一种用于提取DNA的花生叶片组织研磨方法和装置与流程

本发明涉及生物科技技术领域，尤其涉及一种用于提取dna的花生叶片组织研磨方法和装置。

背景技术：

花生又名落花生，属于一年生草本植物，由于其含油量高，被人们誉为“植物肉”。花生除了用于食用外，还可用于印染、造纸工业等，是我国重要的油料和经济作物。我国的花生种植面积和生产总量均居世界前列在国际上具有很强的竞争力。但是，我国目前花生的种质资源相对有限，一些抗病抗逆的种质资源相对缺乏，尤其是抗黄曲霉品种更加缺乏。

常规的杂交育种、诱变育种虽然可以对花生的遗传基因进行一定的改良，但是都很难实现有目的性地进行花生遗传基因改良。而转基因育种可以任意选择生产上的当家品种进行外源基因的导入，达到目的性状基因的转移和种质改良的目的。

现有花生转基因育种的常用方法有农杆菌介导法和基因枪法。无论是采用农杆菌介导法和基因枪法都需要对花生叶片组织进行研磨，以便提取花生叶片组织中的花生dna。已有技术中，为提取花生叶片组织中的花生dna，通常采用研钵和钵杵相互配合在液氮中实现对花生叶片组织的研磨，研磨完成的花生叶片组织从研钵中转移至相应的试管中进行花生叶片dna的提取。

由于已有技术中采用的是研钵和钵杵相互配合实现对花生叶片组织的研磨，大量的花生叶片组织研磨液大量粘连在研钵和钵杵，造成花生叶片组织液的浪费，当花生叶片组织较少时，更无法采用已有技术中的方法进行花生叶片dna的提取。如何减轻研磨过程对花生叶片组织的浪费，降低花生叶片dna的提取成本，已经成为该领域亟待解决的技术难题。

技术实现要素：

本发明实施例提供一种用于提取dna的花生叶片组织研磨方法和装置，旨在降低花生叶片组织研磨过程中对花生叶片组织的浪费，降低花生叶片dna的提取成本。

本发明提供的具体技术方案如下：

一方面，本发明实施例提供一种用于提取dna的花生叶片组织研磨方法，所述方法包括：

取0.1克~0.4克的新鲜花生叶片或者取0.01克~0.04克的干花生叶片，放置于离心管中，其中，所述新鲜花生叶片的含水率大于40%，干花生叶片的含水率小于20%，所述离心管为容积为1ml~2ml的带密封盖或压盖的管状试样容器；

将装有所述新鲜花生叶片或者所述干花生叶片的所述离心管至于液氮中，所述液氮的温度为零下196℃；

将100ul~300ul移液枪枪头的尖端置于酒精灯火焰的外焰部分，待所述移液枪枪头的尖端融化成为圆球之后，将所述移液枪枪头从所述酒精灯火焰的外焰部分移出，所述移液枪枪头的尖端经冷却形成圆球，所述圆球的半径为0.1mm~2mm；

将尖端为圆球的所述移液枪枪头放置于液氮中冷却3s~10s；

待装有所述新鲜花生叶片或者所述干花生叶片的所述离心管在所述液氮中不再发出声音时，将所述离心管从液氮中取出放置于温度为零下20℃~零下30℃的离心管板上，并从液氮中取出所述移液枪枪头，将所述移液枪枪头插入所述离心管中，利用所述移液枪枪头尖端的圆球快速将所述离心管中的花生叶片捣碎，以便采用所述离心管进行提取花生叶片组织中dna的步骤。

可选的，所述取0.1克~0.4克的新鲜花生叶片或者取0.01克~0.04克的干花生叶片，放置于离心管中，具体为：

取0.2克的新鲜花生叶片或者取0.02克的干花生叶片，放置于离心管中，其中，所述离心管为尖底离心管，所述尖底离心管的底部内径大于所述移液枪枪头的尖端的圆球的直径，所述尖底离心管的规格为1.5ml。

