gl；hsv1-gl、hsv1-gd、和hsv1-gc；hsv1-gh、hsv1-gl、和hsv1-gb；hsv1-gh、hsv1-gc、和hsv1-gb；hsv1-gh、hsv1-gd、和hsv1-gb；hsv1-gl、hsv1-gc、和hsv1-gb；hsv1-gl、hsv1-gd、和hsv1-gb；hsv1-gc、hsv1-gd、和hsv1-gb；hsv1-gl、hsv1-gc、和hsv1-gh；hsv1-gl、hsv1-gd、和hsv1-gh；hsv1-gc、hsv1-gd、和hsv1-gl。在三种质粒上的三种抗原的例子包括：hsv1-gb、和hsv1-gh、和hsv1-gl；hsv1-gb、和hsv1-gh、和hsv1-gc；hsv1-gb、和hsv1-gh、和hsv1-gd；hsv1-gb、和hsv1-gl、和hsv1-gc；hsv1-gb、和hsv1-gl、和hsv1-gd；hsv1-gb、和hsv1-gc、和hsv1-gd；hsv1-gh、和hsv1-gl、和hsv1-gc；hsv1-gh、和hsv1-gl、和hsv1-gd；hsv1-gl、和hsv1-gc、和hsv1-gd。在一种质粒上的四种抗原的例子包括：hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gc；hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gd；hsv1-gb、hsv1-gl、hsv1-gc、hsv1-gd；hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gc、hsv1-gd；hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gc、hsv1-gd。在两种质粒上的四种抗原的例子包括：hsv1-gb、和hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gc；hsv1-gb、和hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gd；hsv1-gb、和hsv1-gl、hsv1-gc、hsv1-gd；hsv1-gh、和hsv1-gl、hsv1-gc、hsv1-gd；hsv1-gb、和hsv1-gh、hsv1-gc、hsv1-gd；hsv1-gb、hsv1-gh、和hsv1-gl、hsv1-gc；hsv1-gb、hsv1-gh、和hsv1-gl、hsv1-gd；hsv1-gb、hsv1-gl、和hsv1-gc、hsv1-gd；hsv1-gh、hsv1-gl、和hsv1-gc、hsv1-gd；hsv1-gb、hsv1-gh、和hsv1-gc、hsv1-gd；hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gl、和hsv1-gc；hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gl、和hsv1-gd；hsv1-gb、hsv1-gl、hsv1-gc、和hsv1-gd；hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gc、和hsv1-gd；hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gc、和hsv1-gd；hsv1-gh、和hsv1-gb、hsv1-gl、hsv1-gc；hsv1-gh、和hsv1-gb、hsv1-gl、hsv1-gd；hsv1-gl、和hsv1-gb、hsv1-gc、hsv1-gd；hsv1-gl、和hsv1-gh、hsv1-gc、hsv1-gd；hsv1-gh、和hsv1-gb、hsv1-gc、hsv1-gd；hsv1-gh、hsv1-gb、hsv1-gl、和hsv1-gc；hsv1-gh、hsv1-gb、hsv1-gl、和hsv1-gd；hsv1-gl、hsv1-gb、hsv1-gc、和hsv1-gd；hsv1-gl、hsv1-gh、hsv1-gc、和hsv1-gd；hsv1-gh、hsv1-gb、hsv1-gc、和hsv1-gd；hsv1-gl、和hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gc；hsv1-gl、和hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gd；hsv1-gc、和hsv1-gb、hsv1-gl、hsv1-gd；hsv1-gc、和hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gd；hsv1-gc、和hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gd；hsv1-gl、hsv1-gb、和hsv1-gh、hsv1-gc；hsv1-gl、hsv1-gb、和hsv1-gh、hsv1-gd；hsv1-gc、hsv1-gb、和hsv1-gl、hsv1-gd；hsv1-gc、hsv1-gh、和hsv1-gl、hsv1-gd；hsv1-gc、hsv1-gb、和hsv1-gh、hsv1-gd；在三种质粒上的四种抗原的例子包括：hsv1-gb、和hsv1-gh、和hsv1-gl、hsv1-gc；hsv1-gb、和hsv1-gh、和hsv1-gl、hsv1-gd；hsv1-gb、和hsv1-gl、和hsv1-gc、hsv1-gd；hsv1-gh、和hsv1-gl、和hsv1-gc、hsv1-gd；hsv1-gb、和hsv1-gh、和hsv1-gc、hsv1-gd；hsv1-gb、和hsv1-gh、hsv1-gl、和hsv1-gc、hsv1-gb、和hsv1-gh、hsv1-gl、和hsv1-gd、hsv1-gb、和hsv1-gl、hsv1-gc、和hsv1-gd；hsv1-gh、和hsv1-gl、hsv1-gc、和hsv1-gd、hsv1-gb、和hsv1-gh、hsv1-gc、和hsv1-gd、hsv1-gbhsv1-gc、和hsv1-gh、和hsv1-gl；hsv1-gb、hsv1-gd、和hsv1-gh、和hsv1-gl；hsv1-gbhsv1-gd、和hsv1-gl、和hsv1-gc；hsv1-ghhsv1-gd、和hsv1-gl、和hsv1-gc；hsv1-gbhsv1-gd、和hsv1-gh、和hsv1-gc。在四种质粒上的四种抗原的例子包括：hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gc。在五种质粒上的四种抗原的例子包括：hsv1-gb、hsv1-gh、hsv1-gl、hsv1-gc、hsv1-gd。检测局部和细胞内抗原转运的试验显示在hcmv的情况下，在细胞中gh和gl的共表达导致至细胞表面的转运，当两者中任一蛋白在没有另一者存在下表达时，这不会发生。

实施例18hsv2

在2、3、4和5的组合中所列出的五种hsv2抗原的置换可包括以下。两种抗原：hsv2-gb、hsv2-gh；hsv2-gb、hsv2-gl；hsv2-gb、hsv2-gc；hsv2-gb、hsv2-gd；hsv2-gh、hsv2-gl；hsv2-gh、hsv2-gc；hsv2-gh、hsv2-gd；hsv2-gl、hsv2-gc；和hsv2-gl、hsv2-gd。三种抗原：hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gl；hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gc；hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gd；hsv2-gb、hsv2-gl、hsv2-gc；hsv2-gb、hsv2-gl、hsv2-gd；hsv2-gb、hsv2-gc、hsv2-gd；hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gc；hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gd；和hsv2-gl、hsv2-gc、hsv2-gd。四种抗原：hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gc；hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gd；hsv2-gb、hsv2-gl、hsv2-gc、hsv2-gd；hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gc、hsv2-gd；和hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gc、hsv2-gd。五种抗原：hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gc、hsv2-gd。

置换可存在于多种质粒上。在一种质粒上的两种抗原的例子包括：hsv2-gb、hsv2-gh；hsv2-gb、hsv2-gl；hsv2-gb、hsv2-gc；hsv2-gb、hsv2-gd；hsv2-gh、hsv2-gl；hsv2-gh、hsv2-gc；hsv2-gh、hsv2-gd；hsv2-gl、hsv2-gc、hsv2-gl、hsv2-gd。在两种质粒上的两种抗原的例子包括：hsv2-gb、和hsv2-gh；hsv2-gb、和hsv2-gl；hsv2-gb、和hsv2-gc；hsv2-gb、和hsv2-gd；hsv2-gh、和hsv2-gl；hsv2-gh、和hsv2-gc；hsv2-gh、和hsv2-gd；hsv2-gl、和hsv2-gc；和hsv2-gl、和hsv2-gd。在一种质粒上的三种抗原的例子包括：hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gl；hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gc；hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gd；hsv2-gb、hsv2-gl、hsv2-gc；hsv2-gb、hsv2-gl、hsv2-gd；hsv2-gb、hsv2-gc、hsv2-gd；hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gc；hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gd；hsv2-gl、hsv2-gc、hsv2-gd。在两种质粒上的三种抗原的例子包括：hsv2-gb、hsv2-gh、和hsv2-gl；hsv2-gb、hsv2-gh、和hsv2-gc；hsv2-gb、hsv2-gh、和hsv2-gd；hsv2-gb、hsv2-gl、和hsv2-gc；hsv2-gb、hsv2-gl、和hsv2-gd；hsv2-gb、hsv2-gc、和hsv2-gd；hsv2-gh、hsv2-gl、和hsv2-gc；hsv2-gh、hsv2-gl、和hsv2-gd；hsv2-gl、hsv2-gc、和hsv2-gd；hsv2-gb、hsv2-gl、和hsv2-gh；hsv2-gb、hsv2-gc、和hsv2-gh；hsv2-gb、hsv2-gd、和hsv2-gh；hsv2-gb、hsv2-gc、和hsv2-gl；hsv2-gb、hsv2-gd、和hsv2-gl；hsv2-gb、hsv2-gd、和hsv2-gc；hsv2-gh、hsv2-gc、和hsv2-gl；hsv2-gh、hsv2-gd、和hsv2-gl；hsv2-gl、hsv2-gd、和hsv2-gc；hsv2-gh、hsv2-gl、和hsv2-gb；hsv2-gh、hsv2-gc、和hsv2-gb；hsv2-gh、hsv2-gd、和hsv2-gb；hsv2-gl、hsv2-gc、和hsv2-gb；hsv2-gl、hsv2-gd、和hsv2-gb；hsv2-gc、hsv2-gd、和hsv2-gb；hsv2-gl、hsv2-gc、和hsv2-gh；hsv2-gl、hsv2-gd、和hsv2-gh；hsv2-gc、hsv2-gd、和hsv2-gl。在三种质粒上的三种抗原的例子包括：hsv2-gb、和hsv2-gh、和hsv2-gl；hsv2-gb、和hsv2-gh、和hsv2-gc；hsv2-gb、和hsv2-gh、和hsv2-gd；hsv2-gb、和hsv2-gl、和hsv2-gc；hsv2-gb、和hsv2-gl、和hsv2-gd；hsv2-gb、和hsv2-gc、和hsv2-gd；hsv2-gh、和hsv2-gl、和hsv2-gc；hsv2-gh、和hsv2-gl、和hsv2-gd；hsv2-gl、和hsv2-gc、和hsv2-gd。在一种质粒上的四种抗原的例子包括：hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gc；hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gd；hsv2-gb、hsv2-gl、hsv2-gc、hsv2-gd；hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gc、hsv2-gd；hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gc、hsv2-gd。在两种质粒上的四种抗原的例子包括：hsv2-gb、和hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gc；hsv2-gb、和hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gd；hsv2-gb、和hsv2-gl、hsv2-gc、hsv2-gd；hsv2-gh、和hsv2-gl、hsv2-gc、hsv2-gd；hsv2-gb、和hsv2-gh、hsv2-gc、hsv2-gd；hsv2-gb、hsv2-gh、和hsv2-gl、hsv2-gc；

hsv2-gb、hsv2-gh、和hsv2-gl、hsv2-gd；hsv2-gb、hsv2-gl、和hsv2-gc、hsv2-gd；hsv2-gh、hsv2-gl、和hsv2-gc、hsv2-gd；hsv2-gb、hsv2-gh、和hsv2-gc、hsv2-gd；hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gl、和hsv2-gc；hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gl、和hsv2-gd；hsv2-gb、hsv2-gl、hsv2-gc、和hsv2-gd；hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gc、和hsv2-gd；hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gc、和hsv2-gd；hsv2-gh、和hsv2-gb、hsv2-gl、hsv2-gc；hsv2-gh、和hsv2-gb、hsv2-gl、hsv2-gd；hsv2-gl、和hsv2-gb、hsv2-gc、hsv2-gd；hsv2-gl、和hsv2-gh、hsv2-gc、hsv2-gd；hsv2-gh、和hsv2-gb、hsv2-gc、hsv2-gd；hsv2-gh、hsv2-gb、hsv2-gl、和hsv2-gc；hsv2-gh、hsv2-gb、hsv2-gl、和hsv2-gd；hsv2-gl、hsv2-gb、hsv2-gc、和hsv2-gd；hsv2-gl、hsv2-gh、hsv2-gc、和hsv2-gd；hsv2-gh、hsv2-gb、hsv2-gc、和hsv2-gd；hsv2-gl、和hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gc；hsv2-gl、和hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gd；hsv2-gc、和hsv2-gb、hsv2-gl、hsv2-gd；hsv2-gc、和hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gd；hsv2-gc、和hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gd；hsv2-gl、hsv2-gb、和hsv2-gh、hsv2-gc；hsv2-gl、hsv2-gb、和hsv2-gh、hsv2-gd；hsv2-gc、hsv2-gb、和hsv2-gl、hsv2-gd；hsv2-gc、hsv2-gh、和hsv2-gl、hsv2-gd；hsv2-gc、hsv2-gb、和hsv2-gh、hsv2-gd；在三种质粒上的四种抗原的例子包括：hsv2-gb、和hsv2-gh、和hsv2-gl、hsv2-gc；hsv2-gb、和hsv2-gh、和hsv2-gl、hsv2-gd；hsv2-gb、和hsv2-gl、和hsv2-gc、hsv2-gd；hsv2-gh、和hsv2-gl、和hsv2-gc、hsv2-gd；hsv2-gb、和hsv2-gh、和hsv2-gc、hsv2-gd；hsv2-gb、和hsv2-gh、hsv2-gl、和hsv2-gc、hsv2-gb、和hsv2-gh、hsv2-gl、和hsv2-gd、hsv2-gb、和hsv2-gl、hsv2-gc、和hsv2-gd；hsv2-gh、和hsv2-gl、hsv2-gc、和hsv2-gd、hsv2-gb、和hsv2-gh、hsv2-gc、和hsv2-gd、hsv2-gbhsv2-gc、和hsv2-gh、和hsv2-gl；hsv2-gb、hsv2-gd、和hsv2-gh、和hsv2-gl；hsv2-gbhsv2-gd、和hsv2-gl、和hsv2-gc；hsv2-ghhsv2-gd、和hsv2-gl、和hsv2-gc；hsv2-gbhsv2-gd、和hsv2-gh、和hsv2-gc。在四种质粒上的四种抗原的例子包括：hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gc。在五种质粒上的四种抗原的例子包括：hsv2-gb、hsv2-gh、hsv2-gl、hsv2-gc、hsv2-gd。

