技术领域
本发明涉及灵芝提取技术，具体是一种灵芝多肽的提取方法。
背景技术：
灵芝属于自然界分布的一类真菌生物，是传统名贵中药材之一，药食兼用。古今药理与临床研究均证明，灵芝确有防病治病、延年益寿之功效。现代药理学研究发现，灵芝中含有灵芝多糖、灵芝酸、核苷酸、超氧化物歧化酶、生物类黄酮(又称维他命P)、维他命B5、维他命C、维他命E、蛋白质、氨基酸、微量元素(钙、钾、锌、铁、铬、硒等)、胡萝卜素等，中医理论中，灵芝入五脏，补全身之气，所以心、肺、肝、脾、肾脏虚弱，均可服之；临床医学表明，灵芝具有广泛的药理作用，如抗肿瘤作用、免疫调节作用、抗放射与抗化疗作用，镇静作用、强心及抗心肌缺血作用、调节血脂作用、降血糖作用、平喘作用、保肝作用、抗缺氧作用和抗衰老等作用。
目前市面上的灵芝制品可根据不同用途制成各种产品，供药用的可制成糖浆、片剂、针剂、冲剂、酒剂等，供保健食品用的可制成各种饮料、口服液、袋泡茶等。灵芝的有效成分大多能溶于热水，其中灵芝酸、皂甙、麦角甾醇等成分在热水中溶解度较低，而在乙醇中的溶解度却很高，而乙醇提取的费用高，也并不能保证灵芝有效成分的全部保留；灵芝多肽受热易分解为多糖和氨基酸，导致对药效有所影响。因此进行灵芝的综合利用和深度开发，实现灵芝中多种活性成分的综合开发，对灵芝产业发展有积极地意义。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种灵芝多肽的提取方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种灵芝多肽的提取方法，具体包括以下步骤：
（1）、用10-12倍量的浓度为70-80%的乙醇溶液加热回流提取2-3次，每次1-2小时，滤过，滤渣备用，提取液减压回收乙醇，得浓缩液；
（2）、将步骤（1）所得的浓缩液控制温度为60°C、压力为-0.1MPa的条件下减压浓缩得到灵芝酸浸膏；
（3）、将步骤（2）所得的灵芝酸浸膏加入为其质量5倍的水，混合均匀得到混合液，然后加入为混合液质量的5%的NaHCO3,搅拌均匀后过滤，所得滤液用质量百分比浓度为10%的盐酸水溶液调pH值为2；然后用5倍体积的氯仿萃取上述所得的pH为2的滤液3次，合并3次萃取的氯仿层,然后控制温度40°C，压力-0.1MPa下浓缩至干，得到浓缩液；
（4）、正相硅胶纯化将上述所得的浓缩液用硅胶柱进行纯化，用氯仿作为装柱溶剂，以氯仿：丙酮的体积比从10:1～3:1梯度冲洗，再用浓度为30-70%乙醇洗脱4-10倍柱体积，收集洗脱液，回收乙醇，得醇提取液；
（5）、凝胶纯化在LH-20常压凝胶柱上，用质量百分比浓度为51%的甲醇水溶液对醇提取液进行洗脱至全部洗脱下来，然后在温度40°C，压力-0.1MPa下浓缩至干，即得精品；
（6）、重结晶将上述所得的精品先用氯仿溶解，然后加入甲醇于4°C条件下放置至有白色晶体析出，过滤，得高浓度灵芝多（4）所用硅胶优选为200-300目的硅胶，以氯仿作为装柱溶剂。
作为本发明进一步的方案：步骤（4）所用硅胶优选为200-300目的硅胶，以氯仿作为装柱溶剂
作为本发明进一步的方案：步骤（6）中甲醇的加入量，按体积比即氯仿：甲醇为4:6的比例。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明的一种从灵芝中提取灵芝多肽的方法具有工艺简单，操作方便，适于工业化提取等特点。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
一种灵芝多肽的提取方法，具体包括以下步骤：
（1）、用10-12倍量的浓度为70-80%的乙醇溶液加热回流提取2-3次，每次1-2小时，滤过，滤渣备用，提取液减压回收乙醇，得浓缩液；
（2）、将步骤（1）所得的浓缩液控制温度为60°C、压力为-0.1MPa的条件下减压浓缩得到灵芝酸浸膏；
（3）、将步骤（2）所得的灵芝酸浸膏加入为其质量5倍的水，混合均匀得到混合液，然后加入为混合液质量的5%的NaHCO3,搅拌均匀后过滤，所得滤液用质量百分比浓度为10%的盐酸水溶液调pH值为2；然后用5倍体积的氯仿萃取上述所得的pH为2的滤液3次，合并3次萃取的氯仿层,然后控制温度40°C，压力-0.1MPa下浓缩至干，得到浓缩液；
（4）、正相硅胶纯化将上述所得的浓缩液用硅胶柱进行纯化，用氯仿作为装柱溶剂，以氯仿：丙酮的体积比从10:1～3:1梯度冲洗，再用浓度为30-70%乙醇洗脱4-10倍柱体积，收集洗脱液，回收乙醇，得醇提取液；
（5）、凝胶纯化在LH-20常压凝胶柱上，用质量百分比浓度为51%的甲醇水溶液对醇提取液进行洗脱至全部洗脱下来，然后在温度40°C，压力-0.1MPa下浓缩至干，即得精品；
（6）、重结晶将上述所得的精品先用氯仿溶解，然后加入甲醇于4°C条件下放置至有白色晶体析出，过滤，得高浓度灵芝多肽成品。
步骤（4）所用硅胶优选为200-300目的硅胶，以氯仿作为装柱溶剂。
步骤（6）中甲醇的加入量，按体积比即氯仿：甲醇为4:6的比例。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。