可选的，所述将尖端为圆球的所述移液枪枪头放置于液氮中冷却3s~10s，具体为：

将镊子的尖端插入尖端为圆球的所述移液枪枪头的内腔，以实现将所述镊子卡在所述移液枪枪头的内腔充当所述移液枪枪头的手柄；

移动所述镊子，将尖端为圆球的所述移液枪枪头放置于液氮中冷却3s~4s。

可选的，所述将尖端为圆球的所述移液枪枪头放置于液氮中冷却3s~10s，具体为：

将手柄插入尖端为圆球的所述移液枪枪头的内腔，以实现将所述手柄卡在所述移液枪枪头的内腔中，其中，所述手柄与所述移液枪枪头的内腔相互配合实现将所述手柄卡在所述移液枪枪头的内腔中，所述手柄为塑料手柄、木质手柄或金属手柄中的一种；

移动所述手柄，将尖端为圆球的所述移液枪枪头放置于液氮中冷却3s~4s。

可选的，所述将100ul~300ul移液枪枪头的尖端置于酒精灯火焰的外焰部分，待所述移液枪枪头的尖端融化成为圆球之后，将所述移液枪枪头从所述酒精灯火焰的外焰部分移出，所述移液枪枪头的尖端经冷却形成圆球，具体为：

将规格为200ul的移液枪枪头的尖端置于酒精灯火焰的外焰部分，待所述移液枪枪头的尖端融化成为圆球之后，将所述移液枪枪头从所述酒精灯火焰的外焰部分移出，所述移液枪枪头的尖端经冷却形成圆球，其中，所述圆球的半径为1.5mm。

可选的，所述将所述移液枪枪头插入所述离心管中，利用所述移液枪枪头尖端的圆球快速将所述离心管中的花生叶片捣碎，具体为：

将所述移液枪枪头插入所述离心管中，所述移液枪枪头尖端的圆球与所述离心管的底部往复性接触和脱离；

通过所述移液枪枪头尖端的圆球与所述离心管的底部之间的挤压力，将所述离心管中的花生叶片组织捣碎，其中，捣碎后的所述花生叶片组织中无可视颗粒物。

另一方面，本发明实施例提供一种用于提取dna的花生叶片组织研磨装置，所述装置包括：

获取模块，用于取0.1克~0.4克的新鲜花生叶片或者取0.01克~0.04克的干花生叶片，放置于离心管中，其中，所述新鲜花生叶片的含水率大于40%，干花生叶片的含水率小于20%，所述离心管为容积为1ml~2ml的带密封盖或压盖的管状试样容器；

第一冷却模块，用于将装有所述新鲜花生叶片或者所述干花生叶片的所述离心管至于液氮中，所述液氮的温度为零下196℃；

第一处理模块，用于将100ul~300ul移液枪枪头的尖端置于酒精灯火焰的外焰部分，待所述移液枪枪头的尖端融化成为圆球之后，将所述移液枪枪头从所述酒精灯火焰的外焰部分移出，所述移液枪枪头的尖端经冷却形成圆球，所述圆球的半径为0.1mm~2mm；

第二冷却模块，用于将尖端为圆球的所述移液枪枪头放置于液氮中冷却3s~10s；

第二处理模块，用于待装有所述新鲜花生叶片或者所述干花生叶片的所述离心管在所述液氮中不再发出声音时，将所述离心管从液氮中取出放置于温度为零下20℃~零下30℃的离心管板上，并从液氮中取出所述移液枪枪头，将所述移液枪枪头插入所述离心管中，利用所述移液枪枪头尖端的圆球快速将所述离心管中的花生叶片捣碎，以便采用所述离心管进行提取花生叶片组织中dna的步骤。

可选的，所述获取模块具体用于：

取0.2克的新鲜花生叶片或者取0.02克的干花生叶片，放置于离心管中，其中，所述离心管为尖底离心管，所述尖底离心管的底部内径大于所述移液枪枪头的尖端的圆球的直径，所述尖底离心管的规格为1.5ml。

可选的，所述第二冷却模块具体用于：

将镊子的尖端插入尖端为圆球的所述移液枪枪头的内腔，以实现将所述镊子卡在所述移液枪枪头的内腔充当所述移液枪枪头的手柄；

移动所述镊子，将尖端为圆球的所述移液枪枪头放置于液氮中冷却3s~4s。

可选的，所述第二冷却模块具体用于：

将手柄插入尖端为圆球的所述移液枪枪头的内腔，以实现将所述手柄卡在所述移液枪枪头的内腔中，其中，所述手柄与所述移液枪枪头的内腔相互配合实现将所述手柄卡在所述移液枪枪头的内腔中，所述手柄为塑料手柄、木质手柄或金属手柄中的一种；