实施例19vzv

在2、3、4和5的组合中列出的五种vzv抗原的置换可包括以下。两种抗原：vzv-gb、vzv-gh；vzv-gb、vzv-gl；vzv-gb、vzv-gm；vzv-gb、vzv-gn；vzv-gh、vzv-gl；vzv-gh、vzv-gm；vzv-gh、vzv-gn；vzv-gl、vzv-gm；和vzv-gl、vzv-gn。三种抗原：vzv-gb、vzv-gh、vzv-gl；vzv-gb、vzv-gh、vzv-gm；vzv-gb、vzv-gh、vzv-gn；vzv-gb、vzv-gl、vzv-gm；vzv-gb、vzv-gl、vzv-gn；vzv-gb、vzv-gm、vzv-gn；vzv-gh、vzv-gl、vzv-gm；vzv-gh、vzv-gl、vzv-gn；以及vzv-gl、vzv-gm、vzv-gn。四种抗原：vzv-gb、vzv-gh、vzv-gl、vzv-gm；vzv-gb、vzv-gh、vzv-gl、vzv-gn；vzv-gb、vzv-gl、vzv-gm、vzv-gn；vzv-gh、vzv-gl、vzv-gm、vzv-gn；和vzv-gb、vzv-gh、vzv-gm、vzv-gn。五种抗原：vzv-gb、vzv-gh、vzv-gl、vzv-gm、vzv-gn。

置换可存在于多种质粒上。在一种质粒上的两种抗原的例子包括：vzv-gb、vzv-gh；vzv-gb、vzv-gl；vzv-gb、vzv-gm；vzv-gb、vzv-gn；vzv-gh、vzv-gl；vzv-gh、vzv-gm；vzv-gh、vzv-gn；vzv-gl、vzv-gm、vzv-gl、vzv-gn。在两种质粒上的两种抗原的例子包括：vzv-gb、和vzv-gh；vzv-gb、和vzv-gl；vzv-gb、和vzv-gm；vzv-gb、和vzv-gn；vzv-gh、和vzv-gl；vzv-gh、和zv-gm；vzv-gh、和vzv-gn；vzv-gl、和vzv-gm；和vzv-gl、和vzv-gn。在一种质粒上的三种抗原的例子包括：vzv-gb、vzv-gh、vzv-gl；vzv-gb、vzv-gh、vzv-gm；vzv-gb、vzv-gh、vzv-gn；vzv-gb、vzv-gl、vzv-gm；vzv-gb、vzv-gl、vzv-gn；vzv-gb、vzv-gm、vzv-gn；vzv-gh、vzv-gl、vzv-gm；vzv-gh、vzv-gl、vzv-gn；vzv-gl、vzv-gm、vzv-gn。在两种质粒上的三种抗原的例子包括：vzv-gb、vzv-gh、和vzv-gl；vzv-gb、vzv-gh、和vzv-gm；vzv-gb、vzv-gh、和vzv-gn；vzv-gb、vzv-gl、和vzv-gm；vzv-gb、vzv-gl、和vzv-gn；vzv-gb、vzv-gm、和vzv-gn；vzv-gh、vzv-gl、和vzv-gm；vzv-gh、vzv-gl、和vzv-gn；vzv-gl、vzv-gm、和vzv-gn；vzv-gb、vzv-gl、和vzv-gh；vzv-gb、vzv-gm、和vzv-gh；vzv-gb、vzv-gn、和vzv-gh；vzv-gb、vzv-gm、和vzv-gl；vzv-gb、vzv-gn、和vzv-gl；vzv-gb、vzv-gn、和vzv-gm；vzv-gh、vzv-gm、和vzv-gl；vzv-gh、vzv-gn、和vzv-gl；vzv-gl、vzv-gn、和vzv-gm；vzv-gh、vzv-gl、和vzv-gb；vzv-gh、vzv-gm、和vzv-gb；vzv-gh、vzv-gn、和vzv-gb；vzv-gl、vzv-gm、和vzv-gb；vzv-gl、vzv-gn、和vzv-gb；vzv-gm、vzv-gn、和vzv-gb；vzv-gl、vzv-gm、和vzv-gh；vzv-gl、vzv-gn、和vzv-gh；vzv-gm、vzv-gn、和vzv-gl。在三种质粒上的三种抗原的例子包括：vzv-gb、和vzv-gh、和vzv-gl；vzv-gb、和vzv-gh、和vzv-gm；vzv-gb、和vzv-gh、和vzv-gn；vzv-gb、和vzv-gl、和vzv-gm；vzv-gb、和vzv-gl、和vzv-gn；vzv-gb、和vzv-gm、和vzv-gn；vzv-gh、和vzv-gl、和vzv-gm；vzv-gh、和vzv-gl、和vzv-gn；vzv-gl、和vzv-gm、和vzv-gn。在一种质粒上的四种抗原的例子包括：vzv-gb、vzv-gh、vzv-gl、vzv-gm；vzv-gb、vzv-gh、vzv-gl、vzv-gn；vzv-gb、vzv-gl、vzv-gm、vzv-gn；vzv-gh、vzv-gl、vzv-gm、vzv-gn；vzv-gb、vzv-gh、vzv-gm、vzv-gn。在两种质粒上的四种抗原的例子包括：vzv-gb、和vzv-gh、vzv-gl、vzv-gm；vzv-gb、和vzv-gh、vzv-gl、vzv-gn；vzv-gb、和vzv-gl、vzv-gm、vzv-gn；vzv-gh、和vzv-gl、vzv-gm、vzv-gn；vzv-gb、和vzv-gh、vzv-gm、vzv-gn；vzv-gb、vzv-gh、和vzv-gl、vzv-gm；vzv-gb、vzv-gh、和vzv-gl、vzv-gn；vzv-gb、vzv-gl、和vzv-gm、vzv-gn；vzv-gh、vzv-gl、和vzv-gm、vzv-gn；vzv-gb、vzv-gh、和vzv-gm、vzv-gn；vzv-gb、vzv-gh、vzv-gl、和vzv-gm；vzv-gb、vzv-gh、vzv-gl、和vzv-gn；vzv-gb、vzv-gl、vzv-gm、和vzv-gn；vzv-gh、vzv-gl、vzv-gm、和vzv-gn；vzv-gb、vzv-gh、vzv-gm、和vzv-gn；vzv-gh、和vzv-gb、vzv-gl、vzv-gm；vzv-gh、和vzv-gb、vzv-gl、vzv-gn；vzv-gl、和vzv-gb、vzv-gm、vzv-gn；vzv-gl、和vzv-gh、vzv-gm、vzv-gn；vzv-gh、和vzv-gb、vzv-gm、vzv-gn；vzv-gh、vzv-gb、vzv-gl、和vzv-gm；vzv-gh、vzv-gb、vzv-gl、和vzv-gn；vzv-gl、vzv-gb、vzv-gm、和vzv-gn；vzv-gl、vzv-gh、vzv-gm、和vzv-gn；vzv-gh、vzv-gb、vzv-gm、和vzv-gn；vzv-gl、和vzv-gb、vzv-gh、vzv-gm；vzv-gl、和vzv-gb、vzv-gh、vzv-gn；vzv-gm、和vzv-gb、vzv-gl、vzv-gn；vzv-gm、和vzv-gh、vzv-gl、vzv-gn；vzv-gm、和vzv-gb、vzv-gh、vzv-gn；vzv-gl、vzv-gb、和vzv-gh、vzv-gm；vzv-gl、vzv-gb、和vzv-gh、vzv-gn；vzv-gm、vzv-gb、和vzv-gl、vzv-gn；vzv-gm、vzv-gh、和vzv-gl、vzv-gn；vzv-gm、vzv-gb、和vzv-gh、vzv-gn；在三种质粒上的四种抗原的例子包括：vzv-gb、和vzv-gh、和vzv-gl、vzv-gm；vzv-gb、和vzv-gh、和vzv-gl、vzv-gn；vzv-gb、和vzv-gl、和vzv-gm、vzv-gn；vzv-gh、和vzv-gl、和vzv-gm、vzv-gn；vzv-gb、和vzv-gh、和vzv-gm、vzv-gn；vzv-gb、和vzv-gh、vzv-gl、和vzv-gm、vzv-gb、和vzv-gh、vzv-gl、和vzv-gn、vzv-gb、和vzv-gl、vzv-gm、和vzv-gn；vzv-gh、和vzv-gl、vzv-gm、和vzv-gn、vzv-gb、和vzv-gh、vzv-gm、和vzv-gn、vzv-gbvzv-gm、和vzv-gh、和vzv-gl；vzv-gb、vzv-gn、和vzv-gh、和vzv-gl；vzv-gbvzv-gn、和vzv-gl、和vzv-gm；vzv-ghvzv-gn、和vzv-gl、和vzv-gm；vzv-gbvzv-gn、和vzv-gh、和vzv-gm。在四种质粒上的四种抗原的例子包括：vzv-gb、vzv-gh、vzv-gl、vzv-gm。在五种质粒上的四种抗原的例子包括：vzv-gb、vzv-gh、vzv-gl、vzv-gm、vzv-gn。

序列表

<110>宾夕法尼亚大学托管会

d·b·韦纳

d·j·夏洛克

<120>编码人巨细胞病毒蛋白的核酸分子以及包含所述核酸分子的疫苗

<130>133172.03802upvg0038x5642

<150>61/438,089

<151>2011-01-31

<160>114

<170>patentin版本3.5

<210>1

<211>2724

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>gb共有核酸序列

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(3)

<223>n是a、c、g、或t

<400>1

nnngagagcagaatctggtgcctggtcgtgtgcgtgaacctgtgcatcgtgtgcctggga60

gccgccgtgtccagcagcagcacccggggcacaagcgccacacacagccaccacagcagc120

cacaccaccagcgccgcccacagccggagcggaagcgtgagcagccagcgggtgaccagc180

agcgaggccgtgtcccaccgggccaacgagacaatctacaacaccaccctgaagtacggc240

gacgtcgtgggagtgaacaccaccaagtacccctacagagtgtgcagcatggcccagggc300

accgacctgatcagattcgagcggaacatcgtgtgtaccagcatgaagcccatcaacgag360

gacctggacgagggcatcatggtggtgtacaagagaaacatcgtggcccacaccttcaaa420

gtgcgggtgtaccagaaggtgctgaccttccggcggagctacgcctacatccacaccacc480

tacctgctgggcagcaacaccgagtacgtggcccctcccatgtgggagatccaccacatc540

aacagccacagccagtgctacagcagctacagccgcgtgatcgccggcaccgtgttcgtg600

gcctaccaccgggacagctacgagaacaagaccatgcagctgatgcccgacgactacagc660

aacacccacagcaccagatacgtgaccgtgaaggaccagtggcacagccggggaagcacc720

tggctgtacagagagacatgcaacctgaactgcatggtcaccatcaccaccgccagaagc780

aagtacccttaccacttcttcgccaccagcaccggcgacgtggtggacatcagccccttc840

tacaacggcaccaaccggaacgccagctacttcggcgagaacgccgacaagttcttcatc900

ttccccaactacaccatcgtgtccgacttcggcagacccaacagcgcccctgagacacac960

cggctggtggcctttctggaacgggccgacagcgtgatcagctgggacatccaggacgag1020

aagaacgtgacctgccagctgaccttctgggaggctagcgagcggaccatcagaagcgag1080

gccgaggacagctaccacttcagcagcgccaagatgaccgccaccttcctgagcaagaaa1140

caggaagtgaacatgagcgacagcgccctggactgcgtgcgggatgaggccatcaacaag1200

ctgcagcagatcttcaacaccagctacaaccagacctacgagaagtatggcaacgtgtcc1260

gtgttcgagacaacaggcggcctggtggtgttctggcagggcatcaagcagaagtccctg1320

gtcgagctggaacggctggccaacagaagcagcctgaacctgacccaccggaccaagcgg1380

agcaccgacggcaacaataccacccacctgagcaacatggaaagcgtccacaacctggtg1440

tacgcccagctgcagttcacctacgacaccctgcggggctacatcaaccgggccctggcc1500

cagatcgccgaggcttggtgtgtggaccagcggcggaccctggaagtgttcaaagagctg1560

agcaagatcaaccccagcgccatcctgagcgccatctacaacaagcctatcgccgccaga1620

ttcatgggcgacgtgctgggcctggccagctgcgtgaccatcaaccagaccagcgtgaag1680

gtgctgcgggacatgaacgtgaaagaaagccccggcagatgctactccagacccgtggtc1740

atcttcaacttcgccaacagctcctacgtgcagtacggccagctgggcgaggacaacgag1800

atcctgctgggaaaccaccggaccgaggaatgccagctgcccagcctgaagatctttatc1860

gccggcaacagcgcctacgagtatgtggactacctgttcaagcggatgatcgacctgagc1920

agcatcagcaccgtggacagcatgatcgccctggacatcgaccccctggaaaacaccgac1980

ttccgggtgctggaactgtacagccagaaagagctgcggagcagcaacgtgttcgacctg2040

gaagagatcatgcgcgagttcaacagctacaagcagcgcgtgaaatacgtcgaggacaag2100

gtggtggaccccctgcccccctacctgaagggcctggacgacctgatgagcggcctggga2160

gctgctggcaaggccgtgggagtggccattggagctgtgggcggagccgtggccagcgtg2220

gtggaaggcgtggccacctttctgaagaaccccttcggcgccttcaccatcatcctggtg2280

gctatcgccgtcgtgatcatcacctacctgatctacacccggcagcggcggctgtgtacc2340

cagcctctgcagaacctgttcccctacctggtgtccgccgacggcaccaccgtgacaagc2400

ggctccaccaaggacaccagcctgcaggccccacccagctacgaggaatccgtgtacaac2460

agcggccggaagggcccaggccctcctagctctgacgcctctacagccgccccaccctac2520

accaacgagcaggcctaccagatgctgctggccctggctagactggacgccgagcagaga2580

gcccagcagaacggaaccgacagcctggatggccagaccggcacccaggacaagggccag2640

aagcccaacctgctggaccggctgcggcacagaaagaacggctaccggcacctgaaggac2700

agcgacgaagaggaaaacgtgtga2724

<210>2

<211>907

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>gb共有氨基酸序列

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(1)

<223>xaa可以为任何天然存在的氨基酸

<400>2

xaagluserargiletrpcysleuvalvalcysvalasnleucysile

151015

valcysleuglyalaalavalserserserserthrargglythrser

202530

alathrhisserhishisserserhisthrthrseralaalahisser

354045

argserglyservalserserglnargvalthrserserglualaval

505560

serhisargalaasngluthriletyrasnthrthrleulystyrgly

65707580

aspvalvalglyvalasnthrthrlystyrprotyrargvalcysser

859095

metalaglnglythraspleuileargphegluargasnilevalcys

100105110

thrsermetlysproileasngluaspleuaspgluglyilemetval

115120125

valtyrlysargasnilevalalahisthrphelysvalargvaltyr

130135140

glnlysvalleuthrpheargargsertyralatyrilehisthrthr

145150155160

tyrleuleuglyserasnthrglutyrvalalapropromettrpglu

165170175

ilehishisileasnserhisserglncystyrsersertyrserarg

180185190

valilealaglythrvalphevalalatyrhisargaspsertyrglu

195200205

asnlysthrmetglnleumetproaspasptyrserasnthrhisser

210215220

thrargtyrvalthrvallysaspglntrphisserargglyserthr

225230235240

trpleutyrarggluthrcysasnleuasncysmetvalthrilethr

245250255

thralaargserlystyrprotyrhisphephealathrserthrgly

260265270

aspvalvalaspileserprophetyrasnglythrasnargasnala

275280285

sertyrpheglygluasnalaasplysphepheilepheproasntyr

290295300

thrilevalserasppheglyargproasnseralaleugluthrhis

305310315320

argleuvalalapheleugluargalaaspservalilesertrpasp

325330335

ileglnaspglulysasnvalthrcysglnleuthrphetrpgluala

340345350

sergluargthrileargserglualagluaspsertyrhispheser

355360365

seralalysmetthralathrpheleuserlyslysglngluvalasn

370375380

metseraspseralaleuaspcysvalargaspglualaileasnlys

385390395400

leuglnglnilepheasnthrsertyrasnglnthrtyrglulystyr

405410415

glyasnvalservalphegluthrthrglyglyleuvalvalphetrp

420425430

glnglyilelysglnlysserleuvalgluleugluargleualaasn

435440445

argserserleuasnleuthrhisargthrlysargserthraspgly

450455460

asnasnthrthrhisleuserasnmetgluservalhisasnleuval

465470475480

tyralaglnleuglnphethrtyraspthrleuargglytyrileasn

485490495

argalaleualaglnilealaglualatrpcysvalaspglnargarg

500505510

thrleugluvalphelysgluleuserlysileasnproseralaile

515520525

leuseralailetyrasnlysproilealaalaargphemetglyasp

530535540

valleuglyleualasercysvalthrileasnglnthrservallys

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valleuargaspmetasnvallysgluserproglyargcystyrser

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argprovalvalilepheasnphealaasnsersertyrvalglntyr

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gluglucysglnleuproserleulysilepheilealaglyasnser

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alatyrglutyrvalasptyrleuphelysargmetileaspleuser

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leuproprotyrleulysglyleuaspaspleumetserglyleugly

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alaalaglylysalavalglyvalalaileglyalavalglyglyala

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glyalaphethrileileleuvalalailealavalvalileilethr

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leuleualaleualaargleuaspalagluglnargalaglnglnasn

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pheleupheileleusermetaspthrpheglnleuphethrleuthr

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metserpheargleuprosermetilealaphemetalaalavalhis

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phephecysleuthrilepheasnvalsermetvalthrglntyrarg

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lysglythrvalglnpheargthrleuilevalasnleuvalgluval

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metleuphepheiletrpalametphethrthrcysargalavalarg

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tyrpheargglyargglyserglyservallystyrglnalaleuala

325330335

thralaserglyglugluvalalaalaleuserhishisaspserleu

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gluserargargleuarggluglugluaspaspaspaspaspgluasp

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phegluaspala

370

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<220>

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<222>(1)..(1)

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xaaglutrpasnthrleuvalleuglyleuleuvalleuservalala

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serthrhisthrserthrthrvallysalathrthrthralathrthr

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serthrthrthralathrserthrthrserserthrthrserthrlys

505560

proglyserthrthrhisaspproasnvalmetargprohisalahis

65707580

asnaspphetyrlysalahiscysthrserhismettyrgluleuser

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leuserserphealaalatrptrpthrmetleuasnalaleuileleu

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metglyalaphecysilevalleuarghiscyscyspheglnasnphe

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<220>

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<222>(1)..(1)

<223>xaa可以为任何天然存在的氨基酸

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xaaargproglyleuprosertyrleuthrvalphealavaltyrleu

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leuserhisleuproserglnargtyrglyalaaspalaalaserglu

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alaglnaspserleuglygluglnprothrthrvalproproproile

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aspleuserileprohisvaltrpmetproproglnthrthrprohis

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glytrplysgluserhisthrthrserglyleuhisargprohisphe

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tyralavalaspvalleulysserglyargcysglnmetleuasparg

325330335

argthrvalglumetalaphealatyralaleualaleuphealaala

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alaargglngluglualaglyalagluvalservalproargalaleu

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ilethrserleuvalargleuvaltyrileleuserlysglnasngln

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argglngluleutyrleumetglyserleuvalhissermetleuval

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serserproargthrhistyrleumetleuleulysasnglythrval

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<213>人工序列

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ileleuleutrpcyscysleuleuleuproilevalserseralaala

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valservalalaprothralaalaglulysvalproalaglucyspro

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tyrglusertrpleuargproleuvalasnvalthrglyargaspgly

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proleuserglnleuileargtyrargprovalthrproglualaala

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tyrasnasnproaspglnleuargalaleuleuthrleuleuserser

115120125

aspthralaproargtrpmetthrvalmetargglytyrserglucys

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glyaspglyserproalavaltyrthrcysvalaspaspleucysarg

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glytyraspleuthrargleusertyrglyargserilephethrglu

165170175

hisvalleuglyphegluleuvalproproserleupheasnvalval

180185190

valalaileargasnglualathrargthrasnargalavalargleu

195200205

provalserthralaalaalaprogluglyilethrleuphetyrgly

210215220

leutyrasnalavallysgluphecysleuarghisglnleuasppro

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proleuleuarghisleuasplystyrtyralaglyleuproproglu

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leulysglnthrargvalasnleuproalahisserargtyrglypro

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glnalavalaspalaarg

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<210>11

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<213>人工序列

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<223>go共有核酸序列

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<213>人工序列

<220>

<223>go共有氨基酸序列

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(1)

<223>xaa可以为任何天然存在的氨基酸

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xaaglylyslysglumetilemetvallysglyileprolysilemet

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leuleuileserilethrpheleuleuleuserleuileasncysasn

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valleuvalasnserlysglythrargargsertrpprotyrthrval

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leusertyrargglylysgluileleulyslysglnlysgluaspile

505560

leulysargleumetserthrserseraspglytyrargpheleumet

65707580

tyrproserglnglnlysphehisalailevalilesermetasplys

859095

pheproglnasptyrileleualaglyproileargasnaspserile

100105110

thrhismettrppheaspphetyrserthrglnleuarglysproala

115120125

lystyrvaltyrserglutyrasnhisthralahislysilethrleu

130135140

argproproprocysglythrvalprosermetasncysleuserglu

145150155160

metleuasnvalserlysargasnaspthrglyglulysglycysgly

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asnphethrthrpheasnprometphepheasnvalproargtrpasn

180185190

thrlysleutyrileglyserasnlysvalasnvalaspserglnthr

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iletyrpheleuglyleuthralaleuleuleuargtyralaglnarg

210215220

asncysthrargserphetyrleuvalasnalametserargasnleu

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pheargvalprolystyrileasnglythrlysleulysasnthrmet

245250255

arglysleulysarglysglnalaleuvallysgluglnproglnlys

260265270

lysasnlyslysserglnserthrthrthrprotyrleusertyrthr

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thrserthralapheasnvalthrthrasnvalthrtyrseralathr

290295300

alaalavalthrargvalalathrserthrthrglytyrargproasp

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serasnphemetlysserilemetalathrglnleuargaspleuala

325330335

thrtrpvaltyrthrthrleuargtyrargasngluprophecyslys

340345350

proaspargasnargthralavalsergluphemetlysasnthrhis

355360365

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metserserleutyrtyrasngluthrmetservalgluasngluthr

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alaseraspasnasngluthrthrprothrserproserthrargphe

405410415

glnargthrpheileaspproleutrpasptyrleuaspserleuleu

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pheleuasplysileargasnpheserleuglnleuproalatyrgly

435440445

asnleuthrproprogluhisargargalaalaasnleuserthrleu

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asnserleutrptrptrpleugln

465470

<210>13

<211>516

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>ul128共有核酸序列

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(3)

<223>n是a、c、g、或t

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<210>14

<211>171

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>ul128共有氨基酸序列

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(1)

<223>xaa可以为任何天然存在的氨基酸

<400>14

xaaserprolysaspleuthrpropheleuthralaleutrpleuleu

151015

leuglyhisserargvalproargvalargalagluglucyscysglu

202530

pheileasnvalasnhisproprogluargcystyraspphelysmet

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cysasnargphethrvalalaleuargcysproaspglygluvalcys

505560

tyrserproglulysthralagluileargglyilevalthrthrmet

65707580

thrhisserleuthrargglnvalvalhisasnlysleuthrsercys

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asntyrasnproleutyrleuglualaaspglyargileargcysgly

100105110

lysvalasnasplysalaglntyrleuleuglyalaalaglyserval

115120125

protyrargtrpileasnleuglutyrasplysilethrargileval

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glyleuaspglntyrleugluservallyslyshislysargleuasp

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valcysargalalysmetglytyrmetleugln

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<210>15

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<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>ul130共有氨基酸序列

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(3)

<223>n是a、c、g、或t

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<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>ul130共有氨基酸序列

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(1)

<223>xaa可以为任何天然存在的氨基酸

<400>16

xaaleuargleuleuleuarghishisphehiscysleuleuleucys

151015

alavaltrpalathrprocysleualaserprotrpserthrleuthr

202530

alaasnglnasnproserproprotrpserlysleuthrtyrserlys

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prohisaspalaalathrphetyrcyspropheleutyrproserpro

505560

proargserproleuglnpheserglypheglnargvalserthrgly

65707580

proglucysargasngluthrleutyrleuleutyrasnargglugly

859095

glnthrleuvalgluargserserthrtrpvallyslysvaliletrp

100105110

tyrleuserglyargasnglnthrileleuglnargmetproargthr

115120125

alaserlysproseraspglyasnvalglnileservalgluaspala

130135140

lysilepheglyalahismetvalprolysglnthrlysleuleuarg

145150155160

phevalvalasnaspglythrargtyrglnmetcysvalmetlysleu

165170175

glusertrpalahisvalpheargasptyrservalserpheglnval

180185190

argleuthrphethrglualaasnasnglnthrtyrthrphecysthr

195200205

hisproasnleuileval

210

<210>17

<211>390

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>ul131a共有核酸序列

<220>

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<222>(1)..(3)

<223>n是a、c、g、或t

<400>17

nnnagactgtgcagagtgtggctgagcgtgtgcctgtgcgccgtggtgctgggccagtgc60

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<210>18

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<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>ul131a共有氨基酸序列

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(1)

<223>xaa可以为任何天然存在的氨基酸

<400>18

xaaargleucysargvaltrpleuservalcysleucysalavalval

151015

leuglyglncysglnarggluthralaglulysasnasptyrtyrarg

202530

valprohistyrtrpaspalacysserargalaleuproaspglnthr

354045

argtyrlystyrvalgluglnleuvalaspleuthrleuasntyrhis

505560

tyraspalaserhisglyleuaspasnpheaspvalleulysargile

65707580

asnvalthrgluvalserleuleuileserasppheargargglnasn

859095

argargglyglythrasnlysargthrthrpheasnalaalaglyser

100105110

leualaprohisalaargserleuglupheservalargleupheala

115120125

asn

<210>19

<211>1687

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>ul83共有核酸序列

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(3)

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<211>561

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>ul83共有氨基酸序列

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(1)