移动所述手柄，将尖端为圆球的所述移液枪枪头放置于液氮中冷却3s~4s。

可选的，所述第一处理模块具体用于：

将规格为200ul的移液枪枪头的尖端置于酒精灯火焰的外焰部分，待所述移液枪枪头的尖端融化成为圆球之后，将所述移液枪枪头从所述酒精灯火焰的外焰部分移出，所述移液枪枪头的尖端经冷却形成圆球，其中，所述圆球的半径为1.5mm。

可选的，所述第二处理模块具体用于：

将所述移液枪枪头插入所述离心管中，所述移液枪枪头尖端的圆球与所述离心管的底部往复性接触和脱离；

通过所述移液枪枪头尖端的圆球与所述离心管的底部之间的挤压力，将所述离心管中的花生叶片组织捣碎，其中，捣碎后的所述花生叶片组织中无可视颗粒物。

本发明的有益效果如下：

本发明实施例提供用于提取dna的花生组织研磨方法，通过酒精灯加热将移液枪枪头的尖端烧制成圆球，然后利用尖端烧制成圆球的移液枪枪头与现有的离心管相配合，将经液氮冷却之后的花生叶片组织捣碎，以实现直接在该离心管中提取捣碎之后的花生叶片组织中的dna，相对于已有技术中采用研钵和钵杵相互配合的方式实现的花生叶片组织的捣碎，减轻了研磨过程对花生叶片组织的浪费，更加适合用于花生叶片组织较少时提取花生叶片组织dna；同时，相对于已有技术中使用自动化样品研磨仪器，降低了花生叶片dna的提取成本和节约了花生叶片组织的使用量；由于本发明实施例的方法，在离心管中将花生叶片组织捣碎之后，不需要转移捣碎之后的花生叶片组织即可实现对花生叶片组织dna的提取，避免了已有技术中研钵的使用和清洗工作，提高了花生叶片组织的利用率，同时节省了液氮的使用量，保证了花生叶片组织dna的提取效果，而且离心管和移液枪枪头均是成本较低的试验器常见器材，实现了花生叶片组织的快速、低成本捣碎，节省了试验成本。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明实施例的一种用于提取dna的花生叶片组织研磨方法的方法流程示意图；

图2为本发明实施例的使用的尖端融化成为圆球的移液枪枪头的结构示意图；

图3为本发明实施例的尖端融化成为圆球的移液枪枪头与离心管相配合用于研磨花生叶片组织的示意图；

图4为本发明实施例的一种用于提取dna的花生叶片组织研磨装置的结构框图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明作进一步地详细描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明的说明书和权利要求书及上述附图中的术语“第一”、“第二”、“第三”、“第四”、“第五”、“第六”、“第七”和“第八”等（如果存在）是用于区别类似的对象，而不必用于描述特定的顺序或先后次序。应该理解这样使用的数据在适当情况下可以互换，以便这里描述的本发明的实施例例如能够以除了在这里图示或描述的那些以外的顺序实施。

此外，术语“包括”和“具有”以及他们的任何变形，意图在于覆盖不排他的包含，例如，包含了一系列步骤或单元的过程、方法、系统、产品或设备不必限于清楚地列出的那些步骤或单元，而是可包括没有清楚地列出的或对于这些过程、方法、产品或设备固有的其它步骤或单元。