<223>xaa可以为任何天然存在的氨基酸

<400>20

xaagluserargglyargargcysproglumetileservalleugly

151015

proileserglyhisvalleulysalavalpheserargglyaspthr

202530

provalleuprohisgluthrargleuleuglnthrglyilehisval

354045

argvalserglnproserleuileleuvalserglntyrthrproasp

505560

serthrprocyshisargglyaspasnglnleuglnvalglnhisthr

65707580

tyrphethrglysergluvalgluasnvalservalasnvalhisasn

859095

prothrglyargserilecysproserglngluprometseriletyr

100105110

valtyralaleuproleulysmetleuasnileproserileasnval

115120125

hishistyrproseralaalagluarglyshisarghisleuproval

130135140

alaaspalavalilehisalaserglylysglnmettrpglnalaarg

145150155160

leuthrvalserglyleualatrpthrargglnglnasnglntrplys

165170175

gluproaspvaltyrtyrthrseralaphevalpheprothrlysasp

180185190

valalaleuarghisvalvalcysalahisgluleuvalcyssermet

195200205

gluasnthrargalathrlysmetglnvalileglyaspglntyrval

210215220

lysvaltyrleugluserphecysgluaspvalproserglylysleu

225230235240

phemethisvalthrleuglyseraspvalglugluaspleuthrmet

245250255

thrargasnproglnprophemetargprohisgluargasnglyphe

260265270

thrvalleucysprolysasnmetileilelysproglylysileser

275280285

hisilemetleuaspvalalaphethrserhisgluhispheglyleu

290295300

leucysprolysserileproglyleuserileserglyasnleuleu

305310315320

metasnglyglnglnilepheleugluvalglnalailearggluthr

325330335

valgluleuargglntyraspprovalalaalaleuphephepheasp

340345350

ileaspleuleuleuglnargglyproglntyrsergluhisprothr

355360365

phethrserglntyrargileglnglylysleuglutyrarghisthr

370375380

trpasparghisaspgluglyalaalaglnglyaspaspaspvaltrp

385390395400

thrserglyseraspseraspglugluleuvalthrthrgluarglys

405410415

thrproargvalthrglyglyglyalametalaglyalaserthrser

420425430

alaglyarglysarglysseralaserseralathralacysthrala

435440445

glyvalmetthrargglyargleulysalagluserthrvalalapro

450455460

glugluaspthraspgluaspseraspasngluilehisasnproala

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valphethrtrpproprotrpglnalaglyileleualaargasnleu

485490495

valprometvalalathrvalglnglyglnasnleulystyrglnglu

500505510

phephetrpaspalaasnaspiletyrargilephealagluleuglu

515520525

glyvaltrpglnproalaalaglnprolysargargarghisarggln

530535540

aspalaleuproglyprocysilealaserthrprolyslyshisarg

545550555560

gly

<210>21

<211>2775

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>ige前导序列+gb共有核酸序列

<400>21

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taccagaaggtgctgaccttccggcggagctacgcctacatccacaccacctacctgctg540

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agagagacatgcaacctgaactgcatggtcaccatcaccaccgccagaagcaagtaccct840

taccacttcttcgccaccagcaccggcgacgtggtggacatcagccccttctacaacggc900

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<210>22

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<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>ige前导序列+gb共有氨基酸序列

<400>22

metasptrpthrtrpileleupheleuvalalaalaalathrargval

151015

hissergluserargiletrpcysleuvalvalcysvalasnleucys

202530

ilevalcysleuglyalaalavalserserserserthrargglythr

354045

seralathrhisserhishisserserhisthrthrseralaalahis

505560

serargserglyservalserserglnargvalthrsersergluala

65707580

valserhisargalaasngluthriletyrasnthrthrleulystyr

859095

glyaspvalvalglyvalasnthrthrlystyrprotyrargvalcys

100105110

sermetalaglnglythraspleuileargphegluargasnileval

115120125

cysthrsermetlysproileasngluaspleuaspgluglyilemet

130135140

valvaltyrlysargasnilevalalahisthrphelysvalargval

145150155160

tyrglnlysvalleuthrpheargargsertyralatyrilehisthr

165170175

thrtyrleuleuglyserasnthrglutyrvalalapropromettrp

180185190

gluilehishisileasnserhisserglncystyrsersertyrser

195200205

argvalilealaglythrvalphevalalatyrhisargaspsertyr

210215220

gluasnlysthrmetglnleumetproaspasptyrserasnthrhis

225230235240

serthrargtyrvalthrvallysaspglntrphisserargglyser

245250255

thrtrpleutyrarggluthrcysasnleuasncysmetvalthrile

260265270

thrthralaargserlystyrprotyrhisphephealathrserthr

275280285

glyaspvalvalaspileserprophetyrasnglythrasnargasn

290295300

alasertyrpheglygluasnalaasplysphepheilepheproasn

305310315320

tyrthrilevalserasppheglyargproasnseralaleugluthr

325330335

hisargleuvalalapheleugluargalaaspservalilesertrp

340345350

aspileglnaspglulysasnvalthrcysglnleuthrphetrpglu

355360365

alasergluargthrileargserglualagluaspsertyrhisphe

370375380

serseralalysmetthralathrpheleuserlyslysglngluval

385390395400

asnmetseraspseralaleuaspcysvalargaspglualaileasn

405410415

lysleuglnglnilepheasnthrsertyrasnglnthrtyrglulys

420425430

tyrglyasnvalservalphegluthrthrglyglyleuvalvalphe

435440445

trpglnglyilelysglnlysserleuvalgluleugluargleuala

450455460

asnargserserleuasnleuthrhisargthrlysargserthrasp

465470475480

glyasnasnthrthrhisleuserasnmetgluservalhisasnleu

485490495

valtyralaglnleuglnphethrtyraspthrleuargglytyrile

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ileleuseralailetyrasnlysproilealaalaargphemetgly

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180185190

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valphevalvaltyralaileileserileiletyrpheleuleuile

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glualavalphepheglntyrvallysvalglnpheglytyrhisleu

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aspphegluaspala

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hisasnaspphetyrlysalahiscysthrserhismettyrgluleu

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argargthrvalglumetalaphealatyralaleualaleupheala

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180185190

gluhisvalleuglyphegluleuvalproproserleupheasnval

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valvalalaileargasnglualathrargthrasnargalavalarg

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leuprovalserthralaalaalaprogluglyilethrleuphetyr

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859095

mettyrproserglnglnlysphehisalailevalilesermetasp

100105110

lyspheproglnasptyrileleualaglyproileargasnaspser

115120125

ilethrhismettrppheaspphetyrserthrglnleuarglyspro

130135140

alalystyrvaltyrserglutyrasnhisthralahislysilethr

145150155160

leuargproproprocysglythrvalprosermetasncysleuser

165170175

glumetleuasnvalserlysargasnaspthrglyglulysglycys

180185190

glyasnphethrthrpheasnprometphepheasnvalproargtrp

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asnthrlysleutyrileglyserasnlysvalasnvalaspsergln

210215220

thriletyrpheleuglyleuthralaleuleuleuargtyralagln

225230235240

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245250255

leupheargvalprolystyrileasnglythrlysleulysasnthr

260265270

metarglysleulysarglysglnalaleuvallysgluglnprogln

275280285

lyslysasnlyslysserglnserthrthrthrprotyrleusertyr

290295300

thrthrserthralapheasnvalthrthrasnvalthrtyrserala

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thralaalavalthrargvalalathrserthrthrglytyrargpro

325330335

aspserasnphemetlysserilemetalathrglnleuargaspleu

340345350

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355360365

lysproaspargasnargthralavalsergluphemetlysasnthr

370375380

hisvalleuileargasngluthrprotyrthriletyrglythrleu

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aspmetserserleutyrtyrasngluthrmetservalgluasnglu

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420425430

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leupheleuasplysileargasnpheserleuglnleuproalatyr

450455460

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leuasnserleutrptrptrpleugln

485

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<211>567

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>ige前导序列+ul128共有核酸序列

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<211>188

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>ige前导序列+ul128共有氨基酸序列

<400>34

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151015

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202530

leuleuglyhisserargvalproargvalargalagluglucyscys

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cystyrserproglulysthralagluileargglyilevalthrthr

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metthrhisserleuthrargglnvalvalhisasnlysleuthrser

100105110

cysasntyrasnproleutyrleuglualaaspglyargileargcys

115120125

glylysvalasnasplysalaglntyrleuleuglyalaalaglyser

130135140

valprotyrargtrpileasnleuglutyrasplysilethrargile

145150155160

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165170175

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180185

<210>35

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<212>dna

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<220>

<223>ige前导序列+ul130共有核酸序列

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<211>231

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>ige前导序列+ul130共有氨基酸序列

<400>36

metasptrpthrtrpileleupheleuvalalaalaalathrargval

151015

hisserleuargleuleuleuarghishisphehiscysleuleuleu

202530

cysalavaltrpalathrprocysleualaserprotrpserthrleu

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100105110

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115120125

trptyrleuserglyargasnglnthrileleuglnargmetproarg

130135140

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145150155160

alalysilepheglyalahismetvalprolysglnthrlysleuleu

165170175

argphevalvalasnaspglythrargtyrglnmetcysvalmetlys

180185190

leuglusertrpalahisvalpheargasptyrservalserphegln

195200205

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thrhisproasnleuileval

225230

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<212>dna

<213>人工序列

<220>

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<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>ige前导序列+ul131a共有氨基酸序列

<400>38

metasptrpthrtrpileleupheleuvalalaalaalathrargval

151015

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505560

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ileasnvalthrgluvalserleuleuileserasppheargarggln

100105110

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115120125

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130135140

alaasn

145

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<213>人工序列

<220>

<223>ige前导序列+ul83共有核酸序列

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ggatcagaggtcgaaaatgtgagcgtcaacgtgcacaatcccacaggcaggagtatctgt360

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<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>ige前导序列+ul83共有氨基酸序列

<400>40

metasptrpthrtrpileleupheleuvalalaalaalathrargval

151015

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202530

glyproileserglyhisvalleulysalavalpheserargglyasp

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thrprovalleuprohisgluthrargleuleuglnthrglyilehis

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valargvalserglnproserleuileleuvalserglntyrthrpro

65707580

aspserthrprocyshisargglyaspasnglnleuglnvalglnhis

859095

thrtyrphethrglysergluvalgluasnvalservalasnvalhis

100105110

asnprothrglyargserilecysproserglngluprometserile

115120125

tyrvaltyralaleuproleulysmetleuasnileproserileasn

130135140

valhishistyrproseralaalagluarglyshisarghisleupro

145150155160

valalaaspalavalilehisalaserglylysglnmettrpglnala

165170175

argleuthrvalserglyleualatrpthrargglnglnasnglntrp

180185190

lysgluproaspvaltyrtyrthrseralaphevalpheprothrlys

195200205

aspvalalaleuarghisvalvalcysalahisgluleuvalcysser

210215220

metgluasnthrargalathrlysmetglnvalileglyaspglntyr

225230235240

vallysvaltyrleugluserphecysgluaspvalproserglylys

245250255

leuphemethisvalthrleuglyseraspvalglugluaspleuthr

260265270

metthrargasnproglnprophemetargprohisgluargasngly

275280285

phethrvalleucysprolysasnmetileilelysproglylysile

290295300

serhisilemetleuaspvalalaphethrserhisgluhisphegly

305310315320

leuleucysprolysserileproglyleuserileserglyasnleu

325330335

leumetasnglyglnglnilepheleugluvalglnalaileargglu

340345350

thrvalgluleuargglntyraspprovalalaalaleuphephephe

355360365

aspileaspleuleuleuglnargglyproglntyrsergluhispro

370375380

thrphethrserglntyrargileglnglylysleuglutyrarghis

385390395400

thrtrpasparghisaspgluglyalaalaglnglyaspaspaspval

405410415

trpthrserglyseraspseraspglugluleuvalthrthrgluarg

420425430

lysthrproargvalthrglyglyglyalametalaglyalaserthr

435440445

seralaglyarglysarglysseralaserseralathralacysthr

450455460

alaglyvalmetthrargglyargleulysalagluserthrvalala

465470475480

proglugluaspthraspgluaspseraspasngluilehisasnpro

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alavalphethrtrpproprotrpglnalaglyileleualaargasn

500505510

leuvalprometvalalathrvalglnglyglnasnleulystyrgln

515520525

gluphephetrpaspalaasnaspiletyrargilephealagluleu

530535540

gluglyvaltrpglnproalaalaglnprolysargargarghisarg

545550555560

glnaspalaleuproglyprocysilealaserthrprolyslyshis

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arggly

<210>41

<211>2802

<212>dna

<213>人工序列

<220>

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seralathrhisserhishisserserhisthrthrseralaalahis

505560

serargserglyservalserserglnargvalthrsersergluala

65707580

valserhisargalaasngluthriletyrasnthrthrleulystyr

859095

glyaspvalvalglyvalasnthrthrlystyrprotyrargvalcys

100105110

sermetalaglnglythraspleuileargphegluargasnileval

115120125

cysthrsermetlysproileasngluaspleuaspgluglyilemet

130135140

valvaltyrlysargasnilevalalahisthrphelysvalargval

145150155160

tyrglnlysvalleuthrpheargargsertyralatyrilehisthr

165170175

thrtyrleuleuglyserasnthrglutyrvalalapropromettrp

180185190

gluilehishisileasnserhisserglncystyrsersertyrser

195200205

argvalilealaglythrvalphevalalatyrhisargaspsertyr

210215220

gluasnlysthrmetglnleumetproaspasptyrserasnthrhis

225230235240

serthrargtyrvalthrvallysaspglntrphisserargglyser

245250255

thrtrpleutyrarggluthrcysasnleuasncysmetvalthrile

260265270

thrthralaargserlystyrprotyrhisphephealathrserthr

275280285

glyaspvalvalaspileserprophetyrasnglythrasnargasn

290295300

alasertyrpheglygluasnalaasplysphepheilepheproasn

305310315320

tyrthrilevalserasppheglyargproasnseralaleugluthr

325330335

hisargleuvalalapheleugluargalaaspservalilesertrp

340345350

aspileglnaspglulysasnvalthrcysglnleuthrphetrpglu

355360365

alasergluargthrileargserglualagluaspsertyrhisphe

370375380

serseralalysmetthralathrpheleuserlyslysglngluval

385390395400

asnmetseraspseralaleuaspcysvalargaspglualaileasn

405410415

lysleuglnglnilepheasnthrsertyrasnglnthrtyrglulys

420425430

tyrglyasnvalservalphegluthrthrglyglyleuvalvalphe

435440445

trpglnglyilelysglnlysserleuvalgluleugluargleuala

450455460

asnargserserleuasnleuthrhisargthrlysargserthrasp

465470475480

glyasnasnthrthrhisleuserasnmetgluservalhisasnleu

485490495

valtyralaglnleuglnphethrtyraspthrleuargglytyrile

500505510

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metleuleuileserilethrpheleuleuleuserleuileasncys

354045

asnvalleuvalasnserlysglythrargargsertrpprotyrthr

505560

valleusertyrargglylysgluileleulyslysglnlysgluasp

65707580

ileleulysargleumetserthrserseraspglytyrargpheleu

859095

mettyrproserglnglnlysphehisalailevalilesermetasp

100105110

lyspheproglnasptyrileleualaglyproileargasnaspser

115120125

ilethrhismettrppheaspphetyrserthrglnleuarglyspro

130135140

alalystyrvaltyrserglutyrasnhisthralahislysilethr

145150155160

leuargproproprocysglythrvalprosermetasncysleuser

165170175

glumetleuasnvalserlysargasnaspthrglyglulysglycys

180185190

glyasnphethrthrpheasnprometphepheasnvalproargtrp

195200205

asnthrlysleutyrileglyserasnlysvalasnvalaspsergln

210215220

thriletyrpheleuglyleuthralaleuleuleuargtyralagln

225230235240

argasncysthrargserphetyrleuvalasnalametserargasn

245250255

leupheargvalprolystyrileasnglythrlysleulysasnthr

260265270

metarglysleulysarglysglnalaleuvallysgluglnprogln

275280285

lyslysasnlyslysserglnserthrthrthrprotyrleusertyr

290295300

thrthrserthralapheasnvalthrthrasnvalthrtyrserala

305310315320

thralaalavalthrargvalalathrserthrthrglytyrargpro

325330335

aspserasnphemetlysserilemetalathrglnleuargaspleu

340345350

alathrtrpvaltyrthrthrleuargtyrargasngluprophecys

355360365

lysproaspargasnargthralavalsergluphemetlysasnthr

370375380

hisvalleuileargasngluthrprotyrthriletyrglythrleu

385390395400

aspmetserserleutyrtyrasngluthrmetservalgluasnglu

405410415

thralaseraspasnasngluthrthrprothrserproserthrarg

420425430

pheglnargthrpheileaspproleutrpasptyrleuaspserleu

435440445

leupheleuasplysileargasnpheserleuglnleuproalatyr

450455460

glyasnleuthrproprogluhisargargalaalaasnleuserthr

465470475480

leuasnserleutrptrptrpleuglntyrprotyraspvalproasp

485490495

tyrala

<210>53

<211>594

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>ige前导序列+ul128共有序列+ha标签核酸序列

<400>53

atggattggacctggatcctgtttctggtggccgctgcaacaagggtccactctagcccc60

aaggatctgacccctttcctgaccgccctgtggctgctcctgggccacagcagagtgcct120

agagtgcgggccgaggaatgctgcgagttcatcaacgtgaaccacccccccgagcggtgc180

tacgacttcaagatgtgcaaccggttcaccgtggctctgagatgccccgacggcgaagtg240

tgctacagccccgagaaaaccgccgagatccggggcatcgtgaccaccatgacccacagc300

ctgaccagacaggtggtgcataacaagctgaccagttgcaactacaaccccctgtacctg360

gaagccgacggccggatcagatgcggcaaagtgaacgacaaggcccagtacctgctgggc420

gctgcaggcagtgtgccctacagatggatcaacctggaatacgacaagatcacccggatc480

gtgggcctggaccagtacctggaaagcgtgaagaagcacaagcggctggacgtgtgccgg540

gccaagatgggctacatgctgcagtacccatatgacgtccccgattacgcttga594

<210>54

<211>197

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>ige前导序列+ul128共有序列+ha标签氨基酸序列

<400>54

metasptrpthrtrpileleupheleuvalalaalaalathrargval

151015

hisserserprolysaspleuthrpropheleuthralaleutrpleu

202530

leuleuglyhisserargvalproargvalargalagluglucyscys

354045

glupheileasnvalasnhisproprogluargcystyraspphelys

505560

metcysasnargphethrvalalaleuargcysproaspglygluval

65707580

cystyrserproglulysthralagluileargglyilevalthrthr

859095

metthrhisserleuthrargglnvalvalhisasnlysleuthrser

100105110

cysasntyrasnproleutyrleuglualaaspglyargileargcys

115120125

glylysvalasnasplysalaglntyrleuleuglyalaalaglyser

130135140

valprotyrargtrpileasnleuglutyrasplysilethrargile

145150155160

valglyleuaspglntyrleugluservallyslyshislysargleu

165170175

aspvalcysargalalysmetglytyrmetleuglntyrprotyrasp

180185190

valproasptyrala

195

<210>55

<211>723

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>ige前导序列+ul130共有序列+ha标签核酸序列

<400>55

atggactggacctggatcctgttcctggtcgccgctgctacccgggtgcacagcctgcgg60

ctgctgctgcggcaccacttccactgcctgctgctgtgtgccgtgtgggccaccccttgt120

ctggccagcccttggagcaccctgaccgccaaccagaaccctagccccccctggtccaag180

ctgacctacagcaagccccacgacgccgctaccttctactgcccattcctgtaccccagc240

cctcccagaagccccctgcagttcagcggcttccagcgggtgtccaccggccctgagtgc300

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aacgacggcaccagataccagatgtgcgtgatgaagctggaaagctgggcccacgtgttc600

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tga723

<210>56

<211>240

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>ige前导序列+ul130共有序列+ha标签氨基酸序列

<400>56

metasptrpthrtrpileleupheleuvalalaalaalathrargval

151015

hisserleuargleuleuleuarghishisphehiscysleuleuleu

202530

cysalavaltrpalathrprocysleualaserprotrpserthrleu

354045

thralaasnglnasnproserproprotrpserlysleuthrtyrser

505560

lysprohisaspalaalathrphetyrcyspropheleutyrproser

65707580

proproargserproleuglnpheserglypheglnargvalserthr

859095

glyproglucysargasngluthrleutyrleuleutyrasnargglu

100105110

glyglnthrleuvalgluargserserthrtrpvallyslysvalile

115120125

trptyrleuserglyargasnglnthrileleuglnargmetproarg

130135140

thralaserlysproseraspglyasnvalglnileservalgluasp

145150155160

alalysilepheglyalahismetvalprolysglnthrlysleuleu

165170175

argphevalvalasnaspglythrargtyrglnmetcysvalmetlys

180185190

leuglusertrpalahisvalpheargasptyrservalserphegln

195200205

valargleuthrphethrglualaasnasnglnthrtyrthrphecys

210215220

thrhisproasnleuilevaltyrprotyraspvalproasptyrala

225230235240

<210>57

<211>468

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>ige前导序列+ul131a共有序列+ha标签核酸序列

<400>57

atggactggacctggatcctgttcctggtcgccgctgctacccgggtgcacagcagactg60

tgcagagtgtggctgagcgtgtgcctgtgcgccgtggtgctgggccagtgccagagagag120

acagccgagaagaacgactactaccgggtgccccactactgggacgcctgctctagagcc180

ctgcccgaccagacccggtacaaatacgtggaacagctggtggacctgaccctgaactac240

cactacgacgccagccacggcctggacaacttcgacgtgctgaagcggatcaacgtgacc300

gaggtgtccctgctgatcagcgacttccggcggcagaacagaagaggcggcaccaacaag360

cggactaccttcaacgccgctggcagcctggcccctcacgccagatccctggaattcagc420

gtgcggctgttcgccaactatccgtacgacgtcccagactacgcctga468

<210>58

<211>155

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>ige前导序列+ul131a共有序列+ha标签氨基酸序列

<400>58

metasptrpthrtrpileleupheleuvalalaalaalathrargval

151015

hisserargleucysargvaltrpleuservalcysleucysalaval

202530

valleuglyglncysglnarggluthralaglulysasnasptyrtyr

354045

argvalprohistyrtrpaspalacysserargalaleuproaspgln

505560

thrargtyrlystyrvalgluglnleuvalaspleuthrleuasntyr

65707580

histyraspalaserhisglyleuaspasnpheaspvalleulysarg

859095

ileasnvalthrgluvalserleuleuileserasppheargarggln

100105110

asnargargglyglythrasnlysargthrthrpheasnalaalagly

115120125

serleualaprohisalaargserleuglupheservalargleuphe

130135140

alaasntyrprotyraspvalproasptyrala

145150155

<210>59

<211>1764

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>ige前导序列+ul83共有序列+ha标签核酸序列

<400>59

atggattggacctggatcctgtttctggtggccgctgcaacaagggtccactctgagagt60

cgcgggcggagatgccctgaaatgatcagcgtgctgggcccaatttccgggcatgtgctg120

aaggccgtcttctcccgcggagacacccccgtgctgcctcacgagacaagactgctgcag180

actggcatccatgtgagggtctcccagccatctctgattctggtgtctcagtacacccca240

gatagtacaccctgccacagaggggacaaccagctgcaggtgcagcatacctacttcacc300

ggatcagaggtcgaaaatgtgagcgtcaacgtgcacaatcccacaggcaggagtatctgt360

ccttcacaggagccaatgagcatctacgtgtacgccctgcccctgaaaatgctgaacatc420

cctagcattaatgtgcaccattacccctccgccgctgaacgaaagcaccggcatctgcct480

gtggcagatgccgtcatccatgcttcaggcaaacagatgtggcaggcacgactgaccgtg540

agcggactggcatggacacgacagcagaaccagtggaaggagccagacgtgtactatact600

agcgccttcgtgttccccaccaaagacgtggccctgcgacacgtggtctgcgcacatgag660

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gtcaaagtgtatctggagtccttttgtgaagacgtgccctctgggaagctgttcatgcac780

gtgaccctgggaagcgatgtcgaggaagacctgactatgacccggaacccacagcccttt840

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cccgggaaaatctctcatattatgctggatgtggcctttacaagtcacgagcatttcgga960

ctgctgtgccccaaaagcatccctgggctgtcaattagcggaaacctgctgatgaatggc1020

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ccagtggcagccctgttctttttcgatatcgacctgctgctgcagagaggccctcagtat1140

agtgagcacccaacattcacttcacagtacaggattcaggggaagctggagtatcggcac1200

acttgggatagacatgacgaaggagctgcacagggcgacgatgacgtgtggacctccggc1260

tctgatagtgacgaggaactggtgaccacagagcgaaaaactccccgggtgaccggagga1320

ggagctatggcaggagcatcaaccagcgccggacgaaagagaaaaagcgccagcagcgcc1380

acagcatgcactgcaggcgtgatgacaagggggcgcctgaaggcagaatccacagtcgcc1440

cctgaggaagatactgacgaggattctgacaacgaaatccacaatccagccgtgttcacc1500

tggccaccttggcaggcaggaattctggctcgcaatctggtccctatggtggccactgtc1560

cagggacagaacctgaagtaccaggagtttttctgggatgctaatgacatctatcggatt1620

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caggacgcactgcctggaccatgtatcgcctccaccccaaagaaacataggggctaccct1740

tacgatgtgcctgattatgcctga1764

<210>60

<211>587

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>ige前导序列+ul83共有序列+ha标签氨基酸序列

<400>60

metasptrpthrtrpileleupheleuvalalaalaalathrargval

151015

hissergluserargglyargargcysproglumetileservalleu

202530

glyproileserglyhisvalleulysalavalpheserargglyasp

354045

thrprovalleuprohisgluthrargleuleuglnthrglyilehis

505560

valargvalserglnproserleuileleuvalserglntyrthrpro

65707580

aspserthrprocyshisargglyaspasnglnleuglnvalglnhis

859095

thrtyrphethrglysergluvalgluasnvalservalasnvalhis

100105110

asnprothrglyargserilecysproserglngluprometserile

115120125

tyrvaltyralaleuproleulysmetleuasnileproserileasn

130135140

valhishistyrproseralaalagluarglyshisarghisleupro

145150155160

valalaaspalavalilehisalaserglylysglnmettrpglnala

165170175

argleuthrvalserglyleualatrpthrargglnglnasnglntrp

180185190

lysgluproaspvaltyrtyrthrseralaphevalpheprothrlys

195200205

aspvalalaleuarghisvalvalcysalahisgluleuvalcysser

210215220

metgluasnthrargalathrlysmetglnvalileglyaspglntyr

225230235240

vallysvaltyrleugluserphecysgluaspvalproserglylys

245250255

leuphemethisvalthrleuglyseraspvalglugluaspleuthr

260265270

metthrargasnproglnprophemetargprohisgluargasngly

275280285

phethrvalleucysprolysasnmetileilelysproglylysile

290295300

serhisilemetleuaspvalalaphethrserhisgluhisphegly

305310315320

leuleucysprolysserileproglyleuserileserglyasnleu

325330335

leumetasnglyglnglnilepheleugluvalglnalaileargglu

340345350

thrvalgluleuargglntyraspprovalalaalaleuphephephe

355360365

aspileaspleuleuleuglnargglyproglntyrsergluhispro

370375380

thrphethrserglntyrargileglnglylysleuglutyrarghis

385390395400

thrtrpasparghisaspgluglyalaalaglnglyaspaspaspval

405410415

trpthrserglyseraspseraspglugluleuvalthrthrgluarg

420425430

lysthrproargvalthrglyglyglyalametalaglyalaserthr

435440445

seralaglyarglysarglysseralaserseralathralacysthr

450455460

alaglyvalmetthrargglyargleulysalagluserthrvalala

465470475480

proglugluaspthraspgluaspseraspasngluilehisasnpro

485490495

alavalphethrtrpproprotrpglnalaglyileleualaargasn

500505510

leuvalprometvalalathrvalglnglyglnasnleulystyrgln

515520525

gluphephetrpaspalaasnaspiletyrargilephealagluleu

530535540

gluglyvaltrpglnproalaalaglnprolysargargarghisarg

545550555560

glnaspalaleuproglyprocysilealaserthrprolyslyshis

565570575

argglytyrprotyraspvalproasptyrala

580585

<210>61

<211>18

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>ige前导序列氨基酸序列

<400>61

metasptrpthrtrpileleupheleuvalalaalaalathrargval

151015

hisser

<210>62

<211>9

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>ha标签氨基酸序列

<400>62

tyrprotyraspvalproasptyrala

15

<210>63

<211>7

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>弗林蛋白酶分裂位点氨基酸序列

<400>63

argglyarglysargargser

15

<210>64

<211>1650

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>质粒2插入物-ige前导序列+gm共有序列+ha标签+弗林蛋白酶+