为降低已有技术中花生叶片组织研磨过程中对花生叶片组织的浪费，降低花生叶片dna的提取成本，本发明实施例提供一种用于提取dna的花生叶片组织研磨方法和装置，通过酒精灯加热将移液枪枪头的尖端烧制成圆球，然后利用尖端烧制成圆球的移液枪枪头与现有的离心管相配合，将经液氮冷却之后的花生叶片组织捣碎，以实现直接在该离心管中提取捣碎之后的花生叶片组织中的dna，相对于已有技术中采用研钵和钵杵相互配合的方式实现的花生叶片组织的捣碎，减轻了研磨过程对花生叶片组织的浪费，更加适合用于花生叶片组织较少时提取花生叶片组织dna；同时，相对于已有技术中使用自动化样品研磨仪器，降低了花生叶片dna的提取成本和节约了花生叶片组织的使用量；由于本发明实施例的方法，在离心管中将花生叶片组织捣碎之后，不需要转移捣碎之后的花生叶片组织即可实现对花生叶片组织dna的提取，避免了已有技术中研钵的使用和清洗工作，提高了花生叶片组织的利用率，同时节省了液氮的使用量，保证了花生叶片组织dna的提取效果，而且离心管和移液枪枪头均是成本较低的试验器常见器材，实现了花生叶片组织的快速、低成本捣碎，节省了试验成本。

下面将结合附图1~附图3对本发明实施例的用于提取dna的花生叶片组织研磨方法进行详细的说明。

参考附图1所示，本发明实施例的用于提取dna的花生叶片组织研磨方法包括如下步骤：

步骤110：取0.1克~0.4克的新鲜花生叶片或者取0.01克~0.04克的干花生叶片，放置于离心管中。

如果本发明实施例使用的是新鲜花生叶片，其中，新鲜花生叶片是从花生活体上摘取的花生叶片，新鲜花生叶片的含水率大于40%。在本发明实施例的用于提取dna的花生叶片组织研磨方法中，一次选取的新鲜花生叶片的重量可以在0.1克~0.4克之间；对于一次选取的新鲜花生叶片的具体重量，本发明实施例不做具体限定，只要在本发明实施例限定的范围内即可。

其中，优选的，本发明实施例选取的新鲜花生叶片的重量为0.1克~0.2克，这样可以在保证本发明实施例的方法有效提取花生叶片组织的dna的同时，避免对试验材料花生叶片的浪费，提高花生叶片的利用率和降低试验成本。

如果本发明实施例使用的是干花生叶片，其中，干花生叶片是从晒干的花生本体上摘取的花生叶片，干花生叶片的含水率小于20%。在本发明实施例的用于提取dna的花生叶片组织研磨方法中，一次选取的干花生叶片的重量可以在0.01克~0.04克之间；对于一次选取的干花生叶片的具体重量，本发明实施例不做具体限定，只要在本发明实施例限定的范围内即可。

其中，优选的，本发明实施例选取的干花生叶片的重量为0.01克~0.02克，这样可以在保证本发明实施例的方法有效提取花生叶片组织的dna的同时，避免对试验材料干花生叶片的浪费，提高花生叶片的利用率和降低试验成本。

需要说明的是，本发明实施例使用的离心管可以是容积为1ml~2ml的离心管，其中，该离心管为带密封盖或压盖的管状试样容器，属于实验室常见试验器材；示例的，本发明实施例采用1ml尖底离心管或者1.5ml尖底离心管。

示例的，取0.2克的新鲜花生叶片或者取0.02克的干花生叶片，放置于1.5ml的尖底离心管的内腔201中，并且该尖底离心管的底部内径大于移液枪枪头的尖端的圆球的直径。

步骤120：将装有所述新鲜花生叶片或者所述干花生叶片的所述离心管至于液氮中。

将装有新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管放置于液氮中进行冷却，其中，液氮的温度为零下196℃，由于液氮的温度低，可以实现花生叶片和离心管的温度的急速下降，避免花生叶片在冷却的过程中花生叶片组织中的dna被破坏。

采用液氮对花生叶片进行冷却，不仅可以避免花生叶片在冷却的过程中花生叶片组织中的dna被破坏，而且还可以采用液氮对花生叶片进行快速冷却之后，可以降低花生叶片的研磨难度，保证研磨过程不会破坏花生叶片组织中的dna的完整性。

步骤130：将100ul~300ul移液枪枪头的尖端置于酒精灯火焰的外焰部分，待所述移液枪枪头的尖端融化成为圆球之后，将所述移液枪枪头从所述酒精灯火焰的外焰部分移出，所述移液枪枪头的尖端经冷却形成圆球。