gn共有序列-ha标签核酸序列

<400>64

atggattggacctggatcctgttcctggtggccgctgctacccgggtccacagtgcaccc60

agccacgtggacaaagtgaacacccggacttggagcgccagcatcgtgttcatggtgctg120

accttcgtgaatgtgtccgtccacctggtgctgagcaacttcccccacctgggctacccc180

tgcgtgtactaccacgtggtggacttcgagcggctgaacatgagcgcctacaacgtgatg240

catctgcacacccccatgctgtttctggacagcgtgcagctcgtgtgctacgccgtgttt300

atgcagctggtgttcctggccgtgaccatctactacctcgtgtgctggatcaagatttct360

atgcggaaggacaagggcatgagcctgaaccagagcacccgggacatcagctacatgggc420

gacagcctgaccgccttcctgttcatcctgagcatggacaccttccagctgttcaccctg480

accatgagcttccggctgcccagcatgatcgcctttatggccgccgtccacttcttctgt540

ctgaccatcttcaacgtgtccatggtcacccagtacagaagctacaagcggagcctgttc600

ttcttcagtcggctgcaccccaagctgaagggcaccgtccagttccggaccctgatcgtg660

aacctggtggaagtggccctgggcttcaacaccaccgtggtggctatggctctgtgctac720

ggcttcggcaacaacttcttcgtgcggacaggccacatggtgctggccgtgttcgtggtg780

tacgccattatcagcatcatctactttctgctgatcgaggccgtgttcttccagtacgtg840

aaggtgcagttcggctaccacctgggcgcctttttcggcctgtgcggcctgatctacccc900

atcgtgcagtacgacaccttcctgagcaacgagtaccggaccggcatcagctggtccttc960

ggcatgctgttcttcatctgggccatgttcaccacctgtcgggccgtgcggtacttcaga1020

ggcagaggcagcggctccgtgaagtaccaggccctggccacagccagcggcgaagaagtg1080

gccgccctgagccaccacgacagcctggaaagcagacggctgagagaggaagaggacgac1140

gacgacgatgaggacttcgaggacgcctacccctacgacgtgcccgactatgcccgcggc1200

agaaagcggagatctgagtggaacaccctggtgctgggtctgctggtgctgtctgtggcc1260

gccagcagcaacaacaccagcactgccagcacccccagccctagcagcagcacccacacc1320

tccaccaccgtgaaggccaccaccaccgccaccacaagcaccacaacagccaccagcacc1380

acctcttccaccaccagcacaaagcccggcagcaccactcacgaccccaacgtgatgagg1440

ccccacgcccacaacgacttctacaaggcccactgcaccagccatatgtacgagctgagc1500

ctgagcagcttcgccgcctggtggaccatgctgaacgccctgatcctgatgggcgccttc1560

tgcatcgtgctgcggcactgctgcttccagaacttcaccgccacaaccaccaagggctac1620

tacccttacgatgtgcctgattatgcctga1650

<210>65

<211>549

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>质粒2氨基酸序列-ige前导序列+gm共有序列+ha

标签+弗林蛋白酶+gn共有序列+ha标签氨基酸序列

<400>65

metasptrpthrtrpileleupheleuvalalaalaalathrargval

151015

hisseralaproserhisvalasplysvalasnthrargthrtrpser

202530

alaserilevalphemetvalleuthrphevalasnvalservalhis

354045

leuvalleuserasnpheprohisleuglytyrprocysvaltyrtyr

505560

hisvalvalaspphegluargleuasnmetseralatyrasnvalmet

65707580

hisleuhisthrprometleupheleuaspservalglnleuvalcys

859095

tyralavalphemetglnleuvalpheleualavalthriletyrtyr

100105110

leuvalcystrpilelysilesermetarglysasplysglymetser

115120125

leuasnglnserthrargaspilesertyrmetglyaspserleuthr

130135140

alapheleupheileleusermetaspthrpheglnleuphethrleu

145150155160

thrmetserpheargleuprosermetilealaphemetalaalaval

165170175

hisphephecysleuthrilepheasnvalsermetvalthrglntyr

180185190

argsertyrlysargserleuphephepheserargleuhisprolys

195200205

leulysglythrvalglnpheargthrleuilevalasnleuvalglu

210215220

valalaleuglypheasnthrthrvalvalalametalaleucystyr

225230235240

glypheglyasnasnphephevalargthrglyhismetvalleuala

245250255

valphevalvaltyralaileileserileiletyrpheleuleuile

260265270

glualavalphepheglntyrvallysvalglnpheglytyrhisleu

275280285

glyalaphepheglyleucysglyleuiletyrproilevalglntyr

290295300

aspthrpheleuserasnglutyrargthrglyilesertrpserphe

305310315320

glymetleuphepheiletrpalametphethrthrcysargalaval

325330335

argtyrpheargglyargglyserglyservallystyrglnalaleu

340345350

alathralaserglyglugluvalalaalaleuserhishisaspser

355360365

leugluserargargleuarggluglugluaspaspaspaspaspglu

370375380

aspphegluaspalatyrprotyraspvalproasptyralaarggly

385390395400

arglysargargserglutrpasnthrleuvalleuglyleuleuval

405410415

leuservalalaalaserserasnasnthrserthralaserthrpro

420425430

serproserserserthrhisthrserthrthrvallysalathrthr

435440445

thralathrthrserthrthrthralathrserthrthrserserthr

450455460

thrserthrlysproglyserthrthrhisaspproasnvalmetarg

465470475480

prohisalahisasnaspphetyrlysalahiscysthrserhismet

485490495

tyrgluleuserleuserserphealaalatrptrpthrmetleuasn

500505510

alaleuileleumetglyalaphecysilevalleuarghiscyscys

515520525

pheglnasnphethralathrthrthrlysglytyrtyrprotyrasp

530535540

valproasptyrala

545

<210>66

<211>3189

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>质粒3插入物-ige前导序列+gh共有序列+ha标签+弗林蛋白酶+

gl共有序列+ha标签核酸序列

<400>66

atggactggacctggatcctgttcctggtggccgctgctacccgggtgcacagtcgaccc60

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agcagcctgcggaacagcaccgtcgtgcgcgagaatgctatcagcttcaacttcttccag300

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aatacctacgccctggtgtccaaggacctggccagctaccggtccttcagccagcagctg480

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tatgcctga3189

<210>67

<211>1062

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>质粒3氨基酸序列-ige前导序列+gh共有序列+ha

标签+弗林蛋白酶+gl共有序列+ha标签氨基酸序列

<400>67

metasptrpthrtrpileleupheleuvalalaalaalathrargval

151015

hisserargproglyleuprosertyrleuthrvalphealavaltyr

202530

leuleuserhisleuproserglnargtyrglyalaaspalaalaser

354045

glualaleuaspprohisalaphehisleuleuleuasnthrtyrgly

505560

argproileargpheleuarggluasnthrthrglncysthrtyrasn

65707580

serserleuargasnserthrvalvalarggluasnalaileserphe

859095

asnphepheglnsertyrasnglntyrtyrvalphehismetproarg

100105110

cysleuphealaglyproleualagluglnpheleuasnglnvalasp

115120125

leuthrgluthrleugluargtyrglnglnargleuasnthrtyrala

130135140

leuvalserlysaspleualasertyrargserpheserglnglnleu

145150155160

lysalaglnaspserleuglygluglnprothrthrvalpropropro

165170175

ileaspleuserileprohisvaltrpmetproproglnthrthrpro

180185190

hisglytrplysgluserhisthrthrserglyleuhisargprohis

195200205

pheasnglnthrcysileleupheaspglyhisaspleuleupheser

210215220

thrvalthrprocysleuhisglnglyphetyrleuileaspgluleu

225230235240

argtyrvallysilethrleuthrgluaspphephevalvalthrval

245250255

serileaspaspaspthrprometleuleuilepheglyhisleupro

260265270

argvalleuphelysalaprotyrglnargaspasnpheileleuarg

275280285

glnthrglulyshisgluleuleuvalleuvallyslysaspglnleu

290295300

asnarghissertyrleulysaspproasppheleuaspalaalaleu

305310315320

asppheasntyrleuaspleuseralaleuleuargasnserphehis

325330335

argtyralavalaspvalleulysserglyargcysglnmetleuasp

340345350

argargthrvalglumetalaphealatyralaleualaleupheala

355360365

alaalaargglngluglualaglyalagluvalservalproargala

370375380

leuaspargglnalaalaleuleuglnileglngluphemetilethr

385390395400

cysleuserglnthrproproargthrthrleuleuleutyrprothr

405410415

alavalaspleualalysargalaleutrpthrproasnglnilethr

420425430

aspilethrserleuvalargleuvaltyrileleuserlysglnasn

435440445

glnglnhisleuileproglntrpalaleuargglnilealaaspphe

450455460

alaleulysleuhislysthrhisleualaserpheleuseralaphe

465470475480

alaargglngluleutyrleumetglyserleuvalhissermetleu

485490495

valhisthrthrgluargarggluilepheilevalgluthrglyleu

500505510

cysserleualagluleuserhisphethrglnleuleualahispro

515520525

hishisglutyrleuseraspleutyrthrprocyssersersergly

530535540

argargasphisserleugluargleuthrargleupheproaspala

545550555560

thrvalproalathrvalproalaalaleuserileleuserthrmet

565570575

glnproserthrleugluthrpheproaspleuphecysleuproleu

580585590

glygluserpheseralaleuthrvalsergluhisvalsertyrval

595600605

valthrasnglntyrleuilelysglyilesertyrprovalserthr

610615620

thrvalvalglyglnserleuileilethrglnthraspserglnthr

625630635640

lyscysgluleuthrargasnmethisthrthrhisserilethrala

645650655

alaleuasnileserleugluasncysalaphecysglnseralaleu

660665670

leuglutyraspaspthrglnglyvalileasnilemettyrmethis

675680685

aspseraspaspvalleuphealaleuaspprotyrasngluvalval

690695700

valserserproargthrhistyrleumetleuleulysasnglythr

705710715720

valleugluvalthraspvalvalvalaspalathraspserargleu

725730735

leumetmetservaltyralaleuseralaileileglyiletyrleu

740745750

leutyrargmetleulysthrcystyrprotyraspvalproasptyr

755760765

alaargglyarglysargargsercysargargproaspcysglyphe

770775780

serpheserproglyprovalileleuleutrpcyscysleuleuleu

785790795800

proilevalserseralaalavalservalalaprothralaalaglu

805810815

lysvalproalaglucysprogluleuthrargargcysleuleugly

820825830

gluvalpheglnglyasplystyrglusertrpleuargproleuval

835840845

asnvalthrglyargaspglyproleuserglnleuileargtyrarg

850855860

provalthrproglualaalaasnservalleuleuaspglualaphe

865870875880

leuaspthrleualaleuleutyrasnasnproaspglnleuargala

885890895

leuleuthrleuleuserseraspthralaproargtrpmetthrval

900905910

metargglytyrserglucysglyaspglyserproalavaltyrthr

915920925

cysvalaspaspleucysargglytyraspleuthrargleusertyr

930935940

glyargserilephethrgluhisvalleuglyphegluleuvalpro

945950955960

proserleupheasnvalvalvalalaileargasnglualathrarg

965970975

thrasnargalavalargleuprovalserthralaalaalaproglu

980985990

glyilethrleuphetyrglyleutyrasnalavallysgluphecys

99510001005

leuarghisglnleuaspproproleuleuarghisleuasplys

101010151020

tyrtyralaglyleuproprogluleulysglnthrargvalasn

102510301035

leuproalahisserargtyrglyproglnalavalaspalaarg

104010451050

tyrprotyraspvalproasptyrala

10551060

<210>68

<211>1713

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>质粒5插入物-ige前导序列+ul131a共有序列+ha标签+弗林蛋白酶

+ul130共有序列+ha标签+弗林蛋白酶+ul128共有序列+ha标签

核酸序列

<400>68

atggactggacctggatcctgttcctggtcgccgctgctacccgggtgcacagcagactg60

tgcagagtgtggctgagcgtgtgcctgtgcgccgtggtgctgggccagtgccagagagag120

acagccgagaagaacgactactaccgggtgccccactactgggacgcctgctctagagcc180

ctgcccgaccagacccggtacaaatacgtggaacagctggtggacctgaccctgaactac240

cactacgacgccagccacggcctggacaacttcgacgtgctgaagcggatcaacgtgacc300

gaggtgtccctgctgatcagcgacttccggcggcagaacagaagaggcggcaccaacaag360

cggactaccttcaacgccgctggcagcctggcccctcacgccagatccctggaattcagc420

gtgcggctgttcgccaactatccgtacgacgtcccagactacgccagaggccggaagcgg480

agatctctgcggctgctgctgcggcaccacttccactgcctgctgctgtgtgccgtgtgg540

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ccctggtccaagctgacctacagcaagccccacgacgccgctaccttctactgcccattc660

ctgtaccccagccctcccagaagccccctgcagttcagcggcttccagcgggtgtccacc720

ggccctgagtgccggaacgagacactgtacctgctgtacaaccgcgagggccagaccctg780

gtggaacggtctagcacctgggtcaagaaagtgatctggtatctgagcggccggaaccag840

accatcctgcagcggatgcctcggaccgccagcaagcctagcgacggcaacgtgcagatc900

agcgtggaagatgccaaaatcttcggcgcccacatggtgcccaagcagaccaagctgctg960

agattcgtggtcaacgacggcaccagataccagatgtgcgtgatgaagctggaaagctgg1020

gcccacgtgttccgggactacagcgtgtcattccaggtccgactgaccttcaccgaggcc1080

aacaaccagacctacaccttctgcacccaccccaacctgatcgtctacccttacgacgtg1140

ccagattatgccaggggcagaaaaaggaggagcagccccaaggatctgacccctttcctg1200

accgccctgtggctgctcctgggccacagcagagtgcctagagtgcgggccgaggaatgc1260

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aacaagctgaccagttgcaactacaaccccctgtacctggaagccgacggccggatcaga1500

tgcggcaaagtgaacgacaaggcccagtacctgctgggcgctgcaggcagtgtgccctac1560

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gaaagcgtgaagaagcacaagcggctggacgtgtgccgggccaagatgggctacatgctg1680

cagtacccatatgacgtccccgattacgcttga1713

<210>69

<211>570

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>质粒5氨基酸序列-ige前导序列+ul131a共有序列+

ha标签+弗林蛋白酶+ul130共有序列+ha标签+弗林蛋白酶+ul128

共有序列+ha标签

<400>69

metasptrpthrtrpileleupheleuvalalaalaalathrargval

151015

hisserargleucysargvaltrpleuservalcysleucysalaval

202530

valleuglyglncysglnarggluthralaglulysasnasptyrtyr

354045

argvalprohistyrtrpaspalacysserargalaleuproaspgln

505560

thrargtyrlystyrvalgluglnleuvalaspleuthrleuasntyr

65707580

histyraspalaserhisglyleuaspasnpheaspvalleulysarg

859095

ileasnvalthrgluvalserleuleuileserasppheargarggln

100105110

asnargargglyglythrasnlysargthrthrpheasnalaalagly

115120125

serleualaprohisalaargserleuglupheservalargleuphe

130135140

alaasntyrprotyraspvalproasptyralaargglyarglysarg

145150155160

argserleuargleuleuleuarghishisphehiscysleuleuleu

165170175

cysalavaltrpalathrprocysleualaserprotrpserthrleu

180185190

thralaasnglnasnproserproprotrpserlysleuthrtyrser

195200205

lysprohisaspalaalathrphetyrcyspropheleutyrproser

210215220

proproargserproleuglnpheserglypheglnargvalserthr

225230235240

glyproglucysargasngluthrleutyrleuleutyrasnargglu

245250255

glyglnthrleuvalgluargserserthrtrpvallyslysvalile

260265270

trptyrleuserglyargasnglnthrileleuglnargmetproarg

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thralaserlysproseraspglyasnvalglnileservalgluasp

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alalysilepheglyalahismetvalprolysglnthrlysleuleu

305310315320

argphevalvalasnaspglythrargtyrglnmetcysvalmetlys

325330335

leuglusertrpalahisvalpheargasptyrservalserphegln

340345350

valargleuthrphethrglualaasnasnglnthrtyrthrphecys

355360365

thrhisproasnleuilevaltyrprotyraspvalproasptyrala

370375380

argglyarglysargargserserprolysaspleuthrpropheleu

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thralaleutrpleuleuleuglyhisserargvalproargvalarg

405410415

alagluglucyscysglupheileasnvalasnhisproprogluarg

420425430

cystyraspphelysmetcysasnargphethrvalalaleuargcys

435440445

proaspglygluvalcystyrserproglulysthralagluilearg

450455460

glyilevalthrthrmetthrhisserleuthrargglnvalvalhis

465470475480

asnlysleuthrsercysasntyrasnproleutyrleuglualaasp

485490495

glyargileargcysglylysvalasnasplysalaglntyrleuleu

500505510

glyalaalaglyservalprotyrargtrpileasnleuglutyrasp

515520525

lysilethrargilevalglyleuaspglntyrleugluservallys

530535540

lyshislysargleuaspvalcysargalalysmetglytyrmetleu

545550555560

glntyrprotyraspvalproasptyrala

565570

<210>70

<211>1596

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>质粒2插入物版本2-ige前导序列+gm共有序列+弗林蛋白酶+

gn共有核酸序列

<400>70

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agccacgtggacaaagtgaacacccggacttggagcgccagcatcgtgttcatggtgctg120

accttcgtgaatgtgtccgtccacctggtgctgagcaacttcccccacctgggctacccc180

tgcgtgtactaccacgtggtggacttcgagcggctgaacatgagcgcctacaacgtgatg240

catctgcacacccccatgctgtttctggacagcgtgcagctcgtgtgctacgccgtgttt300

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atgcggaaggacaagggcatgagcctgaaccagagcacccgggacatcagctacatgggc420

gacagcctgaccgccttcctgttcatcctgagcatggacaccttccagctgttcaccctg480

accatgagcttccggctgcccagcatgatcgcctttatggccgccgtccacttcttctgt540

ctgaccatcttcaacgtgtccatggtcacccagtacagaagctacaagcggagcctgttc600

ttcttcagtcggctgcaccccaagctgaagggcaccgtccagttccggaccctgatcgtg660

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ggcttcggcaacaacttcttcgtgcggacaggccacatggtgctggccgtgttcgtggtg780

tacgccattatcagcatcatctactttctgctgatcgaggccgtgttcttccagtacgtg840

aaggtgcagttcggctaccacctgggcgcctttttcggcctgtgcggcctgatctacccc900

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ggcatgctgttcttcatctgggccatgttcaccacctgtcgggccgtgcggtacttcaga1020

ggcagaggcagcggctccgtgaagtaccaggccctggccacagccagcggcgaagaagtg1080

gccgccctgagccaccacgacagcctggaaagcagacggctgagagaggaagaggacgac1140

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ctggtgctgggtctgctggtgctgtctgtggccgccagcagcaacaacaccagcactgcc1260

agcacccccagccctagcagcagcacccacacctccaccaccgtgaaggccaccaccacc1320

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ggcagcaccactcacgaccccaacgtgatgaggccccacgcccacaacgacttctacaag1440

gcccactgcaccagccatatgtacgagctgagcctgagcagcttcgccgcctggtggacc1500

atgctgaacgccctgatcctgatgggcgccttctgcatcgtgctgcggcactgctgcttc1560

cagaacttcaccgccacaaccaccaagggctactga1596

<210>71

<211>531

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>质粒2氨基酸序列版本2-ige前导序列+gm

共有序列+弗林蛋白酶+gn共有氨基酸序列

<400>71

metasptrpthrtrpileleupheleuvalalaalaalathrargval

151015

hisseralaproserhisvalasplysvalasnthrargthrtrpser

202530

alaserilevalphemetvalleuthrphevalasnvalservalhis

354045

leuvalleuserasnpheprohisleuglytyrprocysvaltyrtyr

505560

hisvalvalaspphegluargleuasnmetseralatyrasnvalmet

65707580

hisleuhisthrprometleupheleuaspservalglnleuvalcys

859095

tyralavalphemetglnleuvalpheleualavalthriletyrtyr

100105110

leuvalcystrpilelysilesermetarglysasplysglymetser

115120125

leuasnglnserthrargaspilesertyrmetglyaspserleuthr

130135140

alapheleupheileleusermetaspthrpheglnleuphethrleu

145150155160

thrmetserpheargleuprosermetilealaphemetalaalaval

165170175

hisphephecysleuthrilepheasnvalsermetvalthrglntyr

180185190

argsertyrlysargserleuphephepheserargleuhisprolys

195200205

leulysglythrvalglnpheargthrleuilevalasnleuvalglu

210215220

valalaleuglypheasnthrthrvalvalalametalaleucystyr

225230235240

glypheglyasnasnphephevalargthrglyhismetvalleuala

245250255

valphevalvaltyralaileileserileiletyrpheleuleuile

260265270

glualavalphepheglntyrvallysvalglnpheglytyrhisleu

275280285

glyalaphepheglyleucysglyleuiletyrproilevalglntyr

290295300

aspthrpheleuserasnglutyrargthrglyilesertrpserphe

305310315320

glymetleuphepheiletrpalametphethrthrcysargalaval

325330335

argtyrpheargglyargglyserglyservallystyrglnalaleu

340345350

alathralaserglyglugluvalalaalaleuserhishisaspser

355360365

leugluserargargleuarggluglugluaspaspaspaspaspglu

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aspphegluaspalaargglyarglysargargserglutrpasnthr

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leuvalleuglyleuleuvalleuservalalaalaserserasnasn

405410415

thrserthralaserthrproserproserserserthrhisthrser

420425430

thrthrvallysalathrthrthralathrthrserthrthrthrala

435440445

thrserthrthrserserthrthrserthrlysproglyserthrthr

450455460

hisaspproasnvalmetargprohisalahisasnaspphetyrlys

465470475480

alahiscysthrserhismettyrgluleuserleuserserpheala

485490495

alatrptrpthrmetleuasnalaleuileleumetglyalaphecys

500505510

ilevalleuarghiscyscyspheglnasnphethralathrthrthr

515520525

lysglytyr

530

<210>72

<211>3135

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>质粒3插入物版本2-ige前导序列+gh共有序列+弗林蛋白酶+

gl共有核酸序列

<400>72

atggactggacctggatcctgttcctggtggccgctgctacccgggtgcacagtcgaccc60

ggcctgcccagctacctgaccgtgttcgccgtgtacctgctgagccatctgcccagccag120

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agcagcctgcggaacagcaccgtcgtgcgcgagaatgctatcagcttcaacttcttccag300

agctacaaccagtactacgtgttccacatgccccggtgcctgttcgccggacctctggcc360

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aatacctacgccctggtgtccaaggacctggccagctaccggtccttcagccagcagctg480

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aaggaccagctgaaccggcactcctacctgaaggaccccgacttcctggacgccgccctg960

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gacgtgctgaagtccggccggtgccagatgctggacagacggaccgtggaaatggccttc1080

gcctatgccctggccctgtttgccgccgctcggcaggaagaggctggcgctgaagtgtcc1140

gtgcccagagccctggacagacaggccgctctgctgcagatccaggaattcatgatcacc1200

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atcgccgacttcgccctgaagctgcacaagacccacctggctagctttctgagcgccttc1440

gctaggcaggaactgtacctgatgggcagcctggtgcactccatgctggtgcacaccacc1500

gagaggcgggaaatcttcatcgtggaaaccggcctgtgcagcctggccgagctgagccac1560

ttcacccagctgctggcccacccccaccacgagtacctgagcgacctgtacaccccctgc1620

agctctagcggcagacgggatcacagcctggaacggctgacccggctgttccccgatgcc1680

acagtgcctgccactgtgccagccgccctgtccatcctgtccaccatgcagcccagcacc1740

ctggaaaccttccccgacctgttctgcctgcccctgggcgagagcttcagcgccctgaca1800

gtgtccgagcacgtgtcctacgtggtcaccaaccagtacctgatcaagggcatcagctac1860

cccgtgtccaccaccgtcgtgggccagagcctgatcatcacccagaccgacagccagacc1920

aagtgcgagctgacccggaacatgcacaccacacacagcatcactgccgccctgaacatc1980

agcctggaaaactgcgccttctgccagtctgccctgctggaatacgacgatacccagggc2040

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aacgaggtggtggtgtccagcccccggacccactacctgatgctgctgaagaacggcacc2160

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gtgtacgccctgagcgccatcatcggcatctacctgctgtaccggatgctgaaaacctgc2280

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gtggacgacctgtgccggggctacgacctgaccagactgagctacggccggtccatcttc2820