其中，移液枪是移液器的一种，常用于实验室少量或微量液体的移取，规格不同，不同规格的移液枪配套使用不同大小的枪头，不同生产厂家生产的形状也略有不同，但工作原理及操作方法基本一致。

移液枪的量程范围一般是0.1ul~5000ul，其中，不同量程范围的移液枪使用不同的移液枪枪头，示例的，本发明实施例可以选用量程为100ul~150ul的移液枪的枪头，也可以选用量程为100ul~200ul的移液枪的枪头，也可以选用量程为100ul~300ul的移液枪的枪头。其中，优选的，本发明实施例选用颜色为黄色的200ul的移液枪枪头，选用200ul的移液枪枪头与1.5ml的尖底离心管相配合，其中1.5ml的尖底离心管的大小和容积合适，并且200ul的移液枪枪头的强度和长度也合适，并且两者均是实验室常用的仪器，成本均比较低，可以避免对试验材料干花生叶片的浪费，提高花生叶片的利用率和降低试验成本。

如图2所示，首先，选一个容积为60ml或者150ml又或者200ml的酒精灯，将酒精灯点燃之后，待酒精灯燃烧一段时间之后，将100ul~300ul移液枪枪头的尖端302置于酒精灯火焰的外焰部分进行加热，加热一段时间之后，移液枪枪头的尖端302融化，融化产生的液体在移液枪枪头的尖端302聚集。待移液枪枪头的尖端302聚集的液体可以形成本发明所要求的圆球303之后，将100ul~300ul移液枪枪头撤离酒精灯火焰的外焰部分，在空气中冷却之后，在移液枪枪头的尖端经冷却形成一个圆球303，示例的，如图3所示，在移液枪枪头的尖端302经冷却形成的圆球303的半径为0.1mm~2mm。

需要说明的是，对于酒精灯燃烧多长时间才将移液枪枪头至于酒精灯外焰进行加热，本发明实施例不做具体限定，本领域技术人员可以根据实际需要进行选择。同样，对于移液枪枪头至于酒精灯外焰的加热时间，本发明实施例也不做具体限定，示例的，以本领域技术人员观察到移液枪枪头的尖端聚集的液体，可以在移液枪枪头的尖端经冷却形成一个半径为0.1mm~2mm的圆球303为准。

经酒精灯外焰加热融化后的移液枪枪头的尖端302，经冷却后在移液枪枪头的尖端形成一个半径为0.1mm~2mm的圆球303，其中，尖端带有圆球的移液枪枪头的一端是敞开的，另一端是密闭的，其中，敞开的一端用来安装镊子或者手柄。经酒精灯外焰加热后形成圆球的移液枪枪头是密封的，可以避免用移液枪枪头的尖端的圆球捣碎离心管中的花生叶片时，造成花生叶片组织液进入移液枪枪头，有助于避免研磨过程对花生叶片组织造成浪费。

优选的，本发明实施例将规格为200ul的移液枪枪头的尖端置于酒精灯火焰的外焰部分，待移液枪枪头的尖端融化成为圆球之后，将200ul的移液枪枪头从酒精灯火焰的外焰部分移出，200ul的移液枪枪头的尖端经冷却形成圆球，其中，该圆球的半径为1.5mm。

步骤140：将尖端为圆球的所述移液枪枪头放置于液氮中冷却3s~10s。

将步骤130中制作的尖端带有圆球的移液枪枪头放置于液氮中冷却3s~10s，示例的，可以通过移液枪枪头的大端301，在移液枪枪头的内腔中安装一个把手，用于将步骤130中制作的尖端302带有圆球303的移液枪枪头放置于液氮中进行冷却。对于尖端为圆球的移液枪枪头放置于液氮中的具体冷却时间，本发明实施例不做具体限定，示例的，可以将尖端为圆球的移液枪枪头放置于液氮中冷却5s，保证尖端为圆球的移液枪枪头温度降低至零下20℃以下。