acagagcacgtgctgggcttcgagctggtgccccccagcctgttcaatgtggtggtggcc2880

atccggaacgaggccacccggaccaacagagcagtgcggctgcctgtgtccaccgctgct2940

gctccagagggcatcaccctgttctacggcctgtacaacgccgtgaaagagttctgcctg3000

agacaccagctggacccccccctgctgcggcacctggacaagtactacgccggcctgcct3060

cccgagctgaagcagaccagagtgaacctgcccgcccacagcagatacggccctcaggcc3120

gtggacgccagatga3135

<210>73

<211>1044

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>质粒3氨基酸序列版本2-ige前导序列+gh

共有序列+弗林蛋白酶+gl共有核酸序列

<400>73

metasptrpthrtrpileleupheleuvalalaalaalathrargval

151015

hisserargproglyleuprosertyrleuthrvalphealavaltyr

202530

leuleuserhisleuproserglnargtyrglyalaaspalaalaser

354045

glualaleuaspprohisalaphehisleuleuleuasnthrtyrgly

505560

argproileargpheleuarggluasnthrthrglncysthrtyrasn

65707580

serserleuargasnserthrvalvalarggluasnalaileserphe

859095

asnphepheglnsertyrasnglntyrtyrvalphehismetproarg

100105110

cysleuphealaglyproleualagluglnpheleuasnglnvalasp

115120125

leuthrgluthrleugluargtyrglnglnargleuasnthrtyrala

130135140

leuvalserlysaspleualasertyrargserpheserglnglnleu

145150155160

lysalaglnaspserleuglygluglnprothrthrvalpropropro

165170175

ileaspleuserileprohisvaltrpmetproproglnthrthrpro

180185190

hisglytrplysgluserhisthrthrserglyleuhisargprohis

195200205

pheasnglnthrcysileleupheaspglyhisaspleuleupheser

210215220

thrvalthrprocysleuhisglnglyphetyrleuileaspgluleu

225230235240

argtyrvallysilethrleuthrgluaspphephevalvalthrval

245250255

serileaspaspaspthrprometleuleuilepheglyhisleupro

260265270

argvalleuphelysalaprotyrglnargaspasnpheileleuarg

275280285

glnthrglulyshisgluleuleuvalleuvallyslysaspglnleu

290295300

asnarghissertyrleulysaspproasppheleuaspalaalaleu

305310315320

asppheasntyrleuaspleuseralaleuleuargasnserphehis

325330335

argtyralavalaspvalleulysserglyargcysglnmetleuasp

340345350

argargthrvalglumetalaphealatyralaleualaleupheala

355360365

alaalaargglngluglualaglyalagluvalservalproargala

370375380

leuaspargglnalaalaleuleuglnileglngluphemetilethr

385390395400

cysleuserglnthrproproargthrthrleuleuleutyrprothr

405410415

alavalaspleualalysargalaleutrpthrproasnglnilethr

420425430

aspilethrserleuvalargleuvaltyrileleuserlysglnasn

435440445

glnglnhisleuileproglntrpalaleuargglnilealaaspphe

450455460

alaleulysleuhislysthrhisleualaserpheleuseralaphe

465470475480

alaargglngluleutyrleumetglyserleuvalhissermetleu

485490495

valhisthrthrgluargarggluilepheilevalgluthrglyleu

500505510

cysserleualagluleuserhisphethrglnleuleualahispro

515520525

hishisglutyrleuseraspleutyrthrprocyssersersergly

530535540

argargasphisserleugluargleuthrargleupheproaspala

545550555560

thrvalproalathrvalproalaalaleuserileleuserthrmet

565570575

glnproserthrleugluthrpheproaspleuphecysleuproleu

580585590

glygluserpheseralaleuthrvalsergluhisvalsertyrval

595600605

valthrasnglntyrleuilelysglyilesertyrprovalserthr

610615620

thrvalvalglyglnserleuileilethrglnthraspserglnthr

625630635640

lyscysgluleuthrargasnmethisthrthrhisserilethrala

645650655

alaleuasnileserleugluasncysalaphecysglnseralaleu

660665670

leuglutyraspaspthrglnglyvalileasnilemettyrmethis

675680685

aspseraspaspvalleuphealaleuaspprotyrasngluvalval

690695700

valserserproargthrhistyrleumetleuleulysasnglythr

705710715720

valleugluvalthraspvalvalvalaspalathraspserargleu

725730735

leumetmetservaltyralaleuseralaileileglyiletyrleu

740745750

leutyrargmetleulysthrcysargglyarglysargargsercys

755760765

argargproaspcysglypheserpheserproglyprovalileleu

770775780

leutrpcyscysleuleuleuproilevalserseralaalavalser

785790795800

valalaprothralaalaglulysvalproalaglucysprogluleu

805810815

thrargargcysleuleuglygluvalpheglnglyasplystyrglu

820825830

sertrpleuargproleuvalasnvalthrglyargaspglyproleu

835840845

serglnleuileargtyrargprovalthrproglualaalaasnser

850855860

valleuleuaspglualapheleuaspthrleualaleuleutyrasn

865870875880

asnproaspglnleuargalaleuleuthrleuleuserseraspthr

885890895

alaproargtrpmetthrvalmetargglytyrserglucysglyasp

900905910

glyserproalavaltyrthrcysvalaspaspleucysargglytyr

915920925

aspleuthrargleusertyrglyargserilephethrgluhisval

930935940

leuglyphegluleuvalproproserleupheasnvalvalvalala

945950955960

ileargasnglualathrargthrasnargalavalargleuproval

965970975

serthralaalaalaprogluglyilethrleuphetyrglyleutyr

980985990

asnalavallysgluphecysleuarghisglnleuaspproproleu

99510001005

leuarghisleuasplystyrtyralaglyleuproprogluleu

101010151020

lysglnthrargvalasnleuproalahisserargtyrglypro

102510301035

glnalavalaspalaarg

1040

<210>74

<211>1632

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>质粒5插入物版本2-ige前导序列+ul131a共有序列+

弗林蛋白酶+ul130共有序列+弗林蛋白酶+ul128共有核酸序列

<400>74

atggactggacctggatcctgttcctggtcgccgctgctacccgggtgcacagcagactg60

tgcagagtgtggctgagcgtgtgcctgtgcgccgtggtgctgggccagtgccagagagag120

acagccgagaagaacgactactaccgggtgccccactactgggacgcctgctctagagcc180

ctgcccgaccagacccggtacaaatacgtggaacagctggtggacctgaccctgaactac240

cactacgacgccagccacggcctggacaacttcgacgtgctgaagcggatcaacgtgacc300

gaggtgtccctgctgatcagcgacttccggcggcagaacagaagaggcggcaccaacaag360

cggactaccttcaacgccgctggcagcctggcccctcacgccagatccctggaattcagc420

gtgcggctgttcgccaacagaggccggaagcggagatctctgcggctgctgctgcggcac480

cacttccactgcctgctgctgtgtgccgtgtgggccaccccttgtctggccagcccttgg540

agcaccctgaccgccaaccagaaccctagccccccctggtccaagctgacctacagcaag600

ccccacgacgccgctaccttctactgcccattcctgtaccccagccctcccagaagcccc660

ctgcagttcagcggcttccagcgggtgtccaccggccctgagtgccggaacgagacactg720

tacctgctgtacaaccgcgagggccagaccctggtggaacggtctagcacctgggtcaag780

aaagtgatctggtatctgagcggccggaaccagaccatcctgcagcggatgcctcggacc840

gccagcaagcctagcgacggcaacgtgcagatcagcgtggaagatgccaaaatcttcggc900

gcccacatggtgcccaagcagaccaagctgctgagattcgtggtcaacgacggcaccaga960

taccagatgtgcgtgatgaagctggaaagctgggcccacgtgttccgggactacagcgtg1020

tcattccaggtccgactgaccttcaccgaggccaacaaccagacctacaccttctgcacc1080

caccccaacctgatcgtcaggggcagaaaaaggaggagcagccccaaggatctgacccct1140

ttcctgaccgccctgtggctgctcctgggccacagcagagtgcctagagtgcgggccgag1200

gaatgctgcgagttcatcaacgtgaaccacccccccgagcggtgctacgacttcaagatg1260

tgcaaccggttcaccgtggctctgagatgccccgacggcgaagtgtgctacagccccgag1320

aaaaccgccgagatccggggcatcgtgaccaccatgacccacagcctgaccagacaggtg1380

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atcagatgcggcaaagtgaacgacaaggcccagtacctgctgggcgctgcaggcagtgtg1500

ccctacagatggatcaacctggaatacgacaagatcacccggatcgtgggcctggaccag1560

tacctggaaagcgtgaagaagcacaagcggctggacgtgtgccgggccaagatgggctac1620

atgctgcagtga1632

<210>75

<211>543

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>质粒5氨基酸序列版本2-ige前导序列+ul131a

共有序列+弗林蛋白酶+ul130共有序列+弗林蛋白酶+ul128共有

氨基酸序列

<400>75

metasptrpthrtrpileleupheleuvalalaalaalathrargval

151015

hisserargleucysargvaltrpleuservalcysleucysalaval

202530

valleuglyglncysglnarggluthralaglulysasnasptyrtyr

354045

argvalprohistyrtrpaspalacysserargalaleuproaspgln

505560

thrargtyrlystyrvalgluglnleuvalaspleuthrleuasntyr

65707580

histyraspalaserhisglyleuaspasnpheaspvalleulysarg

859095

ileasnvalthrgluvalserleuleuileserasppheargarggln

100105110

asnargargglyglythrasnlysargthrthrpheasnalaalagly

115120125

serleualaprohisalaargserleuglupheservalargleuphe

130135140

alaasnargglyarglysargargserleuargleuleuleuarghis

145150155160

hisphehiscysleuleuleucysalavaltrpalathrprocysleu

165170175

alaserprotrpserthrleuthralaasnglnasnproserpropro

180185190

trpserlysleuthrtyrserlysprohisaspalaalathrphetyr

195200205

cyspropheleutyrproserproproargserproleuglnpheser

210215220

glypheglnargvalserthrglyproglucysargasngluthrleu

225230235240

tyrleuleutyrasnarggluglyglnthrleuvalgluargserser

245250255

thrtrpvallyslysvaliletrptyrleuserglyargasnglnthr

260265270

ileleuglnargmetproargthralaserlysproseraspglyasn

275280285

valglnileservalgluaspalalysilepheglyalahismetval

290295300

prolysglnthrlysleuleuargphevalvalasnaspglythrarg

305310315320

tyrglnmetcysvalmetlysleuglusertrpalahisvalphearg

325330335

asptyrservalserpheglnvalargleuthrphethrglualaasn

340345350

asnglnthrtyrthrphecysthrhisproasnleuilevalarggly

355360365

arglysargargserserprolysaspleuthrpropheleuthrala

370375380

leutrpleuleuleuglyhisserargvalproargvalargalaglu

385390395400

glucyscysglupheileasnvalasnhisproprogluargcystyr

405410415

aspphelysmetcysasnargphethrvalalaleuargcysproasp

420425430

glygluvalcystyrserproglulysthralagluileargglyile

435440445

valthrthrmetthrhisserleuthrargglnvalvalhisasnlys

450455460

leuthrsercysasntyrasnproleutyrleuglualaaspglyarg

465470475480

ileargcysglylysvalasnasplysalaglntyrleuleuglyala

485490495

alaglyservalprotyrargtrpileasnleuglutyrasplysile

500505510

thrargilevalglyleuaspglntyrleugluservallyslyshis

515520525

lysargleuaspvalcysargalalysmetglytyrmetleugln

530535540

<210>76

<211>2934

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>经修饰的pvax1主链核酸序列

<400>76

gactcttcgcgatgtacgggccagatatacgcgttgacattgattattgactagttatta60

atagtaatcaattacggggtcattagttcatagcccatatatggagttccgcgttacata120

acttacggtaaatggcccgcctggctgaccgcccaacgacccccgcccattgacgtcaat180

aatgacgtatgttcccatagtaacgccaatagggactttccattgacgtcaatgggtgga240

ctatttacggtaaactgcccacttggcagtacatcaagtgtatcatatgccaagtacgcc300

ccctattgacgtcaatgacggtaaatggcccgcctggcattatgcccagtacatgacctt360

atgggactttcctacttggcagtacatctacgtattagtcatcgctattaccatggtgat420

gcggttttggcagtacatcaatgggcgtggatagcggtttgactcacggggatttccaag480

tctccaccccattgacgtcaatgggagtttgttttggcaccaaaatcaacgggactttcc540

aaaatgtcgtaacaactccgccccattgacgcaaatgggcggtaggcgtgtacggtggga600

ggtctatataagcagagctctctggctaactagagaacccactgcttactggcttatcga660

aattaatacgactcactatagggagacccaagctggctagcgtttaaacttaagctttaa720

ctcgagtctagagggcccgtttaaacccgctgatcagcctcgactgtgccttctagttgc780

cagccatctgttgtttgcccctcccccgtgccttccttgaccctggaaggtgccactccc840

actgtcctttcctaataaaatgaggaaattgcatcgcattgtctgagtaggtgtcattct900

attctggggggtggggtggggcaggacagcaagggggaggattgggaagacaatagcagg960

catgctggggatgcggtgggctctatggcttctactgggcggttttatggacagcaagcg1020

aaccggaattgccagctggggcgccctctggtaaggttgggaagccctgcaaagtaaact1080

ggatggctttctcgccgccaaggatctgatggcgcaggggatcaagctctgatcaagaga1140

caggatgaggatcgtttcgcatgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccg1200

cttgggtggagaggctattcggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatg1260

ccgccgtgttccggctgtcagcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgt1320

ccggtgccctgaatgaactgcaagacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgg1380

gcgttccttgcgcagctgtgctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctat1440

tgggcgaagtgccggggcaggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtat1500

ccatcatggctgatgcaatgcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcg1560

accaccaagcgaaacatcgcatcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcg1620

atcaggatgatctggacgaagagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggc1680

tcaaggcgagcatgcccgacggcgaggatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgc1740

cgaatatcatggtggaaaatggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtg1800

tggcggaccgctatcaggacatagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcg1860

gcgaatgggctgaccgcttcctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgca1920

tcgccttctatcgccttcttgacgagttcttctgaattattaacgcttacaatttcctga1980

tgcggtattttctccttacgcatctgtgcggtatttcacaccgcatacaggtggcacttt2040

tcggggaaatgtgcgcggaacccctatttgtttatttttctaaatacattcaaatatgta2100

tccgctcatgagacaataaccctgataaatgcttcaataatagcacgtgctaaaacttca2160

tttttaatttaaaaggatctaggtgaagatcctttttgataatctcatgaccaaaatccc2220

ttaacgtgagttttcgttccactgagcgtcagaccccgtagaaaagatcaaaggatcttc2280

ttgagatcctttttttctgcgcgtaatctgctgcttgcaaacaaaaaaaccaccgctacc2340

agcggtggtttgtttgccggatcaagagctaccaactctttttccgaaggtaactggctt2400

cagcagagcgcagataccaaatactgtccttctagtgtagccgtagttaggccaccactt2460

caagaactctgtagcaccgcctacatacctcgctctgctaatcctgttaccagtggctgc2520

tgccagtggcgataagtcgtgtcttaccgggttggactcaagacgatagttaccggataa2580

ggcgcagcggtcgggctgaacggggggttcgtgcacacagcccagcttggagcgaacgac2640

ctacaccgaactgagatacctacagcgtgagctatgagaaagcgccacgcttcccgaagg2700

gagaaaggcggacaggtatccggtaagcggcagggtcggaacaggagagcgcacgaggga2760

gcttccagggggaaacgcctggtatctttatagtcctgtcgggtttcgccacctctgact2820

tgagcgtcgatttttgtgatgctcgtcaggggggcggagcctatggaaaaacgccagcaa2880

cgcggcctttttacggttcctgggcttttgctggccttttgctcacatgttctt2934

<210>77

<211>5742

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>1011932_phcmvgb_pvax1(ltga)

<400>77

gactcttcgcgatgtacgggccagatatacgcgttgacattgattattgactagttatta60

atagtaatcaattacggggtcattagttcatagcccatatatggagttccgcgttacata120

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