示例的，可以将手柄插入尖端为圆球的移液枪枪头的内腔中，以实现将手柄卡在移液枪枪头的内腔中，安装的手柄用于将步骤130中制作的尖端带有圆球的移液枪枪头放置于液氮中进行冷却；通过移动手柄，将尖端为圆球的移液枪枪头放置于液氮中冷却3s~10s。需要说明的是，之所以在移液枪枪头的内腔中安装手柄，是为了避免将移液枪枪头放置于液氮中进行冷却时人手接触到液氮，可以有效防止人手误接触到液氮而对人手造成冻伤。手柄为塑料手柄、木质手柄或金属手柄中的一种，示例的，该手柄可以是特制的手柄，也可以是木棍，还可以是金属杆等，其中，优选的，该手柄为木质手柄或者塑料手柄，木质手柄和塑料手柄的导热效果差，可以避免用户将移液枪枪头放置于液氮中进行冷却时对用户的手造成冻伤。

示例的，可以将镊子的尖端插入尖端为圆球的移液枪枪头的内腔中，以实现将镊子卡在移液枪枪头的内腔充当该移液枪枪头的手柄，用于将步骤130中制作的尖端带有圆球的移液枪枪头放置于液氮中进行冷却；通过移动镊子，将尖端为圆球的移液枪枪头放置于液氮中冷却3s~4s。需要说明的是，之所以将镊子卡在移液枪枪头的内腔充当该移液枪枪头的手柄，是为了避免将移液枪枪头放置于液氮中进行冷却时人手接触到液氮，可以有效防止人手误接触到液氮而对人手造成冻伤。

步骤150：待装有所述新鲜花生叶片或者所述干花生叶片的所述离心管在所述液氮中不再发出声音时，将所述离心管从液氮中取出放置于温度为零下20℃~零下30℃的离心管板上，并从液氮中取出所述移液枪枪头，将所述移液枪枪头插入所述离心管中，利用所述移液枪枪头尖端的圆球快速将所述离心管中的花生叶片捣碎，以便采用所述离心管进行提取花生叶片组织中dna的步骤。

具体的，步骤120中将装有新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管放置于液氮中进行冷却，待装有新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管在液氮中不再发出声音时，说明装有新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管的温度降到了接近液氮的温度，即装有新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管在液氮中不再发出声音时，说明装有新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管的温度降到了零下196℃。

需要说明的是，装有新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管放置于液氮中进行冷却，其冷却的时间不能太长也不能太短，比如将装有新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管放置于液氮中冷却的时间过长，将会由于冷冻时间过长导致花生叶片中的dna的完整性被破坏；如果将装有新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管放置于液氮中冷却的时间过短，将会提高花生叶片的研磨难度，不利于使用本发明实施例的花生叶片组织的研磨方法将花生叶片彻底研磨碎，不利于花生叶片组织dna的提取。本申请的发明人，经过大量的试验和研究之后，发现当装有新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管放置于液氮中进行冷却，待装有新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管在液氮中不再发出声音时，表明新鲜花生叶片或者干花生叶片在液氮中冷却的温度合适，即可保证花生叶片中dna的完整性，又降低了花生叶片的研磨难度。

其次，需要说明的是，由于不同的花生叶片，其含水率和导热性质都不同，即不同的花生叶片在液氮中冷却所需要的时间不同，因此，如何准确地控住花生叶片在液氮中冷却的准确时间，是一直以来困扰本领域技术人员的亟待解决的技术难题。本发明的申请人经过长期的实践和大量的试验之后发现，通过判断花生叶片在液氮中冷却时发出的声音，可以准确判断不同的花生叶片在液氮中冷却所需要的准确时间，即装有新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管在液氮中不再发出声音时，表明装有新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管的温度降到了合适的温度，此时将其取出进行研磨，可保证花生叶片中dna的完整性，又降低了花生叶片的研磨难度。

待装有新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管的温度降到了零下196℃时，将离心管从液氮中取出放置于温度为零下20℃~零下30℃之间的离心管板上，并从液氮中取出移液枪枪头，迅速将移液枪枪头插入该离心管中，利用移液枪枪头尖端的圆球快速将离心管中的花生叶片捣碎，待离心管中的新鲜花生叶片或者干花生叶片被捣碎之后，将移液枪枪头从离心管中取出，然后将装有捣碎的新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管转移到其他的试验装置上，实现直接采用该离心管提取该离心管中的花生叶片组织中dna。

对于，采用该离心管内的捣碎的新鲜花生叶片或者干花生叶片提取花生叶片组织中dna的具体过程，本发明实施例在此不再累述，本领域技术人员可参考现有技术。

需要说明的是，离心管板需要提前进行降温，保证离心管板的温度降至零下20℃~零下30℃之间，这样可以保证捣碎离心管内的新鲜花生叶片或者干花生叶片的过程中，离心管内的花生叶片组织不会温度升高太多，可以保证花生叶片组织中的dna在花生叶片捣碎过程中，dna的完整性不会被破坏。

其次，需要说明的是，离心管板上设置有离心管安装槽，可以将离心管固定在离心管安装槽内，保证采用移液枪枪头尖端的圆球快速将离心管中的花生叶片捣碎的过程中，装有新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管在离心管板上安装牢靠。

具体的，待装有新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管的温度降到了零下196℃时，将离心管从液氮中取出放置于温度为零下20℃~零下30℃之间的离心管板上，然后将移液枪枪头插入离心管中，然后移液枪枪头尖端的圆球303与离心管的底部202往复性接触和脱离；通过移液枪枪头尖端的圆球303与离心管的底部202之间的挤压力，将离心管中的花生叶片组织捣碎，其中，当离心管内的新鲜花生叶片或者干花生叶片捣碎至离心管内的花生叶片组织中无可视颗粒物，即可将移液枪枪头从离心管中取出，然后将装有捣碎的新鲜花生叶片或者干花生叶片的离心管转移到其他的试验装置上，实现直接采用该离心管提取该离心管中的花生叶片组织中dna。

本发明实施例提供用于提取dna的花生组织研磨方法，通过酒精灯加热将移液枪枪头的尖端烧制成圆球，然后利用尖端烧制成圆球的移液枪枪头与现有的离心管相配合，将经液氮冷却之后的花生叶片组织捣碎，以实现直接在该离心管中提取捣碎之后的花生叶片组织中的dna，相对于已有技术中采用研钵和钵杵相互配合的方式实现的花生叶片组织的捣碎，减轻了研磨过程对花生叶片组织的浪费，更加适合用于花生叶片组织较少时提取花生叶片组织dna；同时，相对于已有技术中使用自动化样品研磨仪器，降低了花生叶片dna的提取成本和节约了花生叶片组织的使用量；由于本发明实施例的方法，在离心管中将花生叶片组织捣碎之后，不需要转移捣碎之后的花生叶片组织即可实现对花生叶片组织dna的提取，避免了已有技术中研钵的使用和清洗工作，提高了花生叶片组织的利用率，同时节省了液氮的使用量，保证了花生叶片组织dna的提取效果，而且离心管和移液枪枪头均是成本较低的试验器常见器材，实现了花生叶片组织的快速、低成本捣碎，节省了试验成本。

图4为本发明实施例提供的一种用于提取dna的花生叶片组织研磨装置的结构示意图。如图4所示，本发明实施例提供的一种用于提取dna的花生叶片组织研磨装置包括：

获取模块401，用于取0.1克~0.4克的新鲜花生叶片或者取0.01克~0.04克的干花生叶片，放置于离心管中，其中，所述新鲜花生叶片的含水率大于40%，干花生叶片的含水率小于20%，所述离心管为容积为1ml~2ml的带密封盖或压盖的管状试样容器；

第一冷却模块402，用于将装有所述新鲜花生叶片或者所述干花生叶片的所述离心管至于液氮中，所述液氮的温度为零下196℃；

第一处理模块403，用于将100ul~300ul移液枪枪头的尖端置于酒精灯火焰的外焰部分，待所述移液枪枪头的尖端融化成为圆球之后，将所述移液枪枪头从所述酒精灯火焰的外焰部分移出，所述移液枪枪头的尖端经冷却形成圆球，所述圆球的半径为0.1mm~2mm；

第二冷却模块404，用于将尖端为圆球的所述移液枪枪头放置于液氮中冷却3s~10s；

第二处理模块405，用于待装有所述新鲜花生叶片或者所述干花生叶片的所述离心管在所述液氮中不再发出声音时，将所述离心管从液氮中取出放置于温度为零下20℃~零下30℃的离心管板上，并从液氮中取出所述移液枪枪头，将所述移液枪枪头插入所述离心管中，利用所述移液枪枪头尖端的圆球快速将所述离心管中的花生叶片捣碎，以便采用所述离心管进行提取花生叶片组织中dna的步骤。

进一步的，获取模块401具体用于：

取0.2克的新鲜花生叶片或者取0.02克的干花生叶片，放置于离心管中，其中，所述离心管为尖底离心管，所述尖底离心管的底部内径大于所述移液枪枪头的尖端的圆球的直径，所述尖底离心管的规格为1.5ml。

进一步的，第二冷却模块404具体用于：

将镊子的尖端插入尖端为圆球的所述移液枪枪头的内腔，以实现将所述镊子卡在所述移液枪枪头的内腔充当所述移液枪枪头的手柄；

移动所述镊子，将尖端为圆球的所述移液枪枪头放置于液氮中冷却3s~4s。

进一步的，第二冷却模块404具体用于：

将手柄插入尖端为圆球的所述移液枪枪头的内腔，以实现将所述手柄卡在所述移液枪枪头的内腔中，其中，所述手柄与所述移液枪枪头的内腔相互配合实现将所述手柄卡在所述移液枪枪头的内腔中，所述手柄为塑料手柄、木质手柄或金属手柄中的一种；

移动所述手柄，将尖端为圆球的所述移液枪枪头放置于液氮中冷却3s~4s。

进一步的，第一处理模块403具体用于：

将规格为200ul的移液枪枪头的尖端置于酒精灯火焰的外焰部分，待所述移液枪枪头的尖端融化成为圆球之后，将所述移液枪枪头从所述酒精灯火焰的外焰部分移出，所述移液枪枪头的尖端经冷却形成圆球，其中，所述圆球的半径为1.5mm。

进一步的，第二处理模块405具体用于：

将所述移液枪枪头插入所述离心管中，所述移液枪枪头尖端的圆球与所述离心管的底部往复性接触和脱离；

通过所述移液枪枪头尖端的圆球与所述离心管的底部之间的挤压力，将所述离心管中的花生叶片组织捣碎，其中，捣碎后的所述花生叶片组织中无可视颗粒物。

需要说明的是：上述实施例提供的用于提取dna的花生叶片组织研磨装置，仅以上述各功能模块的划分进行举例说明，实际应用中，可以根据需要而将上述功能分配由不同的功能模块完成，即将设备的内部结构划分成不同的功能模块，以完成以上描述的全部或者部分功能。另外，上述实施例提供的用于提取dna的花生叶片组织研磨装置与用于提取dna的花生叶片组织研磨方法实施例属于同一构思，其具体实现过程详见方法实施例，这里不再赘述。

本发明是参照根据本发明实施例的方法、设备（系统）、和计算机程序产品的流程图和／或方框图来描述的。应理解可由计算机程序指令实现流程图和／或方框图中的每一流程和／或方框、以及流程图和／或方框图中的流程和／或方框的结合。可提供这些计算机程序指令到通用计算机、专用计算机、嵌入式处理机或其他可编程数据处理设备的处理器，使得通过该计算机或其他可编程数据处理设备的处理器执行的指令可实现流程图中的一个流程或多个流程和／或方框图一个方框或多个方框中指定的功能。

这些计算机程序指令也可存储在能引导计算机或其他可编程数据处理设备以特定方式工作的计算机可读存储器中，使得存储在该计算机可读存储器中的指令产生包括指令装置的制造品，该指令装置实现在流程图一个流程或多个流程和／或方框图一个方框或多个方框中指定的功能。

这些计算机程序指令也可装载到计算机或其他可编程数据处理设备上，使得在计算机或其他可编程设备上执行一系列操作步骤以产生计算机实现的处理，从而在计算机或其他可编程设备上执行的指令提供用于实现在流程图的一个流程或多个流程和／或方框图的一个方框或多个方框中指定的功能的步骤。

尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例做出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。

显然，本领域的技术人员可以对本发明实施例进行各种改动和变型而不脱离本发明实施例的精神和范围。这样，倘若本发明实施例的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变形在内。